专利名称：一种治心血管病的药物组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗心脑血管病的药物及其制备方法，具体地说是中药复方丹参、黄芪的有效部位组成的药物组合物及其制备方法。
丹参是具有活血化瘀功效的传统中药。药理研究表明丹参活血化瘀的有效成分在水溶性部位。现市售丹参注射液(小针)中含水溶性酚酸类成分，主要是丹参酚和原儿茶醛，其药效为增加冠脉血流量，提高心肌对缺氧耐受性的能力等。对于水溶性酚酸类成分，以水为溶媒提取较好。药材用水提取带来的杂质多，传统工艺用两次醇沉法去除杂质，但用此法有效成分也受损失，其有效成分的含量较低。
黄芪是对心脏有保护作用、提高免疫功能的传统中药。主要含有皂甙、多糖，此外还含有氨基酸、黄酮等成分。黄芪皂甙与多糖对急梗犬心有改善心肌收缩功能，缩小心肌梗塞面积，减轻心肌损伤的作用。黄芪多糖还对垂体后叶素引起的大鼠心肌缺血有明显的保护作用，能明显对抗BaCl2诱发的大鼠心律失常和CHCl3诱发的小鼠室颤，能提高血小板粘附率，减慢心律；血液动力学研究表明，对微循环有一定改善作用。现市售黄芪小针，如成都地奥、上海福达生产的黄芪注射剂中只含有皂甙，不含多糖，并且由于工艺原因，黄芪甲甙的含量较低。
本发明的目的在于提供一种中药复方的有效部位组成的治疗心脑血管病的药物。
本发明的目的还在于提供一种既有活血化瘀的治疗作用，又有保护心脏，从而在防治心脑血管病方面产生协同作用的药物。
本发明的目的尚在于提供制备一种不但有效成份含量高，而且有效部位较全面的治疗心脑血管病的药物的方法。
本发明的技术方案是一种治疗心脑血管病的药物组合物，其特征是主要以下述重量配比药物为原料含丹参中的酚酸类化合物2～10份；黄芪中的皂甙0.2～4份；黄芪多糖1～8份。
较好的配比是丹参中的酚酸类化合物4～8份；黄芪中的皂甙0.2～2份；黄芪多糖1～4份。
最好的配比是丹参中的酚酸类化合物6份；黄芪中的皂甙1份；黄芪多糖2份。
所治心血管病主要包冠心病心绞痛、心肌缺血、心衰、心律失常。
本发明的技术方案还包括上述治心血管病药物组合物的制备方法，含如下步骤取丹参，水提，明胶除鞣，醇沉除杂，减压回收乙醇后的水液，用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，得丹参酚酸提取物；取黄芪，乙醇提取，药渣保留备用，减压回收醇液至浸膏状，再醇沉，减压回收乙醇后的水液，用正丁醇萃取，回收正丁醇，得黄芪总皂甙；将黄芪醇提取后的药渣，水煎，浓缩，醇沉，过滤，取沉淀加蒸馏水溶解，过滤，用膜超滤，浓缩，浓缩液再醇沉，滤取沉淀，得黄芪多糖；取丹参酚酸类化合物2～10份、黄芪中的皂甙0.2～4份、黄芪多糖1～8份，较好的配比是丹参酚酸化合物4～8份、黄芪皂甙0.2～2份、黄芪多糖1～4份，最好的配方是丹参中的酚酸类化合物6份、黄芪中的皂甙1份、黄芪多糖2份，按常规制成各种制剂。
所述制剂可以是注射剂、粉针剂、滴丸、冲剂、缓释片、片剂、胶囊剂、微粒剂。
丹参酚酸提取物、黄芪皂甙及多糖的提取分离工艺，分别进行了正交试验。试验结果表明本发明丹参酚酸提取物的一次醇沉后醋酸乙酯萃取提取方法与传统工艺两次醇沉除杂质方法比较，本发明方法制得的样品中丹参素、原儿茶醛含量较高，且二者含量之和占总固体比例高(表2)，表明萃取法除杂质的同时保留有效成分的比例高。与传统工艺即两次醇沉法比较(表1)，丹参素等有效成分的含量可提高60％，有效成分占总固体物的比例由原来的13％提高至30％以上。
表1 萃取法与二次醇沉法样品含量比较样 品 丹参素mg/g原儿茶醛mg/g
萃取法样品 8.32451.5859二次醇沉法样品 5.26821.6666表2 萃取法与二次醇沉法样品含量占总体比样 品 丹参素mg/g 原儿茶醛mg/g 总固体量mg/g 百分比萃取法样品 8.32451.585931.631.36％二次醇沉法样品 5.26821.666651.913.36％丹参提取液中有效成分百分比的测定。根据测定结果，丹参素和原儿茶醛占丹参提取液中实际总固体的36％-40％，而同比丹参小针中只占11％-13％。数据列于表3。
表3丹参提取液中有效成分百分比批 号 991231 000128 000305 上海小针971107 广东小针9703008丹参素含量mg/g 6.6886 7.1277 7.2552 3.1483 1.6545原儿茶醛含量mg/g 0.6839 0.7531 0.6287 0.4412 0.1203总固体mg/g 24.3828.45 26.1032.6014.33实际总固体mg/g 18.136 21.547 20.664有效成分百分比(％)40.65 36.57 38.1511.0112.39影响萃取酚酸类成份萃取的各因素中以药液pH偏酸性，药液浓度适中(每1ml相当于含生药1-3g)，萃取5-7次，每次醋酸乙酯用量为2倍为佳。试验结果表明当药液pH值小于2，浓度为每1ml药液相当于含丹参生药3g，用等量溶媒萃取5次，可使丹参的成分提取利用率大于90％。
对影响水提取黄芪多糖提取的主要因素加水量、提取时间、药材浸泡时间和提取次数按四因素三水平进行L9(34)正交试验。按常规，将中药的水煎煮条件设计为中间水平，分别再取高低两个水平。试验结果表明，影响多糖提取的主要因素均为煎煮时间，且均以煎煮3次，每次2小时为佳。
黄芪超滤纯化多糖工艺所得与目前成都地奥、上海福达等黄芪注射液相比，既保留了皂甙部位，又保留了多糖部位，同时由于改进了提取与纯化工艺，有效成分黄芪甲甙的含量在原工艺基础上可提高40％。
丹参、黄芪提取物注射液犬心脏血流动力学试验报告经心脏血流动力学试验，证明丹参酚酸化合物2～10份、黄芪皂甙0.2～4份、黄芪多糖1～8份混合，或丹参酚酸类成份4～8份、黄芪皂甙0.2～2份、黄芪多糖1～4份的混合提取物(下称丹参黄芪提取物)注射给药后能抑制麻醉犬手术后心率增快，显著增加冠脉流量、心输出量、心脏指数、每搏心输出量、左心室内压最大上升速率和左室作功指数等，在作用强度，或作用时间的延长等方面均优于阳性对照药丹参注射液。这样，将更有利于调整缺血心肌的供-需平衡，使心脏血流供应得到改善，保护缺血心肌，减轻心脏缺血症状等。1实验材料取实施例1制备的丹参黄芪提取物，批号2000128(由本院药物研究室提供)；杂种家犬健康，♀♂兼有，雌性未孕，体重8～11kg，本院实验动物中心提供；5％葡萄糖注射液250ml/瓶，批号20000222，南京小营制药厂生产；丹参注射液3g生药/2ml/支，批号990703，上海中西药业股份有限公司生产；RM-6000型八道生理记录仪，日本光电公司生产；MFV-3200型电磁血流量计日本光电公司生产。2实验方法取健康杂种家犬18只，随机分为3组，每组6只，♀♂兼有，分别为生理盐水(NS)对照组、阳性药对照组及丹参黄芪提取物组。犬禁食(不禁水)14h后，称重，静脉注射戊巴比妥钠30mg/kg进行麻醉，并仰卧位固定于犬手术台上。剪去颈、胸部及右后肢内侧的毛，并用碘酒和75％酒精消毒剪毛区。切开颈部的皮肤，分离气管，进行气管插管，并接动物人工呼吸机。分离右股动脉，进行动脉插管，用充满肝素钠25u/ml生理盐水(NS)的导管液导接通TP-400T型压力换能器，由AP-641G型血压放大器记录血压(收缩压SAP、舒张压DAP、平均动脉压MAP)，定标灵敏度为13.33kPa(100mmHg/cm)。分离右侧股静脉，以备输液和给药。在左侧第四肋间横向切开皮肤，分离肋间肌。开动人工呼吸机(20～25次/min)，用开胸器撑开胸腔切口，暴露心脏，切开心包膜，做心包摇篮。分离升主动脉根部，放置适宜直径的电磁血流量计的探头，由电磁血流量计记录心输出量(CO)。由左心室心尖部插入导管至左心室腔内测量心室内压LVP(换能器为TP-400型，放大器为AP-601型，定标灵敏度为13.33kPa/cm)，测取平均心室内压峰值LVSP。并将信号输入AD-601G型放大器放大后记录左心室舒张末期压(LVEDP)，输入ED-601G型微分器记录左心室内压最大上升速率(+dp/dt max)。于冠脉第一、第二分支间分离冠状动脉，放置适宜直径的探头测量冠脉流量(CAF)，并于犬四肢皮下插入针状电极，记录II导联心电图，测量心率(HR)。上述测量信号均输入RM-6000型八道生理记录仪记录、描记，同时将心输出量、心电、血压及心室内压的电信号同步输入微机的生物医学生理信号处理系统进行记录、处理，并由微机处理后读出心室内压峰值(LVSP)、舒张末期压(LVEDP)、心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)、及左室射血的张力-时间指数(TTI，即左室射血时间内投影在LVP曲线下积分的面积)。最后，按文献(陈奇.中药药理研究方法学.北京人民卫生出版社，1994，525～530)的公式和方法计算心脏指数(CI)、每搏输出量(SV)、心搏指数(SI)、左室作功指数(LVWI)、血管总外周阻力(TPVR)等参数。反映心肌耗氧情况的心肌耗氧指数以TTI乘心率来表示(徐叔云，等.药理实验方法学(第2版).北京人民卫生出版社，1994854～861徐叔云，等.药理实验方法学(第2版).北京人民卫生出版社，1994912～913)。
手术后稳定20min，待所记录的各指标稳定后，记录上述指标作为给药前的正常值，然后于股静脉滴注给药，丹参黄芪提取物的给药剂量为0.058克/kg(即相当于4克生药/kg)，将药物混入100ml的NS输液中滴注给药，约在10min内滴完。空白对照组仅滴入100ml的NS输液；阳性药组给予丹参注射液1g生药/Kg，给药方法同丹参黄芪提取物组。记录并计算给药后5、10、20、30、60、120、180min的上述各血流动力学指标和心肌耗氧指数，结果进行给药前、后净增减值的配对t-检验统计学处理。3.实验结果(详见表4-8)表4 对麻醉犬MAP(kPa)、LVSP、LVEDP(kPa)和+dp/dt max(kPa/s)的影响(x±s，n＝5)
注①给药前后净增减值比较，*P＜0.05，**P＜0.01；***P＜0.001。
②表中“△”表示为给药后的净增加值(下同)；表5 对麻醉犬CO(L/min)、CAF(ml/min)和HR(beats/min)的影响(x±s，n＝5)
注给药前后净增减值比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
表6对麻醉犬TPVR(kPa·s/L)和LVWI(kg·M/min/m2)的影响(x±s，n＝5)
注给药前后净增减值比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
表7 对麻醉犬CI(L/min/m2)、SV(mL/beat)和SI(mL/beat/m2)的影响(x±s，n＝5)
注给药前后净增减值比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
表8 对麻醉犬心肌耗氧指数(TTI×心率)的影响(x±s kPa·beats，n＝5)
注给药前后净增减值比较，*P＜0.05。
实验结果证明，对照组麻醉犬手术后10min即引起持续性心率增加，心脏每搏输出量、心搏指数明显下降(P＜0.05～0.01)；心室内压最大上升速率也有下降，在30min和3h时则有明显下降(P＜0.05)；血管总外周阻力随时间不断增加，在60min时P＜0.05。其余的血流动力学指标则无显著性改变。
丹参黄芪提取物静脉滴注给药后，麻醉犬的心率无显著性增加(与给药前比较，P＞0.05)，表明本品可抑制因手术引起的犬心率增加。给药后5min，即引起麻醉犬的CAF明显增加(P＜0.05～0.001)，维持2h以上，3h时亦有增高，但无统计学差异。丹参黄芪提取物给药后犬的心输出量(CO)也明显增加(P＜0.05～0.001)，维持60min以上；+dp/dt max、CI、SI、SV、LVWI在给药后10min内明显增加(P＜0.05～0.01)，LVSP在给药后20min内明显升高(P＜0.05～0.01)。而阳性药丹参注射液静脉滴注给药后，麻醉犬CAF的上升(P＜0.05～0.001)仅维持了1h，CO仅在给药后10min内有明显上升(P＜0.05)，给药1h后反而明显地下降(P＜0.05)，LVSP在给药后10min内明显升高(P＜0.05)。+dp/dt max、SI、SV在给药后没有明显增加(P＞0.05)。LVWI在给药后10min内明显升高(P＜0.05)，但升幅不及天洋注射液，CI在给药10min时明显升高(P＜0.05)。上述各指标中，丹参黄芪提取物的作用均优于丹参注射液。
取丹参酚酸提取物18克，加注射用水溶解；取黄芪总皂甙3克，加注射用水溶解；取黄芪多糖6克，加注射用水溶解。合并上述三部分溶液，按常规方法配成1000毫升药液，过滤，精滤，灌封，灭菌，检验，得20毫升/支注射剂共50支。使用剂量静脉滴注20毫升/天，或遵医嘱。
权利要求
1.一种治疗心脑血管病的药物组合物，其特征在于以下述重量配比药物为原料丹参中的酚酸类化合物2～10份；黄芪中的皂甙0.2～4份；黄芪多糖1～8份。
2.根据权利要求1所述治心脑血管病的药物组合物，其特征在于主要以下述重量配比药物为原料丹参中的酚酸类化合物4～8份；黄芪中的皂甙0.2～2份；黄芪多糖1～4份。
3.根据权利要求1所述治心脑血管病的药物组合物，其特征在于主要以下述重量配比药物为原料丹参中的酚酸类化合物6份；黄芪中的皂甙1份；黄芪多糖2份。
4.根据权利要求1所述药物组合物，其治疗的心脑血管病主要包括冠心病、心绞痛、心肌缺血、心衰、心律失常。
5.根据权利要求1所述治心脑血管病的药物组合物，其特征在于可以是与任何一种药剂学上辅料混合制成的各种剂型。
6.根据权利要求1所述治心脑血管病的药物组合物，其特征在于可以是注射剂、片剂、缓释片、滴丸、冲剂、粉针剂、胶囊剂、微粒剂。
7.一种治心脑血管病药物组合物的制备方法，含如下步骤取丹参，水提，除鞣，醇沉，用醋酸乙酯萃取，回收醋酸乙酯，得丹参酚酸提取物；取黄芪，醇提，药渣保留备用，减压回收醇液至浸膏状，再醇沉，减压回收醇液，用正丁醇萃取，回收正丁醇，得黄芪总皂甙；将黄芪醇提取后的药渣，水煎，浓缩，醇沉，过滤，取沉淀加蒸馏水溶解，过滤，用膜超滤，浓缩，浓缩液再醇沉，滤取沉淀，得黄芪多糖；取丹参酚酸化合物2～10份、黄芪皂甙0.2～4份、黄芪多糖1～8份混合，按常规制成各种制剂。
8.根据权利要求7所述治心脑血管病药物组合物的制备方法，其特征在于取丹参酚酸化合物4～8份、黄芪皂甙0.2～2份、黄芪多糖1～4份混合，按常规制成各种制剂。
9.根据权利要求7所述治心脑血管病药物组合物的制备方法，其特征在于取丹参酚酸化合物6份、黄芪皂甙1份、黄芪多糖2份混合，按常规制成各种制剂。
10.根据权利要求7所述治心脑血管病药物组合物的制备方法，丹参酚酸化合物、黄芪皂甙、黄芪多糖混合后，可以按常规制成注射剂、片剂、缓释片、滴丸、冲剂、粉针剂、胶囊剂、微粒剂。
全文摘要
本发明公开了一种治心脑血管病的药物组合物及其制备方法,其主要由丹参的酚酸类化合物2～10份、黄芪皂甙0.2～4份和黄芪多糖1～8份组成,三类成份分别提取,混合后加入辅料,可制成各种制剂,治疗冠心病心绞痛、心肌缺血、心衰、心律失常。
文档编号A61K31/343GK1283482SQ0011232
公开日2001年2月14日 申请日期2000年6月9日 优先权日2000年6月9日
发明者侯俊英, 贾晓斌, 倪文山 申请人:安徽天洋药业有限公司