苯并吡喃胍衍生物,其制备方法,及其药物组合物的制作方法

专利名称：苯并吡喃胍衍生物,其制备方法,及其药物组合物的制作方法
背景技术：
1.本发明领域本发明涉及一种新的苯并吡喃胍衍生物，见式1。本发明也涉及该新化合物的制备方法，及含有一种或多种该化合物作为活性成分的药物制剂。
本发明也涉及了苯并吡喃胍衍生物的药物用途，尤其是在心脏、神经细胞或大脑损伤方面的保护，或者器官保护方面的用途，以及抑制NO生成、脂类物质的过氧化作用、血管生成或心脏再狭窄等方面的药物用途式1 此处的R1，R2，R3，R4，R5，R6，n和*可不同。
2.现有技术描述缺血性心脏病通常是心肌缺血引起的，在此种情况下，由于供需之间的不平衡，与氧的需求量相比，氧气的供给量明显下降。大多数情况下，发现冠状动脉疾病是缺血性心脏病的主要病因。如果冠状动脉的内径狭窄，血液供应量减少，从而氧气的供给量减少，则出现心绞痛、心肌梗塞、急性心瘫痪、心率不齐等症状。(G.J.Grover，Can.J.Physiol.75，309(1997)；G.D.Lopaschuk et al.，Science & Medicine 42(1997))。除冠状动脉疾病之外，别的复杂因素也能引起缺血性心脏病，因此，除手术方法如经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)外，也使用药物进行治疗。因此，一些药物开始被使用，这些药物包括抗血栓药物、动脉硬化治疗药物，尤其是一些β阻止剂、硝酸盐、钙离子拮钪剂等，如硝苯吡啶、血栓溶解制剂、阿斯匹林，及血管紧张素转化酶抑制剂(ACE)等。
与传统的钾离子通道开启工具不同，式2表示的吡喃胍化合物(BMS-180448)可选择性的作用于位于心脏的ATP敏感性钾离子通道(KATP)。(K.S.Atwal et al.，J.Mde.Chem.36，3971(1993)；K.S.Atwalet al.，J.Me.Chem.38，1966(1995))人们发现，BMS-180448化合物可以在不明显降低血压的情况下对缺血性心脏进行保护，所以，人们就着手寻找一种新的保护心脏的药物。
式2 完全缺血和局部缺血都可引起细胞的逐渐改变，并可产生大脑损伤。(M.D.Ginsburg，Neuros Scientist 1，95(1995))。即使血流恢复后，氧气能增强产生自由基的生化反应，这将导致潜在的“再灌注损伤”现象出现。为防止出现缺血-再灌注引起的大脑损伤，必须对缺血期的大脑进行保护，以免再增加损伤，同时必须将病理性的细胞变化降至最小。为此，人们使用了神经保护的药物，如刺激性氨基酸拮抗剂和抗氧化剂等。
引起各种神经疾病如中风、脑损伤、阿兹海默综合症、帕金森综合症、新生儿窒息症、青光眼以及糖尿病性神经疾病等的主要原因是神经细胞受到损伤或死亡。(G.J.Zoppo et al.，Drugs 54，9(1997)；I.Sziraki et al.，Neurosci.85，110(1998))。很多因素都可损伤神经细胞，典型的损伤方式是神经细胞中的铁离子浓度增加，活性氧增加，过氧化物增加。(M.P.Mattson et al.，Methods Cell Biol.46，187(1995)；Y.Goodman et al.，Brain Res.706，328(1996))。
神经细胞中的铁离子浓度增加导致大量的反应性羟基出现，大量的氧自由基加快了脂类物质的过氧化作用，因此，神经细胞中就积累了过氧化物。细胞中反应性自由基的积累可产生炎症，如关节炎、动脉硬化症、心肌梗塞、以及神经再生性疾病，如痴呆、由缺血-再灌注或细菌感染产生的内毒素所引起的急性和慢性组织和器官的损伤。
因此，人们寻找一些治疗药物，以减少神经细胞的损伤或死亡，包括抑制脂类物质的过氧化、NO形成，不让细胞内毒素产生的活性氧出现等。目前有报道说，抗氧化剂可以改善神经细胞中的铁离子浓度增加而引起的神经细胞的损伤和死亡的状况。人们一直在努力开发一种能够阻止因氧化物过多而引起神经损伤的药物。(Y.Zhang et al.，J.Cereb.Blood Flow Metab.13，378(1993))。
新生儿窒息(IA)是由于传导过程中暂时缺少氧的供应产生的，据报道，起因是由于产生的能量降低，氧自由基损伤了细胞膜，激动性的神经递质被释放出来，细胞内的离子浓度包括钙离子浓度、锌离子浓度等发生了改变。IA是一个世界性的问题，如果IA很严重，则死亡率就高(大约占1/3的比率)。[C.F.Loid et.al.Physiology andBehavior 68；263-269(2000)]。此外，也可产生长久的后遗症，如运动障碍、学习障碍、癫痫症、肌张力障碍、大脑迟钝及痉挛等。
抗氧化酶、别嘌呤醇、维他命C和E、自由基清道夫、激动性神经递质抑制剂、钙通道阻滞剂如尼莫地平和氟桂嗪、NO生成抑制剂、高血糖和低体温治疗等均可有助于保护大脑的损伤，但他们的临床应用同样受到了限制。因此，需要对新生儿窒息的治疗进行更深入的研究。
青光眼是导致失明的一种原因，因为出现了视神经疾病，视神经的特征发生了变化。人体的视神经是由1百万个神经轴突组成，主要位于神经节细胞层，有一少部分在内神经层的内部。观察剥离的视神经外观，人们推测，青光眼是由于神经节细胞及轴突的死亡和随后的缺失而引起的。[N.N.Osborne，et.Al.Survey of Ophthalmology，43；suppl.S102-s128(1999)]。用于青光眼治疗的神经保护药物可直接或间接的保护视网膜神经元的不死亡，尤其是神经节细胞不死亡。很多药物，如NMDA受体拮抗剂、β-阻滞剂、钙拮抗剂以及抗氧化剂等都能保护因缺血而引起的视网膜神经元的不死亡。
人们目前还不清楚糖尿病引起的神经损伤的病理原因，但存在两种推测。一种是代谢异常，另一种是周围神经的血流减少。[K.Naka et.Al.Diabetes Research and Clinical Practice，30153-162(1995)]。临床上，使用乙酰-L-肉毒碱刺激脂类物质的代谢，改善受损的神经细胞的感受反应性，使用Prosaptide以释放嗜中性因子。另外，临床上还应用美金刚，调节NMDA受体，对血管性痴呆有很好的效果。所以，要治疗糖尿病引起的神经疾病需要开发不同作用机理的神经保护药物。
人类患癌症的比率逐步增加。血管生成即形成新的血管，它被认为是实体瘤增生和转移的主要过程。(Folkma，J.et al.，J.Biol.Chem.26710931-10934(1992))。血管生成受血管生成的诱导剂和抑制剂的双重控制。当两者之间的平衡被破坏，即诱导剂的量大于抑制剂时，则大量的新血管形成。血管生成与各种生理现象密切相关，如胚胎发育、伤口愈合、慢性炎症、血管瘤、糖尿病引起的视网膜疾病、风湿性关节炎、牛皮癣、爱滋病并发症以及恶性肿瘤的增长和转移等。(Forkman，J.，Klagsbrun.M.Science 235442-447(1987))。血管生成包含一系列过程，如各种细胞的转移、增殖、分化等，它也是肿瘤增生和转移的一个重要前提。具体而言，就是因为增加的肿瘤细胞需要从母细胞中形成血管，则肿瘤中的血管生成促进剂就产生刺激作用，使肿瘤内出现血管增生。并且，恶性肿瘤周围的血管又加快了肿瘤细胞向别的部位转移。因此，血管生成抑制剂可阻止肿瘤的增生和转移。作为开发抗肿瘤药物的一个重复研究领域，人们十分关注寻找诱导剂的拮抗剂和血管生成抑制剂，以发现他们的作用机制。
人们发现，蛋白质，如prostamine，以及肿瘤坏死因子，即从软骨组织中提取的因子，以及血管生成抑制剂类固醇可的松，和其它各种类固醇衍生物都是很好的血管生成抑制剂。另外，氢化可的松与肝素合用，则具有抗血管生成作用。(Lee，A.et al.，Science 2211185-1187(1983)；Crum，R.et al.，Science 2301375-1378(1985))。但是，由于这些药物具有细胞毒性，所以，在治疗癌症方面也存在一些潜在的问题。
由于在血管内壁中动脉粥样硬化斑的生长，动脉粥样患者血管内径狭窄，经皮冠状动脉介入法在治疗冠状动脉狭窄方面起到很大作用，治疗成功率超过95％。但是，实施介入治疗之后的6个月内，有20-50％的患者又出现了明显的动脉狭窄现象。(Bult，H.Tips，21；274-279(2000))。虽然人们还没有完全弄清再狭窄的生物机制，但再狭窄的主要细胞的作用机理包括血栓、血管平滑肌细胞的迁移和增生、及偶然的疤痕等。动脉硬化症有各种形式，再狭窄的形成不完全依赖于导致动脉粥样化的血浆浓度或成分。
要寻找再狭窄病症的有效疗法很困难，因为人们还没有完全清楚再狭窄的生物机制，且缺少合适的动物模型。近来，临床试验证明，某些药物，如糖蛋白IIb/IIIa拮抗剂，抗氧化剂丙丁酚等有潜在的临床效用。(Bult，H.Tips，21；274-279(2000))。由于再狭窄与过度增生有关，所以，人们着手开发能降低血管平滑肌细胞增生的药物。
发明人员在开发具有上述药效的化合物的研究过程中发现，式1表示的苯并吡喃胍衍生物在缺血-再灌注和低氧损伤方面具有很好的心脏保护和神经保护作用。该化合物还具有其它药效，包括保护神经细胞、防止脂类物质的过氧化作用、防止反应氧的形成、保护局部缺血的视网膜、改善患糖尿病大鼠受损感受伤害的反应，抑制NO的形成，以及抑制血管生成作用和再狭窄现象。本发明化合物可以用于防治与心血管循环有关的各种疾病，如心肌梗塞、充血性心脏衰竭，中风，神经损伤如新生儿窒息、青光眼、糖尿病引发的神经疾病和脑损伤，氧自由基引发的疾病如神经变性疾病和动脉硬化症，血管生成如癌症和糖尿病引发的视网膜疾病，或再狭窄；也可用来保存器官，如心脏、肾脏、肝脏和组织，也可用来保护在大的心血管外科手术中所用的器官。
本发明的另一目的是提供该苯并吡喃胍衍生物的制备方法。
本发明的另一目的是提供苯并吡喃胍衍生物的药物用途。尤其是提供可用来保护局部缺血和缺氧引发的心脏和脑损伤、具有神经保护作用、抑制NO的形成、抑制脂类物质的过氧化作用、抑制反应氧的生成、抑制血管生成和再狭窄现象形成的苯并吡喃胍衍生物的用途。本发明的详细描述本发明提供了苯并吡喃胍衍生物，见下式1，以及该苯并吡喃胍衍生物的药用盐。
式1 此处，R1可为H，卤素，CF3，NO2，CN，ORa，O(C＝O)Ra，COORa，NH2，NHS(O)mRa，NH(C＝O)Ra或S(O)mRa；Ra可为直链或支链的C1-C4烷基或芳基，m为整数0-2，R2可为直链或支链的C1-C4烷基，R3可为CH2ORa， 或 Ra如前所述；Rb和Rc各自独立，分别代表直链或支链的C1-C4烷基；Z可为直链或支链的C1-C5烷基。
R4为OH、H、卤素、ONO2或O(C＝O)Ra；Ra如前所述，R5和R6各自独立，分别代表H、卤素、直链或支链的C1-C3烷基、ORa，CX3，NO2，CO2Ra，-(C＝O)Ra或SO3Ra，Ra如前所述；X代表卤素；n为整数0-2。
*为手性中心。
在式1中，理想的情况是R1为NO2，CN，NH2，或S(O)mRa；Ra为直链或支链的C1-C2烷基或芳基；m为整数0-2，R2为CH3，R3为 或 Rb和Rc各自独立，分别为直链或支链的C1-C3烷基；Z为直链或支链的C1-C5烷基，R4为OH，H或O(C＝O)Ra；和Ra为直链或支链的C1-C3烷基、ORa，CX3或NO2；R5和R6各自独立，分别为H、卤素、直链或支链的C1-C3烷基、ORa、CX3或NO2；Ra为直链或支链的C1-C3烷基；X为卤素；n为整数0-2。
本发明包括能够从式1表示的苯并吡喃胍衍生物制备而得的所有溶剂化物和水合物，以及式1表示的苯并吡喃胍衍生物和它们的药用盐。
本发明还包括所有单个的立体异构体，如在2、3和4位具有1个或多个手性中心的非对映纯化合物或对映纯化合物，以及式1表示的苯并吡喃胍衍生物的外消旋混合物或非对映异构体混合物。
当2、3和4位上有三个手性中心时，本发明3，4-二氢苯并吡喃衍生物可用光学异构体(I1)，(I2)，(I3)和(I4)表示。(见下式3)式3 此处的R1，R2，R3，R4，R5，R6和n如前所述。
本发明所述的理想的化合物为1)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；2)(2R，3R，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；3)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-氯苯基)胍；4)(2R，3R，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-氯苯基)胍；5)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-硝基苯)胍；6)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苯)胍；
7)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苯)胍；8)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯)胍；9)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯)胍；10)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；11)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；12)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-氯苯基)胍；13)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-氯苯基)胍；14)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苯)胍；15)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苯)胍；16)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯)胍；17)(2S，3R，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯)胍；18)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯)胍；19)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯)胍；20)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯)胍；21)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯)胍；
22)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；23)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；24)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；25)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；26)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；27)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；28)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-羟甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；29)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-羟甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；30)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；31)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；32)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-氯苯基)胍；33)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-氯苯基)胍；34)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-三氟甲基苯)胍；35)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-三氟甲基苯)胍；36)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-氯苯基)胍；
37)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-氯苯基)胍；38)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-乙酰氧基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；39)2S-N″-氰基-N-(6-硝基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；40)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；41)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-乙酸氨-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；42)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲基磺酰氨-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；43)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；44)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-氰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；45)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；46)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-氰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；47)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-溴-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；48)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3，4-二甲氧基苯)胍；49)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3，4-二甲氧基苯)胍；50)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯)胍；51)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯)胍；
52)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-硝基苯)胍；53)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苯)胍；54)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苯)胍；55)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲基磺酰氧-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；56)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲基磺酰氧-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；57)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；58)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；59)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；60)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]二氧戊环-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；61)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]二氧戊环-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；62)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]二噁烷-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；63)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]二噁烷-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；64)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]-5，5-二甲基二噁烷-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；65)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]-5，5-二甲基二噁烷-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；66)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二乙氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；
67)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二乙氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；68)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲氧羧基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；69)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲氧羧基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；70)(3S，4R)-N″-氰基-N-(8-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；71)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(8-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；72)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(8-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；本发明所述的更为理想化合物为(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；及(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-乙酰氧基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；式1所表示的化合物可与药学或生理学可接受的游离酸作用，制成药用盐。这些盐如下所示，但不仅仅限于所示的部分与无机酸作用形成的盐如盐酸、氢溴酸、硫酸、磺酸、磷酸、锡酸等，以及与有机酸作用形成的盐，枸橼酸、醋酸、乳酸、马来酸、富马酸、葡糖酸、甲磺酸、乙二醇酸、琥珀酸、酒石酸、4-甲苯磺酸、半乳糖醛酸、双羟萘酸、谷氨酸、天冬氨酸等。
本发明的化合物酸性盐可用常规方法制备，如将式1化合物溶解于过量酸溶液中，然后用水溶性有机溶剂如甲醇、乙醇、丙酮或乙腈进行沉淀。也可以将等量的式1化合物和在水或醇如乙二醇-甲醚中的酸同时加热，然后蒸发、干燥混合物，或使用抽滤器过滤沉淀出的盐。
式1化合物也可为药学上可接受的铵、碱金属盐或碱土金属盐。可制得式1化合物的碱金属盐或碱土金属盐，如将式1化合物溶解于等摩尔量的碱金属或碱土金属氢氧化物溶液中，滤除不溶解物质，蒸发过滤物至干燥。钠盐、钾盐或钙盐是可药用的。用适当的银盐如硝酸银与碱金属盐或碱土金属盐反应，可制得相应的银盐化合物。
另外，本发明提供了制备式1所示的苯并吡喃胍衍生物的工艺方法。尤其提供了制备式1所示苯并吡喃胍衍生物的工艺方法，见方案1(制备方法I)方案1 此处的R1，R2，R3，R4，R5，R6和n如前所述。
本发明提供了制备式1苯并吡喃胍衍生物的制备工艺，见方案2(制备方法II)方案2 此处，R1，R2，R3，R4，R5，R6和n如前所述。
本发明还提供了利用方案1或方案2制得的化合物(I′)制备式1的苯并吡喃胍衍生物的制备工艺，见方案3。
方案3 此处的R1，R2，R3，R4，R5，R6和n如前所述。
利用方案3的反应可以对R1，R2，R3，R4，R5，和R6的取代基进行修饰，或形成3，4-双键。
以相应的光学异构体作为反应起始物，可以制备式1衍生物的光学活性异构体。
以外消旋混合物作为反应起始物，可制备式1的外消旋混合物，并且，可将外消旋混合物分离为单个的光学异构体。可使用普通的手性色谱柱或再结晶法分离该光学异构体。
使用下述反应和技术可合成式1化合物。将溶剂与适当的反应物在适当的反应条件下，进行反应。I.反应起始物的制备方案1或方案2的反应起始物是氨基醇化合物(III)，可用方案4的反应制备。
方案4 此处，R1，R2和R3分别如前所述，(OZ)为离去基团，Hal代表卤素原子。
方案4所述的环氧化物(II)的制备方法可见美国专利No.5,236,935和由本发明的发明者获得的韩国专利No.096,546。
同样，环氧化合物(II)也可用丙醚衍生物进行制备。(J.Med.Chem.26，1582(1983))。
(1)烯烃化合物(VIII)的制备烯烃化合物(VIII)以对映体(VIII1和VIII2)的形式存在，如式4所示。
式4 此处，R1，R2和R3如上所述。
可分别得到烯烃化合物(VIII)的光学活性化合物(VIII1)和烯烃化合物(VIII2)，见式4。本发明的发明者使用韩国专利申请No.96-7399所述的方法制备烯烃化合物(VIII)。
方案5描述了使用醇化合物(VII)制备烯烃化合物(VIII)具体工艺步骤。
方案5
此处，R1，R2和R3如上所述。
(2)环氧化物(II)的制备按照方案6所示，分别以方案5制得的化合物(VIII1)和(VIII2)作为原料，制备环氧化物，使用化合物(VIII1)制备环氧化物(II1)和(II2)，使用化合物(VIII2)制备环氧化物(II3)和(II4)。
方案6 此处，R1，R2和R3如上所述。
环氧化物(II1)和(II2)能分离成单个的光学异构体，所有分离出的环氧化物或其混合物可在下一步反应中使用。同样，也可分离环氧化物(II3)和(II4)，所有被分离的环氧化物或其混合物可在下一步反应中使用。
可使用美国专利No.5,236,935和由本发明人获得的韩国专利No.096,546中所述的工艺方法，分别用烯烃(VIII1)和(VIII2)制备环氧化物(II1)和(II2)以及环氧化物(II3)和(II4)。
也可用Mn(III)salen的环氧化催化剂，用石蜡(VIII1)或(VIII3)分别制备环氧化物的光学异构体(II1)，(II2)，(II3)和(II4)。(E.N.Jacobsenet al.，Tetrahedron Lett.，38，5055(1991))。使用(R，R)-Mn(III)salen做催化剂时，可将烯烃(VIII1)制成环氧化物(II1)，将石蜡(VIII2)制成环氧化物(II3)。使用(S，S)-Mn(III)salen做催化剂时，可将石蜡(VIII1)制成环氧化物(II2)，将烯烃(VIII2)制成环氧化物(II4)。该环氧化反应在二氯甲烷和水的混合物中进行，NaOCl做氧化剂。
(3)氨基醇化合物(III)的制备在方案4中，将环氧化物(II)和氨气(NH3)或氢氧化铵(NH4OH)在适当的溶剂中反应，制备氨基醇(III)。首选溶剂为醇，如甲醇、乙醇、异丙醇等。反应温度范围5℃-所使用溶剂的沸点。
分别以环氧化物(II1)，(II2)，(II3)和(II4)作为反应起始物，则分别得到氨基醇(III1)，(III2)，(III3)和(III4)。以环氧化物(II1)和(II2)的混合物作为反应起始物，则可制得氨基醇(III1)和(III2)的混合物。以环氧化物(II3)和(II4)的混合物作为反应起始物，则可制得氨基醇(III3)和(III4)的混合物。
式5 此处R1，R2和R3分别如前所述。
式6 此处R1，R2和R3分别如上所述。II.制备方法I式1化合物的制备步骤包括将氨基醇(III)与硫脲(IV)在适当的缩合剂存在下，在适当的溶剂中反应。即制得式1中R4为OH的化合物(I′)，所述缩合剂包括碳二亚胺型缩合剂，如1-[3-(二甲氨基)丙基]-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，及N，N′-二环己基碳二亚胺等，水溶性碳二亚胺型缩合剂为最佳。
相对于氨基醇化合物(III)而言，最佳使用1-3当量的缩合剂。而且，相对于氨基醇化合物(III)而言，优选使用1-2当量的硫脲化合物(IV)。
最佳溶剂为二氯甲烷、氯仿、二甲基甲酰胺、二甲亚砜、四氢呋喃、1，2-二氯乙烷、二氧杂环己烷等。
反应温度范围5℃-40℃。
以氨基醇(III)化合物的单一立体异构体作为反应起始物，则可分别得到与反应起始物具有相同构型的产物。也就是说，式1所述的化合物(I1)，(I2)，(I3)和(I4)可分别由氨基醇化合物(III1)，(III2)，(III3)和(III4)制得。以氨基醇(III1)和(III2)的混合物作为反应起始物，可制成(I1)和(I2)的混合物。以氨基醇(III3)和(III4)的混合物作为反应起始物，可制成(I3)和(I4)的混合物。对式1化合物的混合物进行分离，得到分离出的光学异构体。可用普通的色谱柱或重结晶法分离这些光学异构体。
按照方案7所述，用异氰酸酯(IX)和氰化亚氨钠(NaHNCN)在乙醇中反应，制备上述反应所需的硫脲化合物(IV)。
方案7 此处R5，R6和n分别如前所述。III.制备方法II另一种制备式1化合物的方法为1)在碱性条件下，氨基醇(III)与氰基碳亚胺酸二苯酯(X)反应，生成化合物(V)(步骤1)；2)在适当的溶剂中，化合物(V)与适当的胺反应，生成化合物(I′)(步骤2)。
该反应制成的式1化合物(I′)中的R4为OH。
在步骤1中，可使用各种无机碱和有机碱。无机碱如CaCO3，NaOH，KOH，Na2CO3，NaHCO3等。有机碱包括醇的金属盐，如甲醇钠(CH3ONa)，乙醇钠(CH3CH2ONa)等；醋酸钠(CH3COONa)；氨的金属盐；双环胺，如1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)，1，5-二氮杂双环[4.3.0]壬-5-烯(DBN)等；三乙胺；N，N-二异丙基乙胺；吡啶；二甲基吡啶；N，N-二甲基苯胺；4-(二甲基氨)-吡啶；1，4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷(DABCO)等。最佳的叔胺为三乙胺、N，N-二异丙基乙胺、吡啶、1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-6-烯、4-(二甲基氨基)-吡啶等。
相对氨基醇(III)而言，最好使用1-3当量的碱。相对于氨基醇(III)而言，最好使用1-2当量的氰基碳亚胺酸二苯酯(X)。
优选所用溶剂为醇，如乙醇、异丙醇等，二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亚砜(DMSO)、氯仿等。
反应温度的最佳范围是5℃至所用溶剂的沸点。
在步骤2中，相对氨基醇(III)而言，最佳使用1-5当量的胺化合物(VI)。
反应溶剂的实例为醇，如乙醇、异丙醇等，二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亚砜、氯仿、二氯甲烷、四氢呋喃(THF)等。
反应温度优选保持在5℃至所用溶剂的沸点的范围内。
步骤2可在碱性溶液中反应，所用的碱的实例如上所述。
以氨基醇(III)的各光学异构体做为反应起始物，可得到相应的具有相同构型的产物(I′)。用氨基醇(III1)和(III2)的混合物做为反应起始物，则可得到化合物(I1)和(I2)的混合物。用氨基醇(III3)和(III4)的混合物做为反应起始物，则可得到化合物(I3)和(I4)的混合物。可分离这些光学异构体的混合物，得到化合物(I′)的单一光学异构体。可用普通的色谱柱或重结晶法分离光学异构体。IV.用化合物(I′)制备化合物(I)在方案3反应中，取代基R1，R2，R3，R4，R5或R6可被修饰成其它的官能团，并可在3，4-位形成双键。在此反应中，化合物(I′)为反应起始物，由上述方案1或方案2制备。
反应起始物、反应物以及反应条件根据产物的结构来确定，也就是说，R1，R2，R3，R4，R5和R6是什么取代基，以及是否在3，4-位形成双键来确定。本发明包括了所有的可以制备式1化合物的所有可能的反应类型、反应物和反应条件。
按照方案3流程制备式1化合物的一些制备工艺将在下面详细描述，但，本发明并不仅仅限于这些过程。
(1)在R4位引入乙酰氧基如下方案8所示，在适当催化剂存在的条件下，在适当溶剂中，乙酸酐和化合物(I′)反应，可在R4位引入乙酰氧基。
方案8 此处R1，R2，R3，R4，R5，R6和n如前所述。
在前面已经提到了比较好的碱，最佳的碱为三乙胺、吡啶或N，N-二异丙基乙胺。
比较好的催化剂是4-(二甲基氨基)吡啶。
相对化合物(I′)而言，使用1-3当量的碱比较好。而且，相对于化合物(I’)而言，优选使用0.05-0.5当量的催化剂。
比较好的溶剂为二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、乙腈等，反应温度0-40℃较好。
(2)在3，4-位引入双键如方案9所示，用氢原子取代R4，按上述方案8制备流程制备的乙酸酯(Ia)，在适当的溶剂中与适当的碱反应，则在3，4-位形成双键。
方案9 此处R1，R2，R3，R4，R5，R6和n如前所述。
使用的较好的碱前面已经讨论过。最佳的是1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯、1，5-二氮杂双环[4.3.0]壬-5-烯、或1，4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷等。
相对化合物(Ia)而言，使用1-3当量的碱比较好。
理想溶剂为甲苯、苯、二甲苯、二氧杂环己烷等。理想反应温度范围5℃-溶剂的沸点。
(3)在R1引入NH2基式1化合物(Id)中，R1为NH2，可按方案10所示，对R1为NO2的化合物(Ic)进行还原而制得。
方案10 此处R2，R3，R5，R6和n如前所述。
在适当溶剂中，用金属如铂、钯、碳载钯(Pd/C)、阮内镍等作催化剂，通过氢化反应，将NO2还原成NH2。理想溶剂为醇，如甲醇、乙醇等、和乙酸乙酯。
也可用还原剂将NO2还原成NH2，如在CuSO4，Cu(OAc)2，CoCl，SnCl2或NiCl2存在的情况下，用NaBH4还原。此时，理想的溶剂为水和甲醇的混合物，理想的反应温度为室温。
(4)在R1处引入NH(C＝O)Ra制备R1为NH(C＝O)Ra的式1化合物时，可在碱性条件下，将按上述方案10所示制备的化合物(Id)和酰氯或酸酐反应而得。
理想的碱前面已经论述。比较理想的碱为三乙胺、N，N-二异丙基乙胺、吡啶或4-(二甲基氨基)吡啶。理想溶剂为二氯甲烷、氯仿、二甲亚砜、二甲基甲酰胺、四氢呋喃和二氧杂环己烷。
(5)在R1引入-NHS(O)mRa制备R1为-NHS(O)mRa的式1化合物时，可在碱性条件下，将按上述方案10所示制备的化合物(Id)和烷基磺酰氯或芳基磺酰氯反应而得。
理想的碱前面已经论述。比较理想的碱为三乙胺、N，N-二异丙基乙胺、吡啶或4-(二甲基氨基)吡啶。理想溶剂为二氯甲烷、氯仿、二甲亚砜、二甲基甲酰胺、四氢呋喃和二氧杂环己烷。
此外，本发明还提供了含有权利要求1所述的苯并吡喃胍衍生物或他们的药用盐作为活性成分的药物组合物。尤其是具有保护心脏、保护神经细胞或保护大脑不受损伤，或用于器官保存、抑制NO的生成，抑制脂质过氧化反应，或抑制血管增生和再狭窄现象出现的药物组合物。
用大鼠的离体动脉做实验，则与对照品KATP的开启工具如克罗卡灵(Croma Kalim)和BMS-180448相比，本发明化合物具有明显的弱血管舒张作用。KATP的开启工具通过作用于心脏，产生心脏保护作用，通过影响平滑肌内的KATP，产生血管舒张作用。血管舒张作用不是必须的，在缺血的情况下还应当禁止有这种作用，如对组织进行灌注时，就有危险。换句话说，也就是这些化合物的血管舒张作用将限制它们在治疗心肌缺血方面的应用。因此，本发明化合物几乎没有血管舒张作用，是具有心脏选择性的高安全范围的心脏保护药物。
另外，还证明了本发明化合物的抗缺血活性，及在心脏选择等方面具有明显改善。在麻醉大鼠的缺血性心肌损伤模型中，与对照品BMS-180448相比，本发明化合物具有相同或更好的抗心肌缺血作用。再者，与BMS-180448相比，本发明化合物具有明显的弱血管舒张活性，所以，与常用药物相比，应为心脏保护剂的首选药物。另外，在麻醉的狗的缺血性心肌损伤模型中，本发明化合物可明显地减少梗塞范围，这一作用以危险百分比(％IZ/AAR)表示，此作用优于对照品BMS-180448。
如前所述，本发明化合物几乎不产生血管舒张作用，但在各种动物体内可产生很好的抗心肌缺血活性，所以，可被用于防治与心肌缺血有关的疾病，如缺血后收缩功能紊乱，同时也可被用作心肌梗塞、心绞痛和充血性心脏衰竭的心脏保护剂。
另外，本发明化合物还具有保护神经细胞作用。具体的说，本发明化合物可保护神经细胞免受铁的剂量依赖性的氧化损伤。同样，对于糖尿病大鼠而言，使用热板通过改善受损的MNCV(运动神经传导速度)和疼痛反应，表明本发明化合物也可防止视网膜细胞在缺血损伤剂量依赖性下的死亡，以此显示出本发明化合物具有神经保护作用。在质子MRS(核磁共振光谱)中，通过降低脂质/NAA(N-乙酰基天冬氨酸)和脂质/Cr(肌氨酸)的值，本发明化合物可保护新生大鼠免受缺氧脑损伤。因此，本发明化合物也可用作神经保护制剂，用于治疗因神经细胞的凋亡或死亡而引起的神经性疾病，如中风、大脑痴呆症、新生儿窒息、青光眼、糖尿病性神经病、以及脑外伤等。
另外，本发明化合物还可抑制大鼠动脉平滑肌细胞(A7r5)中的由铁或铜和低密度脂蛋白的氧化作用而出现的脂质的过氧化反应，当加入H2O2后，其抗氧化效果更加明显。另外，在ORAC(氧自由基吸收能力)实验中，用AAPH(2.2′-偶氮(2-氨基丙烷)二氢二氯)作为自由基产生剂，本发明化合物还可抑制A7r5和HUVEC细胞中由H2O2引起的ROS(反应性氧)，并消除氧自由基。
另外，本发明化合物还具有抗氧化作用，可用于阻止脂质的过氧化反应，并可有效治疗因神经细胞中自由基的种类积累而引起的神经疾病，如神经变性性疾病(中风和痴呆)、动脉硬化症及炎症等。
再者，本发明化合物还抑制NO(一氧化氮)的形成，NO的形成是由内毒素如具有剂量依赖性的脂多糖(LPS)等引发的。本发明化合物是NO生成抑制剂，可有效治疗炎症，如关节炎、心肌梗塞、动脉硬化及痴呆等，这些是由于细胞内NO积累，引起细胞凋亡或死亡，对组织或器官造成了损伤。
本发明化合物可有效保护大脑免受缺血-再灌注损伤。本发明化合物优于对照物MK801。接受MK801治疗的大鼠出现了运动功能降低的副反应，而用本发明化合物治疗大鼠，没有对运动变化产生明显副反应。因此，本发明化合物可用作脑缺血-再灌注损伤的神经保护药物，并可有效治疗因脑缺血损伤引起的各种疾病，如血栓引起的缺血性脑血管闭塞症。
在血管紧张素II引发的新血管生成实验中，本发明化合物可有效抑制血管增生，尤其是，按照剂量依赖性方式可几乎完全抑制新血管的形成。因此，本发明化合物可用作血管增生抑制剂，用来治疗因血管增生引起的各种疾病，如风湿性关节炎、牛皮癣、爱滋病综合症、癌症。
在[3H]-胸苷合成实验中，本发明化合物通过抑制DNA的合成，明显抑制血管平滑肌细胞的分裂。所以，本发明化合物可用来防治再狭窄症，该症状通常在经皮冠状动脉介入术之后出现。
本发明化合物可用来保护保存的器官，如心脏、肾脏、肝脏和组织，在大的心血管外科手术中可用来保护器官。
本发明还包括药物制剂，该药物制剂中除含有无毒的、适当的惰性药物添加剂之外，含有1种或多种本发明的活性成分，本发明还包括该药物制剂的制备工艺。
本发明包括药物制剂的剂量单位，对每个制剂的剂量单位而言，如片剂、包衣片剂、胶囊、丸剂、栓剂和安瓿，含有一种以上的相当于个体剂量的一部分或多倍的活性成分。如剂量单位中可含有个体剂量需要的活性成分的1，2，3或4倍，或1/2，1/3或1/4倍。理想的剂量单位是含有一定量的活性成分，适于一次使用，或含有相当于一日剂量的全部、一半剂量、1/3剂量或1/4剂量。
非毒性的惰性的适当的药物赋形剂包括固态、半固态或液态的稀释剂、填充剂和各种类型的药物添加剂等。
理想的药物剂型为片剂、包衣片、胶囊、丸剂、颗粒剂、栓剂、溶液、混悬液、乳液、糊剂、软膏剂、凝胶剂、乳膏、洗液、扑粉和喷剂。
片剂、包衣片、胶囊、丸剂、颗粒剂除含有活性成分外，还可有含有多个添加剂，如(a)填充剂和稀释剂，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，如羧甲基纤维素，藻酸盐、明胶及聚乙烯吡咯烷酮；(c)湿润剂，如甘油；(d)崩解剂，如琼脂，碳酸钙和碳酸钠；(e)溶解缓释剂，如石蜡；(f)吸收促进剂，如季铵化合物；(g)润湿剂，如十六醇、甘油一硬脂酸酯；(h)吸附剂，如滑石粉、硬脂酸钙以及固态的聚乙二醇；或上述(a)至(i)所列的物质的混合物。
片剂、包衣片、胶囊、丸剂、颗粒剂采用常规的包衣和胶壳制备而成，任意使用乳化剂；也可制成能释放活性成分或只在肠内某一部位释放活性成分的制剂，如需要，按延迟释放的方式进行，如用聚合物和蜂蜡制成包埋组合物等。
如需要，可使用上述一种或多种赋形剂也可将一种或多种活性成分制成微胶囊。
栓剂中，除活性成分或药物成分外，还含有常规的水溶性或水不溶性赋形剂，如聚乙二醇、脂肪，如可可脂，及高级酯(如C16-脂肪酸与C14-醇形成的酯)或这些物质的混合物。
乳膏、糊剂、软膏剂、凝胶剂中，除活性成分或药物成分外，还含有常规的赋形剂，如动植物脂肪、蜂蜡、石蜡、淀粉、黄芪胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅树脂、皂土、硅酸、滑石、氧化锌或它们的混合物。
扑粉和喷剂中，除活性成分或药物成分外，可含有常规赋形剂如乳糖、滑石、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙、聚酰胺粉末，或它们的混合物。喷剂中通常还含有常规的抛射剂，如含氯氟烃。
溶液制剂和乳液制剂中，除活性成分或药物成分外，可含常规赋形剂如溶剂、增溶剂和乳化剂，如水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄基醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油脂、尤其是棉花子油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油、芝麻油、甘油、正丙三醇、四氢糠醇、聚乙二醇、山梨聚糖的脂肪酸酯，及它们的混合物。
若是非经肠用药，则溶液与乳液也可制成与血液等渗无菌形式。
混悬剂中，除活性成分或药物成分外，可含常规赋形剂，如液体稀释剂，如水、乙醇、丙二醇，及悬浮剂，如乙氧基化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和山梨酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、皂土、琼脂-琼脂、黄芪胶，或它们的混合物。
上述制剂也可含有着色剂，防腐剂和改善味道的添加剂，如薄荷油、铵树油和甜味剂，如糖精。
在上述药物制剂中，药用活性成分的百分比浓度是约0.1-99.5，理想范围是占总物质重量的约0.5-95％。
上述药物制剂中，除含有本发明化合物外，也可含有其它药物活性化合物。
按常规的已知方法制备上述药物制剂，如将活性成分或各组分与赋形剂进行混合。
以上提及的制剂可由人和动物使用，可口服、直肠用药、注射用药(静脉注射、肌肉注射或皮下注射)、脑池内注射、阴道用药、腹腔内用药或局部用药(扑粉、软膏、滴剂)，也可用于中空体和体腔的感染症的治疗。适当的制剂为注射用溶液、口服治疗的溶液或混悬液，凝胶，输注剂、乳液、软膏或滴剂，眼用和皮肤用制剂、银盐或其它盐、滴耳剂、眼用软膏、扑粉或溶液，可用于局部治疗。对动物而言，通过饮食或喝水来用药比较合适。
凝胶、散剂、扑粉、片剂、缓释片、预混剂、浓缩剂、颗粒剂、小糖丸、大药丸、胶囊、气雾剂、喷剂、和吸入剂等可为人、动物使用。本发明化合物可与其它载体物质结合，如塑料(局部治疗用的塑料链)、胶原质或骨固物等。
已经证明，人类服用本发明所述的活性成分在达到每24小时服用的总量为0.1-100mg/kg体重时，理想情况是，每24小时服用0.1-20mg/体重时有效，若适当，采用上述几个单剂量，则可达到希望的治疗效果。当然，有时也可偏离上述剂量，具体地讲，可根据患者体重和体质情况、病情的性质和严重程度、药物制剂的特性及给药的情况和给药期间的长短等情况而进行变化。
在一些情况下，可服用小于上述剂量的活性成分，在另外一些情况下，则必须给药大于上述的剂量的活性成分。理想的药物剂量和所需活性成分的用药方式由专家根据自己的专业知识确定。
使用IR光谱法、UV光谱法、NMR光谱法、质谱法、液相色谱法、X-光衍射法、旋光分析法和元素分析法对本发明化合物的分子结构进行了鉴定。
制备例方案1或方案2中的起始反应物(III)用下述制备例制备。<制备例1>制备(2R，3R，4S)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃和(2R，3S，4R)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃(步骤1)制备(2R)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧甲基-3，4-环氧基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃在溶于1L丙酮的75g(0.28mol)的(2R)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-1-苯并吡喃的溶液中，加水1L，再将84g(0.99mol)碳酸氢钠加入该混合物，搅拌混合物10分钟，再加入174g(0.28mol)过硫酸氢钾制剂，强烈搅拌。每15分钟，加入碳酸氢钠和过硫酸氢钾制剂，共3次。过滤反应混合物，减压除丙酮，用乙酸乙酯(500ml×2)萃取残留物，有机层用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，用硅胶色谱柱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝4∶1)，得76g(产率95％)所需的白色固体化合物。
(步骤2)制备(2R，3R，4S)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃和(2R，3S，4R)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃将步骤1制得的8.8g环氧化物溶于250ml饱和氨乙醇中，室温搅拌反应混合物7天。除溶剂，用硅胶色谱柱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶4)残留物，回收2.58g反应起始物，得到为外消旋混合物的反应产物5.6g(产率60％)。<制备例2>制备(2S，3R，4S)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃和(2S，3S，4R)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃(步骤1)制备(2S)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧甲基-3，4-环氧-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃在溶于100ml丙酮中的5g(19mmol)的(2R)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-1-苯并吡喃的溶液中，加水100ml，再将5.6g(66mmol)碳酸氢钠加入该混合物，搅拌混合物10分钟，再加入11.6mg(19mmol)过硫酸氢钾制剂，强烈搅拌。每15分钟，加入碳酸氢钠和过硫酸氢钾制剂，共3次。过滤反应混合物，减压除丙酮，用乙酸乙酯(100ml×2)萃取残留物，有机层用无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩，用硅胶色谱柱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝4∶1)，得5.1g(产率97％)所需的白色外消旋混合物固体。
(步骤2)制备(2S，3R，4S)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃和(2S，3S，4R)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃将步骤1制得的5.1g环氧化物溶于100ml饱和氨乙醇中，室温搅拌反应混合物7天。除溶剂，用硅胶色谱柱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶4)残留物，得到4.4g目的化合物(产率80％)的外消旋混合物。<制备例3>制备(2R，3R，4S)-2-甲基-2-二甲氧甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃和(2R，3S，4R)-2-甲基-2-二甲氧甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃(步骤1)制备(2R)-2-甲基-2-二甲氧甲基-3，4-环氧-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃将400mg(1.82mmol)的(2R)-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-1-苯并吡喃溶于1ml的DMSO，向所得溶液中加82ul蒸馏水，将反应混合物冷却至0℃，往混合物中缓慢加入647mg N-溴丁二酰亚胺，30分钟后，加1ml水，用乙酸乙酯萃取混合物。有机层用无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。将剩余物溶于1ml二氧杂环己烷-水(3∶1)，加146mg NaOH，室温搅拌反应混合物24分钟，用乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸镁干燥、过滤，减压浓缩。用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝10∶1)纯化剩余物，得目的化合物358mg目的化合物(产率83％)，属于外消旋混合物。
(步骤2)制备(2R，3R，4S)-2-甲基-2-二甲氧甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃和(2R，3S，4R)-2-甲基-2-二甲氧甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃将步骤1制得的560mg(2.37mmol)环氧化物溶于20ml饱和氨乙醇中，室温搅拌反应混合物7天。除溶剂，用硅胶色谱柱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)残留物，得到340mg目的化合物(产率57％)外消旋混合物。<制备例4>制备(2R，3R，4S)-6-硝基-2-甲基-2-羟甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃和(2R，3S，4R)-2-甲基-2-羟甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃(步骤1)制备(2R)-6-硝基-2-甲基-2-羟甲基-3，4-环氧-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃按制备例1所述的步骤1的方法，反应起始物用708mg(3.20mol)(2R)-6-硝基-2-甲基-2-羟甲基-2H-1-苯并吡喃代替(2R)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-1-苯并吡喃，剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝2∶1)纯化，得目的产物625mg(产率82％)，属于外消旋混合物。
(步骤2)制备(2R，3R，4S)-6-硝基-2-甲基-2-羟甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃和(2R，3S，4R)-2-甲基-2-羟甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃将步骤1制得的625mg(2.63mmol)环氧化物溶于10ml饱和氨乙醇中，室温搅拌反应混合物7天。除溶剂，用硅胶色谱柱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶5)残留物，得到328mg目的化合物(产率49％)外消旋混合物。<制备例5>制备(2R，3R，4S)-6-硝基-2-甲基-2-甲氧甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃和(2R，3S，4R)-2-甲基-2-甲氧甲基-3-羟基4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃(步骤1)制备(2R)-6-硝基-2-甲基-2-甲氧甲基-3，4-环氧-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃按制备例1所述的步骤1的方法，反应起始物用580mlg(2.47mmol)(2R)-6-硝基-2-甲基-2-甲氧甲基-2H-1-苯并吡喃代替(2R)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-1-苯并吡喃，剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝2∶1)纯化，得目的产物607mg(产率98％)，属于外消旋混合物。
(步骤2)制备(2R，3R，4S)-6-硝基-2-甲基-2-甲氧甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃和(2R，3S，4R)-2-甲基-2-甲氧甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃将步骤1制得的607mg(2.42mmol)环氧化物溶于10ml饱和氨乙醇中，室温搅拌反应混合物7天。除溶剂，用硅胶色谱柱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶4)残留物，得到345mg目的化合物(产率53％)外消旋混合物。<制备例6>制备(2S，3S，4R)-6-氰基-2-甲基-2-二甲氧甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃按照实施例1的步骤1和步骤2的相同方法，用1.2g(4.90mmol)(2S)-6-氰基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-1-苯并吡喃代替(2R)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-1-苯并吡喃做反应起始物，剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝4∶1)纯化，得目的产物0.65g(产率48％)，为(2S，3S，4R)立体异构体。<制备例7>制备(2S，3R，4S)-6-氰基-2-甲基-2-二甲氧甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃按照实施例6所述方法制备，剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝4∶1)纯化，得目的产物0.30g(产率22％)，为(2S，3R，4S)立体异构体。<制备例8>制备(2S，3S，4R)-6-溴-2-甲基-2-二甲氧甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃按照实施例1的步骤1和步骤2的相同方法，用1.6g(5.35mmol)(2S)-6-溴-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-1-苯并吡喃代替(2R)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-1-苯并吡喃做反应起始物，剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶4)纯化，得目的化合物1.28g(产率72％)，为(2S，3S，4R)立体异构体。<制备例9>制备(2S，3S，4R)-4-氨基-6-甲基磺酰-3，4-二氢-3-羟基2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-1-苯并吡喃按照实施例1的步骤1和步骤2的相同方法，用2.52g(8.45mmol)(2S)-6-甲基磺酰-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-1-苯并吡喃代替(2R)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-1-苯并吡喃做反应起始物，剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶5)纯化，得目的化合物1.74g(产率62％)，为(2S，3S，4R)立体异构体。<制备例10>制备(2R，3S，4R)-4-氨基-甲基磺酰-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-1-苯并吡喃按照实施例1的步骤1和步骤2的相同方法，用0.79g(2.65mmol)(2S)-6-甲基磺酰-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-1-苯并吡喃代替(2R)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧甲基-2H-1-苯并吡喃做反应起始物，剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶5)纯化，得目的化合物0.60g(产率68％)，为(2R，3S，4R)立体异构体。<制备例11>制备(2S，3S，4R)-2-甲基-2-([1，3]二氧戊环-2-基)-6-硝基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃(步骤 1)制备(2S)-2-甲基-2-([1，3]二氧戊环-2-基)-6-硝基-2H-1-苯并吡喃将1g(3.77mmol)的(2S)-2-甲基-2-二甲氧甲基-6-硝基-2H-1-苯并吡喃、0.63ml(11.31mmol)1，2-亚乙基二醇和71.7mg(0.377mol)对甲苯亚磺酸溶于20ml甲苯，回流5h，用饱和NaHCO3溶液洗涤反应混合物，然后用水和乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。萃取。用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝6∶1)纯化剩余物，得目的化合物0.93g(产率93％)。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.48(s，3H)，3.91-3.97(m，4H)，4.95(s，1H)，5.73(d，1H)，6.49(d，1H)，6.83(d，1H)，7.86(d，1H)，8.01(dd，1H)(步骤2)制备(2S，3S，4R)-2-甲基-2-([1，3]二氧戊环-2-基)-6-硝基-3，4-环氧-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃往100ml的单颈烧瓶中倾入25.6ml(14.08mmol)、0.55M的NaOCl水溶液和9.6ml、0.05M的Na2HPO4，冷却混合物至0℃，然后加入步骤1制成的化合物0.93g(3.52mmol)和96.22mg(0.176mmol)的溶于7ml二氯甲烷的Jacobsen催化剂，室温搅拌反应混合物8h，用cellite板过滤，除去Jacobsen催化剂。用盐水洗涤二氯甲烷层，用Na2SO4干燥、过滤、减压浓缩，用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝4∶1)纯化剩余物，得目的化合物470mg(产率48％)。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.57(s，3H)，3.73(d，1H)，3.80-3.90(m，4H)，4.02(d，1H)，4.96(s，1H)，6.88(d，1H)，8.13(dd，1H)，8.29(d，1H)
(步骤3)制备(2S，3S，4R)-2-甲基-2-([1，3]二氧戊环-2-基)-6-硝基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃将步骤2制成的化合物470mg(1.68mmol)溶于15ml乙醇，再加2.36ml(16.3mmol)，25％ NH4OH溶液，在25℃搅拌反应5日，减压除乙醇。剩余物用乙酸乙酯萃取，盐水洗涤，Na2SO4干燥、过滤，减压浓缩。用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶3)纯化剩余物，得目的化合物400mg(产率80％)。<制备例12>制备(2S，3S，4R)-2-甲基-2-([1，3]二氧戊环-2-基)-6-硝基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃(步骤1)制备(2S)-2-甲基-2-([1，3]二氧戊环-2-基)-6-硝基-2H-1-苯并吡喃按实施例11所述步骤1，将1g(3.77mmol)(2S)-2-甲基-2-二甲氧甲基-6-硝基-2H-1-苯并吡喃与2.73ml 1，3-丙二醇反应。剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝6∶1)纯化，得目的化合物1g(产率96％)。
(步骤2)制备(2S，3S，4S)-2-甲基-2-([1，3]二氧戊环-2-基)-6-硝基-3，4-环氧-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃将步骤1制得的化合物作反应起始物，按实施例11的步骤2的方法反应。剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝4∶1)纯化，得目的化合物0.57g(产率54％)。
(步骤3)制备(2S，3S，4R)-2-甲基-2-([1，3]二氧戊环-2-基)-6-硝基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃将步骤2制得的化合物做为反应起始物，按实施例11的步骤3的方法反应。剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶3)纯化，得目的化合物0.46g(产率76％)。<制备例13>制备(2S，3S，4R)-2-甲基-2-([1，3]-5，5-二甲基二氧戊环-2-基)-6-硝基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃(步骤1)制备(2S)-2-甲基-2-([1，3]-5，5-二甲基二氧戊环-2-基)-6-硝基-2H-1-苯并吡喃按实施例11所述步骤1反应，反应起始物为1g(3.77mmol)(2S)-2-甲基-2-二甲氧甲基-6-硝基-2H-1-苯并吡喃与2.80ml 2，2-二甲基-1，3-丙二醇。剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝6∶1)纯化，得目的化合物1.01g(产率88％)。
(步骤2)制备(2S，3S，4S)-2-甲基-2-([1，3]-5，5-二甲基二氧戊环-2-基)-6-硝基-3，4-环氧-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃将步骤1制得的化合物作反应起始物，按实施例11的步骤2的方法反应。剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝4∶1)纯化，得目的化合物0.62g(产率58％)。
(步骤3)制备(2S，3S，4R)-2-甲基-2-([1，3]-5，5-二甲基二氧戊环-2-基)-6-硝基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃将步骤2制得的化合物做为反应起始物，按实施例11的步骤3的方法反应。剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶3)纯化，得目的化合物0.53g(产率82％)。<制备例14>制备(2S，3S，4R)-2-甲基-2-二甲氧甲基-6-硝基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃(步骤1)制备(2S)-2-甲基-2-二甲氧甲基-6-硝基-2H-1-苯并吡喃按实施例11所述步骤1反应，反应起始物为1g(3.77mmol)(2S)-2-甲基-2-二甲氧甲基-6-硝基-2H-1-苯并吡喃与3.0ml乙醇。剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝6∶1)纯化，得目的化合物1.01g(产率91％)。
(步骤2)制备(2S，3S，4S)-2-甲基-2-二乙氧甲基-6-硝基-3，4-环氧-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃将步骤1制得的化合物作反应起始物，按实施例11的步骤2的方法反应。剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝4∶1)纯化，得目的化合物0.71g(产率67％)。
(步骤3)制备(2S，3S，4R)-2-甲基-2-二乙氧基甲基-6-硝基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃将步骤2制得的化合物做为反应起始物，按实施例11的步骤3的方法反应。剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶3)纯化，得目的化合物0.65g(产率86％)。<制备例15>制备(2S，3S，4R)-2-甲基-2-二甲氧甲基-6-甲酯基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃按照制备例1步骤1和步骤2的方法反应，但起始反应物为1.41g(5.32mmol)(2S)-2-甲基-2-二甲氧甲基-6-甲酯基-2H-1-苯并吡喃。剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶4)纯化，得目的化合物0.86g(产率52％)。<制备例16>制备(2R，3S，4R)-2-甲基-2-二甲氧甲基-6-甲酯基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃按照制备例1步骤1和步骤2的方法反应，但起始反应物为1.27g(4.79mmol)(2R)-2-甲基-2-二甲氧甲基-6-甲酯基-2H-1-苯并吡喃。剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶4)纯化，得目的化合物0.85g(产率57％)。<制备例17>制备(3S，4R)-2-甲基-2-二甲氧甲基-8-硝基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃按照制备例1步骤1和步骤2的方法反应，但起始反应物为1.82g(6.86mmol)(2S)-2-甲基-2-二甲氧甲基-8-硝基-2H-1-苯并吡喃。剩余物用硅胶色谱柱(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶4)纯化，得目的化合物1.31g(产率64％)。
实施例1 制备(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍在508mg N-氰基-N′-(4-氯苯基)硫脲钠盐和500mg(1.68mmol)制备例1制备的氨基醇化合物溶于5ml DMF所得的溶液中加入418mg1-[3-(二甲基氨基)]-2-乙基碳化二亚胺盐酸盐。室温下搅拌反应混合物5小时，加入10ml 1N HCl酸化该混合物，用乙酸乙酯萃取(30ml×2)。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥并减压浓缩。将剩余物经硅胶柱色谱纯化。(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)，得到260mg(产率33％)所需立体化学结构(2R，3R，4S)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.35(s，3H)，3.36(d，6H)，3.85(t，1H)，4.59(s，1H)，5.10(t，1H)，5.97(s，1H)，6.93(d，1H)，7.35(dd，4H)，7.62(d，1H)，8.01(d，2H)，9.44(s，1H)实施例2 制备(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍反应用与实施例1同样方法进行。将剩余物用硅胶柱色谱纯化。(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶4)，得到200mg(产率25％)所需立体化学结构(2R，3S，4R)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.23(s，3H)，3.42(d，6H)，4.07(t，1H)，4.48(s，1H)，4.99(t，1H)，5.80(s，1H)，6.96(d，1H)，7.36(dd，4H)，7.76(s，1H)，8.03(s，2H)，9.48(s，1H)实施例3 制备(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-氯苯基)胍在508mg N-氰基-N′-(4-氯室温下苯基)硫脲钠盐和500mg制备例1中制备的氨基醇化合物溶于5ml DMF所得的溶液中加入418mg1-[3-(二甲基氨基)丙基]-2-乙基碳化二亚胺盐酸盐。搅拌反应混合物6小时，加入10ml 1N HCl酸化该混合物，然后用乙酸乙酯萃取(30ml×2)。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥并减压浓缩。将剩余物经硅胶柱色谱纯化。(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到230mg(产率29％)所需立体化学结构(2R，3R，4S)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.35(s，3H)，3.38(d，6H)，3.88(s，3H)，4.59(s，1H)，5.11(s，1H)，5.97(s，1H)，6.94(d，1H)，7.28(m，4H)，7.79(d，1H)，8.04(m，2H)，9.49(s，1H)实施例4 制备(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-氯苯基)胍反应用与实施例3同样方法进行。将剩余物经硅胶柱色谱纯化。(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶4)得到200mg(产率25％)所需立体化学结构(2R，3S，4R)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.23(s，3H)，3.42(d，5H)，4.08(t，1H)，4.49(s，1H)，4.99(t，1H)，6.98(d，1H)，7.30(m，4H)，7.91(d，1H)，8.04(d，2H)，9.6(s，1H)实施例5 制备(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-硝基苯基)胍在532mg N-氰基-N′-(4-硝基苯基)硫脲钠盐和500mg 制备例1中制备的氨基醇化合物溶于5ml DMF所得的溶液中加入418mg1-[3-(二甲基氨基)丙基]-2-乙基碳化二亚胺盐酸盐。搅拌反应混合物6小时室温下，加入10ml 1N HCl酸化该混合物后，用乙酸乙酯萃取(30ml×2)。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥并减压浓缩。将剩余物经硅胶柱色谱纯化。(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到210mg(产率26％)所需立体化学结构(2R，3R，4S)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.36(s，3H)，3.38(d，6H)，3.88(t，1H)，4.60(s，1H)，5.12(t，1H)，6.2(s，1H)，6.97(d，1H)，7.48(d，1H)，8.04(dd，1H)，8.11(s，1H)，8.20(d，2H)，8.33(d，1H)，10.07(s，1H)实施例6 制备(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苯基)胍在500mg N-氰基-N′-(4-三氟甲基苯基)硫脲钠盐和500mg制备例1中制备的氨基醇化合物溶于5ml DMF所得的溶液中加入418mg1-[3-(二甲基氨基)丙基]-2-乙基碳化二亚胺盐酸盐。搅拌反应混合物5小时室温下，加入10ml 1N HCl酸化该混合物后，用乙酸乙酯萃取(30ml×2)。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥并减压浓缩。将剩余物经硅胶柱色谱纯化。(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到250mg(产率29％)所需立体化学结构(2R，3R，4S)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.34(s，3H)，3.38(d，6H)，3.38(t，1H)，4.59(s，1H)，5.10(t，1H)，6.0(s，1H)，6.94(d，1H)，7.52(d，1H)，7.57(m，3H)，7.86(d，1H)，8.02(dd，1H)，8.09(s，1H)实施例7 制备(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苯基)胍反应用与实施例6同样方法进行。将剩余物经硅胶柱色谱纯化。(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到200mg(产率23％)所需立体化学结构(2R，3S，4R)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.23(s，3H)，3.43(d，6H)，4.08(t，1H)，4.49(s，1H)，5.01(t，1H)，5.85(s，1H)，6.98(d，1H)，7.49(d，1H)，7.60(m，3H)，8.03(m，3H)，9.7(s，1H)实施例8 制备(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯基)胍在500mg N-氰基-N′-(4-甲氧基 苯基)硫脲钠盐和500mg制备例1中制备的氨基醇化合物溶于5ml DMF所得的溶液中加入418mg1-[3-(二甲基氨基)丙基]-2-乙基碳化二亚胺盐酸盐。室温下搅拌反应混合物5小时，加入10ml 1N HCl酸化该混合物后，用乙酸乙酯萃取(30ml×2)。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥并减压浓缩。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到49mg(产率6％)所需立体化学结构(2R，3R，4S)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.24(s，3H)，3.35(d，6H)，3.70(s，3H)，4.08(t，1H)，4.45(s，1H)，5.64(d，1H)，5.78(t，1H)，6.93(m，3H)，7.24(d，2H)，8.02(d，2H)，8.17(s，1H)，9.59(s，1H)实施例9 制备(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯基)胍反应用与实施例8同样方法进行。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到190mg(产率24％)所需立体化学结构(2R，3S，4R)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.33(s，3H)，3.38(d，6H)，3.72(s，3H)，3.87(t，1H)，4.58(s，1H)，5.10(t，1H)，5.88(s，1H)，6.91(d，3H)，7.20(d，3H)，7.97(s，1H)，9.14(s，1H)实施例10 制备(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍在508mg N-氰基-N′-(4-氯苯基)硫脲钠盐和500mg制备例1中制备的氨基醇化合物溶于5ml DMF所得的溶液中加入418mg 1-[3-(二甲基氨基)丙基]-2-乙基碳化二亚胺盐酸盐。室温下搅拌反应混合物5小时，加入10ml 1N HCl酸化该混合物后，用乙酸乙酯萃取(30ml×2)。有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥并减压浓缩。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到260mg(产率33％)所需(2S，3R，4S)立体化学结构化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.35(s，3H)，3.37(d，6H)，3.85(t，1H)，4.59(s，1H)，5.11(t，1H)，5.97(s，1H)，6.93(d，1H)，7.35(dd，4H)，7.63(d，1H)，8.01(d，2H)，9.44(s，1H)实施例11 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍反应用与实施例10同样方法进行。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到200mg(产率25％)所需(2S，3S，4R)立体化学结构化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.23(s，3H)，3.43(d，6H)，4.05(t，1H)，4.48(s，1H)，4.99(t，1H)，5.81(s，1H)，6.97(d，1H)，7.37(dd，4H)，7.76(s，1H)，8.03(s，2H)，9.49(s，1H)实施例12 制备(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-氯苯基)胍反应用与实施例10同样方法进行。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到188mg(产率24％)所需(2S，3R，4S)立体化学结构化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.35(s，3H)，3.43(d，6H)，3.88(t，1H)，4.60(s，1H)，5.11(t，1H)，5.97(s，1H)，6.95(d，1H)，7.17(d，1H)，7.25(d，1H)，7.34(d，2H)，7.79(d，1H)，8.03(m，2H)，9.49(s，1H)实施例13 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-氯苯基)胍反应用与实施例12同样方法进行。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到270mg(产率34％)所需(2S，3S，4R)立体化学结构化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.18(s，3H)，3.43(d，6H)，4.09(t，1H)，4.49(s，1H)，5.00(t，1H)，5.85(s，1H)，6.98(d，1H)，7.29(d，1H)，7.37(d，1H)，7.40(m，2H)，7.91(d，1H)，8.05(m，2H)实施例14 制备(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苯基)胍反应用与实施例10同样方法进行。但用582mg N-氰基-N′-(3-三氟甲基苯基)硫脲钠盐和500mg制备例2中制备的氨基醇化合物。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到220mg(产率26％)所需(2S，3R，4S)立体化学结构化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.34(s，3H)，3.43(d，6H)，3.88(t，1H)，4.60(s，1H)，5.11(t，1H)，5.95(s，1H)，6.95(d，1H)，7.45(d，1H)，7.57(m，3H)，7.88(d，1H)，8.03(dd，1H)，8.10(s，1H)，9.62(s，1H)实施例15 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苯基)胍反应用与实施例14同样方法进行。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到320mg(产率37％)所需(2S，3S，4R)立体化学结构化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.24(s，3H)，3.43(d，6H)，4.08(t，1H)，4.49(s，1H)，5.01(t，1H)，5.82(s，1H)，6.98(d，1H)，7.47(d，1H)，7.57(m，3H)，7.98(d，1H)，8.03(m，2H)，9.67(s，1H)实施例16 制备(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯基)胍反应用与实施例10同样方法进行。但用500mg N-氰基-N′-(4-甲氧基苯基)硫脲钠盐和500mg制备例2中制备的氨基醇化合物。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到170mg(产率21％)所需(2S，3R，4S)立体化学结构化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.33(s，3H)，3.36(d，6H)，3.72(s，3H)，3.86(t，1H)，4.58(s，1H)，5.09(t，1H)，5.88(s，1H)，6.91(d，3H)，7.20(d，3H)，7.97(s，1H)，8.00(d，1H)实施例17 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯基)胍反应用与实施例16同样方法进行。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到270mg(产率34％)所需(2S，3S，4R)立体化学结构化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.22(s，3H)，3.38(d，6H)，3.72(s，3H)，4.06(t，1H)，4.45(s，1H)，4.99(t，1H)，5.75(s，1H)，6.93(t，3H)，7.20(d，2H)，7.35(s，1H)，8.01(s，1H)，8.03(d，1H)，9.19(s，1H)实施例18 制备(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲基苯基)胍反应用与实施例1同样方法进行。但用465mg N-氰基-N′-(4-甲基苯基)硫脲钠盐和500mg制备例2中制备的氨基醇化合物。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到158mg(产率21％)所需立体化学结构(2R，3R，4S)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.34(s，3H)，2.26(s，3H)，3.37(d，6H)，3.87(s，1H)，4.59(s，1H)，5.11(t，1H)，5.93(s，1H)，6.92(d，1H)，7.16(s，3H)，7.38(d，1H)，8.00(1H，2H)，9.24(s，1H)实施例19 制备(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲基苯基)胍反应用与实施例18同样方法进行。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到250mg(产率33％)所需立体化学结构(2R，3S，4R)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.22(s，3H)，2.26(s，3H)，3.38(d，6H)，4.06(t，1H)，4.46(s，1H)，4.99(t，1H)，5.74(s，1H)，6.95(d，1H)，7.16(s，3H)，7.53(s，1H)，8.02(d，2H)，9.28(s，1H)实施例20 制备(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苄基)胍反应用与实施例1同样方法进行。但用530mg N-氰基-N′-(4-甲氧基苄基)硫脲钠盐和500mg制备例1中制备的氨基醇化合物。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到134mg(产率16％)所需立体化学结构(2R，3R，4S)化合物。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ1.47(s，3H)，3.51(d，6H)，3.77(s，3H)，3.80(d，2H)，4.44(t，1H)，4.56(s，1H)，5.32(m，1H)，6.06(s，1H)，6.40(d，1H)，6.90(m，3H)，7.12(m，2H)，7.30(d，1H)，8.00(dd，1H)，8.03(s，1H)实施例21 制备(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苄基)胍反应用与实施例20同样方法进行。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到140mg(产率17％)所需立体化学结构(2R，3S，4R)化合物。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ∑1.32(s，3H)，3.49(s，6H)，3.58(t，1H)，3.77(s，3H)，4.04(d，1H)，4.41(s，1H)，4.65(s，2H)，6.35(s，1H)，6.88(dd，4H)，7.26(d，2H)，8.04(dd，1H)，8.08(s，1H)实施例22 制备(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例1同样方法进行。但用465mg N-氰基-N′-苄基硫脲钠盐和500mg制备例1中制备的氨基醇化合物。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到260mg(产率34％)所需立体化学结构(2R，3R，4S)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.24(s，3H)，3.41(m，1H)，3.44(d，6H)，4.04(m，1H)，4.51(s，1H)，4.76(s，2H)，5.70(s，1H)，6.98(d，1H)，7.32(m，4H)，8.03(m，2H)，8.16(s，1H)实施例23 制备(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例22同样方法进行。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到200mg(产率26％)所需立体化学结构(2R，3S，4R)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.26(s，3H)，3.36(d，6H)，3.44(d，1H)，3.87(t，1H)，4.44(d，2H)，4.56(s，1H)，5.02(t，1H)，5.86(s，1H)，6.94(d，1H)，7.29(m，4H)，7.75(t，1H)，7.93(s，1H)，7.99(dd，1H)实施例24 制备(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例10同样方法进行。但用508mg N-氰基-N′-苄基硫脲钠盐和500mg制备例2中制备的氨基醇化合物。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到170mg(产率22％)所需(2S，3R，4S)立体化学结构化合物。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ1.27(s，3H)，3.48(d，6H)，3.5(m，1H)，4.02(d，1H)，4.48(s，1H)，4.75(s，2H)，6.0(s，1H)，6.72(s，1H)，6.87(d，1H)，7.30(m，5H)，8.0(d，1H)，8.02(s，1H)实施例25 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例24同样方法进行。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到190mg(产率25％)所需(2S，3S，4R)立体化学结构化合物。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ1.31(s，3H)，3.44(d，6H)，3.5(m，1H)，3.71(d，1H)，4.47(s，1H)，5.14(m，2H)，5.69(s，1H)，6.70(s，1H)，6.58(d，1H)，7.25(m，5H)，8.0(d，1H)，8.02(s，1H)实施例26 制备(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍反应用与实施例1同样方法进行。但用500mg N-氰基-N′-(4-氯苯基)硫脲钠盐和500mg制备例3中制备的氨基醇化合物。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到170mg(产率23％)所需立体化学结构(2R，3R，4S)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.25(s，3H)，3.37(d，6H)，3.82(t，1H)，4.52(s，1H)，5.00(t，1H)，5.45(s，1H)，6.71(d，1H)，6.90(t，1H)，7.10(m，2H)，7.24(d，2H)，7.38(d，2H)，7.54(d，1H)，9.24(s，1H)实施例27 制备(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍反应用与实施例26同样方法进行。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到190mg(产率26％)所需立体化学结构(2R，3S，4R)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.16(s，3H)，3.40(d，6H)，4.01(t，1H)，4.43(s，1H)，4.92(t，1H)，5.48(s，1H)，6.72(d，1H)，6.90(t，1H)，7.15(m，3H)，7.31(m，4H)，7.67(s，1H)，9.29(s，1H)实施例28 制备(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-羟基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍反应用与实施例1同样方法进行。但用289mg N-氰基-N′-(4-氯苯基)硫脲钠盐和210mg 制备例4中制备的氨基醇化合物。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到40mg(产率11％)所需立体化学结构(2R，3R，4S)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.35(s，3H)，3.5(m，1H)，3.75(m，1H)，4.95(t，1H)，5.2(t，1H)，6.0(s，1H)，6.97(d，1H)，7.4(m，4H)，7.7(d，1H)，8.0(m，2H)，9.51(s，1H)实施例29 制备(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-羟基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍反应用与实施例28同样方法进行。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到40mg(产率11％)所需立体化学结构(2R，3S，4R)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.2(s，3H)，3.65(m，2H)，4.11(t，1H)，5.08(t，1H)，5.85(s，1H)，7.01(d，1H)，7.4(m，4H)，7.9(d，1H)，8.1(d，2H)，9.58(s，1H)实施例30 制备(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍反应用与实施例1同样方法进行。但用800mg N-氰基-N′-(4-氯苯基)硫脲钠盐和200mg制备例5中制备的氨基醇化合物。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到108mg(产率32％)所需立体化学结构(2R，3R，4S)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.4(s，3H)，3.15(s，3H)，3.45(d，1H)，3.64(d，1H)，3.8(t，1H)，5.08(t，1H)，6.09(s，1H)，6.94(d，1H)，7.34(dd，4H)，7.64(s，1H)，8.01(d，2H)，9.5(s，1H)实施例31 制备(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍反应用与实施例30同样方法进行。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到107mg(产率32％)所需立体化学结构(2R，3S，4R)化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.15(s，3H)，3.3(s，3H)，3.45(d，1H)，3.6(d，1H)，4.06(t，1H)，5.00(t，1H)，5.9(s，1H)，6.96(d，1H)，7.34(dd，4H)，7.8(s，1H)，8.0(m，2H)，7.48(s，1H)实施例32 制备(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-氯苯基)胍反应用与实施例10同样方法进行。但用508mg N-氰基-N′-(2-氯苯基)硫脲钠盐和500mg制备例2中制备的氨基醇化合物。将剩余物经硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到188mg(产率24％)所需(2S，3R，4S)立体化学结构化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.35(s，3H)，3.43(d，6H)，3.88(t，1H)，4.60(s，1H)，5.11(t，1H)，5.97(s，1H)，6.95(d，1H)，7.17(d，1H)，7.25(d，1H)，7.34(d，2H)，7.79(d，1H)，8.03(m，2H)，9.49(s，1H)实施例33 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-氯苯基)胍反应用与实施例32相同方法进行。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)，得到270mg(产率34％)所需化合物(2S，3S，4R)立体化学结构。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.24(s，3H)，3.43(d，6H)，4.10(t，1H)，4.49(s，1H)，5.00(s，1H)，5.85(s，1H)，6.98(d，1H)，7.19(d，1H)，7.28(d，1H)，7.35(m，2H)，7.90(d，1H)，8.05(d，1H)，9.53(s，1H)实施例34 制备(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-三氟甲基苯基)胍。
反应用与实施例10相同方法进行，但用582mg N-氰基-N′-(2-三氟甲基苯基)硫脲钠盐和500mg制备例2中制备的氨基醇化合物。用硅胶色谱法纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)，得到220mg(产率26％)所需(2S，3R，4S)立体化学结构化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.34(s，3H)，3.43(d，6H)，3.88(t，1H)，4.60(s，1H)，5.11(t，1H)，5.97(s，1H)，6.95(d，1H)，7.45(d，1H)，7.60(m，3H)，7.87(d，1H)，8.03(dd，1H)，8.10(s，1H)，9.62(s，1H)实施例35 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-三氟甲基苯基)胍反应用与实施例34相同方法进行。用硅胶色谱法纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)，得到320mg(产率37％)所需(2S，3S，4R)立体化学结构化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.24(s，3H)，3.43(d，6H)，4.08(t，1H)，4.49(s，1H)，5.00(s，1H)，5.82(s，1H)，6.98(d，1H)，7.47(d，1H)，7.61(dd，3H)，8.03(m，3H)，9.67(s，1H)实施例36 制备(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-氯苄基)胍反应用与实施例10相同方法进行，但用540mg N-氰基-N′-(2-氯苄基)硫脲钠盐和制备例2中制备的500mg氨基醇化合物。用硅胶色谱法纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)，得到73mg(产率9％)所需(2S，3R，4S)立体化学结构化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.36(s，3H)，3.47(d，6H)，3.68(s，1H)，4.13(m，1H)，4.39(s，1H)，4.52(s，2H)，5.57(s，1H)，6.6(s，1H)，6.88(m，1H)，7.25(m，6H)，8.01(d，1H)，8.16(s，1H)实施例37 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-氯苄基)胍反应用与实施例36相同方法进行。用硅胶色谱法纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)，得到100mg(产率12％)所需(2S，3S，4R)立体化学结构化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.28(s，3H)，3.5(d，6H)，3.6(s，1H)，3.98(d，1H)，4.53(m，3H)，5.61(d，1H)，5.89(t，1H)，6.88(d，1H)，7.25(m，3H)，7.40(d，1H)，8.02(m，2H)，8.14(s，1H)实施例38制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-乙酰氧基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍在68mg(0.15mmol)实施例25中制备的化合物溶于3ml二氯甲烷所得溶液中加入21ul乙酸酐，42ul三乙胺和2mg DMAP(4-(二甲氨基)吡啶)。室温下搅拌反应混合物5小时，加入5ml水，后用乙酸乙酯萃取(10ml×2)。用水及盐水洗涤有机层，用无水硫酸镁干燥、过滤并减压浓缩。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)，得到67mg(产率90％)所需化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.3(s，3H)，1.25(s，1H)，2.1(s，3H)，3.3(s，3H)，3.5(s，3H)，4.35(s，1H)，4.52(s，2H)，5.25(m，1H)，5.32(s，1H)，6.98(d，2H)，7.38(s，5H)，8.15(d，2H)实施例39 制备(2S)-N″-氰基-N-(6-硝基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍在54mg(0.11mmol)实施例38中制备的化合物溶于2ml甲苯的溶液中加入24ul(0.1628mol)DBU。室温下将反应混合物搅拌24小时，并用乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸镁干燥、过滤并减压浓缩。用硅胶色谱法纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)，得到31mg(产率64％)所需化合物。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.43(s，3H)，3.29(s，3H)，3.39(s，3H)，4.21(s，1H)，4.59(d，2H)，5.45(s，1H)，7.02(d，1H)，7.36(m，5H)，8.29(dd，2H)，8.82(d，1H)实施例40 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍在1.11g实施例24中制备的化合物溶于20ml甲醇的溶液中加入10ml饱和的乙酸铜溶液。在该混合物中缓慢地加入276mg硼氢化钠。室温下将反应混合物搅拌3小时，加入50ml水后用100ml乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸镁干燥、过滤并减压浓缩。用硅胶色谱法纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶3)，得到576mg(产率56％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ1.21(s，3H)，3.58(s，3H)，3.59(s，3H)，4.14(d，1H)，4.30(s，1H)，4.45(d，1H)，4.47(d，1H)，5.46(d，1H)，6.60-6.66(m，3H)，7.32-7.36(m，5H)实施例41 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-乙酰氧氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍在50mg实施例40中制备的化合物溶于2ml二氯甲烷的溶液中加入25ul三乙胺和10ul乙酰氯。室温下将反应混合物搅拌1小时，用10ml水和20ml乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸镁干燥、过滤并减压浓缩。用硅胶色谱法纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到51mg(产率92％)所需化合物。
1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ1.15(s，3H)，1.96(s，3H)，3.38(s，3H)，3.51(s，3H)，3.98(m，2H)，4.30(s，1H)，4.38-4.49(m，2H)，5.22(br s，1H)，5.48(br s，1H)，6.64(d，1H)，7.31(br s，5H)，7.61(br s，1H)，7.94(s，1H)，9.76(s，1H)实施例42 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲磺酰氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍在91mg实施例40中制备的化合物溶于2ml二氯甲烷的溶液中加入45ul三乙胺和20ul甲磺酰氯。室温下将反应混合物搅拌2小时用10ml水和20ml乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸镁干燥、过滤并减压浓缩。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到90mg(产率85％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.25(s，3H)，2.90(s，3H)，3.57(s，6H)，4.10(d，1H)，4.25(d，1H)，4.34(s，1H)，4.43(d，1H)，4.50(d，1H)，4.61(t，1H)，5.83(d，1H)，6.78(d，1H)，7.20-7.38(m，7H)，8.18(br s，1H)实施例43 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍在制备例6中制备的100mg(2S，3S，4R)-6-氰基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃溶于3ml DMF的溶液中加入92mg N-氰基-N′-(4-氯苯基)硫脲钠盐和89mg 1-[3-(二甲氨基)丙基]-2-乙基碳化二亚胺盐酸盐。室温下将反应混合物搅拌6小时，加入5ml 1N HCl酸化该混合物之后用30ml乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸镁干燥并减压浓缩。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)，得到70mg(产率43％)所需(2S，3R，4S)立体化学结构化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.36(s，3H)，3.49(s，3H)，3.53(s，3H)，3.58(t，1H)，4.34(s，1H)，4.99(t，1H)，5.62(s，1H)，6.86(d，1H)，7.25-7.55(m，5H)，7.69(s，1H)实施例44 制备(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-氰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍反应用与实施例43相同方法进行，但用制备例中7制备的99mg(0.35mmol)(2S，3R，4S)-6-氰基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃作原料。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)，得到68mg(产率42％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.50(s，3H)，3.44(s，3H)，3.48(s，3H)，3.66(t，1H)，4.43(s，1H)，5.24(d，2H)，6.84(d，1H)，7.27-7.44(m，4H)，7.55(s，1H)，8.53(s，1H)实施例45 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍(步骤1)制备(2S，3S，4R)-4-[[(氰基-亚氨基)苯氧甲基]氨基]-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-6-腈在150mg制备例6中制备的(2S，3S，4R)-6-氰基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃溶于3ml异丙醇-DMF(2∶1)的溶液中加入141mg氰基碳亚胺酸二苯酯和97ul三乙胺。将反应混合物搅拌18小时室温下，用10ml水和30ml乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸镁干燥、过滤并减压浓缩。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到182mg(产率80％)所需化合物。
(步骤2)制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍在182mg上述步骤1中制备的化合物溶于2ml DMF的溶液中加入0.42ml苄基胺。将反应混合物搅拌12小时室温下用20ml水和50ml乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸镁干燥、过滤并减压浓缩。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到163mg(产率68％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.29(s，3H)，3.45(s，3H)，3.52(s，3H)，4.09(t，1H)，4.35(s，2H)，4.43(d，1H)，4.81(t，1H)，5.94(s，1H)，6.83(d，1H)，7.28-7.40(m，7H)实施例46 制备(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-氰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例45步骤1和步骤2同样方法进行，但用制备例7中制备的150mg(2S，3R，4S)-6-氰基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃作原料。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到160mg(产率69％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.35(s，3H)，3.43(s，3H)，3.44(s，3H)，3.75(t，1H)，3.82(s，2H)，4.47(s，1H)，5.05(t，1H)，5.60(s，1H)，6.81(d，1H)，7.20-7.40(m，7H)实施例47 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-溴-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例45步骤1和步骤2同样方法进行，但用制备例8中制备的98mg(2S，3S，4R)-6-溴-2-甲基-2-二甲氧基甲基-3-羟基-4-氨基-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃作原料。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到86mg(产率83％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3)δ1.21(s，3H)，3.39(s，3H)，3.42(s，3H)，4.10(d，1H)，4.29(s，1H)，4.42(dd，2H)，4.65(m，2H)，5.61(d，1H)，7.20-7.40(m，4H)实施例48制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3，4-二甲氧基苄基)胍(步骤1)制备(2S，3S，4R)-4-[[(氰基亚氨基)苯氧甲基]氨基]-6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃将制备例2中制备的化合物用硅胶色谱(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶4)分离，得到400mg(2S，3S，4R)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃。
在400mg(1.34mmol)(2S，3S，4R)-6-硝基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃溶于3ml DMF的溶液中加入352mg(1.48mmol)氰基碳亚胺酸二苯酯和243ul(1.74mmol)三乙胺。室温下将反应混合物搅拌12小时，用20ml水和30ml乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸镁干燥、过滤并减压浓缩。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到498mg(产率84％)所需化合物。
(步骤2)制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3，4-二甲氧基苄基)胍在327mg(0.74mmol)上述步骤1制备的化合物溶于3ml DMF的溶液中加入371mg(2.22mmol，3当量)(3，4-二甲氧基苄基)胺。室温下将反应混合物搅拌12小时，用20ml水和30ml乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸镁干燥、过滤并减压浓缩。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到338mg(产率89％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.33(s，3H)，3.53(s，3H)，3.57(s，3H)，3.86(s，3H)，3.87(s，3H)，4.14(d，1H)，4.38(s，1H)，4.24-4.50(m，2H)，4.82(brt，1H)，6.15(s，1H)，6.61(t，1H)，6.84(m，3H)，6.92(d，1H)，8.08(dd，1H)，8.35(s，1H)实施例49 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3，4-二甲氧基苄基)胍在209mg(0.41mmol)实施例48中制备的化合物溶于5ml甲醇的溶液中加入0.5ml(0.2mmol，0.5当量)0.4M Cu(OAc)2水溶液。在该混合物中缓慢地在30分钟内加入155mg(4.1mmol，10当量)硼氢化钠。室温下将反应混合物搅拌1小时，用10ml乙酸乙酯萃取并过滤除去黑色沉淀物。加入10ml饱和NaHCO3水溶液后，滤液用30ml乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机层，用无水硫酸镁干燥、过滤并减压浓缩。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝9∶1)，得到169mg(产率85％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.20(s，3H)，3.57(s，6H)，3.87(s，6H)，4.29(s，1H)，4.04-4.12(m，2H)，4.32-4.58(m，2H)，5.46(d，1H)，6.50-6.69(m，3H)，6.84(m，3H)，7.26(br s，1H)实施例50 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧苄基)胍反应用与实施例48步骤2同样方法进行，但用360mg实施例48步骤1制备的化合物作原料和333mg(2.43mmol)4-甲氧苄基胺代替(3，4-二甲氧基苄基)胺。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到343mg(产率87％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.47(s，3H)，3.51(d，6H)，3.77(s，3H)，3.80(d，2H)，4.44(t，1H)，4.56(s，1H)，5.32(m，1H)，6.06(s，1H)，6.40(d，1H)，6.90(m，3H)，7.12(m，2H)，7.30(d，1H)，8.00(dd，1H)，8.03(s，1H)实施例51 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧苄基)胍反应用与实施例49相同方法进行，但用304mg(0.62mmol)实施例50中制备的化合物作原料。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶4)，得到241mg(产率85％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200 MHz)δ1.21(s，3H)，3.58(s，6H)，3.81(s，3H)，4.15(d，1H)，4.17(d，1H)，4.30(s，1H)，4.36-4.54(m，3H)，5.48(d，1H)，6.52-6.71(m，3H)，6.88(d，2H)，7.09(br s，1H)，7.24(d，2H)实施例52 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-硝基苄基)胍反应用与实施例48步骤2同样方法进行，但用358mg(0.81mmol)实施例48步骤1制备的化合物作原料，用458mg(2.43mmol)3-硝基苄基胺盐酸盐代替(3，4-二甲氧基苄基)胺。将剩余物用硅胶色谱纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)得到302mg(产率74％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.18(s，3H)，3.43(d，6H)，4.09(t，1H)，4.49(s，1H)，5.00(t，1H)，5.85(s，1H)，6.98(d，1H)，7.29(d，1H)，7.37(d，1H)，7.40(m，2H)，7.91(d，1H)，8.05(m，2H)实施例53 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苄基)胍反应用与实施例48步骤2同样方法进行，但用443mg(1.0mmol)实施例48步骤1制备的化合物作原料，用525mg(3.0mmol)(3-三氟甲基)苄基胺代替(3，4-二甲氧基苄基)胺。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到497mg(产率95％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.33(s，3H)，3.55(s，3H)，3.59(s，3H)，4.19(d，1H)，4.38(s，1H)，4.40(m，1H)，4.54(d，1H)，4.78(m，1H)，6.48(brs，1H)，6.84(br s，1H)，6.94(d，1H)，7.53(m，5H)，8.09(dd，1H)，8.56(s，1H)实施例54 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苄基)胍反应用与实施例49相同方法进行，但用278mg(0.53mmol)实施例53中制备的化合物作原料。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶4)，得到192mg(产率73％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200 MHz)δ1.23(s，3H)，3.59(s，6H)，4.16(d，1H)，4.31(s，1H)，4.40-4.67(m，3H)，5.53(d，1H)，6.57-6.74(m，3H)，7.31(brt，1H)，7.46-7.59(m，5H)实施例55制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲磺酰氧-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍(步骤1)制备(2S，3S，4R)-4-[[(氰基亚氨基)苯氧甲基]氨基]-6-甲磺酰氧-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-1-苯并吡喃反应用与实施例48步骤1同样方法进行，但用58mg(0.18mmol)制备例9中制备的化合物作原料。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到64mg(产率74％)所需化合物。
(步骤2)制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲磺酰氧-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例48步骤2同样方法进行，但用64mg(0.13mmol)上述步骤1制备的化合物和28ul(0.26mmol)作原料。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)，得到32mg(产率49％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.28(s，1H)，3.21(s，3H)，3.58(s，3H)，3.59(s，3H)，4.15(m，1H)，4.35(s，1H)，4.52(m，1H)，4.63(m，1H)，5.45(d，1H)，6.87(d，1H)，6.92(br s，1H)，7.20-7.42(m，6H)实施例56 制备(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲磺酰氧-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍(步骤1)制备(2R，3S，4R)-4-[[(氰基亚氨基)苯氧甲基]氨基]-6-甲磺酰氧-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-1-苯并吡喃反应用与实施例55步骤1同样方法进行，但用63mg(0.19mmol)制备例10中制备的化合物作原料。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到75mg(产率79％)所需化合物。
(步骤2)制备(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲磺酰氧-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例55步骤2同样方法进行，但用75mg(0.15mmol)上述步骤1制备的化合物和28ul(0.26mmol)作原料。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到57mg(产率74％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.26(s，3H)，3.16(s，3H)，3.41(s，3H)，3.47(s，3H)，3.72(d，1H)，4.43(s，1H)，4.46(d，1H)，5.02(t，1H)，5.25(d，1H)，6.59(t，1H)，6.84(d，1H)，7.02-7.20(m，2H)，7.22-7.40(m，4H)实施例57制备(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例49相同方法进行，但用884mg(1.94mmol)实施例24中制备的化合物作原料。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶3)，得到313mg(产率38％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，500MHz)δ1.41(s，3H)，1.75(br s，1H)，3.39(s，3H)，3.45(s，3H)，3.46(d，1H)，3.72(d，1H)，4.40(s，1H)，4.46(d，2H)，4.78(d，1H)，5.22(m，1H)，6.41(m，1H)，6.50(m，1H)，6.59(d，1H)，6.73(m，1H)，7.30-7.37(m，4H)实施例58 制备(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例49相同方法进行，但用1.2g(2.7mmol)实施例22中制备的化合物作原料。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶3)，得到547mg(产率48％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，500MHz)δ1.21(s，3H)，1.80(br s，2H)，3.57(s，3H)，3.58(s，3H)，4.10-4.13(m，1H)，4.20-4.38(m，1H)，4.31(s，1H)，4.48(dd，1H)，4.50(dd，1H)，5.60(s，1H)，6.58-6.79(m，2H)，7.28-7.37(m，6H)实施例59 制备(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例49相同方法进行，但用1.07g(2.3mmol)实施例23中制备的化合物作原料。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到589mg(产率60％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，500MHz)δ1.41(s，3H)，1.75(br s，1H)，3.39(s，3H)，3.45(s，3H)，3.46(d，1H)，3.72(d，1H)，4.40(s，1H)，4.46(d，2H)，4.78(d，1H)，5.22(m，1H)，6.41(m，1H)，6.50(m，1H)，6.59(d，1H)，6.73(m，1H)，7.30-7.37(m，4H)实施例60制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]二氧戊环-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍(步骤1)制备(2S，3S，4R)-4-[[(氰基亚氨基)苯氧甲基]氨基]-6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]二氧戊环-2-基)-2H-1-苯并吡喃反应用与实施例48步骤1同样方法进行，但用400mg(1.35mmol)制备例11中制备的化合物作原料。用硅胶色谱纯化剩余物(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶3)，得到400mg(产率67％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.40(s，3H)，3.2(d，1H)，3.81-3.92(m，4H)，4.69(s，1H)，5.15(t，1H)，6.98(d，1H)，7.15-7.42(m，5H)，8.12(dd，1H)，8.30(d，1H)(步骤2)制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]二氧戊环-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例48步骤2同样方法进行，但用400mg(0.1mmol)上述步骤1制备的化合物作原料，0.3ml(2.7mmol)苄基胺代替(3，4-二甲氧基苄基)胺。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到350mg(产率85％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.35(s，3H)，3.95-4.15(m，4H)，4.49(dd，2H)，4.91(t，1H)，5.05(s，1H)，5.62(s，1H)，6.61(t，1H)，6.95(d，1H)，7.29-7.41(m，5H)，8.12(dd，1H)，8.21(d，1H)实施例61 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]二氧戊环-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例49相同方法进行，但用200mg(0.44mmol)实施例60中制备的化合物作原料。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶3)，得到90mg(产率48％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.24(s，3H)，3.92-4.14(m，4H)，4.45(dd，2H)，4.97(s，1H)，5.51(d，1H)，6.45-6.80(m，3H)，7.12(s，1H)，7.25-7.42(m，3H)实施例62 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]二噁烷-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍(步骤1)制备(2S，3S，4R)-4-[[(氰基亚氨基)苯氧甲基]氨基]-6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]二噁烷-2-基)-2H-1-苯并吡喃反应用与实施例60步骤1同样方法进行，但用700mg(2.26mmol)制备例12中制备的化合物作原料。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)，得到840mg(产率83％)所需化合物。
(步骤2)制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]二噁烷-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例48步骤2同样方法进行，但用840mg(1.85mmol)上述步骤1制备的化合物作原料，用0.61ml(5.56mmol)苄基胺代替(3，4-二甲氧基苄基)胺。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到750mg(产率87％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.31(s，3H)，1.4-1.52(m，1H)，2.13-2.26(m，1H)，3.80-3.98(m，2H)，4.18-4.31(m，3H)，4.45(dd，2H)，4.75(s，1H)，4.81(t，1H)，5.81(s，1H)，6.75(t，1H)，6.96(d，1H)，7.28-7.40(m，5H)，8.1(dd，1H)，8.35(d，1H)实施例63 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]二噁烷-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例49相同方法进行，但用350mg(0.75mmol)实施例62中制备的化合物作原料。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到278mg(产率85％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.23(s，3H)，1.40-1.50(m，1H)，2.12-2.22(m，1H)，3.8-3.96(m，2H)，4.15-4.32(m，3H)，4.48(dd，2H)，4.70(s，1H)，5.41(d，1H)，6.52-6.71(m，3H)，7.15(s，1H)，7.30-7.39(m，5H)实施例64制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]-5，5-二甲基二噁烷-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍(步骤1)制备(2S，3S，4R)-4-[[(氰基亚氨基)苯氧甲基]氨基]-6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]-5，5-二甲基二噁烷-2-基)-2H-1-苯并吡喃反应用与实施例60步骤1同样方法进行，但用1.1g(3.60mmol)制备例13中制备的化合物作原料。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到1g(产率86％)所需化合物。
(步骤2)制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]-5，5-二甲基二噁烷-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例48步骤2同样方法进行，但用1g(2.1mmol)上述步骤1制备的化合物作原料。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到900mg(产率87％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ0.78(s，3H)，1.21(s，3H)，1.34(s，3H)，3.54(dd，2H)，3.76(d，2H)，4.20(d，2H)，4.44(dd，2H)，4.65(s，1 H)，4.81(t，1H)，5.82(s，1H)，6.72(t，1H)，6.96(d，1H)，7.29-7.41(m，5H)，8.11(dd，1H)，8.38(d，1H)实施例65 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]-5，5-二甲基二噁烷-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例49相同方法进行，但用400mg(0.81mmol)实施例64中制备的化合物作原料。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶3)，得到350mg(产率93％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ0.79(s，3H)，1.21(s，3H)，1.27(s，3H)，3.51(dd，2H)，3.74(d，2H)，4.2(d，1H)，4.35(d，1H)，4.51(dd，2H)，4.61(s，1H)，4.73(s，1H)，5.44(dd，1H)，6.52-6.75(m，3H)，7.16(s，1H)，7.28-7.41(m，5H)实施例66 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二乙氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍(步骤1)制备(2S，3S，4R)-4-[[(氰基亚氨基)苯氧甲基]氨基]-6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二乙氧基甲基-2H-1-苯并吡喃反应用与实施例48步骤1同样方法进行，但用234mg(0.72mmol)制备例14中制备的化合物作原料。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到237mg(产率70％)所需化合物。
(步骤2)制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二乙氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例48步骤2同样方法进行，但用217mg(0.46mmol)上述步骤1制备的化合物作原料。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到200mg(产率90％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.29(m，9H)，3.74(m，5H)，4.20(d，1H)，4.50(m，3H)，4.83(br s，1H)，5.92(m，1H)，6.52(m，1H)，6.90(d，1H)，7.34(m，5H)，8.11(dd，1H)，8.30(s，1H)实施例67 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二乙氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例49相同方法进行，但用122mg(0.25mmol)实施例66中制备的化合物作原料。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶3)，得到91mg(产率80％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.25(m，9H)，3.78(m，4H)，4.18(d，1H)，4.30(m，4H)，5.53(d，1H)，6.68(m，3H)，7.18(br，1H)，7.36(m，5H)实施例68 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲氧基羰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍(步骤1)制备(2S，3S，4R)-4-[[(氰基亚氨基)苯氧甲基]氨基]-6-甲氧基羰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-1-苯并吡喃反应用与实施例48步骤1同样方法进行，但用399mg(1.28mmol)制备例15中制备的化合物作原料。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到397mg(产率68％)所需化合物。
(步骤2)制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲氧基羰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例48步骤2同样方法进行，但用397mg(0.93mmol)上述步骤1制备的化合物和0.21ml(1.98mmol)苄基胺作原料。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到270mg(产率67％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.21(s，3H)，3.55(d，6H)，3.86(s，3H)，4.13(d，1H)，4.17(s，1H)，4.48(m，2H)，5.77(d，1H)，6.83(m，1H)，6.85(d，1H)，7.33(m，4H)，7.93(dd，1H)，7.99(s，1H)实施例69 制备(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲氧基羰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍(步骤1)制备(2R，3S，4R)-4-[[(氰基亚氨基)苯氧甲基]氨基]-6-甲氧基羰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-1-苯并吡喃反应用与实施例48步骤1同样方法进行，但用121mg(0.39mmol)制备例16中制备的化合物作原料。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到131mg(产率74％)所需化合物。
(步骤2)制备(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲氧基羰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例48步骤2同样方法进行，但用131mg(0.31mmol)上述步骤1制备的化合物和60ul(0.61mmol)苄基胺作原料。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到107mg(产率79％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.26(s，3H)，3.43(d，6H)，3.82(d，1H)，3.77(s，3H)，4.45(s，1H)，4.48(m，2H)，5.64(d，1H)，6.81(m，1H)，6.83(d，1H)，7.29(m，4H)，7.80(dd，1H)，7.84(s，1H)实施例70 制备(3S，4R)-N″-氰基-N-(8-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍(步骤1)制备(3S，4R)-4-[[(氰基亚氨基)苯氧甲基]氨基]-8-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-1-苯并吡喃反应用与实施例48步骤1同样方法进行，但用0.97g(3.24mmol)制备例17中制备的化合物作原料。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到1.16g(产率81％)所需化合物。
(步骤2)制备(3S，4R)-N″-氰基-N-(8-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例48步骤2同样方法进行，但用1.16g(2.6mmol)上述步骤1制备的化合物和0.85ml(7.8mmol)苄基胺作原料。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2)，得到0.94g(产率79％)所需化合物，为(2S，3S，4R)-和(2R，3S，4R)立体化学结构的外消旋混合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.23(s，3H)，1.32(s，3H)，3.37-3.40(s，3H)，3.48(s，3H)，3.84-3.87(d，1H)，4.17-4.21(d，1H)，4.36-4.38(d，1H)，4.41-4.45(d，1H)，4.8(t，1H)，5.04(t，1H)，5.82(d，1H)，6.09(d，1H)，6.82-6.96(m，2H)，7.27(s，5H)，7.57-7.69(q，1H)实施例71 制备(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(8-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例49相同方法进行，但用298mg(0.66mmol)实施例70制备的外消旋混合物作原料。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶4)，得到117mg(产率42％)所需(2S，3S，4R)立体化学结构化合物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.25(s，3H)，3.58(s，3H)，3.8(s，1H)，4.39-4.47(m，4H)，5.62(d，1H)，6.58-6.61(d，1H)，6.74-6.78(d，1H)，7.12(s，1H)，7.27-7.34(m，5H)实施例72 制备(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(8-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍反应用与实施例49相同方法进行，但用298mg(0.66mmol)实施例70制备的外消旋混合物作原料。用硅胶色谱对剩余物进行纯化(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶4)，得到106mg(产率38％)所需化合物(2R，3S，4R)立体化学结构。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.46(s，3H)，3.41(s，3H)，3.46(s，3H)，3.73-3.81(m，2H)，4.44(s，1H)，4.46(s，1H)，4.87(m，1H)，5.2(m，1H)，6.59-6.60(d，1H)，6.63-6.76(t，2H)，7.26-7.36(m，5H)上述实施例中制备的化合物列于表1
表1
表1(续) 实验例对式1化合物进行了下列实验，以研究其药理作用。实验例1大鼠离体血管的血管舒张作用进行了如下实验，以考察式1化合物是否具有扩张血管作用。
敲击雄性Sprague-Dawly大鼠(350-450g，来自the ExperimentalAnimal Team of the Korea Research Institute of Chemical Technology(韩国化学技术研究院实验动物组))枕骨部位，将动物击昏，用断颈法杀死动物，并切开胸部。快速除去脂肪组织后，将胸主动脉切成3mm宽的主动脉环。用改进的Krebs Henseleit缓冲剂(生理盐水溶液，PSS)浸湿的棉棒轻轻磨擦主动脉内壁，以除去内上皮层。当血管组织悬浮于含生理缓冲液的器官浴液时，在2g的静止张力作用下平衡，在37℃放置1小时，为保持稳定通入含95％ O2-5％ CO2的碳合气(carbogen)。
然后将血管组织用10-5M苯肾上腺素收缩，并用PSS洗几次，此过程再重复一次，以保证血管平滑肌可反复收缩/舒张，稳定的反应性。
另外，用3×10-6M甲氧胺诱导血管平滑肌强烈收缩。当血管收缩被甲氧胺诱导至最大程度时，将受试化合物和对照品逐渐加入到器官浴中，浓度为1，3，10和30uM，以诱导血管舒张。对照品是Cromakalim和BMS-180448(式2化合物)，二者均为第一代KATP激动剂，具强烈的血管舒张和保护心脏作用。
加入药物之后，计算出被甲氧胺诱导的最大收缩变化，绘制浓度-扩张反应曲线图。经线性回归分析，获得每种药物的IC50，即血管组织扩大50％时药物浓度，结果见下表2。
表2式1化合物对血管舒张和抗缺血作用(保护心脏作用)实验例1 实验例2 实验例3血管舒张作用抗-局部缺血作用抗-局部缺血作用受试药物(离体，大鼠主动脉) (体内，大鼠) (体内，狗)(IC50，μM) (0.3mg/kg i.v.) (2mg/kg/10min，i.v.)AAR/LVIZ/AAR AAR/LV IZ/AAR(％) (％) (％) (％)赋形剂 - 39.75 60.7837.6152.39Cromakalim 0.067BMS-180448 1.38 38.83 39.1437.7338.02实施例1514.07实施例249.78 37.92 48.4835.3328.03实施例25＞30 36.88 48.55实施例323.57 42.49 44.72实施例3824.4838.26 51.13实施例41＞30 33.59 30.25实施例41＞30Cromakalim的IC50是0.067uM，对经甲氧胺(3uM)收缩的大鼠离体主动脉表现出有力的血管扩张作用，而BMS-180448的IC50是1.38uM，是Cromakalim血管舒张活性的1/20。另外，本发明的化合物IC50的排列，从9.78uM至大于30uM，所以其血管舒张作用非常小，甚至比对照物Cromakalim和BMS-180448还小。
当作用于心脏KATP时，本发明的化合物对心脏起保护作用，另外，苯并吡喃胍衍生物作用于外周血管KATP时，可扩张血管，降低血压。因此，本发明的化合物因其具较低血管舒张活性，具有更有效的保护心脏作用。
如上所示，本发明的化合物有低的扩张血管活性，以致在心脏保护功能方面被改进。实验例2对大鼠缺血性心脏模型的保护心脏活性为确定式1化合物对缺血性心脏是否具有保护作用，确定该化合物对大鼠的抗缺血作用进行如下。
雄性大鼠(350-450g，来自韩国化学技术研究院实验动物组)经腹膜注射戊巴比妥(剂量为75mg/kg)麻醉，切开气管后，对大鼠施以人工呼吸，心率为60/分，心搏量为10ml/kg。在fermoral静脉和动脉插入导管，将fermoral静脉和动脉分别作为给药及测血压入口。
在缺血性心肌损伤模型中，体温对结果有重要影响。为避免体温的改变，在每只大鼠的直肠中插入体温计探头，借助于等温毯控制单元，使体温保持恒定的37℃。
之后，在试验中，连续测定大鼠的动脉血压和心率。为测血压，使用压力传感器，如使用Grass Ins.，MA，U.S.A.制造的Model StathamP23XL。用一种流速计，如制造于Gould Inc.，OH，U.S.A.的Biotachometer来测心率。另外，用Gould Inc制造的Gould 2000图表记录器将发生的所有变化记录下来。
按照Selye H.的方法堵塞左侧冠状动脉，将大鼠左胸切开，形成部分开胸，用左手中指压迫右胸，将心脏推出。立即在左前下行冠状动脉后(以下称LAD)仔细地用5-0号结扎丝线和缝合针缝合，将心脏重新放回胸腔中，同时将丝线两端置于胸腔外。将丝线相对的两端穿过一个PE管(PE100，2.5cm)并放松20分钟，以使其稳定。经由插入股动脉的套管，将赋形剂或药物对大鼠给药，等待30分钟，以使药效充分发挥作用。用BMS-180448作对照药，受试药与对照药的静脉注射用量均为0.3mg/kg。
然后，将穿过双股扎线的PE管推向心脏，用止血钳紧拉丝线端，使PE管垂直，同时压迫冠状动脉。将PE管放置45分钟，以堵塞冠状动脉，接着拿掉止血钳，然后重新灌注90分钟。
按上述方法重新堵塞冠状动脉后，给大鼠经静脉给2ml 1％伊文斯兰，然后给予过量戊巴比妥静脉注射，以处死大鼠，然后取出心脏，去除右心室和两个心房。将左心室从心尖水平切成5-6片，称重。从每片表面获得的图像用Hi-scope输入带有图像分析程序(Image ProPlus)的计算机中。从输入计算机的图像测定在计算机监视器上呈兰色的正常血流组织区域或无色的区域，计算每片无色区占总区域的百分比并乘以每片重，确定每片的危险面积(AAR)。将所得的每片的AAR加在一起所得的总AAR除以左心室总重量，得到的％ AAR，见如下数学式1数学式1 另外，将心脏切片在2，3，5-三苯基四唑盐酸盐(TTC)磷酸盐缓冲液(pH 7.4)中于37℃温育15分钟，在10％福尔马林溶液中固定20-24小时。固定期间，2，3，5-三苯基四唑盐酸盐被心肌脱氢酶还原成formazan染料及其辅助因子NADH，使正常组织区域染为砖红色。相反，组织的梗塞区缺乏脱氢酶及其辅助因子，2，3，5-三苯基四唑盐酸盐不发生还原，所以不变色。
根据组织区域是否被2，3，5-三苯基四唑盐酸盐染色测量每片心室切片正常和梗死区面积。将每片梗死区面积相加，将和除以总AAR重量或总左心室重量，得％ IZ见如下数学式2数学式2 在这些试验模型中，测定出一些受试药物具有更高的抗缺血活性，因为其％ IZ较小。结果见上表2。
如表2所示，在麻醉大鼠缺血心肌损伤模型中，给赋形剂的对照组心肌梗塞率比危险区率(IZ/AAR)是60.78％，表明心肌发生了严重的损伤。BMS-180448组的心肌梗塞率是39.14％，表明有明显抗缺血活性。仅用心肌梗塞率一项比较，本发明的化合物类似或优于BMS-180448。但因本发明的化合物在血管舒张活性方面比BMS-180448显著降低，所以大大优于常规心脏-选择性抗缺血活性药物。尤其是实施例40化合物具有极低的血管舒张活性(IC50＞30uM)，其心肌梗塞率低至30.25％，与BMS-180448相比，在血管舒张方面表现出更好的心脏-选择性活性。而且，本发明的化合物不降低血压。因此本发明的化合物可用作缺血性疾病的治疗，因其对于缺血性心血管疾病具有良好的保护活性。实验例3比格狗缺血性心脏模型中的保护心脏活性为确定式1化合物对大动物缺血性心脏是否具有保护活性，如下进行了测定化合物对比格狗抗缺血作用的实验。对比格狗的实验方法按Grover et al.(G.J.Grover et al.，J.Cardiovasc.Pharmacol.25，40(1995)).
经静注戊巴比妥35mg/kg将狗麻醉后，雄性比格狗(8-12kg)再用戊巴比妥钠经右侧头静脉灌注，剂量是3-4mg/kg，以保持持续麻醉。在每只狗呼吸道插入导管，以保证实验过程中呼吸，然后借助于导管(如CWE Inc.，PA，U.S.A生产的呼吸管Model SAR-830)呼吸，利用室内空气和供氧，使CO2分压保持在30-35mmHg。每小时从插入股动脉的导管中取血0.5ml，用Ciba-Corning，MA，U.S.A.制造的BloodgasAnalyzer 280测定血氧浓度。同时观察直肠温度，通过控制放置实验动物的实验台温，使动物体温保持在38℃。为测定血压和心率，在股动脉插入一根肝素化的导管。用Grass Ins.，MA，U.S.A.制造的ModelStatham P23XL传感器测量血压。用Gould Inc.，OH，U.S.A.制造的Biotachometer流速计测量心率。另外用Gould Inc.制造的Gould 2000图表记录器连续记录实验中发生的变化。
切开第5肋间打开胸腔，从周围组织中分出。然后将结扎丝线挂在LAD周围，以堵塞LAD。将LAD上部结扎丝线从邻近组织中分出，并定量测定血流。用MFE Ins.，MA，U.S.A.制造的1400 Thermal ChartRecorder图表记录器记录。用Grass Model 7E多道生理仪，记录和阅读(Lead II)心电图。为对实验比格狗进行灌注，在左头静脉中插入导管并固定。手术后，待所有参数稳定下来后，将试验化合物和对照物赋形剂从静脉给药。
在LAD堵塞前，将实验动物分为对照组(PEG 400)和实验组(KR-31372，50ug/kg/分钟)。LAD堵塞前10分钟通过静脉灌注试验药物。灌注试验药物和对照物持续40分钟(总剂量2mg/kg，总PEG400体积4ml或较少)。开始灌注10分钟后，LAD被完全堵塞，90分钟后，重新灌注以保持冠状动脉血流5小时。5小时后，将导管插入LAD，以与血压同样压力用Ringer’s溶液灌注。
将一种兰紫色溶液(1mg/kg，10mg/ml)注射进左心房，然后给心脏进行电击并去除。两侧心房都去除后，横切心室，间隔0.5cm。用数码相机拍下横切后产生的心室切片。为测量IZ值，将该组织切片在1％ 2，3，5-三苯基四唑盐酸盐磷酸盐缓冲液中于37℃温育30分钟。然后再用数码相机拍下心室横切片。用图像分析程序(Image-Pro Plusver.3.0.1，Media Cybernetics，Maryland，U.S.A.)测定和分析AAR和IZ值。IZ以AAR的百分比表示(参照数学式2)。较低IZ值意味受试药物对此比格狗模型更有效。结果见上表2。
在表2麻醉比格狗的缺血性心肌损伤模型中，本发明的化合物也显示出在危险面积(AAR)中相当低的心肌梗塞发生率。具体数字是，使用溶剂组心肌梗塞率比危险面积(IZ/AAR)是52.39％，表明心肌发生严重损伤。使用BMS-180448组测定结果是38.02％心肌梗塞率，表明有较好的抗缺血活性。另外，用本发明的化合物时，心肌梗塞率减低至28.03％(实施例24化合物)。当然，使用本发明的化合物未发现有明显的降低血压作用。
如上所述，本发明的化合物对比格狗具有良好的抗缺血活性。其抗缺血活性优于对照组BMS-180448。因此，本发明的化合物可用作预防与治疗缺血性心脏病有关的药物。实验例4对神经细胞的保护活性为考察式1化合物是否具有对铁诱导的神经元的死亡的保护作用，进行实验如下。从17-18日龄大鼠晶胚分离出脑皮层神经细胞，然后在5％ CO2孵箱中37℃培养7-9。将该皮层神经细胞培养物用极限必需培养基(MEM)洗两次，以降低浆液浓度至0.2％，再用10uM和30uM每种受试化合物预处理30分钟。将受试化合物溶于DMSO并在培养基中稀释。此时，DMSO终浓度不得超过0.2％。对照组只用药物的赋形剂。
受试化合物或赋形剂预处理之后，加入FeSO4至终浓度为50uM，将该培养物置CO2孵箱中24小时。培养期间，因铁的氧化毒性神经细胞死亡，乳酸脱氢酶(LDH)被释放入培养基中。通过测定LDH分泌在培养基中的量，可测定神经损伤的程度。计算治疗组与对照组相比LDH的减少率，可评价受试化合物对神经的保护作用。结果见下表3。
表3式1所示化合物对神经元的保护作用化合物 浓度(μM) ％保护实施例24 30471029实施例25 306910实施例38 30781056实施例40 30971045如表3所示，本发明的化合物保护神经免受铁损伤与剂量有关。实施例38化合物甚至在浓度为10uM时保护神经高达56％。另外，实施例40化合物显示出保护率高达97％，表明该化合物对抗铁诱导的神经损伤有强大的保护力。
由于本发明的化合物显示出良好的神经保护作用，可用作预防或治疗因神经损伤或死亡引起的神经紊乱的治疗，如脑中风或痴呆以及炎症性疾病，如关节炎、心梗和急慢性组织损伤。实验例5对脂质过氧化反应抑制活性(1)对铁诱导的脂质过氧化反应的抑制作用为考察式1化合物是否可抑制铁诱导的脂质过氧化反应，进行了如下实验。
用Krebs缓冲液(15mM HEPES，10mM葡萄糖，140mM NaCl，3.6mM KCl，1.5mM CaCl2，1.4mM KH2PO4，0.7mM MgCl2，pH 7.4)对大鼠脑匀浆，以转速12,000rpm离心10分钟分出上清液，用作下步实验。在终浓度为400uM脑匀浆中加入FeCl2，然后在37℃静置30分钟。为方便氧化，每种受试化合物以100uM浓度加入，药物赋形剂作为对照。
铁催化脑匀浆氧化，产生脂质过氧化反应产物丙二醛(MDA)，因此，MDA的量决定脂质过氧化反应。受试化合物对脂质过氧化反应的抑制作用可通过计算受试化合物比较对照组对MDA的还原比率而得出。
经典的MDA定量方法是将样品与2-硫巴比妥酸(TBA)反应，然后测定在530nm处的吸光度。但该方法不适于大规模处理样品，因有沸腾步骤。因此，在本实验中，用N-甲基-2-苯基吲哚代替TBA。这种情况下，一分子MDA与两分子N-甲基-2-苯基吲哚反应，形成在586nm有大吸收的发色团，且无需沸腾。用BioxytechRLPO-586Kit试剂盒定量MDA，结果见下表4a。
表4a式1所示化合物对由铁引起的脂质过氧化的抑制效果化合物 浓度(μM) ％抑制实施例7100 70实施例24 100 12实施例25 100 2实施例32 100 86实施例38 100 4实施例40 100 79如表4a所示，本发明的化合物抑制铁诱导的脂质过氧化反，应特别是实施例7，32和40化合物显示出很强的抑制活性，对抗铁诱导的脂质过氧化反应，抑制作用分别是70％，86％和79％。
(2)对铜诱导的LDL氧化抑制作用为考察式1化合物对铜诱导的LDL(低密度脂蛋白)氧化抑制作用，进行了如下实验。
将人LDL(sigma)溶于蒸馏水，浓度为1mg/ml。在4℃用磷酸盐缓冲液在氧化前透析LDL 18小时，更换三次磷酸盐冲液，以除去EDTA(乙二胺四乙酸)。在CuSO4(10uM)存在下，无EDTA的LDL(100ug LDL蛋白/ml)在无EDTA磷酸盐缓冲液中在37℃温育18小时，预处理时将受试化合物或生育酚(tochopherol)终浓度设为10-9，10-7和10-5M。不加CuSO4的受试化合物作为空白对照，赋形剂作为溶剂对照组。通过加入EDTA(200uM)，在4℃终止氧化。
铜Cu+2)催化LDL氧化，产生丙二醛(MDA)，因此与上述实施例5(1)相同，MDA的量决定脂质过氧化反应。用样品与2-硫巴比妥酸(TBA)的反应定量MDA，并测定在530nm处的吸收。1，1，3，3-四甲氧基丙烷(Sigma)用作标准物，计算每mg蛋白与MDA等价的nmol量。受试化合物对脂质过氧化反应的抑制作用可通过计算受试化合物比较对照组对MDA的还原比率而得出。结果见下表4b。
表4b式1所示化合物对由铜引起的脂质过氧化的抑制效果化合物 浓度(M) ％抑制实施例40 10-97.610-724.310-527.6生育酚10-918.510-721.310-529.7
如表4b所示，实施例化合物40在浓度为10-7和10-5M时明显抑制铜诱导的LDL氧化，其作用类似于生育酚。
(3)对A7r5介导的LDL氧化的抑制作用为考察式1化合物是否具有抑制A7r5介导的LDL氧化的抑制作用，进行了如下实验。
用补充了10％热灭活FBS(胎牛血清)和1％抗生素的DMEM培养基(Dulbecco′s改进的Eagle′s培养基)，将A7r5(ATCC CRL-1444，平滑肌，胸大动脉，BDIX大鼠)细胞在24孔板上培养。用磷酸盐缓冲液和补充了10％ FBS和1％抗生素的DMEM在冲洗板上冲洗生长至汇合的A7r5，每孔冲洗液的量是0.5ml。在有或无受试化合物(10-6-10-4M)或生育酚(10-6-10-4M)存在下，将细胞(2×105个/ml)在37℃预培养30分钟。然后将A7r5单独或A7r5加H2O2(10-7M)暴露于LDL(100ug/ml)24小时。
如同上述实施例5(2)，受试化合物对脂质过氧化反应的抑制作用可通过计算受试化合物比较对照组对MDA的还原比率而得出。结果见下表4c。
表4c式1所示化合物对由A7r5介导的LDL氧化的抑制效果化合物 浓度(M) ％抑制LDL LDL+H2O2(10-7M)实施例4010-640.949.710-551.462.510-457.564.3生育酚 10-641.143.210-557.053.010-473.763.9
如表4c所示，在所有浓度的试验中，实施例40化合物和生育酚明显抑制A7r5介导的LDL氧化。尤其是当加入H2O2时，实施例40化合物表现出更明显的抑制LDL氧化作用。
由于从上述试验例5(1)，(2)(3)可以看出抑制脂质过氧化物反应活性，本发明的化合物可用作防治因脂质过氧化反应及其脂质在组织中蓄积引起的神经变性的疾病的药物，如脑中风或痴呆以及炎症性疾病，如关节炎、心梗和急慢性组织损伤。实验例6对NO产物的抑制作用为考察式1化合物抑制一氧化氮(NO)形成的作用，进行了如下实验。
37℃在5％ CO2孵箱中用加有10％胎牛血清(FBS)的RPMI1640培养基培养RAW 264.7细胞(来自American Type Culture Collection)，鼠巨噬细胞系。收获RAW264.7，用加有5％胎牛血清(FBS)的RPMI培养基调整细胞密度至5×105/ml，并放置于96孔板上，每孔5×104细胞。然后在CO2孵箱中培养，去除培养基后，细胞用含33uM和100uM受试化合物的新鲜培养基预处理1小时。将受试化合物溶于DMSO并在培养基中分别稀释。为尽量减少孔中DMSO影响RAW264.7细胞对一氧化氮形成，培养基中DMSO的允许浓度为0.1％或更少。
完成预处理后，加入脂多糖(LPS，大肠杆菌血清型055B5)激活细胞，然后在CO2孵箱中放置24小时。RAW264.7细胞被LPS激活，结果形成NO。NO以亚硝酸形式NO2-释放入培养基，用格里斯试剂定量测定。对照组除用赋形剂代替化合物外，进行同样试验。用亚硝酸标准品显示受试药物本身不影响NO的定量测定。
根据NO量的减少，测定了与对照组相比受试化合物对产生NO的抑制作用。结果见下表5。
表5式1所示化合物对NO形式的抑制效果化合物 浓度(μM)％抑制实施例7 100 88实施例24 100 483316实施例25 100 543339实施例32 100 83实施例38 100 853356实施例40 100 26如表5所示，本发明的化合物在抑制因内毒素，如LPS，诱导产生NO方面显示出剂量依赖型作用。特别是，实施例38化合物甚至在浓度低至33uM时，抑制产生NO活性仍高达56％。另外，实施例7和32的化合物在浓度为100uM时，抑制率分别高达88％和83％，表明本发明的化合物具有很强的抑制LPS诱导产生NO的活性。
由于具有很好的抑制产生NO的活性，本发明的化合物可用作预防或治疗因释放大量NO使神经损伤或死亡引起的神经紊乱的治疗，如脑中风或痴呆以及用于炎症性疾病，如关节炎、心梗和急慢性组织损伤的治疗。实验例7对脑缺血重新灌注引起的脑损伤的预防作用为考察式1化合物对脑缺血重新灌注引起的脑损伤的保护作用，进行了如下实验。
雄性Sprague-Dawley大鼠(350±50g，来自SamYook ExperimentalAnimals Co.，Korea)注射戊巴比妥钠麻醉动物，剂量为40mg/kg，之后在股静脉和动脉插入PE-10导管，同时暴露左颈动脉。手术前5分钟，在动物腹腔注射20ug/kg硫酸肝磷脂。为连续测量血压，在股动脉插入一个测量血压装置。从股静脉取血约10ml，以降低血压至30mmHg。如再抽取7ml血，血压也不能低于100mmHg，这样的大鼠被认为有较高交感神经过敏症。此种情况下，这些大鼠从实验动物中剔除，因为血压不会降至30mmHg，或者即使能成功降低血压，这种大鼠在手术后也会出现高死亡率。
血压在30mmHg保持20分钟后，暴露的左颈动脉用动脉瘤夹堵塞20分钟，造成脑局部缺血。然后除去颈动脉夹，将抽出的血重新灌注。为使系统酸中毒程度降至最小，对大鼠重新灌注5ml含0.84％碳酸氢钠的盐水(碳酸氢钠盐水)。在手术期间和恢复期间，用电热毯和白炽灯泡保持体温在37±0.5℃。在手术中恢复期间，体温保持恒定2小时或更长时间。待完全恢复后，将大鼠转移到观察室，该处处于温度(27℃)、湿度(60％)和光照时间(12-12小时)均稳定的条件。
手术后24小时，在操作台上处死大鼠迅速拿出脑(3分钟)。将取出的脑置于冰上，用脑切片机切成6个2mm厚切片。将切片在37℃浸入2％2，3，5-三苯基四唑盐酸盐溶液中30分钟。拍下浸过的脑切片照片后，打印，测量梗塞面积占总脑面积的百分比。并用图像分析仪(Image-Pro Plus ver.3.0.1)进行分析。
手术前30分钟及颈动脉堵塞后2、4及16小时，将受试化合物经腹膜注射入大鼠，剂量为30mg/kg。对照组注射赋形剂。阳性对照物MK801(RBI，10，11-二氢-5H-二苯并[a，d]环庚-5，10-亚胺氢化马来酸(SR，10S)-(+)-5-甲酯)给药剂量是3mg/kg，以同样的间隔时间给药。
受试化合物对因脑缺血再灌注引起的脑损伤的保护作用，以与对照组相比脑梗塞减少的百分比表示。结果见下表6。
表6式1所示化合物对由脑局部缺血-再灌注引起的脑损伤的保护效果被测药物剂量 梗死面积No.
(mg/kg)平均±SD(％) 减少(％)赋形剂 039.7±1.6 10MK801 329.8±1.5 24.8*7实施例4030 23.0±3.3 42.0*11*P＜0.01与只施给赋形剂的对照组相比大鼠给MK801，剂量为3mg/kg的阳性对照组，其梗塞面积是29.8％，比空白对照组减少24.8％。用实施例40化合物组，其梗塞面积是23.0％，比空白对照组减少42.0％。因此，实施例42化合物对因脑缺血再灌注引起的脑损伤的保护作用是常规药物MK801效果的两倍。
用MK801的治疗组，大鼠表现出低活动性的副作用，而用实施例40化合物组，大鼠未出现任何副作用，包括行为改变如活动性方面的副作用。
由于具有对因脑缺血再灌注引起的脑损伤的保护活性，本发明的化合物可用作预防或治疗神经紊乱的药物，如因脑血管栓塞诱发的脑损伤所引起的中风或脑缺血。实验例8对血管生成的抑制作用为考察式1化合物对新血管形成的抑制作用，进行了如下实验。
(1)对99mTc-DTPA的清除作用5mm×直径12mm大小的聚酯海绵作为血管生长的基质。每个海绵内用线固定住一根长5mm的聚乙烯管。用剂量为300mg/kg水合氯醛腹腔注射将Sprague-Dawley大鼠麻醉。剃除大鼠颈部附近毛，在裸露的部位切开一长10mm的口，以保证皮下有足够大的空间放置海绵。将海绵置于皮下切口中后，固定好以防管子摇动。为避免感染，除给药时外，管口封闭。
为诱导血管生成，使用血管紧张素II。将血管紧张素II溶于加有磷酸盐缓冲液的盐水(PBS)。注射50ul浓度为100nmol的溶液。本发明的化合物溶于PBS，通过管子注射，剂量为0.1，0.3和1.0mg/kg。用赋形剂PBS或单用血管紧张素II以同样剂量作为对照。受试化合物对血管生成的抑制作用在注射后测定7日。
通过测定血流中99mTc-DTPA(二乙撑三胺戊乙酸锝(technetium-diethylenetriamine pentaacetic acid))清除量，检查在移入的海绵中血管生成的程度。注射受试化合物后7日，再次对大鼠腹腔注射水合氯醛使其麻醉，剂量为30mg/kg，然后再通过管道小心注射50ul99mTc-DTPA(0.5mCi)在无菌PBS中的溶液。定量测定99mTc-DTPA 60分钟。用伽玛闪烁检测器，用伽玛相机，如带有低能高分辨率装置的ADACVERTEX/SOLUS伽码相机操作，用60秒时间拍下每个海绵60个镜头画面。将这样得到的连续图像输入计算机(Pegasys Sun计算机)供分析。
根据下列数学式3计算99mTc-DTPA清除率，结果见下表7a。[数学式3]
表7a式1所示化合物对血管生成的抑制效果被测药物剂量99mTC的清除率(mg/kg)(p.o) (％)对照(PBS)- - 30.3对照AII(100nmol) - - 44.71试验组 0.1 26.90AII(100nmol)+ 实施例24 0.3 18.22被测药物1.0 3.38p.o.口服从表7a中明显看出，通过比较给PBS对照组(30.3％)与给血管紧张素II对照组(44.71％)对99mTc-DTPA的清除率，血管紧张素II诱导新血管形成。当给予剂量为0.1mg/kg实施例24化合物，清除99mTc-DTPA 26.90％，清楚地表明该化合物抑制血管形成。另外，当给予剂量为0.3和1.0mg/kg实施例24化合物，清除99mTc-DTPA分别是18.22％和3.38％，表明本发明化合物抑制新血管形成是剂量依赖型的。特别是，剂量为1.0mg/kg的实施例24化合物表现出几乎完全的抑制血管紧张素II诱导血管形成作用，其99mTc-DTPA清除低至3.38％。
(2)对HUVEC管形成的抑制作用为考察式1化合物在细胞水平是否对新血管有抑制作用，进行了如下实验。
培养HUVEC(人类脐静脉内皮细胞，ATCC CRL-1730)，放置在Matrigel培养基表面几小时，以在血管内皮细胞诱导管生成。比较受试化合物与赋形剂对照组对管形成的作用，以直接证实其体外的抗血管生成作用。结果见表7b。
表7b对HUVEC管形成的抑制效果对管形成的抑制效果化合物浓度(μM) 10μM 100μM实施例2 +++实施例10 +++实施例16 +/- +/-实施例24 nd +实施例40 +++实施例52 +/- ++-无效 +/-弱效+中度有效 ++强效nd未检测如表7b所示，浓度为10uM时，HUVEC管形成受到抑制，浓度为100uM时，实施例2，10，40和52表现出强烈抑制作用，并以剂量依赖方式。
由于具有良好的抑制血管形成活性，本发明的化合物可有效地用于各种因血管形成诱导的疾病的治疗，如风湿性关节炎、牛皮癣、艾滋病并发症、癌症、糖尿病、视网膜病等。实验例9对过氧化氢诱导的细胞内ROS的抑制作用为考察式1化合物对过氧化氢诱导的细胞内ROS的抑制作用，进行了如下实验。
用H2DCFDA(2′，7′-二氯二氢荧光素双乙酸盐，Molecular Probes，Eugene，OR，USA生产)确定细胞内的ROS(反应性氧)的测定。H2DCFDA是一种非极性化合物，易于扩散入细胞，并在细胞内被酯酶水解为极性的衍生物H2DCF(2′，7′-二氯二氢荧光素)。该物质不能穿过细胞膜，因此被留在细胞内。H2DCF是低荧光性的，但可被细胞内的ROS转化为高荧光性的DCF(2′，7′-二氯荧光素)。因此，细胞内的ROS形成可从转化的DCF的量来确定。使用HUVEC(人类脐带血管内皮细胞)或A7r5(大鼠胸主动脉平滑肌细胞)。在加有10％热灭活FBS、0.1mg/ml肝磷脂钠，0.03-0.05mg/ml ECGS(内皮细胞生长补充因子)及1％抗生素的Kaighn′s F12K培养基中培养HUVEC。A7r5在加有10％热灭活FBS及1％抗生素的DMEM中培养。为测定细胞内的ROS，HUVEC或A7r5在受试化合物(10-7-10-5M)存在下被预培养30分钟。然后，细胞用H2O2(10-6和10-5M)激活20分钟)，然后在暗处于37℃在含5uM H2DCFDA的50mM磷酸盐缓冲液(pH 7.4)中培养2小时。用荧光板阅读器(FL600，Biotek Instruments生产)测定DCF荧光素(485nm激发，530nm发射)的量。结果见表8。
表8对由H2O2诱导的细胞内ROS的抑制效果细胞化合物 浓度(μm) 抑制(％)H2O2H2O2(10-6M) (10-5M)HUVEC 生育酚10-713.88.810-643.230.710-560.851.0实施例10-717.612.040 10-646.125.810-563.154.9A7r5丙丁酚10-772.010-6184.110-5185.3实施例10-772.024 10-6110.710-5185.3如表8所示，在HUVEC细胞中，实施例40化合物抑制H2O2诱导的ROS，其作用类似或优于生育酚。实施例24化合物浓度在10-6和10-5M时，完全抑制ROS。
由于其良好的抗氧化剂作用，可以抑制细胞内的ROS形成，本发明的化合物可用作防治神经变性类疾病，如脑中风和脑缺血；炎症性疾病，如关节炎、动脉硬化、心梗和因ROS引起的急慢性组织损伤。实验例10或AC试验为考察式1化合物是否可去除氧自由基，进行了如下实验。
ORAC(氧自由基吸收能力)测验是一种体外方法，能够评定一种药物在水环境中对氧自由基的吸收能力。该方法利用β-PE(β-藻红蛋白)作为指示剂蛋白，并用AAPH(2，2′-偶氮双(2-脒基丙烷)二盐酸盐)作为过氧化物指示剂。反应混合物由受试化合物(10-6M和10-4M)，β-PE(1.76×10-8M)，和AAPH(3×10-3M)在75mM磷酸盐缓冲液(pH 7.0)中的溶液组成。在24孔板上使用终体积为2ml。先将受试化合物溶于丙酮，然后加至反应混合物中。一待加入AAPH，反应即在37℃开始进行，每5分钟用荧光素阅读器(FL600，Biotek Instrument)测定荧光素一次。根据受试化合物存在下β-PE的荧光曲线下的面积计算ORAC单位，与1uM Trolox产生的面积相比较。1 ORAC单位代表1uM Trolox产生的净保护值。结果见表9。
表9ORAC测验化合物 浓度(μM)ORAC单位生育酚10-61.010-41.568丙丁酚10-61.32710-41.566实施例40 10-62.04710-43.250
如表9所示，实施例40化合物比生育酚和丙丁酚在浓度为10-6和10-4M时，ORAC单位大约高2倍，表明具有良好的自由基吸收能力。
由于具有良好抗氧化剂除去氧自由基的作用，本发明的化合物可用作防治神经变性类疾病，如脑中风和脑缺血；炎症性疾病，如关节炎、动脉硬化、心梗和自由基引起的急慢性组织损伤。实验例11对缺血性视网膜细胞的保护作用为考察式1化合物是否可保护缺血性视网膜细胞，进行了如下实验。
受试化合物溶于DMSO以制备贮备液(100mM)，用生理盐水稀释到浓度为100，50和30uM。受试化合物在局部缺血前经玻璃体注射给药。
成年大鼠经腹膜内注射水合氯醛(400mg/Kg)麻醉，然后在右眼中滴入1％托品酰胺散瞳。眼内压(IOP)升到160-180mmHg，高于正常血压(140mmHg)，在前房插入管子与流体压力计连接。经检眼镜检查血流证实血流被中断，提高的IOP保持30分钟。局部缺血30分钟后摘除双眼，分离视网膜，观察细胞的损伤。计算在神经节细胞层(250×25um)和核内层((150×25um))中的细胞数，然后计算活细胞与非手术左眼中正常细胞对照的百分比。结果见表10。
表10对缺血性视网膜细胞的保护作用活细胞(％)神经节细胞层 核内层正常对照 100100缺血组34.5 51.7实施例40 30μM 40.7 54.850μM 60.2 69.8100μM 77.9 82.6如表10所示，实施例40化合物在视网膜局部缺血后保护神经节细胞层与核内层，并显示剂量依赖方式。
由于在视网膜神经节细胞层与核内层具有良好的抑制缺血性神经细胞死亡的保护作用，本发明的化合物可用作治疗因局部缺血引起的青光眼和视神经疾病。实验例12对糖尿病大鼠的MNCV(运动神经传导速率)的作用为考察式1化合物是否可改善糖尿病大鼠损伤的MNCV，进行了如下实验。
在大鼠腹腔内注射链脲霉素(65mg/Kg)，诱发糖尿病，然后将受试化合物溶于2ml溶媒(生理盐水∶乙醇∶吐温80＝8∶1∶1)中的溶液，每日一次饲喂。用三氟溴氯乙烷将大鼠麻醉，然后暴露出坐骨神经以测定MNCV。在神经的两点进行刺激。第一个刺激电极插在近侧端，第二个刺激电极插在髋部的凹口。共轴的针状电极插入指间的肌肉，然后通过两极的刺激诱发肌肉动作电位。传导速度的计算是两个刺激点间的距离除以反应时间差。用硫辛酸(100mg/Kg)与式1化合物对比，以比较对糖尿病大鼠损伤的MNCV的恢复率。根据下列式4计算MNCV恢复率(％)。结果见表11。 [数学式4]表11对糖尿病大鼠中MNCV的作用NMCV(秒) 恢复(％)正常对照 51.937 100糖尿病大鼠40.647 -硫辛酸56.070 136.6(100mg/Kg)实施例40 47.756 63.0(30mg/Kg)如表11所示，糖尿病大鼠的MNCV比正常对照组明显降低。硫辛酸(100mg/Kg)可完全恢复糖尿病大鼠损伤的MNCV。使用实施例40(30mg/Kg)糖尿病大鼠明显提高了MNCV。实验例13糖尿病大鼠伤害疼痛试验(热板试验)为考察式1化合物是否可改善糖尿病大鼠受损的感受伤害的反应，进行了如下实验。
用热板考察了受试化合物对大鼠伤害的反应。
对大鼠诱发糖尿病及处理受试化合物方法相同。将大鼠置于50℃热板上，然后测定受伤害的作用时间，如舔爪时间。根据下列式5计算糖尿病大鼠对受伤害反应的恢复率(％)。结果见表12。 表12对糖尿病大鼠的受伤害反应的作用感受伤害反应(秒)恢复(％)正常对照 4.698 100糖尿病大鼠对照 3.986 -硫辛酸 4.371 60.2实施例40 4.791 106.5如表12所示，在热板试验中硫辛酸明显改善糖尿病大鼠受损的感受伤害反应，实施例40化合物完全恢复了糖尿病大鼠受损的感受伤害反应。
由于从上述实验例12和13中可看出，本发明的化合物具有明显提高糖尿病大鼠MNCW和改善受损的感受伤害的反应活性，以及具有抗氧化剂活性和神经细胞保护作用。本发明的化合物可用作防治糖尿病性神经病变及糖尿病外周神经失调。实验例14对脑缺氧损伤保护作用为考察式1化合物保护新生大鼠脑缺氧损伤，用MRS(磁共振谱)进行了如下试验Focal，新生大鼠脑缺氧损伤模型，最常用来研究新生儿窒息，因其脑成熟程度近似于人类婴儿大脑，且容易得到足够所需动物数量，以确定作用。据报道，由于破坏了细胞膜，包括血脑屏障[A.Bizzi et.al.，Magnetic Resonance Imagin 14 581-592(1996)]，造成的缺血性神经细胞伤害，在MRS(磁共振谱)中的脂峰增高，而且脂质和凋亡浓度与凋亡密切相关[Van der A.Toorn et al.，Magnetic Resonamce inMedicine，36，914-922(1996)].N-乙酰基天冬氨酸(NAA)和肌氨酸(Cr)是神经细胞的标志物。证实脂质/NAA(N-乙酰基天冬酸)值和脂质/Cr(肌氨酸)与缺氧脑损伤形态上的改变和凋亡程度相关。
新生大鼠(7日内，10-15g)置于低氧仓内2小时，以诱发缺氧，在造成缺氧前1小时将受试化合物经腹腔内注射。获得脑损伤一天后的质子MRS，确定脂质/NAA和脂质/Cr值。
表13对缺氧脑损伤的保护作用脂质/NAA脂质/Cr缺氧对照 4.634.11实施例40 2.512.33(50mg/Kg)如表13所示，实施例40化合物明显降低脂质/NAA和脂质/Cr的值，提示对脑损伤具有保护作用。由于其对新生大鼠脑缺氧损伤具有良好的保护作用，本发明的化合物可用作防治新生儿窒息。实验例15抑制血管平滑肌细胞增殖的作用为考察式1化合物是否可抑制血管平滑肌细胞增殖，进行了如下实验。
通过测定[3H]-胸腺嘧啶核苷结合进DNA，评价抑制细胞增殖。在含10％ FBS的DMEM的24孔板上生长大鼠主动脉平滑肌细胞3日，至接近汇合。然后冲洗去含10％ FBS的DMEM。细胞再在无血清的DMEM中静置培养48小时。加入受试化合物之后15分钟加入血管紧张素II(10-7M)，该物质可刺激细胞增殖，然后温育72小时。在温育的最后4小时期间加入[3H]-胸腺嘧啶核苷(1uCi/ml)。除去放射性培养基并用DMEM(3×1ml)冲洗细胞三次，以除去未结合的同位素，用15％ TCA(三氯乙酸)处理至少2小时，接着加入0.2N NaOH(0.25ml)保持30分钟。用玻璃微纤过滤器真空过滤样品(GF/B.Whatmann)。用2ml 5％ TCA冲洗滤器3次后，掺入了放射性活性的DNA用液体闪烁计数计(Liquid Scintillation Counter)(Packard，TRI-CARB，2100TR)计数，然后计算[3H]-胸腺嘧啶核苷的百分掺入率。结果见表14。
表14对[3H]-胸苷掺入DNA百分比的影响化合物 掺入血管紧张素II 100实施例737.8实施例553.6实施例259.0实施例14 60.0实施例22 64.0如表14表示，实施例2、5和7化合物明显抑制DNA合成，表现出低于60％的[3H]-胸腺嘧啶核苷的百分掺入率。尤其是实施例化合物7表现出37.8％的低掺入率。
由于对血管平滑肌细胞增殖良好的抑制作用，本发明的化合物可用作防治冠状动脉堵塞介入术后发生再狭窄。实验例16大鼠急性口服毒性试验确定式化合物1毒性的试验进行如下本试验用六周龄SPF SD大鼠，每组2只大鼠。将实施例1，2，3，5，7，8，9，10，13，14，15，19，22，23，24，25，26，28，29，30，31，32，33，34，35，36，37，38，39，40，41，44，46，47，48，49，51，52，57，58，60，62，64，67，68，69，71和72化合物分别悬浮于0.5％甲基纤维素，用球形端针对大鼠口服给药，单次剂量是1g/kg，总剂量是10ml/kg。给药后观察动物的临床毒性或死亡率及测量体重的变化。观察期末将所有存活动物经乙醚麻醉后剖腹，并从腹主动脉取血，做血液学试验和生化分析。处死动物后做尸检，进行器官和组织的宏观检查。取出重要器官和组织样品，用10％中性缓冲的福尔马林溶液固定，然后经标准组织病理学方法处理，并在显微镜下检查。在临床症状、体重和死亡率方面无明显改变。在血液学、血清化学参数与宏观观察方面也未观察到与药物有关的改变。结果表明至剂量为1g/kg，所有受试化合物未对大鼠显示毒性，大鼠口服药物的半数致死量(LD50)大于1g/kg。
本发明已用说明的方式进行了阐述，但应理解为，所用的术语只是为说明本发明的性质，而非对其限制。按上述方法可对本发明进行许多修改和变更。因此应理解为，本发明的范围仅在所附权利要求之内，并不限于以上特定的描述。
权利要求
1.下列式1所示的苯并吡喃胍衍生物，其立体化学异构体和其药物可接受的盐式1 其中，R1代表H，卤素，CF3，NO2，CN，ORa，O(C＝O)Ra，COORa，NH2，NHS(O)mRa，NH(C＝O)Ra或S(O)mRa；Ra代表C1-C4直链或支链烷基或芳基；m是整数0-2，R2代表C1-C4直链或支链烷基，R3代表CH2ORa， 或 Ra如上定义；Rb和Rc互相独立，分别代表C1-C4直链或支链烷基；Z代表C1-C5直链或支链烷基，R4代表OH，H，卤素，ONO2或O(C＝O)Ra；Ra如上定义；R5和R6互相独立，代表H，卤素，直链或支链C1-C3烷基，ORa，CX3，NO2，CO2Ra，-(C＝O)Ra或SO3Ra；Ra如上定义；X代表卤素，及n是整数0-2。
2.根据权利要求1的苯并吡喃胍衍生物，其立体化学异构体及其药物可接受的盐，其中，R1代表NO2，CN，NH2或S(O)mRa；Ra代表直链或支链C1-C2烷基，或芳基；m是整数0-2，R2代表CH3，R3代表 或 Rb和Rc互相独立，分别代表直链或支链C1-C3烷基；Z代表直链或支链C1-C5烷基，R4代表OH，H或-O(C＝O)Ra；Ra代表直链或支链C1-C3烷基；R5和R6互相独立，代表H，卤素，直链或支链C1-C3烷基，ORa，CX3或NO2；Ra代表直链或支链C1-C3烷基；X代表卤素，及n是整数0-2。
3.根据权利要求1的苯并吡喃胍衍生物，其立体化学异构体及其药物可接受的盐，其中，式1化合物选自1)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；2)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；3)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-氯苯基)胍；4)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-氯苯基)胍；5)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-硝基苯基)胍；6)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苯基)胍；7)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苯基)胍；8)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯基)胍；9)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯基)胍；10)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；11)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；12)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-氯苯基)胍；13)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-氯苯基)胍；14)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苯基)胍；15)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苯基)胍；16)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯基)胍；17)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苯基)胍；18)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲基苯基)胍；19)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲基苯基)胍；20)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苄基)胍；21)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苄基)胍；22)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；23)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；24)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；25)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；26)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；27)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；28)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-羟基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；29)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-羟基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；30)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；31)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；32)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-氯苯基)胍；33)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-氯苯基)胍；34)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-三氟甲基苯基)胍；35)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-三氟甲基苯基)胍；36)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-氯苄基)胍；37)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(2-氯苄基)胍；38)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-乙酰氧基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；39)(2S)-N″-氰基-N-(6-硝基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；40)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；41)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-乙酰氧基氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；42)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲磺酰氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；43)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；44)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-氰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-氯苯基)胍；45)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；46)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-氰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；47)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-溴-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；48)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3，4-二甲氧基苄基)胍；49)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3，4-二甲氧基苄基)胍；50)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苄基)胍；51)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(4-甲氧基苄基)胍；52)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-硝基苄基)胍；53)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苄基)胍；54)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-(3-三氟甲基苄基)胍；55)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲磺酰氧基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；56)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲磺酰氧基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；57)(2S，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；58)(2R，3R，4S)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；59)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；60)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]二氧戊环-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；61)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]二氧戊环-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；62)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]二噁烷-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；63)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]二噁烷-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；64)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]-5，5-二甲基二噁烷-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；65)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-([1，3]-5，5-二甲基二噁烷-2-基)-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；66)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二乙氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；67)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二乙氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；68)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲氧基羰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；69)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(6-甲氧基羰基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；70)(3S，4R)-N″-氰基-N-(8-硝基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；71)(2S，3S，4R)-N″-氰基-N-(8-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍；及72)(2R，3S，4R)-N″-氰基-N-(8-氨基-3，4-二氢-3-羟基-2-甲基-2-二甲氧基甲基-2H-苯并吡喃-4-基)-N′-苄基胍。
4.制备权利要求1所述苯并吡喃胍衍生物的方法，包括将氨基醇化合物(III)与硫脲化合物(IV)在缩合剂存在下进行反应，得化合物(I′)方案1 其中，R1，R2，R3，R4，R5，R6及n定义如上。
5.权利要求4所述的方法，其中，缩合剂选自水溶性的碳二亚胺型缩合剂，包括1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐及N，N′-二环己基碳化二亚胺。
6.权利要求4所述的方法，其中反应溶剂选自二氯甲烷、氯仿、二甲基甲酰胺和二甲亚砜。
7.制备权利要求1所述的苯并吡喃胍衍生物的方法，包括以下步骤1)将氨基醇化合物(III)与氰基碳亚胺酸二苯酯(X)在碱存在下制备化合物(V)(步骤1)；及2)将化合物(V)与胺化合物(VI)反应，制备化合物(I′)(步骤2)，方案2 其中，R1，R2，R3，R4，R5，R6和n定义如上。
8.权利要求7所述的方法，其中，步骤1中所用的碱选自叔胺，包括三乙胺、N，N-二异丙基乙胺、吡啶、1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯和4-(二甲基氨基)吡啶。
9.权利要求7所述的方法，其中，步骤1或步骤2所用反应溶剂选自醇，包括乙醇和异丙醇；二甲基甲酰胺；二甲亚砜及氯仿。
10.用于保护心脏的药物组合物，其可作为防治心肌梗塞和充血性心力衰竭及心绞痛的药物，所述药物组合物含权利要求1所述的苯并吡喃胍衍生物或其药物可接受的盐作为活性成分。
11.抑制脂质过氧化反应的药物组合物，含权利要求1所述的苯并吡喃胍衍生物或其药物可接受的盐作为活性成分。
12.用于抑制NO产生的药物组合物，含权利要求1所述的苯并吡喃胍衍生物或其药物可接受的盐作为活性成分。
13.保护因脑缺血再灌注引起的脑损伤的药物组合物，含权利要求1所述的苯并吡喃胍衍生物或其药物可接受的盐作为活性成分。
14.通过抑制血管生成用于治疗癌症和糖尿病性视网膜病的药物组合物，含权利要求1所述的苯并吡喃胍衍生物或其药物可接受的盐作为活性成分。
15.通过抑制脂质过氧化反应和反应性氧用于防治神经变性疾病的药物组合物，所述神经变性疾病包括阿尔兹海默氏症和老年性痴呆及动脉硬化症，所述药物组合物含权利要求1所述的苯并吡喃胍衍生物或其药物可接受的盐作为活性成分。
16.通过保护神经细胞用于防治新生儿窒息、青光眼、糖尿病性神经病和脑外伤的药物组合物，含权利要求1所述的苯并吡喃胍衍生物或其药物可接受的盐作为活性成分。
17.通过抑制细胞增殖用于防治心瓣手术后再狭窄的药物组合物，含权利要求1所述的苯并吡喃胍衍生物或其药物可接受的盐作为活性成分。
18.用于保护保存器官以及用于保护主要用在心血管外科的器官的药物组合物，所述保存器官包括心、肾、肝和组织，所述药物组合物含权利要求1所述的苯并吡喃胍衍生物或其药物可接受的盐作为活性成分。
全文摘要
本发明涉及新型式1所示苯并吡喃胍衍生物、其制备方法和苯并吡喃胍衍生物的药物用途。本发明的苯并吡喃胍衍生物可用于保护心脏、神经细胞或脑损伤及保存器官。苯并吡喃胍衍生物还可作为抑制NO产生的药物,并用于抑制脂质过氧化反应、血管生成或心瓣手术后再狭窄。式1其中,R
文档编号A61K31/155GK1382134SQ00814655
公开日2002年11月27日 申请日期2000年10月20日 优先权日1999年10月21日
发明者柳圣殷, 李圭亮, 李仙卿, 金洛贞, 徐知希, 朴泳淑, 黄仙庆, 辛和燮, 李柄皓, 徐浩源, 林弘, 金善玉, 赵仁善, 南宫美爱, 张铜洙 申请人:东部韩农化学株式会社