专利名称：过氧化物酶体增殖剂应答性受体δ的活化剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及过氧化物酶体增殖剂应答性受体δ的活化剂。
背景技术：
过氧化物酶体(peroxisome)是动植物的细胞中可见的小器官，其基质中含有以过氧化氢酶为首的各种酶。过氧化物酶体增殖剂(peroxisome proliferator)是诱发该过氧化物酶体增殖的物质，已知有抗血脂药(fibrate类)、除草剂、邻苯二甲酸盐增塑剂等多种化合物组。
Isseman等鉴定了通过该过氧化物酶体增殖剂活化的核内受体，并命名为过氧化物酶体增殖剂应答性受体(peroxisome proliferatoractivated receptorPPAR)。(Nature，347，p645-650，1990)迄今为止确认PPAR存在PPARα、PPARγ和PPARδ3种亚型。(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，91，p7335-7359，1994)已经确认上述fibrate类药物对其中的PPARα具有配体效果，在临床上有较强的血清TG(甘油三酯)降低作用。
另外，属于糖尿病治疗药的噻唑烷二酮类化合物(Troglitazone，Rosiglitazone，Pioglitazone)作为PPARγ的配体是已知的。
作为具有PPARδ活化作用的药物，已知下述化合物下式表示的GW-2433(Glaxo Wellcome)、
下式表示的L-165041(Merck)、 或者下式表示的YM-16638(山之内制药)等。
GW-2433作为动脉硬化症的预防和治疗药的用途记载于WO92/10468中，L-165041作为糖尿病治疗药和抗肥胖药的用途记载于WO97/28115中，而且，关于YM-16638，在WO99/04815中记载了具有血清胆固醇降低作用、LDL-胆固醇降低作用的主旨。
而且，最近报道PPARδ的配体有望作为抗癌剂和抗炎剂应用。(JBC，272(6)，p3406-3410，1997；Cell，99，p335-345，1999)。
另一方面，作为具有与本发明化合物的下述通式(I)所示苯并异噁唑衍生物类似结构的化合物，已知下述化合物。
化合物A(特许2581523号)、 化合物B(WO98/28254)、 化合物C(特开平8-311065号公报)、 化合物D(WO97/27190)、以及
化合物E(WO9620935)上述化合物A、B和C均在苯并异噁唑环或苯并呋喃环的右侧通过亚烷基键结合有羧基、氰基，或者在α位乙氧基或丙硫基取代的羧基。
另一方面，本发明化合物是苯并异噁唑环的5～7位通过醚键或硫醚键结合的乙酸或2-烷基丙酸类，与上述A、B和C具有结构上的差别。
另外，已报道了上述化合物A、B和C记载的化合物具有胰岛素抗性改善作用、降血糖作用等，但是没有关于这些化合物作为PPARδ的配体有用的详细记载。
另外，上述化合物D是吲哚环的1位与苯并呋喃环通过亚烷基链结合，与噻唑环或噁唑环通过亚烷基链结合在苯并异噁唑环的3位上的本发明化合物在结构上不同，而且在WO97/27190中记载了具有ACAT(酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶)抑制作用的内容，但是没有关于作为PPARδ的配体有用的详细记载。
另一方面，化合物E仅用苯乙基取代了噁唑环的4位，同样苯并呋喃环的苯环部分仅具有甲氧基羰基甲氧基，而本发明化合物在噁唑环(噻唑环)上具有取代苯基和异丙基等2个取代基，而且在苯并呋喃环(苯并异噁唑环)的苯环部分，除羧基取代烷氧基以外，还具有丙基或丙稀基等取代基，在结构上不同。另外，WO9620935中记载了化合物E具有TXA2受体拮抗作用，但是没有记载作为PPARδ的配体有用。
另外，作为关于苯并异噁唑衍生物的专利申请，本发明人等申请了WO0179197，该专利的实施例化合物在其苯并异噁唑环上不存在取代基。相对于此，本发明化合物在苯并异噁唑环上具有至少1个取代基。
本发明的目的在于提供具有过氧化物酶体增殖剂应答性受体δ的活化作用的下述通式(I)表示的化合物。
发明公开即，本发明涉及下述通式(I)表示的化合物或其盐。
(式中，A表示O、S或NR7，其中，R7表示氢原子或碳原子数1～8的烷基，B1表示CW或N，其中，W表示氢原子或化学键，B2表示O、S或NR8，其中，R8表示氢原子或碳原子数1～8的烷基，X1和X2表示O、S、NH、NHC(＝O)、C(＝O)、C(＝N-OR9)、CH(OR10)、C＝C、C≡C或化学键，其中，R9和R10表示氢原子或碳原子数1～8的烷基，Y表示可以具有碳原子数1～8的烷基或1～3个卤素原子取代的碳原子数1～8的烷基作为取代基的碳原子数1～8的亚烷基链，Z表示NH、O或S，R1表示可以具有从碳原子数1～8的烷基、碳原子数1～8的烷氧基、1～3个卤素原子取代的碳原子数1～8的烷基、羟基、硝基、氨基、苯基、吡啶基或卤素原子中选择的基团或原子作为取代基的芳基，或者由作为成环原子的1～3个从氮原子、氧原子或硫原子中选择的杂原子以及剩余的碳原子构成的5～8元的杂环基团(而且，该杂环上可以缩合苯环)，R2表示碳原子数2～8的烷基、1～3个卤素原子取代的碳原子数1～8的烷基、碳原子数3～7的环烷基、碳原子数2～8的烯基或碳原子数2～8的炔基，或者可以具有从碳原子数1～8的烷基、碳原子数1～8的烷氧基、1～3个卤素原子取代的碳原子数1～8的烷基、羟基、硝基、氨基、苯基、吡啶基或卤素原子中选择的基团或原子作为取代基的芳基取代的烷基(烷基部分的碳原子数为1～4)或者5～8元的杂环取代的烷基(杂环由作为成环原子的1～3个从氮原子、氧原子或硫原子中选择的杂原子以及剩余的碳原子构成，且烷基部分的碳原子数为1～4)，R3表示卤素原子、三氟甲基、碳原子数1～8的烷基、碳原子数2～8的烯基或碳原子数2～8的炔基，R4和R5表示氢原子、碳原子数1～8的烷基、或1～3个卤素原子取代的碳原子数1～8的烷基，而且，R6表示氢原子、氨基取代的碳原子数1～8的烷基、碳原子数1～8的烷基、或碱金属。
其中，Z和R3与苯环结合，X2不与苯环结合。)另外，本发明还涉及含有上述通式(I)表示的化合物或其盐作为有效成分的过氧化物酶体增殖剂应答性受体δ的活化剂。
下面，详细说明本发明。
在上述通式(I)中，作为R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9和R10、以及Y的亚烷基链可以具有的取代基、R1的芳基和杂环基团可以具有的取代基、及R2的被芳基取代的烷基和被杂环取代的烷基可以具有的取代基中的碳原子数1～8的烷基，可以例举甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基或己基。
作为R2的碳原子数2～8的烷基，可以例举乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基或己基。
作为R2、R4和R5、以及Y的亚烷基链可以具有的取代基、R1的芳基和杂环基团可以具有的取代基、及R2的被芳基取代的烷基和被杂环取代的烷基可以具有的取代基中的1～3个卤素原子取代的碳原子数1～8的烷基，可以例举1～3个氟原子、氯原子或溴原子等卤素原子取代的甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基或叔丁基，优选三氟甲基、氯甲基、2-氯乙基、2-溴乙基、2-氟乙基等。
作为R2和R3的碳原子数2～8的烯基，可以例举乙烯基、烯丙基。
作为R2和R3的碳原子数2～8的炔基，可以例举丙炔基。
作为R3的卤素原子，可以例举氟原子、氯原子或溴原子等。
作为R2的碳原子数3～7的环烷基，可以例举环丙基、环戊基或环己基等。
作为R1的芳基和杂环基团可以具有的取代基、以及R2的被芳基取代的烷基和被杂环取代的烷基可以具有的取代基中的碳原子数1～8的烷氧基，可以例举甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、戊氧基或己氧基等。
作为R1的芳基和R2的被芳基取代的烷基的芳基部分，可以例举苯基或萘基。
作为R1的5～8元的杂环基团以及R2的被5～8元杂环取代的烷基的杂环部分，可以例举吡啶基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、喹啉基等。
而且，R1的作为成环原子的1～3个从氮原子、氧原子或硫原子中选择的杂原子与剩余的碳原子构成的5～8元的杂环基团与苯环缩合而成的杂环基团，可以例举喹啉环或苯并噻吩基环。
作为Y的碳原子数1～8的亚烷基链，可以例举亚甲基、亚乙基。
R3可以是1～3个相同或不同的基团。
另外，作为R6的氨基取代的碳原子数1～8的烷基，可以例举哌啶子基、吡咯烷基、二甲基氨基或二乙基氨基等氨基取代的甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基或己基等。
①作为本发明化合物，优选上述通式(I)的化合物中，R1结合在噁唑环、噻唑环或咪唑环的2位的化合物或其盐。
②作为本发明化合物，优选上述通式(I)的化合物或上述①中，B1为N，B2为O的化合物或其盐。
③作为本发明化合物，优选上述通式(I)的化合物或上述①、②中，R6为氢原子的化合物或其盐。
④作为本发明化合物，优选上述通式(I)的化合物或上述①～③中，X2为化学键的化合物或其盐。
⑤作为本发明化合物，优选上述通式(I)的化合物或上述①～④中，X1为化学键的化合物或其盐。
⑥作为本发明化合物，优选上述通式(I)的化合物或上述①～⑤中，R1为具有从碳原子数1～8的烷基、碳原子数1～8的烷氧基、1～3个卤素原子取代的碳原子数1～8的烷基、羟基、硝基、氨基、苯基、吡啶基或卤素原子中选择的基团或原子作为取代基的芳基的化合物或其盐。
⑦作为本发明化合物，优选上述通式(I)的化合物或上述①～⑥中，R2为碳原子数2～8的烷基的化合物或其盐。
⑧作为本发明化合物，优选上述通式(I)的化合物或上述①～⑦中，R3为碳原子数1～8的烷基或碳原子数2～8的烯基的化合物或其盐。
上述通式(I)表示的化合物可以是药理学上允许的盐，R6可以例举钠、钾、锂等的碱金属盐。
上述通式(I)表示的化合物中，苯并异噁唑衍生物的合成方案如下所示。
(合成方法1) (反应式中，R表示甲基、乙基等碳原子数1～6的烷基，Q表示氯原子、溴原子等离去基团，而且R1、R2、R3、R4、R5、A、X1、Y、X2和Z与上述相同。)通式(III)表示的羟基(或巯基)苯并异噁唑衍生物可以通过在冰冷条件下，用亚硝酸钠、矿物酸(硫酸)将通式(II)表示的氨基苯并异噁唑衍生物重氮化后，Z为氧原子的场合用硫酸等分解，Z为硫原子的场合使乙基黄原酸钾等作用后加热得到。
通式(v)表示的本发明的苯并异噁唑衍生物可以通过在碳酸钾等碱的存在下，使通式(IV)表示的乙酸酯衍生物对上述通式(III)表示的化合物作用得到。
而且，通式(VI)表示的本发明的苯并异噁唑衍生物可以通过在氢氧化锂、氢氧化钾等的存在下，使上述通式(V)表示的本发明的苯并异噁唑衍生物进行水解反应得到。
另外，R3＝烯丙基的场合，作为原料的上述通式(III)表示的化合物可以通过以下的反应方案合成。
(反应式中，A、R1、R2、X1、X2和Y与上述相同。)(合成方法2)另外，本发明的苯并异噁唑衍生物也可以通过下述反应方案得到。
(反应式中，A、R1、R2、R3、R4、R5、Z、Q和R与上述相同。)(合成方法3)另外，本发明化合物也可以通过下述反应方案得到。
(反应式中，R、Q、R1、R2、R3、R4、R5、B2、A和Z与上述相同。)上述反应方案中的原料羟基吲哚醛和羟基苯并噻吩醛可以采用例如WO96/35688、EP505322记载的方法等得到。
(合成方法4)R3＝丙基的本发明化合物可以按照以下的合成方案制备。
(反应式中，A、R1、R2、R4、R5、X1、X2、Y、Z和R与上述相同。)其他上述通式(I)表示的化合物也可以通过同样的方法得到。
这样得到的本发明化合物实例如表1～20所示。
(代表化合物1)本发明化合物中，X2＝化学键、B1＝N、B2＝O、R6＝H的下述化合物实例如表1～5所示。(R1、R2分别取代咪唑环、噁唑环、噻唑环的2位和4位)
表1
表2
表3
表4
表5
(代表化合物2)在本发明化合物中，X2＝化学键、B1＝N、B2＝O、R6＝H的下述化合物实例如表6～10所示。(R1、R2分别取代咪唑环、噁唑环、噻唑环的2位和4位)
表6
表7
表8
表9
表10
(代表化合物3)在本发明化合物中，X2＝化学键、R6＝H的下述化合物实例如表11～15所示。(R1、R2分别取代咪唑环、噁唑环、噻唑环的2位和4位)
表11
表12
表13
表14
表15
(代表化合物4)在本发明化合物中，X2＝化学键、R6＝H的下述化合物实例如表16～20所示。(R1、R2分别取代咪唑环、噁唑环、噻唑环的2位和4位)
表16
表17
表18
表19
表20
(代表化合物5)通式(I)中，A＝S、X1＝化学键、X2＝化学键、Y＝CH2CH2、B1＝N、B2＝O，R1的取代位置为2位，R2的取代位置为4位(因此，Y结合在5位)时的本发明化合物，如表21和22所示。
表21
表22
(代表化合物6)通式(I)中，A＝O、R2＝异丙基、X1＝化学键、X2＝化学键、Y＝CH2CH2、B1＝N、B2＝O，R1的取代位置为2位，R2的取代位置为5位(因此，Y结合在4位)的本发明化合物，如表23所示。
表23
(代表化合物7)通式(I)中，R3为甲基，其取代位置为5位，X1＝化学键、X2＝化学键、Y＝CH2CH2、B1＝N、B2＝O，R1的取代位置为2位，R2的取代位置为5位(因此，Y结合在4位)的本发明化合物，如表24所示。
表24
以下叙述本发明的药理效果。
本发明化合物的PPARδ活化作用通过下述方法求出，通过DMRIE-C将受体质粒(GAL4-hPPARδLBD)、虫荧光素酶表达质粒(UASx4-TK-LUC)和β-半乳糖苷酶(β-GAL)表达质粒基因导入CV-1细胞后，在本发明化合物存在下培养40小时后，测定溶解细胞的虫荧光素酶活性和β-GAL活性。
另外，虫荧光素酶活性用β-GAL活性补正，以用L-165041处理的细胞的虫荧光素酶活性作为100％，计算出相对的配体活性。(下述另外，从表27可以确认，实施例6得到的化合物具有优良的HDL胆固醇增加作用。(实施例13)因此，本发明的通式(I)表示的化合物具有优良的PPARδ活化作用，因而可以期待成为降血糖剂、降脂质剂、肥胖、X综合症、高胆固醇血症、高脂蛋白血症等代谢异常疾病、高脂血症、动脉硬化症、循环系统疾病、过食症、缺血性疾病、肺癌、乳腺癌、结肠癌、大肠癌、卵巢癌等恶性肿瘤、阿耳茨海默氏病、炎症性疾病、骨质疏松(Mano H.等，(2000)J.Biol.Chem.，2758126-8132)、突眼性甲状腺肿、肾上腺皮质营养障碍等的预防或治疗剂。
本发明化合物对于人可以通过一般的口服给药或非口服给药等适当的给药方法给药。
为了制成制剂，可以按照制剂技术领域的常规方法制成片剂、颗粒剂、散剂、胶囊剂、悬浊剂、注射剂、栓剂等剂型。
配制这些剂型时，可以使用常规的赋型剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、色素、稀释剂等。其中，作为赋型剂，可以例举乳糖、D-甘露醇、结晶纤维素、葡萄糖等，作为崩解剂，可以例举淀粉、羧甲基纤维素钙(CMC-Ca)等，作为润滑剂，可以例举硬脂酸镁、滑石等，作为粘合剂，可以例举羟丙基纤维素(HPC)、明胶、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等。
给药量通常对于成人，按照有效成分的本发明化合物计，注射剂的场合为1日约0.1mg～100mg，口服给药的场合为1日1mg～2000mg，可以根据年龄、症状等增减。
以下，结合实施例更详细地说明本发明，但是本发明并不受这些实施例实施例1[[7-烯丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]乙酸(1)6-乙酰氨基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑将6-乙酰氨基-3-甲基-1，2-苯并异噁唑(571mg，3.00mmol)溶解于干燥THF(18mL)后，在氮气环境下，在-78℃，用10分钟滴加2M的LDA(3.1mL，6.2mmol)。接着，用7分钟滴加4-碘代甲基-5-异丙基-2-(2，4-二氯苯基)噁唑(1.19g，3.00mmol)的THF(3.0mL)溶液。滴加后，在相同条件下搅拌1小时后，恢复到室温，加入饱和的氯化铵水溶液和乙酸乙酯。分离收集有机层后，用水、食盐水洗涤后，用无水硫酸钠干燥。减压蒸馏除去乙酸乙酯后，用硅胶柱色谱法(氯仿/甲醇＝80/1)精制残渣，得到上述标题化合物，为微黄色油状物(904mg)。(收率70％)1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.10(d，6H，J＝7Hz)，2.22(s，3H)，2.93(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.06(t，2H，J＝7Hz)，3.34(t，2H，J＝7Hz)，7.12(dd，1H，J＝2，9Hz)7.32(dd，1H，J＝2，9Hz)7.37(d，1H，J＝2Hz)，7.43(d，1H，J＝9Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.89(d，1H，J＝9Hz)，8.05(s，1H).
(2)6-羟基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑将上述6-乙酰氨基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑(900mg，1.96mmol)悬浊于3N盐酸(45mL)后，将反应温度提高到100℃，加热4小时。确认反应结束后，恢复到室温，加入饱和的碳酸氢钠水溶液进行中和。加入乙酸乙酯，分离收集有机层后，用食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，在残渣中得到6-氨基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑(770mg)，为褐色油状物。将该氨基体(770mg，1.85mmol)悬浊于25％硫酸(9.3mL)后，用冰冷却。接着，用5分钟滴加亚硝酸钠水溶液(166mg，2.41mmol/1.3ml)后，在相同条件下搅拌45分钟。将该反应溶液用5分钟滴加到加热回流中的75％硫酸水溶液(7.4mL)中，再在相同条件下加热回流4小时。放冷后，用乙醚萃取，用饱和的氯化铵水溶液和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸馏除去乙醚后，用硅胶柱色谱法(己烷/乙酸乙酯＝3/1)精制残渣，得到上述标题化合物，为微黄色油状物(138mg)。(2步收率17％)1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.23(d，6H，J＝7Hz)，2.93(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.06(t，2 H，J＝7Hz)，3.32(t，2 H，J＝7Hz)，5.36(s，1H)，6.75(dd，1H，J＝2，8Hz)6.92(d，1H，J＝2Hz)7.30(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.35(d，1H，J＝8Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.89(d，1H，J＝8Hz).
(3)6-烯丙氧基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑将上述6-羟基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑(500mg，1.20mmol)、碳酸钾(249mg，1.80mmol)悬浊于丙酮(30mL)后，在冰冷条件下用1分钟滴加烯丙基溴(217mg，1.80mmol)。恢复到室温，搅拌20小时后，过滤不溶物，再用丙酮洗涤，蒸馏除去溶剂。用硅胶柱色谱法(己烷/乙酸乙酯＝4/1)精制该残渣，得到上述标题化合物，为无色油状物(420mg)。(收率77％)
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.11(d，6H，J＝7Hz)，2.92(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.06(t，2H，J＝7Hz)，3.32(t，2H，J＝7Hz)，4.5-4.6(m，2H)，5.3-5.5(m，2H)，6.0-6.1(m，1H)，6.86(dd，1H，J＝2，8Hz)6.96(d，1H，J＝2Hz)7.32(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.36(d，1H，J＝8Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.90(d，1H，J＝8Hz).
(4)7-烯丙基-6-羟基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑将6-烯丙氧基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑(70mg，0.153mmol)在180℃下加热4小时。恢复到室温，直接用硅胶柱色谱法(己烷/乙酸乙酯＝3/1)精制反应混合物，得到上述标题化合物，为白色粉末(47mg)。
(收率67％)
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.11(d，6H，J＝7Hz)，2.92(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.05(t，2H，J＝7Hz)，3.31(t，2H，J＝7Hz)，3.65-3.70(m，2H)，5.15-5.25(m，2H)，5.41(s，1H)，6.0-6.1(m，1H)，6.76(d，1H，J＝8Hz)，7.25(d，1H，J＝8Hz)7.32(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.89(d，1H，J＝8Hz).
(5)[[7-烯丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]乙酸乙酯将上述7-烯丙基-6-羟基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑(45mg，0.098mmol)、碳酸钾(20mg，0.147mmol)悬浊于丙酮(5.0mL)后，在冰冷条件下加入溴代乙酸乙酯(25mg，0.147mmol)的丙酮溶液。恢复到室温，搅拌20小时后，过滤不溶物，再用丙酮洗涤后，蒸馏除去溶剂。用硅胶柱色谱法(己烷/乙酸乙酯＝4/1)精制该残渣，得到上述标题化合物，为无色油状物(43mg)。(收率80％)
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.11(d，6H，J＝7Hz)，1.28(t，3H，J＝7Hz)，2.91(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.05(t，2H，J＝7Hz)，3.32(t，2H，J＝7Hz)，3.65-3.70(m，2H)，4.25(q，2H，J＝7Hz)4.70(s，2H)4.95-5.15(m，2H)，6.0-6.1(m，1H)，6.74(d，1H，J＝9Hz)，7.30(d，1H，J＝9Hz)7.32(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.89(d，1H，J＝9Hz).
(6)[[7-烯丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]乙酸将上述酯体(40mg，0.074mmol)溶解于乙醇-水(3.0mL-1.5mL)的混合溶剂后，加入氢氧化锂的一水合物(8mg)，搅拌20小时。在反应溶液中加入冰，接着加入3N盐酸进行中和。过滤收集析出的晶体后，用水洗涤，然后风干一夜，再减压干燥，得到标题化合物(25mg)。(收率66％)白色粉末
mp80-85℃1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.13(d，6H，J＝7Hz)，2.94(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.06(t，2H，J＝7Hz)，3.31(t，2H，J＝7Hz)，3.65-3.75(m，2H)，4.73(s，2H)5.0-5.2(m，2H)，5.9-6.1(m，1H)，6.76(d，1H，J＝9Hz)，7.32(d，1H，J＝9Hz)7.32(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.89(d，1H，J＝9Hz).
实施例22-[[7-烯丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸(1)2-[[7-烯丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸乙酯将上述7-烯丙基-6-羟基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑(92mg，0.20mmol)、2-溴-2-甲基丙酸乙酯(196mg，1.00mmol)、碳酸钾(138mg，1.00mmol)悬浊于甲乙酮(5.0mL)后，加热回流20小时。恢复到室温后，过滤不溶物，再用甲乙酮洗涤，蒸馏除去溶剂。用硅胶柱色谱法(己烷/乙酸乙酯＝5/1)精制残渣，得到上述标题化合物，为无色油状物(100mg)。(定量收率)
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.09(d，6H，J＝7Hz)，1.23(t，3H，J＝7Hz)，1.60(s，6H)，2.90(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.04(t，2H，J＝7Hz)，3.31(t，2H，J＝7Hz)，3.65-3.70(m，2H)，4.23(q，2H，J＝7Hz)，4.95-5.15(m，2H)，6.0-6.1(m，1H)，6.65(d，1H，J＝9Hz)，7.19(d，1H，J＝9Hz)，7.32(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.89(d，1H，J＝9Hz).
(2)2-[[7-烯丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]-2-甲基-丙酸按照与实施例1之(6)同样的方法，得到标题化合物。(收率73％)
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.10(d，6H，J＝7Hz)，1.63(s，6H)，2.92(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.06(t，2H，J＝7Hz)，3.31(t，2H，J＝7Hz)，3.65-3.70(m，2H)，5.00-5.15(m，2H)，5.9-6.1(m，1H)，6.80(d，1H，J＝8Hz)，7.21(d，1H，J＝8Hz)，7.30(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.49(d，1H，J＝2Hz)，7.85(d，1H，J＝8Hz).
实施例3[[7-丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]乙酸(1)[[7-丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]乙酸乙酯将[[7-烯丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]乙酸乙酯(65mg，0.12mmol)溶解于乙醇(7.0mL)后，加入10％Pd-C(6mg)。在氢气环境下(常压)搅拌3小时后，过滤不溶物。浓缩滤液，在残渣中得到上述标题化合物，为无色油状物(63mg)。(收率97％)
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ0.97(t，3H，J＝7Hz)，1.09(d，6H，J＝7Hz)，1.26(t，3H，J＝7Hz)，1.7-1.8(m，2H)，2.9-3.0(m，3H)，3.05(t，2H，J＝7Hz)，3.32(t，2H，J＝7Hz)，4.25(q，2H，J＝7Hz)，4.70(s，2H)，6.71(d，1H，J＝8Hz)，7.25(d，1H，J＝9Hz)，7.33(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.89(d，1H，J＝8Hz).
(2)[[7-丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]乙酸按照与实施例1之(6)同样的方法，得到标题化合物。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ0.96(t，3H，J＝7Hz)，1.12(d，6H，J＝7Hz)，1.7-1.8(m，2H)，2.9-3.0(m，3H)，3.06(t，2H，J＝7Hz)，3.30(t，2H，J＝7Hz)，4.25(q，2H，J＝7Hz)，4.74(s，2H)，6.74(d，1H，J＝8Hz)，7.26(d，1H，J＝9Hz)，7.33(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.87(d，1H，J＝8Hz).
实施例42-[[7-烯丙基-3-[2-[2-[(4-三氟甲基)苯基]-4-异丙基-5-噻唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸下述(1)～(5)按照与实施例1同样的方法合成，另外(6)和(7)按照与实施例2同样的方法合成。
(1)6-乙酰氨基-3-[2-[2-[(4-三氟甲基)苯基]-4-异丙基-5-噻唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑微黄色油状物收率20％
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.24(d，6H，J＝7Hz)，2.23(s，3H)，3.03(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.25-3.40(m，4H)，7.20(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.36(d，1H，J＝2Hz)，7.44(d，1H，J＝9Hz)，7.65(d，2H，J＝8Hz)，7.99(d，2H，J＝8Hz)，8.07(s，1H).
(2)6-氨基-3-[2-[2-[(4-三氟甲基)苯基]-4-异丙基-5-噻唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑微黄色油状物收率93％1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.25(d，6H，J＝7Hz)，3.04(dq，1H，J＝7Hz，7Hz.)，3.15-3.40(m，4H)，4.0-4.05(br，2H)，6.61(dd，1H，J＝2，9Hz)，6.73(d，1H，J＝2Hz)，7.27(d，1H，J＝9Hz)，7.65(d，2H，J＝8Hz)，8.00(d，2H，J＝8Hz)，(3)6-羟基-3-[2-[2-[(4-三氟甲基)苯基]-4-异丙基-5-噻唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑微黄色油状物收率32％
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.24(d，6H，J＝7Hz)，3.03(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.2-3.4(m，4H)，5，95-6.00(br，1H)，6.83(dd，1H，J＝2，9Hz)，6.79(d，1H，J＝2Hz)，7.38(d，1H，J＝9Hz)，7.64(d，2H，J＝8Hz)，7.99(d，2H，J＝8Hz)，(4)6-烯丙氧基-3-[2-[2-[(4-三氟甲基)苯基]-4-异丙基-5-噻唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑微黄色油状物收率49％1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.24(d，6H，J＝7Hz)，3.04(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.2-3.4(m，4H)，4.60-4.65(m，2H)，5.30-5.50(m，2H)，6.00-6.15(m，1H)，6.93(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.00(d，1H，J＝2Hz)，7.40(d，1H，J＝9Hz)，7.65(d，2H，J＝8Hz)，8.00(d，2H，J＝8Hz).
(5)7-烯丙氧基-6-羟基-3-[2-[2-[(4-三氟甲基)苯基]-4-异丙基-5-噻唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑白色粉末收率71％1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.24(d，6H，J＝7Hz)，3.03(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.2-3.4(m，4H)，3.65-3.75(m，2H)，5.15-5.30(m，2H)，5.56(s，1H)，6.00-6.10(m，1H)，6.84(d，1H，J＝9Hz)，7.28(d，1H，J＝9Hz)，7.65(d，2H，J＝8Hz)，8.00(d，2H，J＝8Hz)，(6)2-[[7-烯丙基-3-[2-[2-[(4-三氟甲基)苯基]-4-异丙基-5-噻唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸乙酯微黄色油状物收率48％
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.23(t，3H，J＝7Hz)，1.23(d，6H，J＝7Hz)，1.62(s，6H)，3.02(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.2-3.4(m，4H)，3.65-3.75(m，2H)，4.23(q，2H，J＝7Hz)，5.0-5.15(m，2H)，5.95-6.10(m，1H)，6.71(d，1H，J＝9Hz)，7.22(d，1H，J＝9Hz)，7.65(d，2H，J＝8Hz)，7.99(d，2H，J＝8Hz)，(7)2-[[7-烯丙基-3-[2-[2-[(4-三氟甲基)苯基]-4-异丙基-5-噻唑基]乙基]-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸无色油状物收率81％
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.23(d，6H，J＝7Hz)，1.65(s，6H)，3.01(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.2-3.4(m，4H)，3.65-3.75(m，2H)，5.0-5.15(m，2H)，5.95-6.10(m，1H)，6.85(d，1H，J＝9Hz)，7.27(d，1H，J＝9Hz)，7.65(d，2H，J＝8Hz)，7.99(d，2H，J＝8Hz)，实施例5[3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]-乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧代乙酸(1)6-乙酰氨基-3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑将6-乙酰氨基-3，5-二甲基-1，2-苯并异噁唑(9.18g，45.0mmol)溶解于干燥THF(315mL)后，在氮气环境下，在-78℃用40分钟滴加2M的LDA(53mL，106.0mmol)。接着，在相同条件(-78℃)下搅拌15分钟后，用45分钟滴加4-异丙基-5-碘代甲基-2-(4-三氟甲基)苯基-噻唑(18.51g，45.0mmol)的THF溶液(100mL)。在相同条件(-78℃)下搅拌1小时后，恢复到室温，加入饱和氯化铵水溶液和乙酸乙酯。分离收集乙酸乙酯层后，用水、食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤。蒸馏除去乙酸乙酯后，用硅胶柱色谱法(己烷/乙酸乙酯＝1/1)精制残渣，得到上述标题化合物，为微黄色晶体(7.40g)。(收率34％)
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.25(d，6H，J＝7Hz)，2.26(bs，3H)，2.32(s，3H)，3.04(m，1H)，3.26(dd，2H，J＝6，8Hz)，3.37(dd，2H，J＝6，8Hz)，7.12(bs，1H)，7.65(d，2H，J＝8Hz)，7.99(d，2H，J＝8Hz)，8.40(bs，1H).
(2)6-氨基-3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑将上述酰胺体(18.0g，36.9mmol)悬浊于4M盐酸(360mL)、乙酸(180mL)后，加热回流24小时。确认反应结束后，恢复到室温，注入到冰冷的水中，加入10N氢氧化钠水溶液进行中和。加入乙酸乙酯，分离收集有机层后，用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤。蒸馏除去溶剂后，过滤收集残渣的粗晶体，用己烷洗涤，得到标题化合物，为微褐色晶体(16.8g)。(收率94％)1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.25(d，6H，J＝7Hz)，2.21(s，3H)，3.05(m，1H)，3.21(dd，2H，J＝6，9Hz)，3.35(dd，2H，J＝6，9Hz)，
4.01(bs，2H)，6.75(s，1H)，7.14(s，1H)，7.64(d，2H，J＝8Hz)，8.00(d，2H，J＝8Hz).
(3)6-羟基-3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑将上述苯胺体(15.4g，34.6mmol)悬浊于25％硫酸(170ml)后，在冰冷条件下，加入亚硝酸钠水溶液(3.10g，45mmol)。在相同条件下搅拌20分钟后，用20分钟滴加到加热至130℃的75％硫酸中。在相同条件下加热回流3小时后，恢复到室温，倒入冰冷的水中。加入乙酸乙酯，分离收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤。蒸馏除去溶剂后，过滤收集残渣的粗晶体，用己烷洗涤，得到标题化合物，为微褐色晶体(8.36g)。(收率54％)1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.24(d，6H，J＝7Hz)，2.30(s，3H)，3.04(m，1H)，3.2-3.4(m，4H)，5.31(s，1H)，6.93(s，1H)，7.22(s，1H)，7.65(d，2H，J＝9Hz)，8.00(d，2H，J＝9Hz).
(4)[3-[2-[4-异丙基 2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧代乙酸乙酯按照与实施例1之(5)同样的方法，得到标题化合物。
微黄色油状物 收率65％
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.25(d，6H，J＝7Hz)，1.31(t，3H，J＝7Hz)，2.33(s，3H)，3.04(m，1H)，3.2-3.4(m，4H)，4.12(q，2H，J＝7Hz)4.71(s，2H)，6.83(s，1H)，7.25(s，1H)，7.65(d，2H，J＝9Hz)，8.00(d，2H，J＝9Hz).
(5)[3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧代乙酸按照与实施例1之(6)同样的方法，得到标题化合物。
白色粉末 收率71％mp(dec)180-190℃1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.24(d，6H，J＝7Hz)，2.33(s，3H)，3.03(m，1H)，3.2-3.4(m，4H)，4.77(s，2H)，6.87(s，1H)，7.26(s，1H)，7.64(d，2H，J＝9Hz)，7.99(d，2H，J＝9Hz).
IR(KBr)cm-12960，2930，1740，1620，1520，1450，1420，1320，1280，1250，1160，1120，1060，840.
实施例62-[[3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸(1)2-[[3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸乙酯按照与实施例2之(1)同样的方法，得到标题化合物。
微黄色油状物 收率85％1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.23(d，6H，J＝7Hz)，1.24(t，3H，J＝7Hz)，1. 67(s，6H)2.26(s，3H)，3.02(m，1H)，3.2-3.4(m，4H)，4.25(q，2H，J＝7Hz)6.77(s，1H)，7.25(s，1H)，7.65(d，2H，J＝9Hz)，8.00(d，2H，J＝9Hz).
(2)2-[[3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸按照与实施例2之(2)同样的方法，得到标题化合物。
白色晶体 收率94％
mp(dec)166-168℃1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.23(d，6H.J＝7Hz)，1.72(s，6H)2.28(s，3H)，3.02(m，1H)，3.2-3.4(m，4H)，6.93(s，1H)，7.25(s，1H)，7.65(d，2H，J＝9Hz)，8.00(d，2H，J＝9Hz).
IR(KBr)cm-13000，1720，1620，1520，1450，1370，1320，1280，1160，1120，1060，850，820.
实施例7[3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]硫代乙酸(1)3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]-乙基]-6-巯基-5-甲基-1，2-苯并异噁唑将6-氨基-3-[2-[异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑(475mg，1.07mmol)溶解于乙醇(3.3mL)中。在冰冷条件下(外部温度为0℃)，加入浓盐酸(1.68mL)后，加入亚硝酸钠(81mg，1.17mmol)。30分钟后，用5分钟滴加黄原酸钾(430mg，2.68mmol)的水溶液，然后使反应温度为45℃，搅拌18小时。放冷后，将反应溶液倒入水中，用乙酸乙酯萃取，分离收集有机层，用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤。蒸馏除去溶剂后，用硅胶柱色谱法(己烷/乙酸乙酯＝5/1)精制残渣，得到二硫代碳酸酯体的粗产物(131mg)。接着，将该二硫代碳酸酯体溶解于乙醇后，在室温下加入氢氧化钾(36mg)的水溶液，加热回流3小时。确认原料消失后，将反应溶液倒入冰冷的水中，加入1N盐酸进行中和。加入乙酸乙酯，分离收集有机层后，用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤。蒸馏除去溶剂后，用硅胶柱色谱法(己烷乙酸乙酯/乙酸乙酯＝5/1)精制残渣，得到标题化合物(65mg)。(收率7％)(2步收率)1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.23(d，6H，J＝7Hz)，2.38(s，3H)，3.04(m，1H)，3.2-3.4(m，4H)，3.60(s，1H)，7.26(s，1H)，7.49(s，1H)7.65(d，2H，J＝9Hz)，8.00(d，2H，J＝9Hz).
(2)[[3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]硫]乙酸乙酯按照与实施例1之(5)同样的方法，得到目的物。
微黄色油状物 收率69％1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.25(d，6H，J＝7Hz)，1.27(t，3H，J＝7Hz)，2.41(s，3H)，3.03(m，1H)，3.2-3.4(m，4H)，3.76(s，2H)，4.22(q，2H，J＝7Hz)7.27(s，1H)，7.45(s，1H)，7.65(d，2H，J＝9Hz)，7.99(d，2H，J＝9Hz).
(3)[3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]硫代乙酸按照与实施例1之(6)同样的方法，得到目的物。
微黄白色粉末 收率73％mp(dec)170℃1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.24(d，6H，J＝7Hz)，2.42(s，3H)，3.03(m，1H)，3.2-3.4(m，4H)，3.81(s，2H)，7.28(s，1H)，7.46(s.1H)，7.65(d，2H，J＝9Hz)，8.00(d，2H，J＝9Hz).
实施例8[3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]氨基乙酸(1)[3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]氨基乙酸乙酯将6-氨基-3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑(445mg，1.00mmol)、溴代乙酸乙酯(154mg，1.20mmol)、二异丙基乙胺(142mg，1.10mmol)溶解于DMF(10mL)中。加热回流18小时后，将反应溶液倒入水中，用乙酸乙酯萃取。分离收集有机层后，用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤。蒸馏除去溶剂后，用硅胶柱色谱法(己烷/乙酸乙酯＝3/1)精制残渣，得到茶褐色粉末状的标题化合物(160mg)。(收率30％)
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.25(d，6H，J＝7Hz)，1.34(t，3H，J＝7Hz)，2.25(s，3H)，3.05(m，1H)，3.2-3.3(m，4H)，3.97(d，2H，J＝3Hz)4.6-4.7(br，1H)4.12(q，2H，J＝7Hz)6.51(s，1H)，7.15(s，1H)，7.64(d，2H，J＝9Hz)，8.00(d，2H，J＝9Hz).
(2)[3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]氨基乙酸按照与实施例1之(6)同样的方法，得到标题化合物。
微褐色晶体 收率73％mp(dec)180-185℃1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.25(d，6H，J＝7Hz)，2.25(s，3H)，3.04(m，1H)，3.2-3.3(m，4H)，4.07(s，2H)，6.54(s，1H)，
7.15(s，1H)，7.64(d，2H，J＝9Hz)，7.99(d，2H，J＝9Hz).
IR(KBr)cm-13425，2950，2925，1740，1620，1520，1440，1380，1370，1320，1220，1160，1060，840.
实施例9[3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧代乙酸(1)6-乙酰氨基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑按照与实施例5之(1)同样的方法，得到标题化合物。
褐色油状物 收率34％1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.10(d，6H，J＝7Hz)，2.24(bs，3H)，2.26(s，3H)，2.92(m，1H)，3.05(t，2H，J＝7Hz)，3.33(t，2H，J＝7Hz)，7.16(bs，1H)，7.28(s，1H)，7.32(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.91(d，1H，J＝9Hz)，8.34(bs，1H).
(2)6-氨基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑按照与实施例5之(2)同样的方法，得到标题化合物。
收率42％
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.10(d，6H，J＝7Hz)，2.14(s，3H)，2.92(m，1H)，3.03(t，2H，J＝7Hz)，3.27(t，2H，J＝7Hz)，3.97(bs，2H)，6.72(s，1H)，7.13(s，1H)，7.32(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.92(d，1H，J＝8Hz).
(3)3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-6-羟基-5-甲基-1，2-苯并异噁唑按照与实施例5之(3)同样的方法，得到标题化合物。
淡黄色晶体 收率44％1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.11(d，6H，J＝7Hz)，2.22(s，3H)，2.92(m，1H)，3.05(t，2H，J＝7Hz)，3.29(t，2H，J＝7Hz)，6.15(bs，1H)，6.88(s，1H)，7.19(s，1H)，7.32(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.90(d，1H，J＝9Hz).
(4)[[3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧代乙酸乙酯按照与实施例5之(4)同样的方法，得到标题化合物。
收率97％1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.11(d，6H，J＝7Hz)，1.30(t，3H，J＝7Hz)，2.23(s，3H)，2.91(m，1H)，3.04(t，2H，J＝7Hz)，3.31(t，2H，J＝7Hz)，4.28(q，2H，J＝7Hz)，4.69(s，2H)，6.80(s，1H)，7.24(s，1H)，7.33(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.91(d，1H，J＝8Hz).
(5)[3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-异丙基-4-噁唑基]-乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧代乙酸按照与实施例5之(5)同样的方法，得到标题化合物。
收率88％淡黄色晶体
mp(dec)180-184℃1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.11(d，6H，J＝7Hz)，2.26(s，3H)，2.93(m，1H)，3.04(t，2H，J＝7Hz)，3.30(t，2H，J＝7Hz)，4.76(s，2H)6.84(s，1H)，7.23(s，1H)，7.33(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.64(d，1H，J＝2Hz)，7.99(d，1H，J＝8Hz).
IR(KBr)cm-11749，1718，1625，1562，1521，1457，1446，1429，1388，1361，1317，1284，1251，1162，1103，1087，1041，898，863，831，817，775，732，674，667，611.
实施例102-[[3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸2-哌啶子基乙酯盐酸盐将2-[[3-[2-[4-异丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸(247mg，0.463mmol)溶解于二氯甲烷(10.0mL)后，在冰冷条件下，加入草酰氯(0.053mL，0.60mmol)、DMF(1-drop)。恢复到室温，在氮气环境下搅拌3小时后，减压蒸馏。将残渣的酰氯体溶解于二氯甲烷(10.0mL)后，加入哌啶2-乙醇(90mg，0.70mmol)、三乙胺(71mg，0.70mmol)、4-二甲氨基吡啶(3mg)。在室温下搅拌20小时后，注入到冰冷的水中。加入乙酸乙酯，分离收集有机层后，依次用饱和食盐水、水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤。在减压条件下蒸馏除去溶剂，用硅胶柱色谱法(己烷/乙酸乙酯＝3/1)精制残渣，得到无色油状的2-[[3-[2-[4-异丙基 2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]-乙基]-5-甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸2-哌啶子基乙酯(190mg)。将该酯体溶解于乙醚(4.0mL)后，加入氯化氢-乙醚溶液。过滤收集析出的晶体，得到标题化合物160mg。(收率51％)白色晶体mp75-80℃1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ(フリ一体)1.24(d，6H，J＝7Hz)，1.3-1.4(m，2H)，1.5-1.6(m，4H)1.68(s，6H)，2.26(s，3H)，2.3-2.4(m，4H)，2.55(t，2H，J＝6Hz)，3.04(m，1H)，3.23(t，2H，J＝8Hz)，3.34(t，2H，J＝8Hz)，4.31(t，2H，J＝6Hz)，6.86(s，1H)，7.23(s，1H)，7.65(d，2H，J＝9Hz)，8.00(d，2H，J＝9Hz).
实施例11 药理试验1PPARα、γ、δ活化能力的测定(1)如下所述测定试验化合物(实施例1～4)的PPARα、γ和δ活化能力。
I.测定方法1)材料非洲绿猴(アフリカミドリザル)肾成纤维细胞(CV-1细胞)由东北大学加龄医学研究所医用细胞资源中心购得。所有试验化合物均溶解于二甲基亚砜(DMSO)，最终以DMSO浓度0.1％用于试验。
2)质粒受体表达质粒(GAL4-hPPARαLBD、GAL4-hPPARγ LBD、GAL4-hPPARδ LBD)、报道质粒(UASx4-TK-LUC)、β-半乳糖苷酶表达质粒(βGAL)使用与Kliewer，S.A.等，((1992)Nature，358771-774)同样的质粒。
3)转染将CV-1细胞以每1孔2×105个的细胞浓度接种在24孔培养皿中，用添加了4％胎牛血清(FCS)的OPTI-MEM I Reduced SerumMedium(Life Technologies)500μl/well培养24小时。然后，用未添加血清的OPTI-MEM洗涤细胞，添加含DNA溶液〔每1孔(250μl添加溶液)含有以下成分的溶液；0.03μg的GAL4-hPPARδLBD、0.25μg的UASx4-TK-LUC、0.35μg的βGAL、2μl的lipofection试剂DMRIE-C(Life Technologies)，将这些物质溶解于OPTI-MEM中，在室温下静置30分钟得到的溶液〕，在37℃下培养5小时。
4)添加试验化合物进行的细胞处理除去含DNA溶液，新更换为含有试验化合物(溶解于100％DMSO中使终浓度达到10-6M的溶液)的4％FCS-OPTI-MEM 500μl，再在37℃下培养40小时。
5)报道基因表达水平的测定除去培养基，用PBS洗涤2次后，进行1次冷冻融解，每1孔添加虫荧光素酶活性测定用溶解缓冲液(25mM Tris-PO4(pH7.8)、15％v/v Glyserol、2％CHAPS、1％Lecithin、1％BSA、4mM EGTA(pH8.0)、8mM MgCl2、1mM DTT)100μl，在室温下放置10分钟。分别取其中20μl到96孔测定用板上，添加虫荧光素酶基质溶液100μl(Piccagene，Nippon Gene公司制)，使用MLR-100型microluminoreader(Corona电气公司制)，求出1秒内的发光量(虫荧光素活性)。测定添加虫荧光素基因的同时加入的βGAL的细胞内导入引起的活性表达量，用导入基因的转染效率补正添加化合物引起的虫荧光素酶活性的变化。β-半乳糖苷酶活性的测定方法是，分别取50μl的溶解试样到另一96孔板上，添加ONPG(2-硝基苯基-β-D-吡喃半乳糖苷)溶液100μl，在室温下温育5分钟。加入反应停止液(1M碳酸钠溶液)50μl，测定414nm处的吸光度。以仅用作为溶剂使用的DMSO(0.1％浓度)处理后的细胞的虫荧光素酶活性值(对照值)为0％，以用对照药(PPARα10-4M WY-165041，PPARγ10-5MRosiglitezone、PPARδ10-4M L-165041)处理后的细胞的虫荧光素酶活性值为100％，计算出相对的PPAR活化能力。
II.试验结果试验结果如表25所示。
表25
由表25可以看出，实施例化合物显示优良的PPAR活化作用。特别是实施例1和2得到的化合物显示选择性的PPARδ活化作用。
实施例12 药理试验2PPARα、γ、δ活化能力的测定(2)关于实施例5～10的化合物，按照与实施例11同样的方法，测定PPARα、γ、δ活化能力，其结果如表26所示。
表26
PPAR活化能力以对照药为100％时的相对值PPARα、γ、δ活化能力的测定是试验化合物浓度为10-7M的值，其中仅实施例5、6、7的δ活性为10-8M的值对照药α WY-14643 10-4Mγ rosiglitazone 10-5Mδ L-165041 10-4M由表26可以看出，实施例6～10得到的化合物显示优良的选择性PPARδ活化作用。
实施例13 药理试验3HDL胆固醇增加作用的测定(试验方法)使用遗传性肥胖小鼠db/db小鼠研究HDL胆固醇增加作用。以血清中HDL胆固醇量为标准将db/db小鼠(10周龄)分组，将悬浊于1％甲基纤维素溶液中的本发明化合物(后期的各实施例合成的化合物)和GW-501516口服给药，1日2次，给药1周。对照组(非药物给药组)同样口服给予1％甲基纤维素溶液。最终给药16小时后取血，测定血清中HDL胆固醇量。测定如下进行，使用Chol/Trig Combo(株式会社Helena研究所)按照琼脂糖电泳法求出アポ蛋白胆固醇比率，将其代入按照使用Pure Auto TCHO(第一化学药品)的酶法用自动分析装置(7060E型，株式会社日立制作所制)求出的总胆固醇量，计算得到。
(结果)求出各化合物给药组的血清中HDL胆固醇量，计算出该值相对于对照的比例(百分比)，其结果如表27所示。
表27HDL胆固醇增加作用
由表27可以看出，实施例6得到的化合物显示优良的HDL胆固醇增加作用。
权利要求
1.下述通式(I)表示的化合物或其盐。 (式中，A表示O、S或NR7，其中，R7表示氢原子或碳原子数1～8的烷基，B1表示CW或N，其中，W表示氢原子或化学键，B2表示O、S或NR8，其中，R8表示氢原子或碳原子数1～8的烷基，X1和X2表示O、S、NH、NHC(＝O)、C(＝O)、C(＝N-OR9)、CH(OR10)、C＝C、C≡C或化学键，其中，R9和R10表示氢原子或碳原子数1～8的烷基，Y表示可以具有碳原子数1～8的烷基或1～3个卤素原子取代的碳原子数1～8的烷基作为取代基的碳原子数1～8的亚烷基链，Z表示NH、O或S，R1表示可以具有从碳原子数1～8的烷基、碳原子数1～8的烷氧基、1～3个卤素原子取代的碳原子数1～8的烷基、羟基、硝基、氨基、苯基、吡啶基或卤素原子中选择的基团或原子作为取代基的芳基，或者由作为成环原子的1～3个从氮原子、氧原子或硫原子中选择的杂原子以及剩余的碳原子构成的5～8元的杂环基团(而且，该杂环上可以缩合苯环)，R2表示碳原子数2～8的烷基、1～3个卤素原子取代的碳原子数1～8的烷基、碳原子数3～7的环烷基、碳原子数2～8的烯基或碳原子数2～8的炔基，或者可以具有从碳原子数1～8的烷基、碳原子数1～8的烷氧基、1～3个卤素原子取代的碳原子数1～8的烷基、羟基、硝基、氨基、苯基、吡啶基或卤素原子中选择的基团或原子作为取代基的芳基取代的烷基(烷基部分的碳原子数为1～4)或者5～8元的杂环取代的烷基(杂环由作为成环原子的1～3个从氮原子、氧原子或硫原子中选择的杂原子以及剩余的碳原子构成，且烷基部分的碳原子数为1～4)，R3表示卤素原子、三氟甲基、碳原子数1～8的烷基、碳原子数2～8的烯基或碳原子数2～8的炔基，R4和R5表示氢原子、碳原子数1～8的烷基、或1～3个卤素原子取代的碳原子数1～8的烷基，而且，R6表示氢原子、氨基取代的碳原子数1～8的烷基、碳原子数1～8的烷基、或碱金属，其中，Z和R3与苯环结合，X2不与苯环结合。)
2.如权利要求1所述的化合物或其盐，R1结合在噁唑环、噻唑环或咪唑环的2位。
3.如权利要求1或2所述的化合物或其盐，B1为N，B2为O。
4.如权利要求1～3中任意一项所述的化合物或其盐，R6为氢原子。
5.如权利要求1～4中任意一项所述的化合物或其盐，X2为化学键。
6.如权利要求1～5中任意一项所述的化合物或其盐，X1为化学键。
7.如权利要求1～6中任意一项所述的化合物或其盐，R1为具有从碳原子数1～8的烷基、碳原子数1～8的烷氧基、1～3个卤素原子取代的碳原子数1～8的烷基、羟基、硝基、氨基、苯基、吡啶基或卤素原子中选择的基团或原子作为取代基的芳基。
8.如权利要求1～7中任意一项所述的化合物或其盐，R2为碳原子数2～8的烷基。
9.如权利要求1～8中任意一项所述的化合物或其盐，R3为碳原子数1～8的烷基或碳原子数2～8的烯基。
10.一种过氧化物酶体增殖剂应答性受体δ的活化剂，含有权利要求1～9中任意一项所述的化合物或其盐作为有效成分。
全文摘要
本发明涉及通式(I)表示的化合物或其盐以及含有其作为有效成分的PPARδ活化剂。(式中，A表示O或S等，B
文档编号A61P3/10GK1568323SQ0282024
公开日2005年1月19日 申请日期2002年10月9日 优先权日2001年10月12日
发明者佐久间诏悟, 山川富雄, 神田贵史, 增井诚一郎 申请人:日本化学医药株式会社