专利名称：提取物及其医药用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及由旋复花、代赫石、竹叶和淡豆豉得到的提取物，其含有50-90重量％总黄酮，及其在抗抑郁方面的用途。
背景技术：
本发明的提取物由旋覆花，代赭石，竹叶和淡豆豉得到，其中所含的组分旋覆花，代赭石，竹叶和淡豆豉是药典收藏的无毒中药材。到目前未见上述四种组分且含50-90重量％总黄酮的提取物在抗抑郁方面的报告。
发明内容
本发明人现已发现由旋覆花、代赭石、竹叶和淡豆豉组成且含50-90重量％总黄酮的提取物具有出人意料的抗抑郁作用，本发明基于上述发现现已完成。
因此，本发明涉及一种提取物，其是旋覆花，代赭石，竹叶和淡豆豉的提取物并且含50-90重量％的总黄酮。
本发明进一步涉及用于抗抑郁的产品或药物组合物，其含旋覆花，代赭石，竹叶和淡豆豉的提取物及药物载体，其中所述提取物含50-90重量％总黄酮。
本发明还涉及由旋覆花，代赭石，竹叶和淡豆豉组成且含50-90重量％总黄酮的提取物在制备用于抗抑郁的产品或药物中用途。
根据本发明，本发明提取物是通过用水，C1-4烷基醇或它们的混合物提取旋覆花，代赭石，竹叶和淡豆豉的混合物得到的。
根据本发明，术语C1-4烷基醇举例讲可是甲醇，乙醇，丙醇，异丙醇，丁醇，异丁醇或叔丁醇。
根据本发明，本发明药物组合物中载体为制药领域常用的药用赋形剂或药用辅料，如药用添加剂，稀释剂或崩解剂等。
根据本发明，本发明中所述产品是指不作为药物的产品，如功能性食品或保健产品。
根据本发明，本发明提取物中总黄酮可通过下面方法定性并定量测定定性采用盐酸-镁粉还原反应取少量样品溶于热甲醇中，加入少许镁粉振摇滴加浓盐酸后，升起的泡末呈红色。显示样品中含有黄酮、黄酮醇或双氢黄酮醇。
含量测定以芦丁为标准品，具体方法如下1.芦丁标准液的配置准确称取干燥恒重的芦丁标准品0.0752g，用30％乙醇溶解并定容至250ml，摇匀得浓度为0.3008g/L的标准液。
2.工作曲线的测定分别取上述芦丁标准溶液0.4、0.8、1.6、2.4、3.2ml于5只10ml容量瓶中，用30％乙醇补充至5ml，加入0.28ml 5％亚硝酸钠，摇匀，放置5min后，加入0.28ml 10％硝酸铝，6min后加入2ml 1mol/L NaOH，混匀，用30％乙醇稀释至刻度，10min后于510nm处比色测定，试剂为空白参比。
3.黄酮含量测定称取含总黄酮的提取物0.1000g，用30％乙醇溶液溶解并定容至100ml，摇匀得浓度为1.000g/L的溶液，移取1ml溶液于10ml容量瓶中，按上面2方法操作，测定吸光度，以工作曲线所得标准方程计算黄酮含量。
根据本发明，本发明的药物组合物或提取物可通过口服或非肠道途径给药。适于口服给药的剂型举例讲有片剂，胶囊，溶液，悬浮液，颗粒剂或丸剂等。适于非肠道途径如静脉，皮下或肌内给药的剂型举例讲有注射液。
下面的实施例用来进一步说明本发明，但其不意味着对本发明的任何限制。
实施例1
旋复花，代赭石，竹叶和淡豆豉混合物的总黄酮提取物制备制备方法旋复花2000g、代赭石2000g、竹叶1000g、淡豆豉1000g，加入70％乙醇回流提取3遍(V/W＝6∶1)，过滤、减压浓缩，冷冻干燥得到提取物784g。用水分散成悬浮状溶液(提取物与水的重量比为1∶1.5)，石油醚萃取4遍(石油醚与悬浮溶液的体积比为1∶1)，弃去石油醚层，水层用水进一步分散(药材∶水(1∶1))，离心，弃去沉淀；水层采用AB-8大孔树脂(每4L树脂的上样量相当于3kg药材)水洗两个柱体积，弃去水洗脱液，70％乙醇洗脱至洗脱液呈淡黄色，70％乙醇洗脱液减压浓缩烘干(50℃)，得到含总黄酮的提取物133g，产率为2.22％。用上面所述总黄酮测定方法和/或比色法测得实施例1所制备提取物中总黄酮含量为76.03重量％。
实施例2实施例1提取物的抗抑郁作用评价实验材料实验动物雄性昆明系小鼠，体重18-22g，购自本院实验动物中心；雄性SPF级CD-1小鼠，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。雄性SPF级Wistar大鼠，体重160-180g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。均饲养于本院实验动物中心。
受试样品实施例1提取物、去甲丙米嗪(DIM，SIGMA公司)、丙咪嗪(IMI，SIGMA公司)。
实验仪器玻璃量筒，自制小鼠悬尾实验观察箱，秒表等。
实验方法及结果小鼠给药方法将小鼠50只随机分为五组，分别为空白对照组、DIM组、实施例1提取物大、中、小剂量组，每组10只(或12只)。一次急性给药后测试，其中DIM组或IMI组动物腹腔注射0.5小时后测试，其他四组均灌胃给药1小时后测试(空白对照组给服蒸馏水)。
大鼠给药方法将大鼠40只随机分为五组，分别为空白对照组、DIM组、实施例1提取物大、中、小剂量组，每组8只。一次急性给药后测试，其中DIM组动物腹腔注射0.5小时后测试，其他四组均灌胃给药1小时后测试(空白对照组给服蒸馏水)。
小鼠强迫游泳试验根据Porsolt建立的方法，将动物放入高20cm，直径12cm，水深10cm的量筒，观察6分钟，记录后4分钟的不动时间。结果见表1。
小鼠悬尾试验根据Lucien Steru等建立的方法本室改进，用夹子将小鼠尾端20mm处固定，使其呈倒悬状态，观察6分钟，记录后4分钟的不动时间。结果见表2。
大鼠强迫游泳试验根据Porsolt建立的方法。将大鼠置于盛有的自来水的玻璃缸(直径18cm，高40cm)中，水深23cm，水温28℃，游泳15分钟后取出置于红外线电暖炉前，用干布将动物身体上的水分擦拭后烤干。给药后1小时，再次将大鼠放入上述同等条件的水缸中，累计观察大鼠在5分钟内的不动时间。阳性对照药丙米嗪在实验前30分钟腹腔注射。结果见表3。
小鼠5-HTP甩头试验给药后1小时(其中阳性对照药IMI30分钟)后，腹腔注射5-HTP120mg/kg，即刻开始记录20min内小鼠甩头次数。结果见表4。
数据处理所有数据以X±SD表示，组间差异用t检验。
表1 实施例1提取物对小鼠强迫游泳实验不动时间的影响
注与空白组比较，*P＜0.05 **P＜0.01表2 实施例1提取物对小鼠悬尾实验不动时间的影响
注与空白组比较，*P＜0.05 **P＜0.01表3 实施例1提取物对大鼠强迫游泳试验不动时间的影响
注与空白组比较，*P＜0.05
表4 实施例1提取物对小鼠5-HTP甩头试验的影响
注与空白组比较，*P＜0.05 **P＜0.01结论研究表明，实施例1的总黄酮提取物可以显著缩短小鼠强迫游泳试验、小鼠悬尾试验、大鼠强迫游泳试验的不动时间，显著增加小鼠5-HTP试验的甩头次数。显示其具有抗抑郁作用。
权利要求
1.旋覆花，代赭石，竹叶和淡豆豉的提取物，其含有50-90重量％总黄酮。
2.一种产品或药物组合物，其包括由旋覆花，代赭石，竹叶和淡豆豉得到的提取物及药用载体，其中所述提取物含50-90重量％的总黄酮。
3.由旋覆花，代赭石，竹叶和淡豆豉得到的提取物在制备用于提取物的产品或药物中用途，其中所述提取物含50-90重量％总黄酮。
4.权利要求1的提取物，其含有76.03重量％总黄酮。
5.权利要求2的产品或药物组合物，其中所述提取物含有76.03重量％总黄酮。
6.权利要求3的产品或药物组合物，其中所述提取物含有76.03重量％总黄酮。
全文摘要
本发明涉及由旋复花、代赫石、竹叶和淡豆豉得到的提取物，其含有50－90重量％总黄酮，及其在抗抑郁方面的用途。
文档编号A61P25/24GK1660154SQ200410006049
公开日2005年8月31日 申请日期2004年2月27日 优先权日2004年2月27日
发明者李云峰, 张有志, 于能江, 袁莉, 赵毅民, 肖文彬, 罗质璞 申请人:中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所