专利名称：硝卡芥脂质体及其制备方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，确切地说它是一种硝卡芥脂质体(包括前体脂质体)及其制备方法。
背景技术：
硝卡芥Nitrocaphane别名消瘤芥，邻丙氨酸硝卡芥、硝卡介化学名2-[双(β-氯乙基)胺甲基]-5-硝基苯丙氨酸。分子式C14H19C12NxO4。分子量364.23。
上市制剂有粉针剂；规格为20mg、40mg。为淡棕黄色疏松块状物或粉块。药理毒理为溶肉瘤素脂肪族的异构体，为我国开发的烷化剂。为细胞周期非特异性药物，抑制DNA和RNA的合成，对DNA的合成更为显著。对癌细胞分裂各期均有影响，对增殖和非增殖细胞都有作用。对多种动物肿瘤有抑制作用。抗瘤谱广，毒性较低。静脉注射后，肾，肝和肺含量较高。能通过血脑屏障。肿瘤中含量高。口服吸收快，主要经尿和粪排泄。药动学注射后在血中维持时间较长，24小时后减少54％。分布以胆囊和肾脏最多，肿瘤，肝，肺次之，脑中最少。能通过血脑屏障，肿瘤内含量高。静脉注射1小时后药物分布至全身各个组织，口服24小时后药物分布至全身。主要通过肾脏排泄，24小时后排出53％。适应证肺癌，恶性淋巴瘤，头颈部癌，子宫颈癌及癌性腔积液。硝卡芥、顺铂腹腔内灌注治疗癌性腹水29例疗效观察肿瘤学杂志2004年03期 彭大为，刘英平硝卡芥加顺铂腹腔内序贯注入治疗癌性腹水的近期疗效及不良反应。[方法]全组29例，原发疾病为胃癌12例，胃恶性淋巴瘤1例，肝癌10例，肠癌3例，胰腺癌、卵巢癌、宫颈癌各1例，所有积液均为渗出性。先抽腹水，然后将硝卡芥80mg、顺铂60mg分别加生理盐水30～50mg序贯注入腹腔，每周1次，直到腹水消失或量少抽不出或病情恶化为止。[结果]29例共行87次治疗，其中治疗1次3例、2次9例、3次12例、4次5例、5次2例。疗效评价CR13例，PR9例，S3例，P4例，有效率(CR+PR)75.9％(22/29)，好转率(CR+PR+S)86.2％(25/29)。不良反应为I、II度骨髓抑制和消化道反应。硝卡芥联合白细胞介素-II治疗恶性胸腔积液临床疗效现代肿瘤医学2004年05期 易建莉 观察硝卡芥联合白细胞介素-II治疗恶性胸腔积液的疗效及不良反应。方法对28例恶性胸腔积液患者采用常规胸腔穿刺抽液术，尽量抽尽胸水后，于胸腔内注入硝卡芥80mg+生理盐水20ml，然后注入白细胞介素-II100万μ+生理盐水20ml，每周1次，4周后评价疗效。结果28例患者CR4例(14.3％)，PR14例(50％)，总有效率(CR+PR)64.3％。主要不良反应为胸痛8例(28.6％)，低热7例(25％)。结论胸腔内注入硝卡芥联合白细胞介素-II能有效地控制恶性胸腔积液，临床应用方便、经济，毒副反应小，具有临床应用价值。硝卡芥治疗恶性腹水的临床观察中华实用中西医杂志2004年18期 唐朝晖，唐朝阳 探讨恶性腹水的有效治疗方法。方法67例恶性腹水病人随机分为2组，35例序贯治疗组分别于1、2、3周抽液以后腹腔内注入硝卡芥、5-Fu、顺铂，单独治疗组32例每周抽液后腹腔内注入5-Fu，比较两组间的疗效及不良反应。结果序贯治疗组有效率为72.97％，单独治疗有效率为46.88％，两组间的疗效有显著性差异，但不良反应没有显著性差异。结论序贯使用硝卡芥、5-Fu、顺铂治疗恶性腹水疗效较好，副作用小，有较高的临床使用价值。硝卡芥聚乳酸毫微粒冻干针剂；生物利用度低，而将硝卡芥制成脂质体和前体脂质体未见推荐。
发明内容
本发明的目的是提供硝卡芥脂质体和前体脂质体及其制备方法，作为膜材的磷脂，本身无毒，而且能增强人体免疫力，具有许多保健功能。
本发明是由硝卡芥与磷脂加胆固醇，也可不加胆固醇等辅料制备而成的(纳米)脂质体。制备方法可以采用前体脂质体法、乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸发法、PH梯度法、挤出法、机械法等制备脂质体和纳米脂质体的各种方法。机械法可为乳匀机、高压乳匀机、纳米机、匀浆机、高压微射流等各种机械设备制备脂质体的方法。制备脂质体的磷脂，可以是大豆卵磷脂、氢化大豆磷脂，也可以是合成磷脂，由乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸发法、挤出法、机械法制备硝卡芥脂质体，其组成包括硝卡芥磷脂、胆固醇、VE等辅料。其中磷脂与硝卡芥的重量比为0.1∶1～50∶1，胆固醇与磷脂的重量比为0～2∶1。
通过前体脂质体法制备脂质体的处方为硝卡芥、支持剂、磷脂、胆固醇、VE等。磷脂与硝卡芥的重量比为0.1∶1～50∶1，胆固醇与磷脂的重量比为0～2∶1，支持剂与磷脂的比例为0.01∶1～500∶1。支持剂可以是山梨醇、甘露醇、蔗糖、氯化钠、水溶性淀粉、右旋糖苷、葡萄糖、乳糖等所用可用于冻干支持剂的药用材料或药用辅料。制备前脂质体的方法，可以采用减压旋转薄膜法、冻干法等各种造粒方法和干燥及包衣方法。前体脂质体使用前加水或缓冲液通过振摇、搅拌、超声水化形成脂质体。
用硝卡芥脂质体(或前体脂体)可以制成注射液、冻干粉针、输液乳剂、微乳剂、粉针剂等剂型。
本发明的优点是利用磷脂作膜材，将硝卡芥制成脂质体，磷脂能与硝卡芥发挥协同和辅助作用，提高硝卡芥的疗效。
具体实施例方式本发明的具体制备方法，由下列实施实例举例说明，但本发明的保护范围，不局限于此。
实施例1乙醇注入法制备硝卡芥脂质体取大豆磷脂，胆固醇，VE加无水乙醇溶解后注入硝卡芥水溶液中，恒温高速搅拌，减压蒸发除去乙醇，过微孔滤膜整粒，即得硝卡芥脂质体，包封率可达83.1％。
实施例2薄膜分散法制备硝卡芥脂质体取大豆磷脂，胆固醇，VE用15ml氯仿溶解于150ml茄形瓶中，在旋转薄膜蒸发器上减压成膜并除尽有机溶剂，加10ml硝卡芥水溶液水化，过微孔滤膜整粒，得硝卡芥脂质体，包封率可达68.5％。
实施例3反相蒸发法制备硝卡芥脂质体称取大豆磷脂、胆固醇、VE加5ml氯仿使溶解，再加入10ml乙醚，然后加入15ml硝卡芥的磷酸盐缓冲液中，浴式超声使形成均一单相体系，减压蒸发去除氯仿乙醚至凝胶形成，继续减压蒸发5～10分钟，涡旋振荡至水性悬浊液即脂质体形成。包封率可达51.3％。
实施例4喷雾干燥法制备硝卡芥前体脂质体硝卡芥加水，0.1N NaOH调PH使溶解，加入乳糖和EDTA并使溶解(A液)。另取大豆磷脂、胆固醇、VE溶于100ml无水乙醇中(B液)。将B液在搅拌下缓慢加入A液中，喷雾干燥制粒，过筛，即得硝卡芥脂质体。
实施例5由前体脂质体制备硝卡芥脂质体。取实施例7制得的前体脂质体2g，，加水10ml振摇10分钟并水化，即得硝卡芥脂质体，显微镜放大1000倍观察可看到脂质体。
实施例6冷冻干燥法制备硝卡芥前体脂质体大豆磷脂、胆固醇、适量VE加无水乙醇溶解后在高速搅拌缓慢注入硝卡芥水溶液中，减压蒸发除去乙醇。冷冻干燥24小时，得硝卡芥前体脂质体。
实施例7将硝卡芥脂质体过0.22μm微孔滤膜灭菌，充氮气，灌封，得硝卡芥脂质体注射液。
实施例8将硝卡芥脂质体加入10％蔗糖，过0.22μm微孔滤膜灭菌，分装，冷冻干燥，得粉针剂。
本发明不限于以上所述的实施例。
权利要求
1.硝卡芥脂质体及其制备方法，其特征在于由硝卡芥与磷脂等辅料制备而成的脂质体或前体脂质体。
2.根据权利要求1所述的硝卡芥脂质体，其特征在于其中可以加入胆固醇和支持剂。
3.根据权利要求1所述的硝卡芥脂质体或前体脂质体，其特征在于膜材磷脂可以采用天然磷脂，也可以是采用氢化大豆磷脂和合成磷脂等。
4.根据权利要求1所述的硝卡芥脂质体或前体脂质体，其特征在于磷脂与药物的重量比为0.1∶1～50∶1。且硝卡芥活性成份20-400mg。
5.根据权利要求2述的硝卡芥脂质体或前体脂质体，其特征在于支持剂可以山梨醇、甘露醇、蔗糖、乳糖等，其中支持剂与磷脂的比例为0.01∶1～500∶1。
6.根据权利要求1所述的硝卡芥脂质体或前体脂质体，其特征在于用该脂质体或前体脂质体可制得注射液、冻干粉针、输液等剂型。
7.一种如权利要求1所述的硝卡芥脂质体的制备方法，其特征在于制备方法可以采用前体脂质体法、乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸发法、挤出仪、机械法，PH梯度法等；机械法包括使用均质机、乳匀机、挤出机、纳米机、匀浆机、高压微射流等各种机械设备制备脂质体的方法。
8.一种如权利要求7所述的硝卡芥前体脂质体的制备方法，其特征在于采用前体脂质体法制备硝卡芥脂质体，先制备前体脂质体，由制备的前体脂质体在使用前形成脂质体，或前体脂质体制备成注射液、冻干粉针、输液等。
全文摘要
本发明是硝卡芥脂质体及其制备方法，提高制剂的稳定性。由硝卡芥与磷脂、胆固醇等辅料制备而成的脂质体或前体脂质体，其中还可加入支持剂等辅料。膜材磷脂可以采用天然磷脂或合成磷脂，磷脂与药物的重量比为0.1∶1～50∶1。制备方法可以采用乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸发法、挤出法、机械法，支持剂可以是山梨醇、甘露醇、蔗糖、乳糖等。支持剂与磷脂的比例为0.01∶1～500∶1。为细胞周期非特异性药物，抑制DNA和RNA的合成，对DNA的合成更为显著。对癌细胞分裂各期均有影响，对增殖和非增殖细胞都有作用。对多种动物肿瘤有抑制作用。抗瘤谱广，毒性较低。
文档编号A61P35/00GK1795847SQ200410104449
公开日2006年7月5日 申请日期2004年12月21日 优先权日2004年12月21日
发明者胡才忠 申请人:胡才忠