专利名称：一种纳米乌骨藤苷元注射制剂及其制备方法
技术领域：
本发明属于制药技术领域，具体涉及一种纳米乌骨藤苷元注射制剂及其制备方法。
背景技术：
乌骨藤又名通关藤，分布于我国云南、贵州和广西等地区。消癌平注射液[《国家中成药标准汇编》(口腔肿瘤儿科分册)442]是通关藤浸膏经过制备而成的，具有清热解毒、化痰软坚的功效，用于食道癌、胃癌、肺癌、肝癌，并可配合放疗、化疗的辅助治疗。自上市以来，在临床上虽然取得了一定的治疗效果。但是存在许可问题制备方法为简单的水提醇沉，因而药物中的有效成分不明确，药物的不良反应多；含量测定的指标成分为绿原酸，但是绿原酸含量的高低不和治疗作用的好坏成正比；药物在癌症病灶部位的量很小，很难达到有效的血药浓度，所以治疗效果并不是很理想。所以，如何提高现有消癌平注射液的疗效，成了人们急待解决的问题。
纳米中药主要是指运用纳米技术制造的，粒径小于100纳米的中药有效成分、有效部位、原药及复方制剂。纳米中药的制备是研究纳米中药最基础的，也是最重要的问题。将纳米技术引入中药的研究时，必须考虑中药组方的多样性、中药成分的复杂性，针对不同的药物，在进行纳米化时必须采用不同的技术路线。纳米中药与中药新制剂关系十分密切，如何在中药理论的指导下进行纳米中药新制剂的研究，将中药制成高效、速效、长效、剂量小、低毒、服用方便的现代制剂，也是进行中药纳米化时必须考虑的问题。
现代中药的研究就是要在继承中药传统的基础上，充分利用现代科技手段，使中药具有先进的生产工艺和现代剂型，做到“有效、安全、可控”，将纳米技术应用于中药领域是现代中药发展的重要方向之一。纳米中药一般不是简单地将中药材进行粉碎至纳米量级，而是针对组成中药方剂的某味药的有效部位甚至是有效成分进行纳米技术加工处理，赋予传统中药以新的功能，如提高生物利用度，增强靶向性；降低毒副作用；呈现新的药效，拓宽原药的适应证；丰富中药的剂型选择；减少用药量，节省中药资源等。
查阅文献和专利，未检索到有关于纳米乌骨藤苷元注射制剂等方面的资料。
发明内容
基于上述原因，本发明研究人员经过大量实验研究，从乌骨藤中提取分离出了一种具有抗癌作用的有效成分乌骨藤苷，其水解后得到的乌骨藤苷元具有更强的抗癌活性。乌骨藤苷元为脂溶性成分，为了增强其的水溶性和抗癌作用，本发明研究人员将其制备成纳米乌骨藤苷元注射制剂。药理实验表明，本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂具有很好的靶向性，可以在癌症的病灶部位形成较高的血药浓度，疗效比现有消癌平注射液有显著提高；质量标准考察实验结果表明，本发明纳米注射制剂分散性好、包封率高、载药量大；安全性评价实验结果表明，本发明具有很好的注射给药安全性。
本发明的一个目的是公开一种纳米乌骨藤苷元注射制剂。
本发明的另一个目的是公开上述纳米乌骨藤苷元注射制剂的制备方法。
本发明通过以下技术方案实现一、工艺制法(1)主药乌骨藤苷元的提取、纯化取乌骨藤干品，粉碎，过20目筛，用70-90％乙醇加热回流提取2-4次，每次1-3小时，提取液减压浓缩得浸膏；浸膏加水使溶解，用石油醚萃取3-5次；再用氯仿萃取3-5次，合并氯仿液，滤过，蒸干，用丙酮溶解，慢慢加入石油醚直至沉淀不再析出，滤取沉淀；沉淀用0.01-0.2mol/l硫酸与相同体积的甲醇溶液加热回流2-4小时，放冷，调节pH值至5.0-6.0，减压浓缩，浓缩液用醋酸乙酯萃取3-5次，合并萃取液蒸干，加1.0-2.5％氢氧化钾甲醇溶液加热回流5-7小时，放冷，调节pH值至7.0-7.2，回流液用水饱和正丁醇萃取3-5次，减压浓缩，浓缩液用石油醚-丙酮溶液萃取3-5次，合并萃取液蒸干，即得主药乌骨藤苷元，其中乌骨藤苷元含量≥90％。
(2)主药混悬液的制备取主药1重量份，脂质10重量份，混合后加热熔融作为油相；取乳化剂4重量份，加1重量份助乳化剂，在高速搅拌条件加入65-75℃的蒸馏水中，待完全熔融作为水相；将油相缓慢加入水相中，持续搅拌1小时后超声分散，室温，频率45-50Hz，超声时间5-8分钟，即得。
(3)制剂制备水针制剂的制备将上述主药混悬液加入适量注射用水和稳定剂，调pH值为6.5-7.5，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成每支5ml的水针制剂。
输液制剂的制备将上述主药混悬液加入适量注射用水和稳定剂，加入氯化钠或葡萄糖调等渗，调pH值为6.5-7.5，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成每瓶100ml的输液制剂。
粉针制剂的制备将上述主药混悬液加入适量注射用水，再加入水溶性注射用药用辅料，调pH值为6.5-7.5，用0.22μm微孔滤膜过滤，干燥，制备成粉针制剂。
上述制备方法中，脂质、乳化剂、助乳化剂统称为载体。
上述制备方法中，脂质为三硬脂酸甘油酯、三棕榈酸甘油酯、三肉豆蔻酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、三窬酸甘油酯、Witepsol W35、Witepsol H35、Witepsol H42、单硬脂酸甘油酯、硬脂酸、棕榈酸中的一种或几种；优选为三月桂酸甘油酯。
上述制备方法中，乳化剂为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂及磷脂酰胆碱的一种；优选为蛋黄卵磷脂。
上述制备方法中，助乳化剂为吐温-80。
上述制备方法中，所述的稳定剂为聚乙烯吡咯烷酮。
上述制备方法中，所述的水溶性注射用药用辅料选自甘露醇、右旋糖苷、果糖、葡聚糖、乳糖中的一种或几种。
在本发明药物的制备过程中，本发明研究人员发现，并不是将主药简单的制备成纳米药物就具有靶向作用；载体在靶向作用中起着至关重要的作用，载体的不同会使药物的靶向作用出现3种情况无靶向作用、弱的靶向作用、强的靶向作用。为了使得本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂具有好的靶向作用，同时分散性好、包封率高、载药量大，本发明研究人员对制备方法中常用的脂质、乳化剂、助乳化剂进行了优选。上述每种方法中所用的脂质、乳化剂、助乳化剂的用量和种类就是本发明研究人员优选得到的，最终使得本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂具有很好的治疗作用。
二、乌骨藤苷与乌骨藤苷元的药效学比较在无菌条件下，取荷瘤动物，处死固定，用碘酊及酒精消毒操作部位皮肤，然后切开，选择生长良好的瘤块组织置组织匀浆器中，按1∶2的比例加入无菌生理盐水制成细胞悬液，于实验小鼠腋窝皮下接种0.2ml，每批接种30只，接种后次日随机分组，为模型对照组、乌骨藤苷组、乌骨藤苷元组，每组10只，腹腔注射给予相同量药物。每日1次，连续10天，末次给药后处死小鼠，称体重，摘瘤称重，计算抑制率。肿瘤生长抑制率(％)＝(对照组平均瘤重-治疗组平均瘤重)/对照组平均瘤重×100％。结果见表1。
表1 对小鼠移植S180的抑制作用(X±S)
注与对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与乌骨藤苷组比较#P＜0.05。
由上表实验结果可以看出，乌骨藤苷组、乌骨藤苷元组对小鼠移植肿瘤S180有明显的抑制作用，且乌骨藤苷元组药理作用好于乌骨藤苷组。
三、载体的优选本发明优选实验以药物在靶向组织中的浓度为指标。具体实验方法为取癌症模型大鼠，体重约180-220g，雌雄不限。静脉注射给药，30min后立即断头处死。取血浆离心10min(2000rpm)，取血清分析测定含量。取出靶向组织用生理盐水轻轻冲洗，用滤纸吸干，血管剥离干净后取约0.5g，称重。然后按组织∶生理盐水为1∶1.5(W/V)的比例匀浆，离心10min(2000rpm)，取上清液测定乌骨藤苷元的含量。将血清中的乌骨藤苷元绝对含量记为1，计算组织相对于血清中乌骨藤苷元的相对含量。
1、不同脂质对主药靶向作用的影响制备一系列药物，其中主药、乳化剂、助乳化剂的种类和用量相同，脂质按下表的设计进行安排。测定血清和靶向组织中的药物浓度。实验结果见表2。
为了比较方便，将测定的血清中的浓度计为1。
表2 不同脂质对主药靶向作用的影响
由上述实验结果可以看出，不同脂质对主药靶向作用有影响，均可以增加主药的靶向作用，其中三月桂酸甘油酯作用效果最好。
2、不同乳化剂对主药靶向作用的影响制备一系列药物，其中主药、脂质、助乳化剂的种类和用量相同，乳化剂按下表的设计进行安排。测定血清和靶向组织中的药物浓度。实验结果见表3。
表3 不同乳化剂对主药靶向作用的影响
由上述实验结果可以看出，不同乳化剂对主药靶向作用有影响，均可以增加主药的靶向作用，其中蛋黄卵磷脂的作用效果最好。
3、不同助乳化剂对主药靶向作用的影响制备一系列药物，其中主药、脂质、乳化剂的种类和用量相同，助乳化剂按下表的设计进行安排。测定血清和靶向组织中的药物浓度。实验结果见表4。
表4 不同助乳化剂对主药透过血脑屏障的影响
由上述实验结果可以看出，不同助乳化剂对主药靶向作用有影响，均可以增加主药的靶向作用，其中吐温-80的作用效果最好。
4、乳化剂和助乳化剂用量比例的选择本发明研究人员发现，脂质、乳化剂和助乳化剂的用量比例对于粒径有很大影响，因而对其进行了优选。
4.1乳化剂和助乳化剂用量比例的选择制备一系列药物，其中主药、脂质的种类和用量相同，乳化剂和助乳化剂按下表的设计进行安排。测定了500个粒径，计算平均粒径。结果见表5。
表5 乳化剂和助乳化剂用量比例的选择
由上述实验结果可以看出，当乳化剂和助乳化剂的用量比例为4∶1时，粒径最小。
4.2脂质和乳化剂、助乳化剂用量比例的选择制备一系列药物，脂质和乳化剂、助乳化剂的用量按下表的设计进行安排。测定了500个粒径，计算平均粒径。结果见表6。
表6 脂质和乳化剂、助乳化剂用量比例的选择
由上述实验结果可以看出，当脂质和乳化剂、助乳化剂用量为2∶1时，粒径最小。
二、质量标准考察标准依据《中国药典》2005年版附录XIX E“微囊、微球与脂质体制剂指导原则”中的方法。H-7000型透射电镜仪(日本Hitachi公司)；Zetamaster光子相关光谱仪(英国Malvern公司)；LC-10A高效液相色谱仪(日本岛津)；TGL-18G型台式高速离心机；5批本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂由广东天之骄药物开发有限公司提供。
1、形态观察及粒径将5批本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂在透射电镜下进行形态观察，可见呈圆球体，大小较均匀，表面光滑，无粘连。根据光学显微照片测定了500个，平均粒径为52±25nm，最大粒径为95nm，最小粒径为14nm，且粒径分布符合正态分布规律。
2、包封率和载药量测定采用薄层扫描法，以乌骨藤苷元为指标进行含量测定。
用下述公式计算包封率和载药量包封率(％)＝(投药量-游离药物量)/投药量×100％；载药量(％)＝(投药量-游离药物量)/纳米药物的重量×100％。
结果5批本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂的包封率为87.0-95.0％，载药量为6.0-7.0％。
3、稳定性考察将本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂分别置于小瓶内，密封。于冰箱(3-5℃)、室温(20-25℃)和37℃(RH75％)的环境中放置，于0、1、2和3月观测纳米药物的外观、大小、再分散性等。
结果平均粒径和颜色均未见明显变化，不同条件下的药物再分散性保持良好，无聚合现象的发生。结果见表7。
表7 稳定性实验结果
三、药理实施例为了考查本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂的治疗效果，本发明研究人员对本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂进行了如下的药效学试验。
通关藤药材均为市售的同一批。阳性对照药消癌平注射液按照[《国家中成药标准汇编》(口腔肿瘤儿科分册)442]中消癌平注射液项下制法制备而成，规格为1g/ml；本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂按上述方法制备而成；样品均由广东天之骄药物开发有限公司提供。
1、靶向组织中药物含量的测定取胃癌、肺癌、肝癌模型大鼠各10只，体重约180-220g，雌雄不限。随机分为普通乌骨藤苷元注射液组、本发明纳米乌骨藤苷元注射剂组。静脉注射给药，30min后立即断头处死。取血浆离心10min(2000rpm)，取血清分析测定含量。取出胃、肺、肝组织用生理盐水轻轻冲洗，用滤纸吸干，血管剥离干净后取约0.5g，称重。然后按组织∶生理盐水为1∶1.5(W/V)的比例匀浆，离心10min(2000rpm)，取上清液测定乌骨藤苷元的含量。将血清中的乌骨藤苷元绝对含量记为1，计算不同组织相对于血清中乌骨藤苷元的相对含量。结果见表8。
表8 不同组织中绿原酸的相对含量
由上表实验结果可以看出，普通乌骨藤苷元注射液和本发明纳米乌骨藤苷元注射剂在大鼠血清中药物浓度相当，但是本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂在靶向组织(胃、肺、肝)中药物浓度显著提高，说明本发明纳米制剂具有一定的靶向性。
2、对小鼠移植胃癌的抑制作用在无菌条件下，取荷瘤传代鼠，消毒腹部皮肤，用无菌空注射器抽吸腹水，以无菌生理盐水作1∶2倍的稀释，取雌性小鼠30只，每只鼠接种0.2ml，接种后次日随机分组，为模型对照组、消癌平注射液组、本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂组，每组10只，腹腔注射给药。每日1次，连续10天，记录小鼠存活时间，计算生命延长率。结果见表9。
表9 对小鼠移植胃癌的抑制作用(X±S)
注与模型对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
由上表实验结果可以看出，本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂对小鼠移植胃癌有明显的抑制作用，且药理作用明显好于现有的消癌平注射液。
3、对小鼠移植P388的抑制作用取雌性小鼠30只，接种P388方法同上，接种后次日随机分组，为模型对照组、消癌平注射液组、本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂组，每组10只，腹腔注射给药。每日1次，连续10天，记录小鼠存活时间，计算生命延长率。结果见表10。
表10 对小鼠移植P388的抑制作用(X±S)
注与模型对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
由上表实验结果可以看出，本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂对小鼠移植P388有显著的抑制作用，且药理作用明显好于现有的消癌平注射液。
四、安全性评价1、血管刺激性考察取健康大耳家兔5只，将动物固定于兔箱内，用酒精将皮肤消毒后，于右侧耳缘静脉处注射本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂，于另一侧对应部位注射同一体积的等渗葡萄糖水作为对照。每日注射1次，连续3次，观察兔耳缘静脉反应。于末次给药24h后将兔放血处死，取下两耳，用10％甲醛溶液浸泡，距注射部位1-4cm处，解剖取出静脉，做组织切片检查，观察注射部位的反应。
结果试验过程中，肉眼观察两耳静脉注射部位处，未见红肿、热等刺激表现。表明给药组切片部位组织形态无明显差异，未见本品毒性所致的病理形态学改变(血管结构正常，无内皮细胞损伤，无血栓形成及其他病理性变化)。
2、溶血毒性考察2％红细胞混悬液的制备取兔耳缘静脉取血10-20ml，放入盛有玻璃珠的锥形瓶中，振摇10分钟，除去纤维蛋白原，使成脱纤血。加10倍量的生理盐水溶液，摇匀，离心，除去上清液，沉淀的红细胞再用生理盐水溶液洗涤2-3次，至上清液不呈红色时为止。将所得的红细胞用用生理盐水配成浓度为2％的混悬液，即得。
试验方法取试管6支，按下表中的配比量依次加入2％红细胞混悬液和生理盐水溶液，混匀，于37℃恒温箱中放置30分钟，分别加入不同量的药液(以第6管为空白对照)，摇匀后，置37℃恒温箱中，开始每隔15分钟观察1次，1小时后，每隔1小时观察1次，共观察2小时。
表11 溶血试验设计
结果以第3试管为准，各管均未染有红色，显微镜下观察未见有红细胞破裂，说明本品不溶血，安全性好。
3、急性毒性实验取健康小鼠40只，体重18-22g，，雌雄各半。分为消癌平注射液组、本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂组，尾静脉给药，给药剂量按照人给药剂量的50倍，按照体表面积换算成小鼠给药剂量，每天给药1次，连续7天，观察小鼠死亡情况，记录数据，实验结果见表12。
表12 小鼠急性毒性实验
通过上述实验表明，本发明纳米乌骨藤苷元注射制剂具有很好的安全性。
五、制备实施例实施例1取乌骨藤干品，粉碎，过20目筛，用70％乙醇加热回流提取4次，每次1小时，提取液减压浓缩得浸膏；浸膏加水使溶解，用石油醚萃取5次；再用氯仿萃取3次，合并氯仿液，滤过，蒸干，用丙酮溶解，慢慢加入石油醚直至沉淀不再析出，滤取沉淀；沉淀用0.01mol/l硫酸与相同体积的甲醇溶液加热回流4小时，放冷，调节pH值至6.0，减压浓缩，浓缩液用醋酸乙酯萃取3次，合并萃取液蒸干，加2.5％氢氧化钾甲醇溶液加热回流5小时，放冷，调节pH值至7.2，回流液用水饱和正丁醇萃取5次，减压浓缩，浓缩液用石油醚-丙酮溶液萃取3次，合并萃取液蒸干，即得主药乌骨藤苷元；其中乌骨藤苷元含量为95.6％。
实施例2取乌骨藤干品，粉碎，过20目筛，用90％乙醇加热回流提取2次，每次3小时，提取液减压浓缩得浸膏；浸膏加水使溶解，用石油醚萃取3次；再用氯仿萃取5次，合并氯仿液，滤过，蒸干，用丙酮溶解，慢慢加入石油醚直至沉淀不再析出，滤取沉淀；沉淀用0.2mol/l硫酸与相同体积的甲醇溶液加热回流2小时，放冷，调节pH值至5.0，减压浓缩，浓缩液用醋酸乙酯萃取5次，合并萃取液蒸干，加1.0％氢氧化钾甲醇溶液加热回流7小时，放冷，调节pH值至7.0，回流液用水饱和正丁醇萃取3次，减压浓缩，浓缩液用石油醚-丙酮溶液萃取5次，合并萃取液蒸干，即得主药乌骨藤苷元；其中乌骨藤苷元含量为94.5％。
实施例3取乌骨藤干品，粉碎，过20目筛，用80％乙醇加热回流提取3次，每次2小时，提取液减压浓缩得浸膏；浸膏加水使溶解，用石油醚萃取4次；再用氯仿萃取4次，合并氯仿液，滤过，蒸干，用丙酮溶解，慢慢加入石油醚直至沉淀不再析出，滤取沉淀；沉淀用0.1mol/l硫酸与相同体积的甲醇溶液加热回流3小时，放冷，调节pH值至5.5，减压浓缩，浓缩液用醋酸乙酯萃取4次，合并萃取液蒸干，加2.0％氢氧化钾甲醇溶液加热回流6小时，放冷，调节pH值至7.1，回流液用水饱和正丁醇萃取4次，减压浓缩，浓缩液用石油醚-丙酮溶液萃取4次，合并萃取液蒸干，即得主药乌骨藤苷元；其中乌骨藤苷元含量为97.3％。
实施例4
取主药1重量份，脂质三月桂酸甘油酯10重量份，混合后加热熔融作为油相；取乳化剂蛋黄卵磷脂4重量份，加1重量份助乳化剂吐温-80，在高速搅拌条件加入65℃的蒸馏水中，待完全熔融作为水相；将油相缓慢加入水相中，持续搅拌1小时后超声分散，室温，频率50Hz，超声时间8分钟，即得主药混悬液。
实施例5取主药1重量份，脂质三月桂酸甘油酯10重量份，混合后加热熔融作为油相；取乳化剂蛋黄卵磷脂4重量份，加1重量份助乳化剂吐温-80，在高速搅拌条件加入75℃的蒸馏水中，待完全熔融作为水相；将油相缓慢加入水相中，持续搅拌1小时后超声分散，室温，频率45Hz，超声时间5分钟，即得主药混悬液。
实施例6取主药1重量份，脂质三月桂酸甘油酯10重量份，混合后加热熔融作为油相；取乳化剂蛋黄卵磷脂4重量份，加1重量份助乳化剂吐温-80，在高速搅拌条件加入70℃的蒸馏水中，待完全熔融作为水相；将油相缓慢加入水相中，持续搅拌1小时后超声分散，室温，频率45Hz，超声时间7分钟，即得主药混悬液。
实施例7将上述主药混悬液加入适量注射用水和稳定剂聚乙烯吡咯烷酮，调pH值为6.5，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成每支5ml的本发明水针制剂。
实施例8将上述主药混悬液加入适量注射用水和稳定剂聚乙烯吡咯烷酮，加入氯化钠或葡萄糖调等渗，调pH值为7.5，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成每瓶100ml的本发明输液制剂。
实施例9将上述主药混悬液加入适量注射用水，再加入甘露醇、右旋糖苷，调pH值为7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，干燥，制备成本发明粉针制剂。
实施例10将上述主药混悬液加入适量注射用水，再加入果糖、乳糖，调pH值为6.8，用0.22μm微孔滤膜过滤，干燥，制备成本发明粉针制剂。
实施例11将上述主药混悬液加入适量注射用水，再加入葡聚糖，调pH值为7.2，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，制备成本发明冻干粉针制剂。
权利要求
1.一种纳米乌骨藤苷元注射制剂，其特征在于它是以乌骨藤中提取的乌骨藤苷元为主药配以载体制成纳米级的主药混悬液得到的注射制剂，其中主药1重量份、载体15重量份；其特征还在于所述的纳米级为14nm-95nm。
2.一种纳米乌骨藤苷元注射制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤(1)主药混悬液的制备取乌骨藤苷元主药1重量份，脂质10重量份，混合后加热熔融作为油相；取乳化剂4重量份，加1重量份助乳化剂，在高速搅拌条件加入65-75℃的蒸馏水中，待完全熔融作为水相；将油相缓慢加入水相中，持续搅拌1小时后超声分散，室温，频率45-50Hz，超声时间5-8分钟，即得；(2)制剂制备水针制剂的制备将上述主药混悬液加入适量注射用水和稳定剂，调pH值为6.5-7.5，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成每支5ml的水针制剂；输液制剂的制备将上述主药混悬液加入适量注射用水和稳定剂，加入氯化钠或葡萄糖调等渗，调pH值为6.5-7.5，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成每瓶100ml的输液制剂；粉针制剂的制备将上述主药混悬液加入适量注射用水，再加入水溶性注射用药用辅料，调pH值为6.5-7.5，用0.22μm微孔滤膜过滤，干燥，制备成粉针制剂。
3.根据权利要求2的一种纳米乌骨藤苷元注射制剂的制备方法，其特征在于，所述的脂质为三月桂酸甘油酯。
4.根据权利要求2的一种纳米乌骨藤苷元注射制剂的制备方法，其特征在于，所述的乳化剂为蛋黄卵磷脂。
5.根据权利要求2的一种纳米乌骨藤苷元注射制剂的制备方法，其特征在于，所述的助乳化剂为吐温-80。
6.根据权利要求2的一种纳米乌骨藤苷元注射制剂的制备方法，其特征在于，所述的脂质和乳化剂、助乳化剂之和的用量为2∶1。
7.根据权利要求2的一种纳米乌骨藤苷元注射制剂的制备方法，其特征在于，所述的乳化剂、助乳化剂的用量为4∶1。
8.根据权利要求2的一种纳米乌骨藤苷元注射制剂的制备方法，其特征在于，所述的稳定剂为聚乙烯吡咯烷酮。
9.根据权利要求2的一种纳米乌骨藤苷元注射制剂的制备方法，其特征在于，所述的水溶性注射用药用辅料选自甘露醇、右旋糖苷、果糖、葡聚糖、乳糖中的一种或几种。
10.根据权利要求2的一种纳米乌骨藤苷元注射制剂的制备方法，其特征在于，还包括以下步骤取乌骨藤干品，粉碎，过20目筛，用70-90％乙醇加热回流提取2-4次，每次1-3小时，提取液减压浓缩得浸膏；浸膏加水使溶解，用石油醚萃取3-5次；再用氯仿萃取3-5次，合并氯仿液，滤过，蒸干，用丙酮溶解，慢慢加入石油醚直至沉淀不再析出，滤取沉淀；沉淀用0.01-0.2mol/l硫酸与相同体积的甲醇溶液加热回流2-4小时，放冷，调节pH值至5.0-6.0，减压浓缩，浓缩液用醋酸乙酯萃取3-5次，合并萃取液蒸干，加1.0-2.5％氢氧化钾甲醇溶液加热回流5-7小时，放冷，调节pH值至7.0-7.2，回流液用水饱和正丁醇萃取3-5次，减压浓缩，浓缩液用石油醚-丙酮溶液萃取3-5次，合并萃取液蒸干，即得主药乌骨藤苷元，其中乌骨藤苷元含量≥90％。
全文摘要
本发明公开了一种纳米乌骨藤苷元注射制剂，它是以乌骨藤中提取的乌骨藤苷元为主药配以载体制成纳米级的主药混悬液得到的注射制剂，其中主药1重量份、载体15重量份。本发明还公开了上述注射制剂的制备方法。药理实验表明，本发明注射制剂具有很好的靶向性，可以在癌症的病灶部位形成很高的血药浓度，疗效有显著提高；质量标准考察实验表明，本发明制剂分散性好、包封率高、载药量大；安全性评价实验表明，本发明具有很好的注射给药安全性。
文档编号A61K9/10GK1907286SQ20051008909
公开日2007年2月7日 申请日期2005年8月5日 优先权日2005年8月5日
发明者张晴龙 申请人:张晴龙