专利名称：：联合优选为神经酰胺与细胞毒性药物的联合疗法的制作方法联合优选为神经酰胺与细胞毒性药物的联合疗法本发明涉及联合疗法，具体涉及通过联合两种或者更多种治疗剂治疗增殖紊乱。现有技术列表下面是被认为与描述本发明领域中技术水平相关的技术列表。Barenholz等人，WO2004/087097;Vento，R.M.等人，Mol.Cell.Biochem.185:7-153(1998);Ogretmen,B.D.等人，J.Biol.Chem，276:24901-24910(2001);HannunY.A.等人，BiochimicaetBiophysicaActa1585:114-125(2002);Ogretmen，B.D.等人，J.Biol.Chem276:24卯1-24910(2001);Mueller,H.和Eppenberger，U.AnticancerRes.16:3845-3848(1996);Senchenkov,A.等人，J.Natl.CancerInst.93:347-357(2001);Z.Cai，Z.等人，J.Biol.Chem.272:6918-6926(1997);CharlesAG.等人，CancerChemotherPharmacol47(5):444-450(2001):MehtaS.等人，CancerChemotherPharmacol46(2):85-92(2000);LucciA.等人，IntJOncol15(3):541誦546(1999);CabotMC.等人，FEBSLett394(2):129画131(1996);LavieT.等人，JBiolChem272(3):1682-1687(1997);LucciA.等人，Cancer86(2):300-311(1999);LucciA.IntJOncol15(3):541-546(1997);Lofgren和Pasher，Chem.Phys.Lipids,20(4):273-284，(1977);Carrer和Maggio，Biochim.BiophysActe^1514(1):87曙99，(2001)。背景駄许多脂质是具有生物活性的，即直接或者间接参与介导细胞生长、分化、细胞死亡以及许多其它细胞功能的信号转导途径，这些脂质的例子是二酰甘油(DAG)、神经酰胺(Cer)、鞘氨醇(Sph)、鞘氨醇-l-磷酸(S1P)、神经酰胺-l-磷酸(C-l-P)、二甲基鞘氨醇和三甲基鞘氨醇(分别为DMS和TMS)。这些脂质或它们的衍生物中的大部分具有作为独立的药物或者作为其他药物的支持所具有的治疗效果的潜力。神经酰胺促进凋亡性能的发现[Vento,R.M.等人，Mol.Cell.Biochem.185:7-153(19诉)],以及关于神经酰胺使端粒酶活性失活并因此可能具有癌症特异性的发现[Ogretmen，B.D.等人J.Biol.Chem，276:24卯1-24910(2001)]使神经酰胺成为独立抗肿瘤治疗以及联合化学治疗剂抗肿瘤治疗以克服一些化学治疗障碍的吸引人的候选物。许多出版物对神经酰胺在凋亡中的作用进行了讨论。HannunYA等人概述了来自Cer代谢、拓扑学和效应物作用、某些神经酰胺代谢酶基因的鉴定和神经酰胺分析等研究的见解[HanmmY.A.等人，BiochimicaetBiophysicaActa1585:114-125(2002)]。对神经酰胺在抗增殖过程中作用的证明[Ogretmen,B.D.等人，J.Biol.Chem276:24卯l-24910(2001)]，意味着神经酰胺产生中或神经酰胺效应物机制中的缺陷可能参与为癌细胞提供存活优势。其他的研究[Mueller,H.和Eppenberger,U.，AnticancerRes.16:3845-3848(1996)]暗示有助于降低神经酰胺水平的神经酰胺功能紊乱代谢参与多药(MD)抗性。许多临床上重要的细胞毒性剂似乎是有效的，因为它们通过激活神经酰胺合成酶或者鞘磷脂酶，或者通过抑制葡糖神经酰胺合成酶(GCS)活性，而具有激活癌细胞中的神经酰胺激活途径的能力。据显示，具有TNF-a抗性的MCF-7乳癌细胞已经被表征为它们的鞘磷脂酶不能够产生神经酰胺[Senchenkov，A.等人，J.Natl.CancerInst.93:347-357(2001)]。另外，从对阿霉素(DXN)、美法仑(mephalan)和顺铂有耐性的患者建立的人卵巢腺癌细胞系NIH:OVCAR-3表达高水平的葡糖神经酰胺，这与高水平的GCS—致[Z.Cai，Z,等人，J.Biol.Chem.272:6918-6926(1997)]。此外，许多临床上重要的细胞毒性剂暗示通过与癌细胞中神经酰胺介导的凋亡信号转导途径协同作用而有效。紫杉醇的细胞毒性作用与MDA-MB468人乳癌细胞中神经酰胺的从头合成有关，并且当使用L-环丝氨酸(一种从头合成神经酰胺的抑制剂)阻断神经酰胺形成时，依赖紫杉醇的细胞毒性会被破坏。而且，外源神经酰胺会协同地增强紫杉醇对凋亡的诱导。[CharlesAG.等人，CancerChemotherPharmacol47(5):444-450(2001);MehtaS.等人，CancerChemotherPharmacol46(2):85-92(2000)。阿霉素也表现出促进乳癌中神经酰胺的形成和凋亡[LucciA.等人，IntJOncol15(3):541-546(1999)]。他莫昔芬表现出通过阻断神经酰胺转化为葡糖神经酰胺而提高细胞神经酰胺水平，这不取决于雌激素受体的状态[CabotMC等人，FEBSLett394(2):129-131(1996);LavieT.等人，JTBiolChem272(3):1682-1687(1997)]。而且，他莫昔芬与诸如阿霉素或者环孢霉素A类似物等物质的联合表现出对神经酰胺形成提供协同作用[LucciA.等人，Cancer86(2):300画311(1999)]。多药抗性(MDR)癌症也暗示与提高的神经酰胺代谢有关。暴露于阿霉素会提高对药物敏感的MCF-7乳癌细胞中神经酰胺的水平，而不会提高对阿霉素有抗性的MCF-7-AdrR细胞中神经酰胺的水平[LucciA.，IntJOncoll5(3):541画546(1997)]。另夕卜，显示尽管单独的C6-Cer和单独的他莫昔芬(己知的GlcCer合成酶抑制剂)都不是细胞毒性的，但是将他莫昔芬加入到C6-Cer治疗方案中会降低MCF-7-AdrR细胞的存活能力并引起凋亡。只有与他莫昔芬共施用，用亚德里亚霉素对这些细胞的进一步治疗才刺激内源神经酰胺水平的提高，在该情况中，提高的神经酰胺水平与细胞存活能力的进一步下降相关。然而，正如所描述的，由于MCF-7-AdrR细胞具有高水平的GlcCer合成酶活性，所以这些细胞被怀疑通过将神经酰胺代谢为GlcCer而表现出对外源的能透过细胞的神经酰胺以及化学治疗剂(即阿霉素与亚德里亚霉素)表现出抗性。这样，其暗示通过外源单独给药或者联合化学治疗剂给药，或者通过耙向神经酰胺代谢和细胞死亡信号转导途径而提高细胞内神经酰胺的水平，是用于治疗敏感肿瘤以及克服药物抗性的吸引人的临床治疗策略。然而，对于大部分的这些生物活性脂质，体内进行这类应用的障碍是缺少以使它们保持其生物活性的方式施用和/或输送这些分子的能力。大部分的这些生物活性脂质不溶于水相中，某些例如DAG和神经酰胺等脂质难于以稳定的形式分散在有关介质中；某些脂质当以微胶粒分散时(S1P、Sph)在生物流体如血液中会崩解；大部分脂质在被引入到脂质体中时会造成脂质体物理上的不稳定。最近的进展包括在囊泡膜中引入这些生物活性脂质，以促进它们输送到细胞中。WO2004/087097描述了形成脂质组装体(lipidassemblies)的脂质的有组织集成，其包括生物活性脂质(其不会自组装形成稳定囊泡)、脂聚合物和脂质基质(作为稳定组装体的骨架)的特异联合。发现这些脂质组装体在4"的保存条件下，在生物流体中是化学和物理上稳定的，至少保持6个月。不能够自组装形成稳定囊泡并在WO2004/08797中被具体讨论的具体类型的生物活性脂质包括神经酰胺。神经酰胺是由通过酰氨键连接到长链鞘氨醇碱(sphingoidbase)的氨基的脂肪酸构成的脂质，并且被认为是生物合成鞘脂的关键中间体[Lofgren和Pasher,Chem.Phys.Lipids,20(4):273-284,(1977);Carrer和Maggio，Biochim.BiophysActa,1514(1):87-99,(2001)〗。DOXII^是被包封入长循环STEALTH^脂质体中的盐酸阿霉素,其被批准用于治疗卵巢癌。DOXII^的STEALTH^脂质体是利用表面结合的甲氧基聚乙二醇(MPEG)配制的，该工艺通常被称作聚乙二醇化，以保护脂质体免于被单核吞噬细胞系统(MPS)检测到，并用于提高血液循环时间。盐酸阿霉素的作用机理被认为与其结合DNA并抑制核酸合成的能力有关。研究已经证明DXN快速渗入细胞并结合核周染色质，接着快速抑制有丝分裂活性和核酸合成，并诱导突变和染色体畸变。STEALTH^脂质体在人体中具有大约55小时的半衰期。它们在血液中是稳定的，对脂质体阿霉素的直接检测显示在循环过程中至少90°/。的该药物(所使用这种检验不能定量低于5%10%的游离阿霉素)仍被包封在脂质体中。假定由于它们的小尺寸(Sl00nm)以及循环中的持久性，聚乙二醇化的DOXIL^旨质体能够从被改变的并且经常是受破坏的肿瘤脉管系统中渗出并渗入肿瘤自身。这种假设得到了利用含有胶体金的STEALTH脂质体的研究的支持，其中STEALTH^脂质体可以在显微镜下被观察到。
发明内容本发明基于发现使用携带细胞毒性药物(Doxil)的脂质体和在它们脂质膜中携带促进凋亡的脂质(神经酰胺)的脂质体的联合对癌细胞进行处理，产生了有益的附加效果，即抑制细胞的增殖，其至少为单独利用脂质体细胞毒性药物或者单独利用脂质体促进凋亡的脂质对同样的细胞进行处理时所得到效果的总和。本发明还基于发现一种组合物，该组合物包含在脂质膜中具有促进凋亡的脂质(神经酰胺)的脂质体，和在脂质体内部水相中的细胞毒性药物(阿霉素)，当给荷肿瘤的动物施用所述组合物时，其能够获得在整个测试时期100°/。的存活率。这样，根据本发明的一个方面，本发明提供了一种药物组合物，其包含-(a)—种稳定的脂质组装体，其包含i)影响凋亡的脂质，其在极性环境中并不自聚集形成脂质体；ii)脂聚合物；(b)携带细胞毒性、两亲性弱碱药物的脂质体。这里所使用的"脂质组装体"表示形成微胶粒或者脂质休等的脂质的有组织集成，优选该术语表示脂质体。术语"影响凋亡的脂质"表示具有诱导凋亡(促进凋亡的脂质)或者抑制凋亡(抗凋亡的脂质)作用的脂质。根据本发明的影响凋亡的脂质的凋亡活性是指如通过熟知的参数表示的任何可以检测的凋亡，例如，如在生物靶位点表现出的细胞质膜外表面的磷脂酰丝氨酸暴露，细胞变圆、染色体降解和浓縮、细胞核的破碎、细胞质膜破坏成凋亡体。本发明的生物耙位点可以包括细胞、组织或者器官或其组分(例如胞内组分)。根据本发明的一个实施方式，这里称为术语"混合成分实施方式"，含有影响凋亡的脂质的脂质组装体(优选脂质体)以及携带细胞毒性药物的脂质体是被混合以提供本发明的药物组合物的两种成分。所述两种成分的比例除了其它因素外，依赖药物的类型，其治疗剂量和治疗方案。药学领域的熟练技术人员知道如何根据药物的类型确定该比例。根据本发明的另一个实施方式，这里称为术语"单成分实施方式"，脂质组装体在它们的基于脂质的膜中含有影响凋亡的脂质，并且这些脂质组装体与携带细胞毒性药物的是同样的脂质结构，这样使用了单一类型的基于脂质的成分。这样，本发明还提供了一种药物组合物，其包含稳定的脂质组装体，该脂质组装体包含脂聚合物以及在极性环境中并不自聚集形成脂质体的影响凋亡的脂质，所述的脂质组装体携带细胞毒性的两亲性弱碱药物。优选，所述的脂质组装体是脂质体。根据一个优选的实施方式，所述影响凋亡的脂质是促进凋亡的脂质，并且本发明的药物组合物优选用于治疗增殖性疾病或者过度增殖性疾病。本发明还提供了一种治疗患有增殖性疾病或者过度增殖性疾病的对象的方法。根据本发明的"混合成分"实施方式，提供了一种治疗患有增殖性疾病或者过度增殖性疾病的对象的方法，其包括给所述对象施用药物组合物，该药物组合物包含(a)稳定的脂质组装体，其包含i)影响凋亡的脂质，其在极性环境中并不自聚集形成脂质体;ii)脂聚合物；(b)携带细胞毒性、两亲性弱碱药物的脂质体。根据本发明的"单成分"实施方式，提供了一种治疗患有增殖性疾病或者过度增殖性疾病的对象的方法，该方法包括给所述对象施用药物组合物，该药物组合物包含稳定的脂质组装体和由所述脂质组装体携带的细胞毒性的、两亲性弱碱药物，所述脂质组装体包含在极性环境中不能自聚集形成脂质体的影响凋亡的脂质，以及脂聚合物。根据本发明，还提供了一种治疗患有增殖性疾病或者过度增殖性疾病并用含有阿霉素或具有生物活性的基于蒽环霉素的阿霉素类似物治疗的对象的方法，该方法包括给所述对象施用有效量的在其膜中含有脂聚合物和神经酰胺的脂质体。进一步根据本发明，本发明提供了一种治疗患有增殖性疾病或者过度增殖性疾病并用在其膜中含有脂聚合物和神经酰胺的脂质体治疗的对象的方法，该方法包括给所述对象施用含有阿霉素或具有生物活性的、基于蒽环霉素的阿霉素类似物的脂质体。优选所述施用应该是共施用(其意思是同时施用，或者在非常短的间隔内施用)。如果两种成分被分别施用，优选两次施用之间的时间间隔不超过几个小时，并优选在施用细胞毒性药物之前，给所述对象施用携带影响凋亡的脂质的脂质组装体。根据本发明的"混合成分"实施方式，还提供了稳定的脂质组装休以及携带细胞毒性两亲性弱碱药物的脂质体在制备药物组合物中的应用，所述脂质组装体包含在极性环境中不能自聚集形成脂质体的影响凋亡的脂质，以及脂聚合物。根据本发明的"单成分"实施方式，还提供了稳定的脂质组装体以及由该脂质组装体携带的细胞毒性两亲性弱碱药物在制备药物组合物中的应用，所述脂质组装体包含在其脂质膜中的在极性环境中不能自聚集形成脂质体的影响凋亡的脂质。优选这些药物组合物用于治疗增殖性疾病或者过度增殖性疾病。根据一个优选的实施方式，所述影响凋亡的脂质是促进凋亡的脂质，更优选的是神经酰胺，特别的是，C6神经酰胺，并且所述细胞毒性药物是基于蒽环霉素的化合物，优选阿霉素或下面所描述的其基于蒽环霉素的类似物。这样，根据本发明的"混合成分"实施方式，所采用的--种具体的组合物是包含脂质体的第一成分和脂质体的第二成分的混合物的组合物，其中所述的脂质体的第一成分具有包含脂质基质、C6神经酰胺和脂聚合物的脂膜，所述脂质体的第二成分在脂质体内水相中包封有阿霉素或者阿每素的具有生物活性的基于葸环霉素的类似物。根据本发明的"单成分"实施方式，所采用的一种具体组合物包含一种类型的脂质体，这种脂质体具有包含脂质基质、c6神经酰胺和脂聚合物的脂膜，该脂质体在脂质体内水相中包封有阿霉素或者阿霉素的具有生物活性的基于蒽环霉素的类似物。为了理解本发明以及了解其如何能够在实践中被实施，现在将仅以非限制性实施例的方式参考附图描述优选的实施方式，其中-图1是显示脂质体C6Cer(白色柱)、阿霉素(DXN)(灰色柱)或者它们的联合(黑色柱)对DXN-抗性M109R肿瘤细胞系的细胞毒害活性柱状图。将这些肿瘤细胞与不同的制剂孵育96小时，并借助MB测定检测存活百分率。图2是显示与Doxil相比空间稳定的C6Cer-DXN(C6Cer-DXN-SSL)的治疗活性的图。展示了如所述进行腹膜内接种lX106C-26直肠癌并治疗的BALB/c小鼠的存活百分率(％)。图3是显示与Doxil或游离DXN相比C6Cer-DXN-SSL的治疗活性的图。展示了如所述进行腹膜内接种1X106C-26直肠癌并进行治疗的BALB/c小鼠的存活百分率(％)。图4A4B是表示与Doxil(白色柱)或游离DXN(黑色柱)相比C6Cer-DXN-SSL(灰色柱)的药物动力学(图4A)和生物分布(图4B)的图。具條施方式本发明涉及新型联合治疗的开发，其能够引起比当单独施用各治疗时所得到的效果更好的治疗效果。显示联合治疗达到了意想不到的、显著的最高可能的治疗效果(100°/。存活)。正如这里所提供的非限制性实施例所显示的，当一起配制含有包埋在脂质体膜中的显著水平(>5摩尔％)的生物活性脂质(影响凋亡的脂质，特别是促进凋亡的)的脂质体以及脂质体(相同或者不同的脂质体)的脂质体内部水相中的诸如抗癌药物阿霉素的细胞毒性药物时，得到了稳定的脂质体组合物，当在体内以及体外进行测试时，该稳定的脂质体组合物表现出有益的治疗效果。这样，本发明提供了一种药物组合物，其包含脂质组装体，优选脂质体，所述脂质组装体包含在极性环境中聚集成非脂质体状态的影响凋亡的脂质(即在极性水环境中不能自发自聚集成脂质体的脂质)；脂聚合物和细胞毒性两亲性弱碱药物。正如上面所述的，细胞毒性药物可以在不同的脂质组装体成分中(根据"混合成分"实施方式)或者与影响凋亡的脂质在相同的脂质组装体成分中(根据"单成分"实施方式)。携带影响凋亡的脂质的脂质组装体优选是稳定的脂质组装体。这里所使用的术语"稳定的脂质组装体"表示一种组装体，其在保存条件是化学和物理上稳定的(4'C至少6个月)，并且在生物流体中也是稳定的。该术语还包括存在脂聚合物、影响凋亡的脂质(其自身不能形成脂质体)时的组装体，这样在保存过程中，该脂质组装体的完整性和组成基本上不变。该组装体的稳定性是通过影响凋亡的脂质与脂聚合物的联合达到的，即在不存在脂聚合物时，最初被装入到该组装体中(即在形成该组装体之前)的大部分的影响凋亡的脂质，在保存和/或出现脂质聚集后的短时间内被从中去除。结果，该组装体是有毒性的和/或注射剂量不能携带充分(期望)量的影响凋亡的脂质到靶位点，并且该组装体不能有效地达到期望的生物学效果/治疗效果。所述的影响凋亡的脂质可以是任何天然存在的、合成的和半合成的两亲性物质，其具有含有一个或者多个长烃链的疏水区以及极性离子或非离子头部基团，其中头部基团和疏水区的原子质量比为小于0.3。这些两亲性物质也可以由它们的几何学结构来限定，通常是被截短的反锥体形状。可以替换的，或者另外，通过它们大于1的包装参数可限定这些非形成脂质体的脂质。而且，本发明的影响凋亡的脂质在单独在极性(水性)环境中被混合时，倾向于聚集成不同于脂质体的状态，即它们自身(不与其它脂质混合时)不能形成脂质体。这些非脂质体状态包括例如微胶粒、反六方相或者宽范围的尺寸的组装体或者长细管状结构或者不确定的沉淀物。通常这些影响凋亡的脂质会通过它们的烃链而包埋，它们的烃链与该组装体的其它组分(例如磷脂)的烃链平行。促进凋亡的脂质的非限制性例子包括神经酰胺、神经胺(Ceramine)、二氢鞘氨醇(sphinganine)、二氢鞘氨醇-1國磷酸(sphinganine-1-phosphate)、二烷基鞘氨醇或三烷基鞘氨醇及他们结构生物学上的功能类似物。生物活性脂质的优选类型可以通过下面的化学通式(I)来限定<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>其中，-A代表C2-C26的饱和或不饱和的有分支或无分支的脂肪族链，该脂肪族链可以被一个或者多个羟基或者环烷基取代，并可以由环亚烷基部分构成；-R2可以是相同或者不同的，其代表氢、d-C26的饱和或不饱和的有分支或无分支的链，该链选自脂肪族链、脂肪族羰基链含有环亚烷基的脂肪族链，该脂肪族链可以被芳基、芳烷基或者芳烯基所取代；-R3代表氢、甲基、乙基、乙烯基、碳水化合物基或者磷酸基。一组具体的促进凋亡的脂质是其中&是C15脂肪族链，--个R2是氯，另一个R2如上面所限定，且R3是氢的脂质。—组更具体的促进凋亡的脂质是其中R,是Cl5不饱和脂肪族链，该不饱和位点(即双键)位于R,的d-C2碳原子之间(其相应于鞘氨醇碱的C4-Cs位置)，一个R2是氢，另一个R2基是CrC26饱和或不饱和(任选可以带有羟基取代基(一个或者多个))的脂肪族链，R3是氢的脂质。影响凋亡的脂质的优选组是神经酰胺。优先选择的神经酰胺是短链(CrC8)神经酰胺类似物，优选C6神经酰胺(C6Cer)。正如本领域熟练技术人员己知的，体内输送包括能透过细胞的短链神经酰胺类似物(例如CV、C6-、Cr或Q-神经酰胺)等的各种神经酰胺存在困难。输送效率受到了分子疏水性的限制，疏水性导致体内输送时形成大的聚集体。[RadinNSEurJBiochem268:193-204(2001)]。这样确定了改进输送系统的关键需要是使全身施用时细胞内神经酰胺的积聚最大化。发明人(WO2004/087097)最近完成了将神经酰胺(长链和短链)治疗上有效地加入到脂质体的脂质膜中。所得到的携带神经酰胺的脂质体在保存过程中是稳定的(参见上面稳定性的定义)，并有效地诱导凋亡。除了其他因素外，通过将脂聚合物加入到所述脂质膜中，达到了脂质组装体的空间稳定性。正如上面所限定的，脂质组装体还包含脂聚合物。这里所使用的术语"脂聚合物"表示在其极性头部基团被亲水聚合物改性的脂质物质。本发明的脂聚合物可以进一步被限定为聚合物头部基团与脂质疏水区的原子质量比为至少1.5。优选的是，本发明的脂聚合物是与所述头部基团牢固结合的水的水平为每个脂聚合物分子为大约60个水分子的脂聚合物。通过TiroshO.等人所描述的方法[TiroshO.等人，BiophysicalJournal,74，1371-1379(1998)]，确定与所述头部基团牢固结合的水的水平。大体上，Tirosh等人显示通过PEG及其组分的比体积数据计算的脂聚合物(例如PEG分子)可及表面积为每个PEG重复单元至少3个水分子。这样，聚合度为15的整个"^EG分子会结合大约60个水分子，聚合度为46的2kPEG分子会结合大约142个水分子。典型的是，脂聚合物的聚合物头部基团是水溶性的，并且能够共价或非共价附着到疏水脂质区。在本发明中所采用的脂聚合物是本领域中公知的，并且在体内有耐受性，并且其没有毒性作用(即是生物相容的)。已知这些脂聚合物(诸如本发明所釆用的脂聚合物)能有效地形成长循环脂质体。本发明的脂聚合物优选包含脂质，典型的是，所述脂质在其头部被改性为含有分子量等于或高于750Da的聚合物。该头部基团可以是极性或者非极性的，然而优选是极性头部，其中大的(>750Da)高度水化(每个头部基团至少60个水分子)的柔性聚合物被附着到该极性头部上。亲水聚合物头部基团在脂质区上的附着，可以是共价附着，或者非共价附着，然而优选通过形成共价键(任选通过接头)。亲水聚合物链的最外表面覆盖层有效地为脂质体提供体内血液长循环寿命。通过两种不同方式，可以将脂聚合物引入到该脂质体中(a)通过将脂聚合物加入到形成脂质体的脂质混合物中。所述脂聚合物将被加入并暴露在脂质体双层的内外小叶(leaflet)[UsterP.S.等人，FEBBSLetters386:243(1996)];(b〉或者通过先制备脂质体，接着将脂聚合物加入到预先形成的脂质体的外部小叶，该加入通过在高于脂聚合物和形成脂质体的脂质的Tm值的温度孵育或者通过短时间暴露于微波辐射来进行。由形成脂质体的脂质所构成的囊泡的制备以及用亲水性聚合物对这些脂质进行衍生(由此形成脂质体)己经被描述，例如Tirosh等人[Tirosh等人，Biopys.J.，74(3):1371-1379，(1998)]所描述的，及在美国专利No.5,013,556、5,395,619、5,817,856、6,043,094和6,165,501中以及在WO98/07409中所描述的，这里将其作为参考加以引入。这些脂聚合物可以是非离子脂聚合物(有时也被称作中性脂聚合物或者不带电荷的脂聚合物)或者净电荷为负电或者净电荷为正电的脂聚合物。有许多聚合物可以被附着到脂质上。典型地用作脂质改性剂的聚合物包括但不限于聚乙二醇(PEG)、聚唾液酸、聚乳酸(也被称作聚丙交酯)、聚羟基乙酸(也被称作聚乙交酯)、聚乳酸-聚羟基乙酸(apolylactic-polyglycolicacid)、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚甲基噁唑啉、聚乙基噁唑啉、聚羟乙基噁唑啉、聚羟丙基噁唑啉、聚夭冬酰胺、聚羟丙基甲基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酰胺、聚二甲基丙烯酰胺、聚乙烯基甲基醚、聚丙烯酸羟乙酯、衍生的纤维素例如羟甲基纤维素或羟乙基纤维素。这些聚合物可以以均聚物或者嵌段共聚物或无规共聚物的形式被采用。尽管衍生为脂聚合物的脂质可以是中性、带负电以及带正电的，即对于具体的电荷(或者没有电荷)没有限制，但是，衍生为脂聚合物的最常用的市售脂质是基于磷脂酰乙醇胺(PE)的脂质，通常是二硬脂基磷脂酰乙醇胺(DSPE)。本发明采用的一个具体的脂聚合物家族包括附着到DSPE上的单甲基化PEG(具有不同长度的PEG链，所述甲基化PEG这里被缩写为PEG)，其中所述PEG聚合物通过氨基甲酸酯键被连接到脂质上，从而得到了带负电荷的脂聚合物。其他的脂聚合物是中性的甲基聚乙二醇二硬脂酰甘油(mPEG-DSG)和中性的甲基聚乙二醇氧羰基-3-氨基-l,2-丙二醇二硬脂酰(mPEG-DS)[GarbuzenkoO.等人，Langmuir.21:2560-2568(2005)]。另一种脂聚合物是磷脂酸PEG(PA-PEG)。所述PEG部分优选具有大约750Da大约20，000Da的头部基团分子量。更优选该分子量为大约750Da大约12，000Da，最优选为大约l,00ODa大约5，O0ODa之间。这里所采用的一种具体PEG-DSPE是在其中PEG具有2000Da的分子量，这里被称为，^EG-DSPE或2kpEG-DSPE的PEG-DSPE。脂聚合物除了有助于使包含影响凋亡的脂质的脂质组装体稳定之外，脂聚合物还在脂质体脂双层膜的内外表面提供了亲水聚合物链的表而覆盖层。亲水聚合物链的最外表面覆盖层有效地提供脂质组装体在体内的长血液循环寿命。在脂质体形成的情况下，亲水聚合物链的内覆盖层能够延伸入位于脂质层之间的脂质体中的含水小室中，并进入可含有额外的治疗剂的中心核心小室中。除了影响凋亡的脂质和脂聚合物外，脂质组装体还包含其他的组分，例如其他的脂质，它们共同形成了脂质基质(支架)。需要理解的是，该脂质基质可以包括单一脂质(除了影响凋亡的脂质)或者包含形成脂质层(即脂质体双层)的脂质联合。在形成脂质体时，形成脂质基质的脂质联合可以被限定为它们的加和包装参数在0.741.0的范围内。作为比较，生物活性脂质的包装参数高于1.0。术语"加和有效包装参数"是指脂质体的各成分的包装参数对构成脂质体的最终脂质组合物的平均(即加权总和)包装参数的相对贡献(摩尔％加权)。就脂质体而言，该结构的加和有效包装参数在0.741.0的范围内的事实说明优选形成脂质体，以及说明所有用于形成脂质体层的组分的联合导致稳定脂质体的形成。形成脂质基质的脂质典型地包含一个或者两个疏水的酰基链，其可以和类固醇基结合，并可以在其极性头部基团含有化学活性基团(例如胺、酸、酯、醛或醇)。一组形成所述基质的脂质包括生理上可以接受的形成脂质体的脂质。形成脂质体的脂质典型地是具有甘油骨架的脂质、其联合或者衍生物，其中羟基中的至少两个被酰基链取代，第三个羟基被磷酸基团所替代，而活性基团可以被附着到磷酸基团上，并且所述脂质在头部基团可以含有上面所限定的化学活性基团。典型的是，所述酰基链长度为14大约24个碳原子，并且具有不同的饱和程度(即完全、部分或者非氢化脂质)。进一步，该脂质基质可以是天然来源的、半合成的或者完全合成的脂质，以及中性、带负电或者带正电的脂质。根据一个实施方式，形成脂质体的脂质包括磷脂。所述磷脂可以是甘油磷脂。甘油磷脂的例子包括但不限于三种类型的脂质(i)两性离子磷脂，其包括例如磷脂酰胆碱(PC)、蛋黄磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(DMPC)鞘磷脂(SM);(ii)带负电的磷脂，其包括例如磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酸(PA)、磷脂酰甘油(PG)和二肉豆蔻酰磷脂酰甘油(DMPG);以及(iii)阳离子磷脂，其包括例如磷酸单酯被0-甲基化而形成阳离子脂质的磷脂酰胆碱或鞘磷脂。本发明中所采用的具体磷脂酰胆碱是氢化大豆PC(HSPC)。所述脂质组装体还可以包含通常在形成脂质组装体中所使用的其它组分。例如，可以加入阳离子脂质以产生阳离子脂质体。阳离子脂质可以作为脂质组装体的次要组分或者作为重要组分或者唯一组分而被包含。通常这类阳离子脂质具有亲脂部分，例如固醇、酰基或二酰基链，其中该脂质具有整体净正电荷。优选该脂质的头部基团携带正电荷。单阳离子脂质可以包括例如1，2-二肉豆蔻酰-3-三甲基铵丙烷(DMTAP)1，2-二油基氧基-3-(三甲氨基)丙烷(DOTAP);N-[l-(2，3，-二(十四烷氧基))內基]-N，N-二甲基-N-羟乙基溴化铵(DMRIE);N-[l-(2，3，-二油基氧基)丙基]-N，N-二甲基-N-羟乙基-溴化铵(DORIE);N-[l-(2，3-二油基氧基)丙基]-N，N,N-三甲基氯化铵(DOTMA);3卩[N-(N',N'-二甲基氨基乙烷)氨基甲酰基]胆固醇(DC-Chol);以及二甲基-二(十八烷基)铵(DDAB)。多阳离子脂质的例子包括与单阳离子脂质类似的亲脂部分，多阳离子部分附着到该亲脂部分上。多阳离子部分的例子包括精胺或亚精胺(例子为DOSPA和DOSPER)，或者肽例如聚赖氨酸或其他聚胺脂质。例如，中性脂质(DOPE)可以被聚赖氨酸衍生而形成阳离子脂质。多阳离子脂质包括但不限于N-[2-[[2,5-双[3-氨基丙基]氨基]-l-氧戊基]氨基]乙基]-N，N-二甲基-2，3-双[(l-氧-9-十八烯基)氧基]-l-丙铵(DOSPA)以及神经酰胺氨基甲酰精胺(CCS)。进一步，适合使脂质组装体稳定的其他组分可以包括但不限于固醇和固醇衍生物，例如胆固醇、半琥珀酸胆固醇酯、硫酸胆固醇酯。可以确定和选择所述脂质组装体中各组分的摩尔百分比以达到特定程度的流动性或刚性，以控制所述组装体在保存过程中以及输送之后例如在血清中的稳定性，和控制形成部分组装体的促进凋亡的脂质或者其所携带的细胞毒性药物的释放速率。例如凝胶(固体有序)相中的或者液晶流体(液体无序)状态中的脂质体等具有较髙刚性的脂质组装体是通过降低或者去除液体组合物中的固醇并通过使用相对刚性的脂质，例如具有固体有序相转化为液体无序相的相对高的相转化温度(例如室温以上)的脂质。刚性的(即饱和的)具有长酰基链的脂质有助于组装休中的更高的膜刚性。这种脂质的良好实例是HSPC或DSPC。还已知脂质组分(例如胆固醇)有助于基于流体脂质的液体组装体的刚性。这样的固醇降低了自由体积，从而降低了渗透性。类似的，高脂质流动性是通过加入相对有流动性的脂质而达到的，所述脂质通常为具有相对低的液体转化为液晶的相转化温度(例如处于或者低于室温，更优选为处于或低于靶体温)的脂质。这类磷脂的良好实例为蛋PC。如果脂质组装体是脂质体的形式，则脂质体可以是多层囊泡(MLV)、大单层囊泡(LUV)、小单层嚢泡(SUV)或多囊状囊泡(MVV)的形式以及本领域中已知的其他双层形式。脂质体的大小和薄层性将取决于制备方式，所使用襄泡类型的选择将取决于给药的优选模式。对于全身治疗的目的，优选的可注射的脂质体是直径为50nm150nm大小范围内的脂质体(LUV或SUV[GabizonA.等人，CancerRes.M:诉7-992(1994)]);对于局部治疗，也可以使用诸如MLV或MW等较大脂质体[GrantG.等人，Anesthesiology巡:133-137(2004)]。本发明的药物组合物也可以包含被包封在脂质体内部的细胞毒性两亲性弱碱药物(其相对于包含影响凋亡的脂质的成分相比，作为脂质体的不同成分，或者作为脂质体的相同成分)。两亲性弱碱性化合物的特征是其具有在适当的跨膜pH和/或铵梯度条件下渗透入通常不能渗透的膜的能力。描述了两亲性弱酸和碱的装载(如下)。装载程序的一般原理(称作"主动/远程装载")涉及药物通过脂膜利用脂质组装体进行渗透，所述脂质组装体被制造为装载两亲性弱碱，其中脂质体内部具有比脂质体外部较高的更酸性pH，这类系统将自然地尽力达到平衡，即达到内部和外部相同的pH。这种pH平衡是否是可能的，或者其将发生得多快，取决于将内部水相和外部水相分开的膜的性质，和取决于介质组成。脂质体借助其脂质双层，提供了天然抵抗这类平衡的最佳膜屏障。脂质体自身可以在适当的介质中(例如铵离子)形成，在某种意义上，铵离子的一部分被包封在脂质体中，这样形成了含有硫酸铵的具有一定内部pH的脂质体。该pH将取决于在脂质体内部所装载的硫酸铵量之间的差别，以及在脂质体外部的硫酸铵量之间的差别。如果外部和内部的量相同，则二者中的pH与硫酸铵溶液的pH相同，或者与缓沖液/硫酸铵的pH相同(如果将缓冲液加入到硫酸铵的话)。然而，如果外部的硫酸铵被其他盐类或者被其他非电解质(例如葡萄糖或蔗糖)所取代、稀释或者交换，则脂质体内部会通过将pH朝酸性一侧改变而快速反应。可以通过各种技术制备在远程装载中使用的具有跨过脂质体双层的if和/或离子梯度的脂质体。典型的程序包括将脂质的混合物以形成稳定脂质体的比例溶解在适当的有机溶剂中，并在容器中蒸发以形成薄脂膜。接着将含有溶质物质的水性介质覆盖在该膜上，所述溶质物质将在脂质体的内部空间形成水相。在形成脂质体后，根据已知的方法，可以将这些囊泡根据大小分类，以得到在选定的范围内的脂质体大小分布。在根据大小分类之后，对脂质体的外部介质进行处理以产生跨脂质体膜的离子梯度(通常采用用以形成脂质体的相同缓冲液)，其通常是较高的内部/较低的外部离子浓度梯度。这可以以各种方式完成，例如通过(i)稀释外部介质，(ii)对期望的最终介质透析，(iii)凝胶排阻层析，例如使用SephadexG-50，其在用于洗脱的期望介质中被平衡，或者(iv)反复髙速离心和将沉淀的脂质体重悬浮在期望的最终介质中。正如现将对其进行描述的，所选择的外部介质将取决于梯度的类型、梯度形成的机制以及外部的溶质和期望的pH。在产生离子和/或PT梯度的最简单方法中，脂质被水化，并在具有选定的内部介质pH的介质中按大小分类。对脂质体的悬浮液进行滴定，直到外部的脂质体混合物达到期望的最终pH，或者按照上述进行处理以将外部相缓冲液与具有期望外部pH的缓冲液进行交换。例如，最初的水合介质可以在选定的缓冲液(例如谷氨酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、富马酸盐缓冲液)中具有5.5的pH，并且最终的外部介质可以在相同或者不同缓冲液中具有8.5的pH。这些缓冲液的共同特征是它们是从基本上不可渗透脂质体的酸形成的。优选的是，内部和外部介质被选择为含有大约相同的容积渗克分子浓度，例如通过适当调节缓冲液、盐或低分子量非电解质溶质(例如葡萄糖或蔗糖)的浓度。在另一个通用方法中，该梯度是通过在脂质体中包括选定的离子载体而产生的。为了说明，在钾缓冲液中制备被制备为在脂质体双层中含有缬氨霉素的脂质体，按大小分类，接着使用钠缓冲液交换外部介质，这形成了内部钾/外部钠的梯度。钾离子在从内部到外部的方向的运动接着产生了内低/外高的pH梯度，推测这是由于响应跨过脂质休膜的净带负电电荷，质子进入脂质体的运动[Deamer,D.W.，等人，Biochim.etBiophys.Acta274:323(1972)]。类似的方法是将脂质进行水合，并在高浓度的硫酸镁中对所形成的多层脂质体按大小分类。通过对蔗糖中的20mMHEPPES缓冲液(pH7.4)透析形成硫酸镁梯度。接着，加入A23187离子载体，这导致向外转运镁离子，每个镁离子交换两个质子，并且建立了脂质体内部高/脂质体外部低的质子梯度[SenskeDB等人(Biochim.Biophys.Acta1414:188-204(19诉))。在另一个更优选的方法中，用于药物装载的质子梯度是通过形成跨过脂质体膜的铵离子梯度而产生的，例如在美国专利No.5，192，549和5,316,771中所描述的，这里将其作为参考加以引入。在适当的pH(例如5.57.5)在含有铵盐的水性缓冲液中制备这些脂质体，所述铵盐例如硫酸铵、磷酸铵、拧檬酸铵等，典型的是0.1M0.3M铵盐。该梯度也可以通过在水化介质中包含硫酸化聚合物而产生，所述硫酸化聚合物例如葡聚糖硫酸铵盐、肝素硫酸铵盐或者硫糖铝(sucralfate)。在形成脂质体并按大小分类后，外部介质被交换为缺少铵离子的介质。在该方法中，在装载的过程中，两亲性弱碱被铵离子交换。另外，US5，939,096中描述了另一种方法，这里将其作为参考引入。简单地讲，该方法采用质子穿梭机制，其包括弱酸(例如乙酸)的盐，所述盐的质子化形式跨过脂质体膜转移以产生内高/外低的pH梯度。接着，将两亲性弱酸化合物加入到预先形成的脂质体的介质中。响应于该梯度，该两亲性弱酸在脂质体中聚集，并可以通过阳离子(即转离子)促进的沉淀或者跨脂质体膜的低渗透性而保持在脂质体中，即两亲性弱酸与乙酸交换。根据本发明，细胞毒性药物优选是两亲性弱碱化合物。这类细胞毒性药物的优选组是任何具有生物活性的基于蒽环霉素的两亲性化合物。基于蒽环霉素的化合物共有通用的四环7，8，9，10-四氢并四苯-5，12-醌结构，并通常在特定位点需要糖基化以具有生物学活性。作为另一种芳香族聚酮化合物，蒽环霉素通常是通过II型迭代聚酮化合物合成酶复合物(PKS)从二碳单元来合成的，其中所述二碳单元在连续的乙酰基单元縮聚反应中被加入到生长中的碳链中。接着将碳链环化以形成芳香族聚酮化合物骨架(糖苷配基)，接着在进行最后的糖基化途径之前，通过额外的修饰反应对所述骨架进行调整。大部分蒽环霉素型芳香族聚酮化合物的前体是阿克拉菌酮(aklavinone)，或者较不常用的是诺加霉素酮(nogalamycinone)，其中诺加霉素酮具有被C-9S甲基替换的阿克拉菌酮C-9R乙基。基于蒽环霉素的细胞毒性药物通常是促进凋亡的药物，其通过作为拓扑异构酶n抑制剂而诱导其作用。这样，根据本发明，术语"具有生物活性的基于蒽环霉素的两亲性化合物"表示表现出促进凋亡的作用，特别是抑制拓扑异构酶n活性的任何基于蔥环霉素的两亲性化合物。其他不是拓扑异构酶ii抑制剂的细胞毒性药物可以包括但不限于拓扑异构酶I的抑制剂例如托泊替康(topotecane)。其他的药物可以包括米托蒽醌和vincaalkeloid(例如长春碱和长春新碱、长春瑞滨)，所有这些都是两亲性弱碱，并可以通过pH或铵离子梯度被主动装载到脂质体上。了解了这些化合物的结构多样性的详细基础，数学方法提示可能有超过10,000个理论上的蒽环霉素类〗以物结构。该家族中的一些成员已经表现出在癌症治疗中的临床重要性，其包括正定霉素、阿霉素、伊达比星、表柔比星、吡柔比星、佐柔比星、阿柔比星和洋红霉素和奈莫柔比星。阿霉素是一种这里作为例子的具体细胞毒性药物，其具有化学名称;(8S，10S)-10-[(3-氨基-2,3，6-三脱氧-a-L-来苏己吡喃基)氧]-8-乙醇酰-7，8,9,10-四氢-6,8，11-三羟基-1-甲氧基-5，12-并四苯二酮盐酸盐，以及本领域己知的其类似物。这些类似物包括米托蒽醌、正定霉素和N-乙酰正定霉素、N-乙酰亚德里亚霉素。在美国专利4,672,057;4,345,068;4,314,054;4,229,355;4,216,157;4,199,571;4,138,480;5,304,687;US2001/036923(WO01/49698)和WO04/082579中描述了其他的阿霉素类似物，这里将这些全部作为参考引入。细胞毒性药物可以被不同于携带影响凋亡的脂质的脂质结构的脂质体所携带，但优选其被在其脂质膜中带有影响凋亡的脂质的同样脂质组装体所携带。这里所使用的术语"携带"表示在细胞毒性药物和所述组装体之间的任何相互作用，其包括但不限于包装、黏附、吸附、包埋(在脂质体组装体的内壁或外壁中，或者在脂质体内部水相中)或者嵌在脂质层中，然而，包封在脂质组装体的内部水相中是优选的携带药物的方式。根据本发明的一个优选实施方式，所述组合物包含脂质体，该脂质体包含由HSPC、，EG-DSPE和C6神经酰胺以及可选择的少量胆固醇(少于总脂质的5摩尔％)构成的膜。根据一个更优选的实施方式，Q神经酰胺的摩尔％为总脂质的大约11.5°/。。该药物组合物还可以包含生理上可以接受的载体。生理上可以接受的载体通常是指惰性的、无毒固体或液体物质，其用于促进活性实体输送到(在这一情况中是包含在所述组合物中的脂质组装体/脂质体)它们的靶位点。基于脂质的药物输送系统领域的技术人员将知晓如何选择适当的载体以达到其有效的输送。正如上面所描述的，所述的促进凋亡的脂质和细胞毒性药物可以被相同的脂质组装体或者脂质组装体的不同成分(例如两种类型的脂质体)所携带。携带影响凋亡的脂质和/或细胞毒性药物的脂质组装体/脂质体这里有时统称为"活性实体"。组合物中的活性实体的量可以根据适当设计的临床试验(剂量范围研究)来确定，本领域熟练技术人员知晓如何正确进行这些试验以确定有效量。正如所公知的，有效量取决于各种因素，包括脂质结构在体内的分布概况，各种药理学参数例如体内的半衰期、不期望的副作用(如果有的话)，还取决于诸如被治疗个体的年龄和性别等因素等。该量必须是有效达到期望治疗效果的，例如提高生存率，或者更快地使被治疗对象恢复，或者改善或者消除症状，以及其他与接受治疗的疾病相关的指示，其中这些被本领域技术人员选择作为适当的测量标准。进一步，考虑到个体的临床状态，给药的位点和方法，给药的曰程安排，患者年龄、性别、体重和执业医生已知的其他因素，来施用本发明的药物组合物并定制剂量(dosed)。剂量形式可以是在几天的时间内提供的单次剂量，或者多次剂量的形式。使用本发明的药物组合物进行治疗的日程安排通常具有与疾病的发展时间长度、待治疗个体的参数(例如年龄和性别)以及所采用具体的影响凋亡的脂质和细胞毒性药物的效率成比例的时间长度。已显示携带促进凋亡的脂质和细胞毒性药物(在一起或者在不同的月旨质组装体/脂质体中)的脂质组装体的联合有效杀死癌细胞，同时提高荷肿瘤的小鼠的存活率。这样，本发明还提供了一种治疗患有增殖性疾病或者过度增殖性疾病的对象的方法，其包括给所述对象施用本发明的药物组合物。这样，本发明优选考虑细胞毒性药物(如所限定的)与促进凋亡的脂质的联合，该联合优选用于治疗增殖性疾病或者过度增殖性疾病。术语"增殖性疾病或者过度增殖性疾病"或者縮写"过度增殖性疾病"表示任何表现为不期望的细胞增殖或超增殖(加速的生长和再生)或者细胞过多积聚的病理疾病，并且这些病理疾病需要它们诱导凋亡的治疗。有多种与细胞的加速生长和再生相关的病理疾病。例如，过度增殖性疾病可以是癌症。预计，通过本发明的方法可以治疗任何形式的癌症。癌症可以是癌，例如但不限于腺泡癌、襄性腺样癌、腺鳞癌、附属器癌、蜂窝状癌、大汗腺癌、基底细胞癌、膀胱癌、乳癌、细支气管肺泡癌、支气管癌、子宫颈癌、结肠癌、胆管细胞癌、绒毛膜癌、透明细胞癌、胶样癌、筛状癌、导管癌、胚胎癌、铠甲状癌、子宫内膜样癌、表皮样癌、食道癌、原自多形性腺瘤的癌、滤泡性甲状腺癌、胃癌、肝细胞癌、原位癌、导管内癌、许特尔细胞癌、炎性乳房癌、大细胞癌、肺癌、浸润性小叶癌、小叶癌、髓样癌、脑膜癌、Merkel细胞癌、粘液癌、粘液表皮样癌、鼻咽癌、非小细胞癌、燕麦形细胞癌、胰腺癌、乳头状癌、前列腺癌、肾细胞癌、硬癌、皮脂腺癌、单纯癌、印戒细胞癌、小细胞癌、梭形细胞癌、鳞状细胞癌、终末导管癌、移行细胞癌、小管癌和疣状癌。癌症也可以是肉瘤，例如但不限于腺泡状软组织肉瘤、成釉细胞肉瘤、葡萄状肉瘤、肾透明细胞肉瘤、子宫内膜间质肉瘤、尤因氏肉瘤、巨细胞肉瘤、血管内皮细胞肉瘤、B细胞免疫母细胞肉瘤、T细胞免疫母细胞肉瘤、卡波西肉瘤、枯否细胞肉瘤、骨源性肉瘤、伪卡波西肉瘤、网状细胞肉瘤、鲁斯肉瘤、软组织肉瘤和梭形细胞肉瘤。其他可以通过本发明的方法进行治疗的癌症包括但不限于视网膜母细胞瘤、神经母细胞瘤和胶质母细胞瘤；白血病和淋巴瘤。本发明还可以用于治疗非癌症性的过度增殖性疾病，例如包括狭窄在内的疾病或状态。例如本发明的方法可以用于治疗或预防血管中出现的再狭窄，例如但不限于在气囊血管成形术之后，或者在其他造成血管损伤的治疗之后出现的再狭窄。可以用本发明治疗的狭窄的其他例子包括但不限于主动脉狭窄、肥厚性幽门狭窄、婴儿肥厚性胃狭窄、二尖瓣狭窄、肺狭窄、幽门狭窄、主动脉瓣下狭窄、肾动脉狭窄和三尖瓣狭窄。另外，本发明可以治疗的其他疾病是增殖性皮肤不适，例如牛皮癣、特应性皮炎、过敏性接触皮炎、刺激物接触皮炎以及进一步的湿疹性皮炎、脂溢性皮肤炎。另外，本发明可以治疗的其他疾病是增殖性眼部不适，例如糖尿病性视网膜病。通过使用本发明的组合物将治疗或者预防过度增殖性疾病。在本发明中，治疗或预防表示通过将所述组合物施用于对象所能达到的任何治疗效果，其可以是预防性的，减轻该疾病或者减轻其至少一种不期望的副作用，降低疾病的严重程度或者其急性期的持续时间或者完全治愈。该术语包括抑制与病理条件有关的细胞的生长、增殖和再生；诱导在患病组织的或者病理细胞的程序性细胞死亡，进而消除或者降低病理组织的尺寸等，抑制细胞组织体到不期望的组织或者新生血管形成，以及使平衡朝更分化的细胞改变。本领域熟练技术人员可以理解的是，本发明中活性实体的联合输送的效果可以达到下面的任意一种在与病理疾病相关的症状出现之前，防止表现出症状；改善与该疾病相关的不期望症状；减慢这类症状的恶化；减慢该疾病的进展；加快疾病的缓解期的开始，减慢或者防止由于这种疾病所造成的任何不可逆损伤，减轻疾病的严重程度，提高存活率，或从疾病中更快恢复，或防止疾病出现，或者上述的任意组合。可以采用任何传统的药物实践以对对象施用本发明的组合物。可以采用任何适当的给药途径，例如但不限于静脉内、肠胃外、经皮、皮下、肌肉内、颅内、眼眶内、经眼、心室内、囊内、脊柱内、脑池内、腹膜内、鼻内、直肠内、阴道内、气雾剂或口服给药。给药的优选模式是注射，更优选的是静脉内(i.v.)注射。鄉例材料和方法材料氢化大豆磷脂酰胆碱(HSPC)是从LipoidKG(Ludwigshafen，德国)获得的；1^-氨基甲酰-聚(乙二醇甲基醚)-1，2-二硬脂酰-311-甘油-3-磷酸乙醇胺三乙基铵盐(2kPEG-DSPE)(其中聚乙二醇部分具有2000Da的分子量)是从Genzyme(Liestal，瑞士)获得的；胆固醇是从Sigma购买的；N-己酰-D-赤型-鞘氨醇(C6-Cer)是从Biolab(Jerusalem,以色列)获得的。脂质体制备物制备了下面的脂质体制剂HSPC:2kPEG-DSPE:Chol:C6Cer(全部组分的76:7.5:5:11.5摩尔°/。)、HSPC:2kPEG-DSPE:C6Cer(81:7.5:11.5摩尔％)、HSPC:2kPEG-DSPE:C6Cer(78.5:10:11.5摩尔°/。)、DSPC:2kPEG-DSPE:C6Cer(81:7.5:11.5摩尔％)和HSPC:2kPEG-DSPE:Chol:C6Cer(66:6.5:4.5:23摩尔°/0)。简要地说，将适当量的脂质存储溶液(适合形成上述脂质比例)溶解在乙醇中，以适当的摩尔比在试管中混合在一起，并在60'C进行加热。接着通过温和混合将所得到的溶液加入到硫酸铵水性缓冲液(250mM，pH5.0)，并在60'C加热1小时，以使最终的乙醇浓度达到10%，由此得到多层囊泡。接着通过将MLV通过0.4nm孔径的过滤器(Poretics,Livermore,CA，USA)挤出10次，接着通过0.1nm孔径的过滤器(Poretics,Livermore，CA，USA)挤出10次，而制备大单层囊泡(LUV100腿)，对于1ml2ml的小规模，使用AvantiPolarLipids(Alabaster,AL)的挤出系统，或者对于较大的体积，使用NorthernLipidsInc.(VancouverBC，加拿大)挤出机(2ml10ml和10ml100ml规模)。阿霉素(DXN)的远程装载已经充分表征了对于两亲性弱碱(例如葸环霉素)的远程装载程序(Barenholz等人，US5，316，771和US5,192,549，这里作为参考加以引入)。简单地讲，在使用硫酸铵(250mM，pH5.0)对脂质进行水合并挤出之后，形成了硫酸铵梯度，并通过如下方法去除乙醇对200倍体积的0.9%NaCl透析1个小时，进行三次，每次透析之后均对400倍体积的10%蔗糖进行一次24小时的透析。接着将组氨酸缓冲液(pH6.7)加入到脂质体中，达到10mM的终浓度。所得到的脂质体表现出了非常大(>1000)的跨膜硫酸铵梯度([硫酸铵]册成体[硫酸铵]介《),这引起了大的(>3pH单位)质子梯度。接着通过随着温和旋涡在60'C孵育1小时而将一定量的10mMDXN溶液加入到脂质体中。脂质体鉴定:通过动态光散射(DLS)使用ALV-NIBS/HPPSALV-激光器、VertriebsgesellschaftGmbH(Langen，德国)设备(根据用户指南)来鉴定脂质体的粒度分布(在25'C)，并使用定量TLC鉴定其神经酰胺含量。具体地说，使用溶剂体系溶解神经酰胺，所述溶剂体系由氯仿/甲醇(95:5v/v)组成。接着使用硫酸铜试剂(由含有80ml磷酸(85%)的溶解在600ml高纯水(18.2MQ)的100g无水硫酸铜组成)对TLC板进行喷雾，将经过喷雾的板加热，则脂质以咖啡色斑点出现。斑点的吸光度与神经酰胺的水平(其与适当的神经酰胺的标准曲线相比)成比例。使用来自Merk(Darsmstadt，德国)的硅胶板60F254,并使用Fluor-S-Multilmiger(Bio-RAD，CA)对神经酰胺斑点吸光度(OD)进行定量。包括PC和2kPEG-DSPE的总磷脂(PL)的含量通过确定脂质磷含量而进行验证，所述测定包括修改的Bartlett方法[Shmeeda等人，2003，MethodsinEnzymol.367，272-292]。pH梯度的确定[PadanE，等人，JBiolChem.253(1978):3281-6]确定硫酸铵和pH的跨膜梯度。为了这个目的，确定了脂质体和介质之间的"C甲胺(MA)或吖啶橙(AO)的分布。这在缺少硫酸铵梯度或具有硫酸铵梯度的脂质体中进行确定，对于后者在DXN远程装载之前和之后进行确定。在"CMA分布的研究中，在37'C进行孵育30分钟。接着，将样品向下通过(通过离心)SephadexG-50小旋转柱(spincolumn)以将包封"[C]-甲胺的脂质体与游离的未包封的14C甲胺分离。通过p-计数(KONTRON液体闪烁计数器)对该脂质体中的实际放射性进行检测。从在SephadexG50上分离前后"C甲胺/PL的比例计算pH梯度。在缺少或含有DXN的脂质体中使用其中pH内和pH介加都是已知的校正曲线。使用"CMA分布方法来确定跨膜pH梯度。在缺少DXN的脂质体中研究作为硫酸铵梯度的函数的AO在脂质体内部的积累。在lml的石英杯中使用LS5犯发光光度计(PerkinElmer，Norwalk，CT)以490nm的激发波长检测吖啶橙在525nm处的荧光发射强度。首先，在6(TC记录AO溶液的荧光强度30秒(FQ)，接着，加入脂质体，并监测荧光强度(F)，直到其达到平衡值。数据分析假定荧光的淬灭是由于AO分子从外部隔间转入到脂质体内部水性空间并且其聚集是由于硫酸铵梯度造成的[Clerc，S.和Barenholz，Y.(1998)Anal.Biochem.259，104-111]。根据下式F/Ffl计算AO的内外质量比。确定脂质体的包封水平以及DXN的释放速率使用阳离子交换剂Dowex50X4-400(AldrichChemicalCompany,Inc.)测定包封水平以及DXN从含有DXN的脂质体中释放的速率，正如Druckman等人(1989)Biochim.Biophys.Acta980:381-384;Amselem等人(19卯)J.Pharm.Sci.79:1045-1052]所描述的。使用1mg/50mg的DXN和Dowex之间的比例。将含有DXN的脂质体与Dowex(50X4-400)孵育10分钟，伴随着温和的摇动，之后以5000rpm离心2分钟。从在480nm处使用SynergyHT板读数仪(Bio-Tek,Winooski,VT，USA)以其吸光度模式获得的吸光度检测值计算DXN在脂质体中的浓度，其中通过确定加入Dowex阳离子交换剂前后的DXN水平，计算脂质体中每种脂质体制剂的阿霉素在480nm处摩尔消光系数为游离DXN的12500O.D.%。在存在血清的情况下LUV的尺寸分布分析将各种具体组合物的LUV与成年牛血清(ACS)(BiologicalIndustriesBeit-HaEmek,以色列)孵育长达24小时，ACS分别为25%和50%(体积)。通过监测25'C脂质体粒度的变化来评估LUV-血清的相互作用，所述监测通过动态光散射方法使用ALV-NIBS/HPPSALV-激光器、VertriebsgesellschaftGmbH，(Langen，德国)进行。确定在存在血清时DXN从脂质体的释放将各种脂质体(参见表l的脂质体组合物)在存在血清时在37'C孵育2、4、24和72小时。在所示时间后，在温和摇动下，使样品与DOWEX50阳离子交换剂(其结合游离的DXN，但不结合脂质体DXN)相互作用10分钟，接着以5000rpm离心2分钟。之后在含有10%0.75NHC1(ISP-HC1)的卯°/。异丙醇中将样品稀释10倍，以溶解所有的脂质体-脂质并将DXN释放到溶液中。将脂质体中的DXN浓度与混合阳离子交换剂Dowex50的脂质体中的DXN浓度进行比较，其中DXN浓度是使用SynergyHT板读数仪(Bio-Tek，Vermont,USA)以其荧光模式，根据DXN的标准校正曲线从荧光强度进行确定的(在485土10nm处激发，在5卯±10nm处发射)。细胞毒性研究通过亚甲基蓝(MB)染色检验测试C6Cer-DXN-SSL对阿霉素抗性人乳癌M-109细胞系的细胞毒性[Gorodetsky，R.等人，Int.J.Cancer.75:635-642(1998)]。将200(iL培养基中已知量的对数生长细胞铺在96微孔平底板中。对于测试的每一个变量，使用4个孔。在培养物中孵育24小时后，将不同浓度的药物或制剂加入到含有未处理细胞的各孔中。将细胞暴露于药物96小时。在暴露于药物的最后，将使用药物处理的细胞以及平行的对照细胞洗涤，并在新鲜培养基中继续孵育直到该实验结束。在生长96小时后，通过向每个孔中加入50pL的2.5°/。戊二醛15分钟而将细胞固定。使用去离子水将固定的细胞清洗10次，并使用硼酸盐缓冲液(0.1M，pH8.5)清洗一次，干燥，接着在室温(r.t.)利用MB进行染色(0.1M硼酸盐缓冲液中的100nL的l。/。溶液，pH8.5)1小时。使用去离子水对经过染色的细胞进行完全清洗以去除所有的非细胞结合的染料，接着进行干燥。通过在37'C与200nL的0.1NHC1孵育1小时，将结合到经固定的细胞上的MB提取出来，并通过板分光光度计(LabsystemsMultyskanBichromatic，芬兰)在620nm处确定每个孑L中的染料的净光学密度。脂质体DXN抗肿瘤效力的体内评估所有利用动物(小鼠)的实验程序是根据希伯来大学(HebrewUniversity)和哈达桑医疗组织(HadassahMedicalOrganization)的动物管理和使用机构委员会(InstitutionalAnimalCareandUseCommittee)所要求的标准进行的，并得到了该委员会的许可。为了测试治疗效力，将BALB/c雌性小鼠(体重范围是16-20g)腹膜内注射1><106(:-26结肠癌。通过台盼蓝拒染法测定，这些细胞的存活率为:^0。/。。研究了静脉内注射在脂质体内部水相同时含有DXN(DXN/PL比例为0.2)以及11.5摩尔％C6Cer的SSL(DXN-C6Cer-SSL)与Doxil(单独)以及游离DXN的治疗效力。在所有三种处理中，DXN的剂量为0.16mg/只小鼠(8mg/kg)，被注射入用DXN-C6Cer-SSL处理的小鼠中的C6Cer的剂量为0.25mg/只小鼠(12.5mg/kg)。在接种肿瘤细胞之后的第4天开始静脉内处理，并以5天的间隔重复三次。计算与对照(C)动物相比，经过处理的动物(T)的中值存活期和寿命的提高百分比(TX100/C)-100。荷肿瘤小鼠中的药物动力学和生物分布研究810周龄的BALB/c雌性小鼠是从希伯来大学(Jerusalem,以色列)的动物饲养房获得的，并将其在特定的没有病原体(SPF)设施中在水和食物任食情况下饲养在哈达桑医疗中心。将肿瘤细胞的一个接种体(lXl()S个鼠C-26细胞)皮下注射进每只小鼠的左胁腹中。7天后，静脉内注射同时含有DXN(0.16mg/只小鼠)和CsCer(0.25mg/只小鼠)的SSL制剂、Doxil(0.16mg/只小鼠)和游离DXN(0.16mg/只小鼠)。在注射后的第1、4、24和48小时，使用4°/。的水合氯醛(Fluka,USA)将这些动物麻醉，通过眼部接种(eyeinoculation)进行放血，并通过在5,000rpm离心5分钟将血叛与血细胞分离。取出各种器官(肝、心脏、肺、肾)和肿瘤。每个处理组中每次处理3只小鼠。将样品冷冻在-80'C，直到检验。之后，将血浆样品稀释在含有10。/。0.75NHC1的90°/。异丙醇中，以溶解所有的脂质体的脂质并将DXN释放到溶液中，其中DXN浓度是使用SynergyHT板读数仪(Bio-Tek，Vermont,USA)以其荧光模式，根据DXN的标准校正曲线从荧光强度进行确定的(在485土10nm处激发，在5卯士10證处发射)。统计学分析通过log-rank测试使用Prism软件(GraphPad，SanDiego，CA)计算中值生存期以及存活曲线中的统计学差异的显著性。P<0.05时，则认为差异是显著的。为了评估协同性，通过中值效果分析确定联合指数(CI)[ChowTC，TalalayP.定量分析联系的剂量-效果关系多种药物或者酶抑制剂的联合效果(Quantitativeanalysisofdose-effectrelationships:thecombinedeffectsofmultipledrugsorenzymeinhibitors)AdvEnzymeRegul22:27-55(l诉4)]。用于计算联合指数的方程是CI-(D,/Dx,)+(D2/Dx2)+(DiD2/Dx,Dx2)，其中Dx是单独一种药物在其各自IC50时的浓度，D是导致50%生长抑制时药物在联合中的浓度。继细胞毒性研究首先进行体外研究以测试脂质体C6Cer和阿霉素的联合作用。发现脂质体C6Cer的IC50和IC10值分别是3.1(iM和1.4jiM。接着使用单独提供的DXN(1^、2.5)iM或5^iM)或者与在其IC，o的脂质体Q;Cer联合而得到的剂量应答曲线。在图1中所表示的体外结果显示施用脂质体C6Cer和DXN对乳癌M-109阿霉素抗性细胞系的存活具有加和作用。从以游离形式和单独提供时游离DXN的ICso值为2.2jiM，而存在Ido浓度的脂质体C6Cer时的IC50值为0.9mM来看是明显的(图1)。联合指数(CI)[ModrakDE,等人，鞘磷脂和吉西他滨的协同相互作用增强胰腺癌中神经酰胺介导的凋亡(Synergisticinteractionbetweensphingomyelinandgemcitabinepotentiatesceramide-mediatedapoptosisinpancreaticcancer)CancerRes.2004年11月15日；64(22):8405-10]被确定为等于1.0。考虑到CI值<0.9说明协同作用，在0.9和U之间的CI值说明加和作用，CI>1.1说明拮抗作用，所得到的CI说明在这种细胞系中脂质体C6Cer和DXN之间的加和相互作用。脂质体制剂的鉴定成功地形成了由HSPC或者形成DSPC脂质体的脂质构成的SSL(lOOnm)，其被^PEG-DSPE稳定，并具有11.5摩尔%或者23摩尔n/。的CsCer。为了进一步研究，使用了作为形成脂质体的脂质的HSPC、脂聚合物2kPEG-DSPE(7.5摩尔°/。)和C6Cer。在一些制剂中，在SSL中使用了低量的胆固醇(5摩尔％)。DXN被用作细胞毒性药物。如上所述，利用脂质体髙/介质低的跨膜铵离子梯度通过主动(远程)装载将DXN引入到预先形成的SSL。为了检测跨膜pH，在装载DXN前后确定加入到具有硫酸铵梯度的脂质体的"[C]-甲胺的分布。大约80°/。的"[C]-甲胺被分配到缺少DXN的脂质体中，而装载DXN后，仅有大约30n/o的"[C]-甲胺被分配到脂质体中。基于校正曲线，这暗示在两种情况中，在介质pH均为6.7的条件下，装载前的pH梯度为3.3个pH单位，装载后仅有1.4个pH单位。这些结果说明所有经过测试的和这里所描述的脂质体制剂都具有DXN(通过结合所有游离DXN的阳离子交换剂Dowex50评估的)和C6Cer(通过TLC评估的)的高包封率(卯％95°/0)。LUV稳定性通过使用动态光散射检测粒度分布和通过确定游离DXN的百分比来评估4'C保存过程中脂质休制剂的稳定性，所述游离DXN的百分比是通过将阳离子交换剂Dowex50加入到SSL制剂中而检验的。发现含有11.5摩尔％C6Cer的SSL制剂在物理上能够稳定8个月。而含有23摩尔°/0C6Cer的SSL制剂则是不稳定的，因为在4'C保存3个星期后已经出现了C6Cer的释放，但这些脂质体制剂保持了其跨膜pH梯度(通过14[C]-甲胺分布确定的(参见"材料和方法"))至少3个月，其提示部分C6Cer的释放不会破坏脂质体的屏障性能。分别由HSPC:2kPEG-DSPE:C6Cer(81:7.5:11.5摩尔°/。)、HSPC:2kPEG-DSPE:C6Cer(78.5:10:11.5摩尔0/。)和DSPC:2kPEG-DSPE:C6Cer(81:7.5:11.5摩尔°/。)组成的脂质体制剂能够稳定至少3个月(仍在进行实验中)。SSL制剂在血清中尺寸分布的检测因为这些SSL制剂是为了静脉内(i.v.)给药的目的，因此研究和评估血清对CsCer-DXN-SSL与Doxil相比的物理稳定性的影响是重要的。因此，通过在"材料和方法"中所描述的动态光散射检测了具有不同组成的不同IOOnmSSL制剂由于暴露于成年牛血清(ACS)而导致的尺寸变化。发现，如在下表l中所详细描述的，如果与下表中的血清接触，所有SSL制剂的尺寸都不会显著变化。表l:血清对SSL制剂的尺寸分布的影响:<table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>存在血清时，DXN从脂质体的释放应用脂质体的基本需要是它们需要将药物保持在脂质体内部，其一方面能够将最大量的药物带到靶位点，另一方面能够降低细胞毒性并因此提高药物的治疗指数。因此，一个目的是确定与^JDoxil制剂释放药物相比，DXN从所制备的各种脂质体释放的速率。结果显示从具有11.5摩尔。/。C6Cer的DXN-SSL以及从Doxil释放DXN的速率都非常低。而且，发现在将各种SSL与血清孵育72小时后，9597%的DXN被保持在脂质体中，而不取决于脂质体制剂中脂质的组成。在相同SSL中含節XN和C6Cer的脂质体与Doxi湘比在小鼠肿瘤模型中的治疗效力评估为了测试治疗效力，将BALB/c雌性小鼠腹膜内注射lX106C-26鼠结肠癌。接着确定与Doxil相比，静脉内注射同时含有DXN与C6Cer(在膜中)的SSL的治疗效力。图2中所表示的结果证明，100°/0(p***<0.0005)的经过同时含有DXN和11.5摩尔。/。C6Cer的SSL(HSPC:2kPEG-DSPE:Chol:C6Cer(76:7.5:5:11.5)-DXN)处理的小鼠存活了2个月(长期存活)，而在使用Doxil(脂质体DXN)处理小鼠的情况下存活率为70%(p***<0.0005)。与Doxil或者与含有11.5摩尔。/。C6Cer的包封有DXN的SSL相比，含有23摩尔％C6Cer的包封有DXN的SSL表现出的抗癌活性的效果较低，其中观察到仅17%的长期存活。也测试了荷肿瘤的小鼠的长期存活(注射肿瘤后超过60天)。Doxil与SSL-C6Cer-DXN之间效力的比较证明，开始处理之后80天，75°/。的用两种类型SSL制剂处理的小鼠存活下来(p***<0.0001)，而没有经过处理的小鼠或者经过游离DXN处理的小鼠则没有存活下来的(0%)。在治疗后90天，仅25。/。的经过Doxil处理的小鼠存活下来，而75°/。的经过SSL-C6Cer-DXN处理的小鼠存活下来。这些结果表示在图3中。如果比较经过处理和未处理组的中值存活时间，则发现在用Doxil处理的组中的中值存活时间为80天，而在用游离DXN和未处理的组中的存活时间分别为35天和16天。在经过同时含有DXN和C6Cer的脂质体制剂处理的小鼠中，中值存活时间超过80天并因此而没有得到确定。在荷肿瘤的小鼠中阿霉素药物动力学和生物分布的研究将肿瘤细胞的一个接种体(1X106C-26细胞)皮下注射到BALB/c雌性小鼠的左fl办腹中。7天后，静脉注射同时含有DXN和C6Cer的脂质体制剂[HSPC:2kPEG-DSPE:Chol:C6Cer(76:7.5:5:11.5)-DXN];Doxil或游离DXN,并通过眼部接种进行放血，分离血浆并从血浆中取出50pl用于进一步的分析。在"提取"血浆后，根据在"方法"中所描述的方法使用酸性异丙醉确定DXN水平。药物动力学研究显示借助SSL-C6Cer-DXN输送的DXN具有长循环时间(相当于Doxil)，而且比游离DXN长得多。发现，注射后48小时，借助SSL-C6Cer-DXN或者Doxil输送的DXN分别有36o/。和32。/Q保持在循环中，而在注射后l小时，通过游离DXN得到3。/。仍保持在血浆中(下面检测在48小时游离DXN的血浆水平)。这些结果表示在图4A中。在不同的时间点确定了通过两种类型的SSL制剂(HSPC:2kPEG-DSPE:Chol:C6Cer(76:7.5:5:11.5)-DXN，或Doxil)或者通过游离DXN输送到不同器官和肿瘤组织的DXN的生物分布，并将结果表示在图4B中。正如所示，游离DXN被肾脏清除得比SSL-C6Cer-DXN被肾脏清除得快得多，在心脏组织中检测到水平高得多的作为游离药物输送的游离DXN(比较在处理后4小时，5.7。/。的游离DXN和分别为1.6Q/。与l.lQ/。的注射的SSL-C6Cer-DXN動oxil)。这提示，与游离DXN相比，SSL-C6Cer-DXN和Doxil对心脏的毒性降低了。另一方面，由于两种类型的SSL长得多的循环时间，在所有测试时间在肿瘤组织中发现了显著髙的DXN水平，其在注射后24小时达到了最高值(比较在注射SSL-C6Cer-DXN或Doxil的情况下分别为11%和9.4°/0，在注射游离DXN的情况下为1%)。因此，得出结论包含空间稳定(SSL)神经酰胺的包封有DXN的脂质体戯oxil以比游离DXN高得多的水平在肿瘤中积累，这说明了更优秀的治疗活性，另外，与游离DXN相比，降低了借助SSL输送的DXN的全身和心脏毒性。权利要求1.一种药物组合物，该药物组合物包含(a)稳定的脂质组装体，该稳定的脂质组装体包含i)影响凋亡的脂质，其在极性环境中并不自聚集形成脂质体；ii)脂聚合物；(b)携带细胞毒性两亲性弱碱药物的脂质体。2.—种药物组合物，该药物组合物含有稳定的脂质组装体，该稳定的脂质组装体包含i)影响凋亡的脂质，其在极性环境中并不自聚集形成脂质体；H)脂聚合物；iii)由所述脂质组装体携带的细胞毒性两亲性弱碱药物。3.如权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述的脂质组装体是脂质体。4.如权利要求13中任一项所述的药物组合物，其中所述的影响凋亡的脂质是促进凋亡的脂质。5.如权利要求4所述的药物组合物，其中所述的促进凋亡的脂质具有疏水区和极性头部基团，所述头部基团和疏水区之间的原子质量比为小于0.3。6.如前述任一项权利要求所述的药物组合物，其中所述的脂聚合物具有疏水脂质区和聚合物头部基团，其中所述头部基团和疏水区之间的原子质量比为至少1.5。7.如前述任一项权利要求所述的药物组合物，其中所述的脂质组装体具有脂质基质，该脂质基质包含脂质或者加和包装参数为0.741.0的脂质的联合。8.如前述任一项权利要求所述的药物组合物，其中所述的脂聚合物具有紧紧结合到其头部基团的水，所述水的结合水平为每个脂聚合物头部基团至少大约60个水分子。9.如权利要求38中任一项所述的药物组合物，其中所述的促进凋亡的脂质具有等于或者大于l的包装参数。10.如权利要求9所述的药物组合物，其中所述的促进凋亡的脂质选自神经酰胺、神经胺、二氢鞘氨醇、二氢鞘氨醇-l-磷酸、二烷基鞘氨醇或三烷基鞘氨醇以及它们的结构类似物。11.如权利要求10所述的药物组合物，其中所述的促进凋亡的脂质具有下面的通式(I):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中，-R,代表C2-C26的饱和或不饱和的有分支或无分支的脂肪族链，该脂肪族链可以被一个或者多个羟基或者环烷基取代，并可以由环亚烷基部分构成；-R2可以相同或者不同，其代表氢、d-C26饱和或不饱和的有分支或无分支的链，该链选自脂肪族链、脂肪族羰基链；含有环亚烷基的脂肪族链，所述脂肪族链可以被芳基、芳烷基或者芳烯基所取代；-R3代表氢、甲基、乙基、乙烯基、碳水化合物基或者磷酸基。12.如权利要求ll所述的药物组合物，其中R,是ds脂肪族链，一个112是氢，另一个R2如上面所限定，且R3是氢。13.如权利要求11或12所述的药物组合物，其中R,是具有CrC2反式双键的C,5不饱和脂肪族链，一个R2是氢，另一个R2是C,-C26的饱和或不饱和的任选带有羟基取代基的脂肪族链，且R3是氢。14.如权利要求11或12所述的药物组合物，其中所述的促进凋亡的脂质是神经酰胺。15.如权利要求14所述的药物组合物，其中所述的促进凋亡的脂质是C2-C2fi神经酰胺。16.如权利要求15所述的药物组合物，其中所述的促进凋亡的脂质是选自C2神经酰胺、C4神经酰胺、C6神经酰胺或者C8神经酰胺的短链神经酰胺。17.如权利要求16所述的药物组合物，其中所述的神经酰胺是C6神经酰胺。18.如前述任一项权利要求所述的药物组合物，其中所述的脂聚合物包含选自下列的聚合物头部基团聚乙二醇(PEG)、聚唾液酸、聚乳酸、聚羟基乙酸、聚乳酸-聚羟基乙酸、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯垸酮、聚甲基噁唑啉、聚乙基噁唑啉、聚羟乙基噁唑啉、聚羟丙基噁唑啉、聚天冬酰胺、聚羟丙基甲基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酰胺、聚二甲基丙烯酰胺、聚乙烯甲基醚、聚丙烯酸羟乙酯、衍生的纤维素。19.如权利要求18所述的药物组合物，其中所述的聚合物头部基团是聚乙二醇(PEG)。20.如权利要求19所述的药物组合物，其中所述的PEG具有2，000Da的原子质量(2kPEG)。21.如权利要求7所述的药物组合物，其中所述的脂质基质包含磷脂。22.如权利要求21所述的药物组合物，其中所述的磷脂是甘油磷脂。23.如权利要求22所述的药物组合物，其中所述的甘油磷脂是两性离子磷脂，该两性离子磷脂选自磷脂酰胆碱(PC)、蛋黄磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(DMPC)和鞘磷脂(SM);或者是阴离子磷脂，该阴离子磷脂选自磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酸(PA)、磷脂酰甘油(PG)和二肉豆蔻酰磷脂酰甘油(DMPG);或者是阳离子磷脂，该阳离子磷脂选自其中磷酸单酯被O-甲基化而形成阳离子脂质的磷脂酰胆碱或鞘磷脂。24.如权利要求23所述的药物组合物，其中所述的甘油磷脂是氢化大豆磷脂酰胆碱(HSPC)。25.如权利要求724中任一项所述的药物组合物，其中所述的脂质组装体包含HSPC、2kPEG-DSPE和C6神经酰胺。26.如权利要求17或25所述的药物组合物，其中所述脂质组装体中的所述(:6神经酰胺的摩尔％为ii.5。27.如权利要求726中任一项所述的药物组合物，其中所述的脂质组装体包含摩尔％等于或者小于5°/。的胆固醇。28.如前述任一项权利要求所述的药物组合物，其中所述的细胞毒性药物是基于蒽环霉素的药物。29.如权利要求28所述的药物组合物，其中所述的药物是阿霉素或其具有生物活性的基于蒽环霉素的类似物。30.如权利要求329中任一项所述的药物组合物，其中所述的药物被包封在脂质体中。31.—种药物组合物，其包含第一脂质体和第二脂质体，所述第一脂质体包含Qs神经酰胺和脂聚合物，所述第二脂质体包封有阿霉素或其具有生物活性的基于蒽环霉素的类似物。32.—种药物组合物，其包含脂质体，该脂质体包含有C6神经酰胺和形成部分脂质体膜的脂聚合物，该脂质体包封有阿霉素或其具有生物活性的基于蒽环霉素的类似物。33.如权利要求31或32所述的药物组合物，其中所述C6神经酰胺以总脂质11.5°/。的摩尔％存在于所述膜中。34.如权利要求3032中任一项所述的药物组合物，其中所述的脂质体在4'C保存条件下稳定至少6个月。35.—种治疗患有过度增殖性疾病的对象的方法，该方法包括给所述对象施用药物组合物，该药物组合物包含(a)稳定的脂质组装体，该稳定的脂质组装体包含i)影响凋亡的脂质，其在极性环境中并不自聚集形成脂质体；ii)脂聚合物；(b)携带细胞毒性两亲性弱碱药物的脂质体。36.—种治疗患有过度增殖性疾病的对象的方法，该方法包括给所述对象施用药物组合物，该药物组合物包含稳定的脂质组装体，该稳定的脂质组装体包含i)影响凋亡的脂质，其在极性环境中并不自聚集形成脂质体；ii)脂聚合物；iii)由所述脂质组装体携带的细胞毒性两亲性弱碱药物。37.如权利要求35或36所述的方法，其中所述的脂质组装休是脂质体。38.如权利要求3537中任一项所述的方法，其中所述的影响凋亡的脂质是促进凋亡的脂质。39.如权利要求38所述的方法，其中所述的促进凋亡的脂质具有疏水区和极性头部基团，所述头部基团和疏水区的原子质量比为小于0.3。40.如权利要求3539中任一项所述的方法，其中所述的脂聚合物具有疏水脂质区和聚合物头部基团，其中所述头部基团和疏水区的原子质量比为至少1.5。41.如权利要求3540中任一项所述的方法，其中所述的脂质组装体具有脂质基质，该脂质基质包含脂质或者加和包装参数为0.741.0的脂质的联合。42.如权利要求3541中任一项所述的方法，其中所述的脂聚合物具有紧紧结合到其头部基团的水，该水的结合水平为每个头部基团至少大约60个水分子。43.如权利要求3842中任一项所述的方法，其中所述的促进凋亡的脂质具有大于l的包装参数。44.如权利要求3843中任一项所述的方法，其中所述的促进凋亡的脂质选自神经酰胺、神经胺、二氢鞘氨醇、二氢鞘氨醇-l-磷酸、二烷基鞘氨醇或三烷基鞘氨醇以及它们的结构类似物。45.如权利要求44所述的方法，其中所述的促进凋亡的脂质具有下面的通式(I):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中，-R,代表CrC26的饱和或不饱和的有分支或无分支的脂肪族链，该脂肪族链可以被一个或者多个羟基或者环烷基取代，并可以由环亚烷基部分构成；-R2可以相同或者不同，其代表氢、d-C26的饱和或不饱和的有分支或无分支的链，该链选自脂肪族链、脂肪族羰基链；含有环亚烷基的脂肪族链，所述脂肪族链可以被芳基、芳烷基或者芳烯基所取代；-R3代表氢、甲基、乙基、乙烯基、碳水化合物基或者磷酸基。46.如权利要求45所述的方法，其中R,是C,5脂肪族链，一个R2是氢，另一个R2如上面所限定，且R3是氢。47.如权利要求43或44所述的方法，其中R,是具有d-C2反式双键的ds不饱和脂肪族链，一个R2是氢，另一个R2是d-C26饱和或不饱和的任选带有羟基取代基的脂肪族链，且R3是氢。48.如权利要求47所述的方法，其中所述的促进凋亡的脂质是神经酰胺。49.如权利要求48所述的方法，其中所述的神经酰胺是C2-C26神经酰胺。50.如权利要求49所述的方法，其中所述的促进凋亡的脂质是选自C2神经酰胺、Q神经酰胺、C6神经酰胺或者C8神经酰胺的短链神经酰胺。51.如权利要求50所述的方法，其中所述的神经酰胺是C6神经酰胺。52.如权利要求3551中任一项所述的方法，其中所述的脂聚合物包含选自下列的聚合物头部基团聚乙二醇(PEG)、聚唾液酸、聚乳酸、聚羟基乙酸、聚乳酸-聚羟基乙酸、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚甲基噁唑啉、聚乙基噁唑啉、聚羟乙基噁唑啉、聚羟丙基噁唑啉、聚天冬酰胺、聚羟丙基甲基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酰胺、聚二甲基丙烯酰胺、聚乙烯甲基醚、聚丙烯酸羟乙酯、衍生的纤维素。53.如权利要求50所述的方法，其中所述的聚合物头部基团是聚乙二醇(PEG)。54.如权利要求51所述的方法，其中所述的PEG具有2，000Da的原子质量(2kPEG)。55.如权利要求52所述的方法，其中所述的脂质基质包含磷脂。56.如权利要求53所述的方法，其中所述的磷脂是甘油磷脂57.如权利要求54所述的方法，其中所述的甘油磷脂是两性离子磷脂，该两性离子磷脂选自磷脂酰胆碱(PC)、蛋黄磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(DMPC)和鞘磷脂(SM);或者是带负电荷的磷脂，该带负电荷的磷脂选自磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酸(PA)、磷脂酰甘油(PG)和二肉豆蔻酰磷脂酰甘油(DMPG);或者是阳离子磷脂，该阳离子磷脂选自其中磷酸单酯被O-甲基化而形成阳离子脂质的磷脂酰胆碱或鞘磷脂。58.如权利要求57所述的方法，其中所述的甘油磷脂是氢化大豆磷脂酰胆碱(HSPC)。59.如权利要求3558中任一项所述的方法，其中所述的脂质组装体包含HSPC、2kPEG-DSPE和C6神经酰胺。60.如权利要求51或59所述的方法，其中所述脂质组装体中的所述(:6神经酰胺的摩尔％为总脂质的11.5%。61.如权利要求4160中任一项所述的方法，其中所述的脂质组装体包含摩尔％等于或者小于5%的胆固醇。62.如权利要求3561中任一项所述的方法，其中所述的细胞毒性药物是基于蒽环霉素的药物。63.如权利要求62所述的方法，其中所述的药物是阿霉素或其具有生物活性的基于蒽环霉素的类似物。64.如权利要求3763中任一项所述的方法，其中所述的药物被包封在脂质体中。65.—种治疗患有过度增殖性疾病的对象的方法，该方法包括给所述对象施用药物组合物，该药物组合物包含稳定的脂质组装体，该稳定的脂质组装体包含包含有C6神经酰胺和脂聚合物的脂质体以及包封有阿霉素或其具有生物活性的基于蒽环霉素的类似物的脂质体。66.—种治疗患有过度增殖性疾病的对象的方法，该方法包括给所述对象施用药物组合物，该药物组合物包含稳定的脂质组装体，该稳定的脂质组装体包含C6神经酰胺和形成部分脂质体膜的脂聚合物以及包封有阿霉素或其具有生物活性的基于蒽环霉素的类似物的脂质体。67.如权利要求65或66所述的方法，其中所述的C6神经酰胺以总脂质11.5%的摩尔％存在于所述膜中。68.如权利要求3567中任一项所述的方法，该方法包括通过注射来施用所述的组合物。69.—种治疗患有过度增殖性疾病的对象的方法，该方法包括给所述对象施用以下脂质体的联合在其膜中包含有脂聚合物和06神经酰胺的脂质体；以及包封有阿霉素或其具有生物活性的基于蒽环霉素的类似物的脂质体。70.—种治疗患有过度增殖性疾病并用包含阿霉素或其具有生物活性的基于蒽环霉素的类似物的脂质体治疗的对象的方法，所述方法包括给所述对象施用有效量的在其膜中包含有脂聚合物和C6神经酰胺的脂质体。71.—种治疗患有过度增殖性疾病并用在其膜中包含脂聚合物和C6神经酰胺的脂质体治疗的对象的方法，所述方法包括给所述对象施用包含阿霉素或具有生物活性的基于蒽环霉素的阿霉素类似物的脂质体。72.如权利要求6971中任一项所述的方法，该方法包括施用所述包含阿霉素或具有生物活性的基于蒽环霉素的阿霉素类似物的脂质体，以及同时施用或在其后很短时间内施用在其膜中包含脂聚合物和C6神经酰胺的所述脂质体。73.—种稳定的脂质组装体以及携带细胞毒性两亲性弱碱药物的脂质体在制备药物组合物中的应用，所述稳定的脂质组装体包含在极性环境中并不自聚集形成脂质体的影响凋亡的脂质，和脂聚合物。74.—种稳定的脂质组装体以及由该脂质组装体携带的细胞毒性两亲性弱碱药物在制备药物组合物中的应用，所述脂质组装体具有脂质膜，并在其脂质膜中包含在极性环境中并不自聚集形成脂质体的影响凋亡的脂质。75.如权利要求3或74所述的应用，其用于制备权利要求134任一项所述的药物组合物。全文摘要本发明涉及联合优选为神经酰胺与细胞毒性药物的联合疗法，具体地说，本发明涉及包括联合两个活性实体的新型医学治疗，并涉及含有这两个活性实体的药物组合物。更具体地说，本发明提供了一种药物组合物，该药物组合物包含稳定的脂质组装体，该脂质组装体包含作为第一活性实体的在极性环境中并不自聚集形成脂质体的影响凋亡的脂质以及脂聚合物。所述药物组合物还包含作为第二活性实体的由该脂质组装体或由不同脂质体所携带的细胞毒性两亲性弱碱药物。根据一个实施方式，所述影响凋亡的脂质是促进凋亡的脂质。优选的促进凋亡的脂质是神经酰胺，优选C<sub>6</sub>神经酰胺。所述细胞毒性两亲性弱碱药物优选是阿霉素或具有生物活性的基于蒽环霉素的阿霉素类似物。文档编号A61K31/704GK101102752SQ200580045520公开日2008年1月9日申请日期2005年11月15日优先权日2004年11月15日发明者叶切科尔·巴伦霍茨,埃琳娜·哈扎诺夫申请人:耶路撒冷希伯来大学伊萨姆研发公司