专利名称：一种中药组合物在制备降低恶性细胞因子水平的药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物的新用途，具体地，涉及一种中药组合物在 制备降低恶性细胞因子水平的药物中的应用。
背录技术
导致心力衰竭发生发展的基本机制是心室重塑。心室重塑是由于一 系列复杂的分子和细胞机制导致心肌结构、功能和表型的变化。这些变
化包括神经内分泌的激活(如血管紧张素n、内皮素、肿瘤坏死因子、
氧自由基及丙二醛等)、血液动力学的改变、心肌细胞凋亡及心肌细胞超 微结构的变化等。
现代医学认为，内皮素(ET)是目前已知的最强烈的血管收縮因子,不 但直接刺激或激活多种激素和细胞因子，而且参与心血管疾病的病理生 理过程，临床和实验研究显示它在诱发加重心力衰竭的进程中起着重要 作用。肿瘤坏死因子(TNF-(X)是多种类型细胞发挥多重效应的细胞因 子，心力衰竭时血流动力学及神经内分泌异常可促进巨噬细胞产生 TNF-a，使TNF-a升高。
慢性充血性心力衰竭(chronic heart failure, CHF)时，血管内皮功 能障碍，血管壁切应力改变，缺血、缺氧和多种细胞因子及内分泌因子 的激活均可通过对ET基因转录和表达的调节刺激ET合成和释放，CHF 时肺循环淤咖和肾灌注下降，亦使ET的清楚代谢下降，升高的ET可使 心肌细胞肥大，诱导心肌细胞胚胎型基因的表达，影响成纤维细胞的胶 原合成代谢，导致心肌间质纤维化，构成心室重构的病理基础。ET对心 肌细胞还具有直接毒性及致心律失常作用。TNF-a是由活化的单核巨噬 细胞分泌的一种细胞激动剂，可损害血管内皮，抑制心肌收縮力，导致 右心室明显扩大，刺激成纤维细胞增值，参与心室重构的病理过程，同 时促进ET分泌。心力衰竭时，神经体液因子、细胞因子及局部内皮细 胞的功能受损对疾病的转归有重要的负面作用。(赵顺锋.血浆脑钠肤、 心钠素、内皮素-1与肿瘤坏死因子联合检测在充血性心力衰竭患者中的研究.医学检验与临床.2007年第18巻第4期.)
心力衰竭过程中所产生的内皮素和肿瘤坏死因子等均对机体有害， 因此，我们将心力衰竭过程中所产生对机体有害的细胞因子统称为恶性 细胞因子，而内皮素和肿瘤坏死因子均属于其中的一种。
本发明是在中国专利ZL 02146573.8的基础上进行的改进发明，在此全文 引用该专利文件记载的内容。中国专利ZL 02146573.8未记载该中药组合物在 制备降低恶性细胞因子水平的药物中的应用。本发明提供了该中药组合物在 制备降低恶性细胞因子水平的药物中的新应用。
发明内容
本发明目的是提供一种中药组合物在制备降低恶性细胞因子水平的药 物中的应用；
优选地，该中药组合物能够有效降低心力衰竭患者血浆内皮素(ET)、 和肿瘤坏死因子(TNF-a)水平。
本发明药物是选用黄芪、人参、附子、丹参等ll味药物组成，具有 温阳化饮，益气活血的功效。
所述中药组合物由如下重量份的原料药制成
黄芪150-450份、附子40-120份、人参或党参75-225份、丹参75-225 份、葶苈子50-150份、香加皮或南五加皮60-180份、泽泻75-225份、 玉竹25-75份、桂枝30-90份、红花30-90份、陈皮25-75份；
优选地，所述中药组合物由如下重量份的原料药制成
黄芪450份、附子112.5份、人参或党参225份、丹参225份、 葶苈子150份、香加皮或南五加皮180份、泽泻225份、玉竹75份、 桂枝90份、红花90份、陈皮75份；
优选地，所述中药组合物由如下重量份的原料药制成
黄芪250份、附子112.5份、人参或党参200份、丹参120份、 葶苈子135份、香加皮或南五加皮150份、泽泻200份、玉竹60份、 桂枝75份、红花75份、陈皮60份。
本发明中药组合物的活性成分可以由常规的提取工艺[如范碧亭《中药药剂学》(上海科学出版社1997年12月第1版)]制得，更优选地，所述
中药组合物的活性成分由下列步骤制得的有效成分组成
(1) 将黄芪、葶苈子、泽泻、人参或党参、香加皮或南五加皮用7-9 倍量70%乙醇提取，滤过，浓縮提取液至在6(TC热测时相对密度为1.25-1.30 的清膏；
(2) 提取桂枝、陈皮的挥发油；
(3) 附子、丹参、玉竹、红花加6-10倍量水煎煮2次，每次2小时，合 并提取液，滤过；桂枝、陈皮提油后的水溶液滤过，收集水溶液滤液，再加 6-IO倍量水煎煮残渣I小时，滤过，合并水溶液；将上述所得的各种水溶液 合并，浓縮至相对密度为1.25-1.30清膏，搅拌中加入乙醇，至醇浓度70%， 静置，滤过，滤液浓縮至在6(TC热测时相对密度为1.25-1.30清膏。
本发明还提供了该中药组合物胶囊剂的制备方法
(1) 将黄芪、葶苈子、泽泻、人参或党参、香加皮或南五加皮按照比 例量称取加8倍量70%乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次2小时，合并 提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓縮至相对密度为1.25-1.30 (6(TC热 测)的清膏，备用；
(2) 桂枝、陈皮按照比例蒸馏提取挥发油，提油后的水溶液滤过，备 用，残渣再加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并水煎液，备用；
(3) 附子、丹参、玉竹、红花加水9倍量煎煮2次，每次2小时，合并提 取液，滤过，与步骤(2)中桂枝、陈皮水煎液合并，浓縮至相对密度为 1.25-1.30 (6CTC热测)清膏，搅拌中加入乙醇，至醇浓度70%， 4'C以下静置 24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，浓縮至相对密度为1.25-1.30 (60'C热 观ij)清膏，与步骤(l)的醇提清膏混合，65-70'C烘干；
(4) 将步骤(3)所得干膏粉碎成100目粉，力口70%乙醇适量制粒，喷入 桂枝、陈皮挥发油，混匀，装胶囊，即得。
本发明中药组合物中，作为活性组分的原料药的拉丁名及其加工方法来 自《中药大辞典》(1977年7月，第一版，上海科学技术出版社)和《中国 药典》(2005年版，化学工业出版社)。学》(上海科学出版社1997年12月第1版)记载的制备工艺，制成药剂学可 接受的任意常规剂型，例如胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂等。 本发明的应用中，所述中药组合物制剂剂型为胶囊剂、片剂、颗粒剂、 散剂、口服液或丸剂，为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药 学可接受的辅料，例如填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味
剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘 露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括淀粉、预胶化淀粉、微 晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联 羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二 氧化硅等；助悬剂包括聚乙烯吡咯垸酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙 基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维 素等；甜味剂包括糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味 剂包括甜味剂及各种香精；防腐剂包括尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、
山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括PEG6000， PEG4000，虫蜡等。为使上述剂型能够实现中药药剂学，需在制备这些剂型 时加入药学可接受的其它辅料(范碧亭《中药药剂学》，上海科学出版社1997 年12月第1版中各剂型记载的辅料)。
本发明中药组合物的用量，按活性组分原料药总重量计，为4-20克/日， 可每日服用一次，优选为分2-4次服用，还优选为6-12克/日，分2-4次服用， 更优选为7.59克/日，分3次服用。
为阐明本发明中药组合物降低恶性细胞因子水平的活性，用按实施例方 法所制得的药物(以下称本发明药物)进行了下列试验。
1、 动物
健康Wistar大鼠，清洁级，雌雄各半，体重200 240g，购于河北省动 物实验中心，许可证号SCXK (冀)2003 — 1—003。饲养在河北以岭医药研 究院药理室，光照12小时/天，温度20 23匸，相对湿度40 60%。大鼠笼 养，5只/笼。大鼠饲料为全价颗粒饲料，由河北省实验动物中心提供。适应 性饲养三天。
2、 药物本发明药物(由石家庄以岭药业股份有限公司提供，批号20060601)， 试验用蒸馏水配成所需浓度。
3、 实验方法 3.1分组与造模
大鼠随机分为3组假手术组，模型组，本发明药物4.8g生药/kg 剂量组。每组10只。药物以蒸馏水稀释至所需浓度，给药体积均为 10ml/kg，给药途径为口服。
采用腹主动脉縮窄法制作慢性心力衰竭(心衰)大鼠模型。大鼠用 戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，剑突下腹正中切口，分层打开腹腔，在肾动 脉分支以上钝性游离腹主动脉，将7号注射器针头平行置于腹主动脉上， 用4号手术丝线将腹主动脉和注射器一同结扎，然后缓慢将注射器撤出， 关腹，分层缝合。使大鼠腹主动脉直径縮窄为0.7mm。假手术组开腹后 将手术丝线穿过腹主动脉，除不縮窄腹主动脉以外，其他操作与模型组 完全相同。术后3周开始口服给药，每日一次。连续给药4周。 3.2观察指标及方法
颈总动脉放血处死大鼠，采用放射免疫分析方法测定血浆中内皮素 和肿瘤坏死因子操作按说明书进行。 3.3统计学分析
实验数据采用SPSS11.5版软件包进行统计学处理。实验数据以均数 士标准差表示。用单因素方差分析，PO.05作为差别有显著性的检验水准。
4、 结果
表1本发明药物对大鼠血浆肿瘤坏死因子和内皮素的影响(x士S，n-10)
组别/指标TNF-a(pg/ml)ET(ng/L)
假手术组37.68± 10.45127.42±35.38
模型组110.23±24.35**330.45 ±44.24"
本发明药物组68.52±21.95##201.68±52.41##
与假手术组比较"PO.05;与模型组比较弁弁P0.01
从表l可以看出，模型组与假手术组比较，TNF-a、 ET水平显著升 高(PO.01);本发明药物组与模型组比较，TNF-a、 ET水平均明显下降 (PO.Ol)。 5、结论以上实验研究表明，本发明药物可明显降低心衰大鼠ET水平，逆 转心室重构，改善心功能；模型组大鼠TNT-a水平明显升高，表明TNF-a 可加重心功能及血流动力学的恶化，促进心脏结构的改变，本发明药物 具有逆转这一过程的作用。
综上所述，本发明药物可明显降低心力衰竭患者血浆内皮素(ET) 和肿瘤坏死因子(TNF-a)水平。
具体实施例方式
实施例l:本发明药物胶囊剂的制备
处方
黄芪450g 附子112.5g人参225g丹参225g葶苈子150g 香加皮180g泽泻225g 红花90g玉竹75g陈皮75g桂枝90g 制备方法
(1) 将黄芪、葶苈子、泽泻、人参、香加皮按照上述处方加8倍量70% 乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次2小时，合并提取液，滤过，滤液 减压回收乙醇，浓縮至相对密度为1.25-1.30 (6(TC热测)的清膏，备用；
(2) 桂枝、陈皮按照处方量蒸馏提取挥发油，提油后的水溶液滤过， 备用，残渣再加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并水煎液，备用；
(3) 附子、丹参、玉竹、红花加水9倍量煎煮2次，每次2小时，合并提 取液，滤过，与步骤(2)中桂枝、陈皮水煎液合并，浓縮至相对密度为 1.25-1.30 (6(TC热测)清膏，搅拌中加入乙醇，至醇浓度70%， 4t:以下静置 24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，浓縮至相对密度为1.25-1.30 (6(TC热 测)清膏，与步骤(1)的醇提清膏混合，65-7CTC烘干；
(4) 干膏混合粉碎成100目粉，力[]70%乙醇适量制粒，喷入桂枝、陈皮 挥发油，混匀，装胶囊，制成1000粒，即得。
实施例2:本发明药物片剂的制备 处方
黄芪150g附子40g人参225g丹参225g葶苈子50g 香加皮180g泽泻75g玉竹75g桂枝30g红花90g陈皮25g制备方法
(1) 将黄芪、葶苈子、泽泻、人参、香加皮按照上述处方加8倍量70% 乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次2小时，合并提取液，滤过，滤液 减压回收乙醇，浓縮至相对密度为1.25-1.30 (60。C热测)的清膏，备用；
(2) 桂枝、陈皮按照处方量蒸馏提取挥发油，提油后的水溶液滤过， 备用，残渣再加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并水煎液，备用；
(3) 附子、丹参、玉竹、红花加水9倍量煎煮2次，每次2小时，合并提 取液，滤过，与步骤(2)中桂枝、陈皮水煎液合并，浓縮至相对密度为 1.25-1.30 (6(TC热测)清膏，搅拌中加入乙醇，至醇浓度70%， 4。C以下静置 24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，浓縮至相对密度为1.25-1.30 (6(TC热 测)清膏，与步骤(1)的醇提清膏混合，65-7(TC烘干；
(4) 按常规制剂方法制成片剂。 实施例3:本发明药物口服液的制备 处方
黄芪250g 附子112.5g党参200g丹参120g葶苈子135g 南五加皮150g泽泻200g玉竹60g桂枝75g红花75g 陈皮60g 制备方法按常规制剂方法制成口服液。
10
权利要求
1、一种中药组合物在制备降低恶性细胞因子水平的药物中的应用，其特征在于所述中药组合物由如下重量份的原料药制成黄芪150-450份、附子40-120份、人参或党参75-225份、丹参75-225份、葶苈子50-150份、香加皮或南五加皮60-180份、泽泻75-225份、玉竹25-75份、桂枝30-90份、红花30-90份、陈皮25-75份。
2、 如权利要求1所述的应用，其特征在于所述中药组合物由如下重量份的 原料药制成黄芪450份、附子112.5份、人参或党参225份、丹参225份、 葶苈子150份、香加皮或南五加皮180份、泽泻225份、玉竹75份、 桂枝90份、红花90份、陈皮75份。
3、 如权利要求1所述的应用，其特征在于所述中药组合物由如下重量份的 原料药制成黄芪150份、附子40份、人参或党参225份、丹参225份、 葶苈子50份、香加皮或南五加皮180份、泽泻75份、玉竹75份、 桂枝30份、红花90份、陈皮25份。
4、 如权利要求1所述的应用，其特征在于所述中药组合物由如下重量份的 原料药制成黄甚250份、附子112.5份、人参或党参200份、丹参120份、 葶苈子135份、香加皮或南五加皮150份、泽泻200份、玉竹60份、 桂枝75份、红花75份、陈皮60份。
5、 如权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述中药组合物的活 性成分由下列步骤制成(1) 将黄芪、葶苈子、泽泻、人参或党参、香加皮或南五加皮用7-9 倍量70%乙醇提取，滤过，浓縮提取液至在6(TC热测时相对密度为1.25-1.30 的清膏；(2) 提取桂枝、陈皮的挥发油；(3) 附子、丹参、玉竹、红花加6-10倍量水煎煮2次，每次2小时，合并提取液，滤过；桂枝、陈皮提油后的水溶液滤过，收集水溶液滤液，再 加6-10倍量水煎煮残渣1小时，滤过，合并水溶液；将上述所得的各种水 溶液合并，浓縮至相对密度为1.25-1.30清膏，搅拌中加入乙醇，至醇浓度 70%，静置，滤过，滤液浓縮至在6(TC热测时相对密度为1.25-1. 30的清膏。
6、 如权利要求1-4中任一项所述的应用，其特征在于，所述中药组合物作 为活性成分的药物制剂为胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂。
7、 根据权利要求6所述药物胶囊剂的制备方法，其特征在于，它是由以下 步骤组成(1) 将黄芪、葶苈子、泽泻、人参或党参、香加皮或南五加皮按照比 例量称取加8倍量70%乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次2小时，合并 提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓縮至相对密度为1.25-1.30 (6(TC热 测)的清膏，备用；(2) 桂枝、陈皮按照比例蒸馏提取挥发油，提油后的水溶液滤过，备 用，残渣再加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并水煎液，备用；(3) 附子、丹参、玉竹、红花加水9倍量煎煮2次，每次2小时，合并提 取液，滤过，与步骤(2)中桂枝、陈皮水煎液合并，浓縮至相对密度为 1.25-1.30 (6(TC热测)清膏，搅拌中加入乙醇，至醇浓度70%， 4。C以下静置 24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，浓縮至相对密度为1.25-1.30 (60。C热 测)清膏，与步骤(1)的醇提清膏混合，65-7(TC烘干；(4) 将步骤(3)所得干膏粉碎成100目粉，力卩70%乙醇适量制粒，喷入 桂枝、陈皮挥发油，混匀，装胶囊，即得。
8、 如权利要求1-4中任一项所述的应用，其特征在于，该中药组合物在制 备降低血浆内皮素水平药物中的应用。
9、 如权利要求1-4中任一项所述的应用，其特征在于，该中药组合物在制 备降低肿瘤坏死因子水平药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种中药组合物在制备降低恶性细胞因子水平的药物中的应用。本发明中药组合物由黄芪、人参、丹参等11味中药组成，能有效降低心力衰竭患者血浆内皮素(ET)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的水平。
文档编号A61K9/00GK101590182SQ20081005518
公开日2009年12月2日 申请日期2008年5月30日 优先权日2008年5月30日
发明者安军永, 李向军, 超 王, 郑立发 申请人:河北以岭医药研究院有限公司