专利名称：川楝子提取物在制药中的应用及其提取方法
技术领域：
本发明涉及川楝子提取物的应用及其提取方法，特别是涉及川楝子提取物在制药中的第 二用途以及该川楝子提取物的提取方法。
技术背景骨质疏松症、类风湿性关节炎、多发性骨髓瘤、Paget'S病、溶骨性骨肉瘤等是与破骨 细胞生理活性具有相关性的疾病，特别是骨质疏松症已严重危害全球人类健康，尤其危害老 年人的健康和生活质量。临床上对该类疾病尚无安全、低毒、有效的治疗药物。目前，从天 然资源中发展新的预防和治疗骨质疏松症等骨丢失性疾病的药物逐渐成为研究中的一个热点川楝子为楝科植物川楝Melia toosendan Sieb. et Zucc.的干燥成熟果实。冬季果实成 熟时采收，去除杂质，干燥。主产于四川、甘肃、云南、贵州、湖北等地。川楝子味苦，性 寒，有小毒，有舒肝行气止痛，驱虫的功效，目前川楝子主要用于胸胁、脘腹胀痛，疝痛， 虫积腹痛等疾病的治疗。发明内容到目前为止，还没有发现川楝子提取物能抑制破骨细胞生长活性的相关报道，发明人在 研究中首次发现，川楝子中的某些成分具有很好的抑制破骨细胞生长活性的功效，所以，本 发明所要解决的技术问题是提供川楝子提取物在制备治疗骨丢失性疾病的药物中的应用以及 川楝子提取物的提取方法。为了解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案川楝子提取物在制备治疗骨丢失性疾病的药物中的应用。进一步的，川楝子提取物在制备治疗骨质疏松症、类风湿性关节炎、多发性骨髓瘤、Paget' S病和溶骨性骨肉瘤的药物中的应用。前述的应用是将川楝子提取物加入药物载体，制成药剂学意义上的各种剂型。 前述的川楝子提取物是从川楝子中提取得到的水溶性和醇溶性的有效成分。 本发明还提供了一种优选的川楝子提取物的提取方法取川楝子，用水或水溶性有机溶剂提取，提取液过滤，滤液用有机溶剂萃取分离，萃余物减压浓縮，然后用60 100%的醇水溶液溶解，过滤，滤液回收溶剂，即得。具体地，川楝子提取物的提取方法取干燥川楝子，加入4 10倍量水或水溶性有机溶 剂在20 9(TC提取1 6次，每次5分钟 5小时，合并提取液，过滤，滤液用O. 5 2倍量有机 溶剂萃取，萃余物减压浓縮成清膏，清膏用60 100%的醇水溶液溶解，过滤，滤液回收溶 剂，即得。在上述提取方法中，所述水溶性有机溶剂是浓度为0 100%的含1 6个碳原子的醇、烷 或酯的水溶液。萃取分离所用的有机溶剂为中极性或低极性有机溶剂。所述提取为浸提或回 流提取。骨丢失性疾病与破骨细胞生理活性密切相关，申请人对川楝子提取物在抑制破骨细胞生 长活性方面的作用进行了研究和验证，具体如下称取已制备好的川楝子提取物10mg，加入适量的、已处理好的含有破骨细胞的培养基中 ，在37'C条件下培养7天，并以相同条件作对照。通过电子显微镜观察，对照组培养基中的 破骨细胞生长良好，而加入川楝子提取物的培养基中几乎没有破骨细胞生长，说明川楝子提 取物具有很好的抑制破骨细胞生长的活性(如图l、图2和图3所示)。与现有技术相比，本发明首次公开了一种从川楝子中提取得到的具有抑制破骨细胞活性 功能的天然物质，并通过实验证明了该提取物对破骨细胞的活性有很强的抑制作用，其抑制 率可达95%以上，可用于制备治疗和预防骨丢失性疾病的药物。本发明所提供的提取方法简 单易行，非常适合推广应用。
图l:阴性对照组，未加入RANKL诱导剂的RAW 246. 7细胞经培养，没有破骨细胞形成； 图2:阳性对照组，加入RANKL诱导剂的RAW 246. 7细胞经培养，有破骨细胞形成； 图3:实验组加入川楝子活性提取物和RANKL诱导剂的RAW 246. 7细胞经培养，几乎没 有破骨细胞形成，活性抑制率95%以上。
具体实施方式
本发明通过下面的实施例予以进一步说明，但实施例并不限定本发明的范围。 实施例l:将干燥的川楝子粉碎，过40目筛，称取150g，加入70。/。的乙醇溶液1000ml，于 室温下浸泡3次，每次72h，合并浸泡液，过滤，滤液用l倍量氯仿萃取，萃余物在58'C下减 压浓縮成清膏后用95%乙醇溶解、过滤，滤液减压回收溶剂后，在-8(TC左右真空冷冻干燥 12h，即得具有抑制破骨细胞生长活性的提取物。将提取物加入药物载体，混合，制粒，干燥，即得颗粒剂。用于治疗骨丢失性疾病，例 如骨质疏松症、类风湿性关节炎、多发性骨髓瘤、Paget'S病、溶骨性骨肉瘤等。实施例2:将干燥的川楝子粉碎过40目筛，称取150g，加入10倍量水于8(TC回流提取6次 ，每次2h，合并提取液，过滤，滤液用0.5倍量乙酸乙酯萃取，萃余物减压浓縮成稠膏状， 用95%乙醇溶解、过滤，滤液减压回收溶剂后，在-8(TC左右真空冷冻干燥12h，所得的提取 物具有很好的抑制破骨细胞生长的活性。将提取物加入药物载体，混合，制粒，干燥，压片，即得片剂。用于治疗骨丢失性疾病 ，例如骨质疏松症、类风湿性关节炎、多发性骨髓瘤、Paget'S病、溶骨性骨肉瘤等。实施例3:将干燥的川楝子粉碎过40目筛，称取150g，加入70。/。的甲醇-水溶液1000ml， 于室温下浸泡6次，每次24h，合并提取液，过滤，滤液用石油醚萃取，萃余物在58'C减压浓 縮成稠膏状，用甲醇溶解、过滤，滤液减压回收溶剂后，在-8(TC左右真空冷冻干燥12h，所 得的提取物具有很好的抑制破骨细胞生长的活性。将提取物加入药物载体，制成胶囊剂。用于治疗骨丢失性疾病，例如骨质疏松症、类风 湿性关节炎、多发性骨髓瘤、Paget'S病、溶骨性骨肉瘤等。实施例4:将干燥的川楝子粉碎过40目筛，称取150g，加入70。/。的乙醇-水溶液1000ml， 于9(TC下回流提取2次，每次6h，合并提取液，过滤，滤液用氯仿萃取，萃余物在减压浓縮 成稠膏状，用甲醇溶解、过滤，滤液减压回收溶剂后，在-8(TC左右真空冷冻干燥12h，所得 的提取物具有很好的抑制破骨细胞生长的活性。将提取物加入药物载体，制成丸剂。用于治疗骨丢失性疾病，例如骨质疏松症、类风湿 性关节炎、多发性骨髓瘤、Paget'S病、溶骨性骨肉瘤等。实施例5:将干燥的川楝子粉碎过40目筛，称取150g，加入4倍量乙醇，于室温下浸泡3 次，每次浸泡5天，合并浸泡液，过滤，滤液用氯仿萃取，萃余物在6(TC减压浓縮成稠膏状 ，用60%乙醇溶解、过滤，滤液减压回收溶剂后，在-8(TC左右真空冷冻干燥12h，所得的提 取物对破骨细胞的生长具有很强的抑制作用，其抑制率达95% 。将提取物加入药物载体，制成口服液。用于治疗骨丢失性疾病，例如骨质疏松症、类风 湿性关节炎、多发性骨髓瘤、Paget'S病、溶骨性骨肉瘤等。实施例6:将干燥的川楝子粉碎过40目筛，称取150g，加入10倍量50%的甲醇，于6(TC 下回流提取5次，每次lh，合并提取液，过滤，滤液用乙酸乙酯萃取，萃余物在58。C减压浓 縮成稠膏状，用70%甲醇溶解、过滤，滤液减压回收溶剂后，在-8(TC左右真空冷冻干燥12h ，所得的提取物对破骨细胞的生长有很强的抑制作用。将提取物加入药物载体，制成注射剂。用于治疗骨丢失性疾病，例如骨质疏松症、类风 湿性关节炎、多发性骨髓瘤、Paget'S病、溶骨性骨肉瘤等。实施例7:将干燥的川楝子粉碎过40目筛，称取150g，加入70。/。的乙醇溶液1000ml，于室 温下浸泡5次，每次浸泡4天，合并浸泡液，过滤，滤液用乙酸乙酯萃取，萃余物在65。C减压 浓縮成稠膏状，用甲醇溶解、过滤，滤液减压回收溶剂后，在-8(TC左右真空冷冻干燥12h， 所得的提取物对破骨细胞的生长有很强的抑制作用。将提取物加入药物载体，制成保健药品。用于预防骨丢失性疾病，例如骨质疏松症、类 风湿性关节炎、多发性骨髓瘤、Paget'S病、溶骨性骨肉瘤等。实施例8:将干燥的川楝子粉碎过40目筛，称取150g，加入30。/。的乙醇溶液1000ml，于80 'C下回流提取3次，每次10h，合并提取液，过滤，滤液用乙醚萃取，萃余物在58'C减压浓縮 成稠膏状，用甲醇溶解、过滤，滤液减压回收溶剂后，在-8(TC左右真空冷冻干燥12h，所得 的提取物对破骨细胞的生长有很强的抑制作用。将提取物加入食物载体，制成保健食品。用于预防骨丢失性疾病，例如骨质疏松症、类 风湿性关节炎、多发性骨髓瘤、Paget'S病、溶骨性骨肉瘤等。
权利要求
1. 川楝子提取物在制备治疗骨丢失性疾病的药物中的应用。
2.川楝子提取物在制备治疗骨质疏松症、类风湿性关节炎、多发性 骨髓瘤、Paget' S病和溶骨性骨肉瘤的药物中的应用。
3.按照权利要求1或2所述川楝子提取物在制药中的应用，其特征在 于所述药物为将川楝子提取物加入药物载体，制成药剂学意义上的各种剂型。
4.按照权利要求1一3任一所述川楝子提取物在制药中的应用，其特 征在于所述川楝子提取物是从川楝子中提取得到的水溶性和醇溶性的有效成分。
5.川楝子提取物的提取方法，其特征在于取川楝子，用水或水溶 性有机溶剂提取，提取液过滤，滤液用有机溶剂萃取分离，萃余物减压浓縮，然后用60 100%的醇水溶液溶解，过滤，滤液回收溶剂，即得。
6.按照权利要求5所述川楝子提取物的提取方法，其特征在于取干 燥川楝子，加入4 10倍量水或水溶性有机溶剂在20 9(TC提取1 6次，每次5分钟 5小时 ，合并提取液，过滤，滤液用O. 5 2倍量有机溶剂萃取，萃余物减压浓縮成清膏，清膏用60 100%的醇水溶液溶解，过滤，滤液回收溶剂，即得。
7.按照权利要求5或6所述川楝子提取物的提取方法，其特征在于 所述水溶性有机溶剂是浓度为0 100%的含1 6个碳原子的醇、烷或酯的水溶液。
8.按照权利要求5或6所述川楝子提取物的提取方法，其特征在于 萃取分离所用的有机溶剂为中极性或低极性有机溶剂。
9.按照权利要求5或6所述川楝子提取物的提取方法，其特征在于 所述提取方法为浸提或回流提取。
全文摘要
本发明提供了一种具有抑制破骨细胞活性的提取物及其提取方法和应用，该提取物是从川楝子中提取的，将川楝子用水或水溶性有机溶剂提取，所得提取液用有机溶剂萃取，萃余物减压浓缩后，用60～100％醇水溶解，过滤，滤液回收溶剂并干燥得到活性提取物，该提取物可以用于制备治疗骨丢失性疾病的药物。与现有技术相比，本发明首次公开了一种从川楝子中提取得到了具有抑制破骨细胞活性的天然物质，对破骨细胞活性的抑制率可达95％以上，本发明所提供的提取方法简单易行，所得的提取物可以用于制备治疗骨丢失性疾病的药物，为这些疾病的治疗提供了一种新的、有效的选择。
文档编号A61K36/58GK101239100SQ20081030056
公开日2008年8月13日 申请日期2008年3月14日 优先权日2008年3月14日
发明者英 周, 郭东贵, 黄赤夫 申请人:贵州大学