专利名称：血管衰老抑制剂和抗衰老制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种血管衰老抑制剂和抗衰老制剂，具体涉及一种显示高吸收速率 的血管衰老抑制剂和抗衰老制剂。
背景技术：
新陈代谢能力随着年龄增加而逐渐退化，导致疲劳感增强和组织功能降低。因 此，近年来已经对作为潜在抗衰老治疗的抗氧化剂(例如维生素)、多种激素制剂和不饱 和脂肪酸的经皮吸收或口服进行了各种实验。然而，这些实验仅代表抗衰老治疗中的一 个步骤。另一方面，生物蛋白质中有1/3为胶原，并且该胶原为生物结构中的主要结构 蛋白质。另外，现在清楚地了解胶原不仅仅起到作为生物体支持结构的简单机械作用， 还在保护细胞和作为细胞间因子方面具有极其重要的生物作用。因此，JP 7-278012A提出了包含胶原蛋白或其水解产物作为主要成分的新陈代 谢促进剂。
发明内容
一旦出现衰老，随着血管壁细胞的衰老，血管逐渐丧失弹性，并且血小板和胆 固醇在血管壁上积聚，这增加了动脉硬化的可能性。本发明提供了一种血管衰老抑制剂和一种抗衰老制剂，其能够抑制血管衰老并 能够抑制动脉硬化。本发明的血管衰老抑制剂和抗衰老制剂具有下述特征。(1)根据本发明的一个方面，提供了一种血管衰老抑制剂，其包含作为主要成分 的来源于鱼皮的低分子量胶原，并且进一步包含如钙和磷的矿物质以及任意的维生素。如上所述，来源于鱼皮的低分子量胶原比从其它原料获得的胶原显示出更高的 吸收速率。因此，重新调整了有效吸收的氨基酸肽，并且体内吸收的胶原促进血管壁的 新陈代谢。这导致内皮细胞从血管壁剥离，意味着粘附到内膜上的血小板和胆固醇也逐 渐地被除去，因而使纤维斑块的数量减少。因此，血管壁以基本不变的方式更新，而且 也可以抑制血小板和胆固醇的粘附。通过有规律地施用包含作为主要成分的来源于鱼皮 的低分子量胶原的血管衰老抑制剂，可以改善整个血管壁的弹性，也可以防止血小板和 胆固醇的粘附。(2)根据本发明的另一个方面，提供了在上述(1)中披露的血管衰老抑制剂，其 中，所述来源于鱼皮的低分子量胶原的重均分子量为大约3,000。与高分子量的胶原相比，上述低分子量胶原通过体内酶解分解成更低分子量的 氨基酸肽，并因此使体内(例如，通过肠吸收)的吸收速率非常高，这表明可以提高血管 壁再生过程的效率。(3)根据本发明的又一方面，提供了一种抗衰老制剂，其中，在上述(1)或(2)中披露的血管衰老抑制剂为粒状。与胶囊或片剂相比，制备粒状的制剂促进了当所述制剂达到肠时发生的酶解。
基于下面的附图，将详细地描述本发明的实施方式，其中图1为显示来源于鱼皮的胶原肽与来源于动物皮的胶原肽的吸收之间的关系 图；图2为图示来源于鱼皮的胶原的一个实例的重均分子量的测量结果的图，该实 例表示根据本发明的一个实施方式的抗衰老制剂的主要成分；以及图3为图示动脉硬化的实例的血管的示意剖面图。
具体实施例方式下面将参照附图描述本发明的血管衰老抑制剂和抗衰老制剂的一个实施例。根据原料，胶原大致分为来源于动物皮的胶原(例如，来源于猪皮的胶原和来 源于鸡皮的胶原)和来源于鱼的胶原。已知来源于动物皮的胶原比来源于鱼的胶原具有 更高的变应原性，因此，来源于鱼的胶原具有更高的安全性。此外，来源于鱼的胶原包 括来源于鱼皮的胶原和来源于鱼鳞的胶原。来源于鱼鳞的胶原是使用浓盐酸通过对硬的 鱼鳞进行化学处理得到的，并因此不仅可能在该胶原中含有残留的盐酸，而且由于盐酸 无规地打开生物活性氨基酸肽键，还可能使部分得到的胶原肽已经丧失活性。相反地， 通过适当地施加热并选择特异酶可以在不损失氨基酸肽键的生物活性的情况下分解来源 于鱼皮的胶原，并因此，其不仅安全，还提取出比那些从鱼鳞获得的胶原肽具有更高生 物活性的胶原肽。另外，来源于动物皮的胶原通常具有哺乳动物特有的氨基酸序列，并且趋向比 来源于鱼的胶原包含更大量的胶原特异性氨基酸，如脯氨酸。脯氨酸与羟基键合，并 以羟基脯氨酸的形式存在于胶原内，并且具有比其它氨基酸显示出更强的结合能力的特 征。由于来源于动物皮的胶原包含比在鱼中发现的更大量的羟基脯氨酸，其趋向更难分 解。可以这样解释，这一现象反映了这样的事实，即许多哺乳动物为陆基动物，保护它 们的身体免受非常易变气候的伤害或者免受异物入侵的需要导致那些生存下来的哺乳动 物的皮肤生而坚韧。因此，从图1中可以看出，即使来源于动物的胶原和来源于鱼的胶 原具有相同的分子量，来源于鱼的胶原比来源于动物的胶原的分解程度更高。换言之， 来源于鱼的胶原显示出极高的体内吸收速率(参见FOOD Style 21，2003.2，pp.85_88)。然而，已知在体内通常以三种状态产生胶原，这三种状态为早期交联、成熟交 联和老化交联。在本说明书中，“早期交联”指的是分子内和分子间胶原交联的状态， 其高比例地存在于胎儿或新生动物的胶原纤维中，并且其易于被酸溶解，“成熟交联” 指的是在酸或热的存在下仍然稳定的交联，其不会被四氢硼酸钠还原，并且其包括交联 的结构，例如吡啶诺林或脱氧吡啶诺林，而“老化交联”指的是其中交联通过麦拉德反 应(又称糖化反应)并在体内活性酶的影响下继续发展的状态(参见，“The Collagen Story"，by DaisaburoFUJIMOTO, published by Tokyo Kagaku Dozin 有限公司，第 3 版， 2006 年 7 月 3 日，pp.73-100)。
通常而言，随着衰老的进行，在组成血管壁的胶原中，老化交联的比例也逐渐 提高。因此，血管壁中的胶原交联的程度增加，这导致血管壁硬化，引起血管本身丧失 弹性，并增加了血小板和胆固醇在血管壁上的积聚，使得动脉硬化的几率增大。例如，图3示意地图示了其中动脉硬化已经引起动脉壁变厚和硬化的状态。从 图3中可以看出，在遭受动脉粥样硬化的动脉壁中，在位于血管10的外膜12和中层14 内侧的内膜20的附近区域内的平滑肌细胞进行反复的分裂，并导致单核细胞渗透并积聚 在上皮细胞间，接着，单核细胞和平滑肌细胞都开始吞噬包含在血液中的脂肪，主要为 胆固醇，导致内皮细胞也开始积聚脂质。因此，所述内皮细胞增大，当内皮细胞层破裂 时，血小板开始与暴露的胶原纤维结合，导致纤维斑块16的产生和积聚，所述纤维斑块 16为向血管10的内腔18突出的脂肪结构。这些积聚的纤维斑块16的厚度如图3中的箭 头所示。一般而言，动脉粥样硬化是通过使用血管导管实施气囊血管成形术并在血管内 植入支架来进行治疗的。然而，较理想的为预防上述类型的动脉粥样硬化的发生。目前 的药物疗法为通过降低血管阻力实现抗高血压效果，或者通过降低血液脂质以改善高脂 血症来发挥作用，但是目前没有药物声称直接作用在血管上以提供实现血管恢复和再生 的机制。因此，本发明实施方式的血管衰老抑制剂包括作为主要成分的胶原。如上所述，来源于鱼皮的低分子量胶原比来源于其它原料的胶原显示出更高的 吸收速率，并因此使有效吸收的氨基酸肽被重组，并且体内吸收的胶原促进血管壁的新 陈代谢。这加速了示于图3中类型的血管10的中层14的内腔18侧的内皮细胞的新陈代 谢，并且内膜的内腔18侧的细胞的更新导致这些细胞剥离，意味着在内膜上形成的纤维 斑块16也被除去并且被冲入血液中，在血管中它们被作为废物处理并从体内排出。而且，通过口服本发明实施方式的血管衰老抑制剂一段时间后，可以加速血管 壁细胞的新陈代谢，导致整个血管壁弹性的改善并且显著地抑制纤维斑块16的产生。此外，在根据本发明实施方式的血管衰老抑制剂中，上述来源于鱼皮的低分子 量胶原的重均分子量为大约3,000。因此，与高分子量的胶原相比，通过体内酶解，所述 胶原分解成更低分子量的氨基酸肽，并因此使体内的吸收速率(例如通过肠吸收)非常 高，意味着可以提高血管壁的再生过程的效率。从其中可以得到来源于鱼的胶原的鱼的实例包括东方狐鲣鱼(bonito)、鲔鱼、四 鳍旗鱼、鳕鱼、竹荚鱼(horse mackerel)、鲭鱼、鲑鱼、鳟鱼、秋刀鱼、鳗鱼、罗非鱼、 剥皮鱼(thread-sail filefish)、鼻鲈鱼(grouper)、大比目鱼、比目鱼(flounder)、牛舌鱼 (sole)、鲱鱼、沙丁鱼、鲨鱼、鳐鱼、河豚鱼、鲱鱼(yellowtail)、蝎子鱼、岩鱼和青鳕 鱼，并且优选使用来自这些鱼中的鱼皮胶原。可以用于胶原分解的蛋白质水解酶的实例包括中性的蛋白酶、碱性的蛋白酶、 酸性蛋白酶和胃蛋白酶。所述酶解通常在如下条件下进行在30°C 60°C，且优选 40°C 50°C的温度范围内，在酸性环境(例如，1.0 2.0的pH值)中温育胶原10 60 分钟，且优选15 40分钟。上述酶解得到的酶解产物经过反渗透膜处理并回收作为浓缩液。对于反渗透 膜，优选盐阻挡率(salt blocking ratio)为10% 50%的反渗透膜，市售可得的膜的实例包 括产品 NTR-7410、NTR-7430 和 NTR-7450 (均由 Nitto DenkoCorporation 制造)。在浓
5缩液体的过程中，当液体通过膜时，优选以1 10倍的原液体体积加入水。图2显示包含在本发明的实施方式的血管衰老抑制剂中的源于鱼皮的低分子量 胶原的重均分子量的测量结果。测量条件包括在下述条件下使用HPLC分析法。柱TSK-凝胶保护柱PWXL、TSK-凝胶 G3000 PWXL> TSK-凝胶 G2500PWXL (均由 Tosoh Corporation 生产)；流动相0.5%(w/v)NaCl 水溶液；流动速率0.8ml/min；温度室温(23°C )；检测器紫外光谱检测器(220nm)；样品注入10 μ 1的1 2% (w/v)的来源于鱼皮的胶原的水溶液；标准样品注入包含的下面三种标准样品之一的水溶液，即，溶菌酶(来源 于鸡蛋白，重均分子量14,300)、胰岛素(来源于牛胰腺，重均分子量5,733)和缓激 肽(重均分子量1,240)(均由Sigma-Aldrich Co.制造)。此外，根据本发明的实施方式的抗衰老制剂为包含粒状的上述血管衰老抑制剂 的制剂。与胶囊或片剂相比，制备粒状的制剂促进了当所述制剂到达肠时发生的酶解。实施例下文中，采用操作实施例描述本发明的血管衰老抑制剂和抗衰老制剂。应该理 解的是，无论以何种方式，本发明的范围不受下面描述的实施例的限制。[粒状抗衰老制剂的制备]使用来自鲟形目或鲽形目的鱼皮作为来源于鱼皮的胶原的原料，以及使用胃蛋 白酶作为分解酶，调节pH值至1.5，然后，在40°C的温度下进行酶解20分钟。接着， 在上述的用于HPLC分析方法的条件下测量产物，显示所得的来源于鱼皮的胶原的重均 分子量为3,000。[实验实施例]将由上述制备方法得到的粒状抗衰老制剂给12个受试者口服，每日一次，剂量 为每次服用足以提供5.0g的来源于鱼皮的胶原。使用超声仪器(LOGIQ 7 PRO，GECo.制 造)在进行服用前和服用3个月后测量颈动脉内膜的厚度来分别分析12位受试者(表1 中分别标记为“受试者1”至“受试者12” )的血管状态。
动脉硬化为动脉内膜变厚的现象，如果内膜的厚度超过Imm时，不论年龄都会 诊断动脉硬化。目前认为诊断动脉硬化的最精确的方法包括使用精确的超声仪器测量颈
权利要求
1.一种血管衰老抑制剂，其包含作为主要成分的来源于鱼皮的低分子量胶原。
2.根据权利要求1所述的血管衰老抑制剂，其中，所述来源于鱼皮的低分子量胶原是 使用鲟形目或鲽形目的鱼皮作为原料通过酶解得到的。
3.根据权利要求1所述的血管衰老抑制剂，其中，所述来源于鱼皮的低分子量胶原的 重均分子量为大约3,000。
4.根据权利要求2所述的血管衰老抑制剂，其中，所述来源于鱼皮的低分子量胶原的 重均分子量为大约3,000。
5.一种抗衰老制剂，
6.一种抗衰老制剂，
7.一种抗衰老制剂，
8.一种抗衰老制剂，其包含粒状的根据权利要求1所述的血管衰老抑制剂。 其包含粒状的根据权利要求2所述的血管衰老抑制剂。 其包含粒状的根据权利要求3所述的血管衰老抑制剂。 其包含粒状的根据权利要求4所述的血管衰老抑制剂。
全文摘要
一种血管衰老抑制剂，其包含作为主要成分的来源于鱼皮的低分子量胶原，其中，所述来源于鱼皮的低分子量胶原的重均分子量为大约3,000。
文档编号A61K35/60GK102014949SQ200980116718
公开日2011年4月13日 申请日期2009年5月19日 优先权日2008年5月20日
发明者石井光 申请人:石井光