专利名称：作为酪氨酸激酶调节剂用于治疗肿瘤的二氢吡唑衍生物的制作方法
作为酪氨酸激酶调节剂用于治疗肿瘤的二氢吡唑衍生物
背景技术：
本发明的目的在于发现具有有价值的性质的新化合物，特别是可用于制备药剂的 那些。本发明涉及化合物和化合物的用途，其中激酶、特别是酪氨酸激酶和/或丝氨酸/ 苏氨酸激酶的信号转导的抑制、调节和/或调控发挥作用，本发明还涉及包含这些化合物 的药物组合物和这些化合物用于治疗激酶诱导的疾病的用途。具体而言，本发明涉及化合 物和化合物的用途，其中Met激酶的信号转导的抑制、调节和/或调控发挥作用。实现细胞调节的主要机制之一是通过跨膜胞外信号转导来进行的，该转导转而调 控细胞内的生化路径。蛋白质磷酸化代表了一种过程，通过该过程胞内信号在分子与分子 间传播，最终导致细胞应答。这些信号转导级联受到高度调节并且经常重叠，这一点可由 存在许多蛋白激酶以及磷酸酶而看出。蛋白质磷酸化主要发生在丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸 残基上，因此已经按照其磷酸化位点的特异性对蛋白激酶进行了分类，即丝氨酸/苏氨酸 激酶和酪氨酸激酶。由于磷酸化是细胞内的这类遍在过程并且由于细胞表型主要受这些 路径活性的影响，所以目前认为许多疾病状态和/或疾病可归因于激酶级联分子成分的异 常活化或功能突变。因此，已经有大量的关注致力于表征这些蛋白质和能调控其活性的 化合物(就综述而言，参见Weinstein-Oppenheimer 等人，Pharma. &. Therap. ,2000,88, 229-279)。S. Berthou 等人在 Oncogene，第 23 卷，第 31 期，第 5387-5393 页(2004)中描述了 受体酪氨酸激酶Met在人瘤形成中的作用和抑制HGF (肝细胞生长因子)依赖性Met活化的 可能性。其中所述的抑制剂SU11274(—种吡咯-二氢吲哚化合物)可能适合于对抗癌症。 J. G. Christensen 等人在 CancerRes. 2003，63 (21)，7345-55 中描述了另一种用于癌症治疗 的 Met-激酶抑制剂。H. Hov 等人在 Clinical Cancer Research 第 10 卷，6686-6694 Q004) 中报导了用于对抗癌症的另一种酪氨酸激酶抑制剂。化合物PHA-665752( —种吲哚衍生 物)对抗HGF受体c-Met。其中还报导了 HGF和Met对各种形式的癌症如多发性骨髓瘤的 恶变过程有很大贡献。因此，需要合成特异性地抑制、调节和/或调控酪氨酸激酶和/或丝氨酸/苏氨酸 激酶、特别是Met激酶的信号转导的小化合物，这是本发明的目的。已经发现本发明的化合物及其盐具有非常有价值的药理学性质，同时具有良好的 耐受性。本发明特别涉及抑制、调节和/或调控Met激酶的信号转导的式I化合物、包含这 些化合物的组合物和其用于在哺乳动物中治疗Met激酶-诱导的疾病和不适(complaints) 的使用方法，如血管生成、癌症、肿瘤形成、生长和传播、动脉硬化、眼病如年龄诱发的黄斑 变性、脉络膜新血管形成和糖尿病性视网膜病、炎性疾病、关节炎、血栓形成、纤维化、肾 小球肾炎、神经变性、银屑病、再狭窄、伤口愈合、移植物排斥、代谢疾病和免疫系统疾病， 还有自身免疫性疾病、硬化、糖尿病和血管疾病，还有不稳定性(instability)和渗透性 (permeability)等。
可用Met激酶抑制剂治疗实体瘤，特别是快速生长的肿瘤。这些实体瘤包括单核 细胞白血病、脑癌、泌尿生殖系统癌症、淋巴系统癌症、胃癌、喉癌和肺癌，包括肺腺癌和小 细胞肺癌。本发明涉及用于预防和/或治疗与失调的或紊乱的Met激酶活性相关的疾病的调 节、调控或抑制Met激酶的方法。特别地，式I化合物还可用于治疗某些形式的癌症。式I 化合物还可用于在某些现有的癌症化疗中提供相加或协同作用，和/或可用于恢复某些现 有癌症化疗和放疗的功效。式I化合物还可用于分离和研究Met激酶的活性或表达。此外，它们特别适合用 在与失调的或紊乱的Met激酶活性相关的疾病的诊断方法中。可以证实本发明的化合物在异种移植物肿瘤模型中具有体内抗增殖作用。对具有 过度增殖性疾病的患者施用本发明的化合物，例如以便抑制肿瘤生长、减轻与淋巴组织增 殖性疾病相关的炎症、抑制因组织修复导致的移植物排斥或神经损害等。本发明的化合物 适合于预防或治疗目的。本文所用的术语“治疗”用于指预防疾病和治疗先前存在的病症。 通过在发生明显疾病前施用本发明的化合物来预防增殖，例如预防肿瘤生长、预防转移性 生长、减少与心血管手术相关的再狭窄等。或者，所述化合物用于通过稳定或改善患者的临 床症状来治疗正在进行中的疾病。宿主或患者可属于任何哺乳动物种类，例如灵长类，特别是人；啮齿类动物，包括 小鼠、大鼠和仓鼠；兔；马；牛；狗；猫等。动物模型是实验研究所关注的，为人类疾病的治疗 提供了模型。可以通过体外试验测定特定细胞对用本发明的化合物进行处理的敏感性。通常， 将细胞培养物与不同浓度的本发明的化合物合并足以使活性剂诱导细胞死亡或抑制迁移 的一段时间，通常为约1小时至1周。可以使用来自活检样品的培养细胞进行体外测试。然 后对处理后剩余的活细胞进行计数。剂量根据所用的具体化合物、具体疾病、患者状态等的不同而改变。治疗剂量通常 足以显著减少靶组织中不希望的细胞群，同时维持患者的生存力。治疗一般持续至出现明 显的减轻，例如细胞负荷(cell burden)减少至少约50%，并且可以持续至在体内基本上 不再检测到不希望的细胞。为了鉴定信号转导路径和检测不同信号转导路径之间的相互作用，不同的科学家 已经开发了适宜的模型或模型系统，例如细胞培养物模型(例如Khwaia等人，EMB0，1997， 16,2783-93)和转基因动物模型(例如 White 等人，Oncogene，2001，20，7064-7072)。为了 确定信号转导级联中的某些阶段，可以使用相互作用的化合物以便对信号进行调控(例如 Stephens等人，Biochemical J.，2000，351，95-105)。在动物和/或细胞培养物模型中或 在本申请所述的临床疾病中，本发明的化合物还可用作测试激酶依赖性信号转导路径的试 剂。测定激酶活性是本领域技术人员众所周知的技术。在文献(例如 Campos-Gonzalez, R.和 Glenney，Jr.，J. R. 1992，J. Biol. Chem. 267，第 14535 页)中描述 了使用底物如组蛋白(例如Alessi等人，FEBS Lett. 1996，399，3，第333-338页)或碱性 髓鞘蛋白测定激酶活性的通用试验系统。为了鉴定激酶抑制剂，可利用各种测定系统。在亲近闪烁分析法(Sorg等人，J. of. Biomolecular Screening，2002，7，11-19)和闪板测定法中，使用 YATP 测定作为底 物的蛋白质或肽的放射性磷酸化。在抑制性化合物存在下，可检测到减少的放射性信号 或根本检测不到放射性信号。此外，均勻时间分辨荧光共振能量转移(HTR-FRET)和荧光 偏振(FP)技术也适合用作测定方法(Sills等人，J. of Biomolecular Screening, 2002, 191-214)。其它非放射性ELISA测定法使用特异性磷酸-抗体(磷酸-AB)。磷酸-AB仅结 合磷酸化底物。可以根据化学发光使用过氧化物酶轭合的抗绵羊第二抗体检测这种结合 (Ross 等人，2002，Biochem. J.)。存在许多与细胞增殖和细胞死亡(细胞凋亡)失调相关的疾病。所关注的病症 包括但不限于以下。本发明的化合物适合用于治疗其中存在平滑肌细胞和/或炎性细胞 增殖和/或迁移入血管内层、导致通过该血管的血流受限的多种病症，例如在新生内膜闭 塞性损伤的情况中。所关注的闭塞性移植物血管疾病包括动脉粥样硬化、移植后的冠状 动脉血管病、静脉移植物狭窄、吻合人造物周围再狭窄(peri-anastomatic prosthetic restenosis)、血管成形术或支架置入后再狭窄等。现有技术WO 2007/019933描述了作为Met激酶抑制剂的其它二氢吡唑衍生物。其它用于对抗癌症的4，5- 二氢吡唑还在WO 03/079973A2中有公开。发明概述本发明涉及式I化合物及其可药用的盐、互变异构体和立体异构体、包括其所有 比例的混合物
权利要求
1.式I化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体、包括其所有比例的混合物
2.权利要求1的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体、包括其所有比例的 混合物，其中R3 R3.R1表示Ar。
3.权利要求1或2的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体、包括其所有比例 的混合物，其中R2 表示
4.权利要求1-3中一项或多项的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体、包 括其所有比例的混合物，其中Ar表示被
5.权利要求1-4中一项或多项的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体、包 括其所有比例的混合物，其中A表示具有1-6个C原子的非支链或支链烷基。
6.权利要求1-5中一项或多项的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体、包 括其所有比例的混合物，其中R4表示H。
7.权利要求1-6中一项或多项的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体、包 括其所有比例的混合物，其中D表示噻唑二基、噻吩二基、呋喃二基、吡咯二基、巧悉唑二基、异唑二基、P恶二唑二 基、吡唑二基、咪唑二基、噻二唑二基、哒嗪二基、吡嗪二基、吡啶二基或嘧啶二基；其中所述基团还可以被Hal和/或A单、二或三取代。
8.权利要求1-7中一项或多项的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体、包 括其所有比例的混合物，其中Het表示具有1-4个
9.权利要求1-8中一项或多项的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体、包 括其所有比例的混合物，其中Het表示哌啶基、批咯烷基、吗啉基、哌嗪基、，恶唑烷基、批唑基、批啶基、嘧啶基、呋喃 基、噻吩基、P恶唑基、P恶二唑基、咪唑基、吡咯基、异巧悉唑基或咪唑烷基，其中所述基团还 可以被A和/或[C(R3)JnHet1单或二取代。
10.权利要求1-9中一项或多项的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体、包 括其所有比例的混合物，其中Het1表示哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、哌嗪基、P恶唑烷基或咪唑烷基，其中所述基团还可以被=0和/或A单或二取代。
11.权利要求1-10中一项或多项的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体、 包括其所有比例的混合物，其中R1表示Ar，R2 表示 H、A、
12.权利要求1的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体、包括其所有比例的 混合物，其中的化合物选自
13.制备权利要求1-12的式I化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体的方法， 其特征在于a)对于制备其中R2表示Het的式I化合物，使式II化合物
14.药剂，包含至少一种权利要求1-12的式I化合物和/或其可药用盐、互变异构体和 立体异构体、包括其所有比例的混合物以及任选地包含赋形剂和/或佐剂。
15.权利要求1-12的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体、包括其所有比 例的混合物在制备药剂中的应用，所述药剂用于治疗激酶信号转导的抑制、调节和/或调 控在其中发挥作用的疾病。
16.根据权利要求15的权利要求1-12的化合物及其可药用盐和立体异构体、包括其所 有比例的混合物在制备药剂中的应用，所述药剂用于治疗受到权利要求1-16的化合物对 酪氨酸激酶的抑制的影响的疾病。
17.权利要求15的在制备药剂中的应用，所述药剂用于治疗受到权利要求1-12的化合 物对Met激酶的抑制的影响的疾病。
18.权利要求16或17的应用，其中所治疗的疾病为实体瘤。
19.权利要求18的应用，其中所述实体瘤来源于鳞状上皮、膀胱、胃、肾、头和颈、食道、 宫颈、甲状腺、肠、肝、脑、前列腺、生殖泌尿道、淋巴系统、胃、喉和/或肺的肿瘤。
20.权利要求18的应用，其中所述实体瘤来源于单核细胞白血病、肺腺癌、小细胞肺 癌、胰腺癌、成胶质细胞瘤和乳癌。
21.权利要求19的应用，其中所述实体瘤来源于肺腺癌、小细胞肺癌、胰腺癌、成胶质 细胞瘤、结肠癌和乳癌。
22.权利要求16或17的应用，其中所治疗的疾病为血液和免疫系统肿瘤。
23.权利要求22的应用，其中所述肿瘤来源于急性髓性白血病、慢性髓性白血病、急性 淋巴性白血病和/或慢性淋巴性白血病。
24.药剂，包含至少一种权利要求1-12中一项或多项的式I化合物和/或其可药用盐 和立体异构体、包括其所有比例的混合物以及包含至少一种其它药物活性成分。
25.由如下的单独药包组成的套件(药盒)(a)有效量的权利要求1-12中一项或多项的式I化合物和/或其可药用盐和立体异构 体、包括其所有比例的混合物；和(b)有效量的其它药物活性成分。
全文摘要
式I化合物是酪氨酸激酶、特别是Met激酶的抑制剂，尤其可用于治疗肿瘤，其中R1、R2、R3、R3′、R4和D具有如权利要求1中所示的含义。
文档编号A61K31/4164GK102046605SQ200980119266
公开日2011年5月4日 申请日期2009年4月24日 优先权日2008年5月29日
发明者A·布劳卡特, D·多施, F·施蒂贝尔, O·沙特 申请人:默克专利有限公司