专利名称：Hancornia speciosa的提取物及其药物组合物的制作方法
Hancornia spec iosa的提取物及其药物组合物本发明描述了获自Hancornia speciosa Gomes(EHS)叶的标准化提取物，这种植物在巴西通常称为“曼加巴(mangaba)”，并描述了富含甲基肌醇、芦丁和奎宁酸的级分，认为这些物质的活性是血管紧张素转化酶(下文中称为ACE)抑制剂、血管舒张、抗高血压和抗氧化剂。特别地，本发明涉及从前述植物物种的叶子获得富含对映异构体L-(+)_甲基肌醇、芦丁和奎宁酸的标准化级分，该级分含有ACE抑制、血管舒张、抗高血压和抗氧化的活性本发明还包括含有源自物种Hancornia speciosa Gomes的富含环多醇和类黄酮的提取物或级分的药物制剂，以及所述制剂用于治疗心血管疾病的用途，这些疾病如但不限于，动脉高压、动脉粥样硬化、再狭窄和心脏或大脑缺血。已经对在此所述的级分和物质进行了测试并显示出具有ACE抑制、血管内皮相关和无关的血管舒张、降血压和抗氧化活性。已经显示出上述级分和物质能够在高血压动物模型中降低动脉压。现有技术的状况在历史上，药用植物构成了发现和发展现代治疗中所用药品的有效来源 (World Health Organization(世界卫生组织)· TraditionalMedicine Strategy(传统医学策略)2002-2005. Geneva :World HealthOrganization,2002. 74 p. ；NEWMAN, D. J. ；CRAGG, G. Μ. ；SNADER, K. Μ. Natural Products as Sources of New Drugs over thePeriod 1981-2002 (在1981-2002期间作为新药来源的天然产物).J. Nat. Prod.， v. 66, p. 1022-1037,2003 ；BUTLER, Μ. S.Natural products todrugs :natural product derived compounds in clinical trials (药物的天然产物临床试验中天然产物衍生的化合物)· Nat. Prod. Rep.，v. 22，p. 162-195，2005 ；CHIN, Y. W. ；BALUNAS Μ. J. ；CHAI, H. B.； KINGH0RN, A. D. Drug Discovery From Natural Sources (天然来源的药物研发)，AAPS J.，v. 8，η. 2, ρ.Ε23-Ε253，2006)。目前总共有122种来自植物的天然产物用作药物，其中 80%涉及种族药理学使用(FABRICANT, D. S. =FARNSffORTH, N. R. The value of plantsused in traditional medicine for drug discovery(传统医学中所用植物用于药物研发的价值),Environ. Health Perspect. , v. 109,p.6-75,2001)。在1940-2002期间，140种药物得到批准用于癌症治疗，其中20种(14. 3% )是天然产物，31种(22. 1% )源自天然产物，28种(20% )是基于天然原型全部或部分合成的产物，41种(29. 3% )是基于随机合成的产物。在1981至2002之间批准的75种新的抗高血压药物的情况中，1种(1.3%)源自天然产物，48种(60.8%)基于天然产物得到合成， 26 种(32. 9% )是基于随机合成的产物(NEWMAN，D. J. ；CRAGG, G. Μ. ；SNADER, K. Μ. Natural Products as Sources of NewDrugs over the Period 1981-2002 (在 1981-2002 期间作为新药来源的天然产物).J. Nat. Prod.，v. 66, p. 1022-1037，2003)。尽管事实是从天然产物新衍生的化合物的数量在2004年有所下降，而恰在那年在美国有几种这样的药物注册用于 III 期临床试验(BUTLER，M. S. Natural products to drugs natural product derived compounds inclinical trials (药物的天然产物临床试验中天然产物衍生的化合物).Nat. Prod. R印.,v. 22,p. 162-195，2005)。因此，可以声称天然产物为有前景的研发新药物的来源。巴西具有丰富的生物多样性，其分布在不同的生物群落中，包括Mata
(大西洋热带雨林)、Floresta XwiZZ^i/CiZ (亚马逊热带雨林)、Caatinga(热带灌丛林)、Pantanal (温带沼泽草地(floodedgrassland)) > Floresta de Araucaria(巴西松林)和Cerrado (热带草地和大草原)。后者位于巴西中心平原区，包括以下的几个州 MinasGerais、Mato Grosso、Mato Grosso do Sul、Goids、Tocantins、SSo Paulo、Paranci、 Maranh3o和Piaui，并且是巴西第二大生物群落，具有大约2X106Km2。Cerrado具有草本植被，树木和灌木分散其中。其富铙的植物群包括成千上万的属于数百个属和科的维管植物种。几种cerrado植物在传统上用于医学目的。因此，Cerrado是生物活性植物化学的潜在来源(FERREIRA，M. B. Plantas portadoras de Sllbstancias medicamentosas, de uso popular，nos cerrados de MinasGerais. Inf. Agropec.，v. 6, η. 61, p. 1-23, 1980 ；GOTTSBERGER，I. S. 0. cerrado como potencial do plantas medicinais e toxicas. Oreades，v. 8 (14/15)，p. 15—30，1981/1982 ；HIRSCHMANN，G. S. ；ARIAS，A. R. A survey of medicinal plants of Minas Gerais (MinasGerais 药用植物纵览)，Brazil. J.Ethnopharmacol.，v.29，p. 15-172，1990 ；GAVILANES，M. L. ；BRANDO，M. Frutos， folhas e raizes deplantas do cerrado， suas propriedades medicinais， tendo como veiculoa cacha^a. Inf. Agropec.，v. 16，p. 4-44,1992 ；KREG，T. ；FIGUEIREDO， I. B. ；SANO，Ε. E. ；ALMEIDA，C. A. ；SANTOS，J. R. ；MIRANDA，H. S. ；SATO，M.N. ；ANDRADE， S. M. S. Greenhouse gas emissions from biomassburning in the non-anthropogenic cerrado using orbital data (使用轨道数据在非人为的cerrado中来自生物燃烧的温室 K本Ml) 0 Brasi Iia :BrazilianMinistry of Science and Technology, Secretariat of Science andTechnology Policies and Programs，Department of ThematicPrograms, (巴西利亚巴西科技部，科技政策和项目秘书处，主题项目部)，2002)。在Cerrado的整个范围中出现了几个物种；Hancornia speciosaGomes (夹杉匕禾斗)i 胃中—禾中(GOTTSBERGER, I.S. O cerradocomo potencial de plantas
medicinais e toxicas. Oreades, v.8 (14/15)， p. 15—30，1981/1982 ；SILVA-FILHO, P. V. ；BRANDO, Μ.Plantasmedicinais de uso popular coletadas e comercializadas na regiSo metropolitana de Belo Horizonte. Daphne, ν· 2, η· 2, ρ· 3-53,1992)。根据在cerrado进行的种族植物学调查，该物种通常推荐用于治疗几种疾病。其树皮用于皮肤病(FERREIRA, Μ. B. Plantas portadoras de Sllbstancias medicamentosas, de uso popular,nos cerrados de MinasGerais. Inf. Agropec. , v. 6, n. 61, p. 1-23,1980 ；BARROS, Μ. A. G. Ε. Plantas medicinais—usos etradi^OeSem Braslia-DF. Oreades, v. 8,n. 14/15， p.14-151，1981/1982，BRITTO，K. B. ；BRITTO，I.C. Plantascom atributos medicinais do Herbario da Universidade de Feira deSantana. Oreades, v. 8, n. 14/15，p. 152-163， 1981/1982 ；SILVA-FILHO, P. V. ；BRANDO, M.Plantas medicinais de usopopular coletadas e comercializadas na F6gia0 metropolitana de BeloHorizonte. Daphne， v. 2,n. 2,p. 3-53，1992 ；RODRIGUES，V. E. G. ；CARVALHO，D. A. Levantamento etnobotanico de plantasmedicinais no dominio Cerrado na regiao do Alto RioGrande-MinasGerais. Cienc. Agrotec.，ν· 25，η· 1，ρ· 102—123，2001)，治疗肝病(FERREIRA， Μ. B. Plantas portadoras de Sllbstancias medicamentosas，de uso popular, nos cerrados de Minas Gerais. Inf.Agropec.，v. 6，n.61，p. 1-23，1980 ；BARROS, Μ. A. G. Ε. Plantasmedicinais-usos e tradi^OCS em Braslia-DF. Oreades, v. 8，η. 14/15， ρ·14-151，1981/1982 ;BRITT0，K. B. ；BRITT0，I.C. , Plantas cornatributos medicinais do Herbario da Universidade de Feira deSantana. Oreades, v. 8,n.14/15,p.152-163, 1981/1982 ；SILVA-FILHO, P. V. ；BRANDO, M.Plantas medicinais de usopopular coletadas e comercializadas na F6gia0 metropolitana de BeloHorizonte. Daphne， v. 2,n. 2,p. 3-53，1992 ；RODRIGUES，V. E. G. ；CARVALHO，D. A. Levantamento etnobotanico de plantas medicinaisno dominia Cerrado na regiao do Alto Rio Grande-Minas Gerais, Cienc. Agrotec.，v. 25, n. 1，p. 102-123，2001)，作为抗炎剂(LIMA, J. C. S.； MARTINS，D. T. Screening farmacologico de plantasmedicinais uti1izadas popularmente como antiinflamatorias. In :SIMP0SIO DE PLANTAS MEDICINAIS DO BRASIL，14，Florian0polis· Resumos…Florian0polis Universidade Federal doParana, 1996. p. 89)，用于治疗糖尿病和用于减轻体重的膳食(GRANDI，Τ. M. S. ；LIMA-FILHO，
F.M. ；FERREIRA, S. M. A. Levantamento das plantas medicinais de GraO Mogol. Oreades, v. 8(14/15)，p. 116-125，1981/1982)；根用于治疗风湿病，作为口服抗高血压剂(GRANDI, Τ. Μ. S. ；LIMA-FILHO F. Μ. ；FERREIRA，S. Μ. A. Levantamento das plantas medicinais de GraO Mogol. Oreades, ν· 8 (14/15)，p. 116-125,1981/1982 ；HIRSCHMANN，
G.S. ；ARIAS，A. R. A survey of medicinal plants of Minas Gerais (MinasGerais 药用植物纵览)，Brazil. J. Ethnopharmaco 1.，v. 29，p. 15-172，1990)；其乳胶和叶子用作收敛剂，用于治疗皮肤病和肝病(BRITT0，K.B. ；BRITT0，I. C. Plantas com atributos medicinais do Herbarioda Universidade de Feira de Santana. Oreades,v. 8,η. 14/15， p. 152-163，1981/1982 ；GOTTSBERGER，I. S.O cerrado como potencialde plantas medicinais e toxicas. Oreades, v. 8 (14/15)，p. 15-30，1981/1982)；其果实用作助消化药(GAVILANES，Μ. L. ；BRANDO，Μ. Frutos，folhas e razes de plantas do cerrado, suas propriedadesmedicinais，tendo como vei culo a cachaga· Inf. Agropec.，v. 16, p. 4-44，1992)和用作食物(MOURA，j. c. Farmaceutico Joaquim Correa de Mello um sabio botailico campineiro esquecido. Tribuna Farmaceiltica, v. 16，n. 8， p. 144-148，1948)。除了其医学用途，H. speciosa的乳胶是橡胶生产的原料(GAVILANES， M. L. ；BRANDO, Μ. Frutos, folhas e razes de plantas do cerrado, suaspropriedades medicinais，tendo como vei culo a CHCha^H. Inf. Agropec.，v. 16，p. 4-44，1992)。心血管疾病(下文称为CVD)是由于多重风险因素引起的并且构成世界人群主要的疾病死亡诱因，与性别和争议中的国家发展水平无关。在全世界中，30%的已知死亡原因由 CVD引起，发达和发展中国家中盛行的所有全球疾病的4. 5%具有高血压作为其主要的风险因素(WHO. World Health Organization-International Society of Hypertension Guidelines for theManagement of Hypertension. Guidelines Subcommittee(世界 卫生组织-高血压控制的高血压指导国际协会，指导委员会).J.Hypertens.，v. 17，p. 151-183,1999 ；World Health Organization/InternationalSociety of Hypertension Writing Group 2003. WHO/ISH statement onmanagement of hypertension (WHO/ISH 关于高血压控制的陈述)，J. Hypertens.，ν· 21，ρ· 1983-1992，2003 ；KEARNEY, P. Μ. ；WHELTON, Μ. ；REYNOLDS, K. ；MUNTNER, P. ；WHELTON, P. K.，HE, J. Global burden of hypertension analysis of worldwidedata(全世界数据的20种高血压分析的全球负担)，Lancet， v.365, p. 217-223,2005 ；KAPLAN, N. Μ. ；OPIE, L. H. Controversies inhypertension( ^ 血压中的争论)，Lancet, v. 367，p. 168-176，2006 ；THAYER ;J. F. ；LANE R. D. The role of vagal function in the risk forcardiovascular disease and mortality( 走神经功能在心血管疾病风险和死亡率中的作用)，Biol. Psychol.，v. 74，p. 224-242， 2007)。尽管大约25%的世界人群(10亿人)已经诊断为高血压，但低于三分之一的该人群得到恰当治疗，因此高血压引起高死亡率水平(TUNSTALL-PEDOE，H. ；KUULASMAA, K. ， MHNEN, M. ；T0L0NEN, H. ；RU0K0K0SKI, E. ；AM0UYEL, P. ；Contributionof trends in survival and coronary-event rates to changes in coronaryheart disease mortality 10-year results from 37WH0 MONICAProject populations. Lancet, v. 353, p. 1547-1557,1999 ；CH0BANIAN, A. V. ；BAKRIS, G. L. ；BLACK, H. R. ；CUSHMAN, W. C. ；CREEN, L. Α. ；ΙΖΖ0, J. L. JONES, D. W. ；MATERS0N, B. J. ；OPARIL, S. ；WRIGHT, J. Τ. J r. ；R0CELLA, Ε. J. The seventhreport of the Joint National Committee on Prevention,Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Pressure ( K n^^H^W^^Tii^lJi WiS 防、检测、评价和治疗的第七份报告)，JAMA, v. 289，η. 19，p. 256-2572，2003 ；WHO World HealthOrganization/International Society of Hypertension Writing Group2003. WHO/ISH statement on management of hypertension. J. Hypertens. ,v. 21,p. 1983-1992, 2003 ；KEARNEY,P.M. ；WHELTON,Μ. ；REYNOLDS,K. ；MUNTNER,P. ；WHELTON,P. K. · HE,J. Global burden of hypertension analysis of worldwide data(全世界数据的高血压分析的全球负担)·Lancet，v. 365，p. 217-223，2005 ；KAPLAN, N. Μ. ；OPIE, L. H. Controversies in hypertension (高血压中的争论)，Lancet, v. 367，p. 168-176，2006)。除了包括教育策略、生活习惯的改变和药物治疗以外，治疗上述疾病还应当个别对待。对 用于控制高血压的恰当药物治疗选择应当考虑几个因素，即年龄、肾脏和肝脏功能以及并发症。公知糖尿病和慢性肾机能不全是发病率的共同因素。这些病状应当得到联合治疗，以降低死亡风险(WHO. World Health Organization-International Society ofHypertension Guidelines for the Management of Hypertension. Guidelines Subcommittee. J. Hypertens.，v. 17，p. 151-183，1999 ；CH0BANIAN，A. V. ；BAKRIS，G. L. ；BLACK，H. R.； CUSHMAN, W. C. ； CREEN, L. Α. ；ΙΖΖ0，J. L. ；JONES，D. W. ；MATERS0N，B.J. ；0PARIL，S.； WRIGHT，J· T.J r. ； R0CELLA,Ε. J. The seventhreport of the Joint National Committee on Prevention, Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Pressure (联合全国委员会关于高血压的预防、检测、评价和治疗的第七份报告)，JAMA，v. 289，η. 19， p. 256-2572,2003 ；WHO. . . 2003 ；BRASIL Ministerio da Satide. Agenda Nacional de Vigilancia Sanitaria. ReSOlu^aO da DiretoriaCalegiada (ROC) η ° 48de 16de maro de 2004. Dispoesobre ο registrode Fitoterapicos. Diario oficial daUniao5 2004KAPLAN, N. M. ；OPIE, L. H. Controversies in hypertension ( ^ . Ji ψ 白勺 ife )，Lancet,V. 367,p. 168-176, 2006 ；THAYER,J.F. ,LANE R. D. Therole of vagal function in the risk for cardiovascular disease andmortality (迷走神经功能在心血管疾病风险和死亡中的作用)，Biol. Psychol.，V. 74，p. 224-242，2007)肾素-血管紧张素系统(下文中称为RAS)对心血管系统介导几种作用，包括血压动态平衡和水-静电平衡的维持。ACE，也称为激肽酶II，是负责血管紧张素I、缓激肽和几种C-端倒数第二个氨基酸不是脯氨酸的其他小肽的C-端部分中二肽的破坏的酶 (Skidgel R. A. eErdos E. The Renin Angiotensin System(肾素血管紧张素系统)，Raven Press Ltda, v. 1,10. 1-10. 10，1993)。所述酶结合内皮、上皮细胞膜，并且在血液和其他体液(同上)中是可溶形式的。无活性的血管紧张素I肽变成活性血管紧张素II肽的转化期对于调节心血管功能中的RAS作用是关键的。血管紧张素II是有效的血管收缩剂，直接作用于血管平滑肌(Folkow B.等，Acta Physiol. Scand. 53，99-104，1961)。此外，血管紧张素II还刺激交感神经系统(外周的和中枢的)，提高血管紧张性。其还通过醛甾酮释放和肾血管收缩来诱导钠潴留，通过抗利尿激素的作用引起液体滞留(Biron P.等， J. Clin. Invest. 60，338—347，1961 ；Padfield P. L. e Morton J. J. J. Clin. Endocrinol. 74， 251-259,1977)。在细胞水平，血管紧张素II诱导细胞的转移、增殖和过度增大(Bell L. e Madri J. Am. J. Pathol. 137，7-12，1990 ；ItohH. J. Clin. Invest. 91，2268-2274，1993)。在巴西，基于教授S6rgio Ferreiras小组进行的学术研究，第一次进行了研发作为抗高血压剂的ACE抑制剂，通过该研究证明了垭拉拉卡蝰蛇(Bothrops jararaca) 毒液具有增强对缓激肽的应答的成分，最初将其称为缓激肽强化因子。巴西和美国研究小组对这些肽的分离及其作用机理的研究已经得出结论上述应答是ACE抑制剂，其随后成为血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)类的原型。卡托普利是第一种合成的非肽ACEI并发布用于临床使用，接着又合成了几种其他现在使用的ACEI (FERREIRA ROCHA E SILVA, M. Potentiation ofbradykinin and eledoisin by BPF(bradykinin potentiating factor) from Bothrops jararaca venom(通过来自垭拉拉卡蝰蛇毒液的BPF (缓激肽强化因子)的血管舒缓肽和章鱼素的强化)，Experientia, v. 21, η. 6，p. 347-349，1965 ； FERREIRA, S. H. ；BARTELT, D. C. ；GREENE ；L.J.Isolation of bradykinin-potentiating peptides fromBothrops jararaca venom(从垭拉拉卡蜂蛇毒液分离血管舒缓肽强化因子)，Biochemistry, v. 9，η.13，p. 2583-2593，1970 ；CUSHMANCHEUNG, H. S. ；SABO, Ε. F.； 0NDETTI, Μ. Α. Design of potentcompetitive inhibitors of angiotensin-converting enzyme (血管紧张素转化酶的有效竞争性抑制剂的设计)，Carboxyalkanoyl andmercaptoalkanoyl amino acids (羰基烧酉先基禾口巯基烧酉先基氨基酸)，Biochemistry, v. 16, p.5484-5491,1977 ；PETRILL0, Ε. W. Jr. ；0NDETTI, Μ.A.Angiotensin converting enzyme Inhibitors :medicinal chemistry and biological actions (血管紧张素转化酶抑制剂医学化学和生物作用),Med. Res. Rev.，v. 2，p. 1-41,1982 ；FERREIRA University discoveries and intellectual property rightsfrom Bothrops jararaca bradykinin potentiating peptides toangiotensin converting enzyme inhibitors. Braz. J. Med. Biol. Res. ，v. 27, n. 8,p.1693-1698,1994 ；CUSHMAN,ONDETTI ；M. A.Designof angiotensin converting enzyme inhibitors (血管紧张素转化酶抑制剂的设计)，Nat. Med. , v. 5, η. 1, p. 111-1112,1999 ；LIMA, D. P. Synthesis of angiotensin-converting enzyme (AEC)inhibitors asimportant class of antihypertensive drugs (作为重要类另Ij 的抗高血压药的血管紧张素转化酶(AEC)抑制剂的合成)，Quim. Nova, 22 (3)，p. 375-381，1999)。合成的ACEI得到大量使用和传播，并且在临床上治疗高血压、充血性心机能不全、心绞痛和预防突发性死亡是有效的(The TaskForce on ACE-inhibitors of the European Society of Cardiology (欧洲心脏病学协会的ACE-抑制剂的特别工作小组)，Eur.Heart J. 25,1454-1470, 2004) 0然而，已经在长期使用中发现了几个副作用， 包括咳嗽、辩味干扰、高血钾和皮肤开裂(CLELAND，J. G. F，SffEDBERG, K.，P00LE-WILS0N, P. A. Successes and failure ofcurrent treatment of heart failure (巨力
疗的成功和失败)，Lancet, v. 352，p. SI1-SI28，1998)。对源自天然来源的新ACEI的研究可能是将来以降低的副作用控制高血压的替换方案。基于ACE与各种底物可兼容的能力，可以使用体外模型来抑制这种酶，并因此设定用于定量抑制百分比的实验方案，观察以从植物提取物和分离的天然产物筛选潜在抑制剂。尽管详尽地查阅了种族植物学纵览，但只评估了 Hancorniaspeciosa的少数几个生物活性。Serra等已经提及了来自所述物种叶子的乙醇提取物的ACE抑制活性(SERRA, C. P. ； CORTES, S. F. ； LOMBARD I, J. Α. ； BRAGA DE 0LIVEIRA, Α. ； BRAGA, F. C. Validation of a colorimetric assay for the in vitro screening ofinhibitors of angiotensin-converting enzyme (ACE) from plantextracts (用于来自植物提取物白勺血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂的体外筛选的比色测定的确认)，Wiytomedicine，v. 12， η. 6-7, 2005) 0关于其ACE抑制潜能，这些作者评估了巴西植物群的几个物种。在有活性的物种中，使用 Elbl ;Wagner 所述(ELBL，G. ；WAGNER, H. A new method for the in vitro screening ofinhibitors of angiotensin-converting enzyme(ACE), using the chromophore-and f luorephere-labelled substrate dansyltriglycine 吏用发色团—禾口荧光团-标记的底物丹酰三甘氨酸，用于体外筛选血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂的新方法)，Planta Med.，v. 57，p. 137-141，1991)和 Braga 等改进(BRAGA. F. C.，WAGNER, H.， LOMBARDI, J. A. 0LIVERIA, Α. B. Screeningthe Brazilian flora for antihypertensive plant species for in vitroangiotensin I—converting enzyme inhibitions activity (为体外血管紧张素I转化酶抑制剂活性的抗高血压植物物种筛选巴西植物群)， Phytomedicine, v. 7，η. 3，p. 245—250，2000)的方法，使用 0. 33mg/ml 浓度，H. speciosa 在50. 的情况中抑制了所述酶，这揭示了使用小组批准的比色方法测定时45. 7%的抑制百分比(SERRA，C. P. ； CORTES, S. F. ； LOMBARD I, J. Α. ； BRAGA DE 0LIVEIRA, Α. ； BRAGA, F. C. Validation of a colorimetric assay for the in vitroscreening of inhibitors of angiotens in-converting enzyme (ACE) fromplant extracts (用于来自植物提取物白勺血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂的体外筛选的比色测定的分析)，Phytomedicine, v. 12， η. 6-7,2005)，以 0. lmg/ml 的浓度。Ferreira 等(FERREIRA,H. C. ；SERRA, C. P. ；ENDRINGER, D. C. ；LEMOS, V. S. ；BRAGA, F. C ；CORTES, S.F.EndotheIium-dependent vasodilation induced by Hancorniaspeciosa in rat superior mesenteric artery (在大鼠肠系膜上动脉中通过Hancornia speciosa诱导的内皮依赖性血管舒张)，Phytomedicine, v. 14，ρ· 473-478，2007，FERREIRA, H. C. ；SERRA, C. P. ；LEMOS, V. S. ；BRAGA, F. C. ；CORTES,S. F. Nitric oxide-dependentvasodilatation by ethanolic extract of Hancornia speciosa viaphosphatidyl-inositol 3-kinase (经由磷脂酰-肌醇 3-激酶通过 Hancornia speciosa的乙醇提取物的一氧化氮依赖性血管舒张)，J. Ethnopharmacol.， v. 109, η. 1，ρ. 161-164，2007b)。这些作者已经报道了来自所述物种叶子的乙醇提取物的内皮依赖性血管舒张活性。关于H. speciosa的树皮和叶子的化学组成的报道最近在会议摘要(R0DRIGUES， C. M. ；BRIT0, A. R. M. S. ；HIRUMA-LIMA，C. A. ；VILEGAS ；W. Constituintes quimicos das cascas de Hancorniaspeciosa Gom. (Apocynaceae)见:REUNIAOANUAL DASOCIEDADE BRASILEIRA DE QUMICA,29, Aguas de Lindoia. Resumos. . . Sao Paulo, 2006 ；SANTOS, A. F. ；RIBEIRO, C. Α. ；POLESE, L. ；ERNANDES, J. R. ；KESSERLINGH, S. Μ. ；NONATO, R. v. Determina^ao de parametros de valida^ao de metodoscromatograficos para analise de 5-hidroximetilfurfural e a^UCares emamostras do processo de produ^ao de polimero biodegradavel. Eel. Qum.，v. 31, n. 1，p. 13—20，2006)禾口论文中(RODRIGUES ；RINALDO, D. ；DOS SANTOS, L. C. ；M0NT0R0, P. ；PIACENTE, S. ；PIZZA, C.； HIRUMA-LIMA, C. Α. ；SOUZA BRITO, A. R. Μ. ；VILEGAS, W. Metabolic fingerprinting using direct flow injection electrosprayionization tandem mass spectrometry for the characterization ofproanthocyanidins from the barks of Hancornia speciosa( 用直流注射电子喷射离子化串联质谱表征来自Hancornia speciosa树皮的原花色素的代谢产物指纹识别)，Rapid Commun. Mass Spectrom.，v. 21，p. 1907-1914，2007)公开了。从H. speciosa树皮的浸泡液，分离出gaclic acid、4_羟基_3，5_ 二甲氧基苯甲酸 (丁香酸)、3-0_咖啡酰奎宁酸、5-0-咖啡酰奎宁酸，还有顺-氯原酸甲酯、反-氯原酸甲酉旨、2，7-diidroxixantona e 2，7-二甲氧基 xantona(R0DRIGUES， C. Μ. ；BRITO, A. R. Μ. S.； HIRUMA-LIMA, C. Α. ；VILEGAS ；W. Constituintes quimicos das cascas de Hancornia speciosaGom. (Apocynaceae)见REUNIAO ANUAL DA SOCIEDADEBRASILEIRA DE QUIMICA, 29, AguaS de Lindoia. Resumos. . . S^O Paul0，2006) °通过连接质谱仪的色谱对H. speciosa叶的水蒸馏产物的干残留物分析使得可以鉴定出以下物质-里哪醇氧化物、顺-里哪醇氧化物、α -双缩松油醇、里哪醇、香叶醇、甲基-邻氨基苯甲酸酯、丁子香酚和(E)-异丁子香酚(SANT0S，A.F. ；RIBEIRO, C. Α. ；POLESE, L. ；ernandes, j. R. ；kesserlingh, s. Μ. ；νονατο, R. v. Determina^ao de parametros
de valida^HO de metodoscromatograficos para analise de 5-hidroximetilfurfural e a^UCareS emamostras de processo de produ^HO de po limero biodegradavel. Eel. Quim.，v. 31，η. 1，p. 13-20,2006)。通过针对鉴定原花青素的质谱测定了 H. speciosa的树皮浸泡液。检测到以下的原花青素表儿茶素—8)-儿茶素、表儿茶素—6)-儿茶素和表儿茶素— 7 ;4β — 8)-表儿茶素(RODRIGUES ；RINALDO, D. ；DOS SANTOS, L. C.； M0NT0R0,P. ；PIACENTE,S. ；PIZZA,C. ；HIRUMA-LIMA, C. Α. ；SOUZA BRITO,A. R. Μ. ；VILEGAS, W. Metabolic fingerprinting using direct flow injectionelectrospray ionization tandem mass spectrometry for thecharacterization of proanthocyanidins fromthe barks of Hanconiaspeciosa(使用直流注射电子喷射离子化串联质谱表征来自Hancorniaspeciosa树皮的原花色素的代谢产物指纹识别)，Rapid Commun. Mass Spectrom.，v. 21，p.1907-1914，2007)。专利US4590179中描述了源自氨基环多醇及其单独的端基异构体的药物组合物。 在所述发明中还包括以下要素获得氨基环多醇衍生物及其单独的端基异构体；含有氨基环多醇衍生物或端基异构体的组合物；和使用这些衍生物和端基异构体治疗糖尿病和高脂血症的方法。专利US5428066描述了治疗与高血糖水平相关的疾病的方法，包括手性-肌醇膳食补充。通常与胰岛素抗性相关的疾病，如高血压、乳酸酸中毒、肥胖和冠状动脉疾病，使用手性-肌醇得到适当的治疗，以达到正常的代谢水平。专利US5827896描述了使用松醇和衍生物，及其药物组合物，来使得游离脂肪酸下降，或用于治疗与胰岛素抗性相关的疾病，如糖尿病及其慢性并发症、肥胖、高脂血症和动脉粥样硬化、高血压、冠心病、AIDS、癌症、脓毒症、烧伤、营养不良、压力、狼疮和其他自体免疫疾病、内分泌疾病、高尿酸血症、多囊卵巢综合症以及由运动活性引起的并发症。一些专利描述了具有肌醇磷多糖的激动或拮抗特性的化合物。例如，专利 US6939857描述了基于取代的环多醇的化合物，如手性-肌醇，源自松醇(3_0_甲基-手性-肌醇)，及其用途。一些研究描述了用于筛选为ACE潜在抑制剂的植物提取物的新方法。之前通过要求本专利的研究小组报道了 Hancornia speciosa提取物的ACE抑制活性(SERRA C. P. ；CORTES, S. F. ； LOMBARD I, J. Α. ； BRAGA DE 0LIVEIRA, Α. ； BRAGA, F. C. Validation of acolorimetric assay for the in vitro screening of inhibitors ofangiotensin-converting enzyme (ACE) from plant extracts (用于来自植物提取物白勺血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂的体外筛选的比色测定的分析)，Wiytomedicine，v. 12， η. 6-7,2005)。然而，所述报道不同于本发明，因为其只涉及植物粗提物的体外测定，而不是其标准级分，标准级分是通过在此所述的方法获得的，其构成富含对映异构体L-(+)_甲基肌醇、芦丁和奎宁酸。(C. P. Serra, S. F. Cortes, J. A. Lombardi, Α. Braga de Oliveira, F.C. Braga. Validation of acolorimetric assay for the in vitro screening of inhibitors (体外筛选抑制剂的比色测定的确认)，Phytomedicine, v. 12，η. 6-7，2005)。通过要求本专利的研究小组的另一个研究(FERREIRA，H. C. ；SERRA, C. P.； ENDRINGER, D. C. ；LEMOS, V. S. ；BRAGA, F. C ；CORTES, S.F.Endothelium-dependent vasodilation induced byHancornia speciosa in rat superior mesenteric artery(大鼠上肠系膜动脉中由Hancornia speciosa诱导的内皮依赖性血管舒张)，Wiytomedicine， v. 14，p. 473-478,2007)描述了 Hancornia speciosa乙醇提取物对大鼠大动脉制备物的血管舒张作用。与上述实验相似，该研究是使用粗提物来进行的，而没有使用富含对映异构体L-(+)_甲基肌醇、芦丁和奎宁酸的标准化级分，该标准化级分是在此要求的本发明专利的目标。(HERICK C. FERREIRA, CARLA P. SERRA, VIRGINIA S. LEMOS, FERNAO C. BRAGA, STEYNER F. CORTES)。尽管现有技术的状况总地来说包括几种用于治疗心血管障碍的药物组合物及其制备方法，但这些组合物中没有一种提出它们的生产方法或Hancornia speciosa Gomes叶的标准化提取物的任一种药物组合物，及其富含L_(+)_甲基肌醇、芦丁和奎宁酸的具有 ACE抑制、血管舒张、抗高血压和抗氧化活性的标准化级分。本发明组合物的特征在于药物学上可接受的赋形剂混合物结合富含对映异构体、 甲基肌醇、芦丁、奎宁酸以及其他多元醇和多酚的Hancornia speciosa的标准化级分及其天然或合成类似物的用途。赋形剂实例包括水、盐溶液、含有磷酸盐的缓冲液、Ringer溶液、 葡萄糖溶液、Hank溶液和含有或不含聚乙二醇的生物相容盐溶液。还可以使用非水性载体， 如固定油、芝麻油、油酸乙酯或甘油三酯。还可以制备含有一种赋形剂或赋形剂组合的组合物。赋形剂可以含有少量添加剂，如提高物质等渗性和化学稳定性的物质或缓冲剂。 缓冲剂的实例包括磷酸盐缓冲剂、碳酸氢盐缓冲剂、Tris缓冲剂，而防腐剂实例包括硫柳汞、m-或ο-甲酚、福尔马林和苯甲醇。标准化组合物可以是液体或固体。因此，在非液体制剂中，赋形剂可以包括葡萄糖、人血清白蛋白、防腐剂等，而所述非液体制剂在递送前可以加入盐水溶液。尽管优选口服递送，但可以通过吸入或通过肌内、静脉内、皮下和口服途径，以及通过植入或注射装置来给药上述化合物。发明公开本发明的特征在于从Hancornia speciosa Gomes (EHS)(通常称为曼加巴)的叶子获得的标准化提取物，及其富含甲基肌醇、芦丁和奎宁酸的级分，该提取物和级分具有 ACE抑制、血管舒张、抗高血压和抗氧化活性。特别地，所述发明涉及来自上述植物物种叶子的富含对映异构体L-⑴-甲基肌醇、芦丁和奎宁酸的含有ACE抑制、血管舒张、抗高血压和抗氧化活性的级分。测定了本发明中所述的标准化级分和物质，并呈现出优于提取物的ACE抑制活性、血管内皮相关和无关性的血管舒张活性和降血压活性。植物提取物、级分和物质也能够降低高血压动物模型中的动脉压。本发明是报道环多醇L_(+)_甲基肌醇、芦丁类黄酮、奎宁酸以及其他多酚和类黄酮之间的相互作用用于治疗与心血管系统相关的病状的第一个。本发明还包括L_(+)_甲基肌醇、芦丁、奎宁酸以及其他多元醇和多酚，及其天然和合成类似物以及含有药物学上和药理学上可接受赋形剂的药物组合物用于治疗心血管系统病状的用途。因此，除了对所述植物的标准提取物和级分以及L_(+)_甲基肌醇和芦丁化学标记物所报道的新生物活性，获得所述级分及其标准化的方法，就化学、定量和生物活性而言，同样是新的。通过以下的非限制性实施例可以更好地理解本发明。实施例1 获得Hancornia speciosa的标准化级分将未洗涤的Hancornia speciosa叶子直接接受烤炉中的稳定和干燥，在40°C下使用循环空气72h。将干燥的植物材料在切割研磨机中粉碎并用96° GL的乙醇过滤至耗尽。随后，将乙醇提取物在减压下在50°C的旋转蒸发器中浓缩，并将得到的残余物保存在干燥器中，在真空下至少48h，用于消除残余溶剂。在硅胶空心柱(0. 2mm至5mm目)中进行粗制提取物分级，使用1 12的提取物/吸附剂比例。所用的洗脱系列包括以下的n-己烷、二氯甲烷、二氯甲烷/乙酸乙酯 (1 1)、乙酸乙酯、乙酸乙酯/甲醇(1 1)，甲醇；甲醇/水(1 1)和5%的醋酸水溶液。 可以在图中找到通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)获得的参照色谱特征。标准化级分，富含环多醇和类黄酮，对应于使用乙酸乙酯/甲醇(1 1)获得的洗脱液，相对于最初的提取
物，产量为45% w/w(重量/重量)。在控制的条件下，根据二极管阵列检测仪的高效液相色谱(HPLC-DAD)获得的化学指纹，富含环多醇和类黄酮的标准化级分含有17% w/w的L_(+)_甲基肌醇和10% w/w 的芦丁，以及canferol-3-O-芦丁糖苷、5_0_咖啡酰奎宁酸、反_4_羟基肉桂酸和顺_4_羟基肉桂酸。实施例2 标准化级分和粗提物的ACE抑制活性使用Serra 等所述的比色测试(SERRA, C. P. ； CORTES, S. F. ； LOMBARD I, J. Α.； BRAGA DE 0LIVEIRA, Α. ；BRAGA, F. C. Validation of a colorimetric assay for the in vitro screening ofinhibitors of angiοtensin-converting enzyme(ACE)from plantextractM用于来自植物提取物的血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂的体外筛选的比色测定的确认),Phytomedicine, v. 12，η. 6-7，2005)，在10 μ g/mL的浓度下测试时，富含环多醇和类黄酮的标准化级分产生了 95士 13%的ACE抑制，而在相同的测试中，粗提物导致 T 59 士 13%的抑制。上述标准化程序包括提取和分级过程的优化，以及对级分主要化学标记物测试了 ACE 抑制活性:L-(+)-甲基肌醇(IC50 = 41. 4 士 9. 6 μ M)和芦丁 (IC50 = 453. 9 士 78. 4 μ Μ)。实施例3:血管舒张作用如图2中所示，在用苯肾上腺素(IC5tl = 11. 5士 1.0 μ g/mL)预收缩大鼠大动脉中， EHS标准化级分产生了依赖于完整血管内皮存在的血管舒张作用。这种结果表明标准化级分能够明显只激活具有完整内皮层的动脉。这种对大鼠大动脉的作用通常是由于一氧化氮或环加氧酶衍生物的释放而产生。实施例4 血管舒张作用的抑制如图3中所示的，基于该实施例，可以推断出在用苯肾上腺素预收缩的大动脉环中由L-NAME (100 μ M)诱导的一氧化氮产生的抑制消除了由标准化级分诱导的血管舒张作用。该结果证明该级分通过依赖于一氧化氮的血管内皮产生的机理诱导了血管舒张作用。 因此，从临床观点看，该级分在与一氧化氮相关的再狭窄病例中具有与抗高血压、抗氧化和细胞增殖抑制作用相关的有益作用。环加氧酶衍生物，如前列环素，涉及几个血管床中的内皮依赖性血管舒张。为了证实是否任何一种环加氧酶衍生物涉及由标准化级分诱导的血管舒张作用，递送了消炎痛 (10 μ Μ)，并且注意到对用苯肾上腺素预收缩的大鼠大动脉的血管舒张作用没有改变(图 4)。该结果表明环加氧酶衍生物不太可能参与我们级分的血管舒张。实施例5 血压正常小鼠中降低的收缩压如图5中所示，当口服ρ. ο.递送(* * * P < 0. OOlvs.载体)和通过腹膜内途径p. i.递送(* * P < 0. Olvs.载体)超过4小时时，标准化级分(10mg/kg)明显降低了血压正常小鼠中尾部血管中测量的收缩压。该结果表明该级分除了血管舒张作用外，还具有降血压作用。
实施例6 高血压小鼠中降低的收缩压如图6中所示，当通过腹膜内途径(* * * P < 0. OOlvs.载体)递送时，标准化级分(100mg/kg)显著降低了高血压小鼠中(Doca-sal)的收缩压。对高血压动物的降血压作用明显强于对血压正常小鼠所观察到的(P < 0. 05)。这表明所述级分具有可以以较低剂量用于高血压动物中的抗高血压作用。实施例7 血压正常和高血压小鼠中降低的收缩压对于血压正常的小鼠，腹膜内递送的标准化级分(0. lmg/kg)，将动脉压略降低了约IOmmHg较短的时间，大约池(图7)。然而，递送至高血压小鼠时(Doca-sal)，相同剂量的标准化级分诱导了强烈的收缩压降低-大约40mmHg-该作用持续了超过5h (图7)。这些结果表明高血压个体对标准化级分的抗高血压作用更敏感，并且小剂量的所述级分可以用于治疗高血压，对血压正常个体的心血管功能没有明显改变。实施例8 标准化级分和ACE抑制剂的降血压作用的比较对于血压正常的小鼠，口腔递送标准化级分(lmg/kg)，明显降低了收缩期动脉压 (图8)。卡托普利(lmg/kg)，一种标准的ACE抑制剂，也经口腔递送，显示了明显的降压作用，但强度较低并且持续时间较短(图9)。这些作用的比较结果显示，H. speciosa的标准化级分具有比标准ACE抑制剂更强并且持续时间更长的降压作用。实施例9 标准化级分和H. speciosa叶的乙醇粗提物的抗高血压作用的比较在经口递送标准化级分(lmg/kg)的高血压小鼠中，收缩压被大大降低(图9)。用标准化级分获得的收缩压的最大下降等于55. 5士8. 9mmHg，抗高血压作用的持续时间大于 4小时。经口递送Hancorniaspeciosa的粗提物(lmg/kg)在高血压小鼠中也明显降低了收缩压，然而，该作用明显低于用相同剂量的标准化级分所获得的效果(图9)。用粗提物获得的收缩压的最大下降等于19. 3士8. 4mmHg，作用持续时间小于2小时。这些实施例清楚地显示标准化级分更有潜力，其抗高血压的持续时间明显高于用粗提物所观察到的。因此，相对于H. speciosa叶的乙醇粗提物，这种级分的治疗用途的优势是显而易见的。实施例10 标准化级分在血压正常小鼠中对血浆亚硝酸盐水平的影响经口递送H. speciosa的标准化级分(lmg/kg)明显增加递送后1小时采集的血液样本中的亚硝酸盐水平(
图10)。非选择性一氧化氮合成酶，L-NAMEO0mg/kg)明显抑制这种增加(图10)。由于亚硝酸盐源自一氧化氮的降解，该结果强烈提示标准化级分增加一氧化氮的产量或生物利用度。因此，通过在心血管系统中一氧化氮的增加，标准化级分的降血压作用/抗高血压作用至少部分地被消除。实施例11 =Hancornia speciosa的标准化级分的抗氧化活性通过使用黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶之间的反应产生的发光氨导致的化学发光，来分析不同浓度标准化级分的抗氧化活性。如图11所示，可以看出该级分具有标准的浓度依赖性的抗氧化作用。这种作用可能是由于该级分的降血压/抗高血压活性，因为自由基具有血管收缩活性，并降低内皮依赖性的血管舒张功能。实施例12 在饮用水中以0. lmg/kg剂量递送Hancornia speciosa的标准化级分 14天的抗高血压活性在高血压小鼠中，Hancornia speciosa的标准化级分以0. lmg/kg剂量递送，在治疗的14天期间明显降低了收缩压(图12)，使得收缩压降低到正常血压动物的相同水平。在正常血压动物(Sham)中，标准化级分以0. lmg/kg的剂量没有影响收缩压(图12)。这些结果表明，在14天的治疗期间，低剂量的标准化级分具有抗高血压活性。用这一级分以相同的治疗时间和剂量处理正常血压小鼠，没有表现出降血压活性。附图列表图1-色谱图-通过对Hancornia speciosa叶子(HSE)粗提物和衍生级分[η-己烷级分，HF;二氯甲烷级分，DF;二氯甲烷/乙酸乙酯级分(DEAF) (1 1);乙酸乙酯级分 (EAF)；乙酸乙酯/甲醇级分(EAMF) (1 1)；甲醇级分(MF)；甲醇/水级分(MWF) (1:1)] 的RP-HPLC获得。色谱条件0. 磷酸水溶液(A)和含0. 磷酸的乙腈(B)的梯度洗脱 (60min内5% B — 95% B，接着5min等强度洗脱)；温度40°C ；UV210nm检测；流速ImL/
mirio图2-在用苯肾上腺素预收缩大鼠大动脉中完整血管内皮不存在或存在情况下依赖于Hancornia speciosa标准化级分浓度的血管舒张作用。图3-在用苯肾上腺素预收缩的大动脉环中，在一氧化氮产生抑制剂 L-NAME (100 μ M)的不存在和存在情况下，Hancornia speciosa标准化级分诱导的血管舒张作用。图4-在用苯肾上腺素预收缩的大动脉环中，在环加氧酶抑制剂消炎痛(10 μ M)的不存在和存在情况下，Hancornia speciosa标准化级分诱导的血管舒张作用。图5-在血压正常小鼠中，口服和腹膜内递送Hancornia speciosa标准化级分 (100mg/kg)的降血压作用(mmHg)。图6-在高血压小鼠中，腹膜内递送Hancornia speciosa标准化级分(IOOn^Zkg) 的降血压作用(mmHg)。图7-在血压正常和高血压小鼠中，腹膜内递送Hancornia speciosa标准化级分 (0. lmg/kg)的降血压作用(mmHg)。图8-在血压正常小鼠中，经口递送Hancornia speciosa标准化级分(lmg/kg)和卡托普利(lmg/kg)的降血压作用(mmHg)。图9-在高血压小鼠中，经口递送Hancornia speciosa标准化级分(lmg/kg)和粗提物(lmg/kg)的抗高血压作用(mmHg)。图10-在血压正常小鼠中，经口递送的标准化级分(lmg/kg)对血浆中亚硝酸盐浓度的影响。动物血浆获自递送级分后1小时。图11-在黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶之间的反应中观察到的Hancornia speciosa标准化级分的抗氧化作用。图12-在血压正常和高血压小鼠中，经口递送用饮用水稀释的Hancornia speciosa标准化级分0. lmg/kg的抗高血压作用。
权利要求
1.Hancornia speciosa叶的标准化提取物和级分，其特征在于包含富含环多醇和类黄酮的标准化级分，除了 canferol-3-O-芦丁糖苷和5_0_咖啡酰奎宁酸、反_4_羟基肉桂酸和顺-4-羟基肉桂酸以外，其含有15至25% w/w的L-(+)_甲基肌醇和7至15% w/w的芦丁。
2.根据权利要求1的Hancorniaspeciosa叶及其产物的标准化提取物和级分，其特征在于包含基于优化的提取和分级方法获得的上述标准化级分，以及级分中存在具有ACE抑制活性的主要化学标记物L-(+)_甲基肌醇和芦丁。
3.根据权利要求1和2的Hancorniaspeciosa叶及其产物的标准化提取物和级分， 其特征在于包含所述富集标准化级分和通过高效液相色谱(HPLC)获得的特征性的化学指纹，与图IB中选定的相似。
4.来自Hancorniaspeciosa叶的标准化提取物和级分的药物组合物，其特征在于包含权利要求1至3中所述的Hancornia speciosa叶的标准化提取物和级分，以及药物学和药理学上可接受的惰性赋形剂。
5.根据权利要求4的来自Hancorniaspeciosa叶的标准化提取物和级分的药物组合物，其特征在于包括ACE抑制、血管舒张和抗高血压活性。
6.根据权利要求4和5的来自Hancorniaspeciosa叶的标准化提取物和级分的药物组合物，其特征在于呈现出高于90%的ACE抑制活性。
7.根据权利要求4和6的来自Hancorniaspeciosa叶的标准化提取物和级分的药物组合物，其特征在于呈现出长效降血压作用。
8.根据权利要求4-7任一项的来自Hancorniaspeciosa叶的标准化提取物和级分的药物组合物，其特征在于诱导收缩压的明显降低，该作用持续超过5h。
9.根据权利要求4至8任一项的来自Hancorniaspeciosa叶的标准化提取物和级分的药物组合物，其特征在于通过口服、肌内、静脉内、腹膜内、皮下和经皮途径来递送或作为可植入或注射的装置来递送，优选口服递送。
10.如权利要求4至9中任一项所述的来自Hancorniaspeciosa叶的标准化提取物和级分的药物组合物，其特征在于用于制备治疗心血管疾病的药物。
11.如权利要求4至10中任一项所述的来自Hancorniaspeciosa叶的标准化提取物和级分的药物组合物，其特征在于用于制备抗氧化剂药物。
12.治疗心血管障碍的方法，其特征在于包括将权利要求4至11中任一项所述的药物组合物给药于需要该治疗的人员。
13.用于研究心血管障碍的治疗的方法，其特征在于包括给药权利要求4至11中任一项所述的组合物。
全文摘要
本发明描述了获自Hancornia speciosa Gomes(EHS)(在巴西通常称为“曼加巴”)叶子的标准化提取物，以及具有对血管紧张素转化酶(下文中称为ACE)的抑制活性、血管舒张、抗高血压和抗氧化特性的标准化级分。本发明还涉及药物组合物的制备，所述药物组合物包含衍生自Hancornia speciosa Gomes叶子提取物的所述提取物或级分，所述级分富含环多醇和类黄酮；本发明还涉及所述组合物制备治疗心血管疾病，诸如动脉高血压、动脉粥样硬化、再狭窄和非限制性心脏或大脑缺血的药物的用途。
文档编号A61K36/24GK102202675SQ200980128121
公开日2011年9月28日 申请日期2009年5月19日 优先权日2008年5月19日
发明者D·考汀豪恩德里格, F·卡斯特罗布拉加, G·卡洛里纳达希尔瓦, S·德弗兰卡克提斯 申请人:米纳斯吉拉斯联合大学