专利名称：含胶原肽的皮肤美容用组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种含有胶原肽混合物的皮肤美容用组合物，更具体地，涉及一种含 有胶原肽和选自由透明质酸、弹性蛋白和维生素C所组成的组中的至少一种，且因此具有 卓越的改善皮肤状况的作用的皮肤美容用组合物。
背景技术：
皮肤老化根据其起因可分为内因性老化和外因性老化。内因性老化是随着人的年 龄增长，皮肤结构和生理功能减退的过程，这与环境变化无关。外因性老化是由于持续暴露 于阳光等外部环境而引起的。尤其是，光线引起的皮肤老化被称为光老化。紫外线是皮肤 老化的生理和形态学改变的主要因素。随着内因性皮肤老化的进行，皮肤变得干燥，同时细 纹增加且变深。此外，由于表皮、真皮等的结构和功能的改变，皮肤失去许多弹性且看起来 下垂。真皮变薄，而成人的胶原总量以每年的速度流失。同样，留下的胶原纤维逐渐变 厚，同时其交联增加，因此胶原的可溶性、弹性等降低。另外，弹性纤维变厚且其交联也增 加。另外，在真皮内的纤维母细胞(fibroblasts)的增殖活性降低，合成和分解胶原的能力 也降低。胶原是与皮肤老化有关的皮肤组织的主要成分。胶原蛋白占除脂肪之外的皮肤全 部干重的77%，占真皮纤维成分的90%。它负责维持皮肤强度、弹性和柔韧性。因此，胶原 合成的促进和胶原分解的抑制成为针对皮肤美容和防止皮肤老化的主要问题，且需要开发 能够抑制由紫外线引起的光老化，同时促进胶原合成的美容食品。为此，对能够口服的胶原产品进行了不断的研究。随着技术的发展，开发了不 同来源的胶原产品以及经过不同后处理过程的胶原材料。与此相关的，韩国专利公告号 第2001-0075842号Q001.08.ll)中公开了 一种含有胶原的功能食品，且韩国专利公 告号第2002-0085307 Q002. 11. 16)公开了一种含大量胶原的皮肤美容用口服食品组合 物。然而，由于胶原具有高分子量，胶原的消化和吸收、向靶器官如皮肤输送胶原、向靶器 官输送有效量的胶原、胶原的生物相容性等问题上存在多种问题。因此，需要对胶原类 (collagen-based)材料的实效(substantial effects)进行额外的研究。
发明内容
因此，本发明的发明人为了寻找显示出皮肤美容改善效果的胶原类制剂而进行了 广泛的研究，结果发现含有高浓度Gly-X-Y型三肽的胶原肽具有皮肤美容改善效果。基于 此发现，本发明的发明人实施了关于在皮肤细胞中促进原胶原生物合成的化合物的研究， 结果发现，若向胶原肽中添加最佳量的弹性蛋白、透明质酸和维生素C，能够使皮肤美容改 善效果最大化，由此完成了本发明。因此，本发明的目的在于提供一种没有副作用的改善皮肤美容用组合物，该组合 物通过促进原胶原的生物合成预防皮肤老化，同时抑制光老化，并通过增加皮肤弹性显示 出卓越的皮肤状况改善效果。为了达到上述目的，本发明提供了改善皮肤美容用组合物，该组合物含有胶原肽和选自由弹性蛋白、透明质酸和维生素C所组成的组中的至少一种。以胶原肽的总量为基准，所述胶原肽优选含有含量为15重量％或更多的胶原三 肽。根据本发明的改善皮肤美容用组合物能够通过促进胶原合成预防皮肤老化并 抑制光老化，同时也通过促进伤口愈合和提高胶原肽的体内保留率(invivo retention rate)而显示出卓越的皮肤状况改善效果。
图1显示了使用响应最佳化工具(response optimization tool)得出的最佳条 件；图2是显示实施中心组合设计结果的等值线图(contour diagram)；图3是显示比较例2和3以及实施例1的取样于动物的皮肤复制品(r印licas) 之间差别的一组图片；图4表明了实施免疫组化染色来检测皮肤组织中的胶原表达的结果；图5表明了比较例1和2以及实施例1的体内保留率的分析结果。
具体实施例方式根据本发明的皮肤美容用组合物含有胶原肽和选自由弹性蛋白、透明质酸和维生 素C所组成的组中的至少一种。当分析上述成分的功能时，为了在给定的费用、时间和预算内最大限度地获得信 息，需要综合的实验方法和分析方法。为此，在本发明中使用了实验设计(D0E，Design of Experiments)。DOE是系统设计、执行并统计分析科学研究的方法论。尤其，通过DOE设计 一系列实验步骤并执行，其中，可控制的输入值水平逐渐的变化，以确定特定步骤中的输出 值变化的原因。通过此，使得建立起用于确认实验条件的实验策略成为可能，在所述实验条 件下，能够有效地获得最多的信息，从而满足实验目的并获得充足的结果。所述DOE能够校 正系统方法，且能够定义及评价实验方法和结果值之间的关系。另外，DOE能够知道少数极 重要的参数的变量(variance)，提供针对响应参数的少数极重要的效果的测定值，相比单 次单因子(One-Factor-At-a-Time)标定得到有效测量值和高品质数据，允许不确定性的 测定，最少化检查试验(test trials)，且允许控制干扰变量(nuisancevariables)。这种 DOE法包括部分因子析因设计(fractional factorial design)、全因子析因设计、响应曲 面法(response surface methodology)、混料设计(mixture design)、田□设计等等。本发明中用作活性成分的胶原肽具有500-1000Da的分子量，且以胶原肽的总重 量为基准，该胶原肽含有含量为15重量％或更多，如15-95%的Gly-X-Y型三肽，其中，每个 X和Y可以是任何氨基酸。此外，X和Y可以是相同或不同的氨基酸，且也可以选自所有可 能的氨基酸组合。即，X和Y可以选自天然氨基酸，包括丙氨酸(Ala)、缬氨酸(Val)、亮氨酸 (Leu)、异亮氨酸(Ile)、脯氨酸(ftx))、羟脯氨酸(Hyp)、苯丙氨酸(Wie)、色氨酸(Trp)、蛋氨 酸(Met)、丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)、半胱氨酸(Cys)、谷酰胺(Gin)、甘氨酸(Gly)、天冬 酰胺(Asn)、酪氨酸(Tyr)、赖氨酸(Lys)、精氨酸(Arg)、组氨酸(His)、天冬氨酸(Asp)和谷 氨酸(Glu)。尤其，本发明中使用的三肽可以选自，但不限于由Gly-Pro-Hyp，Gly-Pro-Ala，Aly-Ala-Hyp, Gly-Leu-Hyp, Gly-Glu-Lys, Gly-Pro-Lys, Gly-Glu-Hyp, Gly-Phe-Hyp, Gly-Ser-Hyp, Gly-Gln-Hyp, Gly-Glu-ArgjP Gly-Pro-Arg 所组成的组。具体地，本发明所用的胶原肽可以通过下述方法制备。当利用酶，例如半胱氨酸蛋 白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶或胶原酶，降解胶原或明胶成分时，可制备出含有5重量％或更 多的三肽和二肽的胶原肽。为了增加由此制备的肽混合物的三肽含量，将含Gly-X-Y型三 肽的肽混合物与碱性阴离子交换树脂接触，三肽Gly-X-Y被吸附在离子交换树脂上，然后 从吸附了三肽的离子交换树脂上将三肽洗脱下来，从而制备具有高三肽含量的纯化肽。选 择性地，可通过将含有三肽Gly-X-Y的肽混合物与非极性吸附剂接触，使肽混合物中含有 的疏水性肽部分吸附到非极性吸附剂上，然后将没有吸附到非极性吸附剂上的亲水性三肽 部分回收，从而制备具有更高亲水性三肽含量的纯化肽。在本发明中，胶原肽的含量占组合物总重量的1-80重量％。如果组合物中的胶原 肽的含量少于1重量％，将难以获得理想效果；而如果含量大于80重量％，组合物将难以剂 型化。同样，本发明使用的弹性蛋白是通过水解正鲣(Euthynus pelamis)的主动脉球 (aortic bulb)而获得，且特征在于含有弹性蛋白特有的交联氨基酸，锁链赖氨素和异锁链
赖氨素。本发明所使用的透明质酸是通过链球菌发酵大量生产的，以使透明质酸的含量为 90-100%。这在化妆品和医药领域广泛使用，近来还在保健食品等多种领域得到应用。基于组合物的总重量，本发明组合物中的胶原肽、弹性蛋白、透明质酸和维生素C 的含量分别为1-80重量％，1-20重量％，1-10重量％和1-20重量％。根据本发明的组合物能够促进皮肤的胶原合成，抑制皮肤光老化，增加皮肤湿润 度，促进伤口愈合且增加胶原肽的体内保留率，从而改善皮肤状况。同样，胶原肽弹性蛋白维生素C 透明质酸的含量比优选为1 0.0001-150 0.0001-20 0.0001-50000。本发明的改善皮肤美容用组合物可以制备成各种不同剂型，包括丸剂、茶包、速溶 茶、饮料、颗粒剂、片剂和胶囊剂，能够应用于包括保健食品和医疗药物等多种领域。下面，将参考附图、实施例以及试验实施例进一步对本发明进行更详细的描述。这 些实施例和试验实施例仅用于促进对本发明的理解，本发明的范围并不由此限定。本领域 技术人员应当理解的是在不脱离随附的本发明权利要求的思想和范围的条件下，可以进行 各种常规的众所周知的变形，替代和插入。实验实施例1 生成胶原能力的测定1型原胶原的生成能力通过成纤维细胞测定，如下表1所示。[表 1]
组别处理对照组在正常组中，细胞用生理盐水处理比较例1细胞用溶解有普通胶原材料的生理盐水处理比较例2 细胞用溶解有胶原肽(购自Jellice公司)的生理盐水处理为了比较各组之间的产原胶原能力，将成纤维细胞以5X IO4细胞/孔的密度加入 到48孔板中并使其附着在每个孔上。在此状态下，比较例1和2的胶原各自以最终浓度为 0. lppm、lppm和IOppm加入到细胞中。制备了没有用任何胶原样品处理的组作为对照组。 将细胞培养48小时之后，培养液上清液中的1型原胶原的产量利用ELISA试剂盒(Takara MK101)来测定。将对照组的结果作为100%，测定结果表达为与对照组的相对值，如下表2 所示。[表 2]原胶原的产量
权利要求
1.一种皮肤美容用组合物，其特征在于，该组合物含有胶原肽和选自由弹性蛋白、透明 质酸和维生素C所组成的组中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中，以所述胶原肽的总量为基准，所述胶原肽含有 含量为15-95重量％或更多的胶原三肽。
3.根据权利要求2所述的组合物，其中，所述胶原肽是Gly-X-Y型，且X和Y选自相同 或不同的氨基酸。
4.根据权利要求1所述的组合物，其中，以所述组合物的总量为基准，所述胶原肽的含 量为1-80重量％。
5.根据权利要求1所述的组合物，其中，以所述组合物的总量为基准，所述组合物中的 弹性蛋白、透明质酸和维生素C的含量分别为1-20重量％、1-10重量％和1-20重量％。
6.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述胶原肽弹性蛋白维生素C透明质酸 的含量比为 1 0. 0001-150 0. 0001-20 0.0001-50000。
7.根据权利要求1-6中任意一项所述的组合物，其中，所述组合物的剂型为丸剂、茶 包、速溶茶、饮料、颗粒、片剂或胶囊。
8.一种促进皮肤胶原生成的组合物，其特征在于，该组合物含有权利要求1-6中任意 一项所述的组合物。
9.一种抗老化组合物，其特征在于，该组合物含有权利要求1-6中任意一项所述的组 合物。
10.一种增加皮肤湿润度的组合物，其特征在于，该组合物含有权利要求1-6中任意一 项所述的组合物。
11.一种含有胶原肽和选自由弹性蛋白、透明质酸和维生素C所组成的组中的至少一 种的组合物用于皮肤美容的应用。
12.—种含有胶原肽和选自由弹性蛋白、透明质酸和维生素C所组成的组中的至少一 种的组合物用于促进皮肤胶原生成的应用。
13.一种含有胶原肽和选自由弹性蛋白、透明质酸和维生素C所组成的组中的至少一 种的组合物用于抗皮肤老化的应用。
14.一种含有胶原肽和选自由弹性蛋白、透明质酸和维生素C所组成的组中的至少一 种的组合物用于增加皮肤湿润度的应用。
全文摘要
本发明涉及一种皮肤美容用口服组合物，该组合物具有减少皮肤皱纹和抑制皱纹形成的作用。该组合物含有胶原肽和选自由弹性蛋白、透明质酸和维生素C所组成的组中的至少一种。特别是，所述组合物含有最佳比例的胶原肽、弹性蛋白、透明质酸和维生素C，当被人体摄入后，不会引起副作用，能够最大化皮肤真皮层的胶原生物合成，表现出优异的体内保留率，具有抑制皮肤皱纹形成，保持或增加皮肤弹性和保湿皮肤的作用。因此，所述组合物可用作用于皮肤美容和预防皮肤老化的健康功能食品。
文档编号A61K8/64GK102131492SQ200980133627
公开日2011年7月20日 申请日期2009年8月27日 优先权日2008年8月27日
发明者李智恩, 李知海, 梁美淑, 金完起, 金正基 申请人:株式会社太平洋