用非天然前列腺素治疗脱发的组合物和方法

专利名称：用非天然前列腺素治疗脱发的组合物和方法
技术领域：
本发明涉及治疗哺乳动物脱发的组合物和方法。具体说，本发明涉及制止和/或 逆转脱发以及促进毛发生长的组合物和方法。
背景技术：
脱发是一种常见病，例如天然的或是因为使用某些用于减轻疾病如癌症的治疗药 而由化学机制引起的。通常这种脱发还伴随有毛发再生长的不足，从而使患者部分或完全 秃顶。头皮上头发的生长并不是连续的，而是以由生长和静止交替阶段构成的循环形式 发生的。可以将这种循环分为3个主要阶段毛发生长初期、毛发生长中期和毛发生长终 期。毛发生长初期是循环的生长阶段，其特征为毛囊深入真皮同时细胞迅速增生，这些细胞 分化形成头发。随后的阶段为毛发生长中期，这是一个过渡阶段，其特征为细胞分化的停 止，在该阶段毛囊通过真皮退回且头发停止生长。随后的阶段，毛发生长终期，其特征为静 止期，在该阶段退回的毛囊包含填满真皮乳头细胞的毛芽。在毛发生长终期，由毛芽内细胞 的迅速增生、真皮乳头的膨胀和基质膜成分的形成引发新一轮的毛发生长初期。当毛发生 长停止，大部分毛囊处于毛发生长终期且不接合毛发生长初期，从而引起部分或完全秃顶。人们已进行了许多引发头发再生长的尝试，例如促进或延长毛发生长初期。最近， 美国食品和医药管理局批准了两种用于治疗男性型脱发的药物局部米诺地尔(Pharmacia & Upjohn 的商品R0GAINE )和 口服非那司提(Merck &Co. , Inc 的商品PROPECIA )。然 而，由于一些因素如对安全的考虑和药效不高，对有效的毛发生长诱导剂的研究还在进行 中。脱碘酶I，一种含硒蛋白质(selenoprotein)，将人皮肤中的甲状腺激素甲状腺素 (“T4”)转化成甲状腺原氨酸(“T3”)。硒缺陷会因为脱碘酶I活性的降低导致T3的含 量减少；而这种T3含量的减少与脱发极其相关。与这一观察结果一致的是，有关于施用T4 对头发生长的副作用的报道，参见如Berman "L-甲状腺素对牛毛发生长和毛色的外周影 响”，Journal of Endocrinology，第 20 卷，第 282-292 页(1960)；禾口 Gunaratnam，“ 甲状腺 素对狗毛发生长的影响”，J. Small Anim.PraCt.，第27卷，第17-29页(1986)。另外，在一 些关于脱发治疗的专利出版物中涉及T3和T4。例如参见Fischer等人，DE1，617，477 (1970 年 1 月 8 日出版)；Mortimer, GB2, 138，286 (1984 年 10 月 24 日出版)；禾口 Lindenbaum, WO 96/25943 (授予 Life Medical Science, Inc.，于 1996 年 8 月 29 日出版)。然而不幸的是，施用T3或T4或这两者来治疗脱发是不切实的，因为这些甲状腺 激素引发显著的心脏毒性。参见如Walker等人，美国专利No. 5，284，971 (授予Syntex, 于1994年2月8日出版)；和Emmett等人，美国专利No. 5，061, 798 (授予Smith Kline & French Laboratories,于 1"1 年 10 月 29 日出版)。
在另一方法中，已用前列腺素来促进毛发生长，因为前列腺素具有与甲状腺激素 相似的效益，即增加毛发的长度和色素沉着的改变。天然前列腺素(如PGA2、PGB2, PGE1, PGF2a和PGI2)是C-20不饱和脂肪酸。PGF2a (人体中的天然前列腺素F类似物)的特征 是在脂环的C9和Cll位含羟基，在C5和C6间具有顺式-双键，和在C13和C14间包含反 式-双键。PGF2a的结构式为 天然前列腺素F的类似物是本领域已知的。例如，参见美国专 利 No. 4，024，179(1977 年 5 月 17 日授予 Bindra 和 Johnson)；德国专利 No. DT-002, 460, 990(1976 年 7 月 1 日出版，授予 Beck，Lerch, Seeger 和 Teufel)； 美国专禾Ij No. 4，128，720(1978 年 12 月 5 日授予 Hayashi，Kori 和 Miyake)；美国专 利 No. 4，011，262(1977 年 3 月 8 日授予 Hess, Johnson, Bindra 和 Schaaf)；美国专利 No. 3，776，938 (1973 年 12 月 4 日授予 Bergstrom和 Sjovall) ；P. W. Collins 和 S. W. Djuric, “用于治疗的前列腺素和前列腺环素类似物的合成”，Chem. Rev.第93卷，第1533-1564页 (1993) ；G. L. Bundy 和 F. H. Lincoln "PG1 系列 17-苯基-18，19，20-三去前列腺素 I.的 合成”，Prostaglandin,第 9 卷，第 1 号，第 1-4 页(1975) ；W. Bartman, G. Beck, U. Lerch, H. Teufel和B. Scholkens，“溶解黄体的前列腺素合成和生物活性”，Prostaglandin，第 17 卷，第 2 号，第 301-311 页(1979) ；C. Iiljebris, G. Selen, B. Resul. J. Stemschantz 和 U. Hacksell, "17-苯基-18，19，20-三去前列腺素F2 α异丙酯潜在的抗青光眼药物”， Journal ofMedicinal Chemistry，第 38 卷，第 2 号，第 289-304 页(1995)。一般前列腺素具有很广泛的生物活性。例如，PGE2具有以下特性a)细胞增生的 调节剂，b)细胞因子合成的调节剂，c)免疫应答的调节剂；d)血管舒张的诱导剂。据信，血 管舒张是米诺地尔提供毛发生长益处的机制之一。在体外，文献中的结果也表明前列腺素 的某些抗炎性 C. f. ；Tanaka, H. Br J. Pharm.，116，2298 (1995)。然而，已有的用前列腺素促进毛发生长的尝试并不成功。不同的前列腺素类似物 可能以各种浓度结合于多种受体，而产生双相作用。另外，给予天然前列腺素能产生副作 用，如炎症、表面刺激、平滑肌收缩、疼痛和支气管收缩。因此，本发明的目的之一是提供用 前列腺素类似物使毛发生长的方法，还提供促进人和低等动物毛发生长的组合物。本发明 的另一目的是选择合适的促进毛发生长而不会造成明显副作用的前列腺素类似物。发明概述本发明涉及用于治疗脱发的组合物和方法。这些方法包括施用包含特定的前列腺 素类似物的组合物，这种前列腺素类似物能与毛发选择性受体(如FP受体)强烈相互作 用。前列腺素类似物的选择至关重要，因为前列腺素类似物必须选择性地激活FP受体而不 激活其它会抵消FP受体活化作用的受体。该组合物包含成分A)前列腺素类似物，成分B) 载体，和任选的成分C)活性增强剂。发明详述
本发明涉及用前列腺素F类似物(“PGF”)治疗哺乳动物脱发的组合物和方法。 “治疗脱发”包括制止和/或逆转脱发以及促进毛发生长。在本文中参考许多出版物和专利。本文将所引用的所有美国专利全部纳入作为参考。除非特别指出，本文中的所有百分比、比率和比例都是以重量计的。术语的定义和使用以下列出了本文所用的术语的定义“激活”指受体的结合和信号传导。“酰基”指适合以下酰化的单价基团酰化氮原子形成酰胺或氨基甲酸酯，酰化醇 形成碳酸酯，或酰化氧原子形成酯基团。优选的酰基包括苯甲酰基、乙酰基、叔丁基乙酰基、 对苯基苯甲酰基和三氟乙酰基。更优选的酰基包括乙酰基和苯甲酰基。特别优选的酰基是 乙酰基。“芳基”指具有单环结构或稠合双环结构的单价基团。单环芳基的环包含5-10个 碳原子，宜为5-7个碳原子，更佳的是5-6个碳原子。双环芳基的环中包含8-12个碳原子， 宜为9-10个碳原子。芳基是未取代的。最优选的芳基是苯基。双环芳基包含环系，环系中 的一个环是芳族的。优选的双环芳基是环系中两个环都是芳族的环系。优选的芳环包括萘 基和苯基。最优选的芳环是苯基。“碳环基团”指单价饱和的或不饱和的烃环。碳环基团是单环。碳环基团的环中包 含4-10个碳原子，宜为4-7个碳原子，最优选的是5-6个碳原子。碳环是未取代的。优选 的碳环包含环戊基、环己基、环己烯基、环庚基和环辛基。更优选的碳环包括环己基、环庚基 和环辛基。最优选的碳环是环庚基。碳环基团不是芳族的。"FP促效剂”指激活FP受体的化合物。"FP受体”指已知的人FP受体、它们的剪接变体和与已知人FP受体具有类似结合 和激活性的未描述过的受体。“FP”指一类对所有天然前列腺素的PGF2a具有最高亲和力的 受体。FP指一种已知的蛋白。“杂原子”指F、Cl、Br或I。较佳地，杂原子是F、C1或Br ；更优选的是Cl或F ；最 优选的是F。“卤化的杂基团”指取代的杂基团或取代的杂环基团，其中至少一个取代基是卤原 子。卤化的杂基团可以是直链、支链或环状结构。优选的卤化的杂基团具有1-12个碳原子， 更佳地为1-6个碳原子，最优选的是1-3个碳原子。优选的卤原子取代基是Cl和F。“卤化 的烃类基团”指取代的单价烃类基团或取代的碳环基团，其中至少一个取代基是卤原子。卤 化的烃类基团可以是直链、支链或环状结构。优选的卤化的烃类基团具有1-12个碳原子， 更佳地为1-6个碳原子，最优选的是1-3个碳原子。优选的卤原子取代基是Cl和F。“卤化的烃类基团”指取代的单价烃类基团或取代的碳环基团，其中至少一个卤原 子。卤化的烃类基团是直链、支链或环状结构。优选的卤化的烃类基团具有1-12个碳原子， 更佳地为1-6个碳原子，最优选的是1-3个碳原子。优选的卤原子取代基是Cl和F。最优 选的卤化的烃类基团是三氟甲基。“杂芳基”指环中包含碳原子和1-4个杂原子的芳环。杂芳族基团是单环或稠合双 环。单环杂芳基的环中包含5-10个成员原子(即碳原子和杂原子)，宜为5-7个，更佳地是5-6个。双环杂芳族环的环中包含8-12个成员原子，宜为9-10个。杂芳基是未取代的。双 环杂芳基包含环系，环系中仅一个环是芳族的。优选的双环杂芳基是环系中两个环都是芳 族的环系。优选的单环杂芳基包括噻吩基、噻唑基、嘌呤基、嘧啶基、吡啶基和呋喃基。更优 选的单环杂芳基包括噻吩基、呋喃基和吡啶基。最优选的单环杂芳基是噻吩基。优选的双 环杂芳环包括苯并噻唑基、苯并噻吩基、喹啉基、喹喔啉基、苯并呋喃基、苯并咪唑基、苯并 噁唑基、吲哚基和邻氨基苯甲酰基(anthranilyl)。更优选的双环杂芳环包括苯并噻唑基、 苯并噻吩基和苯并噁唑基。“杂原子”指杂环基团或杂基团链中除碳以外的原子。较佳地，杂原子选自氮、硫 和氧原子。含有多个杂原子的基团可能包含不同的杂原子。“杂环基团”指环中包含碳原子和1-4个杂原子的饱和或不饱和环。环中杂原子 不相邻，且环中结合有杂原子的碳不再连接于羟基、氨基或硫醇基。杂环基团不是芳族的。 杂环基团是单环。杂环基团的环中包含4-10个成员原子(即包含碳原子和至少1个杂原 子)，较佳地4-7个，更优选的是5-6个。杂环基团是未取代的。优选的杂环基团包括胡椒 酰(piperzyl)、吗啉基、四氢呋喃基、四氢吡喃基和哌啶基。“杂基团”指含有1-18个成员原子(即包括碳原子和至少一个杂原子)的饱和的 或不饱和链。杂原子不相邻。较佳地，链包含1-12个成员原子，更佳地为1-6个，最佳的为 1-4个。该链是直链或支链的。优选的支链杂基团具有1个或2个支链，较佳地为具有1个 支链。优选的杂基团是饱和的。不饱和的杂基团具有1个或多个双键、一个或多个三键或 都有。优选的不饱和杂基团包含一个或两个双键或一个三键。更优选的是，不饱和杂基团 具有一个双键。杂基团是未取代的。“单价烃基”指1-18个(较佳地为1-12个)碳原子的链。“低级单价烃基”指具 有1-6个(较佳地为1-3个)碳原子的单价烃基。单价烃基可能是直链或支链结构。优选 的单价烃基具有1个或2个支链，较佳地为1个支链。优选的单价烃基是饱和的。不饱和 单价烃基具有一个或多个双键、一个或多个三键、或这两者。优选的不饱和单价烃基具有1 个或2个双键或1个三键；更优选的不饱和单价烃基具有1个双键。“药学上可接受的”指适用于人或其它哺乳动物的。“前列腺素”指具有激素的或调节性能的多种强生物活性的脂肪酸衍生物。“保护基团”指取代羟基中的活泼氢从而防止羟基上的不良副反应的基团。保护 基团在有机合成中的用途是本领域所熟知的。保护基团的示例可见Greene，T.W.和Wuts， P.G.M.的“有机合成中的保护基团”，第2版，Wiley & Sons，Inc.，1991中的第二章。优选 的保护基团包括甲硅烷基醚、烷氧基甲基醚、四氢吡喃基、四氢呋喃基、酯和取代的或未取 代的苄醚。“安全和有效量”指足以能向待治疗患者的疾病提供有效的有益改善的前列腺素 量，但该量也足够低至避免严重的副作用(合理的益处/风险比)。“选择性”指对特定受体比对其它受体具有结合或活化优先性，这可以用受体结合 或活化试验定量。“对象”指需要治疗的活的、有毛发或皮毛的脊椎动物，如哺乳动物(优选人)。“取代的芳基”指1-4个与环中碳原子结合的氢原子被其它取代基取代的芳基。优 选取代基包括卤原子、氰基、单价烃基、取代的单价烃基、杂基团、取代的杂基团、芳基、取
7代的芳基、或它们的组合。更优选的取代包括卤原子、卤化的单价烃基、苯基和苯氧基。优 选的取代的芳基包括萘基。取代基可以是在环的邻位、间位或对位或它们的组合上取代的。 环上优选的取代模式是邻位或间位。最优选的取代模式是邻位。“取代的碳环基团”指至少1个(宜为1-4个)与环中碳原子结合的氢原子被其它 取代基取代的碳环基团。优选取代基包括卤原子、氰基、单价烃基、单价杂基团、取代的单 价烃基、芳基、取代的芳基、或它们的组合。更优选的取代基包括卤原子和取代的单价烃基。“取代的杂芳基”指1-4个与环中碳原子结合的氢原子被其它取代基取代的杂芳 基。取代基包括卤原子、氰基、单价烃基、取代的杂基团、杂基团、取代的单价烃基、芳基、取 代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基和它们的组合。优选的取代包括卤原子、氰基、单价烃基、 取代的单价烃基、杂基团、取代的杂基团、苯基和苯氧基或它们的组合。更优选的取代基包 括卤原子、卤化的烃基、单价烃基、卤化的杂基团和苯基。“取代的杂环基团”指1-4个与环中碳原子结合的氢原子被其它取代基取代的杂 环基团。优选的取代基包括卤原子、氰基、单价烃基、取代的单价烃基、杂基团、取代的杂基 团、芳基、取代的芳基或它们的组合。更优选的取代基包括卤原子、卤化的烃基、苯基、苯氧 基或它们的组合。取代的杂环基团不是芳族的。“取代的杂基团”指1-4个与链中碳原子结合的氢原子被其它取代基取代的杂基 团。优选的取代的杂基团是单_、二-或三取代的。优选的取代基包括卤原子、羟基、羧基、 芳氧基(如苯氧基、氯苯氧基、甲苯氧基、甲氧基苯氧基、苄氧基、烷氧基羰基苯氧基和酰氧 基苯氧基)、酰氧基(如丙酸基、苯甲酸基和乙酰氧基)、芳基(如苯基和甲苯基)、取代的芳 基(如烷氧基苯基、烷氧基羰基苯基和卤代苯基)、杂环基团、杂芳基、取代的杂环基团和氨 基(如氨基、1-3个碳原子的单_和二 _烷基氨基、甲基苯基氨基、甲基苄基氨基、1-3个碳 原子的链烷基(alkanyl)酰氨基、氨基甲酰氨基、脲基和胍基)。“取代的单价烃基”指1-4个与链中碳原子结合的氢原子被其它取代基取代的单价 烃基。优选的取代的单价烃基是单_、二-或三取代的。优选的取代基包括卤原子、低级单 价烃基、羟基、芳氧基(如苯氧基、氯苯氧基、甲苯氧基、甲氧基苯氧基、苄氧基、烷氧基羰基 苯氧基和酰氧基苯氧基)、酰氧基(如丙酸基、苯甲酸基和乙酰氧基)、羧基、单环芳基、单环 杂芳基、单环碳环、单杂环基团和氨基(如氨基、1-3个碳原子的单-和二 -烷基氨基、甲基 苯基氨基、甲基苄基氨基、1-3个碳原子的烷基(alkanyl)酰氨基、氨基甲酰氨基、脲基和胍 基)。本发明所用的前列腺素本发明涉及前列腺素F类似物(PGF)在治疗脱发中的用途。合适的PGF具有如下
的结构 PGF也可选自如上所示结构的药学上可接受的盐或水合物；如上所示结构的可生 物水解的酰胺、酯和酰亚胺；如上所示结构的光学异构体、非对映体和对映体。因此，在所有 立体化学不确定的(Cn、C12和C15)立构中心，可以设想两种差向异构体。在所有这种本发 明化合物的立构中心的优选立体化学模拟天然的PGF2a。可以使用两种或多种PGF的组合。R1 选自:C(0) OH、C (0) ΝΗΟΗ、C (0) OR3、CH2OH, S (0) 2R3、C (0) NHR3、C (0) NHS (0) 2R4、四 唑、阳离子盐部分、2-13个碳原子的药学上可接受的胺或酯、和2-13个原子的生物可代谢 的胺或酯。较佳地，R1选自C02H、C(O)NH0H、C02R3、C(O)NHS(O)2R4和四唑。更佳地，R1选自 CO2H 和 CO2R3。R2选自氢原子、低级杂基团和低级单价烃基。较佳地，R2是氢原子。R3选自单价烃基、杂基团、碳环、杂环、芳基、杂芳基、取代的单价烃基、取代的杂基 团、取代的碳环、取代的杂环、取代的芳基、和取代的杂芳基。较佳地，R3选自甲基、乙基和异丙基。R4选自单价烃基、杂基团、碳环、杂环、芳基、杂芳基、取代的单价烃基、取代的杂 基团、取代的碳环、取代的杂环、取代的芳基和取代的杂芳基。较佳地，R4是苯基。X 是二 价的。X 选自-C 三 C-、共价键、-CH = C = CH-、-CH = CH_、-CH = N-、-C (0) -、-C (0) Y-、- (CH2)n-(其中 η 为 2-4)、-CH2S-和-CH2O-。Y 选自0、S 和ΝΗ。Z选自碳环、杂环、芳基、杂芳基、取代的碳环、取代的杂环、取代的芳基、和取代 的杂芳基。较佳地，当X是共价键时，Z选自芳基、杂芳基、取代的芳基和取代的杂芳基。更 佳地，当X是共价键时，Z是双环杂芳基。较佳地，当X是-C ε C-时，Z是单环芳基。更佳地，当X是-C Ε C-时，Z选自 呋喃基、噻吩基和苯基。在以上第二个结构中以短划线表示键是表明那些键是任选的双键或三键。例如， 当R1是以下机构中的C(O)OH: 在C2-C3位置的键可以是单键或双键。在C5-C6位置的键是单价、双键或三键。在 C13-C14位置的键是单价、三键或三键。下表1和2显示了适合用作成分A)的具有如下结构的PGF的实例 表1 适合用作成分A)的实例 上表中的Me代表甲基。可用常规有机合成方法制备表1中的PGF。优选的合成是用反应流程1、2和3进 行的。流程1描述了制备X为-CH = CH-(式I)或-CH = C = CH-(式II)的PGF的常规 反应流程。流程2描述了制备X为-C(0)-(式III)或-C(O)Y-(式IV)的PGF的常规反应 流程。流程3描述了制备X为-CH = N-(式V)的GPF的常规反应流程。流程1 在流程1中，R1和Z的定义如上。流程1中所示的作为起始物的7(3_(R)_羟 基-5-氧代-I-环戊烯-I-基)庚酸甲酯(Sla)是可购得的(如可以从SumitomoChemical
Cayman Chemical )。在流程1中，7-(3-(R)_羟基-5-氧代-1-环戊烯-1-基)庚酸甲酯(Sla)与溶剂 中的甲硅烷基化剂和碱反应，该溶剂能让甲硅烷基化进行。优选的甲硅烷基化剂包括叔丁 基二甲基甲硅烷基氯和三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯。最优选的甲硅烷基化剂是三 氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯。优选的碱包括三乙胺、三甲胺和2，6_ 二甲基吡啶。更 优选的碱包括三乙胺和2，6-二甲基吡啶。最优选的碱是2，6-二甲基吡啶。优选的溶剂包括 卤化的烃类溶剂，最优选的是二氯甲烷。宜让反应在-100°C到100°C进行，更佳地为-80°C 到80°C，最优选的是-70°C到23°C间进行。用本领域技术人员已知的方法分离得到的甲硅烷基化的化合物。这些方法包括 提取、蒸发溶剂、蒸馏和结晶。较佳地，在通过真空蒸馏的分离后纯化甲硅烷基醚。然后将甲硅烷基化的化合物与通过合适的链烯溴的Grignard形成产生的铜酸盐 反应，如以下参考文献所述H. 0. House等人，“碳阴离子的化学制备有机铜酸盐锂的便利 前体”，J. Org. Chem.第40卷(1975)，第1460-69页；和P. Knochel等人，“作为有效和选择性 a，/d，多偶合试剂的锌和铜卡宾体”，J. Amer. Chem. Soc.第111卷(1989)，第6474-76页。优选的链烯基溴包括4_溴-1- 丁烯、4-溴-1- 丁炔、4-溴-2-甲基-1- 丁烯和4-溴-2-乙 基-1-丁烯。最优选的链烯溴是4-溴-1-丁烯。优选的溶剂包括醚溶剂，其中乙醚和四氢 呋喃是优选的。最优选的溶剂是四氢呋喃。在80°C-23°C，较佳地为85°C-30°C，最优选的 是在75°C _65°C，让Grignard试剂形成。反应时间宜为1_6小时，较佳地为2_5小时，更佳 地为3-4小时。一旦形成Grignard试剂，就从链烯基镁产生铜酸盐。铜酸盐形成的温度范围 为-100°c到0°C。优选的温度范围为-80°c到-20°c。最优选的温度范围为_75°C到_50°C。 优选的反应时间为30分钟到6小时，更佳地为45分钟到3小时。最佳反应时间为1到1. 5 小时。用本领域技术人员已知的方法分离如此形成的链烯。这些方法包括提取、蒸发 溶剂、蒸馏和结晶。较佳地，用10% EtOAc/己烷(EtOAc表示乙酸乙酯)作洗脱液，在硅胶 (Merck, 230-400目)上通过快速层析纯化该链烯。然后让链烯与氢化还原剂和极性、质子性溶剂反应得到C-9醇。优选的还原剂包 括氢化铝锂、硼氢化钠和L-selectride。更优选的还原剂是硼氢化钠和L-selectride。最 优选的还原剂是硼氢化钠。优选的溶剂包括甲醇、乙醇和丁醇。最优选的溶剂是甲醇。还 原在-100°C到23°C间的温度进行。优选的温度范围为-60°C到0°C。最优选的温度范围 为-45°C到-20°C。用本领域技术人员已知的方法分离得到的醇。这些方法包括提取、蒸发溶剂、蒸馏 和结晶。较佳地，用20% EtOAc/己烷作为洗脱液，在硅胶(Merck，230-400目)快速层析纯 化该醇。可如上所述保护得到的醇。在该过程中优选的甲硅烷基化剂包括叔丁基甲烷基甲 硅烷氯和三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷酯。最优选的甲硅烷基化剂是三氟甲磺酸叔丁基 二甲基甲硅烷酯。优选的碱包括三乙胺、三甲铵和2，6_ 二甲基吡啶。更优选的碱包括三乙 胺和2，6_ 二甲基吡啶。最优选的碱是2，6_ 二甲基吡啶。优选的溶剂包括卤化的烃类溶 剂，其中二氯甲烷是最优选的。反应宜在-ioo°c到100°C的温度进行，更优选的为-80°C到 80°C，最优选的-70°C到23°C。用本领域技术人员已知的方法分离得到的甲硅烷基化的化合物S lb。这些方法包 括提取、蒸发溶剂、蒸馏和结晶。较佳地，在用真空蒸馏后纯化甲硅烷基醚，得到化合物Sib。然后用在溶剂(可溶解锇和过碘酸钠)中的锇和过碘酸钠处理保护的醇。锇的优 选形式包括四氧化锇和锇酸钾。优选的溶剂系统包括1 1混合的乙酸和水以及1 1 2 混合的水、乙酸和THF。(THF表示四氢呋喃)。这种处理的结果为醛Sic。用本领域技术人员已知的方法分离化合物Sic。这些方法包括提取、蒸发溶剂、蒸 馏和结晶。较佳地，用20% EtOAc/己烷作为洗脱液，在硅胶(Merck，230-400目)上快速层 析纯化Sic。以Slc表示的关键中间体醛与多种不饱和链烯基阴离子亲核试剂反应，得到C-9 和C-Il保护的13，14- 二氢-前列腺素Fla衍生物。可以分离得到的化合物，但通常是用本领域技术人员已知的方法将其去保护，且 任选地在C-I操作在R1得到所需的酸衍生物。例如，将甲酯与胺或羟胺缩合，分别得到酰 胺或异羟肟酸化合物。在C-I如此操作后，分离化合物得到最终的13，14- 二氢-15-取代的-15-五去甲前列腺素Fla衍生物(式I)。以与式I所示的化合物类似的方法，可直接从中间体Slc制备式II所示的化合 物，其中替代合适的丙二烯阴离子。对丙二烯亲核试剂而言，反应宜在-80°C到0°C进行，较 佳地为-80°C到-20°C，最佳的是在-80°C到-40°C。对反应而言优选的碱包括正丁基锂、仲 丁基锂和叔丁基锂。最优选的碱是仲丁基锂。对此反应优选的溶剂是醚溶剂。优选的醚溶 剂包括乙醚和四氢呋喃。最优选的溶剂是四氢呋喃。对杂环亲核试剂而言，优选的溶剂包 括醚溶剂。更优选的溶剂包括乙醚、二丁醚和四氢呋喃。最优选的醚溶剂是四氢呋喃。分 离后，用本领域技术人员已知的方法进行类似的C-I操作和/或官能团的去保护。流程2 在流程2中，R\Y和X的定义如上。用醚溶剂中的硼氢化剂处理已保护的醇Slb (流 程1中的)，然后用合适的氧化剂氧化除去硼试剂，得到S2a化合物。优选的硼氢化剂包括 一氯硼烷-二甲基硫醚、二硼烷、硼烷-四氢呋喃和硼烷-二甲基硫醚。最优选的硼氢化 剂是硼烷-二甲基硫醚。优选的醚溶剂包括THF和乙醚。最优选的溶剂是THF。反应在 约-20°C到+30°C进行约1-24小时。优选的温度范围为约0°C到+20°C。然后用碱性过氧化 氢(参见“有机化学中的硼烷，，，H. C. Brown，Cornell University Press，Itahaca，NY 1972， 第321-325页)可以氧化地除去该反应的硼氢化的产物得到醇，然后可用本领域技术人员 已知的方法将其氧化成醛(W = H)或酸(W = 0H)。或者，通过用铬酸或Cr(VI)盐处理，将 硼氢化的产物直接氧化成醛或酸。这些盐包括氯铬酸吡啶鐺(PCC)和二氯铬酸吡啶鐺。参见 Brown，H. C. ；Kulkarni, Rao 和 Patil，Tetrahedron, 1986,45515。优选的方法是室温用 PCC的二氯甲烷溶液处理硼氢化的产物。这些操作的结果是S2a的化合物。用本领域技术人员已知的方法分离S2a的化合物。这些方法包括提取、蒸发溶 剂、蒸馏和结晶。较佳地，在硅胶(Merck，230-400目)快速层析纯化S2a，用20% EtOAc/ 己烷作为洗脱液(如果W = OH则要加入0. 1 %乙酸)。以S2a表示的关键中间体醛与多种不饱和的碳亲核试剂反应，得到式III的C_9 和C-Il保护的13，14-二氢-16-四去甲前列腺素Fla衍生物。对芳族和杂芳族亲核试剂而言，反应宜在_80°C到0°C进行，更佳地为-80 °C 到_20°C，特别优选的为-80°C到-40°C。该反应优选的碱包括正丁基锂、仲丁基锂、二异丙 基氨化锂和叔丁基锂。最优选的碱是正丁基锂。该反应优选的溶剂是醚溶剂。优选的溶剂 包括乙醚和四氢呋喃。最优选的溶剂是四氢呋喃。对杂环亲核试剂而言，优选的溶剂包括 醚溶剂。更优选的醚溶剂包括乙醚、二丁醚和四氢呋喃。最优选的醚溶剂是四氢呋喃。可以分离得到的醇，但通常是将其氧化成粗分离物。将苄型醇氧化成苄型酮是本 领域已知的。进行该反应的优选试剂包括KMn04、MnO2、铬酸、Jone' s试剂、Collins试剂 和PCC。最优选的方法是室温在二氯甲烷中用PCC氧化约4小时。通过柱层析分离酮，用 20%己烷/乙酸乙酯作为溶剂。然后用标准条件除去酯。参见Grene和Wuts，“有机合成中 的保护基团”，ffileylnterscience, NY第224-276页。然后用2. 1当量强氮碱处理该游离 酸，使酸及与苄型酮相邻的位置去质子化。这种碱包括LDA。将此烯醇与过氧化试剂反应， 该过氧化试剂能氧化化合物从而产生α-羟基酮。这些试剂包括间-氯过苯甲酸、二甲基 双氧环丙烷、Davis试剂和过乙酸。分离得到粗产物或除去残留的保护基团。此时，可进行 C-I上的酸的操作。例如，用本领域技术人员已知的方法进行再酯化、形成酰胺、异羟肟酸或 磺酰胺，得到式III的化合物。从中间体S2b可制得式IV所示的化合物。此时，用多种醇和胺易实现游离酸的缩 合，无论是通过偶联剂如二环己基碳二亚胺(“DCC”)或是通过用例如草酰氯活化酸。随 后，如Greene和Wut s在“有机合成中的保护基团”，WileyInterscience，NY第224-276页 所述选择性地除去甲酯，并用与上述相同的方法氧化酯烯醇化物制备酮中间体。类似地，如 上所示，除去残留的保护基团，并对C-I进行操作，得到式IV的化合物。流程3 在流程3中，R1和Z如上所述。用锇盐和任选的催化剂再氧化剂(宜为N-甲基吗 啉N-氧化物(“ΝΜ0”))处理链烯Slb (流程1的)，得到二醇。然后通过提取和硅胶层析纯 化分离此二醇。然后将此二醇选择性地氧化成α羟基醛。这可以由多种途径实现。例如， 可以使用选择性氧化剂，如DMSO-草酰氯。(“DMS0”表示二甲基亚砜)。或者，可以选择性 地保护伯醇，然后选择性地保护仲醇，再除去伯醇上的保护并如流程II所示氧化醇。但优 选的方法是加入ο-溴-苄基溴保护基团，这种保护基团可以通过三丁基氢化锡等试剂的同 时氧化除去。用这种方法得到S3a类化合物，其中Q = H。该步骤后，用胺缩合醛，形成S3b 类的亚胺。如流程I和II所示除去保护基团并操作C-1，得到式V的化合物。表2 合适的PGF的实例
可用常规的有机合成制备表2中的PGF。优选的合成是反应流程4。流程4 在流程4中，R1、R2、X和Z的定义如上。作为流程4的起始物以S4a所示的 7 (3-(R)-羟基-5-氧代-1-环戊烯-1-基)庚酸甲酯是购得的(如从SumitomoChemical
Cayman Chemical )。用合适的保护基团保护7(3_(R)_羟基-5-氧代-1-环戊烯-1-基)庚酸甲酯 (S4a)的C11醇。最优选的保护基团是甲硅烷基。在上述的流程4中，7 (3-(R)_羟基-5-氧 代-1-环戊烯-1-基)庚酸甲酯(S4a)与溶剂中的甲硅烷基化剂和碱反应，该溶剂能让甲娃 烧基化进行。优选的甲硅烷基化剂包括叔丁基二甲基甲硅烷基氯和三氟甲基磺酸叔丁基二 甲基甲硅烷酯。最优选的甲硅烷基化剂是三氟甲基磺酸叔丁基二甲基甲硅烷酯。优选的碱 包括三乙胺、三甲铵和2，6_ 二甲基吡啶。更优选的碱包括三乙胺和2，6_ 二甲基吡啶。最 优选的碱是2，6_ 二甲基吡啶。优选的溶剂包括卤化的烃类溶剂，其中二氯甲烷是最优选的溶剂。反应宜在-100°C到100°C进行，更佳地为-80°c到80°C，最优选的是_70°C到23°C。用本领域技术人员已知的方法分离得到的甲硅烷基化化合物。这些方法包括提 取、蒸发溶剂、蒸馏和结晶。较佳地，在真空蒸馏分离后纯化甲硅烷基醚。然后将甲硅烷基化的化合物与通过合适的链烯溴的Grignard形成产生的碳阴离 子反应，如以下参考文献所述H. 0. House等人，“碳阴离子的化学制备有机铜酸盐锂的便 利前体”，J. Org. Chem.第40卷(1975)，第1460-69页；和P. Knochel等人，“作为有效和选择 性a’/d’多位点试剂的锌和铜卡宾体”，J. Amer. Chem. Soc.第111卷(1989)，第6474-76页。 优选的链烯基溴包括4_溴-1- 丁烯、4-溴-1- 丁炔、4-溴-2-甲基-1- 丁烯和4-溴-2-乙 基-1-丁烯。最优选的链烯溴是4-溴-1-丁烯。优选的溶剂包括醚溶剂，其中乙醚和四氢 呋喃是优选的。最优选的溶剂是四氢呋喃。在100°C-23°C，较佳地为85°C-30°C，最优选 的是在75°C _65°C，让Grignard试剂形成。反应时间宜为1_6小时，较佳地为2_5小时，更 佳地为3-4小时。一旦形成Grignard试剂，就从链烯基镁产生铜酸盐。铜酸盐形成的温度范围 为-100°c到0°C。优选的温度范围为-80°c到-20°c。最优选的温度范围为_75°C到_50°C。 优选的反应时间为30分钟到6小时，更佳地为45分钟到3小时。最佳反应时间为1到1. 5 小时。用本领域技术人员已知的方法分离如此形成的链烯。这些方法包括(但不限制 于)提取、蒸发溶剂、蒸馏和结晶。较佳地，用10% EtOAc/己烷作洗脱液，在硅胶(Merck， 230-400目)上通过快速层析纯化该链烯。然后让链烯与氢化还原剂和极性、质子溶剂反 应得到C-9醇。优选的还原剂包括氢化铝锂、硼氢化钠和L-selectride。更优选的还原剂 包括硼氢化钠和L-selectride。最优选的还原剂是硼氢化钠。优选的溶剂包括甲醇、乙 醇和丁醇。最优选的溶剂是甲醇。还原在-100°C到23°C间的温度进行。优选的温度范围 为-60°C到0°C。最优选的温度范围为-45°C到-20°C。用本领域技术人员已知的方法分离得到的醇。这些方法包括(但不限制于)提取、 蒸发溶剂、蒸馏和结晶。较佳地，用20% EtOAc/己烷作为洗脱液，在硅胶(Merck，230-400 目)快速层析纯化该醇。如上所述保护得到的醇。在该过程中优选的甲硅烷基化剂包括叔丁基甲烷基甲硅 烷氯和三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷酯。最优选的甲硅烷基化剂是三氟甲磺酸叔丁基二 甲基甲硅烷酯。优选的碱包括三乙胺、三甲铵和2，6_ 二甲基吡啶。更优选的碱包括三乙胺 和2，6_ 二甲基吡啶。最优选的碱是2，6_ 二甲基吡啶。优选的溶剂包括卤化的烃类溶剂，其 中二氯甲烷是最优选的。反应宜在-100°C到100°C的温度进行，更优选的为-80°C到80°C， 最优选的_70°C到23°C。用本领域技术人员已知的方法分离得到的甲硅烷基化的化合物。这些方法包括 (但不限制于)提取、蒸发溶剂、蒸馏和结晶。较佳地，在用真空蒸馏后纯化甲硅烷基醚。然后用在溶剂(可溶解锇和过碘酸钠)中的锇和过碘酸钠处理保护的醇。锇的优 选形式包括四氧化锇和锇酸钾。优选的溶剂系统包括1 1混合的乙酸和水以及1 1 2 混合的水、乙酸和THF。这种处理的结果为醛S4b。用本领域技术人员已知的方法分离化合物S4b。这些方法包括(但不限制于) 提取、蒸发溶剂、蒸馏和结晶。较佳地，用20% EtOAc/己烷作为洗脱液，在硅胶(Merck，230-400目)上快速层析纯化S4b。以S4b表示的关键中间体炔与多种不饱和碳亲核试剂反应，得到以式S4c表示的 C-9和C-Il保护的13，14- 二氢-16-四去甲前列腺素Fla衍生物。对炔亲核试剂而言，反应宜在_80°C到0°C进行，较佳地为_80°C到-20°C，最佳的 是在-80°C到-40°C。对反应而言优选的碱包括正丁基锂、仲丁基锂、叔丁基锂和二异丙基 氨化锂(“LDA”)。对此反应优选的溶剂是醚溶剂。优选的溶剂包括乙醚和四氢呋喃。最 优选的溶剂是四氢呋喃。对杂环亲核试剂而言，优选的溶剂包括醚溶剂。更优选的溶剂包 括乙醚、二丁醚和四氢呋喃。最优选的醚溶剂是四氢呋喃。然后用本领域技术人员已知的方法将S4c所示的化合物去保护，并分离得到以式 VI所示的13，14- 二氢-15-取代的-15-五去甲前列腺素Fla衍生物。可以用本领域技术人员已知的方法，从以S4c所示的C-9和C-Il保护的13，14-二 氢-16-四去甲前列腺素Fla衍生物直接制备式VII所示的化合物。例如，用胺或羟胺缩合 Sc4的甲酯，得到式VII所示的化合物。用本领域技术人员已知的方法分离这些化合物。这 些方法包括提取、蒸发溶剂、蒸馏和结晶。适用于成分A)的具有如下结构的PGF实例包 括 氯前列醇(前列氯醇钠)、氟前列醇(前列氟醇钠)、噻前列素、a -前列醇、地前 列酯、氟氧前列素、9-a Ul-a、15-a -三羟基-16-(3-氯苯氧基)-ω -四去-前列_4_顺 式-13-反式-二烯酸、latanoprost和它们的类似物；和13，14- 二氢-16- ((3-三氟甲基) 苯氧基)-16-四去甲前列腺素F1 a、17- ((3-三氟甲基)苯基)-17-三去-前列腺素F2a及 其类似物、13，14_ 二氢-18-噻吩基-18-二去甲前列腺素Fla和它们的类似物。在“二十烷 类的CRC手册前列腺素及其相关脂类”，第I卷，化学和生物活性状况B部分，由Anthony L.Willis 编辑，CRC Press, Boca Raton，表 4，第 80-97 页(1987)中公开了其它 PGF，本文 将其纳入作为参考。本发明的优选PGF对FP受体与兴奋前列腺素受体的选择性比例为1 10，优选 1 20，更优选的为1 50。本发明的组合物本发明还涉及治疗脱发的组合物。“治疗脱发”指制止和/或逆转脱发以及促进毛 发生长。本发明的组合物包括成分A)以上所述的PGF和成分B)载体。本发明的组合物还 可包含成分C) 一种或多种任选地活性增强剂。本发明的组合物可以是药物或化妆品组合物，用于脱发的治疗或预防。使用标 准药物制齐Ll方法，如 Remington’ s Pharmaceutical Science，MackPublishing Company,Easton, PA(1990)中公开的那些方法。本发明的组合物还包含载体成分B)。“载体”指一种或多种适用于给予哺乳动物 的相容物质。载体包括固态或液态稀释剂、水溶助长剂(hydrotope)、表面活性剂和胶囊材 料。“相容”指组合物的成分能与PGF彼此混合，以在常规使用条件下不发生降低组合物效 力的相互作用的形式。载体必须有足够高的纯度且毒性也要足够低，使它们适用于给予待 治疗的哺乳动物。载体可能是惰性的，或具有药物益处和/或化妆品益处。成分B)的选择取决于成分A)PGF要施用的途径和组合物的形式。组合物可以是 多种形式，如适用于全身施用的(如口服、直肠给药、鼻内给药、舌下给药、颊部给药或肠胃 外给药)或局部施用(如在皮肤、眼睛的局部施用，脂质体输送体系或离子电渗作用)。优 选的是将药物局部施用于所需生长毛发的位置。全身施用的载体通常包括一种或多种选自以下的成分a)稀释剂、b)润滑剂、c) 粘合剂、d)分散剂、e)色素、f)调味剂、g)加甜剂、h)抗氧剂、j)防腐剂、k)助流剂、m)溶 剂、η)悬浮剂、ο)表面活性剂和它们的组合等。成分a)是稀释剂。适合的稀释剂包括糖，如葡萄糖、乳糖、右旋糖和蔗糖；多元 醇，如丙二醇；碳酸钙；碳酸钠；甘油；甘露醇；山梨糖醇和麦芽糊精。成分b)是润滑剂。适合的润滑剂的实例为固态润滑剂，包括二氧化硅、滑石粉、硬 脂酸及其镁盐和钙盐、硫酸钙；和液态润滑剂，如聚乙二醇和植物油如花生油、棉籽油、芝麻 油、橄榄油、玉米油和可可豆油。成分c)是粘合剂。适合的粘合剂包括聚乙烯吡咯烷酮；硅酸铝镁；淀粉，如玉米 淀粉、马铃薯淀粉；明胶；黄蓍胶；和纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、 甲基纤维素、微晶纤维素和羟丙基甲基纤维素；卡波姆；聚烯吡酮(providone)、阿拉伯树 胶、胍尔豆胶和黄原胶。成分d)是分散剂。适合的分散剂包括琼脂、海藻酸及海藻酸钠、泡腾混合物、交 联羧甲纤维素、聚乙烯聚吡咯烷酮、羧甲基淀粉钠、淀粉甘醇酸钠、粘土和离子交换树脂。成分e)是色素，如FD&C染料。成分f)是调味剂，如薄荷醇、胡椒薄荷和水果香精。成分g)是调味剂，如糖精和阿斯巴特。成分h)是抗氧剂，如丁基化的羟基苯甲醚、丁基化的羟基甲苯和维生素E。成分j)是防腐剂，如苯酚、对羟基苯甲酸的烷基酯、苯甲酸及其盐、硼酸及其盐、 山梨酸及其盐、三氯叔丁醇(chorbutanol)、苯甲醇、硫柳汞、乙酸苯汞和硝酸苯汞、硝甲酚 汞、苯扎氯铵、氯化十六烷吡啶、对羟苯甲酸甲酯和对羟苯甲酸丙酯。特别优选的是苯甲酸 的盐、氯化十六烷吡啶、对羟基苯甲酸甲酯和对羟苯甲酸丙酯和苯甲酸钠。成分k)是助流剂，如二氧化硅。成分m)是溶剂，如水、等渗盐水、油酸乙酯、醇如乙醇、甘油、二醇(如聚丙二醇和 聚乙二醇)和缓冲液(如磷酸盐、乙酸钾、硼酸、碳酸、磷酸、丁二酸、苹果酸、酒石酸、柠檬 酸、乙酸、苯甲酸、乳酸、甘油酸、葡糖酸、戊二酸和谷氨酸)。成分η)是悬浮剂。合适的悬浮剂包括FMC Corporation of Philadelphia, Pennsylvania 的AVICEL RC-591 和海藻酸钠。成分ο)是表面活性剂，如卵磷脂、聚山梨醇80、月桂基硫酸钠、聚氧乙烯去水山梨醇糖脂肪酸酯、聚氧乙烯单烷基醚、蔗糖单酯、羊毛脂酯和羊毛脂醚。合适的表面活性剂 是本领域己知的且是可以购得的，如Atlas PowderCompany of Wilmington, Delaware的 TWEENS 。用于胃肠外给药的组合物通常含有A)0. 1-10%的PGF和B)90-99. 9%的载体，该 载体含有a)稀释剂，和m)溶剂。优选组分a)是丙二醇而m)是乙醇或油酸乙酯。用于口服的组合物可以有多种剂型。例如，固态形式包括片剂、胶囊、粒剂和粉状 制剂。这些口服剂型包含安全有效量(通常为至少5%，宜为25%-50%)的A)PGF。口服 剂型组合物还包含至多95% (宜为50-75% )作为载体的B)。片剂可以是压制的、研制的、肠溶衣的、糖涂层的、膜涂层的或复压片。片剂通常包 含A) PGF和B)载体，载体包括选自以下的成分a)稀释剂、b)润滑剂、c)粘合剂、d)分散 剂、e)色素、f)调味剂、g)加甜剂、k)助流剂和它们的组合。优选的稀释剂包括碳酸钙、碳 酸钠、甘露醇、乳糖和纤维素。优选的粘合剂包括淀粉、明胶和蔗糖。优选的分散剂包括海 藻酸和交联羟甲基纤维素。优选的润滑剂包括硬脂酸镁、硬脂酸和滑石粉。优选的色素是 FD&C染料(用于增加外观)。咀嚼片宜包含g)加甜剂，如阿斯巴特和糖精，或f)调味剂如 薄荷醇、薄荷和水果香精。胶囊(包含缓释和持续释放制剂)通常包含A) PGF和B)载体，载体包括一种或多 种在上述含明胶的胶囊中所公开的稀释剂。粒剂通常包含A)PGF，还宜包含k)助流剂，如二 氧化硅以改善其流动特性。口服制剂中载体的选择取决于次要考虑因素如口味、成本及存储稳定性，这对本 发明的目的而言并不关键。本领域技术人员无需进行试验就可最佳化合适的成分。可用常规方法将固态组合物涂层，通常用PH或时控的涂层，从而能在肠胃道中的 不同时间释放PGF以延长所需的作用。通常涂层包含一种或多种选自以下的成分苯二 甲酸醋酸纤维素、苯二甲酸聚醋酸乙烯酯、苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、丙烯 酸树脂如EUDRAGIT 涂层(可从 Rohm & HaasG. M. B. H. of Darmstadt，Germany 购得)、 蜡、虫胶、聚乙烯吡咯烷酮和其它可购得的膜涂层制剂如Dri-Klear (Crompton & Knowles Corp. , Mahwah, NJ 制备)或0PADRY (由 Colorcon, Inc. , of West Point, Pennsylvania 制备)。口服给药的组合物还可以是液态形式。例如，合适的液态形式包括水溶液、乳剂、 悬浮液、由非泡腾的粒剂重建的溶液、由非泡腾粒剂重建的悬浮液、由泡腾粒剂重建的泡腾 剂、酏剂、酊剂、糖浆等。液态口服施用的组合物通常包含A)PGF和B)载体，载体包含选自 以下的成分=a)稀释剂、e)色素和f)调味剂、g)加甜剂、j)防腐剂、m)溶剂、η)悬浮剂、和 ο)表面活性剂。糖浆液态组合物宜包含一种或多种选自以下的成分e)色素、f)调味剂和 g)加甜剂。可用于进行向对象全身送递目的化合物的其它组合物包括舌下、颊和鼻剂型。这 些组合物通常包含一种或多种可溶性填充成分，如a)稀释剂(包括蔗糖、山梨糖醇和甘露 醇)、和c)粘合剂(如阿拉伯树胶、微晶纤维素、羧甲基纤维素和羟丙基甲基纤维素)。这 些组合物还可包含b)润滑剂、e)色素、f)调味剂、g)加甜剂、g)抗氧剂和k)助流剂。本发明的组合物还可包含成分C)任选的活性增强剂。成分C)宜选自i)(除PGF 以外的)毛发生长刺激剂和ii)渗透增强剂。
成分i)是任选的毛发生长刺激剂。成分i)可列举为血管扩张剂、抗雄激素、环孢 菌素、环孢菌素类似物、抗菌剂、抗炎药、甲状腺激素、甲状腺激素衍生物和甲状腺激素类似 物、非选择性前列腺素促效剂或拮抗剂、类视色素、三萜烯和它们的组合等。“非选择性前列 腺素”促效剂和拮抗剂与成分A)不同，因为它们不会选择性激活FP受体，而且它们可能会 激活其它受体。血管扩张剂如钾通道促效剂(包括米诺地尔和米诺地尔衍生物，如阿米昔 尔(aminexil))以及在美国专利 No. 3，382，247、5，756，092、5，772，990、5，760，043、 5，466，694,5, 438，058,4, 973，474中所公开的那些和克罗吗宁(cromakalin)和二氮嗪可 用作组合物中的任选地毛发生长刺激剂。合适的抗雄激素的实例包括5-α-还原酶抑制剂如非那司提和美国专利 No. 5，516，779和Nane等人在癌症研究58“C17, 20-裂解酶和5 α -还原酶的某些新型抑制 剂的体外和体内作用以及它们在治疗前列腺癌中的潜在用途”中所公开的那些，以及乙酸 环丙孕酮、壬二酸及其衍生物和那些在美国专利No. 5，480，913中所公开的化合物，氟他米 特和那些在美国专利No. 5，411，981,5, 565，467和4，910，226中所公开的化合物。抗菌剂包括硫化硒、酮康唑、三氯卡班、三氯生、硫氧吡啶锌、伊曲康唑、亚细亚 酸、扁柏酚、米匹罗星(mipirocin)和EPA 0，680，745中所公开的那些、盐酸克林西星 (clinacycin)、过氧苯甲酰、过氧化苄和米诺环素。合适的抗炎药的实例包括糖皮质激素(如氢化可的松、糠酸莫米松和氢化泼 尼松)、非留类抗炎药(包括环氧酶抑制剂或脂肪氧化酶，如美国专利No. 5，756，092中 所公开的那些和苄达明)、水杨酸和那些在ΕΡΑ0，770，399(1997年5月2日出版)、WO 94/06434 (1994年3月31日出版)和FR2，268，523 (1975年11月21日出版)中所公开的 化合物。3，5，3’ -三碘甲腺原氨酸是合适的甲状腺激素的实例。合适的非选择性前列腺素促效剂和拮抗剂的实例包括那些在 W098/33497 (Johnstone, 1998 年 8 月 6 日出版)、W0 95/11003 (St jernschantz, 1995 年 4 月 27 日出版)、JP 97-100091 (Ueno)和 JP 96-134242 (Nakamura)中所公开的化合物。合适的类视色素包括异维甲酸、依曲替酸和他佐罗汀。成分i)的其它任选的毛发生长刺激剂包括苯扎氯铵、苄索氯胺、苯酚、雌二醇、 氯苯吡胺马来酸、叶绿酸衍生物、胆固醇、水杨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、红椒酊剂、烟酸苄 酯、D，L-薄荷醇、薄荷油、泛酸钙、泛醇、蓖麻油、氢化泼尼松、间苯二酚、蛋白激酶C的化学 活化剂、葡糖胺聚糖链细胞内吸收的抑制剂、糖苷酶活性的抑制剂、葡糖胺聚糖酶抑制剂、 焦谷氨酸酯、己糖酸(hexosaccharic acid)或酰化的己糖酸、芳基取代的乙烯、N-酰化的 氨基酸、类黄酮(flavinoid)、子囊霉素衍生物和类似物、组胺拮抗剂(如盐酸苯海拉明)、 三萜烯(如齐墩果酸和熊果酸)和那些在美国专利No. 5，529，769,5, 468，888,5, 631，282 和 5，679，705、JP 10017431、WO 95/35103、JP 09067253、WO 92/09262、JP 62093215 和JP 08193094 ；皂角苷，如EP 0, 558，509 (Bonte等人，1993年9月8日出版)和WO 97/01346 (Bonte等人，1997年1月16日出版)中公开的那些；蛋白多糖酶或葡糖胺聚糖 酶抑制剂，如美国专利No. 5，015，470,5, 300，284和5，185，325中公开的；雌激素促效剂和 拮抗剂、假特林(pseudoterin)、细胞因子和生长因子刺激剂、类似物或抑制剂如白细胞介素1抑制剂、白细胞介素_6抑制剂、白细胞介素-10刺激剂、和肿瘤坏死因子抑制剂、维生 素如维生素D类似物和甲状腺激素拮抗剂、维生素B12类似物和泛醇、干扰素促效剂和拮抗 剂、醇酸如美国专利No. 5，550，158中公开的那些、二苯甲酮和乙内酰脲抗惊厥药如苯妥英 以及它们的组合。其它毛发生长刺激剂公开于JP 09-157，139 (Tsu ji等人，1997年6月17日 出版)；EP 0277455A1 (Mirabeau, 1988 年 8 月 10 日出版)；W0 97/05887 (CaboSoler 等人，1997年2月20日出版)；W0 92/16186 (Bonte等人，1992年3月13日出版)； JP 62-93215 (Okazaki 等人，1987 年 4 月 28 日出版)；美国专利 No. 4，987，150 (Kurono 等人，1991年1月22日出版)JP 29081 (Ohba等人，1992年10月15日出版)JP 05-286，835 (Tanaka 等人，1993 年 11 月 2 日出版)；FR 2，723，313 (Greff，1994 年 8 月2日出版)；美国专利No. 5. 015，470 (Gibson, 1991年5月14日出版)；美国专利 No. 5，559，092 (1996 年 9 月 24 日出版)；美国专利 No. 5，536，751 (1996 年 7 月 16 日出版)； 美国专利 No. 5，714，515 (1998 年 2 月 3 日出版 0 ；EPA 0，319，991 (1989 年 6 月 14 日出版)； EPA 0, 357, 630 (1988 年 10 月 6 日出版)；EPA 0, 573, 253 (1993 年 I2 月 8 日出版)；JP 61-260010 (1986年11月18日出版)；美国专利No. 5，772，990 (1998年6月30日出版)； 美国专利No. 5,053,410(1991年10月1日出版)；美国专利No. 4，761，401 (1988年8月2 日出版)。最优选的活性增强剂是米诺地尔和非那司提，其中地诺米尔是最优选的。成分ii)是可以加到全身给药的所有组合物中的渗透增强剂。组合物中成分ii) 的存在量通常为1-5%。渗透增强剂是实例包括2-甲基丙-2-醇、丙-2-醇、乙基-2-羟 基-丙酸酯、己-2，5-二醇、聚氧乙烯(2)乙基醚、二(2-羟丙基)醚、戊_2，4-二醇、丙酮、 聚氧乙烯(2)甲基醚、2-羟基丙酸、2-羟基辛酸、丙-1-醇、1，4_ 二噁烷、四氢呋喃、丁-1， 4_ 二醇、丙二醇二壬酸酯、聚氧丙烯15硬脂基醚、辛醇、油醇的聚氧乙烯酯、油醇、月桂醇、 己二酸二辛酯、己二酸二癸酯、己二酸二异丙酯、癸二酸二异丙酯、癸二酸二丁酯、癸二酸二 乙酯、癸二酸二甲酯、癸二酸二辛酯、辛二酸二丁酯、壬二酸二辛酯、癸二酸二苄酯、邻苯二 甲酸二丁酯、壬二酸二丁酯、肉豆蔻酸乙酯、壬二酸二甲酯、肉豆蔻酸丁酯、琥珀酸二丁酯、 邻苯二甲酸盐二癸酯、油酸癸酯、己酸乙酯、水杨酸乙酯、棕榈酸异丙酯、月桂酸乙酯、壬酸 2-乙基-己酯、异硬脂酸异丙酯、月桂酸丁酯、苯甲酸苄酯、苯甲酸丁酯、月桂酸己酯、癸酸 乙酯、辛酸乙酯、硬脂酸丁酯、水杨酸苄酯、2-羟基丙酸、2-羟基辛酸、二甲基亚砜、N，N-二 甲基乙酰胺、N，N-二甲基甲酰胺、2-吡咯烷酮、1-甲基-2-吡咯烷酮、5-甲基-2-吡咯烷 酮、1，5- 二甲基-2-吡咯烷酮、1-乙基-2-吡咯烷酮、磷化氢氧化物、糖酯、四氢糠醇、脲、二 乙基-间-甲苯甲酰胺、1-十二烷基氮杂环庚-2-酮、ω三脂肪酸和鱼油以及它们的组合。在本发明的一优选实施例中，局部施用PGF。可以局部施用于皮肤的局部化合物可 以是任何形式，包括溶液、涂油、乳膏、油膏、凝胶、洗液、香波、免洗或要清洗的护发素、乳 液、清洗剂、保湿剂、喷雾、皮肤贴片等。局部用的组合物包含上述的成分A)PGF和成分B) 载体。局部用的组合物的载体宜协助PGF渗透入皮肤，到达毛囊的环境。局部用的组合物 还宜包含C) 一种或多种上述任选地活性增强剂。局部用的组合物中各成分的实际量取决于多种因素。成分Α)的用量取决于所选 用的PGF的IC5Q。"IC5tl”指抑制50%的浓度。加到局部用的组合物的成分A)的量为
IC5tlXlO-2 彡成分 A)的％彡 IC5。X1(T3，其中IC5tl以纳摩尔单位表示。例如，若PGF的IC5tl为InM，则成分A)的量为 0. 001-0. 01%o 若 PGF 的 IC50 为 IOnM,则成分 A)的量为 0. 01-0. 若 PGF 的 IC50 为 ΙΟΟηΜ，则成分A)的量为0. 1-1.0%。若PGF的IC5tl为ΙΟΟΟηΜ，则成分A)的量为1.0-10%， 宜为1.0-5%。如果成分A)的量超出了上述范围(即高于或低于)，则可能降低治疗的效 力。可以按以下的参考例1的方法计算IC5(I。无需试验，本领域技术人员可计算IC5Q。局部用的组合物还宜包含1-20%成分C)，且成分B)的量应足以使成分A)、B)和 C)的总量到达100%。与PGF联用的B)载体的量应足以提供实际量的组合物以给予单位剂 量化合物。配制用于本发明方法的剂型的方法和组合物在以下文献中有描述“现代药学” 第 9 和 10 章，Banker & Rhodes 编辑(1979) ；Lieberman 等人，“药物剂型片剂” (1981)； 和Ansel，“药物剂型导论”，第2版(1976)。成分B)载体可包含单种成分或两种或多种成分的组合。在局部用的组合物中，成 分B)是局部载体。优选的局部载体包括一种或多种选自以下的成分水、醇、芦荟胶、尿囊 素、甘油、维生素A和E油、矿物油、丙二醇、聚丙二醇-2肉豆寇基丙酸酯、异山梨酸二甲酯 和它们的组合等。更优选的载体包括丙二醇、异山梨酸二甲酯和水。局部载体可以包含一种或多种选自以下的成分q)乳化剂、r)推进剂、S)溶剂、t) 润湿剂、U)增稠剂、V)粉末和W)香精，以补充或替代上述优选的局部载体成分。本领域技 术人员无需试验就能最佳化局部用的组合物的载体成分。成分q)是乳化剂。局部用的组合物中成分q)的量通常为5_95%。适合的乳化剂 包括十八烷醇、单蓖麻酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯、丙-1，2-二醇、丁-1，3-二醇、貂油、鲸腊 醇、异硬脂酸异丙酯、硬脂酸、棕榈酸异丁酯、硬脂酸异鲸腊酯、油醇、月桂酸异丙酯、月桂酸 己酯、油酸癸酯、十八烷-2-醇、异鲸腊醇、棕榈酸鲸腊酯、癸二酸二 -正-丁酯、肉豆蔻酸异 丙酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸异丙酯、硬脂酸丁酯、聚乙二醇、三甘醇、羊毛脂、芝麻油、椰子 油、花生油、蓖麻油、乙酰化的羊毛脂醇、矿脂、矿物油、肉豆蔻酸丁酯、异硬脂酸、棕榈酸、亚 油酸异丙酯、乳酸月桂酯、乳酸肉豆蔻酯、油酸癸酯、肉豆蔻酸肉豆蔻酯、聚二甲基硅氧烷和 它们的组合。优选的乳化剂包括十八烷醇和聚二甲基硅氧烷。成分r)是推进剂。局部用的组合物中成分r)的量通常为5_95%。适合的推进剂 包括丙烷、丁烷、异丁烷、二甲醚、二氧化碳、一氧化二氮和它们的组合。成分s)是溶剂。局部用的组合物中成分s)的量通常为5-95%。适合的溶剂包括 水、乙醇、二氯甲烷、异丙醇、蓖麻油、乙二醇单乙醚、二乙二醇单丁醚、二乙二醇单乙醚、二 甲基亚砜、二甲基甲酰胺、四氢呋喃和它们的组合。优选的溶剂是乙醇。成分t)是润湿剂。局部用的组合物中成分t)的量通常为5-95%。适合的润湿剂 包括甘油、山梨糖醇、2-吡咯烷酮-5-羧酸钠、可溶性胶原、邻苯二甲酸二丁酯、明胶和它们 的组合。优选的润湿剂包括甘油。成分u)是增稠剂。局部用的组合物中成分U)的量通常为0-95%。成分ν)是粉末。局部用的组合物中成分ν)的量通常为0-95%。适合的粉末包括 白垩、滑石粉、漂白土、白陶土、淀粉、树胶、胶质二氧化硅、聚丙烯酸钠、四烷基铵绿土、三烷 基芳基铵绿土、化学改性的硅酸镁铝、有机改性的蒙脱石粘土、水合硅酸铝、二氧化硅粉末、 聚羧乙烯、羧甲基纤维素钠、单硬脂酸乙二醇酯和它们的组合。
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成分w)是香精。局部用的组合物中成分w)的量通常为0.001-0.5%，宜为 0. 001-0. 1%。成分C)任选的活性增强剂如上所述。可以将任何i)毛发生长刺激剂和ii)渗透 增强剂加到局部用的组合物中。较佳地，局部用的组合物包含0.01-15%成分i)任选的毛 发生长刺激剂。更优选的是，组合物包含0. 1-10%成分i)，最优选的是包含0.5-5%成分 i)。较佳地，局部用的组合物包含1-5%成分ii)。在本发明的另一实施例中，用常规方法制备施用于眼睛的局部药物组合物。施用 于眼睛的局部药物组合物包含A)PGF、B)载体(如纯水)和一种或多种选自以下的成分y) 糖，如葡聚糖，尤其是葡聚糖70 ；ζ)纤维素或其衍生物；aa)盐；bb)EDTA 二钠(乙二胺四乙 酸二钠)；和cc) pH调节添加剂。适合施用于眼睛的局部药物组合物中的成分ζ)纤维素衍生物的实例包括羧甲基 纤维素钠、乙基纤维素、甲基纤维素和羟丙基甲基纤维素。羟丙基甲基纤维素是优选的。适合施用于眼睛的局部药物组合物中的成分aa)盐的实例包括氯化钠、氯化钾和 它们的组合。cc) pH调节剂的实例包括HCl或NaOH，其存在量足以将施用于眼睛的局部药物组 合物的PH调节至7. 2-7.5。本发明还涉及使毛发变深、变密和逆转毛发泛灰的方法。这种方法包括将局部用 的组合物施用于毛发部位的皮肤和/或毛发来治疗脱发。例如，可将局部用的组合物施用 于长头发的头皮或睫毛上。这种局部用的组合物可以是例如用上述方法制备的化妆品组合 物。可施用于睫毛的组合物的实例是睫毛膏。可在本领域已知的睫毛膏组合物中(例如美 国专利No. 5，874，072中所公开的睫毛膏，本文将其纳入作为参考)添加前列腺素。睫毛膏 还包含dd)水溶性材料、ee)水溶性成膜聚合物、ff)蜡、ο)表面活性剂、gg)色素和s)溶 剂。成分dd)是水不溶性材料，选自丙烯酸共聚物；苯乙烯/丙烯酸/甲基丙烯酸共 聚物；丙烯酸乳胶；苯乙烯/丙烯酸酯共聚物乳胶；聚乙酸乙烯酯乳胶；乙酸乙烯酯/乙烯 共聚物乳胶；苯乙烯/ 丁二烯共聚物乳胶；聚氨酯乳胶；丁二烯/丙烯腈共聚物乳胶；苯乙 烯/丙烯酸酯/丙烯腈共聚物乳胶和它们的混合物，其中丙烯酸酯共聚物和苯乙烯/丙烯 酸酯/甲基丙烯酸酯共聚物还可包含氨、丙二醇、防腐剂和表面活性剂。成分ee)是水溶性、成膜聚合物。成分ee)选自乙烯醇/聚(烯氧基)丙烯酸 酯；乙烯醇/乙酸乙烯酯/聚(烯氧基)丙烯酸酯；聚氧乙烯；聚氧丙烯；丙烯酸酯/辛烷 基_丙烯酰胺共聚物和它们的混合物。成分 )是蜡。“蜡”指低熔点的有机混合物或高分子量的、室温为固态的化合物， 在组合物中通常与脂肪和油类似，但它们不含甘油酯。其中一些是烃类，其它则是脂肪酸和 醇的酯。用于本发明的蜡选自动物蜡、植物蜡、矿物蜡、天然蜡的各种馏分、合成蜡、石油 蜡、乙烯型聚合物、烃类(如Fischer-Tropsch蜡)、有机硅蜡和它们的混合物，其中蜡的熔 点在55-100°C之间。成分ο)是如上所述的表面活性剂。睫毛膏中的成分ο)宜为HLB为3-15的表 面活性剂。合适的表面活性剂包括那些在C. T. F. A. Cosmetic IngredientHandbook,第 587-592(1992) ；Remington's Pharmaceutical Science，第 15版，第335-337页(1975)；和McCutcheon’s,第 1 卷，Emulsifiers & Detergents,North American Edition,第 236-239 页(1994)中公开的表面活性剂。成分gg)是色素。适合的色素包括无机色素、有机沉淀染料、珠光颜料和它们的 混合物。可用于本发明的无机色素包括金红石或锐钛矿二氧化钛(以颜色指数编码的参 考号为CI 77，891)；黑、黄、红和棕色氧化铁(编码的参考号为CI 77，499、77，492和77， 491)；锰紫(Cl 77，742)；群青(Cl 77，007)；三氧化二铬(Cl 77，288)；氢氧化铬(Cl 77， 289)；和铁蓝(ferric blue) (CI77，510)和它们的混合物。可用于本发明的有机染料和沉淀染料包括选自以下的染料D&C红No. 19(CI45， 170)、D&C 红 No9(CI 15，585)、D&C 红 No. 21 (Cl 45，380)、D&C 橙 No. 4 (Cl 15，510)、D&C 橙 No. 5 (Cl 45，370)、D&C 红 No. 27 (Cl 45，410)、D&C 红 No. 13 (Cl 15，630)、D&C 红 No. 7 (Cl 15，850)、D&C红No. 6(CI 15，850)、D&C黄No. 5(Cl 19，140)、D&C红No. 36(Cl 12,085),D&C 橙 No. 10 (CI45，425)、D&C 黄 No. 6 (Cl 15，985)、D&C 红 No. 30 (Cl 73，360)、D&C 红 No. 3 (Cl 45,430)和以胭脂虫红为基础的染料或沉淀染料(Cl 75,570)和它们的混合物。可用于本发明的珠光颜料包括选自以下的珠光颜料白色珠光颜料，如用氧化钛、 氯氧化铋包涂的云母；有色珠光颜料，如氧化铁包涂的钛云母、铁蓝、氧化锆等包涂的钛云 母、用选自上述的有机颜料以及氯氧化铋包涂的钛云母和它们的混合物。成分s)是如上所述的溶剂，优选水。添加到睫毛膏中的A)PGF的量如上局部用的组合物所述。还可以脂质体送递系统的形式施用PGF，如单层小泡、单层大泡和多层小泡。可以 由多种磷脂(如胆固醇、硬脂胺或卵磷脂)制成脂质体。局部送递本发明化合物的优选制剂 使用以下文献所述的脂质体=Dowton等人，“脂质体组合物对局部送递胶囊化的环孢菌素A 的影响1.用无毛小鼠皮肤进行的体外研究”，S. Τ. P. Pharma Sciences，第3卷，第404-407 页(1993) ；Wallach 和 Philippot，“新型脂类小泡Novasome ，，，Liposome Technology, 第 1 卷，第 141-156 页(1993) ；Wallach，美国专利 No. 4，911，928 (授予 Micro-Pak，Inc., 于1990年3月27日出版)；和Weiner等人，美国专利No. 5，834，014 (授予密西根大学和 Micro-Pak Inc.，于1998年11月10日出版)(在Weiner等人的文献中，本发明的化合物 替代或补充米诺地尔)。还可用离子电渗疗法施用PGF。参见，如网址www. unipr. it/arpa/dipfarm/ erasmus/erasml4. html ；Banga等人，“用于透皮送递肽/蛋白药物的水凝胶_基础的离子电 渗疗法送递装置”，Pharm. Res.，第10(5)卷，第697-702页(1993) ；Ferry，“用于透皮药物 送递的离子电渗疗法的治疗模型”，Pharmaceutical Acta Helvetiae，第70卷，第279-287 页(1995) ；Gangarosa等人，“局部送递药物的新式离子电渗疗法”，Int. J. Pharm.第123 卷，第159-171页(1995) ；Green等人，“体外透过皮肤离子电渗疗法送递三肽系列”，Pharm. Res.，第8卷，第1121-1127页(1991) Jadoul等人，“在皮肤中用离子电渗疗法送递芬太 尼和TRH的定量和定位”，Int. J. Pharm.，第120卷，第221-8页(1995) ；0，Brien等人，“对 其抗病毒活性、药物动力学特性和治疗效力的最新综述”，Drugs，第37卷，第233-309页 (1989) ；Parry等人，“人皮肤中阿昔洛韦的生物可利用性”，J. Invest. Dermatol.第98 (6) 卷，第856-63页(1992) ；Santi等人，“在透皮离子电渗疗法中鲑鱼降钙素的药物存储组合 物和送递”，Pharm. Res.，第14(1)卷，第63-66页(1997) ；Santi等人，“逆向离子电渗疗法-确定电渗流的参数:I. PH和离子强度”，J. Control. Release,第38卷，第159-165页 (1996) ；Santi等人，“逆向离子电渗疗法-确定电渗流的参数II.电极室制剂”J. Control. Rel ease，第42卷，第29-36页(1996) ；Rao等人，“逆向离子电渗疗法在人体内的非扩散 的葡萄糖监测”，Pharm. Res.，第 12(12)卷，第 1869-1873 页(1995) ；Thysman 等人，“用离 子电渗疗法向大鼠送递人的降钙素”，J. Pharm. Pharmacol.第46卷，第725-730页(1994)； 和Volpato等人“离子电渗疗法增强由电推斥和电渗透向裸鼠皮肤送递阿昔洛韦”，Pharm. Res.，第 12(11)卷，第 1623-1627 页(1995)。可将PGF装入药盒，这种药盒包含PGF、上述的全身和/或局部用的组合物；和信 息和/或说明书，说明用此药盒能提供对哺乳动物(尤其是人)脱发的治疗。这种信息和 说明书可以是文字和/或图片等的形式。此外或代替之，药盒还可包含PGF和/或组合物； 和信息和/或说明书，说明PGF或组合物的施用方法，较佳地还附带治疗哺乳动物脱发的益 处。本发明的方法本发明还涉及治疗哺乳动物脱发的方法。这种方法包括对患脱发的哺乳动物(尤 其是人)施用上述PGF。例如，可用本发明的方法治疗诊断患有脱发的哺乳动物，包括雄性 型脱发和雌性型脱发。较佳地，将包含A)PGF和B)载体的全身或局部用的组合物施用于哺 乳动物。更佳的是，这种组合物是包含A)PGF、B)载体和C)任选的活性增强剂的局部用的 组合物。施用的PGF的剂量取决于施用的方法。对全身给药(如口服、直肠给药、鼻部 给药、舌下给药、颊部给药或肠胃外给药)而言，通常每天给予0. 5mg-300mg，较佳地为 0. 5mg-100mg，更佳地为0. Img-IOmg的PGF。这些剂量只是示范性的，可根据多种因素调节 每天的给药剂量。要施用的PGF特定剂量、以及治疗的持续时间和治疗是局部的或是全身 的都是相互关联的。剂量和疗法也取决于因素如所用的特定PGF、治疗的适应性、化合物的 效力、对象的个人特征(如，体重、年龄、性别和对象对药物的反应)、疗法的顺应性和治疗 的任何副作用的存在情况和严重性。对局部给药(如在皮肤、眼睛上的局部施用，脂质体送递系统或离子电渗疗法)而 言，通常每天施用局部用的组合物一次。每天施用局部用的组合物持续时间相对较短(即 几周)。通常，6-12周足矣。局部用的组合物宜为免洗组合物。通常，局部用的组合物在施 用后的至少几小时内不应清除。除治疗脱发的益处以外，发明人还惊讶地发现本发明组合物和方法中的PGF还能 使毛发变黑和变密，且可能逆转毛发泛灰。本发明还涉及用于毛发变黑和变密的方法。该 方法包括将用于治疗脱发的局部用的组合物施用于生长的毛发和毛发生长部位的皮肤。在 本发明的一优选实施例中，将局部用的组合物，如上述的睫毛膏组合物，施用于睫毛。
实施例用这些实施例向本领域技术人员说明本发明，但并非对本发明所附权利要求的范 围进行限制。参考例1-放射性配体结合试验用放射性配体结合试验可以确定PGF相对于PGF2a的IC5(1。作为对照，PGF2a本身的IC50应不低于1. OnM且不高于5. OnM0在此试验中，用LipofectAMINE试剂，以hFP重组质粒瞬时转染C0S-7细胞。48 小时后，用Hanks平衡盐溶液(HBSS，无CaCl2、MgCl2, MgSO4或酚红)冲洗转染的细胞。用 依地酸分离细胞，并加入HBSS。在200g离心该混合物10分钟，在4°C让细胞沉淀。将沉淀 物重悬浮于磷酸盐缓冲盐水-EDTA缓冲液(PBS ； ImM EDTA ；pH 7. 4 ；4°C )。4°C，用800psi 氮气空腔化(Parr model 4639)裂解细胞15分钟。将此混合物在4°C、IOOOg离心10分 钟。将上清液在4°C、100，OOOg离心60分钟。将沉淀物重悬浮成Img蛋白质/ml TME缓 冲液(5OmMTris ；IOmM MgCl2 ；ImM EDTA ；pH 6. 0 ;4°C )，用 Pierce BCA 蛋白质试剂盒确定 蛋白质的水平。用 Kinematica P0LYTR0N (购自 KINEMATICA AG, Luzernerstrassel47A CH-6014Littau, Switzerland)混合此勻浆10秒。然后将此膜制剂储藏于_80°C直到试验 使用时冻融。以96孔形式进行受体竞争性结合试验。各孔含有IOOg hFP膜、5nM(3H)PGF2和各 种竞争化合物，总量为200L。将这些板在23°C培养1小时。用PackardFiltermate 196采集 装置通过用TME缓冲液预湿的PackardUNIFILTER GF/B滤器(购自Packard Instrument Co. , Inc. of Downers Grove Illinois)快速过滤终止培养。用TME缓冲液清洗滤器4 次。将Packard Microscint 20 (-种高效液态闪烁混合物)加到滤板孔中，在计数前让这 些平板保持在室温三小时。用Packard T0PC0UNT 微板闪烁计数器(同样购自Packard Instrument Co. , Inc)阅读平板。参考例2-毛发生长终期的转让试验用毛发生长终期的转化试验测试PGF对毛发生长的潜力。毛发生长终期转化试验 测定PGF将处于毛发生长周期静止阶段(“毛发生长终期”)的小鼠转变到毛发生长周期的 生长阶段(“毛发生长初期”)的潜力。不希望束缚于理论，毛发生长周期有3个主要阶段毛发生长初期、毛发生长中期 和毛发生长终期。据信，在约40天龄-75天龄、毛发生长同步化的C3H小鼠(Harlan Sprague Dawley, Inc. ,Indianapolis, IN)中，毛发生长终期较长。据信，在75天龄后毛发生长就不 再同步化。用约40天龄的、深色毛(褐色或黑色)的小鼠进行毛发生长试验，在毛发(毛) 的生长过程中发生黑素形成，在此过程中评估毛发生长刺激剂的局部施用。本文用毛发生 长终期的转化试验通过测定黑素形成筛选有潜在毛发生长的PGF。使用3组44天龄的C3H小鼠载体对照组、阳性对照组和测试PGF组，其中对测试 PGF组施用本发明方法所用的PGF。试验的长度为24天，其中15天为处理天(处理从星期 一到星期五进行)。第一天为处理的第一天。下表3列出了典型研究的设计。表3列处理 典型剂量浓度，当然本领域技术人员易理解这些浓度是可以改变的。表3-试验参数
组号动物编号化合物浓度施用剂量研究长度11-10测试化合物用载体**配制成 0. 01%400 μ 1局部26天
40 *T3是3，5，3，-三碘甲腺原氨酸"载体是60%乙醇、20 %丙二醇和20%异山梨酸二甲酯(购自Sigma ChemicalCo. , St.Louis, MO)。从星期一到星期五，在小鼠的下背(尾巴基部到下肋骨)局部处理小鼠。用移液器 和吸头将400 μ 1送递到每只动物的背部。边推开小鼠身上的毛边缓慢施用400 μ 1试剂， 让其到达皮肤。每次向小鼠进行局部处理时，对每只动物处理区域的皮肤进行目测打分，分级为 0-4。当小鼠从毛发生长终期向毛发生长初期转化时，其皮肤的颜色会变得更青黑。如表4 所示，0-4的分级表示目测观察到的皮肤从白色到青黑色的变化。表4-评分标准 实施例1用参考例1所述的方法测试具有如下结构的13，14- 二氢_15_(2_苯并噻唑基)
五去甲前列腺素Fla 13，14- 二氢-15-(2-苯并噻唑基)五去甲前列腺素Fla使毛发生长，其IC5tl为 45ηΜ。对比例1
用参考例1的方法测试具有如下结构的拉塔前列素(latanoprost) 拉塔前列素在0.01％和0.1％是活性的。表5列出了表示第26天动物平均评分
的分数。然而，拉塔前列素不是选择性的。虽然拉塔前列素不会减弱激活FP受体的作用， 但拉塔前列素还激活EPl受体，而这将导致副作用疼痛。实施例2用参考例1所述的方法测试具有如下结构的氟前列醇甲酯 氟前列醇甲酯0.015-0. 的氟前例醇使毛发生长。表5列出了表示第26天动物平均评分的分数。表5-分级 对比例2按参考例1所述的方法制备和测试含0. 01 % T3化合物的组合物。T3化合物让毛 发生长。实施例3制备局部施用的组合物，其包含 组合物中的PGF如下 用本发明的方法治疗患男性型脱发的男性对象。具体说，每天将上述组合物中的 一种局部施用于对象引发毛发生长，持续6周。实施例4按Dowton等人，“脂质体组合物对局部送递胶囊化的环孢菌素A的影响I.用无 毛小鼠皮肤进行的体外研究”，S. T. P. Pharma Science，第3卷，第404-407页(1993)所述 的方法，用 PGF 替代环孢菌素 A 并用N0VAS0ME 1 (购自 Micro-Pak，Inc. ,of Wilmington, Delaware)(作为非离子的脂质体制剂)，制备局部施用的组合物。用上述组合物治疗患男性型脱发的男性对象。具体说，每天将上述组合物局部施用于对象，持续6周。实施例5制备包含以下成分的香波 IC50为19nM的PGF与实施例3-1的相同。IC50为45nM的PGF与实施例3-3的相同。用本发明的方法治疗患男性型脱发的人对象。具体说，对象每天使用上述香波，共 12周。实施例6制备睫毛膏组合物。该组合物包含 该PGF与实施例3-1所用的相同。女性对象每天使用此组合物。具体说，将上述组合物局部施用于对象6周，使睫毛 变深变密。实施例7用常规方法，如混合和直接压制，制备片剂形式的药物组合物，其成分如下成分量(mg/片剂)PGF0. 5微晶纤维素100乙醇酸淀粉钠30硬脂酸镁3本实施例的PGF与实施例3-3所用的相同。
让对象每天一次口服上述组合物，共6-12周，以促进毛发生长。
实施例8用常规方法制备液态形式的药物组合物，其成分如下
成分量PGF0. Img磷酸盐缓冲的生理盐水IOml对羟基苯甲酸甲酯0.05ml本实施例的PGF与实施例3-3所用的相同。将1. Oml上述组合物每天一次在脱发的部位皮下施用，共6-12周，以促进毛发生实施例9用常规方法制备局部用药物组合物，其成分如下成分量(wt%)PGF0.004葡聚糖700. 1羟丙基甲基纤维素0.3氯化钠0. 77氯化钾0. 12EDTA 二钠(乙二胺四乙酸二钠)0. 05苯扎氯铵0. 01HCl 禾口 / 或 NaOHpH 7. 2-7. 5纯化水q. s.至100%本实施例的PGF与实施例3-3所用的相同。将上述组合物每天一次用于对象的眼部，6-12周，以促进睫毛的生长。 发明效果本发明的组合物和方法能向需要这种治疗的对象提供毛发生长及外观美感的益
权利要求
一种治疗脱发的组合物，其特征在于，所述的组合物包含A)活性成分，选自如下结构的前列腺素F的类似物；如下结构的药学上可接受的盐或水合物；如下结构的可生物水解的酰胺、酯和酰亚胺；如下结构的光学异构体、非对映体和对映体；或它们的组合；其中R1选自C(O)OH、C(O)NHOH、C(O)OR3、CH2OH、S(O)2R3、C(O)NHR3、C(O)NHS(O)2R4、四唑、阳离子盐部分、2 13个碳原子的药学上可接受的胺或酯、和2 13个原子的生物可代谢的胺或酯；R2选自氢原子、低级杂基团和低级单价烃基；R3选自单价烃基、杂基团、碳环、杂环、芳基、杂芳基、取代的单价烃基、取代的杂基团、取代的碳环、取代的杂环、取代的芳基、和取代的杂芳基；R4选自单价烃基、杂基团、碳环、杂环、芳基、杂芳基、取代的单价烃基、取代的杂基团、取代的碳环、取代的杂环、取代的芳基和取代的杂芳基；X选自 C≡C 、共价键、 CH＝C＝CH 、 CH＝CH 、 CH＝N 、 C(O) 、 C(O)Y 、 (CH2)n ，其中n为2 4， CH2NH 、 CH2S 和 CH2O ；Y选自氧原子、硫原子和NH；和Z选自碳环、杂环、芳基、杂芳基、取代的碳环、取代的杂环、取代的芳基、和取代的杂芳基；和B)载体。FSA00000133405200011.tif
2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的R1选自C02H、C(O)ΝΗΟΗ、CO2R3, C(O)NHS (0)2R4 和四唑。
3.如权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，所述的R2是氢原子。
4.如权利要求1、2或3所述的组合物，其特征在于，所述的X是共价键，且所述的Z选 自芳环、杂芳环、取代的芳环和取代的杂芳环。
5.如权利要求1、2或3所述的组合物，其特征在于，所述的X是-Cε C-，且ζ是单芳环。
6.如权利要求1、2、3、4或5所述的组合物，其特征在于，所述的成分A)的添加量为 IC50XlO"2 彡成分 A)的％彡 IC50XIO"3,其中成分A)的IC5tl以纳摩尔单位表示。
7.如权利要求1、2、3、4、5或6所述的组合物，其特征在于，所述的组合物还包含成分 C)活性增强剂。
8.如权利要求7所述的组合物，其特征在于，所述的成分C)在组合物中的添加量为1-20%，且加入足够量的成分B)使成分A)、B)和C)的总量为100%。
9.如权利要求1、2、3、4、5、6、7或8所述的组合物，其特征在于，所述的成分B)包含选 自以下的成分:q)乳化剂、r)推进剂、s)溶剂、t)湿润剂、U)增稠剂、ν)粉末、w)香精、水、 醇、芦荟胶、尿囊素、甘油、维生素A和E油、矿物油、丙二醇、聚丙二醇_2肉豆寇基丙酸酯、 异山梨酸二甲酯和它们的组合。
全文摘要
用非天然前列腺素治疗脱发的组合物和方法，用含前列腺素F类似物的组合物治疗哺乳动物脱发的方法。这种组合物可局部施用于皮肤。这种组合物可以制止、逆转脱发并促进毛发生长。
文档编号A61K8/40GK101897700SQ20101019348
公开日2010年12月1日 申请日期2001年3月30日 优先权日2000年3月31日
发明者J·M·姆西维尔, M·A·德隆, R·S·扬奎斯特 申请人:杜克大学