蓝萼甲素的葡萄糖衍生物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药发明领域，具体涉及蓝萼甲素（glaucocalyxinA，GLA)的葡萄糖 衍生物及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 蓝萼甲素（glaucocalyxinA，GLA)，化学名称为：（50，7a，90，IOa)-7, 14-二 羟基贝壳杉-16-烯-3, 15-二酮；又名leukameninF，分子式为C20H2804,分子量：332. 43， CAS登记号：79498-31-0,密度：1. 22g/cm3,熔点：513. 4°C，易溶于甲醇、乙醇，其结构式为 式III所示。
[0003]
【主权项】
1. 一种蓝萼甲素的葡萄糖衍生物，该类衍生物具有式I或式II所示结构：
其中，&为氢或甲氧基，R2各自独立的为氢或乙酰基，n为0或1。
2. 根据权利要求1所述的衍生物，其特征在于，所述衍生物为式Ia-Ic:
3. 根据权利要求1所述的衍生物，其特征在于，所述衍生物为式Ila-IIc所示化合物：
4. 一种制备权利要求1-3任一项所述的衍生物的方法，其特征在于，该方法包括以下 步骤： 步骤1，全乙酰化溴代葡萄糖和全乙酰化叠氮葡萄糖的制备：以葡萄糖为原料，通过乙 酰化、溴代、叠氮化反应得到全乙酰化溴代葡萄糖和全乙酰化叠氮葡萄糖； 步骤2,含末端炔基或羧基的苯甲醛衍生物的制备：以取代羟基苯甲醛为原料，通过与 3_溴丙炔发生亲核取代反应，得到含末端炔基的苯甲醛衍生物，或与氯乙酸发生亲核取代 反应，得到含羧基的苯甲醛衍生物； 步骤3,取代苯甲醛乙酰葡萄糖苷的制备：以步骤1制备的全乙酰化叠氮葡萄糖和步骤 2制备的含末端炔基的苯甲醛衍生物为原料，通过click反应，得到含三氮唑基团的取代苯 甲醛乙酰葡萄糖苷； 或，以步骤1制备的全乙酰化溴代葡萄糖和步骤2制备的含羧基的苯甲醛衍生物或 取代羟基苯甲醛为原料，通过亲核取代反应，得到重要的中间产物，取代苯甲醛乙酰葡萄糖 苷； 步骤4,蓝萼甲素葡萄糖衍生物的制备：以步骤3制备的重要中间产物取代苯甲醛乙 酰葡萄糖苷和蓝萼甲素为原料，通过缩合反应，得到目标产物蓝萼甲素的葡萄糖衍生物 Ia_Ic、IIa-IIc〇
5. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤： 步骤1，全乙酰化溴代葡萄糖和全乙酰化叠氮葡萄糖的制备：葡萄糖与乙酸钠按摩尔 比为1:1. 0-1:2. 0混勾，在乙酸酐中加热回流2-3h，反应结束后冷却，加入冰水析出白色固 体，过滤，用5-6倍量的蒸馏水洗涤，干燥，得到全乙酰化葡萄糖；所得全乙酰化葡萄糖溶于 二氯甲烧，滴加溴化氢-乙酸溶液，室温反应20-30h，之后加入冰水结束反应，二氯甲烧萃 取，有机层依次用蒸馏水、饱和碳酸氢钠、食盐水洗涤，干燥、减压浓缩，得到全乙酰化溴代 葡萄糖；所得全乙酰化溴代葡萄糖溶于有机溶剂，加入叠氮化钠，60-90°C反应5-12h，冷却 至室温，加入冰水析出固体，过滤，干燥，得全乙酰化叠氮葡萄糖； 步骤2,含末端炔基或羧基的苯甲醛衍生物的制备：：取代羟基苯甲醛与3-溴丙炔按 摩尔比为1:1-1:2于有机溶剂中搅拌溶解，加入0. 6-1摩尔当量的无水碳酸钾，催化量的碘 化钾，40-60°C反应6-10小时，反应结束后加入反应液等体积的蒸馏水，乙酸乙酯萃取，萃 取液无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩，硅胶柱层析分离纯化，石油醚-乙酸乙酯体系洗脱， 得到含末端炔基的苯甲醛衍生物； 取代羟基苯甲醛置于5%氢氧化钠溶液，调节pH值为8-9,逐滴加入1. 4-1. 6倍量的氯 乙酸的饱和碳酸钾溶液，再加入催化量的碘化钾，加热回流至溶液呈橘黄色后继续反应2-4 小时，停止反应，体系冷却至室温，浓盐酸调节溶液pH值为1-2,沉淀析出，抽滤，5-6倍量的 蒸馏水洗涤多次，所得固体乙醇-水重结晶，真空干燥后，得到含羧基的苯甲醛衍生物； 步骤3,取代苯甲醛乙酰葡萄糖苷的制备：步骤1中所得全乙酰化叠氮葡萄糖与步骤2 中所得含末端炔基的苯甲醛衍生物以摩尔比为1:1. 0-1:1. 5溶于有机溶剂，冰浴条件下加 入催化量的硫酸铜、L-抗坏血酸钠，室温条件下反应0-5h，加入1. 5-2倍反应液体积的蒸馏 水，乙酸乙酯萃取，依次用蒸馏水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩，柱层 析分离纯化，石油醚-乙酸乙酯体系洗脱，得含三氮唑基团的取代苯甲醛乙酰葡萄糖苷； 步骤4,蓝萼甲素葡萄糖衍生物的制备：步骤3中所得苯甲醛乙酰葡萄糖苷与蓝萼甲素 以摩尔比为1:0. 5 - 1:1. 5溶于有机溶剂，酸性条件下反应1 - 5h，加入二氯甲烷萃取，依次 用饱和碳酸氢钠、饱和食盐水进行洗涤，无水MgS04干燥，过滤，浓缩，柱层析分离纯化，石油 醚/乙酸乙酯体系洗脱，得到终产物la-Ic、Ila-lie。
6. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤1中：所述的有机溶剂为四氢呋 喃、N，N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、乙腈、1，4-二氧六环、二氯甲烷或氯仿； 所述步骤2中：所述的有机溶剂为四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、乙腈或 1，4-二氧六环。
7. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤3中，所述的有机溶剂为四氢呋 喃、N，N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、乙腈、1，4-二氧六环、正丁醇、正丁醇-水、二氯甲烷、氯 仿或乙腈。
8. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤4中，所述酸性条件为无机酸、有 机酸或非质子酸。
9. 含权利要求1-3任一项所述的衍生物的制剂，其特征在于，所述制剂由该衍生物与 药学上可接受的载体组成。
10. 权利要求1-3任一项所述的衍生物或权利要求9所述的制剂在制备治疗肿瘤的药 物中的应用，所述肿瘤优选为肝癌、宫颈癌、白血病、绒毛膜癌和肺癌。
【专利摘要】本发明涉及一种蓝萼甲素的葡萄糖衍生物，该类衍生物具有式I或式II所示结构。其中，R1为氢或甲氧基，R2为氢或乙酰基，n为0或1。本发明还涉及所述葡萄糖衍生物的制备方法和应用，经细胞毒活性评价实验，结果发现蓝萼甲素的葡萄糖衍生物具有较强的人肿瘤细胞增殖抑制活性，活性优于母体化合物蓝萼甲素。
【IPC分类】A61K31-7048, C07H1-00, A61P35-02, A61P35-00, A61K31-7056, C07H19-056, C07H13-04, C07H15-26
【公开号】CN104558077
【申请号】CN201510027426
【发明人】白素平, 李婷, 尹志奎, 黄锋, 刘兆敏, 海广范, 陈亮辉, 任茜茜, 周慧超, 张荒荒
【申请人】新乡医学院
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2015年1月20日