专利名称：复方丹参浓缩制剂及其制备、检测方法
技术领域：
本发明涉及一种活血化淤的复方丹参浓缩片及其制备方法，属中药领域。
背景技术：
中医中药是防治冠心病的重要手段。根据祖国医学辩证论治采用治标和治本两种方法。治标，主要在疼痛期应用，以“通”为主，有活血、化淤、理气等治法；治本，一般在缓解期应用，以调整阴阳、气血为主，有补阳、滋阴、调理肺腑等法。其中以“活血化淤法”(常用丹参、红花、川芎、郁金等药材)和“芳香温通法”(常用苏合香丸、保心丸等)最为常用。复方丹参片是我国应用最广、销售额最大的中成药之一，已收载于2000、2005、 2010年版的《中华人民共和国药典》中。该方取活血化淤之道，使用了丹参、三七和冰片的组方。丹参，唇形科鼠尾草属植物Mlviamiltiorrhiza Bge.的根，一种传统常用的中药材，收载于中华人民共和国历版药典中，有关中药大专院校教材、专著及辞典类中药书籍均作为重点药物收载介绍。长期以来，丹参广泛用作多种疾病的治疗药物，是活血化瘀中药的代表性药材。丹参主要含有二萜醌类、酚酸类化合物，另外还含有鞣质、多糖等。其中，丹参二萜醌主要包括丹参酮II A(Tanshinone II A)、隐丹参酮(Cryptotanshinone)、丹参酮 I (Tanshinone I)(Dihydrotanshinone) >(Methyltashinone)等； 酚酸类化合物主要包括丹酚酸B (Salvianolic acid B)、丹酚酸A (Salvianolic acid A)、 丹参素(Danshensu)、迷迭香酸(Rosmarinic acid)、原儿茶酸(Protocatechualdehyde)、 原儿茶酸(Protocatechuic acid)、咖啡酸(Coffeic acid)以及丹酚酸C、D、E等。丹参的水溶性酚酸类化合物及脂溶性二萜醌类化合物这二类化合物均是丹参的主要有效成分，也是丹参治疗心血管疾病的主要有效成分，由于这两类成分性质均不甚稳定，提取工艺的不当可极大影响产品质量。在含有丹参的现有制剂中，常常使用水或不同浓度的乙醇作为溶剂来提取丹参，但是获得较低收率的水溶性酚酸类化合物及脂溶性二萜醌类化合物，而且含有较大量的杂质，不利于控制产品质量，并降低了生物利用度。三七，五加科植物三七Panax notoginseng (Burk. ) F. H. Chen的干燥根，分主根、支根及茎基，属贵重药材，也是一种传统常用的中药材，收载于中华人民共和国历版药典中。 大量研究资料表明，三七主要有效成分是其所含的皂甙类成分，三七皂甙也是三七治疗心脑血管疾病的最主要有效成分。三七皂甙在水、醇中均易溶。但三七为根类药材，同时含有大量淀粉。由于三七生药质坚硬，常须碎为中、细粉方容易提出其有效成分，因而如溶媒选择不当，在提取皂甙类成分的同时随之而来的是三七中淀粉等成分将大量溶出，给提取、精制工艺带来一定困难。一般认为，三七中由于含有大量淀粉，在传统蒸煮法过程中，容易使淀粉糊化，难以过滤。因此，长期以来，在复方丹参片的传统制备工艺中，一般将三七粉碎之后直接以三七粉的形式加入到丹参浸膏及适当的辅料中，制成颗粒并干燥压片。但是，三七的有效成分多为脂溶性，未经提取的三七粉在消化道内的利用率较低，为达到治疗效果，所需的三七药材量较高。同时直接使用未提取的三七原粉，不利于监控药物片剂中三七有效成分的含量，容易造成片剂生产批次之间的质量差异，不利于中成药质量控制体系的构建及大规模生产和应用。此外，目前复方丹参片的制法繁多，但均存在各种各样的缺点，导致无法降低使用时的服用量。服用量减小必然是通过大幅提高复方丹参制剂的有效成分含量而实现；适合大规模生产又必须控制成本，如果能保证现有设备仍能使用，即无需更换设备，则更为优选。在现有的技术中，丹参及三七的提取效率不高，有效成分提取率有限，大量有效成分如丹参酮随药渣废弃，造成了巨大的浪费。由于2010年年初中国西南的持续旱情及北部地区持续低气温，我国的丹参及三七均将出现大幅度减产，部分地区甚至面临绝产。这导致市场丹参及三七货源匮乏甚至断货，部分地区原料药材价格已经上涨两倍以上。更为严重的是，由于药用作物大量枯死， 缺货在将来将越来越严重。如果将丹参和三七等中药材充分利用，提高提取效率，减少原料消耗，能使生产厂家显著降低生产成本，节约原料中药材，确保对国内外市场的药物供应， 因此具有明显的社会和经济意义。目前我国化石燃料缺乏，如果能节约使用提取溶剂，简化提取工艺，降低耗能耗料，能大量节约石化产品，有助于我国低碳经济的发展和环境的保护。
发明内容
本发明的一个目的在于，提供一种复方丹参浓缩制剂；本发明的另一个目的在于， 提供前述浓缩制剂的制备方法；本发明的再一个目的在于，提供前述浓缩制剂的检测方法。针对上述发明目的，本发明提供以下技术方案一方面，本发明提供一种复方丹参浓缩片的制备方法，包括(1)称取丹参900 1800g，三七282 564g，冰片8 32g ；(2)取丹参提取三次，第一次加95%乙醇回流提取，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成膏；第二次加50 %乙醇回流提取，滤过；第三次加水回流提取，滤过，合并第二、三次滤液， 回收乙醇，浓缩，加乙醇沉淀，放置，取上清液回收乙醇，浓缩成膏，与第一次的浓缩浸膏合并，混勻；(3)将三七粉碎或不粉碎，提取，滤过，滤液浓缩；(4)将丹参浸膏及三七浸膏混合均勻，加入辅料制粒，干燥，与冰片混勻制剂。其中所述浓缩剂为选自片剂，硬胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、糖浆剂、气雾剂、蜜丸齐U、酊剂、煎膏剂、浓缩丸剂、口服液的组的剂型。其中所述辅料可选自包含微粉硅胶，淀粉，糊精，CMS-Na, HPMC，滑石粉，硬脂酸镁或其混合物的组。其中处方优选为丹参1200-1500g，三七380_460g，冰片20_28g。其中处方进一步优选为丹参1350g、三七423g、冰片Mg。优选地，( 步骤中，第一次加2-5倍量的95%乙醇提取，第二次加3-7倍量的 50 %乙醇提取，第三次加3-7倍量的水提取。浸膏提取收率(流浸膏/药材)为7 % 27 %。进一步优选地，( 步骤中，第一次加3. 5倍量的95%乙醇提取，第二次加5倍量的50%乙醇提取，第三次加5倍量的水提取。优选地，( 步骤中，丹参的50%乙醇提取液和水提液合并减压浓缩至相对密度为1. 10-1.30时，加入乙醇醇沉至65-85%，放置8_16小时，滤过，滤液回收乙醇。进一步优选地，( 步骤中，丹参的50%乙醇提取液和水提液合并减压浓缩至相对密度为1.20时，加入乙醇醇沉至75%，放置12小时，滤过，滤液回收乙醇。以上优先步骤，丹参浸膏提取收率(流浸膏/药材)为15% 20%。优选地，⑶步骤中，取三七打碎过20 40目筛，加入1. 5-3. 5倍量的60-80% 乙醇回流提取二次，每次1-2小时，滤过，合并滤液回收乙醇，减压浓缩至相对密度为 1.20-1. 40 (60°C)的稠膏。浸膏提取收率(流浸膏/药材)为 % 2 %。优选地，( 步骤中，取三七打碎过20 40目筛，加入2. 5倍量的75%乙醇回流提取二次，每次1. 5小时，滤过，合并滤液回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1. 30 (600C )的稠膏。以上优先步骤，三七浸膏提取收率(流浸膏/药材)为15% 20%。优选地，丹参及三七的浓缩方法均选择减压浓缩方法。优选地，辅料配方可采取微粉硅胶10 % 30 %，糊精5 % 10 %，CMS_Na3 % 8 %，玉米淀粉15 % 45 %，滑石粉0. 3 % 3. 0 %，硬脂酸镁0. 1 % 0. 5 %或其混合物。另一方面，本发明提供了一种由上述方法制得的复方丹参浓缩片。第三方面，本发明还提供了上述复方丹参浓缩片的检测方法。该检测方法包括性状本品为褐色的片、糖衣片或薄膜衣片，糖衣片和薄膜衣片除去包衣后显棕色至褐色；气芳香，味微苦。鉴别(1)取本品2片，研细，进行微量升华，所得白色升华物，加新配制的香草醛硫酸溶液1滴，液滴边缘渐显玫瑰红色。(2)取本品5片，糖衣片除去糖衣，研碎，加乙醚10ml，超声处理5分钟，滤过，药渣备用，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹参素钠、丹参酮IIA、 冰片对照品，分别加醋酸乙酯制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法 (中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述四种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以苯-醋酸乙酯(19 1)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与丹参酮IIa对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；喷以香草醛硫酸溶液，在110°C加热数分钟，在与冰片对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(3)取〔鉴别〕(1)项下的药渣，加甲醇25ml，加热回流15分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水25ml，微热使溶解，加水饱和的正丁醇25ml，振摇提取，取正丁醇提取液，用氨试液25ml洗涤，弃去氨溶液，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次25ml，正丁醇液浓缩至干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取三七皂苷R1对照品及人参皂苷Rbp Rg1 对照品，分别加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典 2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述四种溶液各1 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上， 以氯仿-甲醇-水(13 7 2) 10°C以下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干， 喷以硫酸乙醇溶液(1 — 10)，立即于110 120°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(4)取本品2片，加少量水，搅拌使溶解后用水稀释至100ml，摇勻，取anl，加水至 25ml，摇勻，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VA)测定，在的波长处有最大吸收。检查应符合片剂项下有关的各项规定(中国药典2000年版一部附录ID)。含量测定_丨除照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合胶为填充剂；甲醇-水 (73 27)为流动相；检测波长为270nm。理论板数按丹参酮IIa峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备精密称取丹参酮IIa对照品10mg，置50ml棕色量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇勻，精密量取5ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，即得(每 Iml中含丹参酮IIa 40 μ g) 0供试品溶液的制备取本品10片，糖衣片除去糖衣，精密称定，研细，取lg，精密称定，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理15分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定， 即得。丹参素的测定照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合胶为填充剂；甲醇-0.5%乙酸 (1 9)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按丹参素峰计算应不低于1200。对照品溶液的制备取丹参素钠对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含 0. 16mg(相当于丹参素0. Hmg)的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品10片，糖衣片除去糖衣，置IOOml量瓶中，加甲醇适量， 超声处理2小时，放冷，加甲醇至刻度，摇勻，用微孔滤膜(0.45μπι)滤过，取滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液5μ 1与供试品溶液5 10μ 1，注入液相色谱仪， 测定，即得。人参皂苷的测定照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为A液 (乙腈水=20 80)与B液(乙腈水=60 40) 二元线性梯度洗脱；检测波长为 203nm ；柱温30°C ；人参皂苷和人参皂苷Rb1的分离度应符合要求。
权利要求
1.一种复方丹参浓缩剂的制备方法，其中(1)称取丹参900 1800g，三七282 564g，冰片8 32g；(2)取丹参提取三次，第一次加95%乙醇回流提取，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成膏；第二次加50%乙醇回流提取，滤过；第三次加水回流提取，滤过，合并第二、三次滤液，回收乙醇，浓缩，加乙醇沉淀，放置，取上清液回收乙醇，浓缩成膏，与第一次的浓缩浸膏合并，混勻；(3)将三七粉碎或不粉碎，提取，滤过，滤液浓缩；(4)将丹参浸膏及三七浸膏混合均勻，加入辅料制粒，干燥，与冰片混勻制剂。
2.如权利要求1所述的制备方法，其中所述浓缩剂的剂型选自片剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、糖浆剂、气雾剂、蜜丸剂、酊剂、煎膏剂、浓缩丸剂和口服液。
3.如权利要求1所述的制备方法，其中所述辅料选自微粉硅胶、淀粉、糊精、CMS-Na, HPMC、滑石粉、硬脂酸镁和其混合物。
4.如权利要求1或2所述的制备方法，其中浓缩剂为片剂。
5.如权利要求1所述的制备方法，其中所述三种药材的重量配比为丹参1200-1500g， 三七 380-460g，冰片 20-28g。
6.如权利要求5所述的制备方法，其中所述三种药材的重量配比为丹参1350g、三七 423g、冰片 24g。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其中，在所述步骤O)中，第一次加2-5倍量的 95%乙醇提取，第二次加3-7倍量的50%乙醇提取，第三次加3-7倍量的水提取。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其中，在所述步骤O)中，第一次加3.5倍量的 95%乙醇提取，第二次加5倍量的50%乙醇提取，第三次加5倍量的水提取。
9.根据权利要求1所述的制备方法，其中，在所述步骤(2)中，丹参的50%乙醇提取液和水提液合并减压浓缩至相对密度为1. 10-1. 30时，加入乙醇醇沉至65-85%，放置8-16小时，滤过，滤液回收乙醇。
10.根据权利要求9所述的制备方法，其中，在所述步骤O)中，丹参的50%乙醇提取液和水提液合并减压浓缩至相对密度为1. 20时，加入乙醇醇沉至75%，放置12小时，滤过， 滤液回收乙醇。
11.根据权利要求1所述的制备方法，其中，在所述步骤C3)中，取三七打碎过20 40 目筛，加入1. 5-3. 5倍量的60-80%乙醇回流提取二次，每次1-2小时，滤过，合并滤液回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1. 20-1. 40 (600C )的稠膏。
12.根据权利要求11所述的制备方法，其中，在所述步骤(3)中，取三七打碎过20 40目筛，加入2. 5倍量的75%乙醇回流提取二次，每次1. 5小时，滤过，合并滤液回收乙醇， 减压浓缩至相对密度为1. 30 (600C )的稠膏。
13.根据权利要求1所述的制备方法，其中丹参及三七的提取液的浓缩方法为减压浓缩方法。
14.根据权利要求所述的制备方法，其中辅料包含微粉硅胶MOg、糊精92.8g、CMS-Na 58g、玉米淀粉322. Sg、颗粒量1. 0%的滑石粉和颗粒量0. 3%的硬脂酸镁。
15.根据权利要求1-14任一项制备方法制得的复方丹参浓缩剂。
16.一种复方丹参片剂的检测方法，其包含丹参素的检测，所述检测方法包括高效液相色谱法。
17. 一种复方丹参片剂的检测方法，其包含人参皂苷的检测，所述检测方法包括高效液相色谱法。
全文摘要
本发明提供一种复方丹参浓缩片的制备方法及其制得的产品。利用这种制备方法无需更换已有的设备，仅需对部分参数进行改变即可，极大地降低了改变工艺所带来的成本，易于被生产厂家接受。制备方法中提高了中药材的有效成分提取率，且制得的产品具有非常好的效果，能带来极为可观的经济和社会效益。
文档编号A61K36/537GK102309543SQ20101021664
公开日2012年1月11日 申请日期2010年6月30日 优先权日2010年6月30日
发明者向飞军, 朱颖虹, 黄掌欣 申请人:广东环球制药有限公司