专利名称：一种依前列醇脂质体及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种依前列醇脂质体及其制备方法，本发明还涉及含有所述脂质体的 剂型及其制备方法。
背景技术：
依前列醇，又名前列环素(PGX)、前列腺素I2(PGI2),为血管内皮细胞产生的花生 四烯酸代谢产物，能抑制血小板聚集，对冠脉、全身血管和肺血管有强烈舒张作用。临床上 用于不稳定型心绞痛、心肌梗死、顽固性心衰、外周血管痉挛性疾病及肺动脉高压。其抗血 小板聚集作用可用于防止血栓形成。用于治疗某些心血管疾病和血液透析时(比肝素更为 安全)作为抗凝剂；末梢血管病如雷诺病，用药后明显减少发作次数和发作时间；也用于血 小板消耗综合征及减少血小板在体外循环中的损失等。依前列醇半衰期短，一般使用输注 泵通过中心静脉导管持续输注给药。起始剂量为2ng/(kg · min)，若能耐受，继后每次可增 加2ng/kg，逐渐达到所需剂量。推荐在6个月后，其平均剂量可达20至40ng/(kg · min)， 而有些病人的最后剂量需要增加到200ng/ (kg · min)，甚至更多。不良反应静注速度超过 每分钟lOng/kg时，可出现头痛、腹部不适、高血压等，超过20ng/kg时，可出现血压下降、心 率减慢，甚至昏厥。不良反应发生率与剂量有关静滴时不良反应有面部潮红、头痛、不安、 焦虑、呕吐、腹部不适、低血压和心动过缓等。依前列醇的化学性质不稳定，尤其是潜在的水解不稳定性使得它难以研发成稳定 制剂。PGI2-Na的乙烯基醚部分通过在碱性(pH>8.8)条件下缓冲而在溶液中最稳定化。国际申请PCT/US2007/002948公开了依前列醇在23°C，pH 9. 3条件下10小时降 解50%，因此，将其开发成稳定的制剂需首先解决依前列醇的稳定性问题。该申请中提供 一种pH > 11的碱化试剂的药物组合物，在高pH条件下，依前列醇溶液在15至30°C下24 至48小时仍然保持90%的依前列醇不降解。目前已上市的剂型是粉针剂Flolan(Glaxo Smith Kline)，每支冻干小瓶包含0. 5mg或1. 5mg依前列醇，3. 76mg甘氨酸，2. 93mg氯化 钠和50mg甘露醇。还可加入氢氧化钠以便调节pH。另外还配有无菌稀释剂，含有94mg甘 氨酸，73. 5mg氯化钠，氢氧化钠(调节pH)，适量注射用水至50ml的玻璃瓶中。重新配置 Flolan溶液具有10. 2至10. 8的pH。静脉给药的pH范围4至9，pH过高或过低都容易引 起刺激性，上述溶液虽然通过调节PH值一定程度上解决了依前列醇的稳定性问题，但存在 静脉给药的安全隐患。中国专利申请CN200910093402公开了一种依前列醇脂质纳米粒及其制备方法， 但所用固体脂质材料缺少注射级别，而且需要加入大量表面活性剂以提高制剂稳定性，这 使得制剂毒性增加，存在安全隐患。因此，有必要研制一种稳定并且适合静脉给药的新剂 型。脂质体(Liposome)或称类脂小球、液晶微囊，是一种定向药物载体，属于靶向给 药系统的一种类似微型胶囊的新剂型。1971年，英国Rymen等人开始将脂质体用作药物载 体。它具有类细胞结构，进入动物体内主要被网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功
3能，并改变被包封药物的体内分布，使药物主要在肝、脾、肺和骨髓等组织器官中积蓄，从而 提高药物的治疗指数，减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。脂质体技术是被誉为“生物 导弹”的第四代靶向给药技术，也是目前国际上最热门的制药技术。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是显著提高依前列醇的稳定性。本发明的一个目的在于提供一种依前列醇脂质体，其中所述脂质体中依前列醇、 磷脂材料的重量比为1 4至1 200，优选为1 20至1 100。所述磷脂材料选自蛋黄卵磷脂、大豆磷脂、甘油磷脂、氢化大豆磷脂、氢化卵磷脂、 氢化甘油磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺或其组合，优选大豆 磷脂，蛋黄卵磷脂。本发明上下文中，所述磷脂不包括胆固醇。在本发明的一个实施方案中，所述磷脂为大豆磷脂。在本发明的另一个实施方案中，所述磷脂为蛋黄卵磷脂。在本发明的另一个实施方案中，所述磷脂为氢化卵磷脂。优选地，在所述依前列醇脂质体中加入有助于脂质体形成的胆固醇。所述胆固醇 用量按胆固醇与磷脂重量比计算，用量范围为1 0.2至1 20，优选为1 1至1 10， 最优选为1 2至1 6。在本发明的一个实施方案中，所述胆固醇与磷脂的重量比为1 0.2。在本发明的另一个实施方案中，所述胆固醇与磷脂的重量比为1 4。在本发明的另一个实施方案中，所述胆固醇与磷脂的重量比为1 10。在本发明的另一个实施方案中，所述胆固醇与磷脂的重量比为1 20。本发明的另一个目的在于提供所述依前列醇脂质体的制备方法，包括以下步骤1)将磷脂、任选的胆固醇、依前列醇用有机溶剂溶解，均勻混合，除去有机溶剂，获 得含有依前列醇的脂膜；2)将步骤1)所述的脂膜水化，高压均质，获得依前列醇脂质体。其中，所述步骤1)中的有机溶剂选自乙醇、异丙醇、二氯甲烷、氯仿、甲醇及其组合。所述步骤幻中高压均质压力为600至2000bar，均质次数为3至10次。本发明的另一个目的在于提供依前列醇脂质体的剂型，所述剂型为粉针剂或水针 剂。在本发明的一个实施方案中，所述依前列醇脂质体的剂型为水针剂。在本发明的另一个实施方案中，所述依前列醇脂质体的剂型为粉针剂，其特征在 于含有支撑剂。所述支撑剂选自海藻糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇或其组 合。优选地，所述支撑剂为蔗糖、乳糖、甘露醇、海藻糖。更优选地，所述支撑剂为乳糖、海藻 糖。在本发明的一个实施方案中，所述支撑剂为山梨醇。在本发明的另一个实施方案中，所述支撑剂为乳糖。在本发明的另一个实施方案中，所述支撑剂为海藻糖。本发明的另一个目的在于提供所述依前列醇脂质体粉针剂的制备方法，包括以下步骤1)将磷脂、任选的胆固醇、依前列醇用有机溶剂溶解，均勻混合，除去有机溶剂，获 得含有依前列醇的脂膜；2)将步骤1)所述的脂膜水化，高压均质，获得依前列醇脂质体；3)向步骤2、所得的依前列醇脂质体中加入支撑剂，冷冻干燥，获得所述依前列醇 脂质体粉针剂。其中，所述步骤1)中的有机溶剂选自乙醇、异丙醇、二氯甲烷、氯仿、甲醇及其组合。所述步骤幻中的高压均质压力为600至2000bar，均质次数为3至10次。所述步骤幻中的支撑剂选自海藻糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇 或其组合。优选地，所述支撑剂为蔗糖、乳糖、甘露醇、海藻糖。更优选地，所述支撑剂为乳 糖、海藻糖。本发明所制备的依前列醇脂质体具有以下优点(1)脂质载体毒性低，生理相容 性好，降低了毒副作用，提高了机体耐受性；( 脂质体易聚集在病变血管处，具有靶向作 用；C3)所制备的脂质体将药物包封于脂质载体中，可以使药物免受外界因素(水、氧、光) 的破坏，大大提高药物在储存过程的的稳定性；(4)所制备的脂质体将药物包封于脂质载 体中，可减少肾排泄和代谢而延长药物在血液中的滞留时间，使药物在体内缓慢释放，延长 药物的作用时间。因此，本发明所述的依前列醇脂质体粉针剂不仅解决了药物的稳定性问题，而且 降低了静脉给药的刺激性，增加了临床用药的安全性。
具体实施例方式下面结合实施例进一步详细描述本发明，以便本领域普通技术人员能够更清楚地 理解和实施本发明。然而，应当理解的是，本发明并不限于这些实施例。对本发明所作的任 何不背离本发明精神和范围的变更、修改和等同替换，均落在本发明的范围之内。实施例1处方依前列醇0. Ig大豆磷脂Ig胆固醇5g水200ml制备工艺1)将大豆磷脂、胆固醇、依前列醇用200ml无水乙醇溶解，均勻混合，然后在40°C 下干燥，除去乙醇，获得含有依前列醇的脂膜；2)将上述的脂膜加入200ml水中水化，高压均质，压力为600bar，勻化8次，获得 依前列醇脂质体溶液。实施例2 处方依前列醇0. Ig
蛋黄卵磷脂4g胆固醇Ig磷酸盐缓冲液(pH7. 4) 200ml制备工艺1)将蛋黄卵磷脂、胆固醇、依前列醇用200ml 95%异丙醇溶解，混合均勻，然后在 45°C下干燥，除去异丙醇，获得含有依前列醇的脂膜；2)将上述的脂膜加入200ml磷酸盐缓冲液中水化，高压均质，压力为1200bar，勻 化6次，获得依前列醇脂质体溶液；3)将上述脂质体溶液经0. 22 μ m微孔滤膜过滤，无菌灌封，获得依前列醇脂质体 水针剂。实施例3 处方依前列醇 0. Ig大豆磷脂 IOg胆固醇Ig山梨醇 IOg水200ml制备工艺1)将大豆磷脂、胆固醇、依前列醇用200ml 二氯甲烷/甲醇(1 1)溶解，均勻混 合，然后在50°C下干燥，除去有机溶剂，获得含有依前列醇的脂膜；2)将上述的脂膜加入200ml水中水化，高压均质，压力为2000bar，勻化3次，获得 依前列醇脂质体；3)将依前列醇脂质体加入处方量山梨醇，冻干，获得依前列醇脂质体粉针剂。实施例4:处方依前列醇0. Ig氢化卵磷脂20g胆固醇Ig乳糖20g磷酸盐缓冲液(pH7. 4) 200ml制备工艺1)将氢化卵磷脂、胆固醇、依前列醇用200ml氯仿溶解，均勻混合，然后在60°C下 干燥，除去氯仿，获得含有依前列醇的脂膜；2)将上述的脂膜加入200ml磷酸盐缓冲液中水化，高压均质，压力为lOOObar，勻 化10次，获得依前列醇脂质体；3)将依前列醇脂质体加入处方量乳糖，冻干，获得依前列醇脂质体粉针剂。实施例5 处方依前列醇0. Ig
6
蛋黄卵磷脂Ig胆固醇5g海藻糖3g水200ml制备工艺1)将蛋黄卵磷脂、胆固醇、依前列醇用200ml 75%异丙醇溶解，混合均勻，然后在 55°C下干燥，除去异丙醇，获得含有依前列醇的脂膜；2)将上述的脂膜加入200ml水中水化，高压均质，压力为800bar，勻化10次，获得 依前列醇脂质体；3)将依前列醇脂质体加入处方量海藻糖，冻干，获得依前列醇脂质体粉针剂。实施例6 处方依前列醇0. 5g蛋黄卵磷脂2g胆固醇8g乳糖IOg磷酸盐缓冲液(pH7.4) 1000ml制备工艺1)将氢化卵磷脂、胆固醇、依前列醇用200ml 二氯甲烷溶解，均勻混合，然后在 50°C下干燥，除去二氯甲烷，获得含有依前列醇的脂膜；2)将上述的脂膜加入IOOOml磷酸盐缓冲液中水化，高压均质，压力为1500bar，勻 化4次，获得依前列醇脂质体；3)将依前列醇脂质体加入处方量蔗糖，冻干，获得依前列醇脂质体粉针剂。比较实施例1药物稳定性试验参考专利申请200780011395. 3的方法测定依前列醇缓冲盐溶液、脂质体溶液稳 定性，结果见表1。结果表明，将依前列醇制成脂质体后，药物的稳定性大大改善。表 权利要求
1.一种依前列醇脂质体，其特征在于所述脂质体中依前列醇、磷脂材料的重量比为 1 4 至 1 200。
2.根据权利要求1所述的依前列醇脂质体，其特征在于，所述磷脂材料选自蛋黄卵磷 脂、大豆磷脂、甘油磷脂、氢化卵磷脂、氢化大豆磷脂、氢化甘油磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙 醇胺、聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺或其组合，优选大豆磷脂，蛋黄卵磷脂。
3.根据权利要求1或2所述的依前列醇脂质体，其特征在于，向所述依前列醇脂质体中 加入胆固醇。
4.根据权利要求3所述依前列醇脂质体，其特征在于，所述胆固醇用量按胆固醇与磷 脂重量比例计算，用量范围为1 0.2至1 20，优选为1 1至1 10，最优选为1 2 至 1 6。
5.一种权利要求1至4中任一项所述的依前列醇脂质体的制备方法，其特征在于，包括 以下步骤1)将磷脂、任选的胆固醇、依前列醇用有机溶剂溶解，均勻混合，除去有机溶剂，获得含 有依前列醇的脂膜；2)将步骤1)所述的脂膜水化，高压均质，获得依前列醇脂质体。
6.根据权利要求5所述的依前列醇脂质体的制备方法，其特征在于，步骤1)所述的有 机溶剂选自乙醇、异丙醇、二氯甲烷、氯仿、甲醇或其组合；步骤2)所述高压均质压力为600 至2000bar，均质次数为3至10次。
7.一种含有权利要求1至4中任一所述的依前列醇脂质体的粉针剂，其特征在于，含有 支撑剂。
8.根据权利要求7所述的依前列醇脂质体粉针剂，其特征在于，所述的支撑剂选自海 藻糖，蔗糖，乳糖，麦芽糖，葡萄糖，甘露醇，山梨醇或其组合，优选为海藻糖或乳糖。
9.一种权利要求7或8所述的依前列醇脂质体粉针剂的制备方法，其特征在于，包括以 下步骤1)将磷脂、任选的胆固醇、依前列醇用有机溶剂溶解，均勻混合，除去有机溶剂，获得含 有依前列醇的脂膜；2)将步骤1)所述的脂膜水化，高压均质，获得依前列醇脂质体；3)将步骤幻依前列醇脂质体加入支撑剂，冷冻干燥，获得依前列醇脂质体粉针剂。
10.根据权利要求9所述的依前列醇脂质体粉针剂的制备方法，其特征在于，步骤1)所 述的有机溶剂选自乙醇、异丙醇、二氯甲烷、氯仿、甲醇或其组合；步骤2、所述高压均质压 力为600至2000bar，均质次数为3至10次。
全文摘要
本发明涉及一种依前列醇脂质体及其制备方法，该脂质体中依前列醇、磷脂材料的重量比为1∶4至1∶200。采用薄膜分散-高压均质法制备，所制备的脂质体不仅解决了药物的稳定性问题，而且降低了静脉给药的刺激性，增加了临床用药的安全性。
文档编号A61P9/10GK102133182SQ20101062297
公开日2011年7月27日 申请日期2010年12月30日 优先权日2010年12月30日
发明者伞红男, 孙欣, 宋华先, 徐庆春, 王娟, 郑建华, 马红萍, 黄海 申请人:北京中海康医药科技发展有限公司