专利名称：一种用于抗癌药物释放的壳聚糖微球的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种用于抗癌药物释放的壳聚糖微球的制备方法。
背景技术：
紫杉醇是红豆杉属植物中的提取的一种治疗癌症的二萜类化合物，具有稳定微管并促进其聚合和组装的作用，是对实体瘤和白血病有良好前景的抗癌药。卵磷脂是一类含有磷元素的脂肪化合物，不但可以保护肝脏，还能降低血清胆固醇含量，此外，还能促进大脑发育，增强记忆力。卵磷脂具有良好的保健作用，将其应用在微球体系作为油相，不需要额外去除。壳聚糖具有优良的生物活性，如生物相容性、可降解性、抗菌消炎性、无毒性和促进伤口愈合等性能，近年来在生物医学领域越来越受到青睐，可作为组织工程支架材料、皮肤组织伤口辅料、药物载体等。壳聚糖微球是目前应用较多的药物缓释形式，其以优良的缓释性能在临床药物中广泛应用，其可靶向分布于肿瘤组织，能加强药物的穿透性和滞留性，提高药物的稳定性及生物利用度，降低全身血药浓度，减少副反应。壳聚糖特有的性质使其成为新型的药物载体，除具备壳聚糖的一般特性外，还拥有一些纳米材料的普遍特征，如表面与界面效应、小尺寸效应和量子尺寸效应等，所以在组织工程及药物运载中表现出良好的应用前景。壳聚糖米微球的制备方法主要有以下几种乳化交联法，乳化溶剂蒸发法，乳化内部凝胶化法， 复乳法，离子交换法，喷雾干燥法，冷冻干燥法和包衣法等。近几年壳聚糖衍生物的缓释性能也更优良，在微球、微囊、纳米球、漂浮片等缓释剂型中广泛应用。微球是目前作为缓释剂型研究的热点，制作方法以乳化交联法最为常用， 其基本方法是将药物分散于壳聚糖的醋酸溶液中，与含有表面活性剂的油相混合处理后， 再与戊二醛等交联剂等乳化交联变可以制成。壳聚糖微球作为一种新型的药物和基因载体所展示出的优点越来越受到人们的关注，随着科技的发展进步，壳聚糖微球载体将进入更加广泛的药物治疗领域，在众多化学合成药和天然药物中取得突破。运用先进合成技术对壳聚糖微球表面进行修饰，使其具有靶器官、靶组织和靶细胞所要求的选择性，也是未来的发展趋势。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于抗癌药物释放的壳聚糖微球的制备方法(1)将壳聚糖溶于2wt%的稀酸溶液中，配制成2% (w/v)的壳聚糖稀酸溶液作为水相，将紫杉醇和卵磷脂溶于乙醇或丙酮中作为油相。(2)将适量乳化剂加入到油相，机械搅拌5-30min使其分散均勻，将水相逐滴加入油相，水浴加热控制温度30-70°C搅拌20-50min。(3)逐滴加入适量京尼平水溶液进行交联，并快速搅拌。(4)用0. 5-5wt%的妝!10)3溶液调反应体系pH值，快速搅拌反应l_10h，除去乙醇或丙酮，干燥即得壳聚糖纳米微球。这一方法的主要优点在于第一，卵磷脂是人体所必须的物质之一，对人体无毒、 无副作用，我们采用卵磷脂是为油相而非乳化剂。第二，京尼平是一种环烯醚萜类杂环化合物，是天然生物的交联剂。采用京尼平作交联剂来进一步减少细胞毒性。第三，在制备过程中加入紫杉醇，将药物包覆在微球的内部，提高粒子的载药量，从而提高药物的有效利用率。
具体实施例方式实施例1将壳聚糖(分子量为50，000)溶于2wt%的乙酸水溶液中，配制成2% (w/v)的壳聚糖乙酸水溶液作为水相，将紫杉醇和卵磷脂溶于乙醇中作为油相，司班80加入到油相， lOOOr/min机械搅拌20min使其分散均勻，将水相逐滴加入油相，其中水相/油相为1 2， 紫杉醇的加入量为乙醇质量的0.01%，软磷脂为乙醇质量的2%，司班的加入量为油相的 0.5% (ν/ν) 0水浴加热控制温度30°C搅拌20min。逐滴加入2%的京尼平溶液进行交联， 快速搅拌30min。用质量分数5%的NaHCO3溶液调反应体系pH值为9，快速反应10h，除去乙醇，真空干燥即可。所得微球的平均粒径为5 μ m。实施例2将壳聚糖(分子量为100，000)溶于2wt%的甲酸水溶液中，配制成2% (w/v)的壳聚糖甲酸水溶液IOml作为水相，将紫杉醇和卵磷脂溶于乙醇中作为油相，司班80加入到油相，2000r/min机械搅拌5min使其分散均勻，将水相逐滴加入油相，其中水相/油相为 1 2，紫杉醇的加入量为乙醇质量的0.5%，软磷脂为乙醇质量的6%，司班的加入量为油相的2% (ν/ν) 0水浴加热控制温度40°C搅拌30min。逐滴加入lmL2%的京尼平溶液进行交联，快速搅拌30min。用质量分数1 %的NaHCO3溶液调反应体系pH值为7. 5，快速反应 lh，除去乙醇，真空干燥即可。所得微球的平均粒径为2 μ m。实施例3将壳聚糖(分子量为3，000)溶于2wt%的柠檬酸水溶液中，配制成2% (w/v)的壳聚糖柠檬酸水溶液IOml作为水相，将紫杉醇和卵磷脂溶于乙醇中作为油相，司班80加入到油相，2500r/min机械搅拌30min使其分散均勻，将水相逐滴加入油相，其中水相/油相为 1 8，紫杉醇的加入量为乙醇质量的2%，软磷脂为乙醇质量的3%，司班的加入量为油相的6% (ν/ν) 0水浴加热控制温度50°C搅拌50min。逐滴加入lmL2%的京尼平溶液进行交联，快速搅拌30min。用质量分数1 %的NaHCO3溶液调反应体系pH值为6. 5，快速反应2h， 除去乙醇，真空干燥即可。所得微球的平均粒径为830nm。实施例4将壳聚糖(分子量为5，000)溶于2wt%的羟基乙酸水溶液中，配制成2% (w/v) 的壳聚糖羟基乙酸水溶液IOml作为水相，将紫杉醇和卵磷脂溶于乙醇中作为油相，将司班 85加入到油相，2000r/min机械搅拌IOmin使其分散均勻，将水相逐滴加入油相，其中水相 /油相为1 4，紫杉醇的加入量为乙醇质量的1%，软磷脂为乙醇质量的10%，司班的加入量为油相的10% (ν/ν) 0水浴加热控制温度40°C搅拌30min。逐滴加入lmL2%的京尼平溶液进行交联，快速搅拌50min。用质量分数2 %的NaHCO3溶液调反应体系pH值为7，快速反应池，除去乙醇，真空干燥即可。所得微球的平均粒径为1 μ m。实施例5将壳聚糖(分子量为200，000)溶于2wt%的乳酸水溶液中，配制成2% (w/v)的壳聚糖乳酸水溶液IOml作为水相，将紫杉醇和卵磷脂溶于丙酮中作为油相，司班83加入到油相，2500r/min机械搅拌20min使其分散均勻，将水相逐滴加入油相，其中水相/油相为 1 3，紫杉醇的加入量为丙酮质量的2%，软磷脂为丙酮质量的8%，司班的加入量为油相的(ν/ν) 0水浴加热控制温度70°C搅拌50min。逐滴加入2%的京尼平溶液进行交联， 快速搅拌20min。用质量分数0. 5%的NaHCO3溶液调反应体系pH值为5，快速反应5h，除去丙酮，真空干燥即可。所得微球的平均粒径为2. 5μπι。实施例6将壳聚糖(分子量为10，000)溶于2wt%的丙二酸水溶液中，配制成2% (w/v)的壳聚糖丙二酸水溶液IOml作为水相，将紫杉醇和卵磷脂溶于乙醇中作为油相，司班80加入到油相，1500r/min机械搅拌5min使其分散均勻，将水相逐滴加入油相，其中水相/油相为 1 5，紫杉醇的加入量为乙醇质量的0.7%，软磷脂为乙醇质量的5%，司班的加入量为油相的3% (ν/ν) 0水浴加热控制温度40°C搅拌50min。逐滴加入1 %的京尼平溶液进行交联，快速搅拌30min。用质量分数1 %的NaHCO3溶液调反应体系pH值为4. 5，快速反应7h， 除去乙醇，真空干燥即可。所得微球的平均粒径为3 μ m。
权利要求
1.一种用于抗癌药物释放的壳聚糖微球的制备方法，其方法如下步骤(1)将壳聚糖溶于的稀酸溶液中，配制成2%(w/v)的壳聚糖稀酸溶液作为水相， 将紫杉醇和卵磷脂溶于乙醇或丙酮中作为油相。(2)将适量乳化剂加入到油相，机械搅拌5-30min使其分散均勻，将水相逐滴加入油相，水浴加热控制温度30-70°C搅拌20-50min。(3)逐滴加入京尼平水溶液进行交联，并快速搅拌。(4)用0.5-5wt%的妝!10)3溶液调反应体系pH值，快速搅拌反应l_10h，除去乙醇或丙酮，干燥即得壳聚糖纳米微球。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤1中的壳聚糖的分子量为 3000-200，000。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤1中的稀酸溶液的酸包括甲酸、乙酸、柠檬酸、羟基乙酸、乳酸、丙二酸。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤1中的水相/油相为1 2-1 8， 紫杉醇的加入量为乙醇或丙酮质量的0. 01-1%，软磷脂为乙醇或丙酮质量的2-10%。
5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤2中司班乳化剂包括司班80、司班 83或司班85，且其司班的加入量为油相的0. 5% -10% (ν/ν)。
6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤3中京尼平水溶液为Iwt% -2wt%0
7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤2、3、4中搅拌的转速 1000-2500rpm。
8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤4中反应体系的pH值为4-9。
全文摘要
本发明公开了一种用于抗癌药物释放的壳聚糖微球的制备方法。该方法采用油包水技术，将壳聚糖溶于2wt％的稀酸溶液中，配制成2％(w/v)的壳聚糖稀酸溶液作为水相，将紫杉醇和卵磷脂溶于乙醇或丙酮中作为油相，将适量司班80加入到油相，机械搅拌5-30min使其分散均匀，将水相逐滴加入油相，水浴加热控制温度30-70℃搅拌20-50min。逐滴加入适量京尼平水溶液进行交联，快速搅拌一定时间后，用质量分数0.5-5％的NaHCO3溶液调反应体系pH值，快速搅拌反应1-10h，除去乙醇或丙酮，干燥即得壳聚糖纳米微球。
文档编号A61K9/16GK102293751SQ20111016871
公开日2011年12月28日 申请日期2011年6月17日 优先权日2011年6月17日
发明者聂俊, 马贵平 申请人:北京化工大学常州先进材料研究院