鸡新城疫-H₉亚型禽流感二联双佐剂灭活疫苗及其制备方法

专利名称：鸡新城疫-H₉亚型禽流感二联双佐剂灭活疫苗及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种双佐剂疫苗及其制备方法，尤其是指一种鸡新城疫-H9亚型禽流感二联双佐剂灭活疫苗及其制备方法。
背景技术：
中国是国际公认的养殖大国，但不是养殖强国。动物疫病的防控水平低是制约我国跨入养殖业强国序列的重要限制因素之一。禽流感、高致病性猪蓝耳病、狂犬病等动物或人畜共患病的爆发和流行，不仅使养殖业屡受重创，更引发了国民乃至于国际上对我国公共卫生、食品安全的关注和担忧，由此突显了从根本上提高我国动物疫病防控水平的紧迫性和重要性。随着我国养鸡业的发展，养殖规模和养殖密度越来越大，鸡群受疫病侵害的危险性也越来越大，据统计，我国家禽的发病率和死亡率在12% 20%以上，高于发达国家4 8倍。家禽传染病的流行一方面给养鸡生产造成了严重的经济损失，影响了农民的经济收入和养殖积极性；另一方面，又会造成鸡肉及相关产品中病原微生物和药物残留，降低肉、蛋品质，威胁人类健康。如何控制畜禽疫病的流行，全面提升动物防疫技术水平，已成为影响养鸡业可持续性发展的主要障碍和瓶颈。鸡的主要病毒性传染病有鸡新城疫(ND)、禽流感 (Al)、传染性支气管炎(IB)、减蛋综合征(EDS)、传染性法氏囊(IBD)、马立克氏病(MD)、禽网状内皮组织增生病(RE)、鸡传染性贫血病(CIA)、禽白血病(AL)等，其中大部分是能导致机体免疫抑制的疫病。鸡新城疫、禽流感是严重威胁养禽业的传染性疾病，高致病性禽流感更是世界养禽业的头号大敌，常常引起感染鸡群的大规模死亡。目前，HJ2亚型禽流感已遍布全国。虽然压队亚型禽流感病毒为低致病力毒株，即使人工感染也不一定引起死亡，但引起的产蛋下降和与其它病原混合感染或继发感染，给我国养禽业造成了巨大损失。对于该病的防治， 国内外的研究均表明，用压队亚型禽流感病毒研制禽流感油乳剂灭活疫苗，可以有效地预防该病。疫苗是应用病原微生物或其代谢产物等，经过一系列生产工艺而制备的生物制剂，应用于畜禽后可被机体很好地吸收，且无毒、无副作用和有害残留，是一种安全、高效的动物保健制剂，可以广泛用于无公害动物性食品的生产和发展健康养殖业。根据国内外动物疫病防控的实践经验，结合我国的具体国情，应用疫苗进行预防接种，是提高动物疫病防疫水平最为重要的措施之一。当前，多联疫苗已成为动物生物制品行业的研究热点，其中包括鸡新城疫-H9亚型禽流感(ND-AI(H9)) 二联油乳剂灭活疫苗，该二联苗不含活病毒，具有安全性好、免疫持续期长等优点。但是灭活疫苗仅能刺激机体产生体液免疫反应，对细胞免疫刺激作用很小，更不能调节机体的免疫功能。免疫抑制是指由于各种因素影响，使得机体对抗原的应答能力低下甚至缺失的现象。造成免疫抑制的因素很多，包括疾病、应激、营养等。由病原微生物感染而引起的免疫
3抑制尤为严重。在禽类，有些免疫抑制性疾病具有明显的临床症状，其危害易被认识到，而有些虽不表现临床症状，但由于免疫抑制使机体免疫力低下，从而造成对多种致病因子易感性增强及疫苗免疫失败。所以，家禽的免疫抑制性疾病不仅因疾病本身造成发病及死亡， 同时由免疫抑制造成的一系列恶性结果，给养禽生产带来更大的经济损失。近年来，由于家禽出现的免疫抑制问题越来越多，对免疫增强剂的研究也越来越受到有关专家的重视。现在多数研究着眼于使用各种免疫增强剂来提高机体特异性和非特异性免疫功能、防止免疫抑制的发生。常用的免疫增强剂有盐酸左旋咪唑、硒、福氏佐剂、油佐剂、维生素E、蜂胶、中药制剂(黄芪、党参、香菇等多糖物质)以及细胞因子(转移因子和干扰素、白细胞介素)寸。盐酸左旋咪唑(LMS)是一种广谱高效的抗线虫药物，以后又被发现对机体具有免疫调节作用。LMS的咪唑环可与免疫细胞上的胸腺生成素受体结合，刺激T细胞分化及对抗原的反应，增加干扰素的产量，增强巨噬细胞和中性粒细胞的吞噬作用。盐酸左旋咪唑对于细胞免疫功能受到抑制的动物作用更为明显，能将低下的免疫功能调整到正常水平。所以 LMS虽无抗微生物的作用，但可提高鸡对细菌及病毒感染的抵抗力，可使受抑制的细胞免疫功能恢复正常。目前认为，盐酸左旋咪唑对免疫反应的调节作用与剂量有关，剂量小无免疫调节作用，剂量大不但没有调节作用有时反而有抑制作用，甚至会发生中毒。只有适合的剂量才能增强机体免疫反应。因此，对于不同动物种类、同一动物不同日龄或体重、同一动物不同的使用途径和方法，其使用剂量都有差异，只有经过大量应用试验，方能找出针对某种动物适用的剂量。传统的油乳剂灭活疫苗能诱导较强的体液免疫反应，但其诱导的细胞免疫反应很弱。LMS是一种良好的免疫增强剂，它不仅能增强细胞免疫机能，还能使受抑制的吞噬细胞和淋巴细胞功能恢复正常，而且也可提高疫苗的体液免疫反应，大大增强疫苗的免疫效果。 有关LMS作为免疫增强剂应用于鸡群疫苗免疫的研究较多，主要集中在通过口服途径提高疫苗的免疫效力，而将LMS加入油乳剂灭活疫苗的报道则少见，更未见在鸡ND-AI (H9) 二联油乳剂灭活疫苗中添加LMS的报道。有关研究结果表明给6周龄雏鸡口服盐酸左旋咪唑， 对鸡新城疫病毒感染鸡可显著增加抗体滴度；用MD疫苗免疫的同时口服盐酸左旋咪唑促进了马立克氏病疫苗接种鸡细胞免疫和体液免疫的功能，外周血液中T淋巴细胞转化明显增强，血清内抗MD特异性抗体明显升高。另有报道在ND油乳剂灭活疫苗中加入适量的盐酸左旋咪唑，可以明显提高疫苗免疫鸡的HI抗体水平。有关专利资料叙述在禽霍乱油乳剂灭活疫苗水相中加入盐酸左旋咪唑和亚硒酸钠维生素E注射液，可使禽霍乱疫苗在免疫期内攻毒保护率达94. 4% 97. 6% (专利号200510027333. 4)；在禽传染性鼻炎疫苗水相中加入盐酸左旋咪唑和亚硒酸钠维生素E注射液，在免疫期内攻毒保护率达100% (专利号 200510027331.5)；将1 5%左旋咪唑加入囊尾蚴细胞液中制备成猪囊尾蚴疫苗。在所有报道和专利资料中，未见有在ND-AI (H9)灭活病毒液中添加LMS，制备成鸡ND-AI (H9) 二联双佐剂灭活疫苗的。

发明内容
本发明所要解决的技术问题是，通过抗原浓缩技术，增加鸡新城疫-H9亚型禽流感(ND-AI (H9)，下同)二联油乳剂灭活疫苗溶液单位中的抗原量，并在制苗过程中加入适合剂量的免疫增强剂——盐酸左旋咪唑(LMS)，以提高常规油乳剂灭活疫苗的免疫效力，制备出一种增效型的鸡ND-H9AI 二联双佐剂灭活疫苗。 为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是一种鸡新城疫-H9亚型禽流感二联双佐剂灭活疫苗，包括鸡ND-AI (H9) 二联油乳剂灭活疫苗、免疫增强剂盐酸左旋咪唑和油佐剂。在每ml鸡ND-AI (H9) 二联油乳剂灭活疫苗中加入了 0. 5 16mg盐酸左旋咪唑。所述油佐剂为白油佐剂，在每ml鸡ND-AI (H9) 二联油乳剂灭活疫苗中含有0. 66 0. 75ml的白油佐剂。所述白油佐剂成分的重量配比进口注射用白油94份、司班-806份和硬脂酸铝2 份。一种鸡新城疫-H9亚型禽流感二联双佐剂灭活疫苗的制备方法，包括如下步骤(1)用鸡新城疫病毒La Sota株、H9亚型禽流感病毒HP株分别接种易感鸡胚，经过孵育，收获感染胚液，通过抗原浓缩装置，将含毒胚液浓缩，再用甲醛溶液灭活，制成灭活的ND-AI (H9)混合浓缩毒液；(2)按比例将盐酸左旋咪唑准确添加到灭活的新城疫、H9亚型禽流感混合毒液中， 并在毒液中加入质量3% 5%的Tween-80 ；(4)然后将加有盐酸左旋咪唑的混合毒液按体积比1 3水油比缓缓加入到油相中，用乳化罐充分乳化，制成双佐剂灭活疫苗；(5)进行物理性状、无菌检验以及安全性和效力检验，待检验合格后，得到鸡 ND-AI (H9) 二联双佐剂灭活疫苗。所述油相为白油佐剂，白油佐剂的制备为按重量份数，将进口注射用白油94份、 司班-806份和硬脂酸铝2份充分混合后高压灭菌，冷却后待用。所述的鸡新城疫-H9亚型禽流感二联双佐剂灭活疫苗在提高鸡体液免疫、增强鸡细胞免疫、提高鸡增重率方面的应用。本发明的有益效果是本发明人在现有油乳剂灭活疫苗的基础上，开展了在鸡 ND-AI (H9) 二联油乳剂灭活疫苗中添加免疫增强剂——LMS的试验研究，旨在通过盐酸左旋咪唑免疫增强剂来启动和调节家禽的非特异性免疫功能，并特异地增强ND-AI (H9) 二联油乳剂灭活疫苗的免疫效力，最终通过鸡自身免疫抵抗力的提高和灭活疫苗的免疫作用，来预防新城疫、H9型禽流感的发生，这对避免免疫抑制、疫苗免疫失败现象的发生，增强鸡体液免疫力，防止这两种疫病的发生和流行，具有十分重要的实际意义。同时对促进生长和鸡增重也有很大的贡献。同时本发明所说的双佐剂是指由司盘-80、白油、硬脂酸铝组成的油佐剂，和盐酸左旋咪唑免疫增强剂。其中白油佐剂能起到缓释作用，持续不断地刺激机体免疫系统，与抗原物质合并使用时，能延长免疫期和增强抗原物质的免疫原性；盐酸左旋咪唑能有效地增强油乳剂疫苗的细胞免疫作用，同时也能提高疫苗的血清抗体水平。因此双佐剂的配合，可特异地增强ND-AI (H9) 二联油乳剂灭活疫苗的免疫效力并能持久地发挥免疫作用。试验证明，双佐剂用于病毒的灭活疫苗更能起到良好的增强效果。


图1是免疫不同ND-AI (H9) ニ联双佐剂灭活疫苗后鸡体重增长图；图2是免疫不同ND-AI (H9) ニ联双佐剂灭活疫苗后鸡ND抗体水平消长规律；图3是免疫不同ND-AI (H9) ニ联双佐剂灭活疫苗后鸡H9AI抗体水平消长规律；图4是接种不同ND-AI (H9) ニ联双佐剂灭活疫苗后鸡淋巴细胞转化率值；图5是免疫不同ND-AI (H9) ニ联双佐剂灭活疫苗后肉鸡体重增长图；图6是免疫不同ND-AI (H9) ニ联双佐剂灭活疫苗后肉鸡ND抗体水平消长规律；图7是免疫不同ND-AI (H9) ニ联双佐剂灭活疫苗后肉鸡H9AI抗体水平消长规律；图8是免疫不同ND-AI (H9) ニ联双佐剂灭活疫苗后肉鸡淋巴细胞转化率值。
具体实施例方式下面结合附图和具体实施方式
对本发明作进一步详细说明本发明研制的ND-AI (H9) 二联双佐剂灭活疫苗，是一种用于预防鸡新城疫、H9亚型禽流感的增效型灭活疫苗，由鸡ND-AI (H9) 二联油乳剂灭活疫苗和免疫增强剂组成，其特征是在常规鸡ND-AI (H9) 二联油乳剂灭活疫苗中每ml添加0. 5_16mg LMS免疫增强剂。用本发明提供的二联双佐剂灭活疫苗免疫蛋鸡和肉鸡，比常规疫苗的ND、AI (H9) HI抗体滴度提高0. 5 2. 0Log2,能刺激鸡体的细胞免疫系统发挥作用，并能调节受抑制的免疫功能恢复正常，能够比常规的二联苗更好地保护鸡群免受新城疫病毒(NDV)、H9型禽流感病毒(AI(H9)V)的侵袭。本发明所述的鸡ND-AI (H9) 二联双佐剂灭活疫苗，其中的免疫增强剂为盐酸左旋咪唑，购于南京白敬宇制药有限责任公司(批号为1^080似4，含量为98.5%)；新城疫种毒La Sota毒株购于中国兽医药品监察所(E5，AV1615) ;H9亚型禽流感种毒HP毒株来源于河南农大禽病研究所。本发明所述的双佐剂灭活疫苗剂型为油乳剂。本发明采用皮下注射方式，将含LMS的ND-AI (H9) 二联双佐剂灭活疫苗给SPF鸡和肉雏鸡接种，通过检测疫苗免疫刺激反应程度，较系统的研究双佐剂疫苗对鸡细胞免疫和体液免疫的影响，目的旨在探索不同剂量LMS对鸡ND-AI (H9) 二联油乳剂灭活疫苗免疫效果的影响，筛选出适合蛋鸡和肉雏鸡使用的LMS剂量，为日后规模化生产该疫苗提供科学的试验数据，并为有效地应用于鸡群奠定基础，为实现上述目的，本发明公开了如下的技术方案本发明进一步公开了一种用于预防新城疫、H9型禽流感的增效油乳剂双佐剂灭活疫苗的制备方法，按如下的步骤进行制备(1)按常规方法制备油相(油佐剂)将进口注射用白油94份、司班-806份和硬脂酸铝2份充分混合后高压灭菌，冷却后待用；(2)用鸡新城疫种毒La Sota毒株，H9型禽流感种毒HP毒株分别接种易感鸡胚， 经过孵育，收获感染胚液，通过抗原浓缩装置，将含毒胚液浓缩，再用甲醛溶液灭活，制成灭活的ND-&AI混合毒液。(3)按一定比例将盐酸左旋咪唑准确添加到灭活的ND-AI (H9)混合毒液中，并在毒液中加入质量3 5%的Tween-80，充分混合均勻，制成水相；
(4)然后将加有盐酸左旋咪唑的混合毒液按1 3水油比缓缓加入到油相(油佐剂)中，用乳化罐充分乳化，制成油乳剂灭活疫苗；(5)最后进行物理性状、无菌检验以及安全性和效力检验，待检验合格后，得到鸡 ND-AI (H9) 二联双佐剂灭活疫苗。本发明进一步公开的用于预防鸡新城疫、H9亚型禽流感的双佐剂灭活疫苗的免疫试验包括双佐剂灭活疫苗在增强SPF鸡和肉雏鸡细胞免疫和体液免疫方面的应用。同时本发明也公开了双佐剂灭活疫苗在提高鸡增重率方面的应用。具体的试验设计、方法及结果如下(一 )试验设计本研究将不同剂量的左旋咪添加到常规的鸡ND-AI (H9) 二联油乳剂灭活疫苗中， 以SPF鸡和肉雏鸡作为试验动物，通过红细胞凝集抑制试验(HI)和淋巴细胞转化试验方法，对注射双佐剂灭活疫苗后的鸡只进行血清中抗体水平和外周淋巴细胞转化率值检测评估，从而判断不同剂量盐酸左旋咪唑在鸡ND-AI (H9) 二联油乳剂灭活疫苗中的免疫增强作用。(二)鸡ND-AI (H9) 二联双佐剂灭活疫苗的制备方法本发明公开了预防新城疫、H9亚型禽流感的盐酸左旋咪唑-油佐剂双佐剂灭活疫苗的制备方法，按如下的步骤进行制备1按常规方法制备油相将注射用白油94份、司班-806份和硬脂酸铝2份充分混合后高压灭菌，冷却后待用。2将ND病毒和AI (H9)病毒分别接种10日龄和11日龄易感鸡胚，在36°C下孵育3 或4天后置-4°C下冷胚过夜待收毒；3分别收获二种接毒鸡胚尿囊液，使用浓缩装置分别浓缩ND病毒和AI (H9)病毒的尿囊液，使其尿囊液中ND病毒含量彡IO8 8EID50, H9AI病毒含量彡IO8 4EID50 ；4在浓缩后的ND病毒液和AI (H9)病毒液中加入0. 2%的甲醛进行灭活；5病毒液灭活后，在水相中加入3 5%的Tween-80混合均勻，制成水相；再加入一定剂量的盐酸左旋咪唑溶液充分混勻；6在乳化罐中将水相与油相按1 3水油比例充分混合乳化，制成双佐剂灭活疫苗；7最后进行物理性状、无菌检验以及安全性和效力检验，待检验合格后，得到 ND-AI (H9) 二联双佐剂灭活疫苗。(三)鸡ND-AI(H9) 二联双佐剂灭活疫苗的免疫效果试验本发明进一步公开的预防新城疫、H9亚型禽流感的盐酸左旋咪唑-油佐剂双佐剂灭活疫苗的免疫效果试验包括双佐剂灭活疫苗对SPF鸡和肉雏鸡在体液免疫和细胞免疫方面的应用。1鸡ND-AI (H9) 二联双佐剂灭活疫苗在SPF鸡上免疫效力的比较试验1.1试验材料1.1.1试验动物20日龄SPF蛋雏鸡70只。1. 1. 2试剂浓缩无菌新城疫和H9亚型禽流感灭活毒液、盐酸左旋咪唑、白油佐剂； 红细胞凝集抑制试验和淋巴细胞转化试验用各种试剂。
1. 1. 3设施和物品中空超滤浓缩设备，乳化设备，制苗用器皿，红细胞凝集抑制试验和淋巴细胞转化试验用药剂、物品和仪器等。1. 2试验方法1. 2. 1鸡ND-AI (H9) 二联双佐剂灭活疫苗的制备在制备ND-AI (H9) 二联双佐剂灭活疫苗时，分别在疫苗水相中加入五个不同剂量的盐酸左旋咪唑(表1)，再按水相油相 1 3比例进行乳化。1.2.2试验分组和疫苗免疫将20日龄SPF鸡分为7组，每组10只。1 5组为试验组，颈部皮下注射添加不同剂量盐酸左旋咪唑的鸡ND-AI (H9) 二联双佐剂灭活疫苗0. 5ml/ 只；第6组为常规疫苗对照组，按0. 5ml/只接种不添加盐酸左旋咪唑的ND-AI (H9) 二联油乳剂灭活疫苗；第7组为空白对照组，注射同一剂量的生理盐水(表1)。表IND-H9AI 二联双佐剂灭活疫苗中左旋咪唑添加剂量及试验分组
组另Ij左旋咪唑添加剂量(mg/ml)试验鸡数注射途径注射剂量第1组二联双佐剂灭活疫苗+110只颈部皮下0. 5 ml/只第2组二联双佐剂灭活疫苗+210只颈部皮下0. 5 ml/只第3组二联双佐剂灭活疫苗+410只颈部皮下0. 5 ml/只第4组二联双佐剂灭活疫苗+810只颈部皮下0. 5 ml/只第5组二联双佐剂灭活疫苗+1610只颈部皮下0. 5 ml/只第6组常规二联油乳剂灭活疫苗10只颈部皮下0. 5 ml/只第7组空白对照组(生理盐水)5只颈部皮下0. 5 ml/只1. 2. 3疫苗的安全性在疫苗注射后观察试验鸡的精神、饮食情况以及注射部位的炎症反应，以了解疫苗的安全性。1. 2. 4疫苗对鸡增重的影响在疫苗注射后对每只鸡进行称重，并详细记录。1. 2. 5新城疫和氏亚型禽流感HI抗体水平的检测在免疫前和免疫后10d、20d、 30d、40d、50d、60d、70d、80d、90d时，对各组鸡进行HI抗体水平的检测。1. 2. 6淋巴细胞转化试验使用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测细胞免疫功能。在注苗后10d、20d、31d、42d、Md、66d时，从1 7组各随机取5只鸡进行淋巴细胞转化试验，检测细胞免疫功能。1. 3试验结果1. 3. 1疫苗的安全性通过临床观察，接种疫苗后，除了试验5组外，其它鸡精神、吃料、饮水均正常，注射部位也无肿胀、破溃和硬结等异常变化；注射大剂量盐酸左旋咪唑灭活疫苗的第5组雏鸡有一定反应，其鸡的精神有些沉郁、吃料减少，但1 2天均恢复正常。1. 3. 2疫苗对鸡增重的影响疫苗对鸡增重的影响试验结果见表2和图1。从表2和图1可以看出，接种添加中等剂量盐酸左旋咪唑疫苗的2、3、4组SPF鸡增重效果明显，平均体重比常规疫苗组对照组多出IOOg左右。但是添加大剂量和小剂量盐酸左旋咪唑疫苗的第5、1组增重效果与未添加盐酸左旋咪唑苗组差异不显著，第5组反而有一定的抑制作用。表2免疫不同ND-AI (H9) 二联双佐剂灭活疫苗后鸡体重增长记录(g)
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权利要求
1.一种鸡新城疫-H9亚型禽流感二联双佐剂灭活疫苗，其特征在于，包括鸡ND-AI (H9) 二联油乳剂灭活疫苗、免疫增强剂盐酸左旋咪唑和油佐剂。
2.根据权利要求1所述的鸡新城疫-H9亚型禽流感二联双佐剂灭活疫苗，其特征在于， 在每ml鸡ND-AI (H9) 二联油乳剂灭活疫苗中加入了 0. 5 16mg盐酸左旋咪唑。
3.根据权利要求1所述的鸡新城疫-H9亚型禽流感二联双佐剂灭活疫苗，其特征在于， 所述油佐剂为白油佐剂，在每ml鸡ND-AI (H9) 二联油乳剂灭活疫苗中含有0. 66 0. 75ml 的白油佐剂。
4.根据权利要求3所述的鸡新城疫-H9亚型禽流感二联双佐剂灭活疫苗，其特征在于， 所述白油佐剂成分的重量配比进口注射用白油94份、司班-806份和硬脂酸铝2份。
5.一种鸡新城疫-H9亚型禽流感二联双佐剂灭活疫苗的制备方法，其特征在于，包括如下步骤(1)用鸡新城疫病毒LaSota株、H9亚型禽流感病毒HP株分别接种易感鸡胚，经过孵育，收获感染胚液，通过抗原浓缩装置，将含毒胚液浓缩，再用甲醛溶液灭活，制成灭活的 ND-AI (H9)混合浓缩毒液；(2)按比例将盐酸左旋咪唑准确添加到灭活的新城疫、H9亚型禽流感混合毒液中，并在毒液中加入质量3% 5%的Tween-80 ；(4)然后将加有盐酸左旋咪唑的混合毒液按体积比1 3水油比缓缓加入到油相中，用乳化罐充分乳化，制成双佐剂灭活疫苗；(5)进行物理性状、无菌检验以及安全性和效力检验，待检验合格后，得到鸡ND-AI(H9) 二联双佐剂灭活疫苗。
6.根据权利要求5所述的鸡新城疫-H9亚型禽流感二联双佐剂灭活疫苗的制备方法， 其特征在于，所述油相为白油佐剂，白油佐剂的制备为按重量份数，将进口注射用白油94 份、司班-806份和硬脂酸铝2份充分混合后高压灭菌，冷却后待用。
7.如权利要求1所述的鸡新城疫-H9亚型禽流感二联双佐剂灭活疫苗在提高鸡体液免疫、增强鸡细胞免疫、提高鸡增重率方面的应用。
全文摘要
本发明公开了一种鸡新城疫-H9亚型禽流感二联双佐剂灭活疫苗及其制备方法，该二联苗是由浓缩并灭活的ND和AI(H9)毒液、盐酸左旋咪唑和油佐剂组成，其中每ml灭活疫苗中含有0.5-16mg盐酸左旋咪唑免疫增强剂。使用本发明制备的增效ND-AI(H9)二联双佐剂灭活疫苗免疫鸡，能有效地提高肉、蛋鸡体液免疫及细胞免疫水平，并有促生长、提高增重率作用。该二联双佐剂灭活疫苗免疫效果明显优于常规的鸡ND-AI二联油乳剂灭活疫苗，可有效保护鸡群免受ND病毒和AI(H9)病毒的侵袭，在免疫期内不发生鸡新城疫和H9型禽流感。
文档编号A61P37/04GK102416177SQ201110412639
公开日2012年4月18日 申请日期2011年12月12日 优先权日2011年12月12日
发明者刘建, 刘海霞, 王英珍 申请人:天津瑞普高科生物药业有限公司