专利名称：十二烷基苯磺酸钠在制备治疗手足癣外用药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及十二烷基苯磺酸钠(sodium dodecylbenzene sulfonate，英文缩写 SDBS)在制备治疗手足癣外用药物中的应用。手足癣是发生于掌、跖与指、趾间皮肤的浅部真菌感染。致病菌主要有红色毛癣菌、须癣毛癣菌和絮状表皮癣菌，近年来白念珠菌也不少见。足癣俗名脚气。是指皮肤癣菌侵犯趾、趾间、跖部皮肤所引起的感染。症状为足趾间发生水疱，脱屑或皮肤发白湿软，也可发生糜烂或皮肤增厚、粗糙、皲裂，易蔓延至脚底及脚背边缘，剧痒，故常因抓破伴有继发感染，致局部化脓、红肿、疼痛，腹股沟淋巴结肿大，甚至形成小腿丹毒及蜂窝组织炎。由于用手抓痒处，常传染至手而发生手癣(鹅掌风)。真菌喜爱潮湿温暖的环境，夏季天热多汗，穿胶鞋、尼龙袜者更是为真菌提供了温床。手足癣是一种接触传染病，会因共用面盆、脚盆、脚巾、手巾、拖鞋及澡盆而迅速传播。近年来，随着广谱抗生素、皮质类固醇激素以及免疫抑制剂的广泛应用、先进诊疗技术如器官移植的开展，糖尿病、AIDS的流行，以及肿瘤放、化疗的影响，手足癣无论是在发生频率还是在致病菌种方面都在不断增加。与此同时，目前临床所应用的抗真菌药物种类少，特异性低、易耐药、价格昂贵，难以满足临床治疗的需要。因此，迫切需要开发高效、广谱、低毒、经济的抗真菌药物。十二烷基苯磺酸钠结构式为
分子式为C18H29SO3Na,分子量为348. 48 ；根据烷基异构之不同又可分为硬性SDBS及软性SDBS两种。SDBS属阴离子型表面活性剂，是合成洗涤剂中的主要成分；它易溶于水，在酸性、碱性、硬水及某些氧化液中都很稳定。能减低液体的表面张力，并能吸附于细菌表面， 改变其细胞壁的通透性，使菌体内的酶、辅酶、代谢中间产物溢出，呈现杀菌作用。SDBS是低毒或无毒产品，大鼠经口 LD50 :1288mg / kg。经国内外数十年的研究和应用证明，短期内小剂量低浓度(<4%)外用，既不会引起急、慢性中毒及肝脏损害，对皮肤亦没有明显刺激作用。美国曾作过人身实验，成年犯人每天口服l.Og，连服65天，经检查血、尿、肾功能和肝功能等均未发现异常。无致癌、致畸、致突变。日本曾组织数所大学进行实验，结果证明20^^5^^1% SDBS外用在妊娠母鼠的皮肤上，既没有引起胎儿畸形，也没有致癌、致突变作用。我国在这方面已进行了大量研究，薛京伦等证明，SDBS不存在致癌、 致畸、致突变作用。表面活性剂SDBS具有对皮肤的浸透作用，一部分从毛囊管浸入，而大部分是透过皮脂腺的细胞膜浸透到皮肤组织内而进入人体内的。同时实验证明，SDBS进体内并不蓄积，而是从粪尿中排泄出去。总之，大量的研究和试验表明，低浓度的SDBS外用是安全的。现有技术中只报道了 SDBS作为表面活性剂，还没有关于SDBS用于治疗手足癣的文献报道。因此，将SDBS开发为具备低毒高效性质的新型治疗手足癣外用药物具备广泛的
背景技术：
应用前景，并具备良好的经济价值和市场潜力。
发明内容
本发明的目的是提供SDBS在制备治疗手足癣外用药物中的应用。其中所述的药物为软膏。软膏的组成为按照重量百分比将十二烷基苯磺酸钠粉末1%与硬脂酸9%、单甘脂 3%、十六醇1%、十八醇1%、液体石蜡1%、羊毛脂11%、蒸馏水64. 5%、甘油8%、三乙醇胺0. 5% 混合加工得到1%的十二烷基苯磺酸钠软膏，然后分装成20克规格的软膏剂。1%的十二烷基苯磺酸钠软膏的配置过程为按照上述比例将甘油加入蒸馏水中， 加热至85°C，并保持此水温，制成水相；另将硬脂酸、单甘脂、十六醇、十八醇、液体石蜡、羊毛脂、十二烷基苯磺酸钠混于同一容器中，置水浴上加热使之熔化，并保持溶解状态，制成油相；将水相缓慢地加入到油相中，边加边按同一方向搅拌调配；在搅拌调配的同时加入三乙醇胺乳化，冷却凝固，即得到1%的十二烷基苯磺酸钠软膏。本发明的有益效果如下
首先证明了 SDBS体外具有有效抗真菌的作用。1、体外抗真菌活性试验结果显示，SDBS对红色毛癣菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌有明显的抑菌作用。试管法结果表明，SDBS的最小抑菌浓度(MIC)范围为红色毛癣菌 0. 0313%、须癣毛癣菌0. 0625%、絮状表皮癣菌0. 0625%、白色念球菌0. 2500%。2、临床对30例手足癣志愿者进行治疗，治愈率高达66. 67%，总有效率93. 33 %，未见有明显不良反应发生。
具体实施例方式选用人工合成的SDBS原料，产自上海盛众精细化工有限公司。批号20100816。执行质量标准行标。产品规格高纯度。含量彡95%。实施例1:软膏的制备
1% (5%)十二烷基苯磺酸钠软膏制备
处方组成=SDBS 1% (或5%)、硬脂酸9%、单甘脂3%、十六醇1%、十八醇1%、液体石蜡1%、 羊毛脂11%、蒸馏水64. 5% (60. 5%)、甘油8%、三乙醇胺0. 5%。制备工艺
水相制备将甘油加入蒸馏水中，加热至85°C，并保持此水温。油相制备将硬脂酸、单甘脂、十六醇、十八醇、液体石蜡、羊毛脂、SDBS混于同一容器中，置水浴上加热使之熔化，并保持溶解状态。两相混合+乳化将水相缓慢地加入到油相中，边加边按同一方向搅拌调配；在搅拌调配的同时加入三乙醇胺乳化，冷却凝固，即得到1%或5% SDBS0基质的制备将上述处方中的1%十二烷基苯磺酸钠去掉，羊毛脂由11%提高到 12%，用同样办法制备基质。下面通过实验例1进一步阐明本发明SDBS在制备治疗手足癣的使用效果。
实验例1 十二烷基苯磺酸钠体外抗真菌活性实验研究一、SDBS抑菌试验
1.材料
1.1药物1%SDBS软膏青岛大学医学院附属医院制剂科提供。取1% SDBS (8磅灭菌)，4°C保存备用。用前倍比系列稀释，共稀释10个浓度(0. 5%-0. 0001%)。1.2实验菌种由青岛大学医学院附属医院皮肤科真菌室提供。红色毛癣菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌、白色念珠菌。1. 3 培养基沙氏琼脂平板(SDA)，由1%蛋白胨、4%葡萄糖、002%氯霉素、2%琼脂组成。2、实验方法
2.1活化菌株红色毛癣菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌、白色念珠菌用SDA，培养温度为25-27°C，培养7天。2. 2制作菌悬液挑取芝麻粒大菌落一团，溶于灭菌蒸馏水1 mL.充分混合均勻， 调节菌悬液浊度至3X 106CFU/mL的菌液。2. 3制作含菌平板以无菌棉签蘸取菌悬液并在管壁挤去多余液体后，将菌悬液均勻涂布于实验用培养基平板表面。2. 4打孔加药以直径7mm的打孔器在涂菌后的培养基上打扎，将孔内的琼脂挑去后分别将不同浓度SDBS 50ul加入孔内，使药物与孔边缘充分接触，勿使药物沾染孔外
琼脂平面。2. 5结果观察白色念珠菌菌丝态置于37°C，其余菌株置25-27°C培养。观察各药孔周围抑菌圈大小并记录其直径的cm值，抑菌圈内有无细小菌落；并在低倍显微镜下观察抑菌圈内实验菌的形态大小及细小菌落的形态特征，并涂片革兰氏染色，镜检观察菌体大小、形态结构、染色反应。根据加SDBS部位形成抑菌圈及抑菌圈内接种的实验菌、细小菌落中菌体大小、形态结构、染色反应的改变判断对实验菌的抗菌作用。3、试验结果
3.1接种红色毛癣菌的平板于48小时在加0. 0156%SDBS及以上浓度的部位均形成直径1. 4-1. 7cm的抑菌圈，72小时后0. 0156%_0· 0625% SDBS的抑菌圈内形成细小菌落，菌落数量随SDBS量增加而减少。镜下见加0. 0313%-0. 0625% SDBS的抑菌圈内的实验菌呈单个分散存在，或形成菌落，细小菌落为颗粒状，菌落中部的菌体膨大或破裂。革兰氏染色片镜检见大量菌体膨大呈球形、不规则或粗长丝状的革兰氏阴性或阳性细胞，革兰氏阴性细胞内有呈革兰氏阳性的斑块或颗粒，或菌体裂解释放大量颗粒，及细胞结构疏松或呈空壳状的细胞。3.2 接种须癣毛癣菌和絮状表皮癣菌的平板皆于48小时后在加0.0313% SDBS 及以上浓度的部位分别形成直径1.3-1. 8cm和1.2-1. 6cm的抑菌圈，72小时后在加 0. 0313%-0. 0625%SDBS的抑菌圈内皆有针尖大小的菌落，菌落数量随SDBS量增加而减少。 镜下见抑菌圈内的实验菌呈单个分散存在，或形成颗粒型L型菌落，菌落中部菌体显著膨大或裂解。革兰氏染色镜检见大量菌体膨大呈巨球形或大小不一形态各异的革兰氏阴性或阳性细胞，革兰氏阴性细胞内有呈革兰氏阳性的颗粒，或菌体裂解释放大量颗粒。细胞结构呈空壳状。
实验结果显示微量SDBS对红色毛癣菌和须癣毛癣菌及絮状表皮癣菌有较强抑菌作用。二、试管法测定SDBS的抑真菌MIC 1、材料
1. 1 药物1%SDBS 青岛大学医学院附属医院制剂科提供。取1% SDBS (8磅灭菌)， 4°C保存备用。用前倍比系列稀释，共稀释10个浓度(0. 5%-0. 0001%)。1. 2实验菌种由青岛大学医学院附属医院皮肤科真菌室提供。红色毛癣菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌、白色念珠菌。2、方法
2.1药基配制对照管(单纯沙氏琼脂)不加药物。培养基含药浓度为倍比稀释，即 0. 50%,0. 25%,0. 125% 至 0. 0001% 共 10 个浓度。2. 2菌液制备取25_27°C温度下SDA培养2周菌种置消毒乳钵，挑取芝麻粒大菌落一团，溶于灭菌蒸馏水1 mL.充分混合均勻，调节菌悬液浊度至3X106CFU/mL的菌液。白色念珠菌直接稀释。2.3菌液接种及结果观察每管不同浓度含药培养基分别接种50 Ul菌液，白色念珠菌菌丝态置于37°C，其余菌株置25-27°C生化培养箱培养。白色念珠菌孵育小时，其它试验菌孵育48-72小时看结果，含最小药物浓度管，若无真菌生长则为最小抑菌浓度(MIC)。3、试验结果
试管法测试SDBS抗真菌MIC 对照组接种后，一般均在1-3天开始生长。试管法SDBS 的MIC范围为0. 0313%-0. 2500%,以红色毛癣菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌效果最好，对白色念球菌效果较差。结果见表1
表1 SDBS对真菌MIC测定结果
Η·································································································································
试验例2 =SDBS I期临床试验研究
1、试验材料
基质、1%SDBS (标准体)软膏、5%SDBS (5倍体)软膏皆由青岛大学医学院附属医院制剂科提供配制。2、方法
2.1受试者的选择条件经过体检无皮肤病，无药物接触过敏史，四周内未参加其他皮肤外用药物试验，年龄在18至60岁之间的健康人。2. 2分组选取符合上述条件的受试者20人，分成SDBS标准组和5倍体组各10 人，每组男女各5人，随机分组。先观察标准组，无反应后再观察5倍体组。
2. 3给药方法SDBS与基质按斑贴方法给予，即在左前臂屈侧皮肤贴敷2X 2cm2 面积的SDBS，右侧皮肤贴敷同样面积的基质作为对照，覆盖纱布和玻璃纸，保留M小时。2. 4观察指标及时间贴敷后对、48、7池及至7d，观察局部皮肤反应和自觉症状 (痛、痒)，并用分级法记录结果。3、实验结果
SDBS标准组和基质对照组试验均为阴性，而5倍体组有2例于M小时出现红斑及瘙痒，无水泡，分别于72小时皮疹及瘙痒消失。结果见表2。表2 SDBS皮肤反应结果
权利要求
1.十二烷基苯磺酸钠在制备治疗手足癣外用药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的药物为软膏。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，按照重量百分比将十二烷基苯磺酸钠粉末1%与硬脂酸9%、单甘脂3%、十六醇1%、十八醇1%、液体石蜡1%、羊毛脂11%、蒸馏水 64.5%、甘油8%、三乙醇胺0.5%混合加工得到1%的十二烷基苯磺酸钠软膏，然后分装成20 克规格的软膏剂。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，1%的十二烷基苯磺酸钠软膏的配置过程为按照权利要求2的比例将甘油加入蒸馏水中，加热至85°C，并保持此水温，制成水相；另将硬脂酸、单甘脂、十六醇、十八醇、液体石蜡、羊毛脂、十二烷基苯磺酸钠混于同一容器中， 置水浴上加热使之熔化，并保持溶解状态，制成油相；将水相缓慢地加入到油相中，边加边按同一方向搅拌调配；在搅拌调配的同时加入三乙醇胺乳化，冷却凝固，即得到1%的十二烷基苯磺酸钠软膏。
全文摘要
本发明提供十二烷基苯磺酸钠在制备治疗手足癣外用药物中的应用。
文档编号A61P31/10GK102488679SQ20111044213
公开日2012年6月13日 申请日期2011年12月27日 优先权日2011年12月27日
发明者刘占涛, 刘肃, 匡瑞霞, 臧运书, 葛红芬 申请人:青岛大学医学院附属医院