专利名称：无岩藻糖基化CD20抗体与mTOR抑制剂的联合疗法的制作方法
无岩藻糖基化CD20抗体与mTOR抑制剂的联合疗法本发明涉及无岩藻糖基化CD20抗体与mTOR抑制剂用于治疗癌症的联合疗法。
背景技术：
无岩藻糖基化的抗体单克隆抗体的细胞介导的效应器功能可以通过工程化改造其寡糖组分来增强，如记载于 Umana, P.等，Nature Biotechnol. 17 (1999) 176-180 及 US 6，602，684 的。IgGl型抗体(即在癌症免疫疗法中最常使用的抗体)是在每个CH2域中的Asn297处具有保守的N连接的糖基化位点的糖蛋白。附着于Asn297的两个复合双触角寡糖掩埋于各CH2域间，与多肽主链形成广泛的接触，并且其存在对于抗体介导效应器功能诸如抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)是至关重要的(Lifely, M. R.等，Glycobiology5 (1995) 813-822; Jefferis, R.等，Immunol. Rev. 163 (1998) 59-76 ; Wright, A 和Morrison, S. L. , Trends Biotech. 15 (1997) 26-32)。 Umafia: P.等.NatureBiotechnol. 17(1999) 176-180 和 WO 99/54342 显示了 β (1，4)-N-こ酰葡糖胺转移酶IIK “GnTIII”)(一种催化两分型寡糖形成的糖基转移酶)在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中的过表达显著提高抗体的体外ADCC活性。N297碳水化合物的组成变化或其消除也影ロ向 Fe 结合 Fe Y R和 C Iq (Umana P.等，Nature Biotechnol. 17 (1999) 176-180; Davies, J.等，Biotechnol. Bioeng. 74 (2001) 288-294 ;Mimura, Y.等，J. Biol. Chem. 276 (2001) 45539-45547; Radaev, S.等，J. Biol. Chem. 276 (2001) 16478-16483; Shields, R. L.等，J. Biol. Chem. 276(2001)6591-6604;Shields, R. L.等，J. Biol. Chem. 277(2002)26733-26740;Simmons,L. C.等，J. Immunol. Methods 263(2002) 133—147)。Ii da, S.等，Clin. Cancer Res. 12 (2006) 2879-2887 显示了通过添加岩藻糖基化抗CD20抑制无岩藻糖基化抗CD20抗体的效カ。无岩藻糖基化的和岩藻糖基化的抗CD20的1:9混合物(10微克/mL)的效カ次于单独的无岩藻糖基化抗⑶20的1，000倍稀释液(0. 01微克/mL)的效力。他们推断出不包含岩藻糖基化对应物的无岩藻糖基化IgGl可以经由其高的Fe Y RIIIa结合而逃避血衆IgG对ADCC的抑制效果。Natsume, A.等在J. ImmunoI.Methods 306(2005)93-103中显示了自人IgGl型抗体的复合型寡糖消除岩藻糖导致抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)的大大增强。Satoh，M.等，Expert Opin. Biol. Ther. 6(2006) 1161-1173讨论了无岩藻糖基化治疗性抗体作为下一代治疗性抗体。Satoh推断出认为仅由无岩藻糖基化人IgGl形式组成的抗体是理想的。Kanda, Y.等，Biotechnol.Bioeng. 94(2006)680-688比较岩藻糖基化CD20抗体(96%岩藻糖基化，CH0/DG441H5)与无岩藻糖基化 CD20 抗体。Davies, J.等，Biotechnol. Bioeng. 74(2001) 288-294报告了，对于⑶20抗体，升高的ADCC与升高的对Fe Y RIII的结合相关联。通过减少岩藻糖量来增强单克隆抗体的细胞介导的效应器功能的方法记载于例如 WO 2005/018572、WO 2006/116260、WO 2006/114700、W02004/065540、WO 2005/011735、WO 2005/027966,WO 1997/028267,US2006/0134709,US 2005/0054048、US 2005/0152894、WO 2003/035835、W02000/061739、Niwa, R.等，J. Immunol. Methods 306 (2005) 15 ト 160 ；Shinkawa, T.等，J. Biol. Chem. 278 (2003) 3466 - 3473 ；W0 03/055993 或 US2005/0249722。⑶20和抗⑶20抗体⑶20分子(又称作人B淋巴细胞限制性分化抗原或Bp35)是ー种位于前B和成熟B淋巴细胞上的具有约35kD分子量的疏水性跨膜蛋白(Valentine，M.A.等，J. Biol.Chem. 264(1989) 11282-11287;及 Einfeld, D. Α·等，EMBO J. 7(1988)711-717;Tedder, T.F.等，Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 85 (1988) 208-212 ; Stamenkovic, I.等，J. Exp.Med. 167 (1988) 1975-1980; Tedder, T. F.等，J. Immunol. 142 (1989) 2560-2568)。CD20 在来自外周血或淋巴样器官的大于90%的B细胞表面上有找到，并且在早期前B细胞发育期间表达，而且保持到浆细胞分化。⑶20存在于正常B细胞及恶性B细胞两者上。特别地，⑶20在大于90%的B细胞非何杰金(Hodgkin)氏淋巴瘤(NHL)上表达(Anderson, K. C.等，Blood63(1984) 1424-1433))，但是在造血干细胞、原B细胞、正常的浆细胞、或其它正常的组织上没有找到(Tedder, T. F.等，J, Immunol. 135(1985)973-979)。CD20蛋白的85个氨基酸的羧基端区位于胞质内。此区的长度与其它B细胞特异性表面结构诸如IgM、IgDjP IgG重链或组织相容性抗原类Ila或β链(其分别具有3、3、28、15、和16个氨基酸的相对较短的胞质内区)的长度形成对比(Komaromy’M.等NAR11 (1983) 6775-6785)。在最后61个羧基端氨基酸中，21个是酸性残基，而仅2个是碱性，指示此区具有强的净负电荷。GenBank登录号是NP-690605。认为⑶20可能牵涉调节B细胞的活化和分化过程中的早期步骤(Tedder, T.F.等，Eur. J. Immunol. 16 (1986) 881-887),并且可以发挥钙离子通道的功能(Tedder, T. F.等，J. Cell. Biochem. 14D(1990) 195)。存在着在其CD20结合模式和生物学活性上显著差异的两种不同类型的抗CD20 抗体(Cragg, M. S.等，Blood 103(2004)2738-2743 ；及 Cragg, M. S.等，Blood 101 (2003) 1045-1052) ο I型抗体，如例如利妥昔单抗(rituximab)在补体介导的细胞毒性中是有力的，而II型抗体,如例如托西莫单抗(Tositumomab) (BI)、11B8、AT80或人源化B-Lyl抗体经由不依赖于胱天蛋白酶的凋亡及伴随的磷脂酰丝氨酸暴露而有效启动靶细胞死亡。表I中汇总了 I型和II型抗⑶20抗体共享的共同特征。表I :1型和II型抗⑶20抗体的特性
权利要求
1.具有60%或更少的岩藻糖量的无岩藻糖基化抗CD20抗体用于制造与mTOR抑制剂联合治疗癌症的药物的用途。
2.依照权利要求I的用途，其特征在于岩藻糖量在40%和60%之间。
3.依照权利要求I的用途，其特征在于岩藻糖量是50%或更小。
4.依照权利要求I至3中任一项的用途，其特征在于所述癌症是表达⑶20的癌症。
5.依照权利要求4的用途，其特征在于所述表达CD20的癌症是B细胞非何杰金氏淋巴瘤(NHL)。
6.依照权利要求I至5中任一项的用途，其特征在于所述无岩藻糖基化抗CD20抗体是II型抗⑶20抗体。
7.依照权利要求I或6的用途，其特征在于所述抗体是人源化B-Lyl抗体。
8.依照权利要求7的用途，其特征在于所述mTOR抑制剂是雷帕霉素、或雷帕霉素类似物或衍生物。
9.依照权利要求7的用途，其特征在于所述mTOR抑制剂是坦西莫司或依维莫司。
10.依照权利要求I至9中任一项的用途，其特征在于施用一种或多种另外的其它细胞毒剂、化疗剂或抗癌剂、或增强此类药剂的效果的化合物或电离辐射。
11.一种用于治疗癌症的组合物，其包含具有60%或更少的岩藻糖量的无岩藻糖基化抗CD20抗体和mTOR抑制剂。
12.依照权利要求11的组合物，其特征在于所述无岩藻糖基化抗CD20抗体是人源化B-Lyl抗体。
13.一种治疗患有癌症的患者的方法，其通过对需要此类治疗的患者施用与mTOR抑制剂组合的具有60%或更少的岩藻糖量的无岩藻糖基化抗CD20抗体。
14.依照权利要求13的治疗方法，其特征在于岩藻糖量在40%和60%之间。
15.依照权利要求13或14的治疗方法，其特征在于所述癌症是B细胞非何杰金氏淋巴瘤(NHL)。
全文摘要
本发明涉及无岩藻糖基化抗CD20抗体与mTOR抑制剂用于治疗癌症的联合疗法，特别地涉及用无岩藻糖基化的人源化B-Ly1抗体和mTOR抑制剂诸如坦西莫司或依维莫司对表达CD20的癌症的联合疗法。
文档编号A61K31/00GK102844049SQ201180018255
公开日2012年12月26日 申请日期2011年4月21日 优先权日2010年4月27日
发明者F.赫廷, C.克莱恩 申请人:罗切格利卡特公司