专利名称：至少一种二烷基硫代磺酸酯或硫代亚磺酸酯用于减少动物中的顶复动物亚门的数量的应用的制作方法
至少一种二烷基硫代磺酸酯或硫代亚磺酸酯用于减少动物中的顶复动物亚门的数量的应用本发明涉及至少一种二烷基硫代磺酸酯或硫代亚磺酸酯用于减少存在于家禽或猪等单胃动物，或者牛、绵羊或山羊等反刍动物中的顶复动物亚门(ap i comp I exa )的数量的应用。
背景技术：
顶复动物亚门或孢子虫纲(sporozoa)是单细胞生物，是脊椎动物或无脊椎动物的寄生虫。这些寄生虫能够引起各种病理状况。因此，例如，禽球虫病(Avian coccidiosis)是一种严重扰乱家禽摄食和生长的常见肠道原虫感染，由顶复动物亚门族、特别是艾美尔球虫属的几种寄生虫引起，这些寄生虫感染肠道并通过摄取受感染的卵囊从一个动物传播给另一个动物。新孢子虫和隐孢子虫、其他隶属顶复动物亚门族的生物也能够感染动物的肠道。所有这些感染都给养殖业造成了经济损失，而目前没有有效对抗它们的疫苗。控制这类型感染的传统策略都非常昂贵，因为它们主要是基于化学药物预防。此外，不断出现耐药菌株(例如，艾美尔球虫株)，再加上工业化家禽养殖中强化调控以及抗双孢子球菌(coccidia)的药物的禁用，意味着需要新的疾病控制的方法和策略。由于宿主免疫和寄生虫生命周期的复杂性，开发新的干预策略或新的抗顶复动物亚门的疫苗被证明是相当困难的。因 此，目前的趋势是采用基于活寄生虫的疫苗来控制球虫病。至少有10种这类疫苗在全世界范围内可商购 。所有这些疫苗都依靠受感染的活卵囊，以便产生意图引起自然免疫的真正的感染，该自然免疫保护3到4周龄(与多数球虫病爆发的时间相对应)的雏鸡。这种疫苗接种技术的主要缺点是活卵囊只能由活雏鸡产生，这需要大量的工作，涉及许多操作。文献US2006/122266提到其它化合物中蒜素治疗疟疾的应用，蒜素是二烯丙基硫代亚磺酸酯，即二亚烷基硫代亚磺酸酯，因此是含有2个不饱和键的产品。文献EP2110128列举了丙基硫代亚磺酸丙基酯(PTS)和丙基硫代磺酸丙基酯(PTSO)作为抗菌和抗微生物的化合物；这些文献中列举的所有生物都是细菌，即原核生物，而顶复动物亚门是真核生物；原核生物与真核生物的细胞结构完全不同。文献W02004/084645涉及蒜素的应用。该文献中没有提及或暗示抗顶复动物亚门的应用。WPI 数据库(Week 199838，Thomson Scientific, London, GB, AN1998-440169&HU9602190A2，1998年5月28日)的摘录中提到应用蒜油、百里酚、薄荷油、柑橘油以及稀释剂或载体的组合来治疗和预防球虫病；由于这些化合物中有大量各种成分，本文献中没有任何记载关于这些组分中哪些单独或者与其他成分的组合是活性的。Lewis 等人的出版物(“effects of dietary inclusion of plant extracts onthegrowth performance of male broiler chickens，，，British Poultry Science (英国家禽科学杂志)，朗文集团，GB LNKD-DO1: 10. 1080/00071660301940，第44卷，第I期增刊，2003年 I 月 I 号，第 S43 页，XP008104094ISSN:0007-1668)以及E. Demir 等人的出版物(“Theuse of natural feed additives as alternatives asalternatives for an antibioticgrowth promoter in broiler diets，，, British PoultryScience (英国家禽科学杂志)，朗文集团，GB LNKS-DO1: 10. 2080/00071660301944，第 44 卷，第 I 期增刊，2003 年 I 月 I 号，第S44-S45页，XP008104095ISSN: 0007-1668)涉及被迫摄取各种化合物(包括蒜)的动物的生长；这些文献中提及对顶复动物亚门没有影响。文献US2009/018194涉及PTS或PTSO用于治疗植物的应用。文献EP1721534涉及葱属的衍生物作为防腐剂在食品和食品加工业中的应用。发明概沭本发明的主要目的是对抗存在于家禽或猪等单胃动物，或牛、绵羊或山羊等反刍动物体内的顶复动物亚门。本发明者所进行的研究使他们能够找到可破坏顶复动物亚门的试剂。令人惊奇的是，这些试剂是已知的化合物，二烷基硫代亚磺酸酯和硫代磺酸酯，特别是二正丙基硫代亚磺酸酯和二正丙基硫代磺酸酯，在下文的描述中，分别被称为PTS和PTS0。应用这些化合物已经证明是对破坏顶复动物亚门、特别是艾美尔球虫(Eimer ia)尤为有效。此外，这些化合物能够独立于使用它们的动物且从天然产物中产生或通过有机合成产生，即不需要卵囊。 而且，它们具有令人惊奇的优点，即即使在极低剂量也是有效的。现在将在下面参考所附的单张附图
所给出的描述中详细地描述本发明的其它特征和优点，该附图是表示作为所使用的化合物的函数的子孢子(spOTozoites)数量减少的比较图。发明详述二烷基硫代亚磺酸酯和硫代磺酸酯是对应于下式F的化合物式F :F-SOa-S-R,其中，R和R’相同或不同，各表不烧基基团；且a 为 I 或 2。优选地，所述烷基基团R和R’包含1-5个碳原子。而且，丙基基团通常是正丙基基团，更适合用作R和R’基团。 在式F的一个化合物和相同的化合物中，优选所述R和R’基团相同。对于二烷基硫代亚磺酸酯，式F中的a为I。对于二烷基硫代磺酸酯，a为2。有利的是，将二丙基硫代亚磺酸酯和/或二烷基硫代磺酸酯、特别是PTS或PTSO用作式F的化合物。事实上，虽然PTS可以是合成的产品，但是它能够有利地从隶属葱科(根据APG亲缘分类)的植物中提取，特别是从隶属葱属(葱科的成员)的植物中提取。隶属葱属的最知名的植物是韭葱(Allium ampeloprasum)、洋葱(AlliumcepaL.)、种植的蒜(Allium sativum L.)、火葱(Allium ascalonicum)、大葱(Alliumfistulosum L.)和细香葱(Allium schoenoprasum L.)。根据本发明,优选使用蒜、特别是种植的蒜(Allium sativum L.)的提取物。通常是蒜球的提取物。PTSO能通过合成或分解(或氧化)PTS获得。提取获得PTS和获得PTSO的方法具体记载在专利申请EP-A1-1721534第15页第34行到第16页第26行中。所述硫代亚磺酸酯也能够根据记载在专利申请FR-A-2813884中的方法获得。当然，可以使用任何比例的下列物质的混合物-若干二烷基硫代亚磺酸酯；-若干二烷基硫代磺酸酯；-至少一种二烷基硫代亚磺酸酯和至少一种二烷基硫代磺酸酯。研究已经表明，动物、特别是家禽不会对这些化合物产生抵抗作用，从而使它们在工业养殖中的应用特别有利。 PTS和/或PTSO以预防药物使用。对于它们的预防性应用，可将二烷基硫代亚磺酸酯和/或硫代磺酸酯添加到动物的饲料中，例如，通过每天将它们与动物的食物进行混合。然后,所使用的量通常为2mg-60mg/千克饲料干物质。它们能够任选地根据动物饮用的平均水量在给予动物的水中以l_30mg/升水的比例稀释。本发明适用于家禽或猪等单胃动物，或牛、绵羊或山羊等反刍动物。比较例测试了下列化合物的抗寄生虫特性-含有6wt%的辣椒素与二氢辣椒素的混合物的辣椒油树脂(辣椒红色素)；-香芹酚；-肉桂醛；-姜黄素；-茴香脑；-PTS (本发明的)；-PTSO (本发明的)；和-被称为“Garlicon40”的本发明提取物，其含有400ppm有机硫化合物(其特征是为蒜 / 洋葱)、6. 7wt% 的 PTS 和 34. 3wt% 的 PTSO0制备由含有IOOppm上述试验化合物的水溶液组成的第一系列样品和仅含有IOppm这些化合物的第二系列样品。接下来，为了能够测试上述化合物对艾美尔球虫的影响，进行如下操作。从柔嫩艾美尔球虫(Eimeria tenella)获得新鲜的孢子化的卵囊，并储存于4°C下2. 5% (重量/体积)的重铬酸钾溶液中，直到使用。然后，用漂白剂对卵囊灭菌，然后分离孢子虫。卵囊的壁采用球磨机(具有O. 5mm的球)机械破坏5-7秒。再将所得到的产物于41°C下在含有O. 014mol/l的牛磺酸脱氧胆酸和O. 25wt%的胰蛋白酶的PBS缓冲溶液中培养45分钟，以释放所述子孢子。将经脱囊释放的流体过滤，将收集到的子孢子在4°C下用RPM1-1640培养基以每分钟2100转的速度搅拌来洗涤三次。然后，制备每毫升106个子孢子的溶液，再用相同体积的测试化合物的样品进行培养24小时。然后，根据台盼蓝染色排除法测定子孢子的成活力。在所附的单张图上能看到所述结果，图中位于每列上方的数字表示相应的化合物所抑制的百分比，化合物名称后的数字表示该化合物的浓度。还用对照溶液(不含测试化合物)进行了测量，在图中称为“对照”。首先，除了茴香脑外，似乎测试的所有化合物在IOOppm的浓度都对柔嫩艾美尔球虫的子孢子具有明显抑制或破坏作用(至少61%);其次，姜黄素、肉桂醛、香芹酚、PTS、PTSO和Garlicon 40提取物似乎是最有效的(至少74%) 。此外，惊奇地注意到，只有PTS和PTSO在仅IOppm的浓度水平显示出高有效性，分别为87%和61%。更重要的是，PTSO在IOppm甚至令人惊奇地比在IOOppm时具有更高的有效性。
权利要求
1.至少一种与下式F相对应的化合物用于减少单胃动物或反刍动物体中的顶复动物亚门的数量的预防性应用，式 F : R-SOa-S-R, 其中，R与R'可以相同或不同，各表示烷基基团；以及 a为I或2。
2.如权利要求1所述的应用，其中，在式F中，所述的R与R’基团是包含1-5个碳原子的烧基基团。
3.如权利要求2所述的应用，其中，在式F中，所述的R与R’基团是丙基。
4.如权利要求1-3中任一项所述的应用，其中，所述的R与R’基团相同。
5.如权利要求1-4中任一项所述的应用，其中，在式F中，a为I。
6.如权利要求1所述的应用，其中，式F的化合物为二丙基硫代亚磺酸酯。
7.如权利要求1-4中任一项所述的应用，其中，在式F中，a为2。
8.如权利要求1所述的应用，其中，式F的化合物为二丙基硫代磺酸酯。
9.如权利要求1-8中任一项所述的应用，其中，式F的化合物至少部分地为隶属葱科家族(family Alliaceae)的植物的提取物的形式。
10.如权利要求9所述的应用，其中，式F的化合物至少部分地为隶属葱属(Alliumgenus)的植物的提取物的形式。
11.如权利要求10所述的应用，其中，所述的葱属的植物为种植的蒜(大蒜(Alliumsativum L.))。
12.如权利要求1-11中任一项所述的应用，其中，所述动物为单胃动物。
13.如权利要求12所述的应用，其中，所述动物为家禽。
14.如权利要求1-11中任一项所述的应用，其中，所述的动物为反刍动物。
15.如权利要求14所述的应用，其中，所述动物为牛科动物。
16.如权利要求1-15中任一项所述的应用，其中，所述的顶复动物亚门为双孢子球菌。
17.如权利要求16所述的应用，其中所述的双孢子球菌为艾美尔球虫。
18.如权利要求1-15中任一项所述的应用，其中，所述的顶复动物亚门为新孢子虫属或隐孢子虫属。
19.如权利要求1-18中任一项所述的应用，按2-60mg/千克饲料干物质的比例或l-30mg/升饮用水的比例使用。
全文摘要
本发明涉及应用至少一种二烷基硫代磺酸酯或硫代亚磺酸酯以减少家禽或猪等单胃动物，或者牛、绵羊或山羊等反刍动物中的顶复动物亚门，例如，球孢子菌属、特别是艾美尔球虫的数量。
文档编号A61P33/02GK103037856SQ201180024972
公开日2013年4月10日 申请日期2011年4月1日 优先权日2010年4月1日
发明者达维德·布拉沃, 希恩·利勒霍伊 申请人:潘可士玛股份公司