专利名称：经皮给药方法、制剂和系统的制作方法
技术领域：
本发明涉及经皮给药方法、制剂和装置，具体而言，涉及联合使用清洁和消毒皮肤、微针皮肤预处理、经皮给药仓贴、促渗剂透明质酸酶、抗菌防腐剂和待递送药物的新型给药方法和装置。
背景技术：
人类皮肤的厚度在2-3_，最上层的是角质层，无痛缓释经皮给药一直是人类的梦想。世界上最早的无痛缓释经皮给药技术是中国的膏药。近代西方发达国家的小分子脂溶性药物无痛缓释经皮技术构成了现在正在开发的经皮给药技术的基础。微针技术最早起源于不锈钢微针阵列章(needle stamp)(图I)，这种不锈钢微
针阵列章针长度在O. 15-0. 25mm，主要功能是刺激表皮功能，用来除斑、除皱和美容。早在1996年，Des Fernandes博士在中华台北的国际会议上提出了这种结构简单、容易操作,使用起来方便的微针技术(图I)。2004年,美国加州的Clinical Resolution Laboratory公司重新改造了不锈钢微针阵列章，制造和生产了 MTS滚针(MTSRoller)并投放市场(图2)，主要是做“微针美容”。最近，美欧科学家利用金属硅和塑料等先进材料来制造一次性使用的O. 15-0. 25_微针阵列(几十到几百个微针排列成阵)，有实心和空心两种。这种一次性使用的微针阵列，作为透皮贴的一次性使用组成部分，在经皮给药过程中微针列阵一直插入在皮肤中将药物向皮肤中传导，直至药物吸收后将微针阵列和经皮贴一起取出。这种利用先进材料来制造一次性使用的微针阵列的方法有专利发表，在经过某一特定药物的人类临床试验的安全和药效学认证后，有可能成为新一代市场化的无痛缓释经皮给药技术。皮肤和皮下组织主要成分是透明质酸(可以形象地比喻为“水泥”)和胶原纤维(可以比喻为“钢筋”)，注射用透明质酸酶目前在临床上是用来促进药物在眼内和皮下的迅速扩散。另外，使用透明质酸酶可以在动物皮肤上消化“水泥”，增加皮肤对药物的渗透性，也可以将已有的微针孔进一步扩大，促进药物和疫苗的皮肤渗透。目前，还未见到透明质酸酶和一次性使用的O. 15-0. 25mm微针阵列经皮给药贴在人类临床上共同使用来介导双体药物 TNFR2-Fc-IL-lra、IL-lra-Fc-IL_18bp、抗 IL-12 抗体、抗 IL-23 抗体、抗 OPGL 抗体、促生长激素释放激素(商品名Sermorelin) >GLP-1类似物(商品名Byetta)、生长抑素、抗利尿激素、胸腺五肽、脑钠素、心钠素、干扰素、basic FGF、红细胞生成素、卡介苗、流感疫苗和乙肝疫苗发挥预防和治疗作用的成功报道。双体药物TNFR2-Fc-IL-lra、IL-lra-Fc-IL-18b p、抗 IL-12 抗体、抗 IL-23 抗体、抗OPGL抗体、促生长激素释放激素(商品名Sermorelin) >GLP-1类似物(商品名Byetta)、生长抑素、抗利尿激素、胸腺五肽、脑钠素、心钠素、干扰素、basic FGF、红细胞生成素、主要是采用皮下、皮内或肌肉注射的办法，直接皮下、皮内或肌肉注射，引起疼痛，而且不能缓释，一次性注射药物浓度高半衰期短，可能有副作用，不利于治疗。卡介苗、流感疫苗和乙肝疫苗主要是采用皮下、皮内或肌肉注射的办法，引起疼痛，而且可能不如经皮免疫的保护效果好。
发明内容
本发明提供了一种经皮给药方法，包括对受试者皮肤进行清洁和消毒；用微针阵列章对受试者皮肤进行预处理以产生穿透皮肤角化层的微孔(给药过程中不将微针留在皮肤中)；将装载待递送药物的经皮给药仓贴粘贴在受试者皮肤上，并保持一段时间；和将所述经皮给药仓贴从受试者皮肤上取下；上述方法任一步骤时间段为O. 5-10小时；其中，所述经皮给药仓贴中包含促渗透剂透明质酸酶、抗菌防腐剂和待送药物或疫苗。
图I是现有技术的美容、除皱、除疤痕用的微针阵列章。图2是现有技术的美容、除皱、除疤痕用的MTS滚针。
图3是可以穿透角化层的单人或一次性使用的微针阵列章的示意图。图4是可以穿透角化层的单人或一次性使用的微针阵列章的实物图。图5是经皮给药仓贴的使用方法示意图。图6是经皮给药仓贴的使用方法实物图。图7是装载有药物或疫苗的经皮给药仓贴实物图。图8采用微针阵列章预处理、透明质酸酶促渗剂和抗菌防腐剂结合经皮给药百泌肽对糖尿病患者血糖的控制情况。图9采用微针阵列章预处理、透明质酸酶促渗剂和抗菌防腐剂结合经皮给药百泌肽取代胰岛素后对糖尿病患者血糖的控制情况。图10是有透明质酸酶情况下，经皮给药仓贴对不同药物和疫苗经皮传递能力示意图。图11是无透明质酸酶情况下，经皮给药仓贴对不同药物和疫苗经皮传递能力示意图。
具体实施例方式我们设想一种改进的新方法，即在人体上采用简单的不锈钢微针阵列章(needlestamp)(图I)或MTS滚针(图2)或塑料或钛合金或硅材料等任何可以在皮肤上打孔的微针预处理皮肤，不将微针留在皮肤中，然后将经皮给药仓贴装载上透明质酸酶(作为药物促皮肤渗透剂)和抗菌防腐剂(保护皮肤清洁和维持药物稳定性)，再装载上所需药物或疫苗(即待递送药物)1-2小时内经皮缓释治疗。如果能成功，以上药物的经皮缓释或持续释放，不需要将微针留在皮肤内，这样给药持续时间长，最高血药浓度比注射给药浓度低，其副作用可能小，有可能成为一种更简单的、有商业价值的新方法。本发明涉及使用不锈钢微针阵列章预处理人皮肤，在经皮贴药仓内使用透明质酸酶(提取的或重组的，优选重组长效透明质酸酶)做为药物皮肤促渗剂来促进药物经皮吸收，又在经皮给药仓内使用抗菌防腐剂例如苯扎氯铵防止皮肤感染和仓贴内待递送药物在缓释过程中降解，在人体实现了有效的无痛安全经皮药物缓释。这些在人体上验证的药物包括双体药物 TNFR2-Fc-IL-lra、IL-lra-Fc-IL_18bp、抗 IL-12 抗体、抗 IL-23 抗体、抗OPGL抗体、促生长激素释放激素(商品名Sermorelin)、GLP-I类似物(商品名Byetta)、生长抑素、抗利尿激素、胸腺五肽、脑钠素、心钠素、干扰素、basic FGF、红细胞生成素、卡介苗、流感疫苗和乙肝疫苗。另外，含有透明质酸酶和抗菌防腐剂的经皮给药仓贴也可以用来作为通用的不同药物和疫苗的经皮给药装置。在一个实施方式中，本发明提供了一种经皮给药系统，包括皮肤预处理用微针阵列章，微针阵列章在皮肤上制造透角化层针孔后不留在皮肤内，贴敷在所述的针孔上的经皮给药仓贴装载有透明质酸酶做为药物促渗剂和抗菌防腐剂苯扎氯铵，还装载有治疗作用的双体药物 TNFR2-Fc-IL-lra、IL-lra-Fc-IL_18bp、抗 IL-12 抗体、抗 IL-23 抗体、抗 OPGL抗体或者促生长激素释放激素(商品名Sermorelin)或者GLP-I类似物(商品名Byetta)或者生长抑素或者抗利尿激素或者胸腺五肽或者脑钠素或者心钠素或者干扰素或者basicFGF或者红细胞生成素或者卡介苗、流感疫苗和乙肝疫苗。另外，给药仓贴配合使用的促渗剂透明质酸酶、抗菌防腐剂苯扎氟铵和药物也可在给药仓贴上直接储存，或在单独的滴瓶内储存(包括分离和混合装瓶)。优选地，所述的药物包括双体药物TNFR2-Fc-IL_lra、IL-lra-Fc-IL_18bp、抗 IL-12抗体、抗IL-23抗体、抗OPGL抗体、促生长激素释放激素(商品名Sermorelin) >GLP-1类似物(商品名Byetta)、生长抑素、抗利尿激素、胸腺五肽、脑钠素、心钠素、干扰素、basicFGF、红细胞生成素、卡介苗、流感疫苗和乙肝疫苗，可以用来治疗炎症性皮肤病、骨质疏松、贫血、病毒性疾病、矮小症、衰老、艾滋病和肾病晚期、糖尿病、肥胖、免疫低下、病毒感染、结核病、肿瘤、流感、乙肝以及美容。优选地，所述的皮肤预处理微针阵列章是针长为一次性或单独使用的O. 10-0. 25_的不锈钢针。儿童使用O. Imm的不锈钢针，妇女使用O. 15_的不锈钢针，成年男人使用O. 2mm的不锈钢针，卡介苗给药采用O. 25mm以上的不锈钢针。优选地，所述的微针阵列为直径为1.5-3cm的圆形阵列，每个圆形阵列含有20-200个微针。优选地，所述的经皮给药仓贴是由PVC软塑料外膜和无纺布一起制成，无纺布是用来维持药仓有效液体装载体积。在一个实施方式中，本发明还提供了一种经皮给药方法，包括第一步是酒精消毒皮肤，然后用单人多次使用的微针阵列章(图3和图4)给皮肤打能穿透皮肤角化层的微孔(预处理皮肤)；第二步是在装有透明质酸酶和抗菌防腐剂的经皮给药仓贴(图5和图6)上装载含有药物和疫苗的制剂；第三步是将已装载药物和疫苗的经皮给药仓贴粘贴在上肢皮肤上(图7)第四步是在1-1. 5小时后将经皮给药仓贴从皮肤上拿掉完成经皮缓释给药。优选地，所述的制造透角化层针孔的方法是采用微针阵列章反复多次刺压皮肤，但不留在皮肤中。优选地，待递送药物(药物或疫苗等)可以与透明质酸酶、抗菌防腐剂混合成制剂储存在同一药液瓶中或装载在无纺布给药仓内。在一个具体实施方式
中，本发明还提供了多种经皮给药制剂，其组成分别包括如下组分TNFR2-Fc_IL_lra 2. 5_20mg/ml、透明质酸酶(O. 01-10 单位/ml)、乙酸钠(Sodiumacetate buffer) 10_20mM、苯扎氯铵(Benzalkonium chloride)0. 005% (mg/ml)、羧甲基纤维素(Carboxy methyl cellulose)。· 5% (mg/ml)、吐温80(Tween 80)0. 005-0· 01 (mg/ml)、精氨酸(Arginine) 0. 05-0. I % (mg/ml)、组胺(Histamine) 5_15mM，所述的经皮给药制剂的pH 为 4· 5-5.0。每O. 3-0. 5ml含促生长激素释放激素(商品名Sermorelin) O. 1-0. 3mg、透明质酸酶(0. 01-10 单位 /ml)、乙酸钠(Sodium acetate buffer) 10_20mM、苯扎氯铵(Benzalkonium chloride) 0. 005% (mg/ml)、吐温 80 (Tween 80) 0. 005-0. 01 (mg/ml)、精氨酸(Arginine) 0. 05-0. I % (mg/ml)、组胺(Histamine) 10_15mM。每0. 3-0. 5ml含GLP-1类似物(商品名Byetta)0. 1-0. 5mg、透明质酸酶(0. 01-10 单位/ml)、乙酸钠(Sodium acetate buffer) 10_20mM、苯扎氯铵(Benzalkoniumchloride) 0. 005 % (mg/ml)、吐温 80 (Tween 80) 0. 005-0· 01 (mg/ml)、精氨酸(Arginine) 0. 05—0. I % (mg/ml)、组胺(Histamine) 10_15mM。
每0. 2-0. 6ml含胸腺五肽l_6mg、透明质酸酶(0. 01-10单位/ml)、乙酸钠(Sodium acetate buffer) 10_20mM、苯扎氯铵(Benzalkonium chloride) 0. 005 % (mg/ml)、吐温 80 (Tween 80) 0. 005-0. 01 (mg/ml)、精氨酸(Arginine) 0. 05—0. I % (mg/ml)、组胺(Histamine)10_15mMo每0. 2-0. 6ml含生长抑素0. 2-0. 6mg、透明质酸酶(0. 01-10单位/ml)、乙酸钠(Sodium acetate buffer) 10_20mM、苯扎氯铵(Benzalkoniumchloride)0. 005% (mg/ml)、吐温 80 (Tween 80) 0. 005-0. 01 (mg/ml)、精氨酸(Arginine) 0. 05-0. I % (mg/ml)、组胺(Histamine)10_15mMo每0. 2-0. 6ml含抗利尿激素0. 2-0. 6mg、透明质酸酶(0· 01-10单位/ml)、乙酸钠(Sodium acetate buffer) 10_20mM、苯扎氯铵(Benzalkonium chloride)0. 005% (mg/ml)、吐温 80 (Tween 80) 0. 005-0. 01 (mg/ml)、精氨酸(Arginine) 0. 05—0. I % (mg/ml)、组胺(Histamine)10_15mMo每0. 2-0. 6ml含脑钠素0. 2-0. 6m g、透明质酸酶(0. 01-10单位/ml)、乙酸钠(Sodium acetate buffer) 10_20mM、苯扎氯铵(Benzalkonium chloride) 0. 005 % (mg/ml)、吐温 80 (Tween 80) 0. 005-0. 01 (mg/ml)、精氨酸(Arginine) 0. 05—0. I % (mg/ml)、组胺(Histamine)10_15mMo每0. 2-0. 6ml含心钠素0. 2-0. 6m g、透明质酸酶(0. 01-10单位/ml)、乙酸钠(Sodium acetate buffer) 10_20mM、苯扎氯铵(Benzalkonium chloride) 0. 005 % (mg/ml)、吐温 80 (Tween 80) 0. 005-0. 01 (mg/ml)、精氨酸(Arginine) 0. 05—0. I % (mg/ml)、组胺(Histamine)10_15mMo每0. 2-0. 6ml含干扰素0. 2-0. 6mg、透明质酸酶(0. 01-10单位/ml)、乙酸钠(Sodium acetate buffer) 10_20mM、苯扎氯铵(Benzalkoniumchlo ride) 0. 005 % (mg/ml)、吐温 80 (Tween 80) 0. 005-0. 01 (mg/ml)、精氨酸(Arginine) 0. 05—0. I % (mg/ml)、组胺(Histamine)10_15mMo每0. 5ml含卡介苗0. 25m g、透明质酸酶(0. 01-10单位/ml)、乙酸钠(Sodiumacetate buffer)10_20mM、苯扎氯铵(Benzalkonium chloride)0.005 % (mg/ml)、吐温 80 (Tween 80) 0. 005-0· 01 (mg/ml)、精氨酸(Arginine) 0. 05-0. I % (mg/ml)、组胺(Histamine)10_15mM。每0. 5ml含流感疫苗30微克、透明质酸酶(O. 01-10单位/ml)、乙酸钠(Sodiumacetate buffer) 10-20mM> 苯扎氯铵(Benzalkonium chloride)0. 005 % (mg/ml)、吐温 80 (Tween 80) 0· 005-0. 01 (mg/ml)、精氨酸(Arginine) 0. 05-0. I % (mg/ml)、组胺(Histamine)10_15mM。每0. 5ml含乙肝疫苗20微克、透明质酸酶(O. 01-10单位/ml)、乙酸钠(Sodiumacetate buffer) 10_20mM、苯扎氯铵(Benzalkonium chlo ride) 0. 005 % (mg/ml)、吐温 80 (Tween 80) 0· 005-0. 01 (mg/ml)、精氨酸(Arginine) 0. 05-0. I % (mg/ml)、组胺(Histamine)10_15mM。本发明解决了药物和疫苗等的经皮传递问题和使用制剂的经皮传递问题。发明人采用不锈钢针来制作针长为0. 10-0. 25mm的圆形阵列章，每个圆形阵列章的直径为I. 5-3em,含20-200个微针(图I、图3和图4)。每个微针阵列章经清洗和灭菌 后，用来单人反复使用或一次性使用，这种微针阵列章是用来预处理皮肤穿透皮肤角化层的。除微针阵列章外，发明人还生产了经皮给药仓贴和用来向微针经皮给药仓贴上滴入的制剂等。优选地，本发明的经皮给药仓贴是采用PVC软塑料膜和无纺布一起制成的，示意图和实物图如图5和图6所示。经皮给药仓贴所采用的PVC软塑料是用来防止药物和疫苗溶液外漏，无纺布是用来吸附和保留药物和疫苗溶液，最终目的也是用来防止药物和疫苗溶液外漏。经皮治疗制剂和方法经皮治疗药物和疫苗(包括但不限于双体药物TNFR2-Fc-IL_lra、IL-lra-Fc-IL-18bp、抗IL-12抗体、抗IL-23抗体、抗OPGL抗体、促生长激素释放激素(商品名Sermorelin) >GLP-1类似物(商品名Byetta)、生长抑素、抗利尿激素、胸腺五肽、脑钠素、心钠素、胰岛素、干扰素、basic FGF、红细胞生成素和卡介苗等)制剂，如I.药物或疫苗2.乙酸钠(Sodium acetate buffer) 10_20mM3.苯扎氯铵(Benzalkonium chloride)0. 005% mg/ml4.吐温 80 (Tween 80) 0. 005-0. Olmg/ml5.精氨酸(Arginine) 0. 05-0. I % mg/ml6.组胺(Histamine) 10_15mM在一个实施方式中，第一步是酒精消毒皮肤，然后用单人多次使用的微针阵列章(图3和图4)给皮肤打出能穿透皮肤角化层的微孔(预处理皮肤)；第二步是在装有透明质酸酶和抗菌防腐剂的经皮给药仓贴(图5和图6)上滴加含有药物和疫苗的制剂；第三步是将已装载药物和疫苗的经皮给药仓贴粘贴在上肢皮肤上(图7)。一般在1-1. 5小时后将经皮给药仓贴从皮肤上拿掉完成经皮给药。例如，在一个具体实施方式
中，使用促生长激素释放激素(商品名Sermorelin)和经皮给药方法(来治疗衰老)，每日治疗一次，每次剂量200ug，一个半小时之内缓释(以一个半小时后将经皮贴揭去)，连续两个月。两个月后测定腹围、体重和脸色，实验结果显示治疗组腹围平均下降2. 2cm，体重平均下降I. 2公斤，脸色明显好转。这个实验表明促生长激素释放激素经皮给药可以用来预防衰老。在一个具体实施方式
中，使用GLP-I类似物(商品名Byetta，也称百泌肽)经皮给药来治疗二型糖尿病和肥胖，每日早餐和晚餐前治疗两次，每次剂量200ug，一个半小时之内缓释，连续两个月，两个月后测定空腹血糖、腹围和体重，实验结果显示治疗组空腹血糖平均下降12% (图8)，腹围平均下降I. 2cm，体重平均下降O. 8公斤。对已经使用胰岛素治疗的患者，我们采用Byetta经皮给药，完全取代了胰岛素，病人已不再使用胰岛素，只用Byetta经皮给药就可以维持血糖在正常范围内(图9)。在一个具体实施方式
中，使用促生长激素释放激素(商品名Sermorelin)、GLP-I类似物(商品名Byetta)、胸腺五肽、胰岛素、抗IL-12/23抗体、抗OPGL抗体、卡介苗、乙肝疫苗和灭活流感疫苗、纯化透明质酸酶、重组透明质酸酶和重组Fc/HSA融合的长效透明质酸酶，结合使用以上各类成分的抗体，我们采用皮肤活检和抗体染色的办法进行了动物和人以上各类成分经皮渗透的研究。初步研究结果表明，在透明质酸酶存在的情况下，经皮贴可以有效的将促生长激素释放激素、GLP-I类似物和胸腺五肽释放入血，并产生人体生物效应和治疗效果(图10)。在透明质酸酶存在的情况下，分子超大的病毒和细菌不能通过皮肤 免疫屏障，透明质酸酶由于和皮肤粘多糖发生反应，也不能渗透入血，也没有产生人体生物效应(图10)。在没有透明质酸酶存在的情况下，相同剂量的促生长激素释放激素、GLP-I类似物和胸腺五肽只能少量透过皮肤入血，没有产生人体生物效应和相应的治疗效果(图11)。与现有技术相比，本发明的优点有有效的经皮传递药物和疫苗一直是世界难题，我们通过利用药物或疫苗(双体药物 TNFR2-Fc-IL-lra、IL-lra-Fc-IL_18bp、抗 IL-12 抗体、抗 IL-23 抗体、抗 OPGL 抗体、促生长激素释放激素(商品名Sermorelin) >GLP-1类似物(商品名Byetta)、生长抑素、抗利尿激素、胸腺五肽、脑钠素、心钠素、胰岛素、干扰素、basic FGF、红细胞生成素、卡介苗、流感疫苗和乙肝疫苗等)进行多次动物和人的实验，建立了一个微针皮肤预处理、结合透明质酸酶促渗剂和抗菌防腐剂、PVC无纺布经皮给药仓贴和几种药物的新型经皮给药方法和制剂。下面结合实施例，更具体地说明本发明的内容。应当理解，本发明的实施并不局限于下面的实施例，在不脱离本发明的精神的情况下，对本发明所做的任何形式上的变通和/或改变都将落入本发明保护范围。在本发明中，若非特指，所有的份、百分比均为重量单位，所有的设备和原料等均可从市场购得或是本行业常用的。若无特别指明，实施例采用的方法为本领域通用技术。对实施例的几点说明(I)实施例中的经皮给药方法按如下操作第一步是酒精消毒皮肤，然后用单人多次使用的微针阵列章(图3和图4)给皮肤打能穿透皮肤角化层的微孔(预处理皮肤)；第二步是在装有透明质酸酶和抗菌防腐剂的经皮给药仓贴(图5和图6)上滴加含有药物和疫苗的制剂；第三步是将已装载药物和疫苗的经皮给药仓贴粘贴在上肢皮肤上(图7)。一般在1-1. 5小时后将经皮药物治疗贴从皮肤上拿掉完成经皮给药。(2)实施例中的最终经皮给药制剂
I.药物(双体药物 TNFR2-Fc-IL-lra、IL-lra-Fc-IL_18bp、抗 IL-12 抗体、抗IL-23抗体、抗OPGL抗体、促生长激素释放激素(商品名SermoreIin)、GLP-I类似物(商品名Byetta)、生长抑素、抗利尿激素、胸腺五肽、脑钠素、心钠素、胰岛素、干扰素等)2.透明质酸酶(O. 01-10单位/ml)3.乙酸钠(Sodium acetate buffer) 10_20mM4.苯扎氯铵(Benzalkonium chloride)O. 005% mg/ml
5.吐温 80 (Tween 80) 0. 005-0. Olmg/ml6.精氨酸(Arginine) 0. 05-0. 1% mg/ml7.组胺(Histamine) 10_15mM实施例I使用TNFR2-IL_lra经皮治疗抗体蛋白质制剂(杭州安瑞普生物科技有限公司制备)和经皮给药方法来治疗炎性皮肤病(异位性皮炎)，隔日治疗一次，每次剂量I. 0-5. Omg0实验结果显示炎症引起的瘙痒在给药后一小时内消失，皮损处的红色炎性斑点在三小时后开始消退，皮损在两周后大部消失(图7)。以上实验结果还提示TNFR2-IL-lra有可能成为炎症性皮肤病(如治疗牛皮癣)的有效药物。TNFR2-FC是目前治疗牛皮癣的主要药物，牛皮癣与皮肤炎症类似，没有真正的牛皮癣模式，但抗TNF药物就是治牛皮癣的。实施例2使用IL-lra-Fc-IL-18bp(哈药生物制备，按本发明方法制备成经皮治疗抗体蛋白质制剂)和经皮给药方法来治疗炎性皮肤病(异位性皮炎)，每次剂量I. 0-5. Omg,隔日治疗一次。实验结果显示炎症引起的瘙痒在给药后一小时开始消失，损处的红色炎性斑点在三小时后开始消退，皮损在一周后开始消失。实施例3使用一种抗IL-12/23抗体经皮治疗抗体蛋白质制剂(杭州安瑞普生物科技有限公司制备)和经皮给药方法来治疗炎性皮肤病(异位性皮炎)，隔日治疗一次，每次剂量1.0-5. Omgoo实验结果显示炎症引起的瘙痒在给药后一小时内消失，皮损处的红色炎性斑点在三小时后开始消退，皮损在两周后大部消失。实施例4使用一种抗OPGL抗体经皮治疗抗体蛋白质制剂(杭州安瑞普生物科技有限公司制备)和经皮给药方法来治疗女性更年期后骨质疏松，每次剂量I. 0-5. Omg,隔日治疗一次，连续两周，经两周治疗后，第三个月使用DXA(dual energy χ-ray absorptiometry)来检测骨密度增加的百分率(Bone Mineral Density Percent Change)。实验结果显示抗OPGL抗体经皮给药平均增加了骨密度2. I %。实施例5使用促生长激素释放激素(商品名Sermorelin)和经皮给药方法(来治疗衰老)，每日治疗一次，每次剂量200ug，一个半小时之内缓释(以I各半小时后将经皮贴揭去)，连续两个月。两个月后测定腹围、体重和脸色，实验结果显示治疗组腹围平均下降2. 2cm，体重平均下降I. 2公斤，脸色明显好转。这个实验表明促生长激素释放激素经皮给药可以用来预防衰老。实施例6
使用GLP-I类似物(商品名Byetta)经皮给药来治疗二型糖尿病和肥胖，每日早餐和晚餐前治疗两次，每次剂量200ug，一个半小时之内缓释，连续两个月，两个月后测定空腹血糖、腹围和体重，实验结果显示治疗组空腹血糖平均下降12% (图8)，腹围平均下降I. 2cm，体重平均下降O. 8公斤。对已经使用胰岛素治疗的患者，我们采用Byetta经皮给药，完全取代了胰岛素，病人已不再使用胰岛素，只用Byetta经皮给药就可以维持血糖在正常范围内(图9)。实施例7使用促生长激素释放激素(商品名Sermorelin) >GLP-1类似物(商品名Byetta)、胸腺五肽、胰岛素、抗IL-12/23抗体、抗OPGL抗体、卡介苗、乙肝疫苗和灭活流感疫苗、纯化透明质酸酶、重组透明质酸酶和重组Fc/HSA融合的长效透明质酸酶，结合使用以上各类成分的抗体，我们采用皮肤活检和抗体染色的办法进行了动物和人以上各类成分经皮渗透的研究。初步研究结果表明，在透明质酸酶存在的情况下，经皮贴可以有效的将促生长激素释放激素、GLP-I类似物和胸腺五肽释放入血，并产生人体生物效应和治疗效果(图10)。在透 明质酸酶存在的情况下，分子超大的病毒和细菌可以诱发皮内的免疫反应，但不能通过皮肤免疫屏障，透明质酸酶由于和皮肤粘多糖发生反应，也不能渗透入血，也没有产生人体生物效应(图10)。在没有透明质酸酶存在的情况下，相同剂量的促生长激素释放激素、GLP-I类似物和胸腺五肽只能少量透过皮肤入血，没有产生人体生物效应和相应的治疗效果(图11)。实施例8使用胰岛素经皮给药来治疗糖尿病，每次剂量200ug，一个半小时之内缓释，一日三餐每餐前和餐后两小时测定血糖浓度，连续两个月，实验结果显示经皮给药可以取代皮下注射的给药方法，并且有缓释效果。实施例9使用有效剂量(60-300单位/平方厘米)的basic FGF (珠海亿胜生物制药有限公司，按本发明方法制备成经皮治疗抗体蛋白质制剂)和经皮给药方法做面膜美容治疗，隔日治疗一次。实验结果显示在治疗四次后面部皮肤质量和颜色明显改善。实施例10联合使用TNFR2-IL_lra制剂(杭州安瑞普生物科技有限公司制备)和使用有效剂量(30-300单位/平方厘米)的basic FGF (珠海亿胜生物制药有限公司，按本发明方法制备成经皮治疗抗体蛋白质制剂)和经皮给药方法做面膜美容治疗，隔日治疗一次。实验结果显示在治疗三次后面部皮肤质量和颜色明显改善。实施例11卡介苗是结核菌的减毒活疫苗，主要用来免疫儿童预防结核病、治疗小儿哮喘性支气管炎、预防感冒和提高免疫力治疗肿瘤。我们使用皮内注射用卡介苗O. 25mg/0. 5ml对已有结核病感染的7例成人经皮给药，用药后2 8小时，病人产生局部红斑、硬结或溃疡，表明经皮给药方法有效。本经皮实验结果与7例皮内注射卡介苗O. 25mg/0. 5ml对比，产生了同样的效果。这个经皮给药方法能在不用医护人员的情况下在家自行操作，有可能取代有疼痛的皮内注射方法和成为发展中国家可以广泛使用的经皮卡介苗给药方法。实施例12
流感疫苗主要是预防流行性感冒，每年在流行季节接种I次，免疫力可以持续一年。一般采用上臂三角肌肌肉注射，每针剂量30微克/0.5ml。2011年美国开始使用皮内注射的流感疫苗，结果表明皮内注射比肌肉注射更能产生保护性的反应。我们使用经皮方法给药12例健康人，并和12例健康人肌肉注射接种HINI流感疫苗进行比较，实验结果表明接种后21天采集血清检测的HINI抗体应达水平，发现两组人群100%都产生了免疫性保护。实施例13乙肝疫苗是一种预防乙型肝炎的药物，主要使用方法为三角肌肌肉注射，同时有报道称皮内接种效果更好。其大剂量长期使用也用来减少乙肝表面抗原和治疗乙肝。我们将成人和儿重共14例，其中肌肉注射7例，经皮给药7例，在首次给药后的I个月、6个月再分别给药20微克。I年后检测乙肝表面抗体，两组用药结果均为100%阳性。表明经皮给药是有效的方法。
实施例14纯化透明质酸酶从牛睾丸中采用乙醇沉淀、壳聚糖沉淀、季铵盐沉淀或者膜分离盐析的方法分离纯化获得，其活性检测方法是以过量透明质酸钠或透明质酸钾为底物，透明质酸酶催化反应，未反应的底物与血清蛋白形成浑浊液，在640nm处有吸光值，透明质酸活性单位浓度与吸光值降低值成正比。实施例15重组PH20可溶区段的表达和活性鉴定中性透明质酸酶全长片段为509个氨基酸(其中信号肽长35aa，加工过程切除)，由N490位的GPI锚定位点锚定于细胞质膜上。去除锚定位点后，不影响其发挥生理功能，并且C端可部分截短，最短到N464位仍有活性，但活性有所降低。将活性优化后需保留序列至N482。采用IgK信号肽相比采用天然信号肽PH20表达量更高，因此将IgK信号肽与PH20的N36-N482序列融合，转入CHO细胞表达。CHO细胞完善的翻译后加工系统，对于PH20糖基化与二硫键的正确配对都非常有利。活性检测以过量透明质酸钠或透明质酸钾为底物，透明质酸酶催化反应，未反应的底物与血清蛋白形成浑浊液，在640nm处有吸光值，透明质酸活性单位浓度与吸光值降低值成正比。PH20N36-N482 核苷酸序列CTGAATTTCAGAGCACCTCCTGTTATTCCAAATGTGCCTTTCCTCTGGGCCTGGAATGCCCCAAGTGAATTTTGTCTTGGAAAATTTGATGAGCCACTAGATATGAGCCTCTTCTCTTTCATAGGAAGCCCCCGAATAAACGCCACCGGGCAAGGTGTTACAATATTTTATGTTGATAGACTTGGCTACTATCCTTACATAGATTCAATCACAGGAGTAACTGTGAATGGAGGAATCCCCCAGAAGATTTCCTTACAAGACCATCTGGACAAAGCTAAGAAAGACATTACATTTTATATGCCAGTAGACAATTTGGGAATGGCTGTTATTGACTGGGAAGAATGGAGACCCACTTGGGCAAGAAACTGGAAACCTAAAGATGTTTACAAGAATAGGTCTATTGAATTGGTTCAGCAACAAAATGTACAACTTAGTCTCACAGAGGCCACTGAGAAAGCAAAACAAGAATTTGAAAAGGCAGGGAAGGATTTCCTGGTAGAGACTATAAAATTGGGAAAATTACTTCGGCCAAATCACTTGTGGGGTTATTATCTTTTTCCGGATTGTTACAACCATCACTATAAGAAACCCGGTTACAATGGAAGTTGCTTCAATGTAGAAATAAAAAGAAATGATGATCTCAGCTGGTTGTGGAATGAAAGCACTGCTCTTTACCCATCCATTTATTTGAACACTCAGCAGTCTCCTGTAGCTGCTACACTCTATGTGCGCAATCGAGTTCGGGAAGCCATCAGAGTTTCCAAAATACCTGATGCAAAAAGTCCACTTCCGGTTTTTGCATATACCCGCATAGTTTTTACTGATCAAGTTTTGAAATTCCTTTCTCAAGATGAACTTGTGTATACATTTGGCGAAACTGTTGCTCTGGGTGCTTCTGGAATTGTAATATGGGGAACCCTCAGTATAATGCGAAGTATGAAATCTTGCTTGCTCCTAG ACAATTACATGGAGACTATACTGAATCCTTACATAATCAACGTCACACTAGCAGCCAAAATGTGTAGTCAAGTGCTTTGCCAGGAGCAAGGAGTGTGTATAAGGAAAAACTGGAACTCAAGTGACTATCTTCACCTCAACCCAGATAATTTTGCTATTCAACTTGAGAAAGGTGGAAAGTTCACAGTACGTGGAAAACCGACACTTGAAGACCTGGAGCAATTTTCTGAAAAATTTTATTGCAGCTGTTATAGCACCTTGAGTTGTAAGGAGAAAGCTGATGTAAAAGACACTGATGCTGTTGATGTGTGTATTGCTGATGGTGTCTGTATAGATGCTTTTCTAAAACCTCCCATGGAGACAGAAGAACCTCAAATTTTCTACPH20N36-N482 氨基酸序列
LNFRAPPVIPNVPFLWAWNAPSEFCLGKFDEPLDMSLFSFIGSPRINATGQGVTIFYVDRLGYYPYIDSITGVTVNGGIPQKISLQDHLDKAKKDITFYMPVDNLGMAVIDffEEffRPTffARNWKPKDVYKNRSIELVQQQNVQLSLTEATEKAKQEFEKAGKDFLVETIKLGKLLRPNHLWGYYLFPDCYNHHYKKPGYNGSCFNVEIKRNDDLSWLWNESTALYPSIYLNTQQSPVAATLYVRNRVREAIRVSKIPDAKSPLPVFAYTRIVFTDQVLKFLSQDELVYTFGETVALGASGIVIWGTLSIMRSMKSCLLLDNYMETILNPYIINVTLAAKMCSQVLCQEQGVCIRKNWNSSDYLHLNPDNFAIQLEKGGKFTVRGKPTLEDLEQFSEKFYCSCYSTLSCKEKADVKDTDAVDVCIADGVCIDAFLKPPMETEEPQIFY实施例16PH20-Fc融合蛋白表达与活性鉴定通过重叠PCR将PH20N36-N482与IgG2的Fe段融合，分别将IgG2的Fe段融合在PH20的C端与N端，然后与IgK信号肽重叠，与克隆载体连接测序正确后连入表达载体，转染CHO细胞表达，经过克隆筛选挑取高表达细胞株，对细胞培养液进行分离纯化，获得PH20-FC的重组蛋白。活性检测以过量透明质酸钠或透明质酸钾为底物，透明质酸酶催化反应，未反应的底物与血清蛋白形成浑浊液，在640nm处有吸光值，透明质酸活性单位浓度与吸光值降低值成正比。收集重组细胞的细胞培养液进行小鼠皮下台盼蓝扩散试验，以透明质酸酶提纯产品作为阳性对照，结果证明培养液中蛋白活性约lU/ug。PH20-FC核苷酸序列CTGAATTTCAGAGCACCTCCTGTTATTCCAAATGTGCCTTTCCTCTGGGCCTGGAATGCCCCAAGTGAATTTTGTCTTGGAAAATTTGATGAGCCACTAGATATGAGCCTCTTCTCTTTCATAGGAAGCCCCCGAATAAACGCCACCGGGCAAGGTGTTACAATATTTTATGTTGATAGACTTGGCTACTATCCTTACATAGATTCAATCACAGGAGTAACTGTGAATGGAGGAATCCCCCAGAAGATTTCCTTACAAGACCATCTGGACAAAGCTAAGAAAGACATTACATTTTATATGCCAGTAGACAATTTGGGAATGGCTGTTATTGACTGGGAAGAATGGAGACCCACTTGGGCAAGAAACTGGAAACCTAAAGATGTTTACAAGAATAGGTCTATTGAATTGGTTCAGCAACAAAATGTACAACTTAGTCTCACAGAGGCCACTGAGAAAGCAAAACAAGAATTTGAAAAGGCAGGGAAGGATTTCCTGGTAGAGACTATAAAATTGGGAAAATTACTTCGGCCAAATCACTTGTGGGGTTATTATCTTTTTCCGGATTGTTACAACCATCACTATAAGAAACCCGGTTACAATGGAAGTTGCTTCAATGTAGAAATAAAAAGAAATGATGATCTCAGCTGGTTGTGGAATGAAAGCACTGCTCTTTACCCATCCATTTATTTGAACACTCAGCAGTCTCCTGTAGCTGCTACACTCTATGTGCGCAATCGAGTTCGGGAAGCCATCAGAGTTTCCAAAATACCTGATGCAAAAAGTCCACTTCCGGTTTTTGCATATACCCGCATAGTTTTTACTGATCAAGTTTTGAAATTCCTTTCTCAAGATGAACTTGTGTATACATTTGGCGAAACTGTTGCTCTGGGTGCTTCTGGAATTGTAATATGGGGAACCCTCAGTATAATGCGAAGTATGAAATCTTGCTTGCTCCTAGACAATTACATGGAGACTATACTGAATCCTTACATAATCAACGTCACACTAGCAGCCAAAATGTGTAGTCAAGTGCTTTGCCAGGAGCAAGGAGTGTGTATAAGGAAAAACTGGAACTCAAGTGACTATCTTCACCTCAACCCAGATAATTTTGCTATTCAACTTGAGAAAGGTGGAAAGTTCACAGTAC
GTGGAAAACCGACACTTGAAGACCTGGAGCAATTTTCTGAAAAATTTTATTGCAGCTGTTATAGCACCTTGAGTTGT
AAGGAGAAAGCTGATGTAAAAGACACTGATGCTGTTGATGTGTGTATTGCTGATGGTGTCTGTATAGATGCTTTTCT
AAAACCTCCCATGGAGACAGAAGAACCTCAAATTTTCTACGTCGAGTGCCCACCGTGCCCAGCACCACCTGTGGCAG
GACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACGTGCGTG
GTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAA
GACAAAGCCACGGGAGGAGCAGTTCAACAGCACGTTCCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTTGTGCACCAGGACTGGC
TGAACGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGGCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAACC
AAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCT
GACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACT
ACAAGACCACACCTCCCATGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGG
TGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTC
CCTGTCTCCGGGTAAAPH20-FC氨基酸序列LNFRAPPVIPNVPFLWAWNAPSEFCLGKFDEPLDMSLFSFIGSPRINATGQGVTIFYVDRLGYYPYIDSITGVTVNGGIPQKISLQDHLDKAKKDITFYMPVDNLGMAVIDWEEWRPTWARNffKPKDVYKNRSIELVQQQNVQLSLTEATEKAKQEFEKAGKDFLVETIKLGKLLRPNHLWGYYLFPDCYNHHYKKPGYNGSCFNVEIKRNDDLSWLWNESTALYPSIYLNTQQSPVAATLYVRNRVREAIRVSKIPDAKSPLPVFAYTRIVFTDQVLKFLSQDELVYTFGETVALGASGIVIWGTLSIMRSMKSCLLLDNYMETILNPYIINVTLAAKMCSQVLCQEQGVCIRKNWNSSDYLHLNPDNFAIQLEKGGKFTVRGKPTLEDLEQFSEKFYCSCYSTLSCKEKADVKDTDAVDVCIADGVCIDAFLKPPMETEEPQIFYVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK实施例17PH20-HSA融合蛋白表达与活性鉴定成熟HSA(人血清白蛋白)为585个氨基酸，包含结构同源的3个区段。我们通过重叠PCR将PH20N36-N482与HSA的第一区段(N1-N197)融合，分别将HSA融合在PH20的C端和N端，然后与IgK信号肽重叠，与克隆载体连接测序正确后连入表达载体，转染CHO细胞表达，经过克隆筛选挑取高表达细胞株，对细胞培养液进行分离纯化，获得PH20-HSA 191的重组蛋白。活性检测以过量透明质酸钠或透明质酸钾为底物，透明质酸酶催化反应，未反应的底物与血清蛋白形成浑浊液，在640nm处有吸光值，透明质酸活性单位浓度与吸光值降低值成正比。PH20-HSA核苷酸序列CTGAATTTCAGAGCACCTCCTGTTATTCCAAATGTGCCTTTCCTCTGGGCCTGGAATGCCCCAAGTGAATTTTGTCTTGGAAAATTTGATGAGCCACTAGATATGAGCCTCTTCTCTTTCATAGGAAGCCCCCGAATAAACGCCACCGGGCAAGGTGTTACAATATTTTATGTTGATAGACTTGGCTACTATCCTTACATAGATTCAATCACAGGAGTAACTGTGAATGGAGGAATCCCCCAGAAGATTTCCTTACAAGACCATCTGGACAAAGCTAAGAAAGACATTACATTTTATATGCCAGTAGACAATTTGGGAATGGCTGTTATTGACTGGGAAGAATGGAGACCCACTTGGGCAAGAAACTGGAAACCTAAAGATGTTTACAAGAATAGGTCTATTGAATTGGTTCAGCAACAAAATGTACAACTTAGTCTCACAGAGGCCACTGAGAAAGCAAAACAAGAATTTGAAAAGGCAGGGAAGGATTTCCTGGTAGAGACTATAAAATTGGGAAAATTACTTCGGCCA
AATCACTTGTGGGGTTATTATCTTTTTCCGGATTGTTACAACCATCACTATAAGAAACCCGGTTACAATGGAAGTTG
CTTCAATGTAGAAATAAAAAGAAATGATGATCTCAGCTGGTTGTGGAATGAAAGCACTGCTCTTTACCCATCCATTT
ATTTGAACACTCAGCAGTCTCCTGTAGCTGCTACACTCTATGTGCGCAATCGAGTTCGGGAAGCCATCAGAGTTTCC
AAAATACCTGATGCAAAAAGTCCACTTCCGGTTTTTGCATATACCCGCATAGTTTTTACTGATCAAGTTTTGAAATT
CCTTTCTCAAGATGAACTTGTGTATACATTTGGCGAAACTGTTGCTCTGGGTGCTTCTGGAATTGTAATATGGGGAA
CCCTCAGTATAATGCGAAGTATGAAATCTTGCTTGCTCCTAGACAATTACATGGAGACTATACTGAATCCTTACATA
ATCAACGTCACACTAGCAGCCAAAATGTGTAGTCAAGTGCTTTGCCAGGAGCAAGGAGTGTGTATAAGGAAAAACTG
GAACTCAAGTGACTATCTTCACCTCAACCCAGATAATTTTGCTATTCAACTTGAGAAAGGTGGAAAGTTCACAGTAC
GTGGAAAACCGACACTTGAAGACCTGGAGCAATTTTCTGAAAAATTTTATTGCAGCTGTTATAGCACCTTGAGTTGT
AAGGAGAAAGCTGATGTAAAAGACACTGATGCTGTTGATGTGTGTATTGCTGATGGTGTCTGTATAGATGCTTTTCT
AAAACCTCCCATGGAGACAGAAGAACCTCAAATTTTCTACGATGCACACAAGAGTGAGGTTGCTCATCGGTTTAAAG
ATTTGGGAGAAGAAAATTTCAAAGCCTTGGTGTTGATTGCCTTTGCTCAGTATCTTCAGCAGTGTCCATTTGAAGAT
CATGTAAAATTAGTGAATGAAGTAACTGAATTTGCAAAAACATGTGTTGCTGATGAGTCAGCTGAAAATTGTGACAA
ATCACTTCATACCCTTTTTGGAGACAAATTATGCACAGTTGCAACTCTTCGTGAAACCTATGGTGAAATGGCTGACT
GCTGTGCAAAACAAGAACCTGAGAGAAATGAATGCTTCTTGCAACACAAAGATGACAACCCAAACCTCCCCCGATTG
GTGAGACCAGAGGTTGATGTGATGTGCACTGCTTTTCATGACAATGAAGAGACATTTTTGAAAAAATACTTATATGA
AATTGCCAGAAGACATCCTTACTTTTATGCCCCGGAACTCCTTTTCTTTGCTAAAAGGTATAAAGCTGCTTTTACAG
AATGTTGCCAAGCTGCTGATAAAGCTGCCTGCCTGTTGCCAAAGCTCGATGAACTTCGGGATGAAGGGAAGGCTTCG
TCTGCCAAACAGAGA PH20-HSA氨基酸序列LNFRAPPVIPNVPFLWAWNAPSEFCLGKFDEPLDMSLFSFIGSPRINATGQGVTIFYVDRLGYYPYIDSITGVTVNGGIPQKISLQDHLDKAKKDITFYMPVDNLGMAVIDWEEWRPTWARNWKPKDVYKNRSIELVQQQNVQLSLTEATEKAKQEFEKAGKDFLVETIKLGKLLRPNHLWGYYLFPDCYNHHYKKPGYNGSCFNVEIKRNDDLSWLWNESTALYPSIYLNTQQSPVAATLYVRNRVREAIRVSKIPDAKSPLPVFAYTRIVFTDQVLKFLSQDELVYTFGETVALGASGIVIWGTLSIMRSMKSCLLLDNYMETILNPYIINVTLAAKMCSQVLCQEQGVCIRKNWNSSDYLHLNPDNFAIQLEKGGKFTVRGKPTLEDLEQFSEKFYCSCYSTLSCKEKADVKDTDAVDVCIADGVCIDAFLKPPMETEEPQIFYDAHKSPVCHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFAKTCVADESAENCDKSLHTLFGDKLCTVATLRETYGEMADCCAKQEPERNECFLQHKDDNPNLPRLVRPEVDVMCTAFHDNEETFLKKYLYEIARRHPYFYAPELLFFAKRYKAAFTECCQAADKAACLLPKLDELRDEGKASSAKQR尽管发明人已经对本发明的技术方案做了较为详细的阐述和列举，应当理解，对于本领域一个熟练的技术人员来说，对上述实施例作出修改和/或变通或者采用等同的替代方案是显然的，都不脱离本发明的精神实质。
权利要求
1.一种经皮给药方法，包括 对受试者皮肤进行消毒； 用微针阵列章对受试者皮肤进行预处理以产生穿透皮肤角化层的微孔，并不将微针留在皮肤中； 将装载待递送药物和促渗剂透明质酸酶经皮给药仓贴粘贴在受试者皮肤上，并保持一段时间持续给药； 和将所述经皮给药仓贴从受试者皮肤上取下， 其中，所述经皮给药仓贴中包含抗菌防腐剂。
2.权利要求I的方法，其中在临使用前，将待递送药物、透明质酸酶和抗菌防腐剂的液体制剂施加到所述经皮给药仓贴的给药仓中。
3.权利要求I的方法，其中所述待递送药物、透明质酸酶和抗菌防腐剂已经预先装载到所述经皮给药仓贴的给药仓中。
4.以上权利要求之任一项的方法，其中所述待递送药物选双体药物TNFR2-Fc-IL-lra、IL-lra-Fc-IL-18bp、抗 IL-12 抗体、抗 IL-23 抗体、抗 OPGL 抗体、自由促生长激素释放激素、GLP-I类似物、生长抑素、抗利尿激素、胸腺五肽、脑钠素、心钠素、胰岛素、干扰素、basic FGF、红细胞生成素、卡介苗、流感疫苗和乙肝疫苗构成的组。
5.以上权利要求之任一项的方法，其中所述透明质酸酶为天然提取的或重组的透明质酸酶，特别优选的是经生物工程改造的重组长效透明质酸酶。
6.以上权利要求之任一项的方法，其中所述抗菌防腐剂为苯扎氯铵。
7.以上权利要求之任一项的方法，其中所述微针阵列章的微针为0.10-0. 25mm。
8.以上权利要求之任一项的方法，其中所述时间段为0.5-10小时。
9.用于以上权利要求之任一项的方法的经皮给药制剂，其组成包括如下组分 主要起效成分、透明质酸酶0. 01-10单位/ml、乙酸钠10-20mM、苯扎氯铵0. 005% mg/ml、羧甲基纤维素 0. 5% mg/ml、吐温 800. 005-0. 01mg/ml、精氨酸 0. 05-0. I % mg/ml、组胺5_15mM0
10.用于权利要求9的经皮给药制剂中主要起效成分可按需选用以下药物TNFR2-Fc-IL-lra 2. 5_20mg/ml (pH 为 4. 5-5. 0)、促生长激素释放激素 0. 1-0. 3mg (每0.3-0. 5ml 制剂)、GLP-I 类似物 0. 1-0. 5mg (每 0. 3-0. 5ml 制剂)、胸腺五肽 l_6mg (每0.2-0. 6ml制剂)、生长抑素0. 2-0. 6mg(每0. 2-0. 6ml制剂)、抗利尿激素0. 2-0. 6mg(每0.2-0. 6ml 制剂)、脑钠素 0. 2-0. 6mg(每 0. 2-0. 6ml 制剂)、心钠素 0. 2-0. 6mg(每0.2-0. 6ml 制剂)、干扰素 0. 2-0. 6mg (每 0. 2-0. 6ml 制剂)、卡介苗 0. 25mg (每 0. 5ml 制剂)、流感疫苗30微克(每0. 5ml制剂)、乙肝疫苗20微克(每0. 5ml制剂)。
11.用于以上权利要求之任一项的方法的经皮给药系统，包括经皮给药仓贴，和微针阵列章，用于对受试者皮肤进行预处理，以产生穿透皮肤角化层的微孔。
12.权利要求11的经皮给药系统，还包括用于容纳所述待递送药物、透明质酸酶和/或抗菌防腐剂的液体制剂的一个或多个容器。
全文摘要
一种经皮给药方法、制剂和系统。本发明提供了一种经皮给药方法，包括对受试者皮肤进行消毒；用微针阵列章对受试者皮肤进行预处理，以产生穿透皮肤角化层的微孔；将装载待递送药物、透明质酸酶的经皮给药仓贴粘贴在受试者皮肤上，并保持一段时间；和将所述经皮给药仓从受试者皮肤上取下；其中，所述经皮给药仓贴中包含抗菌防腐剂。
文档编号A61K47/42GK102805896SQ20121006396
公开日2012年12月5日 申请日期2012年3月6日 优先权日2011年5月30日
发明者惠觅宙 申请人:惠觅宙, 徐江运