一种褐毛橐吾提取物在制备治疗白血病药物中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种褐毛橐吾提取物的新用途，该新用途是褐毛橐吾提取物在制备治疗白血病药物中的应用。所述褐毛橐吾提取物是按如下方法制备的：以褐毛橐吾为原料，采用超临界二氧化碳萃取技术，大孔吸附树脂纯化技术分别得到褐毛橐吾提取物A、褐毛橐吾提取物B、褐毛橐吾提取物C，按一定比例混合，即为褐毛橐吾提取物。本发明所提供的褐毛橐吾提取物对制备治疗白血病药物具有重要意义。
【专利说明】一种褐毛橐吾提取物在制备治疗白血病药物中的应用
【技术领域】
[0001]本发明属于医药领域，涉及一种中药材提取物在制备治疗白血病药物中的应用，具体是涉及一种褐毛橐吾提取物在制备治疗白血病药物中的应用。
【背景技术】
[0002]白血病是起源造血系统的、以骨髓或其他造血组织中产生和积聚大量幼稚和异常白细胞为特点的恶性疾病。从形式看白血病细胞大多数是未成熟和形态异常的白细胞；在功能上，白血病细胞有着与肿瘤细胞相同的特点:白血病细胞呈肿瘤性增值，无法控制，常导致骨髓造血功能的抑制和衰竭，致病人出现贫血、中性粒细胞和血小板减少，白血病细胞可浸润全身各种组织与脏器，使各个脏器的功能受损，如脾、肝、淋巴结、脑膜、皮肤等，产生肝、脾、淋巴结肿大、头痛、颈强直等临床症状和体征；也可表现为局部的肿瘤，例如浸润骨膜下时，可聚集成淡绿色肿块，俗称绿色瘤，如乳突绿色瘤、硬脑膜绿色瘤、脊椎绿色瘤、骨盆绿色瘤等，并可早于白血病前出现于临床。由于白血病细胞源于血液系统，又具有肿瘤细胞的特点，所以人们习惯上称他为血癌。白血病的分布是世界性的，占癌症总发病率的5%左右，发病以儿童和青年居多。我国白血病患者约为3-4人/10万人口，男性多于女性。在我国各年龄组恶性肿瘤的死亡率中白血病占第6位(男性)和第8位(女性)，在儿童及35岁以下的人群中则占第I位。白血病按白细胞发育成熟的程度区分，可分为急性、慢性两种；按白细胞的不同类型来区分，可分为淋巴细胞型、粒细胞型、单核细胞型、浆细胞型、巨核细胞型白血病，有时也可由两种细胞混合而成，如粒一单细胞性白血病。
[0003]目前白血病的治疗主要依靠化疗，治疗白血病的药物也比较多，中药西药均有，常见的西药有甲氨蝶呤、环磷酰胺、长春新碱、三尖杉酯碱、干扰素等，中成药有珍香胶囊、复方斑蝥胶囊等，这些药物通过不同的机制对白血病进行治疗，其中有细胞毒性药物、诱导分化药物等。细胞毒性药物虽然可以杀伤大量的白血病细胞，减少体内的白血病负荷，但副作用较多，如杀伤、抑制正常造血细胞，导致贫血、出血；抑制正常免疫功能，机体免疫力下降，容易合并感染；损伤胃肠道粘膜，导致厌食恶心、呕吐；还会影响心肝肾功能，而且还可使第二肿瘤发生率增加。此外,这些药物剂量再大，也不可能完全杀灭体内的白血病细胞,而残留的白血病细胞是疾病复发的根源。诱导分化治疗是指应用能够促进白血病细胞分化成熟或能够调节白血病细胞表型以增强其对药物敏感性的诱导分化剂。目前应用最有效的是全反式维甲酸治疗急性早幼粒细胞白血病，全反式维甲酸已成为急性早幼粒细胞白血病诱导缓解的首选药物。
[0004]干扰素是一种单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。分为a、P、Y3种。自80年代以来，许多研究显示，干扰素(尤其是a-干扰素及Y-干扰素)除具有抗病毒、免疫调节的作用外，还具有明显的抗细胞增值作用。目前干扰素已被用于治疗多种白血病。干扰素的治疗主要显示对慢粒(慢性期)、毛细胞白血病，慢淋等慢性白血病是有帮助的。由于干扰素治疗费用昂贵、大剂量是副作用多(如行动能力降低、治理减退等)，目前国内应用尚不普遍。[0005]上述药物有的具有较强的毒性，在治疗白血病的同时对正常细胞液有杀伤作用，有的效果不明显，有的效果虽然好但价格昂贵。中药在白脉病治疗上已表现出一定的效果，并且由于中药毒性低，副作用少而越来越受到关注。
[0006]褐毛橐吾为菊科植物褐毛橐吾Ligularia achyrotricha (Diels) Ling或大黄橐吾L.duciformis (C.windl.)Hand.-Mazz.的干燥全草。6~7月采集全草,洗净,晒干。收载于《中华人民共和国卫生部药品标准藏药(第一册)》，标准编号:WS3-BC-0122-95。性凉，味甘、苦。具有清热解毒之功效。用于龙热病，脾热病，白喉，疫疠，疮疖，皮肤病。为我国藏蒙等少数民族地区的常用药物。但有关阿氏蒿的基础研究尚十分有限，使该药材的后续推广和应用受到限制。现代研究关于阿氏蒿的化学成分及药理作用鲜有报道。国内专利检索结果，未见褐毛橐吾相关专利。
[0007]上述文献及专利等，尚未见褐毛橐吾或褐毛橐吾提取物用于制备治疗白血病药物的报道。
【发明内容】
[0008]本发明的目的在于提供一种褐毛橐吾提取物在制备治疗白血病药物中的应用。
[0009]本发明是通过如下技术方案实现的:
本发明所用褐毛橐吾为菊科植物褐毛橐吾Ligularia achyrotricha (Diels) Ling或大黄棄吾 L.duciformis (C.windl.) Hand.-Mazz.的干燥全草。
[0010]本发明一种褐毛橐吾提取物在制备治疗白血病药物中的应用，所述褐毛橐吾提取物的制备方法为:
(1)褐毛橐吾，粉碎，过10-50目筛，采用超临界二氧化碳萃取技术，萃取温度400C -50°C、萃取压力20-30MPa、萃取时间l_2h，萃取挥发油，收集挥发油，即得褐毛橐吾提取物A，超临界二氧化碳萃取后的褐毛橐吾药渣A备用；
(2)将步骤(1)得到的褐毛橐吾药渣A用浓度70%-95%乙醇为溶剂，在50°C_80°C温浸提取，提取次数为2-4次，每次提取时间为1-3小时，每次溶剂用量为褐毛橐吾重量的10-15倍，滤过，得药渣B和提取液，提取液回收乙醇，浓缩，干燥，即得褐毛橐吾提取物B ;
(3)将步骤(2)得到的药渣B，加水回流提取，提取次数为1-4次，每次提取时间为1-3小时，每次水用量为药渣B重量的8-12倍，滤过，提取液浓缩至相对密度d=l.12，通过大孔吸附树脂，先用水洗脱，再用浓度30%-70%的乙醇溶液洗脱，收集不同浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得褐毛橐吾提取物C ；
(4)上述褐毛橐吾提取物A、褐毛橐吾提取物B、褐毛橐吾提取物C，其中一种或两种或三种按一定比例混匀，即得本发明的褐毛橐吾提取物。
[0011]褐毛橐吾提取物的制备方法为:
(1)褐毛橐吾，粉碎，过10-50目筛，采用超临界二氧化碳萃取技术，萃取温度400C -50°C、萃取压力20-30MPa、萃取时间l_2h，萃取挥发油，收集挥发油，即得褐毛橐吾提取物A，超临界二氧化碳萃取后的褐毛橐吾药渣A备用；
(2)将步骤(1)得到的褐毛橐吾药渣A用浓度70%-95%乙醇为溶剂，在50°C_80°C温浸提取，提取次数为2-4次，每次提取时间为1-3小时，每次溶剂用量为褐毛橐吾重量的10-15倍，滤过，得药渣B和提取液，提取液回收乙醇，浓缩，干燥，即得褐毛橐吾提取物B ;(3)将步骤(2)得到的药渣B，加水回流提取，提取次数为1-4次，每次提取时间为1-3小时，每次水用量为药渣B重量的8-12倍，滤过，提取液浓缩至相对密度d=l.12，通过大孔吸附树脂，先用水洗脱，再用浓度30%-70%的乙醇溶液洗脱，收集不同浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得褐毛橐吾提取物C ；
(4)上述褐毛橐吾提取物A、褐毛橐吾提取物B、褐毛橐吾提取物C混匀，即得本发明的褐毛橐吾提取物。
[0012]优选的褐毛橐吾提取物的制备方法为: (1)褐毛橐吾，粉碎，过30目筛，采用超临界二氧化碳萃取技术，萃取温度45°C、萃取压力25MPa、萃取时间2h，萃取挥发油，收集挥发油，即得褐毛橐吾提取物A，超临界二氧化碳萃取后的褐毛橐吾药渣A备用；
(2)将步骤(1)得到的褐毛橐吾药渣A用浓度80%乙醇为溶剂，在70°C温浸提取，提取次数为2次，每次提取时间为2小时，每次溶剂用量为褐毛橐吾重量的12倍，滤过，得药渣B和提取液，提取液回收乙醇，浓缩，干燥，即得褐毛橐吾提取物B ;
(3)将步骤(2)得到的药渣B，加水回流提取，提取次数为2次，每次提取时间为2小时，每次水用量为药渣B重量的12倍，滤过，提取液浓缩至相对密度d=l.12，通过HPD600大孔吸附树脂，先用水洗脱，再用浓度50%的乙醇溶液洗脱，收集50%浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得褐毛橐吾提取物C ；
(4)上述褐毛橐吾提取物A、褐毛橐吾提取物B、褐毛橐吾提取物C混匀，即得本发明的褐毛橐吾提取物。
[0013]本发明的的褐毛橐吾提取物的制备方法，其特征在于:所采用的大孔吸附树脂为HPD600大孔吸附树脂、DlOl大孔吸附树脂。
[0014]本发明的的褐毛橐吾提取物与化学药或中药或天然药物组成治疗白血病药物。
[0015]本发明的褐毛橐吾提取物A、褐毛橐吾提取物B、褐毛橐吾提取物C，在制备治疗白血病药物中的应用。
[0016]本发明的褐毛橐吾提取物A、褐毛橐吾提取物B、褐毛橐吾提取物C与化学药或中药或天然药物组成治疗白血病药物。
[0017]本发明的褐毛橐吾提取物，通过加入药剂学允许的各种辅料，制成药剂学上的片剂、颗粒剂、胶囊等口服剂型。
[0018]本发明首次对褐毛橐吾采用超临界二氧化碳萃取技术、大孔吸附树脂纯化技术等进行治疗白血病提取物制备研究，分离得到了具有治疗白血病活性的提取物，包括褐毛橐吾提取物A、褐毛橐吾提取物B和褐毛橐吾提取物C。
[0019]本发明首次以菊科植物褐毛橐吾Ligularia achyrotricha (Diels) Ling或大黄橐吾L.duciformis (C.windl.)Hand.-Mazz.的干燥全草为原料,制备提取物用于治疗白血病。本发明首次探索研究并分离得到了褐毛橐吾具有治疗白血病作用的提取物。本发明的褐毛橐吾提取物能够抑制白血病细胞(HL-60细胞)增殖和诱导白血病细胞(HL-60细胞)凋亡，因此，可以用来对白血病进行治疗。
【具体实施方式】
[0020]下面通过具体实验例和实施例对一种褐毛橐吾提取物在制备治疗白血病药物中的应用做进一步说明，但不限于本发明。[0021]实施例1:褐毛橐吾提取物的制备 (1)褐毛橐吾26kg，粉碎，过30目筛，采用超临界二氧化碳萃取技术，萃取温度45°C、萃取压力25MPa、萃取时间2h，萃取挥发油，收集挥发油，即得褐毛橐吾提取物A，超临界二氧化碳萃取后的褐毛橐吾药渣A备用； (2)将步骤(1)得到的褐毛橐吾药渣A用浓度80%乙醇为溶剂，在70°C温浸提取，提取次数为2次，每次提取时间为2小时，每次溶剂用量为褐毛橐吾重量的12倍，滤过，得药渣B和提取液，提取液回收乙醇，浓缩，干燥，即得褐毛橐吾提取物B ; (3)将步骤(2)得到的药渣B，加水回流提取，提取次数为2次，每次提取时间为2小时，每次水用量为药渣B重量的12倍，滤过，提取液浓缩至相对密度d=l.12，通过HPD600大孔吸附树脂，先用水洗脱，再用浓度50%的乙醇溶液洗脱，收集50%浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得褐毛橐吾提取物C ； (4)上述褐毛橐吾提取物A、褐毛橐吾提取物B、褐毛橐吾提取物C混匀，即得本发明的褐毛橐吾提取物。[0022]实施例2:褐毛橐吾提取物的制备 (1)褐毛橐吾22kg，粉碎，过10目筛，采用超临界二氧化碳萃取技术，萃取温度40_°C、萃取压力20MPa、萃取时间lh，萃取挥发油，收集挥发油，即得褐毛橐吾提取物A，超临界二氧化碳萃取后的褐毛橐吾药渣A备用； (2)将步骤(1)得到的褐毛橐吾药渣A用浓度70%乙醇为溶剂，在50°C温浸提取，提取次数为2次，每次提取时间为I小时，每次溶剂用量为褐毛橐吾重量的10倍，滤过，得药渣B和提取液，提取液回收乙醇，浓缩，干燥，即得褐毛橐吾提取物B ; (3)将步骤(2)得到的药渣B，加水回流提取，提取次数为I次，每次提取时间为3小时，每次水用量为药渣B重量的12倍，滤过，提取液浓缩至相对密度d=l.12，通过DlOl大孔吸附树脂，先用水洗脱，再用浓度30%的乙醇溶液洗脱，收集30%浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得褐毛橐吾提取物C ； (4)上述褐毛橐吾提取物A、褐毛橐吾提取物B、褐毛橐吾提取物C混匀，即得本发明的褐毛橐吾提取物。[0023]实施例3:褐毛橐吾提取物的制备 (1)褐毛橐吾18kg，粉碎，过50目筛，采用超临界二氧化碳萃取技术，萃取温度50°C、萃取压力30MPa、萃取时间2h，萃取挥发油，收集挥发油，即得褐毛橐吾提取物A，超临界二氧化碳萃取后的褐毛橐吾药渣A备用； (2)将步骤(1)得到的褐毛橐吾药渣A用浓度95%乙醇为溶剂，在80°C温浸提取，提取次数为4次，每次提取时间为3小时，每次溶剂用量为褐毛橐吾重量的15倍，滤过，得药渣B和提取液，提取液回收乙醇，浓缩，干燥，即得褐毛橐吾提取物B ; (3)将步骤(2)得到的药渣B，加水回流提取，提取次数为4次，每次提取时间为I小时，每次水用量为药渣B重量的8倍，滤过，提取液浓缩至相对密度d=l.12，通过HPD600大孔吸附树脂，先用水洗脱，再用浓度70%的乙醇溶液洗脱，收集70%浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得褐毛橐吾提取物C ； (4)上述褐毛橐吾提取物A、褐毛橐吾提取物B、褐毛橐吾提取物C混匀，即得本发明的褐毛橐吾提取物。
[0024]实施例4:褐毛橐吾提取物片剂的制备
取:实施例1褐毛橐吾提取物325g，加入淀粉55g，混匀，制粒，干燥，过筛，加微晶纤维素25g，硬脂酸镁3.5g，混匀，压制成1000片，即得褐毛橐吾提取物片剂。
[0025]实施例5:褐毛橐吾提取物颗粒剂的制备
取实施例2褐毛橐吾提取物225g，加入糊精110g，混匀，制粒，干燥，整粒，即得褐毛橐吾提取物颗粒剂。
[0026]实施例6:褐毛橐吾提取物胶囊的制备
取实施例3褐毛橐吾提取物315g，加入淀粉85g，混匀，制粒，干燥，整粒，装胶囊1000粒，即得褐毛橐吾提取物胶囊。
[0027]实验例1:褐毛橐吾各提取物抑制HL-60细胞增殖和诱导HL-60细胞凋亡试验 I材料和方法
1.1材料:RPMI1640培养基购于Gibco公司；四甲基偶氮唑盐(MTT)、罗丹明123为Sigma公司产品；Caspase_3, 9分光光度法检测试剂盒购自南京凯基生物有限公司；其他化学试剂均为国产分析纯。褐毛橐吾提取物、褐毛橐吾提取物A、褐毛橐吾提取物B、褐毛橐吾提取物C(实施例1方法制备得到，批号分别为:20110202、20110203、20110204、20110205)。
[0028]1.2细胞培养:人早幼粒细胞性白血病细胞株HL-60购于中科院上海细胞生物研究所，培养于含10%胎牛血清的RPMI1640培养液中，青霉素100kU/L，链霉素100 mg/L, 370C，5%C02，饱和湿度培养箱内培养，取对数生长期细胞进行实验。
[0029]1.3人外周血单个核细胞(PBMC)的分离:无菌采集健康供者静脉血，肝素抗凝(每毫升全血加0.1ml的200U/ml肝素钠溶液)，PBS等倍稀释血液，1:4加入人淋巴细胞分离液，2000rpm离心20min,收集乳白层后用无血清RPM1-1640培养基1500rpml0min离心洗涤2次，获得单个核细胞，台盼蓝拒染率大于95%，重悬于10% FCS的RPM1-1640培养基中备用。
[0030]1.4褐毛橐吾各提取物对HL-60细胞和人PBMC生长的影响:接种HL-60细胞和人PBMC与96孔板，每孔2 X IO4个细胞(IOOul)。371:、5% CO2条件下培养24h后，实验组一次加50ug/mL褐毛橐吾提取物、50ug/mL褐毛橐吾提取物A、50ug/mL褐毛橐吾提取物B、50ug/mL褐毛橐吾提取物C，继续分别培养24、48、72h后，终止培养，设只加培养液的对照组，每个剂量组设4个复孔。实验结束前4h，每孔加入20ul MTT溶液(5g/L)，继续孵4h，终止培养，小心吸弃上清液，每孔加入150uL DMS0，震荡lOmin，选择570nm波长，在自动酶联检测仪上测定各孔吸光度(A)值，重复实验3次，并计算其生长抑制率(Cl)。Cl=(阴性对照组A值-实验组A值)/阴性对照组A值X 100%。
[0031]1.5流式细胞术测定细胞凋亡率:收集50ug/mL褐毛橐吾提取物、50ug/mL褐毛橐吾提取物A、50ug/mL褐毛橐吾提取物B、50ug/mL褐毛橐吾提取物C处理48h的各组细胞，PBS洗涤2次，加入预冷的70%乙醇于-20°C固定24h，离心洗涤后加入200uLPI染液，50ulRNA酶，4°C避光放置20min，1500rpm离心5min。调整细胞浓度为I X IO5个/ml~IXlO6个/ml，上流式细胞仪分析，激发光源为氢离子激光，激发波长为488nm。
[0032]1.6统计学分析本实验结果应用统计分析:软件SPSS13.0处理，组间比较采用单因素方差分析。[0033]2 结果
2.1褐毛橐吾各提取物对HL-60细胞及PBMC生长的影响
对照组HL-60细胞生长活跃，经50ug/mL的褐毛橐吾提取物、50ug/mL的褐毛橐吾提取物A、50ug/mL的褐毛橐吾提取物B、50ug/mL的褐毛橐吾提取物C处理24、48、72h后，HL-60细胞生长均不同程度的减慢，并呈时间、浓度依赖性。在相同浓度下，培养72h褐毛橐吾各提取物对人PBMC几乎无抑制作用，与HL-60细胞比较有显著性差异(P〈0.05)(见表1)。
[0034]表1褐毛橐吾各提取物对HL-60细胞增殖的影响(n=4)
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[0035]2.2流式细胞术检测HL-60细胞凋亡
HL-60细胞与褐毛橐吾各提取物作用48h后，经流式细胞仪分析，结果显示G1期峰前均出现了代表细胞凋亡的亚二倍体峰，其中50.0ug/mL褐毛橐吾提取物作用48h凋亡率达到(40.38 ±3.78) %(表 2)。
[0036]表2褐毛橐吾各提取物作用48h后对HL-60细胞凋亡率的影响(n=3)
【权利要求】
1.一种褐毛橐吾提取物在制备治疗白血病药物中的应用，所述褐毛橐吾提取物的制备方法为: (1)褐毛橐吾，粉碎，过10-50目筛，采用超临界二氧化碳萃取技术，萃取温度400C -50°C、萃取压力20-30MPa、萃取时间l_2h，萃取挥发油，收集挥发油，即得褐毛橐吾提取物A，超临界二氧化碳萃取后的褐毛橐吾药渣A备用； (2)将步骤(1)得到的褐毛橐吾药渣A用浓度70%-95%乙醇为溶剂，在50°C_80°C温浸提取，提取次数为2-4次，每次提取时间为1-3小时，每次溶剂用量为褐毛橐吾重量的10-15倍，滤过，得药渣B和提取液，提取液回收乙醇，浓缩，干燥，即得褐毛橐吾提取物B ; (3)将步骤(2)得到的药渣B，加水回流提取，提取次数为1-4次，每次提取时间为1-3小时，每次水用量为药渣B重量的8-12倍，滤过，提取液浓缩至相对密度d=l.12，通过大孔吸附树脂，先用水洗脱，再用浓度30%-70%的乙醇溶液洗脱，收集不同浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得褐毛橐吾提取物C ； (4)上述褐毛橐吾提取物A、褐毛橐吾提取物B、褐毛橐吾提取物C，其中一种或两种或三种按一定比例混匀，即得本发明的褐毛橐吾提取物。
2.根据权利要求1所述的褐毛橐吾提取物的制备方法为: (1)褐毛橐吾，粉碎，过10-50目筛，采用超临界二氧化碳萃取技术，萃取温度400C -50°C、萃取压力20-30MPa、萃取时间l_2h，萃取挥发油，收集挥发油，即得褐毛橐吾提取物A，超临界二氧化碳萃取后的褐毛橐吾药渣A备用； (2)将步骤(1)得到的褐毛橐吾药渣A用浓度70%-95%乙醇为溶剂，在50°C_80°C温浸提取，提取次数为2-4次，每次提取时间为1-3小时，每次溶剂用量为褐毛橐吾重量的10-15倍，滤过，得药渣B和提取液，提取液回收乙醇，浓缩，干燥，即得褐毛橐吾提取物B ; (3)将步骤(2)得到的药渣B，加水回流提取，提取次数为1-4次，每次提取时间为1-3小时，每次水用量为药渣B重量的8-12倍，滤过，提取液浓缩至相对密度d=l.12，通过大孔吸附树脂，先用水洗脱，再用浓度30%-70%的乙醇溶液洗脱，收集不同浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得褐毛橐吾提取物C ； (4)上述褐毛橐吾提取物A、褐毛橐吾提取物B、褐毛橐吾提取物C混匀，即得本发明的褐毛橐吾提取物。
3.根据权利要求1所述的褐毛橐吾提取物的制备方法为: (1)褐毛橐吾，粉碎，过30目筛，采用超临界二氧化碳萃取技术，萃取温度45°C、萃取压力25MPa、萃取时间2h，萃取挥发油，收集挥发油，即得褐毛橐吾提取物A，超临界二氧化碳萃取后的褐毛橐吾药渣A备用； (2)将步骤(1)得到的褐毛橐吾药渣A用浓度80%乙醇为溶剂，在70°C温浸提取，提取次数为2次，每次提取时间为2小时，每次溶剂用量为褐毛橐吾重量的12倍，滤过，得药渣B和提取液，提取液回收乙醇，浓缩，干燥，即得褐毛橐吾提取物B ; (3)将步骤(2)得到的药渣B，加水回流提取，提取次数为2次，每次提取时间为2小时，每次水用量为药渣B重量的12倍，滤过，提取液浓缩至相对密度d=l.12，通过HPD600大孔吸附树脂，先用水洗脱，再用浓度50%的乙醇溶液洗脱，收集50%浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得褐毛橐吾提取物C ； (4)上述褐毛橐吾提取物A、褐毛橐吾提取物B、褐毛橐吾提取物C混匀，即得本发明的褐毛橐吾提取物。
4.根据权利要求1、权利要求2所述的褐毛橐吾提取物的制备方法，其特征在于:所采用的大孔吸附树脂为HPD600大孔吸附树脂、DlOl大孔吸附树脂。
5.根据权利要求1所述的褐毛橐吾提取物A、褐毛橐吾提取物B、褐毛橐吾提取物C在制备治疗白血病药物中的应用。
6.根据权利要求1所述的褐毛橐吾提取物A、褐毛橐吾提取物B、褐毛橐吾提取物C与化学药或中药或天然药物组成治疗白血病药物。
7.根据权利要求1所述的褐毛橐吾提取物与化学药或中药或天然药物组成治疗白血病药物。
8.根据权利要求1、权利要求2、权利要求3所述的褐毛橐吾提取物，通过加入药剂学允许的各种辅料，制成药剂学上的片剂、颗粒剂、胶囊等口服剂型。
【文档编号】A61P35/02GK103585227SQ201310526719
【公开日】2014年2月19日 申请日期:2013年10月31日 优先权日:2013年10月31日
【发明者】孔倩倩 申请人:济南星懿医药技术有限公司