1.DC靶向猪蓝耳病PLGA纳米佐剂灭活疫苗,其特征在于,以10头份疫苗计,包括以下物质:PRRSV TCID50=5×105-5×107,甘露糖1-20wt%,PLGA 0.01-5wt%,Poly(I:C)0.01-5wt%。
2.一种制备权利要求1所述的DC靶向猪蓝耳病PLGA纳米佐剂灭活疫苗的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
S1.制备PLGA纳米佐剂灭活疫苗;
S2.合成甘露糖修饰的PLGA纳米佐剂疫苗。
3.如权利要求2所述的制备DC靶向猪蓝耳病PLGA纳米佐剂灭活疫苗的方法,其特征在于,所述步骤S1为:
a.制备W2相:PVA加入到水中,全部溶解;
b.制备O相:PLGA加入到二氯甲烷中,全部溶解;
c.制备W1相:Poly(I:C)与PRRSV混合,溶解充分;
d.将W1相加入到O相中,进行超声波处理得到混合物Ⅰ;
e.将混合物Ⅰ加入到W2相中,进行超声乳化后除去二氯甲烷得到混合物Ⅱ;
f.将混合物Ⅱ离心除去上清液,保留沉淀即为PLGA纳米佐剂疫苗。
4.如权利要求2所述的制备DC靶向猪蓝耳病PLGA纳米佐剂灭活疫苗的方法,其特征在于,所述步骤S2为:
a.向步骤S1得到的PLGA纳米佐剂疫苗中分别加入1-6wt%N-羟基琥珀酰亚胺和1-8wt%二环己基碳二亚胺溶液,混合均匀;
b.将步骤a混合均匀的液体置于透析袋中透析6-8小时,除去多余的N-羟基琥珀酰亚胺、二环己基碳二亚胺;
c.向经透析后的液体中加入乙二胺,用浓盐酸调节pH至5.0,形成铵化PLGA;
d.将1-20wt%甘露糖溶解于0.1mol/L醋酸钠溶液中,将甘露糖-醋酸钠溶液加入到步骤c得到的铵化PLGA中,在37℃震荡处理2天;
e.将步骤d处理后的液体离心,得到沉淀,用生理盐水洗涤、重悬沉淀即得甘露糖修饰的PLGA纳米佐剂疫苗。
5.如权利要求3所述的制备DC靶向猪蓝耳病PLGA纳米佐剂灭活疫苗的方法,其特征在于,所述的W2相中PVA的质量份数为0.25-1.25wt%。
6.如权利要求3所述的制备DC靶向猪蓝耳病PLGA纳米佐剂灭活疫苗的方法,其特征在于,所述超声乳化的条件为:时间110s,0.6s/次,振幅55%。