本发明属于医药领域，涉及一种治疗系统性红斑狼疮的中药治疗方法，具体的涉及一种治疗系统性红斑狼疮的药物组合物及其制备方法。
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：系统性红斑狼疮，是一种自身免疫性疾病。该病是以产生多种自身抗体，并由免疫反应介导炎症为特征的累及多器官、多系统的弥漫性结缔组织病，病情轻重不一。近年来，环磷酰胺、糖皮质激素冲击疗法作为重型诱导缓解的常用疗法。狼疮危象常常需要大剂量甲基泼尼松龙或加用大剂量免疫球蛋白冲击治疗。虽然近年来的治疗方面有许多新进展，但国内外仍以糖皮质激素加免疫抑制剂为主。它们常能有效控制疾病活动、改善病情，有效提高了患者的存活率。但是大剂量免疫抑制剂和糖皮质激素的副作用及并发症也不容忽视。许多临床研究表明，大剂量、甲基泼尼松龙冲击治疗后出现诸如带状疱疹、肺炎、泌尿系感染及脑炎等感染，可见于以上的患者。特别是经或甲基泼尼松龙冲击治疗后的患者免疫力低下，并发感染的几率大大增加，已成为患者死亡的主要原因之近年来，中医中药在治疗系统性红斑狼疮中的作用逐渐引起人们的重视。中医古代文献中虽没有以系统性红斑狼疮为病名的论述，但对其相似或相关论述甚广，历经数千年之积淀，对其论述涉及本病诸多方面。根据其临床症状表现，不少中医学者将它归属于“蝴蝶斑”、“阴阳毒”、“日晒疮”等范畴。目前国内中医学家对此病证认识颇多，大都认为该病的基础是先天禀赋不足。所以补其不足在系统性红斑狼疮中的研究中占重要地位。代表药物如六味地黄丸，此外百令胶囊、白芍总苷等也被常用于的辅助治疗。中国专利CN103705754B公开了一种治疗系统性红斑狼疮的中药组合物。具有显著的调节T细胞亚群活性，具有广阔的临床应用前景。但其配方中仍存在有药效不够完善的缺陷。中国专利CN104147269A公开了一种用于治疗系统性红斑狼疮的中药，它是由以下重量配比的原料药材制备而成：蒺藜苗9份、泽泻10份、忍冬藤26份、葶苈子4份、隔山消13份、白花蛇舌草20份。临床实验证明，该发明能够安全有效治疗系统性红斑狼疮，但是该发明专利的没有提供与其配方向匹配的制备工艺，药物有效成分的提取率不高。技术实现要素：有鉴于此，本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种治疗系统性红斑狼疮的药物组合物、制备方法及其用途，解决了现有技术中治疗红斑狼疮药物配方疗效不够全面，药物有效成分提取率低问题。为达到上述目的，本发明采用以下技术方案：一种治疗系统性红斑狼疮的药物组合物，包括下列重量份的原料：生地35-40份、黄芩30-35份、当归30-35份、山药30-35份、丹参30-32份、积雪草25-30份、川芎25-30份、猫爪草20-25份、金银花18-20份、忍冬藤16-18份、冬凌草15-18份、牛膝6-9份、半夏3-5份、党参3-5份、桂枝3-5份、泽泻1-3份、鸡血藤1-3份、防己1-3份。优选的，包括下列重量份的原料：生地36份、黄芩32份、当归32份、山药32份、丹参31份、积雪草28份、川芎28份、猫爪草22份、金银花19份、忍冬藤17份、冬凌草17份、牛膝8份、半夏4份、党参4份、桂枝4份、泽泻2份、鸡血藤2份、防己2份。一种治疗系统性红斑狼疮的药物组合物的制备方法，包括如下步骤，1)将原料清洗、干燥、粉碎，超微粉，得粉末；2)将步骤1)所得粉末加入1.5-2.0倍重量份的乙醇水溶液离心10-20分钟，将所得离心液与下层固体分离备用；3)向步骤2)所得下层固体加入1.5-2.0倍重量份的水，回流提取30-50分钟，静置、冷却、过滤，取滤液；4)将步骤2)所得上层离心液和步骤3)所得滤液合并，浓缩得10-15wt％的浸膏；5)将步骤4)所得浸膏加入30-50wt％的辅料、干燥、制剂。优选的，步骤1)所得粉末的粒径为5-8μm。优选的，步骤2)所述乙醇水溶液中乙醇的体积分数为45-60％。优选的，步骤2)所述离心功率为1500-2000W。优选的，所述辅料为淀粉、糊精和葡萄糖中的一种或一种以上的组合。优选的，所述剂型包括片剂、丸剂、颗粒剂。本发明中通过临床实验经验结合中药理论，将所述18味中药合理配伍，获得所述配方，配方中：生地，味甘、苦、性寒，无毒。沉也，阴也。其用有四：凉心火之血热，泻脾土之湿热，止鼻中之衄热，除五心之烦热，凉血清热，也可以生津，还可以养阴，多用于治疗阴虚内热、骨蒸劳热、舌绛烦渴、发斑发疹等问题。黄芩，性味：苦，寒，归经：入心、肺、胆、大肠经。泻实火，除湿热，止血，安胎。治壮热烦渴，肺热咳嗽，湿热泻痢，黄疸，热淋，吐、衄、崩、漏，目赤肿痛，胎动不安，痈肿疔疮。当归，补血活血，调经止痛，润肠通便。用于血虚萎黄，眩晕心悸，月经不调，经闭痛经，虚寒腹痛，肠燥便秘，风湿痹痛，跌扑损伤，痈疽疮疡。酒当归活血通经，用于经闭痛经，风湿痹痛，跌扑损伤。山药，性味甘、平、无毒；归经：归脾、肺、肾经；山药具有滋养强壮，助消化，敛虚汗，止泻之功效，主治脾虚腹泻、肺虚咳嗽、糖尿病消渴、小便短频、遗精、妇女带下及消化不良的慢性肠炎。丹参，味苦，微寒，无毒，有活血散淤、消肿止血、消炎止痛、调经止痛、扩张冠状动脉、改善心肌缺血状况、降低血压、安神静心、降血糖和抗菌等功效，对月经不调，经闭痛经，症瘕积聚，胸腹刺痛，热痹疼痛，疮疡肿痛，心烦不眠；肝脾肿大，心绞痛等病症有一定的疗效。此外，近代医学实验证明，丹参还具有抗血小板凝聚、降低血液黏度及调节内外凝血系统的功能，是一种安全又可靠的治疗心脏血管疾病的天然中药。积雪草，清热利湿，消肿解毒。治痧气腹痛，暑泻，痢疾，湿热黄疸，砂淋，血淋，吐、衄、咳血，目赤，喉肿，风疹，疥癣，疔痈肿毒，跌打损伤。川芎，行气、祛风、活血、为治疗头痛之首选药物。治疗月经不调、经闭痛经、产后瘀滞腥痛；症瘕肿块；胸胁疼痛；头痛眩晕；风寒湿痹；跌打损伤；痈疽疮疡。猫爪草，性味甘、辛，微温。归经：归肝、肺经；化痰散结，解毒消肿；主治瘰疬痰核，疔疮，虫蛇咬伤，偏头痛，疟疾，牙痛；肺结核，淋巴结结核，淋巴结炎，咽喉炎。金银花，性味甘，微苦，清香，辛，寒。归肺，胃，心，大肠经；具有清热解毒、透邪外出、和胃止呕作用，可用以邪热壅阻，胃气不和，发热烦躁，胸膈痞闷，口渴干呕，舌红苔燥，脉象滑数。忍冬藤，本药又名银花藤。具有清热解毒，疏风通络的疗效。可用于温病发热，疮痈肿毒，热毒血痢，风湿热痹。主要含黄酮类忍冬苷和绿原酸等成分。叶含忍冬苷，即木樨草素一葡萄糖苷、木樨草素、忍冬黄素等黄酮类化合物；忍冬地上部分含绿原酸，比金银花含量低；忍冬茎含生物碱、鞣酸；(一)抗炎有显著的抗炎活性，肌内注射能显著抑制大鼠足肿胀和胸膜渗出。木樨草素口服可使幼鼠胸腺萎缩，表明其能增强坚肾上腺皮质功能，其抗炎作用与此有关；(二)抗过敏反应和免疫调节，对工型变态反应有显著的抑制作用。抗过敏反应的机制与其能抑制过敏介质释放，竞争性拮抗SRS-A(缓慢反应物质)的致痉作用和组胺的作用，以及直接使平滑肌解痉有关。冬凌草，性味：苦、甘、微寒。功效：清热、解毒、活血止痛。主治：咽喉肿痛、扁桃体炎、蛇虫咬伤、风湿骨痛等。泽泻，性味：甘寒，小便不利，淋病尿血，湿热痰饮，水肿胀满，脚气，利尿。作用显著，能增加尿量、尿素与氯化物的排泄。2、降胆固醇。动物实验发现，泽泻对家兔血中胆固醇含量有轻度抑制作用，能减轻动脉粥样硬化的发展，但临床尚未用于治疗动脉硬化。牛膝，性味：苦、甘、酸，平。归经：归肝、肾经。功效：逐瘀通经，补肝肾，强筋骨，利尿通淋，引血下行。主治：经闭、痛经、腰膝酸痛、筋骨无力、淋证、水肿、头痛、牙痛、日疮、吐血、衄血。半夏，性味：辛，平，生微寒，熟温，有毒，入脾、胃经，燥湿化痰，降逆止呕，消痞散结。治湿痰冷饮，呕吐，反胃，咳喘痰多，胸膈胀满，痰厥头痛，头晕不眠，外消痈肿。党参，燥湿化痰，降逆止呕，消痞散结。用于痰多咳喘，痰饮眩悸，风痰眩晕，痰厥头痛，呕吐反胃，胸脘痞闷，梅核气；生用外治痈肿痰核。桂枝，其性味辛、甘，温，入肺、心、膀胱经，是主治里寒常用的温里药，具有补元阳、通血脉、暖脾胃之功效，常与补肝肾药、补气血药配伍，治疗肾阳不足、命门火衰、肢冷脉微，与其它温里药配伍治疗脘腹冷痛、寒痹腰痛，具有明显的镇痛和抗癌防癌的作用。现有的各种驱风油类药物如清凉油、风湿油等皆含有桂油成分。鸡血藤，功效作用：补血行血，通经活络。1.对造血系统的作用，2.对凝血、纤溶的作用，3.抑制心脏和降低血压作用，4.抗癌作用，5.对脂质代谢的调节。防己，味辛、苦，性寒，归膀胱、肺经，祛风止痛，利水消肿，用于风湿痹痛，水肿脚气，小便不利，湿疹疮毒。本发明的有益效果是：1、本发明以临床试验经验结合传统中药理论，以君臣佐使为基础，合理调配各中药组分，确保各中药组分间的相互作用。君药为生地、黄芩，臣药为山药、当归、丹参，佐药为积雪草、川芎、猫爪草、金银花、忍冬藤、冬凌草；使药为牛膝、半夏、党参、桂枝、泽泻、鸡血藤、防己。君药是本方剂中主要的药物，针对的是系统性红斑狼疮的主要矛盾，生地凉心火之血热，泻脾土之湿热，黄芩，性味：苦，寒，归经：入心、肺、胆、大肠经。泻实火，除湿热，止血。臣药有辅助君药治疗系统性红斑狼疮的作用，丹参，味苦，微寒，无毒，有活血散淤、消肿止血、消炎止痛、调经止痛、扩张冠状动脉、改善心肌缺血状况、降低血压、安神静心、降血糖和抗菌等功效，当归，补血活血，调经止痛；同时用来治疗系统性红斑狼疮兼症，增强免疫抵抗力。佐助药能辅助君、臣药治疗主症，或直接治疗次要兼症。积雪草，清热利湿，消肿解毒；川芎，行气、祛风、活血，；金银花，性味甘，微苦，清香，辛，寒。归肺，胃，心，大肠经；忍冬藤，本药又名银花藤。具有清热解毒，疏风通络的疗效。是辅助君药生地去火泄湿之功效；猫爪草，性味甘、辛，微温。归经：归肝、肺经；化痰散结，解毒消肿；冬凌草，性味：苦、甘、微寒，则为反佐药，为药效过盛时起效。邪盛的病人服药可能会拒药，用反佐药则可以防止拒药。使药是引经药或调和药。泽泻，性味：甘寒，利尿；牛膝，性味：苦、甘、酸，平。归经：归肝、肾经。半夏，性味：辛，平，生微寒，熟温，有毒，入脾、胃经，燥湿化痰，降逆止呕，消痞散结。党参，燥湿化痰，降逆止呕，消痞散结。桂枝，其性味辛、甘，温，入肺、心、膀胱经，鸡血藤，；补血行血，通经活络；防己，味辛、苦，性寒，归膀胱、肺经，祛风止痛，利水消肿。因系统性红斑狼疮为免疫类疾病，其病症会诱发各类疾病症状，因而在疾病治疗中，需要多方调和，以达到标本兼治的目的。总的来说，君臣佐使得配伍理论是为了兼顾疾病的主症和兼症，并确保用药不伤正气，不留邪气。2、本发明提供的制备方法中包括药物有效成分的分步提取和制剂，通过分步提取，能够高效率的提取中药有效成分，获得更好的疗效，首先通过超微粉碎技术加速中药组方中药物有效成分的的溶出，再经过离心分离，取上清液获得大部分的中药成分，其中离心选取体积分数为45-60％乙醇水溶液，离心10-20分钟，离心功率为1500-2000W。本发明组方中，为了达到标本兼治、固本清源的目的，采用18位中药，依照君臣佐使的理论精选调配，其药物有效成分涉及到黄酮、绿原酸、葡萄糖苷、精油等各类成分，对提取的方法，温度等具有严格的要求，特别是低挥发性、高活性的有效成分需要在较低温度下，较为快速的提取，因而提取溶剂的选择要兼顾所需有效成分各自的特性，实验发现，体积分数为45-60％乙醇水溶液，离心功率为1500-2000W满足高效提取有效成分的目的，离心10-20分钟，基本达到提取极限，且药物有效成分不被破坏；回流提取是对离心提取的必要补充，避免低温条件下药物有效成分提取不彻底，又避免了高温对温度敏感的有效药物成分的破坏。具体实施方式实施例1一种治疗系统性红斑狼疮的药物组合物，包括下列重量份的原料：生地35份、黄芩30份、当归30份、山药30份、丹参30份、积雪草25份、川芎25份、猫爪草20份、金银花18份、忍冬藤16份、冬凌草15份、牛膝6份、半夏3份、党参3份、桂枝3份、泽泻1份、鸡血藤1份、防己1份。其制备方法，包括如下步骤，1)将原料清洗、干燥、粉碎，超微粉，得粒径为5μm的粉末；2)将步骤1)所得粉末加入1.5倍重量份的体积分数为45％的乙醇水溶液离心10分钟，离心功率为1500W，将所得离心液与下层固体分离备用；3)向步骤2)所得下层固体加入1.5倍重量份的水，回流提取30分钟，静置、冷却、过滤，取滤液；4)将步骤2)所得上层离心液和步骤3)所得滤液合并，浓缩得含水量10wt％的浸膏；5)将步骤4)所得浸膏加入30wt％的淀粉和糊精的混合物，淀粉和糊精的重量比为1:2，干燥、制成片剂。实施例2一种治疗系统性红斑狼疮的药物组合物，包括下列重量份的原料：生地40份、黄芩35份、当归35份、山药35份、丹参32份、积雪草30份、川芎30份、猫爪草25份、金银花20份、忍冬藤18份、冬凌草18份、牛膝9份、半夏5份、党参5份、桂枝5份、泽泻3份、鸡血藤3份、防己3份。其制备方法，包括如下步骤，1)将原料清洗、干燥、粉碎，超微粉，得粒径为8μm的粉末；2)将步骤1)所得粉末加入2.0倍重量份的体积分数为60％的乙醇水溶液离心20分钟，离心功率为2000W，将所得离心液与下层固体分离备用；3)向步骤2)所得下层固体加入2.0倍重量份的水，回流提取50分钟，静置、冷却、过滤，取滤液；4)将步骤2)所得上层离心液和步骤3)所得滤液合并，浓缩得含水量15wt％的浸膏；5)将步骤4)所得浸膏加入50wt％的糊精、淀粉和葡萄糖的混合物，糊精、淀粉和葡萄糖的重量比为3:2:2，干燥、制成丸剂。实施例3一种治疗系统性红斑狼疮的药物组合物，包括下列重量份的原料：生地36份、黄芩32份、当归32份、山药32份、丹参31份、积雪草28份、川芎28份、猫爪草22份、金银花19份、忍冬藤17份、冬凌草17份、牛膝8份、半夏4份、党参4份、桂枝4份、泽泻2份、鸡血藤2份、防己2份。其制备方法，包括如下步骤，1)将原料清洗、干燥、粉碎，超微粉，得粒径为6μm的粉末；2)将步骤1)所得粉末加入1.8倍重量份的体积分数为50％的乙醇水溶液离心15分钟，离心功率为1700W，将所得离心液与下层固体分离备用；3)向步骤2)所得下层固体加入1.8倍重量份的水，回流提取40分钟，静置、冷却、过滤，取滤液；4)将步骤2)所得上层离心液和步骤3)所得滤液合并，浓缩得含水量13wt％的浸膏；5)将步骤4)所得浸膏加入40wt％的葡萄糖和淀粉的混合物，葡萄糖和淀粉的重量比为2:1，干燥、制成颗粒剂。实施例4一种治疗系统性红斑狼疮的药物组合物，包括下列重量份的原料：生地36份、黄芩31份、当归31份、山药31份、丹参30份、积雪草26份、川芎26份、猫爪草21份、金银花19份、忍冬藤17份、冬凌草16份、牛膝7份、半夏4份、党参3份、桂枝4份、泽泻1份、鸡血藤3份、防己2份、青黛2份。其制备方法，包括如下步骤，1)将原料清洗、干燥、粉碎，超微粉，得粒径为6μm的粉末；2)将步骤1)所得粉末加入1.6倍重量份的体积分数为50％的乙醇水溶液离心12分钟，离心功率为1600W，将所得离心液与下层固体分离备用；3)向步骤2)所得下层固体加入1.6倍重量份的水，回流提取35分钟，静置、冷却、过滤，取滤液；4)将步骤2)所得上层离心液和步骤3)所得滤液合并，浓缩得含水量11wt％的浸膏；5)将步骤4)所得浸膏加入35wt％的淀粉和葡萄糖的混合物，淀粉与葡萄糖的重量比为1:1；干燥、制成丸剂。青黛为常用中药,具有清热解毒、凉血消斑、泻火定惊之功效。因其不溶于水,古今常在丸散剂中应用,本课题将青黛引入到配方中，增强本配方药物抗炎特性的同时，改善丸剂本身的物理特性。实施例5一种治疗系统性红斑狼疮的药物组合物，包括下列重量份的原料：生地36份、黄芩32份、当归32份、山药32份、丹参30份、积雪草27份、川芎27份、猫爪草22份、金银花19份、忍冬藤17份、冬凌草16份、牛膝8份、半夏3份、党参4份、桂枝5份、泽泻1份、鸡血藤3份、防己2份、栀子5份。其制备方法，包括如下步骤，1)将原料清洗、干燥、粉碎，超微粉，得粒径为7μm的粉末；2)将步骤1)所得粉末加入1.7倍重量份的体积分数为55％的乙醇水溶液离心14分钟，离心功率为1700W，将所得离心液与下层固体分离备用；3)向步骤2)所得下层固体加入1.7倍重量份的水，回流提取40分钟，静置、冷却、过滤，取滤液；4)将步骤2)所得上层离心液和步骤3)所得滤液合并，浓缩得含水量12wt％的浸膏；5)将步骤4)所得浸膏加入40wt％的淀粉和葡萄糖的混合物，淀粉和葡萄糖的重量比为1:1；干燥、制成片剂。研究表明，栀子在心脑血管系统方面有多种药理功效,如抗氧化、清除自由基作用，抑制血小板聚集,调节血脂,防止动脉粥样硬化等，在本配方中加入栀子，其抗氧化、清除自由基的功能使得本组方原有药物成分不易被破坏，同时能够在配合本发明原有组方成分作用，增加免疫调节功能，更好的协调增强心血管的功能，有效增加药物疗效。实施例6一种治疗系统性红斑狼疮的药物组合物，包括下列重量份的原料：生地37份、黄芩33份、当归33份、山药33份、丹参31份、积雪草28份、川芎28份、猫爪草23份、金银花20份、忍冬藤18份、冬凌草17份、牛膝9份、半夏4份、党参5份、桂枝3份、泽泻2份、鸡血藤1份、防己3份。其制备方法，包括如下步骤，1)将原料清洗、干燥、粉碎，超微粉，得粒径为8μm的粉末；2)将步骤1)所得粉末加入1.8倍重量份的体积分数为60％的乙醇水溶液离心16分钟，离心功率为1800W，将所得离心液与下层固体分离备用；3)向步骤2)所得下层固体加入1.8倍重量份的水，回流提取45分钟，静置、冷却、过滤，取滤液；4)将步骤2)所得上层离心液和步骤3)所得滤液合并，浓缩得含水量13wt％的浸膏；5)将步骤4)所得浸膏加入45wt％的糊精和葡萄糖的混合物，糊精和葡萄糖的重量比为1:3；干燥、制成颗粒剂。实施例7一种治疗系统性红斑狼疮的药物组合物，包括下列重量份的原料：生地38份、黄芩34份、当归34份、山药34份、丹参32份、积雪草29份、川芎29份、猫爪草24份、金银花18份、忍冬藤16份、冬凌草18份、牛膝6份、半夏5份、党参3份、桂枝4份、泽泻43份、鸡血藤2份、防己1份。其制备方法，包括如下步骤，1)将原料清洗、干燥、粉碎，超微粉，得粒径为5μm的粉末；2)将步骤1)所得粉末加入1.9倍重量份的体积分数为48％的乙醇水溶液离心17分钟，离心功率为1900W，将所得离心液与下层固体分离备用；3)向步骤2)所得下层固体加入1.9倍重量份的水，回流提取50分钟，静置、冷却、过滤，取滤液；4)将步骤2)所得上层离心液和步骤3)所得滤液合并，浓缩得含水量14wt％的浸膏；5)将步骤4)所得浸膏加入50wt％的淀粉、糊精和葡萄糖的混合物，淀粉、糊精和葡萄糖的重量比为2:1:1；干燥、制成颗粒剂。实施例8一种治疗系统性红斑狼疮的药物组合物，包括下列重量份的原料：生地39份、黄芩35份、当归35份、山药35份、丹参30份、积雪草30份、川芎30份、猫爪草25份、金银花19份、忍冬藤17份、冬凌草16份、牛膝8份、半夏4份、党参34份、桂枝34份、泽泻2份、鸡血藤12份、防己12份。其制备方法，包括如下步骤，1)将原料清洗、干燥、粉碎，超微粉，得粒径为6μm的粉末；2)将步骤1)所得粉末加入2.0倍重量份的体积分数为53％的乙醇水溶液离心20分钟，离心功率为2000W，将所得离心液与下层固体分离备用；3)向步骤2)所得下层固体加入2.0倍重量份的水，回流提取38分钟，静置、冷却、过滤，取滤液；4)将步骤2)所得上层离心液和步骤3)所得滤液合并，浓缩得含水量15wt％的浸膏；5)将步骤4)所得浸膏加入48wt％的淀粉和葡萄糖的混合物，淀粉和葡萄糖的重量比为3:1，干燥、制成颗粒剂。(二)药效实施例部分实施例3药物组合物颗粒剂对系统性红斑狼疮MRL/lpr小鼠的影响实验1.实验材料1.1实验动物及分组8周龄系统性红斑狼疮(SLE)MRL/lpr小鼠50只，雌性，由上海斯莱克实验动物有限公司提供，适应性饲养一周后，按体重随机分为5组，每组10只。ICR小鼠10只，雌性，作为正常对照组小鼠。正常对照组：灌胃给予溶剂；SLE模型组：灌胃给予溶剂；泼尼松组：灌胃给予5mg/kg；药物组合物低剂量组：灌胃给予本发明实施例3制备的药物0.5mg/kg；药物组合物中剂量组：灌胃给予本发明实施例3制备的药物1mg/kg；药物组合物高剂量组：灌胃给予本发明实施例3制备的药物4mg/kg。所有试验组每天给药1次，连续给药3周，于给药结束时取血备用，摘取脾脏。1.2试剂(1)IL-10、抗ds-DNA抗体试剂盒购自上海柯丰生物试剂有限公司。(2)PBS：称取下列试剂8.5gNaCl，0.2gKCl，2.85gNa2HPO4·12H2O，0.27gKH2PO4，用1L双蒸水定容，以上试剂均是为市售分析纯。(3)红细胞裂解液：先配制0.83％NH4Cl，再配制tris溶液(称取tris20.594g溶于500-700ml蒸馏水中，再用1MHCl调pH7.65至1L)，把0.83％NH4Cl与tris溶液按9:1比例混合后即得。(4)抗小鼠荧光标记单克隆抗体CD3(FITC)，为BeckmanCoulter公司产品。(5)抗小鼠荧光标记单克隆抗体CD4(PE)、CD8a(PE)，Caltaglaboratories产品。实验方法2.1T淋巴细胞亚群分析脾细胞单细胞悬液的制备：把小鼠的脾脏放入盛有冷PBS液的培养皿中清洗，在玻璃匀浆器中加入3mlPBS研磨，再用200目不锈钢网过滤，把脾匀浆液离心以转速1500rpm/min离心7分钟，弃上清液，并加入红细胞裂解液2.5ml，混匀，静置2分钟后再加入PBS液2ml终止裂解反应，再以1500rpm/min离心7分钟，弃去上清液，用PBS洗三次后加入PBS，在荧光显微镜下计算细胞数。以上的操作均需在冰上。用以上脾细胞单细胞悬液，计细胞数后，把细胞浓度调整为5×106cells/ml。每一组取其中一只小鼠脾细胞样本做亚群分析，把已调整浓度的小鼠脾细胞样本加入流式细胞分析专用管，每只小鼠脾细胞样本制备两管，每管加入样本100μl。在含有样品专用管的第一管加5μlCD3(FITC)和3μlCD4(PE)，第二管加5μlCD3(FITC)和3μlCD8(PE)。室温闭光孵育20min，各管加入500μl鞘液，振荡混匀。准备上机分析。2.2血清IL-10、抗ds-DNA抗体含量测定：按试剂盒操作说明操作即可。2.3尿微量白蛋白的测定：实验试剂：10％(v/v)的冰醋酸溶液(PH2.8)；0.303mol/L甘氨酸-冰醋酸缓冲液(PH3.0)：称取22.72g甘氨酸，用10％冰醋酸溶液稀释成1000ml，加NaN3100mg，室温密封可稳定1年；溴酚蓝(1.924mmol/L)贮存液：精确称取257.36mgBPB，用无水乙醇溶至200ml，4℃冰箱可稳定1年；溴酚蓝(0.231mmol/L)显色剂：取60mlBPB贮存液，加入2.5mlTritonX-100，用甘氨酸-冰醋酸缓冲液稀释至500ml，室温密封可保存1年。标本的采集和检测：于第20天将小鼠分别放于代谢笼中饲养，收集隔夜12小时尿，准确记录尿量。叠氮钠处理后，离心(2000r/min)10min，量取储存的小鼠尿液2ml，各加显色剂1ml，混匀(防止产生气泡)，用紫外分光光度计于600nm下测定吸光度A。吸光度A反映尿微量白蛋白的含量大小，A值越小，尿微量白蛋白含量越低。实验数据按照以下方法进行统计学处理：采用SPSS10.0统计软件，计算数据以均数±标准差表示，多组资料比较采用方差分析，组内比较采用t检验。以p＜0.05为有统计学意义。实验结果3.1本发明对SLE小鼠T淋巴细胞亚群的影响CD3+CD4+淋巴细胞是辅助性T细胞(Th)，CD3+CD8+淋巴细胞主要起抑制性调节作用，SLE小鼠模型组CD3+CD4+淋巴细胞水平比正常对照组的下降，SLE小鼠模型组CD3+CD8+淋巴细胞水平比正常对照组的上升，本发明能使SLE小鼠下降的CD3+CD4+T细胞上升，使上升的CD3+CD8+T下降，其中药物组合物中剂量组效果较好，这表明，本发明的药物能够纠正SLE小鼠T细胞亚群的失衡状态。试验结果见表1。表1本发明对SLE小鼠T淋巴细胞亚群的影响组别CD3+CD4+(％)CD3+CD8+(％)正常对照组14.804.00SLE模型组12.006.80泼尼松组12.506.60药物组合物低剂量组13.804.80药物组合物中剂量组14.104.10药物组合物高剂量组13.205.403.2本发明对血清IL-10、抗ds-DNA抗体含量的影响与正常对照组比较，SLE模型小鼠的IL-10和抗ds-DNA抗体水平明显升高，与SLE模型组相比，本发明能显著降低SLE小鼠血清IL-10和抗ds-DNA抗体水平，其中药物组合物低、中剂量组效果尤为显著，优于阳性药，其中药物组合物中剂量组与正常对照组无显著性差异。这表明，本发明的药物对于SLE小鼠治疗效果显著。试验结果见表2。表2本发明对SLE小鼠血清IL-10、抗ds-DNA抗体含量的影响*与正常对照组相比，p＜0.05；**与正常对照组相比，p＜0.01；#与SLE模型组相比，p＜0.05；##与SLE模型组相比，p＜0.01。3.3本发明对SLE小鼠尿微量白蛋白含量的影响微量白蛋白尿反映肾脏异常渗漏蛋白质，正常对照组尿液中仅出现极少量白蛋白，SLE模型组白蛋白含量明显升高，反映SLE小鼠肾脏有损伤；与模型组相比，本发明能显著降低SLE小鼠尿液中白蛋白的含量，药物组合物低、中剂量组效果尤为显著，优于阳性药，并且药物组合物低、中剂量组与正常对照组无显著性差异。这进一步表明，本发明的药物对于SLE小鼠肾脏损伤具有突出的治疗效果。试验结果见表3。表3.本发明对SLE小鼠尿微量白蛋白含量的影响组别吸光度A(OD)正常对照组0.087±0.016SLE模型组0.0785±0.214**泼尼松组0.416±0.113*#药物组合物低剂量组0.187±0.083##药物组合物中剂量组0.175±0.049##药物组合物高剂量组0.481±0.205*#*与正常对照组相比，p<0.05；**与正常对照组相比，p<0.01；#与SLE模型组相比，p<0.05；##与SLE模型组相比，p<0.01。在T淋巴细胞亚群分析试验中，与SLE模型组相比，本发明能使SLE样小鼠下降的CD3+CD4+T细胞上升，使上升的CD3+CD8+T下降，纠正T细胞亚群的失衡状态；在血清IL-10、抗ds-DNA抗体含量测定试验中，与SLE模型组相比，本发明能显著降低SLE小鼠血清IL-10和抗ds-DNA抗体水平的升高，其中药物组合物中剂量组与正常对照组无显著性差异，说明本发明的药物对于SLE小鼠治疗效果显著；在尿微量白蛋白的测定试验中，SLE模型组白蛋白含量明显升高，反映SLE小鼠肾脏有损伤，本发明能显著降低SLE小鼠尿液中白蛋白的含量，药物组合物低、中剂量组效果尤为显著，优于阳性药，并且药物组合物低、中剂量组与正常对照组无显著性差异，表明本发明的药物组合物对于SLE小鼠肾脏损伤具有突出的治疗效果。最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，本领域普通技术人员对本发明的技术方案所做的其他修改或者等同替换，只要不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。当前第1页1 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