泊那替尼在KIT突变型恶性黑色素瘤中的应用的制作方法

本发明属于生物医药领域。具体地，涉及泊那替尼在酪氨酸激酶kit突变型恶性黑色素瘤中的应用。

背景技术：

恶性黑色素瘤(melanoma)是一种起源于黑色素细胞的肿瘤，进展快、预后不良。黑素瘤分为皮肤，肢端，黏膜，眼部等黑色素瘤，其遗传背景各不相同。其中皮肤恶性黑色素瘤以brafv600e/v600k突变为主要特征，而肢端及黏膜恶性黑色素瘤好发于亚洲人群，口腔黏膜恶性黑色素瘤进展快，五年生存率仅20-25％，kit是此类黑色素瘤中主要的突变基因。

因此，本领域迫切需要开发一种对于恶性黑色素瘤，尤其是kit突变的黏膜恶性黑色素瘤具有有效抑制作用的药物。

技术实现要素：

本发明提供了一种泊那替尼的新适应症。具体地，本发明第一方面，提供了泊那替尼(ponatinib)或其药学上可接受的盐的用途，用于制备治疗酪氨酸激酶(kit)突变型恶性黑色素瘤的药物组合物中的应用。

在另一优选例中，所述酪氨酸激酶kit基因来源于哺乳动物。

在另一优选例中，所述酪氨酸激酶kit基因来源于人、小鼠或大鼠。

在另一优选例中，所述酪氨酸激酶kit基因的genbankidno.ensg00000157404。

在另一优选例中，所述酪氨酸激酶kit突变型包括选自下组一种或多种的kit突变：

v560d；

k642e；

和d816v。

在另一优选例中，所述药物组合物中，含有安全有效量的泊那替尼，和药学上可接受的载体。

在另一优选例中，所述药物组合物还含有肿瘤治疗剂。

在另一优选例中，所述肿瘤治疗剂针对恶性黑色素瘤。

在另一优选例中，所述肿瘤治疗剂包括伊马替尼。

在另一优选例中，所述恶性黑色素瘤包括kit突变的皮肤恶性黑色素瘤、黏膜恶性黑色素瘤或肢端恶性黑色素瘤。

在另一优选例中，所述药学上可接受的盐包括盐酸盐、硫酸盐、磺酸盐、碳酸盐、醋酸盐、酒石酸盐、或羟乙基磺酸盐。

在另一优选例中，所述的药物组合物包括胃肠给药剂型或胃肠外给药剂型。

在另一优选例中，所述的药物组合物包括片剂、丸剂、散剂、胶囊剂、糖浆、注射剂、贴剂、滴剂、膏剂、或喷雾剂。

在另一优选例中，所述的药物组合物的施用方式包括口服、肌肉注射、静脉注射、静脉滴注、瘤内注射、灌肠、喷雾、外敷、或腹腔注射。

在另一优选例中，所述安全有效量指的是：20-100mg/kg/d，优选地为30-80mg/kg/d，更优选为40-60mg/kg/d。

本发明第二方面，提供了一种体外非治疗性抑制kit突变型恶性黑色素瘤的方法，包括步骤：向含有kit突变型恶性黑色素瘤的细胞培养体系中加入泊那替尼或其药学上可接受的盐或含有其的药物组合物，从而kit突变型抑制恶性黑色素瘤细胞。

本发明第三方面，提供了一种治疗kit突变型恶性黑色素瘤的方法，包括步骤：向需要的对象施用安全有效量的泊那替尼或其药学上可接受的盐或含有其的药物组合物，从而治疗kit突变型恶性黑色素瘤。

应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

附图说明

图1显示了细胞活力检测kit突变对伊马替尼(imatinib)，阿西替尼(axitinib)，达沙替尼(dasatinib)，尼罗替尼(nilotinib)，泊那替尼(ponatinib)，索拉菲尼(sorafenib)，舒尼替尼(sunitinib)药物敏感性，(a)kitv560d突变的pdcs的细胞活力检测(b)kitk642e突变的pdcs的细胞活力检测(c)kitd816v突变的pdcs的细胞活力检测(d)无kit突变的pdcs的细胞活力检测作为阴性对照。

图2显示了针对kit突变及未突变的恶性黑色素瘤的体内药效评估。每天给予pdxsimatinib(100mg/kg)，dasatinib(30mg/kg)andponatinib(30mg/kg)，为期28天。肿瘤体积和体重一周测量两次。每组的模型数量大于等于5只。(a-b)v560d突变的pdx，imatinib(tgi＝25.25％)，dasatinib(tgi＝68.65％)和ponatinib(tgi＝78.33％).(c-d)kitk642e突变的pdx对于imatinib(tgi＝27.59％)，dasatinib(tgi＝81.38％)和ponatinib(tgi＝83.66％)。(e-f)kitd816v突变的pdx对于imatinib(tgi＝42.67％)，dasatinib(tgi＝67.73％)ponatinib(tgi＝99.95％)。(g-h)野生型kit的pdx对于imatinib(tgi＝17.96％)，dasatinib(tgi＝33.85％)和ponatinib(tgi＝33.26％)。*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001；****，p<0.0001，ns为没有统计学意义。

具体实施方式

本发明人经过广泛而深入的研究，首次意外地发现，泊那替尼对于酪氨酸激酶kit突变型，尤其是v560d、k642e、和d816v这三个位点突变的恶性黑色素瘤具有非常显著的肿瘤抑制作用，而这种抑制作用是其它靶点抑制剂，尤其是同类kit靶点抑制剂所不具有。因此，泊那替尼可以作为一种潜在的kit突变型恶性黑色素瘤治疗药物。在此基础上，完成了本发明。

泊那替尼

泊那替尼(ponatinib，c29h27f3n6o，selleck货号ap24534)是一种新型有效的多靶点抑制剂，已经被fda批准用于bcr-abl^t315i突变的慢性粒细胞性白血病和费城染色体阳性的急性粒细胞白血病的治疗。泊那替尼的化学结构式如i所示：

本发明所用的泊那替尼可以采用本领域已知的技术进行合成。一种优选的合成方法如下所示：

优选地，从化合物s-1出发，nbs溴代，得到苄溴化合物s-2，随后使用n-甲基哌嗪取代得到化合物s-4，使用保险粉还原硝基得到苯胺化合物s-5，最后将苯胺化合物和酰氯s-6反应，得到酰胺化合物s-7。溴代杂环s-8通过sonogashira偶联得到炔烃化合物s-9，tbaf脱去保护基，得到末端炔s-10，末端炔s-10再和碘代芳烃s-7进行sonogashira偶联反应得到普纳替尼iclusig(ponatinib)。

可用于本发明的泊那替尼包括式i化合物或其药学上可接受的盐。例如泊那替尼的盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、磺酸盐、碳酸盐、醋酸盐、酒石酸盐、甲酸盐、乙酸盐或羟乙基磺酸盐等。

在本发明中，泊那替尼或其药学上可接受的盐可以作为活性成分，来制备治疗kit突变型恶性黑色素瘤的药物组合物。本发明活性成分的制备通常可以通过常规技术手段获得，且其作用和效果可以根据细胞实验或等效性实验中与泊那替尼比较获得，均在本领域技术人员可以理解和预期的范围内。

在本发明中，泊那替尼或其药学上可接受的盐可以直接用于所需的对象，或与药学上可接受的载体混合或经制备后，以药物组合物的形式进行施用。可用于本发明的泊那替尼或其药学上可接受的盐的施用剂量通常为20-100mg/kg/d，优选地为30-80mg/kg/d，更优选为40-60mg/kg/d。而该施用的剂量在临床医师或实验室人员的可预期范围内，例如可通过有效性、安全性测试，对其剂量进行适当的调整，从而获得最优的施用剂量。

恶性黑色素瘤

恶性黑素瘤是由皮肤和其他器官黑素细胞产生的肿瘤。皮肤黑素瘤表现为色素性皮损在数月或数年中发生明显改变。虽其发病率低，但其恶性度高，转移发生早，死亡率高，因此早期诊断、早期治疗很重要。

恶性黑色素瘤的病因学尚未完全阐明。一些研究资料提示，其发生与下列危险因素有关：基因、环境及基因/环境共同因素。比如不典型(发育不良)痣或黑色素瘤家族史、光导致色素沉着的皮肤、不容易晒黑皮肤、红色头发人种、强的间断日光暴露、日晒伤、多发黑色素细胞痣等。基因/环境多种因素导致黑素瘤恶性转化。恶性转化的关键细胞通路：rb通路、p53通路、pi3k/akt通路、ras/mapk通路(20～30％nras突变，55～60％braf突变)。

在恶性黑色素瘤的亚型中，包括较为常见的皮肤恶性黑色素瘤、预后极差的黏膜恶性黑色素瘤、以及肢端恶性黑色素瘤。不同来源的黑色素瘤往往治疗手段及临床预后不同，因此造成治疗手段也不相同。

kit基因及其突变

kit是酪氨酸激酶受体蛋白家族的重要成员之一，位于人染色体4q12-13，属于原癌基因，其产物是ⅲ型酪氨酸激酶其作为干细胞因子的受体，可以通过一系列信号通路参与造血干细胞增殖分化的调控。近年来研究发现，kit基因存在突变，特别是激活性突变与急性白血病中的发病、治疗和预后等密切相关。在胃肠道间质瘤中，kit基因突变最常见于11号外显子，接着是9号外显子，在其次为atp结合口袋的13号外显子和激活循环的17号外显子。在肥大细胞增症中，kit突变最常见于17号外显子，即d816v。伊马替尼(imatinib)是唯一被nccn指南推荐的针对kit突变黏膜恶性黑色素瘤的靶向药物，然而，kit突变的恶性黑色素瘤患者中出现的对imatinib治疗的不敏感或者耐药极大限制了imatinib的临床应用。

药物组合物

如本文所用，术语“药物组合物”是指将用于特定目的而被施用的组合物。

如本文所用，术语“活性成分”指的是泊那替尼或其衍生物。

为了本发明目的，药物组合物含有泊那替尼或其衍生物作为活性成分，以及药学上可接受的载体并用于治疗黏膜恶性黑色素瘤的物质。术语“药学上可接受的”是指政府药品管理机构或在药典上列出并认可的可以用于脊椎动物、尤其用于人类的物质。通常，药学上可接受的载体指的是一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能和本发明的活性成分以及它们之间相互掺和，而不明显降低活性成分的药效。药学上可以接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂(如)、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、无热原水等。

本发明活性成分或药物组合物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式包括(但并不限于)：口服、肌肉注射、静脉注射、静脉滴注、瘤内注射、灌肠、喷雾、外敷、或腹腔注射。

用于口服给药的固体剂型包括片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、或胶囊剂。在这些固体剂型中，活性成分与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或与下述成分混合：(a)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(c)保湿剂，例如，甘油；(d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；(e)缓溶剂，例如石蜡；(f)吸收加速剂，例如，季胺化合物；(g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸附剂，例如，高岭土；和(i)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合物。胶囊剂、片剂和丸剂中，剂型也可包含缓冲剂。

固体剂型如片剂、糖丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂可采用包衣和壳材制备，如肠衣和其它本领域公知的材料。它们可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性成分或化合物的释放可以延迟的方式在消化道内的某一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。必要时，活性成分也可与上述赋形剂中的一种或多种形成微胶囊形式。

用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳剂、溶液、悬浮剂、糖浆或酊剂。除了活性成分外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例知，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物等。

除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料。

除了活性成分外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物等。

用于肠胃外注射的组合物可包含生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。

用于局部给药的本发明化合物的剂型包括软膏剂、散剂、贴剂、喷雾剂和吸入剂。活性成分在无菌条件下与生理上可接受的载体及任何防腐剂、缓冲剂，或必要时可能需要的推进剂一起混合。

本发明化合物可以单独给药，或者与其他药学上可接受的化合物联合给药。

使用药物组合物时，是将安全有效量的本发明化合物适用于需要治疗的哺乳动物(如人)，其中施用时剂量为药学上认为的有效给药剂量，对于60kg体重的人而言，日给药剂量通常为1～2000mg，优选6～600mg。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。通常其中“安全有效量”指的是：化合物的量足以明显改善病情，而不至于产生严重的副作用。

此外，本发明药物组合物或活性成分还可以与其它肿瘤治疗剂一起施用，例如已知靶点的恶性黑色素瘤靶点抑制剂，如伊马替尼(imatinib)、维罗非尼(vemurafenib)、达拉菲尼(dabrafenib)、瑞博西林(ribociclib)、玻玛西林(abemaciclib)。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如sambrook等人，分子克隆：实验室手册(newyork:coldspringharborlaboratorypress，1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。

通用方法

rpmi1640培养基、胎牛血清(fetalbovineserum，fbs)购自gibco公司；

cck-8购自biotool公司；

小分子抑制剂和细胞毒性药物均购于selleck公司。

实施例1kit突变的恶黑病人组织源性细胞pdc模型筛选敏感性抑制剂

1.1样本采集

入选标准：恶性黑色素瘤原发病灶。

肿瘤组织取材方法：

1)查找患者病史包括现病史，既往史和家族遗传史，记录患者基本信息，将病人的基本信息例如姓名，性别，病案号，诊断、等标记在冻存管，采血管，离心管(含1％青霉素-链霉素的dmem)中。

2)原发肿瘤病灶经手术切除后，切除坏死组织，根据肿瘤组织大小切取相应组织量，将瘤体分切成大小约5mm×5mm×5mm的小块，尽量满足实验需求。构建pdx模型需3-5块(组织块放入培养基，置于冰上)，肿瘤原代培养1-2块，剩余组织块冻存2-3块，将留取冻存的组织迅速存于液氮罐中为后续研究所用；

3)肿瘤正常交界组织的取材：石蜡切片需要时，可切取一块肿瘤与正常黏膜交界的组织，用10％中性福尔马林固定。

4)转移淋巴结的采集：恶性黑色素瘤已发生转移，可在有明显转移的淋巴结上切一块组织，组织保存处理同肿瘤组织处理方式。

1.2细胞培养及药物化合物筛选

1)收集对数生长期的pdc细胞，胰酶消化后，制备细胞悬液，细胞计数，将细胞浓度调至2×10⁴个/ml；

2)将细胞接种到96孔板中，每孔100ul细胞悬液，每个药物浓度至少设置3个副孔；

3)将细胞置于37℃，5％二氧化碳培养箱中培养过夜；

4)细胞接种后第二天，按药物浓度梯度0nm，10^-3nm，10^-2nm，10^-1nm，1nm，10nm，100nm，1000nm，10um，加入到96孔板中；

5)将细胞放入培养箱，继续培养72小时；

6)将cck-8试剂与培养基按照1:10配制成混合液，吹打均匀，吸去96孔板内原培养基，每孔加入100微升的cck-8稀释液。设置一组空白对照，即在一组没有细胞的空白孔中加100微升cck8稀释液，同样至少设置3个复孔。加药后轻微震荡96孔板，使cck-8以及侧壁残留的液体与板中液体充分混匀；

7)加入cck-8后将细胞继续培养3小时；

8)将酶标仪设定波长450nm，测定每孔的吸光值(od值)。

对5株肿瘤细胞的原代细胞进行近150种靶点药物的筛选，药物清单如下：

mdm2：nutlin3mx69，yh239-ee，nvp-cgm097，idasanutlin

tert：bibr1532，木香烃内酯(costunolide)

her2：拉帕替尼(lapatinib)、阿法替尼(afatinib)、来那替尼(neratinib)、卡奈替尼(canertinib)、sapitinib、木利替尼(mubritinib)、ac480、tak-285、irbinitinib、曲妥珠单抗trastuzumab、帕妥珠单抗(pertuzumab)。

cdk：roscovitin、迪那昔利布(dinaciclib)、azd5438、mk-8776、pha-793887、pha-767491r457、xl413、p276-00、nu6027、ro-3306、kenpaullone、senexina、purvalanola、ml167、tg003、su9516、帕布昔利布(palbociclib)

parp：奥拉帕尼(olaparib)、veliparib、rucaparib、talazoparib、iniparib、pj34hcl、upf1069、azd2461、niraparib、e7449、nu1025、苯甲酰胺(benzamide)、nms-p118、吡啶酰胺(picolinamide)

kit：达沙替尼(dasatinib)、舒尼替尼(sunitinib)

pdgfr：泊纳替尼(ponatinib)、avapritinib

egfr：埃罗替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、ag-490

vegfr：索拉菲尼(sorafenib)、舒尼替尼(sunitinib)、cabozantinib、foretinib、范德他替尼(vandetanib)、尼达尼布(nintedanib)、瑞戈非尼(regorafenib)、帕唑帕尼(pazopanib)、西地尼布(cediranib)、pd173074、多韦替尼(dovitinib)、linifanib、瓦他拉尼(vatalanib)、tivozanib、乐伐替尼(lenvatinib)、布利尼布(brivanib)

c-met：克唑替尼(crizotinib)、su11274、pha-665752、sgx-523、bms-777607、tivantinib、glesatinib、capmatinib、tepotinib、merestinib、去甲斑蝥素(norcantharidin).

stat3：sh-4-54、nt157、whi-p154、napabucasin、硝呋齐特(nifuroxazide)、ochromyclnone、hjc0152、氯硝柳胺(niclosamide)、c188-9

pi3k：dactolisib、pictilisib、idelalisib、buparlisib、tanalisib、autophinib

bcl2：abt-737、navitoclax、obatoclax、甲磺酸(mesylate)、tw-37、venetoclax、btsa1、s63845、wehi-539、fx1、at101、ha14-1、sabutoclax.

wnt/pactin：lgk-974、wnt-c59、xav-939、icg-001、iwr-1-endo、异槲皮苷(isoquercitrin)、icrt3、gnf-6231、iwp-l6、iwp-2、ky02111

jak：托法替尼(tofacitinib)、momelotinib、fm-381、pf-06651600、at9283、fedratinib、azd1480、az960、cep-33779、gandotinib、baricitinib、filgotinib、peficitnib、cerdulatinib、oclacitinib

hadc：vorinistat、entinostat、帕比司他(panobinostat)、曲古抑菌素a(trichostatina)、mocetinostat、wt161、达西司特(dacinostat)、givinostat.

化疗药：顺铂(cisplatin)、替莫唑胺(temozolomide)、达卡巴嗪(dacarbazine)、紫杉醇(paclitaxel)、卡铂(carboplatin)

nccn-黑色素瘤推荐药物：维莫非尼(vemurafenib)、达拉菲尼(dabrafenib)、曲美替尼(trametinib)、cobimetinib、伊马替尼(imatinib)

将初步筛药结果依据细胞株的全基因测序结果进行聚类分析，分析结果显示泊那替尼与kit基因的突变型恶性黑色素瘤具有非常高的相关性。对突变型的种类进一步的分析后，结果显示kit突变型主要集中在d816v，k642e，v560d三个突变位点。如表1所见，泊那替尼对于各种kit突变型的恶性黑色素瘤具有显著的抑制效果，而这种效果在同类药物(kit抑制剂)中并不存在。而同时从图1d可见，无kit突变的恶性黑色素瘤，kit抑制剂并不能对其起到抑制作用。

表1

实施例2基于kit基因突变的恶黑病人组织源性pdx模型验证敏感性抑制剂

利用构建的kit突变的pdx模型进行体内药物验证，当pdx移植瘤传代到3-5代时，移植瘤传代40只裸鼠，待肿瘤体积达到约250mm³时，将裸鼠随机分组，每组至少5只，按照imatinib(100mg/kg)，dasatinib(30mg/kg)和ponatinib(30mg/kg)体重给药，imatinib用ddh2o溶解，dasatinib和ponatinib用citratebuffer(25mm，ph＝2.75)溶解。每周测量移植瘤体积2次，用药周期28天。肿瘤体积＝l×w²×0.5，其中l代表最大直径，w代表肿瘤最小直径。肿瘤生长抑制(tumorgrowthinhibition，tgi)tgi＝[1-(tvf，treated-tvi，treated)/(tvf，control-tvi，control)]×100％，其中tvf代表实验终点组内肿瘤平均体积，tvi代表实验起点组内肿瘤平均体积。

在pdx上进行药物敏感性的验证，将kitv560d突变的pdx随机分成5组，每组6只，ponatinib和dasatinib的给药剂量均为30mg/kg，imatinib给药剂量100mg/kg，citrate和ddh2o作为对照组，灌胃给药，统计肿瘤体积，制成肿瘤生长曲线(图2-a)，发现ponatinib(tgi＝78.33％，p<0.01)和dasatinib(tgi＝68.65％，p<0.01)能够显著抑制肿瘤生长，而imatinib(tgi＝25.25％，p＞0.05)与对照组无差异，而且ponatinib和dasatinib组肿瘤体积显著低于对照组和imatinib组；同样的分组给药方法用于kitk642e突变的pdx，如图2-c所示，ponatinib(tgi＝83.66％，p<0.01)和dasatinib(tgi＝81.38％，p<0.01)能够显著抑制肿瘤生长，而imatinib(tgi＝27.59％，p＞0.05)与对照组无差异，而且ponatinib和dasatinib组肿瘤体积显著低于对照组和imatinib组；同样的分组给药方法用于kitd816v突变的pdx，如图2-e所示，ponatinib(tgi＝99.95％，p<0.01)和dasatinib(tgi＝67.73％，p<0.01)显示显著地抗肿瘤效应，而imatinib(tgi＝42.67％，p＞0.05)与对照组无差异；为了验证ponatinib是否针对野生型kitpdx起作用，将ponatinib作用于无kit突变的pdx，如图2-g所示，发现ponatinib(tgi＝33.26％，p＞0.05)，dasatinib(tgi＝33.85％，p＞0.05)与imatinib(tgi＝17.96％，p＞0.05)对无kit突变的移植瘤无明显抑制效应。

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。