专利名称：治疗溃疡的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于治疗和预防溃疡复发以及大多数消化不良的组合物。特别是，本发明涉及具有胃保护活性以及抑制高胃酸分泌活性的组合物。
本领域已知的和市售的用于治疗溃疡的产物是具有抗酸分泌的化合物(酸分泌抑制剂)。参见例如“New Guide to Medicine & Drugs”Brit．Medical Assoc．Editor，1997，第108-109页。具有较高治疗作用的已知产物显示高抗酸活性，并且用于急性和长期(6个月或更久)治疗。这些产物的缺陷在于它们的胃保护活性(如果有的话)差。从实践的角度来看，这就意味着胃保护作用不是最佳的，并且尤其会对长期治疗造成不便。在这种情况下，由于胃粘膜衰弱导致的经常出现的消化不良是值得注意的。
为了克服这些困难，本领域已知的是在所述药物中加入其它具有胃保护活性的抗溃疡药物前列腺素、铋盐(例如柠檬酸铋)和抗菌素。通过这种方式可以除去致溃疡的病因。然而，这些组合在其耐受性方面通常是不能令人满意的。例如，众所周知，前列腺素在肠道引起副作用(腹泻)；铋盐经常会引起恶心和烧心感。抗菌素则引起不希望的胃肠道反应。
因此，需要提供在溃疡和胃消化不良治疗中具有改善的治疗特性和耐受性的组合物，这些组合物总体和局部地、特别是具有改善的胃保护活性同时具有抗酸分泌活性。
本申请人出人意料地和意外地发现了具有改善的治疗活性和耐受性的抗溃疡药物组合物。
本发明的一个目的是药物组合物，该组合物主要含有下列组分组分a)选自下列一组的一种或多种成分 在(A)类化合物中，R=H，OCH3，OCHF2；R1=CH3，OCH3；R2=H，CH3；R3=CH3，CH2-CF3，(CH2)3-OCH3；在(B)类化合物中，RI3和RI4彼此相同或不同，它们分别表示自由价、氢、-N=C(NH2)2、-CH2-N(CH3)2；Y=S，N-RI6，C RI7RI8；X=O，S，N-RI1；RI2=H，CH3；n=0，1；Z=N-CN，N-SO2NH2，CH-NO2或 RI5=H，-NH-CH3，NH2；RI6、RI7、RI8、RI1彼此相同或不同，它们是氢、自由价；组分b)一种或多种含-ONO2官能团的有机化合物或者一种或多种含-NO基团的无机化合物或其混合物，所述化合物的特征在于它们是NO一氧化氮供体，即，当它们在体外与血管内皮细胞或血小板等接触，并在37℃培养5分钟后，能够释放出NO以激活cGMP的合成(环3’，5’(磷酸氢)鸟嘌呤核苷)，正如将在下面的详细描述中进行的特定实验所证实的那样。
本发明组合物可以通过将组分a)和b)直接混合制得。
组分a)与b)之间的摩尔比可以在很宽的范围内变化，可以是1∶0．1至1∶5，优选1∶0．5至1∶2。
对于组分a)来说，优选的(A)类化合物是下列当R=OCH3，R1=CH3，R2=CH3，R3=CH3时，奥美拉唑残基；与奥美拉唑类似，不同的是R=OCHF2，R1=OCH3，R2=H，泮托拉唑残基；与奥美拉唑类似，不同的是R=H，R2=H，R3=(CH2)3-OCH3，雷贝拉唑残基；与雷贝拉唑类似，不同的是R3=CH2-CF3，兰索拉唑残基；对于组分a)来说，优选的(B)类化合物是下列当式(B)中X=N-RI1(其中RI1是自由价)，Y=N-RI6(其中RI6=H)，RI3=H，RI4是自由价并与RI1形成双键，RI2=CH3，n=1，RI5=-NH-CH3，Z=N-CN时，西咪替丁残基；当X=N-RI1(其中RI1是自由价)，Y=S，RI3=-N=C(NH2)2，RI4是自由价并与RI1形成双键，RI2=H，n=1，RI5=H，Z=(VIIA)时，乙溴替丁残基；与乙溴替丁类似，不同的是n=0，RI5=NH2并且Z=N-SO2NH2，法莫替丁残基；与乙溴替丁类似，不同的是RI3=-CH2-N(CH3)2，RI5=-NH-CH3并且Z=CH-NO2，尼唑替丁残基；与尼唑替丁残基类似，不同的是X=氧，Y=CRI7RI8(其中RI7是氢，RI8是自由价)，RI4是自由价并与RI9形成双键，雷尼替丁残基。
还可以使用各种组分的一种或多种化合物的异构体制备本发明组合物。
属于(A)和(B)类的组分是按照“The Merck Index，第12版”(1996)所述方法制备的，在此，将其引入本文作为参考。
在组分a)的式(A)化合物中还包括具有下列分子内环的化合物，它们可以通过在酸的含水介质中处理其前体而获得(参见“A Textbookof Drug Design and Development”，哈佛大学出版社(Harwoodacademic publisher)，1991，第140页) 其中NAI和CAII分别是在式(A)的吡啶环1和2位的氮原子和碳原子，CB2和NB3分别是在咪唑环2和3位的碳原子和氮原子(咪唑环的1位是质子氮)。
组分a)的式(A)和(B)化合物可以用其相应的有机盐或无机盐替代，这些盐是通过本领域专业人员已知的反应获得的。合适的无机离子的实例如下盐酸盐、硝酸盐、硫酸盐、磷酸盐等；可以提及的有机盐是马来酸盐、草酸盐、乙酸盐、琥珀酸盐等。优选含有硝酸盐的组合物。
优选的组分a)的化合物的盐是那些相应于优选的式(A)或(B)化合物的盐。
在本发明组合物中，上式化合物的盐在每摩尔化合物中含有至少1摩尔阴离子。阴离子与化合物的摩尔比优选是归一的。当分子中存在其它足以成盐的碱性氨基(aminic)基团时，可以得到具有较高摩尔比的盐。
例如按照下述方法制备(A)和(B)类化合物与硝酸的盐。
当成盐物质是可溶于有机溶剂、优选不含羟基的有机溶剂(例如乙腈、乙酸乙酯、四氢呋喃等)中的游离碱或者其相应盐时，则通过将该物质以优选等于或大于10％w／v的浓度溶解在上述溶剂中，加入与化合物中存在的可成盐氨基基团相应摩尔数的浓硝酸。硝酸优选以同样的溶剂稀释。优选在加入硝酸的过程中或者之后，将该混合物冷却到20-0℃的温度范围。通常经过滤回收产物并用溶剂洗涤。
相反，当成盐物质溶解性不好，或者不是非常易溶于上述溶剂的盐时，可以使用与羟基化溶剂的相应混合物。这些羟基化溶剂的实例是甲醇、乙醇和水。在加入硝酸后，通过用非极性溶剂稀释所得的混合物可以迅速产生沉淀。
当原料与盐酸成盐时，可以向溶液中直接加入硝酸银制备硝酸盐。滤出氯化银之后，将溶液浓缩并按照上述方法进行处理，以回收硝酸盐。
当原料是盐时，还可以通过用碳酸氢钠或碳酸氢钾或者碳酸钠或碳酸钾饱和溶液处理、或者用氢氧化钠或氢氧化钾稀溶液处理，以释放出相应的碱。然后用合适的有机溶剂(例如卤代溶剂、酯、醚)萃取碱，之后将其干燥。将有机溶液蒸发，然后进行上述制备，将碱溶解在乙腈或上述其它溶剂中。
对于组分b)来说，可以使用含有-ONO2基团的有机化合物，例如在第11版《默克索引》(The Merck Index，1989)中所记载并按已知方法制备的下列化合物，例如在该同一参考文献中提及的那些化合物，在此引入本文作为参考chlonitrate(3-氯-1，2-丙二醇二硝酸酯)(Merck No．2390)，分子式为C3H5ClN2O6，结构式如下 丁四硝酯(1，2，3，4丁四醇四硝酸酯)(Merck No．3622)，分子式为C4H6N4O12，结构式如下 甘露醇六硝酸酯(Merck No．5630)，分子式为C6H8N6O18，结构式如下 尼可地尔(N-[2-(硝酰基)乙基]-3-吡啶甲酰胺)(Merck No．6431)，分子式为C8H9N3O4，结构式如下 硝酸甘油(1，2，3-丙三醇三硝酸酯)(Merck No．6528)，分子式为C3H5N3O9，结构式如下 季戊四醇四硝酸酯(2，2-二[(硝酰基)甲基]-1，3-丙二醇二硝酸酯)(Merck No．7066)，分子式为C5H8N4O12，结构式如下 戊硝醇(2，2-二[(硝酰基)甲基]-1，3-丙二醇一硝酸酯)(Merck No．7094)，分子式为C5H9N3O10，结构式如下 丙帕硝酯(2-乙基-2-二[(硝酰基)甲基]-1，3-丙二醇二硝酸酯)(Merck No．7821)，分子式为C6H11N3O9，结构式如下 磷酸三硝乙醇胺(磷酸2，2’，2”-硝酰基三乙醇三硝酸酯)(1∶2盐)(Merck No．9682)，分子式为C6H18N4O17P2，结构式如下 可以使用的其它含-ONO2基团的化合物是在同样是本申请人的PCT／EP申请98／03645中描述的前列腺素硝基衍生物。该专利申请的化合物及其制备方法均引入本文作为参考。
可以提及的含有-NO基团的无机化合物是-碱金属、碱土金属或第Ⅲ族金属的硝酸盐，例如优选硝酸铝、硝酸钠和硝酸钾；-亚硝基铁氰酸盐，例如亚硝基铁氰酸钠(五(氰基-C)亚硝酰铁(2-)二钠)(Merck No．8600)，分子式为Na2[Fe(CN)5NO]。
如上所述，产生本发明结果的含有-ONO2基团或-NO基团的本发明组分b)必需满足下文详述的体外实验。
具体地说，该实验涉及当将本发明所述NO供体例如硝酸甘油、尼可地尔、亚硝基铁氰酸盐等置于内皮细胞(方法a)或血小板(方法b)中时，从该供体生成一氧化氮a)内皮细胞将人脐静脉细胞以1O3细胞／板的密度涂布在培养板上，与标量浓度的NO供体(1-100微克／毫升)一起培养5分钟。然后如下所述对培养基进行分析(生理溶剂，例如台罗德氏溶液)以测定生成NO的能力1)通过化学发光法测定一氧化氮；2)cGMP测定(环GMP，上面提及的Merck No．2715)。
对于化学发光分析来说，将100微升的量注入含有冰醋酸和碘化钾的化学发光分析仪的反应室中。在此条件下，培养基中存在的亚硝酸盐／硝酸盐转化为NO，在NO与臭氧反应后，通过所产生的光对NO进行测定。如同在化学发光测量装置中通常发生的那样，所产生的光与所生成的NO的量成正比，并且可以用合适的化学发光分析仪的光电倍增管测定。
光电倍增管将入射光转化为电压，然后对其定量记录。根据用标量亚硝酸盐浓度绘制的校准曲线，可以定量测定所生成的NO浓度。例如，由100μM尼可地尔培养物产生约10μM的NO。
对于cGMP测定来说，将一部分培养基(100微升)以1000转／20秒的速度离心。弃去上清液，用冰冷却的磷酸盐缓冲液(pH7．4)处理沉淀。通过特异性免疫酶促反应物测定产生的cGMP含量。由该试验得到如下结果，即在这些试验条件下，含有各种待测NO-供体之一的培养物与相应的不含NO供体的培养物相比，明显引起cGMP的增加。例如，在与100μM亚硝基铁氰酸钠一起培养后，cGMP的值比仅仅含载体而不含NO供体的培养物得到的cGMP值增加约20倍。
b)血小板使用按照Radomski等所述类似的方法(Br．J．Pharmacol．92，639-1987)制备的、经洗涤过的人血小板。将每份0．4毫升的各等分试样与标量浓度的NO-供体(1-100微克／毫升)一起培养5分钟。然后对于用内皮细胞进行的分析来说，如前段所述，通过用化学发光法和cGMP法测定一氧化氮，对培养基(例如台罗德氏溶液)进行分析以测定生成NO的能力。对于化学发光法测定来说，在此同样的是，根据用标量亚硝酸盐浓度绘制的校准曲线，可以定量测定所生成的NO浓度。例如，由100μM尼可地尔培养物产生约35μM的NO。
对于cGMP测定来说，在同样的试验条件下，含有各种待测NO-供体之一的培养物与相应的不含NO供体的培养物相比，明显引起cGMP的增加。例如，在与100μM亚硝基铁氰酸钠一起培养后，cGMP的值比仅仅含载体而不含NO供体的培养物得到的cGMP值增加约30倍。
由所述实验结果可以得出如下结论正如所用特定实验测定的那样，当本发明的所有NO-供体与内皮细胞或血小板一起培养5分钟后，它们能够产生NO，并以浓度依赖的方式活化cGMP的合成。
目前出人意料地发现，与上述提及的已知组合相比，本发明组合物可以全面改善构成组分a)的化合物的药理-毒理学特性、在溃疡和胃消化不良治疗中增加治疗功效及其全身和局部耐受性，以及改善胃保护活性。
可以按照本领域已知的技术、用常规的赋形剂，将本发明组合物配制成相应的药物组合物；参见例如“Remington’s PharmaceuticlSciences 15a Ed．”。
本发明组合物可以经口、非肠道或经皮给药。组分b)通常可以与组分a)同时给药、先于或后于组分a)给药。组分a)的(A)和(B)化合物的剂量是这些化合物的常规剂量。
通过将本发明的药物组合物与常规的胃保护剂结合得到的本发明组合物是本发明的另一目的。例如可以提及的是前列腺素、铋盐、抗胃肠粘膜致病微生物的活性抗菌素。
出人意料地发现，本发明组合物的胃保护活性非常高。这使得已知胃保护活性药物与本发明化合物或其制剂结合使用时，可以避免已知胃保护活性药物的不希望的作用。实际上，以本发明的联合用药形式使用的已知胃保护活性剂的用量低于已知的用量，并且不会引起不希望的副作用。本领域的专业人员可以容易地确定与本发明药物组合物结合的常规胃保护剂的最大用量，因为这是与已知胃保护剂通常的副作用不存在相应的。在任何情况下，用于本发明联合给药的常规胃保护剂的用量低于本领域所述联合给药中的用量。
下面的实施例用于说明本发明，而不是对本发明的限制。
实施例1药物组合物。
由下述组分制备混合物组分a) 西咪替丁50克组分b) KNO320克然后称取相应于70毫克／公斤用量的该混合物，一次或者分多次给动物施用。
药理实验实施例2急性毒性以2％w／v羧甲基纤维素水悬浮液的形式，给10只各重20克的一组大鼠单次口服施用相当于280毫克／公斤剂量的实施例1组合物。
对这些实验动物监测14天。该组动物中没有一只观察到中毒症候。
实施例3抗溃疡活性根据A．Robert等所述试验模型对抗溃疡活性进行评价(“前列腺素对大鼠的细胞保护作用。预防由乙醇、HCl、NaOH、高渗NaCl和热损伤引起的胃坏死”，Gastroenterology 77，433-43 1979)。
使每组10只的三组大鼠从前一天晚上开始空腹，在喂入无水乙醇(1毫升)前15分钟，口服-5毫升／公斤2％的羧甲基纤维素水悬浮液。-50毫克／公斤剂量的5毫升／公斤西咪替丁的2％的羧甲基纤维素水悬浮液。-70毫克／公斤剂量的5毫升／公斤实施例1组合物的2％的羧甲基纤维素水悬浮液。
1小时后，将动物处死，并对胃损伤的发生率进行评价。所得结果记载于表1中，该结果表明与西咪替丁相比，西咪替丁与硝酸钾组合显示了改善的胃保护活性。
表权利要求
1．药物组合物，该组合物含有下列组分组分a)选自下列一组的一种或多种成分 在(A)类化合物中，R=H，OCH3，OCHF2；R1=CH3，OCH3；R2=H，CH3；R3=CH3，CH2-CF3，(CH2)3-OCH3；在(B)类化合物中，RI3和RI4彼此相同或不同，它们分别表示自由价、氢、-N=C(NH2)2、-CH2-N(CH3)2；Y=S，N-RI6，C RI7RI8；X=O，S，N-RI1；RI2=H，CH3；n=0，1；Z=N-CN，N-SO2NH2，CH-NO2或 RI5=H，-NH-CH3，NH2；RI6、RI7、RI8、RI1彼此相同或不同，它们是氢、自由价；组分b)一种或多种含-ONO2官能团的有机化合物或者一种或多种含-NO基团的无机化合物或其混合物，所述化合物的特征在于它们是NO一氧化氮供体，即，当它们在体外与血管内皮细胞或血小板等接触，并在37℃培养5分钟后，能够释放出NO以激活cGMP的合成(环3’，5’-(磷酸氢)鸟嘌呤核苷)。
2．权利要求1的药物组合物，其中组分a)与b)之间的摩尔比为1∶0．1至1∶5，优选1∶0．5至1∶2。
3．权利要求1-2的药物组合物，其中组分a)的化合物是下列化合物-式(A)化合物R=OCH3，R1=CH3，R2=CH3，R3=CH3，奥美拉唑残基；与奥美拉唑类似，不同的是R=OCHF2，R1=OCH3，R2=H，泮托拉唑残基；与奥美拉唑类似，不同的是R=H，R2=H，R3=(CH2)3-OCH3，雷贝拉唑残基；与雷贝拉唑类似，不同的是R3=CH2-CF3，兰索拉唑残基；-式(B)化合物X=N-RI1(其中RI1是自由价)，Y=N-RI6(其中RI6=H)，RI3=H，RI4是自由价并与RI1形成双键，RI2=CH3，n=1，RI5=-NH-CH3，Z=N-CN，西咪替丁残基；当式(B)中X=N-RI1(其中RI1是自由价)，Y=S，RI3=-N=C(NH2)2，RI4是自由价并与RI1形成双键，RI2=H，n=1，RI5=H，Z=(VIIA)时，乙溴替丁残基；与乙溴替丁类似，不同的是n=O，RI5=NH2并且Z=N-SO2NH2，法莫替丁残基；与乙溴替丁类似，不同的是RI3=-CH2-N(CH3)2，RI5=-NH-CH3并且Z=CH-NO2，尼唑替丁残基；与尼唑替丁残基类似，不同的是X=氧，Y=C RI7RI8(其中RI7是氢，RI8是自由价)，RI4是自由价并与RI8形成双键，雷尼替丁残基。
4．权利要求1-3的药物组合物，其中使用各种组分的一种或多种化合物的异构体。
5．权利要求1-4的药物组合物，其中在组分a)的式(A)化合物中还包括具有下列分子内环的化合物，它们可以通过在酸的含水介质中处理其前体而获得 其中NAI和CAII分别是在吡啶环1和2位的氮原子和碳原子，CB2和NB3分别是在咪唑环2和3位的碳原子和氮原子。
6．权利要求1-5的药物组合物，其中组分a)的式(A)和(B)化合物可以用其相应的有机盐或无机盐替代。
7．权利要求6的药物组合物，其中含有硝酸盐。
8．权利要求6的药物组合物，其中含有权利要求3的式(A)或(B)化合物的盐。
9．权利要求6-8的药物组合物，其中所述化合物的盐在每摩尔化合物中含有至少1摩尔阴离子。
10．权利要求1-9的药物组合物，其中可用于组分b)的含有-ONO2基团的有机化合物选自3-氯-1，2-丙二醇二硝酸酯，丁四硝酯，甘露醇六硝酸酯，尼可地尔，硝酸甘油，季戊四醇四硝酸酯，戊硝醇，丙帕硝酯，磷酸三硝乙醇胺，前列腺素硝基衍生物。
11．权利要求1-9的药物组合物，其中可用于组分b)的含有-NO基团的无机化合物选自碱金属、碱土金属或第Ⅲ族金属的硝酸盐和亚硝基铁氰酸盐。
12．权利要求11的药物组合物，其中硝酸盐是硝酸钠和硝酸钾。
13．前述权利要求的药物组合物，配制成经口、非肠道、经皮给药的形式。
14．权利要求13的药物组合物，其中组分b)与组分a)同时给药或者先于或后于组分a)给药。
15．用作药物的权利要求1-14的药物组合物。
16．权利要求1-14的药物组合物在制备治疗和预防溃疡和消化不良复发的药物中的应用。
17．权利要求15-16的应用，其中组分a)的(A)和(B)化合物的剂量是这些化合物的常规剂量。
18．药物组合物，可以通过将权利要求1-14的组合物与常规的胃保护剂结合制得。
19．权利要求18的组合物，其中常规的胃保护剂选自前列腺素、铋盐和抗菌素。
20．权利要求18-19的药物组合物在制备治疗和预防溃疡和消化不良复发的药物中的应用。
全文摘要
用于治疗和预防溃疡以及消化不良复发的药物组合物,该组合物主要含有下列组分a)和b):组分a):一种或多种选自常规抗溃疡产品的组分;组分b):含－ONO
文档编号A61K31/426GK1291896SQ99803531
公开日2001年4月18日 申请日期1999年2月25日 优先权日1998年3月5日
发明者P·德尔索达托 申请人:尼科克斯公司