莉花叶子，剪碎，使用40目粉碎，待用。
[0027] (2)称取10倍莱莉花植物叶重量的己醇与莱莉花植物叶于烧瓶中混合配置成料 液，系统中真空度为0. 6MPa，在温度为55°C和超声波功率为420W下反应12min，质量分数为 70%己醇，完成整个提取后，过滤收集得到茶多酪提取液，标记为样品1。
[002引 （3)茶多酪的含量测定；采用高效液相色谱法进行茶多酪含量的测定（，其分析时 间短，操作简便。其最佳分析条件为：甲醇；水；己酸= 20:60:0. 4(体积比），流速为1. 1ml/ min,进样体积；5 X 1(T3,温度25°C，紫外检测波波长为277nm ;经过5次重复试验验证，在W 上情况下茶多酪的平均提取率为23. 55% ;
[0029] (4)作用测试：测定美国野生型黑腹果蛹头部的脂褐素和昆明种小鼠的过氧化脂 质产物丙二醇；
[0030] W美国野生型黑腹果蛹160只，分为3组，分别为实验组1、实验组2和对照组。在 果蛹培养基中按照王厚德法稍加改进配制。对照组1不加入茶多酪，实验组1和实验组2 于lOOg基础培养基中分别加入lOmg/L与lOOmg/L的茶多酪；
[0031] 脂褐素（lipo化scin)又称老年素。沉积于神经、屯、肌、肝脏等组织衰老细胞中的 黄褐色不规则小体，内容物为电子密度不等的物质、脂滴、小泡等，是溶酶体作用后剩下不 再能被消化的物质而形成的残余体。其积累随年龄增长而增多，是衰老的重要指征之一。见 于浅表皮肤者俗称"老年斑"。能用苏丹黑染色，西夫氏过舰酸反应阳性，紫外线照射时发射 的巧光波长最大值在420~480nm，可显示微弱溶酶体酶活性。
[0032] 在美国野生型黑腹果蛹测定果蛹头部脂褐素含量测定；处死65日龄果蛹，取头部 精密称重，按So址1法提取脂褐素，用英冠分光光度法测定巧光强度，推算每克样品中脂褐 素含量。结果如下
[0033] 表1茶多酪对果蛹脑内脂褐素含量的影响
[0034] HI ? 样品癸光值 脂褐素 (mg/L) (mg) (ug/g 组织） 对脱姐 M ^ Wl 1300. 1 央验卽 1 50 3.7 61.6 1101.5 头验如 2 白0 4. 1 57.3 874.2
[0035] 表1结果表明；
[0036] 莱莉花叶提取物茶多酪能抑制果蛹头部脂褐素生成，实验组1和实验组2的每克 组织脂褐素均低于对照组，其下降的程度与剂量程依赖关系，即说明莱莉花叶细胞提取物 具有抗衰老，抗氧化的功效。
[0037] 实施例2
[003引 （1)样品的预处理：摘取莱莉花叶子，剪碎，使用60目粉碎，待用。
[0039] (2)称取15倍莱莉花植物叶重量的己醇与莱莉花植物叶于烧瓶中混合配置成料 液，连接好设备，开启真空累使整个系统形成负压，系统中真空度为0. 4MPa，在温度为50°C 和超声波功率为420W下反应Imin，己醇质量分数70%，完成整个提取后，过滤收集得到茶 多酪提取液，标记为样品2。
[0040] 对样品2进行过氧化脂质产物丙二醇的含量测定；测定昆明种小鼠体外组织匀浆 与不同浓度茶多酪孕育吼过氧化脂质产物丙二醇含量；
[0041] 实验分组；W昆明种小鼠体270只，分为3组，分别为实验组1、实验组2和对照 组。对照组1不加入茶多酪，实验组1和实验组2于lOOg基础培养基中分别加入lOOmg/L 与200mg/L的茶多酪；
[0042] 结果如下；
[0043] 表2体外茶多酪对大鼠组织匀浆过氧化脂质的影响
[0044] 药物浓度~试验次数 巧二醇（n mol/g组织湿重） ~ (ug/mg) 脑 肝 '。
[0045] ^对照组 8 552. 1 534. 7 264.9 实验组 1 8 192.3 219.5 263.7 实验组 2_8_159.6 161.3_220. 1
[0046] 表2结果表明体外茶多酪对大鼠匀浆过氧化脂质的影响：当不同浓度的茶多酪与 大鼠的屯、肝脑组织均匀解育，结果表示莱莉花叶细胞提取物具有能降低脑、肝、屯、组织匀浆 中的过氧化脂质，减少其产物丙二醒的生成量，即说明莱莉花叶细胞提取物具有抗衰老的 功效。
[0047] 根据上述说明书的揭示和教导，本发明所属领域的技术人员还可W对上述实施方 式进行变更和修改。因此，本发明并不局限于上面揭示和描述的【具体实施方式】，对本发明的 一些修改和变更也应当落入本发明的权利要求的保护范围内。此外，尽管本说明书中使用 了一些特定的术语，但该些术语只是为了方便说明，并不对本发明构成任何限制。
【主权项】
1. 一种茉莉花植物叶细胞提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤： (1) 选取茉莉花植物叶作为原料； (2) 称取（10-15)倍茉莉花植物叶重量的乙醇与茉莉花植物叶混合配置成料液，置 于真空度为0. 4MPa-0. 6MPa的环境中，在50-60°C下和超声波功率为420W的条件下反应 l_15min ; (3) 过滤收集得到茉莉花植物叶细胞提取物。
2. 根据权利要求1所述的一种茉莉花植物叶细胞提取物的制备方法，其特征在于，步 骤（1)中选取茉莉花植物叶作为原料，剪碎后过（40- 60)目筛后粉碎。
3. 根据权利要求1所述的一种茉莉花植物叶细胞提取物的制备方法，其特征在于，步 骤⑵中所述环境的真空度为〇. 6MPa。
4. 根据权利要求1所述的一种茉莉花植物叶细胞提取物的制备方法，其特征在于，步 骤（2)中乙醇质量分数为70%。
5. 根据权利要求1所述的一种茉莉花植物叶细胞提取物的制备方法，其特征在于，步 骤⑵中温度为55 °C。
6. 权利要求1-5任意一项所述的制备方法制得的一种茉莉花植物叶细胞提取物在抗 衰老护肤品中应用。
7. 如权利要求6所述的应用，其特征在于：所述抗衰老护肤品为面膜、爽肤水、面霜、乳 液、眼霜、洗面乳、霜膏。
8. 如权利要求6所述的应用，其特征在于：所述茉莉花植物叶细胞提取物在抗衰老护 肤品中的添加量为10-1200 μ g/ml。
9. 如权利要求8所述的应用，其特征在于：所述茉莉花植物叶细胞提取物在抗衰老护 肤品中的添加量为1000 μ g/ml。
【专利摘要】本发明公开了一种茉莉花植物叶细胞提取物的制备方法及应用，制备方法包括以下步骤：(1)选取茉莉花植物叶作为原料；(2)称取10-15倍茉莉花植物叶重量的乙醇与茉莉花植物叶混合配置成料液，置于真空度为0.4-0.6MPa的环境中，在温度为50-60℃和超声波功率为420W下反应1-15min；(3)过滤收集得到茉莉花植物叶细胞提取物。本发明采用真空耦合超声波提取法提取茉莉花植物叶细胞提取物，缩短了提取时间的同时产品得率高、工作效率且产品安全；将茉莉花植物液叶细胞提取物添加到面霜等化妆品中，具有抗衰老、抗紫外线等美容功效。
【IPC分类】A61Q19-02, A61Q17-04, A61K8-97, A61Q19-08, A61Q19-00
【公开号】CN104622758
【申请号】CN201510074124
【发明人】陈海佳, 王一飞, 葛啸虎, 黎敏聪, 池诗源
【申请人】广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
【公开日】2015年5月20日
【申请日】2015年2月11日