齐墩果酸用于修饰大黄素脂质体在制备药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药技术领域，具体涉及齐墩果酸用于修饰大黄素脂质体在制备药物 中的应用。
【背景技术】
[0002] 大黄素别名朱砂莲甲素，英文名称Emodin，化学名：1'3'8-三羟基-6-甲基蒽醌， 橙黄色长针状结晶（丙酮中结晶为橙色，甲醇中结晶为黄色），熔点256°C~257°C。具有 蒽醌的特殊反应。几乎不溶于水，溶于乙醇及碱溶液。大黄素可用作泻药，虽有泻下活性，但 由于体内易被氧化破坏，实际上泻下作用很弱，如与糖结合成苷类，则可发挥泻下作用。大 黄素-1-0-β -D-葡萄糖苷和大黄素-8-0-β -D-葡萄糖苷者是大黄素与葡萄糖结合的苷， 二者只是结合的位置不同，同时存在于大黄中。另有抗菌、止咳、抗肿瘤、降血压等作用。
[0003] 齐墩果酸为肝病辅助药，临床用于治疗传染性急性黄疸型肝炎，具有明显的降低 谷丙转氨酶及退黄效果，改善病毒性和慢性迀延性肝炎患者的症状，体征和肝功能；还可用 于银肩病，风湿性关节炎，肾炎水肿，肝硬化腹水，急慢性肝炎，胃痛淋池，血崩，跌打损伤， 痈肿，腰膝酸软，胎动不安等症。
[0004] 大黄素为脂溶性，生物利用度低，且给药后在体内分布广泛，缺乏靶向性。有学者 将大黄素制成磁性纳米脂质体，脂质纳米微泡以改善其生物利用度低的缺点。但是普通的 脂质体靶向性效果有待增强，有文献报道引经药与靶向给药有相似性，中医理论认为，引经 药可改变其它药物的作用方向或部位，或使其作用侧重或集中于特定的方向和部位。申请 人采用薄膜-超声分散法制备齐墩果酸-大黄素脂质体，研宄齐墩果酸-大黄素脂质体在 小鼠体内药代动力学，为研宄其组织分布提供实验依据，为研宄齐墩果酸是否增强大黄素 脂质体靶向性做铺垫。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提高大黄素的利用率，增强大黄素的在人体内的靶向性，通过 将中药引经药中的活性成分齐墩果酸作为表面修饰材料修饰大黄素脂质体，从而提高大黄 素的药用效率和靶向作用。
[0006] 本发明具体通过以下技术方案实现：
[0007] 本发明提供了齐墩果酸用于修饰大黄素脂质体的应用。
[0008] 本发明还提供了齐墩果酸用于修饰大黄素脂质体在制备药物中的应用。
[0009] 本发明所属的药物按照加工需要可以制备成任何医药上可接受的剂型，其配置通 常由本领域技术人员公知的加工方法制备，即将活性组分与液体溶剂或者固体载体混合， 在添加至少一种表面活性剂制备而成，其中较优选为片剂、颗粒剂、口服液或胶囊剂。
[0010] 本发明所述的药物在使用前可由使用者经稀释或直接使用。
[0011] 本发明所述的齐墩果酸还可与大黄素同时给药，可以提高大黄素对靶器官的识别 能力，或直接增加大黄素在靶器官的浓集，较大程度降低药物毒性，进一步提高大黄素脂质 体的靶向性，增强治疗效果。
[0012] 本发明的有益效果为：利用齐墩果酸对大黄素脂质体进行修饰，研宄表明齐墩果 酸-大黄素脂质体可延长在小鼠体内循环时间，降低在小鼠体内分布范围，提高药物的利 用效率和靶向性。
【附图说明】
[0013] 图1是本发明实施例大黄素脂质体组药时曲线；
[0014] 图2是本发明实施例齐墩果酸-大黄素脂质体组药时曲线。
【具体实施方式】
[0015] 下面结合实施例对本发明做进一步的说明，以下所述，仅是对本发明的较佳实施 例而已，并非对本发明做其他形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示 的技术内容加以变更为同等变化的等效实施例。凡是未脱离本发明方案内容，依据本发明 的技术实质对以下实施例所做的任何简单修改或等同变化，均落在本发明的保护范围内。
[0016] 对照品：齐墩果酸对照品（中国食品药品检定研宄院，批号：110709-201206);大 黄素对照品（中国食品药品检定研宄院，批号：110756-200110);
[0017] 原料药：齐墩果酸（南京市泽朗医药科技有限公司，批号：ZL11225A，纯度98%); 大黄素（西亚试剂，批号：1〇16837,纯度98% );
[0018] 其他材料：胆固醇（成都市科龙化工试剂厂，纯度99% );大豆卵磷脂（成都市科 龙化工试剂厂，纯度99%);
[0019] 动物：雄性昆明小鼠66只，体重20~25g[重庆医科大学实验动物中心证号 SCXK-(渝）2007-0001]。
[0020] 大黄素标准品溶液：精密称取大黄素标准品10. 〇mg，用甲醇溶解并定容至100mL 容量瓶中，配成浓度为〇. lmg/ml标准储备液，存于4°C，临用前稀释为一系列浓度。
[0021] 内标溶液：精密称取内标1，8-二羟基蒽醌标准品10.0 mg，用甲醇溶解并定容至 100mL容量瓶中，配成浓度为0. lmg/ml标准储备液，存于4°C，临用前稀释为浓度4. Oug/ml。
[0022] PBS溶液：准确称取磷酸二氢钠0. lg、磷酸氢钠0. 78g、氯化钠4. 10g，溶于400ml 蒸馏水，盐酸调节pH值至6. 7,蒸馏水定容至500ml。
[0023] 大黄素脂质体的制备：称取大黄素20.0 mg，卵磷脂263. 2mg，胆固醇15. 7mg，溶于 20ml二氯甲烷中，将混合溶液盛装于250mL圆底烧瓶，超声溶解，于40°C水浴下旋转蒸发， 烧瓶壁内形成类脂质薄膜，加入IOmlPBS (pH = 6. 7)溶液，水合2. 5h，超声20min，过0. 22um 微孔滤膜，制备大黄素脂质体。
[0024] 齐墩果酸-大黄素脂质体的制备：称取大黄素10.0 mg，齐墩果酸10.0 mg，卵磷脂 263. 2mg，胆固醇15. 7mg，溶于20ml二氯甲烧中，将混合溶液盛装于250ml圆底烧瓶，超声溶 解，于40°C水浴下旋转蒸发，烧瓶壁内形成类脂质薄膜，加入10ml PBS(pH = 6. 7)溶液，水 合2. 5h，超声20min，过0. 22um微孔滤膜，制备齐墩果酸-大黄素脂质体。
[0025] 实施例1线性关系
[0026] 取6份空白血浆，依次加入一系列大黄素标准品及4. 0ug/ml内标溶液IOOul，分别 配制成 0· 02、0· 10、0· 50、1· 00、5· 00、8· 00ug/ml 标准血浆样品。
[0027] 加100ull5%硫酸，涡旋混匀，（70±2) °C水浴加热水解30min。冷却，加入乙醚 2. Oml,祸旋5min，4000r/min离心5min，吸取乙醚层，水相用2. Oml乙醚同法再萃取一次， 合并两次乙醚液，氮气吹干，残澄IOOul甲醇溶解。12000r/min离心10min取上清液。按色 谱柱：Thermo Syncronis C18(250_X4. 6mm, 5um)柱；流动相：0· 1%磷酸缓冲溶液：甲醇 =15:85(V/V);紫外检测波长：254nm ;流速：1.0ml/min ;柱温：30°C ;进样20ul测定。
[0028] 以血浆样品浓度x(ug/ml)为横坐标，大黄素与内标色谱峰面积比值y为纵坐 标，进行线性回归，得线性回归方程为y = 〇. 316x+0. 0055r = 0. 9988,结果表明大黄素在 0.02~8.00ug/ml浓度范围内有良好线性关系。定量限为0.02ug/ml，检测限为O.Olug/ ml 〇
[0029] 实施例2药代动力学研宄
[0030] 取60只健康雄性昆明小鼠，随机分为a，b两组，a组为大黄素脂质体组，b组为齐 墩果酸-大黄素脂质体组。禁食12h后，按大黄素剂量5mg/kg，a组尾静脉注射大黄素脂 质体，b组尾静脉注射齐墩果酸-大黄素脂质体。给药后于时间点0. 083h、0. 16h、0. 25h、 0. 5h、lh、2h、4h、6h、12h、24h每组3只小鼠眼眶取血至加有肝素的离心管中，于4000r/min 离心10min，取上清液血浆，于-20°C中保存，待用。
[0031] 精密量取上层血浆IOOul置5ml试管中，加入IOOul内标1，8-二羟基蒽醌（4ug/ ml),加100ull5%硫酸，涡旋混匀，（70±2)°C水浴加热水解30min。冷却，加入乙醚2. 0ml， 祸旋5min，4000r/min离心5min，吸取乙醚层，水相用2. Oml乙醚同法再萃取一次，合并两 次乙醚液，氮气吹干，残澄IOOul甲醇溶解。12000r/min离心10min取上清液。按色谱 柱：Thermo Syncronis C18(250mmX4. 6mm, 5um)柱；流动相：0· 1%磷酸缓冲溶液：甲醇= 15:85 (V/V);紫外检测波长：254nm ;流速：1.0ml/min ;柱温：30°C ;进样20ul测定。药时曲 线如图1和图2所示。Kinetica 2000软件计算药动学参数，药动学参数结果见表1。
[0032] 表1大黄素脂质体与齐墩果酸-大黄素脂质体给药后药动学参数（η = 3)(元土SD)
[0033]
【主权项】
1. 齐墩果酸用于修饰大黄素脂质体的应用。
2. 权利要求1所述的齐墩果酸用于修饰大黄素脂质体在制备药物中的应用。
3. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于：该药物制成片剂、颗粒剂、口服液或胶囊 剂。
【专利摘要】本发明提供了齐墩果酸用于修饰大黄素脂质体的应用，还提供了齐墩果酸用于修饰大黄素脂质体在制备药物中的应用，该药物配置通常由本领域技术人员公知的加工方法制备，其中较优选为片剂、颗粒剂、口服液或胶囊剂，利用齐墩果酸对大黄素脂质体进行修饰，可以提高大黄素对靶器官的识别能力，或直接增加大黄素在靶器官的浓集，较大程度降低药物毒性，进一步提高大黄素脂质体的靶向性，增强治疗效果。
【IPC分类】A61K31-122, A61K31-56, A61K47-28
【公开号】CN104667284
【申请号】CN201510061160
【发明人】尚京川, 张梦, 辜鹏程
【申请人】重庆医科大学
【公开日】2015年6月3日
【申请日】2015年2月6日