液 经高压均质机均质，均质条件为IOOMpa,均质3遍，制得单一藏灵燕菌发酵乳提取物物。
[0082] 对比例2
[0083] 普通藏灵菇菌发酵乳提取物的制备
[0084] 取1000 g牛乳，加热到80°C度，灭菌20min时间，将藏灵菇菌20g接种到无菌牛乳 中，25~37°C静置培养24h，此时牛乳状态变得粘稠，用滤网过滤，去除菌体，保留滤液。滤 液经80°C加热20min，离心去除沉淀，离心条件为6000r/min，处理20min，制得普通藏灵菇 菌发酵乳提取物。
[0085] 实施例5
[0086] 含有藏灵菇菌发酵乳提取物物精华露，用于皮肤功效测试。
[0087]
[0088] 藏灵菇菌发酵乳提取物的皮肤功效测试
[0089] 由40名志愿者组成的测试组（年龄30~58岁），平均分为4组，分别为藏灵菇菌 发酵乳提取物组、单一藏灵菇菌发酵乳提取物组、普通藏灵菇菌发酵乳提取物组和空白对 照组。本测试遵循随机和双盲测试原则。
[0090] 测试周期为8周，测试期间，受试者每日早晚于面部使用含提取物的精华露或安 慰剂精华露，分别于〇周、4周、6周、8周对志愿者进行面部皮肤测试。
[0091 ] 面部皮肤测试是通过VISIA全脸分析仪拍照分析面部皱纹变化情况，MPA580皮肤 测试仪分析面部黑素、水合度变化情况，乳酸刺激实验测定皮肤敏感度变化情况。
[0092] 其中乳酸刺激实验是这样操作的，试验前志愿者统一使用温和清洁剂清洗面部皮 肤，然后用含有10%乳酸的滤纸片贴于鼻唇沟处，用4分法分别记录志愿者在2. 5min和 5min时的刺痛感觉，无剌痛为0分、轻度刺痛为1分、中度刺痛为2分、重度刺痛为3分。两 次结果相加作为评价皮肤敏感度的结果。
[0093] 实验结果显示，使用含有藏灵菇菌发酵乳提取物精华露的各实验组面部皱纹数量 和深度优于其他实验组，其中含有植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum)的藏灵燕提取 物组皱纹数量下降达20 %。空白组下降4 %，普通藏灵菇菌发酵提取物下降8 %，单一藏灵 菇菌发酵提取物下降12%。说明藏灵菇菌发酵乳提取物作为有效活性成份，应用于化妆品 中，能有效抚平皱纹和预防皱纹产生。
[0094] 实验结果显示，使用含有藏灵菇菌发酵乳提取物精华露的实验组面部黑色素含量 下降幅度由于其他实验组，其中含有副干酿乳杆菌（Lactobacillus paracasei)的藏灵燕 菌提取物组黑色素下降可达22 %，而空白组下降4%，普通藏灵菇菌发酵提取物下降8 %， 单一藏灵菇菌发酵提取物下降12%，说明该藏灵菇菌发酵乳提取物作为有效的活性成份， 应用于化妆品中，能有效和显著地提亮与增白肤色。
[0095] 实验结果显示，使用含有藏灵菇菌发酵乳提取物精华露的实验组面部皮肤水合度 上升10%~15%，Kerfir. LME组最优。而空白组上升3. 3%，普通藏灵菇菌发酵提取物上 升5. 2%，单一藏灵菇菌发酵提取物上升8%。说明该提取物作为有效的活性成份，应用于 化妆品中，能预防和克服皮肤干燥问题。
[0096] 实验结果显示，使用含有藏灵菇菌发酵乳提取物精华露的实验组面部皮肤接敏感 度下降了约66%~76%，Kerfir. SLA组最优。而空白组下降44%，普通藏灵菇菌发酵提取 物下降52%，单一藏灵菇菌发酵提取物下降58%。说明藏灵菇菌提取物作为有效的活性成 份，应用于化妆品中，可以降低皮肤敏感度，增强皮肤屏障功能。，
[0097] 实施例4 :化妆水
[0098]
[0099] 实施例5 :保湿霜
[0100]
[0101]
[0102] 实施例6:防晒霜
[0103]
[0104] 上述仅选自本发明的具体实施例，但本发明的设计构思并不局限于此，凡利用此 构思对本发明进行非实质性的改动，均属于侵犯本发明保护范围的行为。
【主权项】
1. 一种藏灵菇菌发酵乳提取物，所述提取物由藏灵菇菌同至少一种益生菌微生物在发 酵培养基中，通过培养得到的提取物。2. 如权利要求1所述的藏灵菇菌发酵乳提取物，其通过下述步骤制备： (1) 培养基加热灭菌， (2) 将藏灵菇菌及至少一种益生菌微生物接种到培养基中， (3) 发酵,获得发酵乳， (4) 将发酵乳过滤或离心处理，过滤物用纯净水洗涤，得藏灵菇菌团备用，滤液备用， (5) 步骤（4)的滤液加热灭菌，离心获得滤液备用， (6) 将步骤（5)滤液与步骤（4)藏灵菇菌团混合，进行菌体破碎，均质，得发酵提取物。3. 如权利要求2所述的藏灵菇菌发酵乳提取物，其中： 培养基为乳基培养基，优选牛乳，步骤（1)的灭菌温度为70°C~120°C，时间为10~ 30min， 藏灵菇菌接种量基于100重量份的培养基的量为〇. 1~10重量份，优选〇. 5~5重量 份，更优选为1~3重量份， 益生菌微生物接种量基于100重量份的培养基的量为0. 1~10重量份，优选0. 5~5 重量份，更优选为1~3重量份， 发酵温度为KTC~43°C，优选15°C~40°C，更优选为20°C~37°C， 发酵时间为4h~48h，优选8h~40h，更优选为16h~24h， 步骤（5)的滤液灭菌温度为60°C~100°C，优选为70°C~90°C，更优选为80°C，加热时 间为IOmin~30min，优选为15min~25min，更优选为20min， 离心转速为3000r/min~10000r/min，优选为4000r/min~9000r/min,更优选为 6000~7000r/min，离心时间为15min~35min，更优选为20~30min， 所述的菌体破碎通过组织匀楽器处理来实现，处理时间为〇. 5~5min，优选1~4min， 更有选2~3min， 所述均质处理为高压均质，其压力为50~150Mpa，优选为80~120Mpa，更优选为 100 ~IlOMpa04. 如权利要求2所述的藏灵菇菌发酵乳提取物，发酵pH控制在4. 0~7. 0。优选4. 5~ 6. 5〇5. 如权利要求2所述的藏灵菇菌发酵乳提取物，进一步的调节pH值为5. 5-6. 5。6. 如权利要求2所述的藏灵菇菌发酵乳提取物，其中，益生菌微生物选自嗜酸乳杆菌、 副干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、短乳杆菌、保加利亚乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、唾液乳杆菌、嗜 热链球菌、肠球菌、肠膜明串珠菌、乳酸乳球菌及其混合物。7. 如权利要求2所述的藏灵菇菌发酵乳提取物，发酵培养基中进一步添加营养物质， 所述营养物质选自葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和/或乳糖，优选葡萄糖。8. 如权利要求1所述的藏灵菇菌发酵乳提取物在制备化妆品中的用途，所述化妆品用 于处理包括皮肤黯沉、保湿、舒缓皮肤刺激、皱纹相关障碍的皮肤问题。9. 如权利要求8所述的用途，其中藏灵菇菌发酵乳提取物的量为0. 1%~10%，优选 1 %~10%重量,更优选为1 %~5%重量。10. -种含有如权利要求1所述藏灵菇菌发酵乳提取物的化妆品组合物，其中藏灵菇 菌发酵乳提取物含量基于化妆品组合物总重量为0.1 %~10%重量，优选为I %~10%重 量，更优选为1 %~5%重量。
【专利摘要】本发明涉及一种藏灵菇菌发酵乳提取物及其在化妆品中的应用，其中藏灵菇菌发酵乳提取物为藏灵菇同至少一种益生菌微生物，特别是乳酸菌属种的微生物复合发酵提取物，其通过分离和破碎技术，得到含有发酵上清液及菌体胞溶提取物的活性成份。进一步的，所述藏灵菇菌发酵乳提取物中具有美白、祛斑、保湿、舒缓皮肤刺激的功效。
【IPC分类】A61Q19/00, A61Q19/08, A61K8/99, A61Q19/02
【公开号】CN105012219
【申请号】CN201410160820
【发明人】不公告发明人
【申请人】德州昂立达生物技术有限公司
【公开日】2015年11月4日
【申请日】2014年4月22日