pertension. 2009;53:539-548. 16. BianZY,HuangHetal.Limandcysteine-richdomains1regulatescardiac hypertrophybytargetingcalcineurin/nuclearfactorofactivatedtcells signaling.Hypertension. 2010;55:257-263. 17. XiaoJ，MoonMetal.Cellularflice-inhibitoryproteinprotects againstcardiacremodellingaftermyocardialinfarction.BasicResCardiol. 2012:107:239. 18. LiuQ，ChenYetal.Interactionbetweennfkappabandnfatcoordinates cardiachypertrophyandpathologicalremodeling.CircRes. 2012;110:1077-1086. 19. WilkinsBJ，DaiYSetal.Calcineurin/nfatcouplingparticipates inpathological,butnotphysiological,cardiachypertrophy.CircRes. 2004;94:110-118. 20. RoseBA,ForceTetal.Mitogen-activatedproteinkinasesignaling intheheart:Angelsversusdemonsinaheart-breakingtale.PhysiolRev. 2010;90:1507-1546. 21. HuaY，ZhangYetal.Chronicaktactivationaccentuatesaging-induced cardiachypertrophyandmyocardialcontractiledysfunction:Roleofautophagy. Basic Res Cardiol. 2011;106:1173-1191. 22. Ronnebaum SM， Patterson C. The foxo family in cardiac function and dysfunction. Annu Rev Physiol. 2010;72:81-94. 23. Turner AJ， Hooper NM. The angiotensin-converting enzyme gene family: genomics and pharmacology. Trends Pharmacol Sci 2002， 23:177-183. 24. Acharya KR， Sturrock ED et al. Ace revisited: A new target for structure-based drug design. Nat Rev Drug Discov 2003, 2:891-902. 25. Tipnis SR, Hooper NM et al. A human homolog of angiotensin-converting enzyme. Cloning and functional expression as a captopri1-insensitive carboxypeptidase. J. Biol. Chem. 275, 33238 - 33243 (2000). 26. Donoghue M， Hsieh F et al. A novel angiotensin-converting enzyme-related carboxypeptidase (ACE2) converts angiotensin I to angiotensin 1-9. Circ. Res. 87, el - e8 (2000). 27. Rella M， Elliot JL et al. Identification and characterisation of the angiotensin converting enzyme-3 (ACE3) gene: a novel mammalian homologue of ACE. BMC Genomics 2007，8:194. 28. Inoue N， Kasahara et al. Identification and Disruption of Sperm-Specific Angiotensin Converting Enzyme-3 (ACE3) in Mouse. PLoS One. 2010 Apr 22;5 (4):el0301〇
【发明内容】
[0007] 为解决上述现有技术的缺陷和不足，本发明的目的在于确定血管紧张素转化酶3 (ACE3)的表达和心肌肥厚的相互关系，提供一种ACE3在制备保护心脏功能、抗心脏纤维化 和/或预防、缓解和/治疗心肌肥厚的药物中的新应用。
[0008] 本发明的目的通过下述技术方案实现：、 本发明通过试验确定了 ACE3表达与心肌肥厚之间的关系： 1、发生心肌肥厚时心肌细胞肥大标志物ANP、Myh7的表达明显上调，ACE3的表达明显 下调 本发明选用正常假手术（sham)小鼠和通过主动脉弓缩窄手术（AB)造成心肌肥厚的小 鼠心脏，分别检测了 ANP、Myh7、ACE3的蛋白表达情况。结果表明，发生心肌肥厚的小鼠心脏 中心肌细胞肥大标志物ANP、Myh7的表达明显上调，ACE3的表达明显下调（图1)。
[0009] 2、ACE3干扰（Adsh ACE3)及过表达（Ad ACE3)腺病毒对经Ang II诱导的心肌细 胞肥大模型的影响 本发明发现在经血管紧张素II (Ang II)诱导的体外心肌肥厚模型中，ACE34过表达 心肌细胞的肥大明显被抑制，ACE3不表达心肌细胞出现明显肥大（图2)。
[0010] 3、ACE3基因敲除显著促进了心肌肥厚、纤维化，恶化心功能 本发明选用野生型小鼠、ACE3基因敲除小鼠进行试验，并将每种小鼠分成假手术组和 手术组，每组10只小鼠。手术组给予主动脉弓缩窄手术，假手术组不予主动脉弓缩窄，然 后通过对假手术组和手术组的各组小鼠进行心脏心肌肥厚、纤维化及心功能的测定，研究 ACE3基因敲除对主动脉弓缩窄诱导的心肌肥厚的影响。结果表明敲除ACE3基因所致的 ACE3缺陷显著恶化心肌肥厚、纤维化及心功能（图3、图4、图5、图9)。
[0011] 4、ACE3基因过表达显著抑制了心肌肥厚及其纤维化，改善心功能 本发明选用心脏特异性ACE3转基因小鼠和非转基因小鼠进行试验，并将每种小鼠分 成假手术组和手术组，每组10只小鼠。手术组给予主动脉弓缩窄手术，假手术组不予主动 脉弓缩窄，然后通过对假手术组和手术组的各组小鼠进行心脏心肌肥厚、纤维化及心功能 的测定，研究ACE3基因过表达对主动脉弓缩窄诱导的心肌肥厚的影响。结果表明过表达 ACE3基因显著抑制心肌肥厚及纤维化，保护心功能（图6、图7、图8、图10)。
[0012] 由以上结果可知在发生心肌肥厚的模型中，ACE3的表达和正常组相比显著降低； 抑制ACE3表达显著促进了心肌肥厚、纤维化，恶化心功能，促进ACE3过表达则显著抑制了 心肌肥厚、纤维化，保护心功能。因此ACE3具有保护心功能和抑制心肌肥厚及纤维化的作 用，特别是ACE3具有能够抑制主动脉弓缩窄引起的心肌肥厚相关疾病发生的作用。
[0013] 一种ACE3在心肌肥厚中的功能，主要体现在ACE3具有保护心功能和抑制心肌肥 厚的作用，特别是ACE3具有能够抑制主动脉弓缩窄引起的心肌肥厚发生的作用。
[0014] 针对ACE3的上述功能，提供一种ACE3的应用，主要体现为ACE3在保护心脏、抗心 脏纤维化和治疗心肌肥厚中的应用，特别是ACE3在筛选或制备保护心脏功能、抗心脏纤维 化和/或预防、缓解和/或治疗心肌肥厚的药物中应用。所述的应用包括ACE3直接作为保 护心脏功能、抗心脏纤维化和/或预防、缓解和/或治疗心肌肥厚药物的有效成分，能够促 进ACE3表达的化学物质间接作为保护心脏功能、抗心脏纤维化和/或预防、缓解和/或治 疗心肌肥厚药物的有效成分。
[0015] -种保护心脏功能的药物，包含ACE3。
[0016] 一种抗心脏纤维化的药物，包含ACE3。
[0017] 一种预防、缓解和/治疗心肌肥厚的药物，包含ACE3。
[0018] 本发明具有如下有益效果： 本发明发现了 ACE3基因的新功能，即ACE3基因具有能够保护心脏功能、抗心脏纤维化 和抑制心肌肥厚的作用。因此，ACE3可作为靶基因，用于筛选保护心脏功能、抗心脏纤维化 和/或预防、缓解和/或治疗心肌肥厚的药物，用于制备保护心脏功能、抗心肌肥厚和/或 预防、缓解和/或治疗心肌肥厚的药物，为心肌肥厚的治疗提供了一条有效的新途径。
【附图说明】
[0019] 图1是野生型C57BL/6小鼠（C57)假手术组（Sham)和主动脉弓缩窄手术（AB)心 脏中ANP、Myh7、ACE3的表达情况及统计柱状图，GAPDH作为内参；其中4W表示4周，8W表 示8周；发生心肌肥厚的心脏ACE3的表达下调（*:p< 0. 05vsC57小鼠Sham组)。
[0020] 图2是SD乳鼠原代心肌细胞用腺病毒AdshRNA、Adsh ACE3、Ad-GFP和Ad ACE3感 染，经Ang II刺激后的免疫荧光及细胞表面面积统计柱状图；ACE3的干扰腺病毒促进心肌 细胞肥大，ACE3的过表达腺病毒抑制心肌细胞肥大（* :p < 0. 05 vs PBS组，# :p < 0. 05 vs Ang II 组）。
[0021] 图3是WT和ACE3-K0小鼠采用AB手术建立致心肌肥厚模型4周后Hff/BW、LW/BW 及 HW/TL 的统计柱状图（* :p < 0? 05 vs WT Sham 组，# :p < 0? 05 vs WT AB 组)。
[0022] 图4是WT和ACE3-K0小鼠AB手术4周后心室横截面以及心脏组织HE染色和心 肌细胞横截面积统计柱状图（* :P < 〇. 05 vs WT Sham组，# :p < 0. 05 vs WT AB组)。
[0023] 图5是WT和ACE3-K0小鼠AB手术4周后心脏组织天狼星红染色及左室胶原面积 统计柱状图（* :P < 〇? 05 vs WT Sham 组，# :p < 0? 05 vs WT AB 组）。
[0024] 图6是NTG和ACE3-TG小鼠AB手术4周后Hff/BW、LW/BW及HW/TL的统计柱状图 (* :p < 0? 05 vs NTG