酷胺 树状聚合物。
[0083] 取决于脂质膜泡膜的通透性，自发形成对应浓度梯度的完全跨膜潜能或通透性增 强试剂，例如，质子离子载体可添加至介质。如果期望，可使用色谱或其他技术在完成装载 复合物之后从脂质体制剂去除通透性增强试剂。
[0084] 通常，主动装载期间介质的溫度在约-25°C和约100°C之间，例如，约0°C和约70°C 之间，例如，约4°C和65°C之间。
[0085] 定义为内部水相中略微水溶性试剂的封装量除W外部水相中初始量乘W100 %的 封装或装载效率（例如，W试剂克数/憐脂摩尔数或药物g数/总脂质g数测量）是至少 10 %，优选地至少50 %，至少90 %。
[0086] 在示例性实施方式中，本发明提供了将略微水溶性试剂装载至脂质体的方法。示 例性方法包括，在适于在所述脂质体中封装略微水溶性试剂的条件下使所述脂质体的水悬 液接触试剂的水悬液。脂质体具有脂质膜封装的内部水性环境。脂质体的水悬液包括横跨 膜的选自下述的梯度：质子梯度、离子梯度和其组合。在适于略微水溶性试剂穿过膜并且在 内部水性环境中浓缩的条件下溫育略微水溶性试剂和脂质体悬液选择的时间段，从而形成 所述药物制剂。
[0087]在各种实施方式中，上述反应混合物被溫育选择的时间段并且在溫育期间横跨脂 质体膜存在抑梯度、硫酸盐梯度、憐酸盐梯度、麟酸盐梯度、簇酸盐梯度（巧樣酸盐梯度、乙 酸盐梯度等）、邸TA离子梯度、锭盐梯度、烷基化的锭盐梯度、Mg"、Mn"、化"、化\r梯度或 其组合。
[0088]在本发明的示例性实施方式中，略微水溶性治疗剂不共价连接至脂质体的组分， 也不共价连接至用于形成本发明脂质体试剂制剂的抑或盐梯度的任何组分。
[008引非质子溶剂
[0090]在示例性实施方式中，略微水溶性试剂完全溶解在与水混溶的非质子溶剂中。试 剂溶液W大于药物试剂在脂质体悬浮或脂质体悬浮/非质子溶剂混合物中溶解度的浓度 添加至水性脂质体悬液，因此形成沉淀。示例性非质子溶剂包括二甲亚讽、二嗯烧、四氨巧 喃、二甲基甲酯胺、乙腊、乙酷二甲胺、环下讽、丫下内醋、化咯烧酬、^甲基-2-化咯烧酬、 甲基化咯嘟、乙二醇一甲基酸、二甘醇一甲基酸、PEG400和聚乙二醇。
[0091] 略微水溶性试剂沉淀
[0092]本发明提供了将不溶解的沉淀装载在脂质体的脂质膜内侧水性内部腔室的方法。 示例性的沉淀的概念为悬液中试剂的一些不溶解的部分。不溶解的部分定义为不溶解的一 部分试剂，如下述任何所指示：任何朦賊外观大于没有该试剂的脂质体悬液的外观，任何程 度的增加在其中内容物不吸收光的波长下比如在600nm的光散射大于单独脂质体悬液、通 过在小于12, 000RPM离屯、15min可分离（小球化）的任何部分的药物，可通过0. 2um过滤 器过滤分离的任何部分的药物试剂。
[009引示例性制剂
[0094]在示例性实施方式中，本发明提供了封装在脂质体的水性核屯、中的略微水溶性试 剂的制剂，其包含胆固醇、PEG-DSPE和脂质组分，具有憐酸胆碱头基团和一个或两个脂肪酸 残基。在各种实施方式中，脂质体包括服PC、胆固醇和PEG-DSPE的组合。在示例性实施方 式中，脂质体包括的组分的摩尔比为约50%摩尔至约70%摩尔服PC，约25%摩尔至约50% 摩尔胆固醇和约0%摩尔至约10%摩尔PEG-DSPE。在一种实施方式中，脂质体包括的组分 的摩尔比为约60%摩尔HSPC，约40%摩尔胆固醇和约2. 8%摩尔阳G-DSPE。在示例性实施 方式中，试剂通过主动装载封装在脂质体中。
[0095]在进一步示例性实施方式中，本发明提供了封装在脂质体的水性核屯、中的略微水 溶性试剂包括銷憐脂（SM)、胆固醇和PEG-DSPE的组合。在示例性实施方式中，脂质体包 括的组分的摩尔比为约45至约75SM，约25 %摩尔至约50 %摩尔胆固醇和约0 %摩尔至约 10%摩尔阳G-DSPE。在一种实施方式中，脂质体包括的组分的摩尔比为约55%摩尔SM、约 45%摩尔胆固醇和约2. 8%摩尔阳G-DSPE。
[0096]在示例性实施方式中，略微水溶性试剂（例如，卡非佐米）或其盐、类似物或衍生 物：脂质比例是约30mg至约90mg的试剂与约90mg至约250mg的脂质。在示例性实施方式 中，制剂试剂：脂质比例是约60mg试剂与约170mg脂质。
[0097] 在各种实施方式中，试剂（yg):脂质（ymol)比例是约250与约450。在示例性 实施方式中，该比例是约300至约400。
[0098]在示例性实施方式中，远程装载剂是碳水化合物硫酸盐的锭盐。在各种实施方式 中，远程装载剂是=乙基葡聚糖硫酸锭盐。
[0099] 在示例性实施方式中，本发明提供了药物制剂，其包含封装在质量是约90mg至约 200mg的脂质体群的约60mg的试剂。脂质体包括限定内部水性腔室的脂质膜。试剂封装 在由脂质膜限定的水性腔室中。脂质膜的组分的摩尔比是：(a)约55%摩尔銷憐脂（SM); 化）约45%摩尔胆固醇讯（C)约2. 8%摩尔阳G-(l，2-二硬脂酷基-sn-甘油-3-憐酸乙 醇胺）（PEG-DSP巧。制剂选自冻干制剂和其中所述脂质体悬浮在药学上可接受的稀释剂中 的制剂。
[0100] 在示例性实施方式中，本发明提供了试剂的脂质体制剂，其中试剂在施用其的对 象中的体内Ti/2为约2小时至约12小时，例如，约3小时至约6小时。在示例性制剂中，试 剂是游离的或封装形式。
[0101] 本发明的示例性药物制剂包括进一步封装碳水化合物硫酸盐的脂质体。在示例性 实施方式中，碳水化合物硫酸盐是葡聚糖硫酸盐。
[0102] 在示例性实施方式中，通过包括下述的方法形成本发明的制剂：(a)在碳水化合 物硫酸盐的锭盐水溶液中制备脂质体的悬液，形成封装在所述脂质体中的第一群体的所 述锭盐和所述脂质体外部的第二群体的所述盐；化）用水性缓冲液替换所述脂质体外部的 盐，从而形成横跨所述脂质膜的所述碳水化合物硫酸盐的梯度；和（C)添加非质子溶剂中 的试剂溶液至化）中形成的悬液，形成允许试剂穿过脂质膜的试剂沉淀，在所述内部水性 腔室中浓缩，从而封装试剂。
[0103] 在示例性实施方式中，碳水化合物硫酸盐的锭盐是=乙基葡聚糖硫酸锭或葡聚糖 硫酸锭。
[0104] 在示例性实施方式中，装载试剂的脂质体的直径是约40nm至约150nm。
[0105] 在各种实施方式中，封装试剂溶解在内部水性腔室中。在各种实施方式中，试剂为 悬液的形式。在示例性实施方式中，试剂组分被部分溶解并且部分为悬液形式。
[0106] 本领域技术人员认识到，W任何有用的形式自由组合上面阐释的单个参数。
[0107] 试剂盒
[0108] 在示例性实施方式中，本发明提供了试剂盒，其包含本发明的脂质体或制剂的一 个或多个组分和如何组合和使用组分和从组合产生的制剂的说明书。在各种实施方式中， 试剂盒包含在一个容器中的略微水溶性试剂和在另一容器中的脂质体制剂。示例性脂质体 制剂包括脂质膜外侧和内侧的盐分布，W产生和/或维持离子梯度，比如本文所述的。也包 括的是组合容器内容物的说明书，W产生本发明的脂质体或其制剂。在各种实施方式中，复 合物和脂质体的量足够配制单位剂量形式的复合试剂。
[0109] 在示例性实施方式中，一个容器包括脂质体或脂质体溶液，其用于将略微水溶性 治疗剂制剂的容器的至少部分内容物（例如，批准的治疗剂）在施用至对象的护理点转化 成封装治疗剂的脂质体。在示例性实施方式中，容器的内容物足够配制单位剂量形式的治 疗剂。
[0110] 在其中形成单位剂量形式的实施方式中，容器包括约Img至约500mg的治疗剂，例 女日，约Img至约200mg，例女日，约5mg至约lOOmg，例女日，约lOmg至约60mg。
[0111] 在示例性实施方式中，批准的治疗剂是卡非佐米并且其在容器中存在的量是约 40mg至约80mg，例如，约50mg至约70mg。在示例性实施方式中，存在的卡非佐米是约60mg。
[0112] 示例性制剂
[0113] 在示例性实施方式中，本发明提供了封装在脂质体的水性核屯、中的略微水溶性试 剂的制剂，其包含胆固醇、PEG-DSPE和脂质组分，具有憐酸胆碱头基和一个或两个脂肪酸残 基。在各种实施方式中，脂质体包括服PC、胆固醇和PEG-DSPE的组合。在示例性实施方式 中，脂质体包括的组分的摩尔比为约50 %摩尔至约70 %摩尔服PC，约25 %摩尔至约50 %摩 尔胆固醇和约1%摩尔至约10%摩尔PEG-DSPE。在一种实施方式中，脂质体包括的组分的 摩尔比为约60%摩尔服PC，约40%摩尔胆固醇和约2. 8%摩尔阳G-DSPE。在示例性实施方 式中，试剂通过主动装载封装在脂质体中。
[0114] 在进一步示例性实施方式中，本发明提供了封装在脂质体的水性核屯、中的略微水 溶性试剂的制剂，其包含銷憐脂（SM)、胆固醇和PEG-DSPE的组合。在示例性实施方式中，月旨 质体包括的组分的摩尔比为约45至约75SM，约25%摩尔至约50%摩尔胆固醇和约0%摩 尔至约10%摩尔PEG-DSPE。在一种实施方式中，脂质体包括的组分的摩尔比为约55%摩尔 SM，约45%摩尔胆固醇和约2. 8%摩尔阳G-DSPE。
[0115] 在示例性实施方式中，略微水溶性试剂（例如，卡非佐米）或其盐、类似物或衍生 物：脂质比例是约30mg至约90mg的试剂与约90mg至约250mg的脂质。在示例性实施方式 中，制剂试剂：脂质比例是约60mg试剂与约170mg脂质。
[0116] 在各种实施方式中，试剂（yg):脂质（ymol)比例是约250至约450。在示例性 实施方式中，该比例是约300至约400。
[0117] 在示例性实施方式中，远程装载剂是碳水化合物硫酸盐的锭盐。在各种实施方式 中，远程装载剂是=乙基葡聚糖硫酸锭。
[011引在示例性实施方式中，本发明提供了药物制剂，其包括封装在质量是约90mg至约 200mg的脂质体群体中的约60mg的试剂。脂质体包括限定内部水性腔室的脂质膜。试剂封 装在由脂质膜限定的水性腔室中。脂质膜的组分的摩尔比为：(a)约55%摩尔銷憐脂（SM); 化）约45%摩尔胆固醇讯（C)约2. 8%摩尔阳G-(l，2-二硬脂酷基-sn-甘油-3-憐酸乙 醇胺）（PEG-DSP巧。制剂选自冻干制剂和其中所述脂质体悬浮在药学上可接受的稀释剂中 的制剂。
[0119] 在示例性实施方式中，本发明提供了试剂的脂质体制剂，其中试剂在施用其的对 象的体内Ti/2为约2小时至约12小时，例如，约3小时至约6小时。在示例性制剂中，试剂 为游离或封装的形式。
[0120] 本发明的示例性药物制剂包括脂质体，其进一步封装碳水化合物硫酸盐。在示例 性实施方式中，碳水化合物硫酸盐是葡聚糖硫酸盐。
[0121] 在示例性实施方式中，通过包括下述的方法形成本发明的制剂：(a)在碳水化合 物硫酸盐的锭盐水溶液中制备脂质体的悬液，形成封装在所述脂质体中的第一群体的所 述锭盐和所述脂质体外部的第二群体的所述盐；化）用水性缓冲液替换所述脂质体外部的 盐，从而形成横跨所述脂质膜的所述碳水化合物硫酸盐的梯度；和（C)添加非质子溶剂中 的试剂溶液至化）中形成的悬液，形成允许试剂穿过脂质膜的试剂沉淀，在所述内部水性 腔室中浓缩，从而封装试剂。
[0122] 在示例性实施方式中，碳水化合物硫酸盐的锭盐是=乙基葡聚糖硫酸锭盐或葡聚 糖硫酸锭。
[0123] 在示例性实施方式中，装载试剂的脂质体的直径是约40nm至约150nm。
[0124] 在各种实施方式中，封装试剂溶解在内部水性腔室中。在各种实施方式中，试剂为 悬液的形式。在示例性实施方式中，部分溶解试剂组分并且部分为悬液的形式。
[0125] 本领域技术人员认识到，W任何有用的形式自由组合上面阐释的单个参数。
[0126] 治疗方法
[0127] 在一个方面中，本发明提供了治疗对象，例如，人中增生性病症例如癌症的方法， 所述方法包括W有效治疗病症的量向对象施用包括本发明的药物制剂的组合物，从而治疗 增生性病症。
[012引在一种实施方式中，与一个或多个另外抗癌剂，例如，化疗剂，例如，本文所述的化 疗剂或化疗剂的组合，W及福射，施用药物制剂。
[0129] 在一种实施方式中，癌症是本文所述的癌症。例如，癌症可W是膀脫癌（包括加速 的和转移膀脫癌）、乳腺癌（例如，雌激素受体阳性乳腺癌；雌激素受体阴性乳腺癌；肥R-2 阳性乳腺癌；HER-2阴性乳腺癌；孕酬受体阳性乳腺癌；孕酬受体阴性乳腺癌；雌激素受体 阴性、肥R-2阴性和孕酬受体阴性乳腺癌（即，S阴性乳腺癌）；炎症乳腺癌），结肠癌（包 括结肠直肠癌）、肾癌（例如，过渡性细胞癌）、肝癌、肺癌（包括小细胞肺癌和非小细胞肺 癌、肺腺癌和鱗状的细胞癌症）、泌尿生殖道癌，例如，卵巢癌（包括输卵管癌和腹膜癌）、宫 颈癌、前列腺癌、睾丸癌、肾癌和输尿管癌、淋己腺系统癌、直肠癌、喉头癌、膜腺癌（包括外 分泌膜腺癌）、食道癌、胃癌、胆囊癌、甲状腺癌、皮肤癌（包括鱗状细胞癌）、脑癌（包括多 形性成胶质母细胞瘤）、头颈癌（例如，潜伏的原发性癌），和软组织癌（例如，卡波西氏肉 瘤（例如，AIDS相关的卡波西氏肉瘤）、平滑肌肉瘤、血管肉瘤和组织细胞瘤）。
[0130] 在示例性实施方式中，癌症是多发性骨髓瘤或实体瘤。在一种实施方式中，本发明 的药物制剂包括作为略微水溶性治疗剂的卡非佐米。
[0131] 在一个方面中，本公开描述了治疗对象例如人中与炎症相关的疾病或病症的方 法，例如，过敏反应或自身免疫性疾病，所述方法包括：W有效治疗病症的量施用包含本发 明药物制剂的组合物至对象，从而治与炎症相关的疗疾病或病症。
[0132] 在一种实施方式中，与炎症相关的疾病或病症是本文所述的疾病或病症。例如， 与炎症相关的疾病或病症可W是例如，多发性硬化、风湿性关节炎、银屑病关节炎、退行性 关节疾病、spondouloart虹opathies、痛风性关节炎、系统性红斑狼疮、幼年关节炎、风湿 性关节炎、骨关节炎、骨质疏松症、糖尿病（例如，膜岛素依赖性糖尿病或幼年出现的糖尿 病）、经期疫李、囊性纤维化、炎性肠炎、过敏性肠综合症、克罗恩病、粘液性结肠炎、溃瘍性 结肠炎、胃炎、食管炎、膜腺炎、腹膜炎、阿尔茨海默氏疾病、休克、强直性脊柱炎、胃炎、结膜 炎、膜腺炎（急性或慢性）、多器官损伤综合症（例如，败血症或创伤继发的）、屯、肌梗死、动 脉粥样硬化、中风、再灌注损伤（例如，由于屯、肺转流术或肾透析）、急性肾小球性肾炎、血 管炎、热损伤（即，晒伤）、坏死性小肠结肠炎、粒细胞输血相关的综合症、和/或斯耶格伦 氏综合征。示例性皮肤炎症病况包括，例如，湿疹、遗传过敏性皮炎、接触性皮炎、等麻疹、 硬皮病、牛皮癖，和具有急性炎症组分的皮肤病。在一些实施方式中，自身免疫性疾病是器 官-组织自身免疫性疾病（例如，Raynaud综合症）、硬皮病、重症肌无力、移植排斥、内毒素 休克、脈毒、牛皮癖、湿疹、皮炎、多发性硬化、自身免疫甲状腺炎、葡萄膜炎、全身性红斑狼 疮、阿狄森病、自身免疫性多腺疾病（也称为自身免疫多腺综合症），或Grave疾病。
[0133] 在另一实施方式中，本发明的药物制剂或本文所述的方法可用于治疗或预防变态 反应和呼吸病况，包括哮喘、支气管炎、肺的纤维化、过敏性鼻炎、氧毒性、气肿、慢性支气管 炎、急性呼吸窘迫综合症，和任何慢性阻塞性肺部疾病（COPD)。本发明的药物制剂、颗粒或 组合物可用于治疗慢性肝炎感染，包括乙型肝炎和丙型肝炎。
[0134] 在一个方面中，本公开描绘了治疗对象例如人中屯、血管疾病例如屯、脏疾病的方 法，所述方法包括W有效治疗病症的量施用本发明的药物制剂至对象，从而治疗屯、血管疾 病。
[0135] 在一种实施方式中，屯、血管疾病是本文所述的疾病或病症。例如，屯、血管疾病可W 是屯、肌病或屯、肌炎；比如特发性屯、肌病，代谢屯、肌病，酒精性屯、肌病，药物诱导的屯、肌病，缺 血性屯、肌病，和高血压屯、肌病。使用本发明的药物制剂，本文所述的颗粒、组合物和方法也 可治疗或预防的是主要血管的动脉粥样硬化病症（大血管疾病）比如主动脉、冠状动脉、颈 动脉、脑血管动脉、肾动脉、肠动脉、股动脉和順动脉。可治疗或预防的其他血管疾病包括与 下述相关的那些：血小板聚集、视网膜小动脉、小球小动脉、神经滋养血管、屯、脏小动脉和相 关的眼睛的毛细管床、肾、屯、脏和中枢和周围神经系统。可用本发明的药物制剂治疗的仍其 他病症包括再狭窄，例如，冠状动脉介入后，和与异常水平的高密度和低密度胆固醇相关病 症。
[0136] 在一种实施方式中，本发明的药物制剂可施用至正在经历或已经经历血管成形术 的对象。在一种实施方式中，本发明的药物制剂、颗粒或组合物用施用至正在经历或已经经 历具有支架植入的血管成形术的对象。在一些实施方式中，本发明的药物制剂、颗粒或组合 物可用作支架的支柱或支架的涂层。
[0137] 在一个方面中，本发明提供了治疗对象例如人中与肾相关的疾病或病症例如肾病 症的方法，所述方法包括：W有效治疗病症的量施用本发明的药物制剂至对象，从而治疗与 肾疾病相关的疾病或病症。
[013引在一种实施方式中，与肾相关的疾病或病症是本文所述的疾病或病症。例如，与肾 相关的疾病或病症可W是例如急性肾衰竭、急性肾综合症、镇痛药肾病、atheroembo1iC肾 疾病、慢性肾衰竭、慢性肾炎、先天性肾病综合症、晚期肾疾病、肺出血肾炎综合征、间质性 肾炎、肾损伤、肾感染、肾损伤、肾结石、狼疮肾炎、膜增生性GNI、膜增生性GNII、膜性肾 病、微小病变、坏死性肾小球性肾炎、成肾细胞瘤、肾兮质沉着症、肾源性尿崩症、肾变性病 (肾病综合症）、多囊性肾