组合物77092202050623及其在抗肝纤维化药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及组合物77092202050623、制备方 法及其用途。
【背景技术】
[0002] 肝纤维化是慢性肝损伤向肝硬化发展的动态过程，表现为细胞外基质（ECM)大量 合成、分泌，而降解绝对或相对不足，使ECM在肝脏内弥漫沉积。其起始于肝细胞（HC)坏死， 随之是炎症反应、纤维生成介质释放，肝星状细胞（FSC)激活，最终以肝脏结缔组织成分的 合成与降解明显失去平衡。肝纤维化是多种慢性肝病共同的病理过程，是影响预后的重要 因素。
[0003] 过去的20年间，肝纤维化的研究取得了长足进展，证实肝纤维化与一定程度的肝 硬化都是可逆的。近年来陆续出现了一些抗肝纤维化治疗方法，包括化学药、生物制剂、中 药与基因疗法等，但是理想的临床治疗手段仍然缺乏（刘平.加强抗肝纤维化作用机制的 研究.中华肝病杂志，2005, 8(13) :561)。目前防治肝纤维的关键是针对与肝星状细胞激活 相关的环节，主要是：减轻肝损伤；抑制星状细胞激活，减少细胞外基质产生；调节细胞因 子紊乱，促进活化肝星状细胞凋亡；抑制肝脏成纤维细胞的增殖以及星状细胞激活大量分 泌诱导肝脏成纤维细胞的增殖。
[0004] 从天然产物中寻找化合物或先导化合物并进行结构修饰获得其衍生物，从而得到 高效低毒的潜在药物最有重要价值。
[0005] 本发明涉及的化合物I是一个2011年发表（Fan-YuMengetal.，2011. SchiglautoneA,aNewTricyclicTriterpenoidwithaUnique6/7/9-FusedSkeleton fromtheStemsofSchisandraglaucescens.OrganicLetters13(2011) 1502 - 1505) 的化合物，我们对化合物I进行了结构修饰，获得了两个新的衍生物即化合物III和化合物 IV，并用化合物ΠΙ和化合物IV制备了组合物77092202050623并对该组合物抗肝纤维化 活性进行了评价，其具有抗肝纤维化活性。
[0006] 由于肝脏星状细胞的激活，从而引起了多种生长因子的大量分泌，这些生长因子 会诱导肝脏成纤维细胞的快速增殖，从而加速纤维化，其中最重要的生长因子之一就是 TGF。因此，筛选抗肝纤维化药物的一个重要思路就是筛选能够抑制肝脏成纤维细胞增殖的 药物或者筛选能够抑制TGF等生长因子诱导的成纤维细胞的增殖，筛选常常在成纤维细胞 上进行，NIH/3T3细胞是最常用的细胞株。
【发明内容】
[0007] 本发明公开了一个新的组合物77092202050623,该组合物由化合物III和化合物 IV组成，该组合物中化合物III和化合物IV的质量百分数分别为60%和40%。
[0008]
[0010] 本发明公开的组合物可以制成药学上可接受的盐或药学上可接受的载体。
[0011] 药效学实验表明，本发明的组合物具有较好的抗肝纤维化作用。本发明的药学上 可接受的盐具有同样的药效。
[0012] 进一步的，组合物的体外实验表明，组合物具有很强的抗成纤维细胞增殖的活性， 因此本发明的组合物有望被用于制备新型抗肝纤维化药物。
[0013] 进一步的，组合物的体外实验表明，组合物具有很强的抗生长因子诱导的成纤维 细胞增殖的活性，组合物是一个极具开发潜力的化合物，它可直接用于相应疾病的治疗以 及相关药物的制备。
[0014] 以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加以限定。
【具体实施方式】
[0015] 实施例1化合物SchiglautoneA的制备
[0016] 化合物SchiglautoneA(I)的制备方法参照Fan-YuMeng等人发表的文献 (Fan-YuMengetal. , 2011.SchiglautoneA,aNewTricyclicTriterpenoidwitha Unique6/7/9-FusedSkeletonfromtheStemsofSchisandraglaucescens.Organic Letters13(2011) 1502 - 1505)的方法。
[0018] 实施例2SchiglautoneA的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0019] 将化合物I(502mg，1.OOmmol)溶于15mL苯，向溶液中加入四丁基溴化铵（TBAB) (0. 08g)，1，2-二溴乙烷（7. 520g，40.OOmmol)和6mL的50%氢氧化钠溶液。混合物在35摄 氏度搅拌8h。8h之后将反应液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取两次，合并有机相溶液。然 后对有机相溶液依次用水和饱和食盐水洗涤3次，再用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩去 除溶剂得到产物粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油醚/丙酮=100:1. 〇， v/v)，收集棕色集中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物II的棕色粉末（508mg，71% )。
[0020] 4NMR(500MHz，DMS0-d6)δ13. 40 (s，1H)，6. 10 (s，1H)，5. 63 (s，1H)，5. 53 (s，1H)，3 .85 (d,J= 11. 2Hz, 4H), 3. 52 (d,J= 10. 8Hz, 4H), 2. 96 (s, 1H), 2. 20 (s, 1H), 2. 16 (s, 2H), 2. 00 (s, 1H), 1. 84 (d,J= 13. 9Hz, 4H), 1. 69 (s, 1H), 1. 58 (dd,J= 22. 2, 8. 5Hz, 4H) ,1-51 (s, 1H )，1. 47 (s, 1H)，1. 26 (dd,J= 9. 1，4. 4Hz, 4H)，1. 21 (s, 1H)，1. 08 - 0· 98 (m, 4H)，0· 96-0. 94 ( m, 9H), 0. 94-0. 85 (m, 6H).
[0021] 13CNMR(125MHz，DMS0-d6)δ211. 46(s)，209. 14(s)，170. 06(s)，161. 12(s)，143. 5 1 (s), 132. 01 (s), 127. 77 (s), 85. 96 (s), 82. 40 (s), 70. 19 (s), 69. 10 (s), 57. 14 (s), 52. 73(s ),51. 90 (s), 45. 77 (s), 40. 67 (s), 38. 57 (s), 38. 32 (s), 35. 04 (s), 33. 55 (s), 33. 27 (s), 29. 85 (s), 28. 98 (s), 26. 71 (s), 25. 50 (s), 24. 05 (s), 22. 31 (s), 21. 06 (s), 20. 56 (s), 20. 00 (s) ,18. 69 (s), 18. 11 (s), 15. 07 (s).
[0022] HRMS(ESI)m/z[M-H]calcdforC34H51Br206： 715. 2032；found715.2027.
[0023]
[0024] 实施例3SchiglautoneA的0-(四氢吡咯基）乙基衍生物（III)的合成
[0025] 将化合物II(358mg，0. 5mmol)溶于15mL乙腈当中，向其中加入无水碳酸钾 (690mg，5.0mmol)，碘化钾（168mg，1.0mmol)和吡略烧（2840mg，40mmol)，混合物加热回流 6h。反应结束后将反应液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取4次，合并有机相。依次用水和 饱和食盐水洗涤合并之后的有机相，再用无水硫酸钠干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物粗 品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油醚/丙酮=100:1. 5,v/v)，收集棕色集 中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物ΠΙ的棕色粉末（215. 8mg，62% )。
[0026]NMR(500MHz,DMS〇-d6)δ13. 06 (s, 1Η), 6. 10 (s, 1H), 5. 65 (d,J= 43. 0Hz, 2H), 3. 61 (s, 2H), 3. 52 (s, 2H), 3. 01 (s, 1H), 2. 77 (s, 1H), 2. 67 (d,J= 14. 2Hz, 4H), 2. 51 (s, 8H), 2. 37 (s, 2H), 2. 23 (s, 1H),L92 - 1. 81 (m, 5H), 1. 73 (s, 1H), 1. 68 (d,J= 3. 5Hz, 8H),L61-1. 53 (m, 4H), 1. 44 (d,J= 64. 7Hz, 2H), 1. 28 (dd,J= 21.0,9.0Hz,4H),1.08-0. 98 (m, 4H), 0. 96 (d,J= 20. 0Hz, 6H), 0. 94 (d,J= 20. 0Hz, 3H), 0. 90 (d,J= 20. 0Hz, 3H), 0. 86 (d,J= 20. 0Hz, 3H).
[0027]13CMffi(125MHz，DMS0-d6)S211.57(s)，209.27(s)，170.21(s)，161.23(s)，143. 64 (s), 132. 16 (s), 127. 88 (s), 86. 09 (s), 82. 55 (s), 67. 09 (s), 66. 24 (s), 57. 29 (s), 54. 51 (d,J= 17. 1Hz), 52. 85 (s), 52. 04 (s), 45. 90 (s), 40. 79 (s), 38. 71 (s), 38. 45 (s), 35. 16(s ),33. 69(s), 29. 96(s), 29.ll(s), 26.