S-(羧甲基)-l-半胱氨酸在制备防治呼吸系统疾病药物的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及药物领域，具体而言，本发明涉及s-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其药学上可以接受的盐的药物新用途。
【背景技术】
[0002]NF-κΒ是1986年由Sen等首先从B淋巴细胞核抽提物中检测到的一种能与免疫球蛋白轻链基因增强子κΒ序列特异性结合的核蛋白因子，可促进轻链基因的表达，发挥转录和调控作用(Sen R，Baltimore D.1nducibility of kappa immunoglobulinenhancer-binding protein Nf—kappa B by a posttranslat1nal mechanism.Cell.1986;47(6):921-8.)。作为一个多功能核转录因子，NF-κ B由Rel蛋白家族中的两个成员P65和P50构成的二聚体复合物，在肺组织中主要以P65亚基形式存在。在静息状态下，NF- κ B与抑制物I κ B结合存在于胞浆中，不具有生物活性；当受到多种细胞因子、病毒、LPS等刺激后，I κ B被降解并与NF- κ B分离，NF- κ Β进入细胞核后与DNA上的κ Β位点结合，启动多种炎症反应基因转录，包括前炎症细胞因子TNF-α、IL-2、IL_6，趋化因子IL-8、巨噬细胞趋化蛋白(MCP)、巨噬细胞炎症蛋白(MIP)，粘附因子如细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子(VCAM-1)等，与支气管哮喘、慢性支气管炎、急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征、肺纤维化等肺部炎性疾病发生发展密切相关。然而，目前临床尚无特异性NF-κΒ抑制剂的应用。
[0003]S-(竣甲基)-L-半耽氨酸(carbocisteine、carboxymethylcysteine, CMC)，又称羧甲司坦，于1961年由法国Joullie公司首先开发并应用于临床，为粘痰溶解药，可影响支气管腺体的分泌，使低粘度的唾液粘蛋白的分泌增加，高粘度的岩藻粘蛋白的产生减少，且可直接作用于粘蛋白的二硫键，使粘蛋白分子裂解而降低痰液粘滞性，易于咯出；可提高粘膜纤毛清除率；降低气道高反应性。CMC进入体内后易脱去羧甲基形成半胱氨酸，其所含的巯基能与活性氧(reactive oxygen species，R0S)等的亲电子基团相互作用，发挥直接抗氧化作用；此外，半胱氨酸亦是谷胱甘肽(GSH)的前体，能再合成具有生物活性的GSH，增加体内GSH的浓度，起到间接抗氧化作用。临床上CMC主要用于治疗慢性支气管炎、肺气肿、慢性阻塞性肺病(C0PD)、支气管哮喘等疾病引起的痰液粘稠、咳痰困难等。近来，有报道CMC可以抑制体外鼻病毒、IL-Ιβ等刺激所致的IL-6、IL-8等炎性因子的释放(Yasuda Η,Yamaya M, Sasaki Τ, et al.Carbocisteine inhibits rhinovirus infect1n in humantracheal epithelial cells.Eur Respir J.2006;28(1):51-8.Nogawa H, IshibashiY, Ogawa A, et al.Carbocisteine can scavenge reactive oxygen species in vitr0.Respirology.2009; 14 (1): 53-9.)，以及抑制香烟烟雾诱导的肺气肿(Hanaoka M, DromaY, Chen Y, et al.Carbocisteine protects against emphysema induced by cigarettesmoke extract in rats.Chest.2011; 139 (5): 1101-8.)。但对于 NF_ κ B 信号通路的影响未见。因此，探讨CMC对NF- κ B信号通路的影响，对于进一步明晰C0PD在肺部炎性疾病的预防治疗中的应用具有重大意义。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其药学上可以接受的盐或含有它们中任何一种的药物组合物在制备用于预防或治疗呼吸系统疾病的药物中的用途。
[0005]上述呼吸系统疾病包括支气管哮喘、肺气肿、急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征、肺纤维化等疾病。
[0006]为实现S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其药学上可以接受的盐在制备用于预防或治疗呼吸系统疾病的药物中的用途，可以将S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其药学上可以接受的盐制成胶囊剂、片剂、丸剂、口服液、软胶囊剂或滴丸剂。
[0007]本发明解决技术问题采用的技术方案为:将S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其药学上可以接受的盐制成片剂、胶囊剂、口服液、颗粒剂、干混悬剂、丸剂或滴丸剂中的一种，为实现这些制剂的制备，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，如填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括:淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括:淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括:硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括:聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼酯、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括:淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括:糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括:甜味剂及各种香精；防腐剂包括:尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等。
[0008]在本发明中，术语“药学上可接受的盐”包括与无机碱形成的羧酸盐，如钠、钾、钙、镁、铵等无机碱的盐；与有机碱形成的羧酸盐，如葡甲胺、氨基葡萄糖、三甲基胺、三乙基胺、二环己基胺、N，N-二苄基-1，2-乙二胺、精氨酸、赖氨酸等的盐，或无毒性的盐类。
[0009]本发明优选的方案是S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其药学上可以接受的盐或含有它们中任何一种的药物组合物在制备用于预防或治疗由NF-κ B信号通路活化所引起的呼吸系统疾病的药物中的用途。
[0010]为了更好地理解本发明的实质，下面用s-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其盐在体内外的试验结果，说明其在制药领域的新用途。
【附图说明】
[0011]附图1所示为S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其药学上可以接受的盐对H202刺激引起的ρ NF-κΒ p65表达的抑制作用(注:与H202组比较，* K0.05)。
[0012]附图2所示为S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其药学上可以接受的盐对TNF- α刺激引起的P NF-kB p65表达的抑制作用(注:与TNF-α组比较，*代0.05)。
[0013]附图3所示为S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其药学上可以接受的盐对香烟烟雾提取物(CSE)刺激引起的ρ NF-κΒ p65表达的抑制作用(注??与CSE组比较，*代0.05)。
[0014]附图4所示为S-(羧甲基)-L-半胱氨酸对H202、TNF- a、CSE刺激引起的ρ NF-κΒΡ65蛋白入核的抑制作用。
[0015]附图5所示为S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其药学上可以接受的盐对H202刺激下IL-6及E-8释放的抑制作用(注:与H202组比较，* K0.05)。
[0016]附图6所示为S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其药学上可以接受的盐对TNF- α刺激下IL-6及IL-8释放的抑制作用(注:与TNF- α组比较，*代0.05)。
[0017]附图7所示为S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其药学上可以接受的盐对CSE刺激下IL-6及Ε-8释放的抑制作用(注:与CSE组比较，*代0.05)。
[0018]附图8所示为S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其铵盐对急性肺损伤小鼠NF- κ Β表达的抑制作用(注:与模型组比较，*代0.05)。
[0019]附图9所示为S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其铵盐对急性肺损伤小鼠IL-6、IL_8释放的抑制作用(注:与模型组比较，*代0.05)。
[0020]附图10所示为S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其铵盐对支气管哮喘小鼠NF- κ B表达的抑制作用(注:与模型组比较，*代0.05)。
[0021]附图11所示为S-(羧甲基)-L-半胱氨酸及其铵盐对支气管哮喘小鼠IL-6、IL_8释放的抑制作用(注:与模型组比较，*代0.05)。
【具体实施方式】
[0022]下面结合实施例对本发明作进一步的说明。
[0023]本发明所用材料如下:
1.1主要仪器与试剂
二氧化碳培养箱(日本ASTEC公司)；BSC-1600IIA2生物安全柜(苏净集团苏州安泰空气技术有限公司);XDS_1B倒置显微镜(重庆光电仪器有限公司);Ax1 Vert.Al焚光显微镜(德国ZEISS公司)。
[0024]1.2主要试剂、动物
人肺腺癌A549细胞(实验室自存)；RPM1-1640、胎