-氧代十二氨-1H，甜，細-二化晚并[2，l-f:3'，2'，r-ij][l， 6]糞晚-12-基)氧基)戊酷基)-N-((5-氧代-5-(((41S，7aS，13bR)-10-氧代十二氨-IH，甜， 細-二化晚[2，1寸:3'，2'，1'-。'][1，6]糞晚-12-71)氧基)戊酷基)-0-亮氨酷)-0-半脫胺 酷-D-亮氨酷-D-精氨酷-D-脯氨酷I-D-鄉氨酷甘氨酸(TP，透膜短肤-苦参碱）；
[0036] 所述溶剂选自N，N-二甲基甲酯胺、二甲基亚讽、乙腊中的任一种;溶剂的用量为10 ~25毫升/克SM2。
[0037] 所述碱选自碳酸钟、碳酸钢、N，N-二异丙基乙胺、S乙胺中的任一种;碱的用量为2 ~3.5当量。
[003引所述TM3与短肤的摩尔比为1.8~2.4:1 (1.8~2.4当量）。
[0039] 所述酷胺化反应的反应溫度为20°C，反应时间为90~150分钟，优选120分钟。
[0040] 反应式如下：
[0042] 由于SM2上有两个反应点，并且原料及产品的分子都比较大，活性基团较多，很容 易发生副反应，此步反应是本发明的关键步骤，为了筛选和验证最佳工艺参数范围，发明人 进行了大量对比试验，并一一进行分析对比，现将结果举例如下：
[0043] (1)此反应中碱的优选:使用不同的碱时，得到的反应情况也不同，如表1所示。
[0044] 表1.不同种类的碱对产品收率的影响
[0046] 由表1可W看出，无机碱用于上述反应的收率明显低于有机碱，运是因为在产物及 原料分子中存在酷胺基和醋基，由于运类基团在碱性条件下，尤其是无机碱存在的条件下， 容易发生水解反应，生成副产物，导致收率降低。而酷胺基和醋基在有机碱存在下不容易发 生水解反应，所W减少了副反应的发生。N，N-二异丙基乙胺和=乙胺相比，碱性稍弱，反应 更溫和，减少了副反应的发生。所W反应过程中所用的碱优选为有机碱N，N-二异丙基乙胺。
[0047] (2)溶剂的优选：当使用不同的溶剂，其它试剂及用量不变的情况下，获得的产品 收率不同，如表2所示。
[004引表2.不同种类溶剂对产品收率的影响
[0050]由表2可W看出，当使用水做溶剂时，由于其极性太大，而且体系是碱性，所W醋键 或酷胺键容易断裂，生成副产物，造成没有目标产物生成。W二甲基亚讽为溶剂，由于收率 稍低，而且不易除去，所W未选择此溶剂。乙腊对原料的溶解性较差，所W造成反应时间长， 副产物增多。所W溶剂优选为N，N-二甲基甲酯胺。
[0051 ] (3)TM3用量的优选:在其他条件不变的情况下，改变TM3的用量，也会对收率有影 响，如表3所示。
[0052]表3. TM3的用量对产品收率的影响
[0054] 由表3可W看出，TM3的用量越大，收率越高，当超过2.2当量时，收率不再增加，运 是由于反应是2当量的TM3与1当量的SM2发生反应，所W当TM3用量不足时，SM2与TM3反应不 完全，转化率低，所W收率低。增力日TM3的用量可W提高SM2的转化率，当TM3的用量超过2.2 当量时，已经足W使SM2完全转化，所W再增加 TM3用量也没有变化。TM3的用量优选为2.2当 量。
[0055] (4)N，N-二异丙基乙胺用量的优选:在其他条件不变的情况下，改变N，N-二异丙基 乙胺的用量，也会对收率有影响，如表4所示。
[0056] 表4. N，N-二异丙基乙胺用量对产品收率的影响
[0058] 由表4可W看出，N，N-二异丙基乙胺越大，收率越高，当超过3当量时，收率的变化 不明显，所WN，N-二异丙基乙胺的用量优选为3当量。
[0059] (5)溶剂用量的优化:在其他条件不变的情况下，改变溶剂N，N-二甲基甲酯胺越大 的用量，也会对收率有影响，如表5所示。
[0060] 表5. N，N-二甲基甲酯胺的用量对产品收率的影响
[0063] 由表5可W看出，溶剂用量偏少，反应受影响，收率偏低，用量在20毫升/克时收率 较高。用量提高至25毫升/克时，收率反而有下降趋势，可能是用量过高致使产品纯化回收 时造成损失。
[0064] (6)对反应时间的优选:对此反应进行所需要的时间进行了优选，如表6所示。
[0065] 表6.溶剂对产品收率的影响
[0067] 由表6可W看出，由于反应时间越长，SM2转化越充分，所W收率越高。但是超过120 分钟W后，反应已经转化完全，再延长时间，产品会发生降解，造成副产物增多，目标物减 少，使收率降低。所W反应时间优选为120分钟。
[0068] 通过上述优选试验对比，确认本发明所述目标物透膜短肤-苦参碱(TP)制备方法 的优选工艺条件如下：TM3在碱性条件下与SM2发生酷胺化反应得到TP，即：SM2在N，N-二甲 基甲酯胺中（溶剂原料比为20毫升/克）中加入TM31.8~2.4当量(优选2.2当量)和N，N-二异 丙基乙胺2~3.5当量(优选3当量），反应溫度20°C，反应时间90~150分钟(优选120分钟）， 纯化得到TP。
[0069] W上制备透膜短肤-苦参碱的总的化学反应式如下：
[0071] 本发明利用化学方法将苦参碱和短肤通过分子结构修饰，将苦参碱接在短肤上， 提高祀向性和穿透性，使其在血液中不易穿透细胞膜进入细胞而被摄取，但可W快速进入 肝脏细胞，并在细胞内发生降解，生成苦参碱，发挥其抗癌的活性。因此，本发明合成的透膜 短肤-苦参碱保留了苦参碱的抗癌效果和短肤的透膜和祀向性，可W祀向性作用于上皮来 源的恶性肿瘤（胃癌、结直肠癌、肝癌、膜腺癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌、肾癌等），尤其是肝 癌。本发明的透膜短肤-苦参碱，与目前临床应用的苦参碱相比较，具有明显肝癌细胞祀向 性，可W快速穿透肝癌细胞膜，抑制肝癌细胞的增殖，诱导肝癌细胞的调亡。
【附图说明】
[0072] 图1:TP的核磁氨谱图。
[0073] 图2:TP的质谱图。
[0074] 图3:透膜短肤-苦参碱快速进入肝癌细胞示意图，其中，A为解育5分钟后，B为解育 30分钟后。
[0075] 图4:肝癌细胞化pG2增殖和细胞周期阻滞示意图，其中，A:同样的摩尔浓度下，苦 参碱与透膜短肤-苦参碱抑制细胞增殖的作用;B:苦参碱、透膜短肤-苦参碱处理的细胞中 各期的分布。
[0076] 图5:肝癌细胞化pG2调亡示意图，其中，A:空白对照、苦参碱、透膜短肤-苦参碱处 理的细胞调亡情况;B:空白对照、苦参碱、透膜短肤-苦参碱处理的细胞调亡情况对比；C:空 白对照、苦参碱、透膜短肤-苦参碱处理的细胞调亡照片。
【具体实施方式】
[0077] 下面结合实施例对本发明作进一步的说明。
[0078] 下述实施例中所设及的仪器、试剂、材料等，若无特别说明，均为现有技术中已有 的常规仪器、试剂、材料等，可通过正规商业途径获得。下述实施例中所设及的实验方法，检 测方法等，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规实验方法，检测方法等。
[0079] 实施例1制备透膜短肤-苦参碱
[0080] 步骤如下：
[0081 ] (l)(41S，7aS，13bR)-10-氧代十二氨細-二化晚并[2，l-f :3'，2'，r-ij]
[1，6]糞晚-12-醇(TMl)的合成：
[0082] 在100毫升的圆底烧瓶中加入30毫升水和3.36克氨氧化钟，溶液加热到100°C，加 入1.2克SMl，反应8个小时后，将体系降至室溫，用二氯甲烧萃取四次，每次30毫升;合并有 机相，用无水硫酸钢干燥后，除去溶剂得粗品油状物，此油状物用正己烧重结晶，得0.12克 白色固体TMl，收率9 %。
[0083