连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素组合物在制备抗氧化药物中的应用
【专利摘要】本发明公开了一种连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素组合物在制备抗氧化药物中的新应用。试验证明，连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素组合物抗氧化的作用显著，见效快、毒副作用小、是一种安全、高效、稳定、制备工艺简单的抗氧化药物，适于工业化生产，易于推广。本发明为抗氧化提供了一种新的药物来源。
【专利说明】
连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素组合物在制备抗氧 化药物中的应用
技术领域
[0001] 本发明涉及医药领域，涉及一种抗氧化的药物或保健食品，特别涉及一种中药连 翘及连翘叶提取成分在制备抗氧化药物或保健食品中的应用。
【背景技术】
[0002] 衰老是生物界存在的普遍规律，是不以人类意志为转移的生物学法则。老年和衰 老是相关但不相同的概念。早在2千多年前，我国《楚辞》中就有"年既老而不衰"的说法。衰 老是一个生物学过程，而老年一般是以年龄为标准而确定的。根据全世界的综合情况，尤其 是照顾到发展中国家的情况，1982年在联合国老龄问题世界大会上确定60岁为老年期的开 始年龄。近年，随着人们生活和健康水平的提高，越来越多的60~65岁老年人仍然身体健 壮、精力充沛。预计人口老龄化的高峰将诞生在21世纪中期，这就意味着21世纪老年学研究 中存在一个内容复杂、难度大、涉及面广的衰老和抗衰老研究的新课题，如何进一步延长寿 命，如何使此长寿人群的生存质量进一步提高，这个课题是当今世界具有深远影响的科学 前沿。
[0003]氧化和非酶糖化这两个与能量代谢相关的生物化学不良反应是环境伤害的罪魁 祸首，在人体衰老过程中起到了决定性的作用，因此相关的研究正越来越成为衰老机制研 究的热点和重点。自由基氧化损伤一氧化应激造成的生物大分子的生理和病理性损伤和修 饰的累积是造成生物体病变和衰老的一类最常见的生化反应;非酶糖基化修饰是与衰老相 关的另一类极为重要生化反应，与糖尿病造成的衰老和疾病有关，此反应无需生物酶(非 酶)催化，可自发进行。研究表明衰老过程中自由基介导的氧化一非酶糖基化作用增强，导 致蛋白质结构与功能的改变，加速衰老的进程。
[0004] 现代研究发现许多中药多糖都具有提高抗氧酶活性、清除自由基、抑制脂质过氧 化，从而保护生物膜的作用。
[0005] 中药抗氧化作用亦即保健养生，由来已久，早在"神农本草经"列为上品诸药中，大 多系延年、不老的抗衰老性养生保健药物，如人参、女贞子、肉苁蓉、麦门冬、枸杞子…等均 载有"…久服轻身、延年、不饥、不老。"。近代李时珍之"本草纲目"所载补益药也达197种之 多，而从古至今所载的补益药方剂数以千计，但以伏苓、熟地、人参、菟丝子，肉苁蓉、肉桂、 枸杞子、杜仲、山药、甘草、鹿茸等出现频率较高，证明疗效确切。
[0006] 连翘是中药临床常用传统药物之一，应用广泛，用量巨大，它具有清热"解毒"消肿 散结"清除自由基的功能，临床上常与其他的中草药制成配方使用。其中具体活性成分尚不 清楚，
【发明人】经过艰苦探索，制备提取了其中活性单体化合物连翘苷，并经化学合成，制备 了相应的衍生物，进行了一系列的药理活性研究，发现连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连 翘脂素组合物可延缓高温强化保存的油脂酸价和过氧化值的升高，可以作为天然抗氧化 剂，说明连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素组合物具有抗氧化作用，为患者开辟了 新的治疗途经。
[0008]连翅苷(phillyrin)
[0010] 连翘脂素（（ + )_phillygenin)
[0011] 本发明人通过大量的现代科学研究，采用先进的分离纯化技术从连翘及连翘叶中 提取其抗氧化的有效成分连翘苷，并经进一步研究合成制备了连翘苷衍生物。可以为患者 提供一种高效低毒的药物。
【发明内容】
[0012] 本发明的首要目的是提供连翘苷、连翘苷衍生物或连翘苷与连翘脂素（即连翘苷/ 连翘脂素）用于抗氧化的新应用，并提供连翘苷、连翘苷衍生物或连翘苷与连翘脂素用于制 备抗氧化的用药的新用途，即在抗氧化的药物或保健食品中的新应用。
[0013] 为实现上述目的，本发明一方面提供一种连翘苷、连翘苷衍生物或连翘苷与连翘 脂素在制备抗氧化药物或保健品中的应用。
[0014] 在筛选具有抗氧化作用的天然活性成分的过程中，发明人发现连翘的化学成分中 连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷/连翘脂素组合物具有强烈的抗氧化的作用。
[0015] 其中，所述药物或保健品由连翘苷、连翘苷衍生物或连翘苷与连翘脂素组合物和 药学上可接受的载体组成。
[0016] 特别是，所述连翘苷衍生物选择连翘脂素葡萄糖醛酸衍生物。
[0017] 特别是，所述连翘苷衍生物包括33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（33-Hydr〇Xy phi 1 lygenin-8-〇-0-D-glucuronide)、9_羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（9-Hydroxy phi 1 lygenin-8-〇-0-D_glucuronide)、33，34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（33，34-Methylenedioxy phillygenin_8-〇-0-D-glucuronide)、连翅脂素葡萄糖酸酸甲酯（（2R, 3R,4R,5S)-methy16-(5-((1R,4S)-4-(3,4-dimethoxyphenyl)hexahydrofuro[3,4~c] furan-1-y1)-2-methoxyphenoxy)-3,4,5~trihydroxyte tra hydr〇-2H-pyran-2-〇&1*13(?713七6)、连翘脂素葡萄糖醛酸钠（8〇(1;[11111(21?，31?，41?，53)-6-(5-((11?，43)-4-(3,4-dimethoxyphenyl)hexahydrofuro[3,4~c]furan-1-y1)-2-methoxyphenoxy)-3,4,5- trihydroxytetrahydr〇-2H-pyran-2_carboxylate)、连翅脂素葡萄糖酸酸钾（potassium (2R,3R,4R,5S)-6-(5-((lR,4S)-4-(3,4-dimethoxyphenyl)hexahydrofuro[3,4-c]furan-l _yl)_2_methoxyphenoxy)_3,4,5-trihydroxytetrahydr〇-2H-pyran-2_carboxylate)、连 翘脂素葡萄糖醛酸（（2R，3R，4R，5S)-6-(5-((lR，4S)-4-(3,4-dim eth〇Xyphenyl) hexahydrofuro[3,4~c]furan-1-y1)-2-methoxyphenoxy)-3,4,5~trihydroxytetrahydro-2H-pyran-2-carboxy 1 i c ac id);优选为33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、9-羟基-连翘脂 素葡萄糖醛酸苷、33,34_亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、连翘脂素葡萄糖醛酸甲酯、 连翘脂素葡萄糖醛酸钠或连翘脂素葡萄糖醛酸钾。
[0018]特别是，所述连翘苷与连翘脂素组合物中连翘苷与连翘脂素的重量份配比为2~ 98:2~98;优选为2-10:90-98;进一步优选为80:20或20:80，进一步优选为90:10或10:90， 更进一步优选为98:2或2:98;再进一步优选为98:2。
[0019]其中，所述的连翘苷、连翘苷衍生物的含量多1 %，优选为多30%，进一步优选为多 60%，更进一步优选为多80%，再更进一步优选为多98% ;连翘苷与连翘脂素组合物含量多 1%，优选为^30%，进一步优选为多60%，更进一步优选为多80%，再更进一步优选为彡 98% 〇
[0020] 特别是，所述的连翘苷、连翘苷衍生物含量为1 %~98% ;优选为30~80% ;连翘苷 与连翘脂素组合物含量为1 %~98% ;优选为30~80%。
[0021] 特别是，药学上可接受的载体通常被保健专家认可用于这一目的且作为药剂的非 活性成分。有关药学上可接受的载体的汇编可以在《药物赋形剂手册》（Handbook of Pharmaceutical excipients，第 2版，由 A.Wade 和 P.J.Weller 编辑；American Pharmaceutical Association出片反，Washington and The Pharmaceutical Press , London, 1994)等工具书中找到。
[0022] 尤其是，所述的载体包括赋形剂，如淀粉、水等;润滑剂，如硬脂酸镁等;崩解剂，如 微晶纤维素等;填充剂，如乳糖等;粘结剂，如预胶化淀粉、糊精等;甜味剂;抗氧化剂;防腐 剂、矫味剂、香料等；
[0023] 其中，所述药物以片剂、胶囊剂、丸剂、散剂、颗粒剂、糖浆剂形式存在。
[0024]特别是，所述的连翘苷、连翘苷衍生物含量多1 %，优选为多30 %，进一步优选为多 60%，更进一步优选为多80%，再更进一步优选为多98% ;连翘苷与连翘脂素组合物含量多 1%，优选为^30%，进一步优选为多60%，更进一步优选为多80%，再更进一步优选为彡 98% 〇
[0025] 本发明另一方面提供一种含有连翘苷、连翘苷衍生物或连翘苷与连翘脂素组合物 的抗氧化药物或保健品。
[0026] 其中，所述连翘苷衍生物选择连翘脂素葡萄糖醛酸衍生物。
[0027]特别是，所述连翘苷衍生物包括33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、9-羟基-连翘脂 素葡萄糖醛酸苷、33,34_亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、连翘脂素葡萄糖醛酸甲酯、 连翘脂素葡萄糖醛酸钠、连翘脂素葡萄糖醛酸钾、连翘脂素葡萄糖醛酸;优选为33-羟基-连 翘脂素葡萄糖醛酸苷、9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、33，34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄 糖醛酸苷、连翘脂素葡萄糖醛酸甲酯、连翘脂素葡萄糖醛酸钠或连翘脂素葡萄糖醛酸钾。 [0028]其中，所述连翘苷与连翘脂素组合物中连翘苷与连翘脂素的重量份配比为2~98: 2~98;优选为2-10:90-98;进一步优选为80:20或20:80，进一步优选为90:10或10:90，更进 一步优选为98:2或2:98;再进一步优选为98:2。
[0029]特别是，所述的连翘苷、连翘苷衍生物的含量多1 %，优选为多30%，进一步优选为 多60%，更进一步优选为多80%，再更进一步优选为多98% ;连翘苷与连翘脂素组合物含量 多1 %，优选为多30%，进一步优选为多60%，更进一步优选为多80%，再更进一步优选为多 98% 〇
[0030] 尤其是，所述的连翘苷、连翘苷衍生物的含量多1%，优选为1%~98%;优选为30 ~80%，更进一步优选为60% ;连翘苷与连翘脂素组合物含量多1 %，优选为1 %~98% ;优 选为30~80 %，更进一步优选为60 %。
[0031] 特别是，所述连翘苷、连翘苷衍生物或连翘苷与连翘脂素组合物的重量与所述药 物或保健品的总重量之比为〇. 01-10:100,优选为0.1~10:100,进一步优选为1~10:100。
[0032] 其中，所述连翘苷/连翘脂素组合物以连翘苷和连翘脂素以单体组成、或采用溶剂 加热提取方法制备而成的连翘脂素-连翘苷提取组合物，或连翘脂素和连翘苷与环糊精或 环糊精的衍生物组合而成连翘脂素-连翘苷-环糊精组合物。
[0033] 特别是，所述连翘脂素-连翘苷-环糊精组合物选择连翘脂素和连翘苷与α-、β-或 γ -环糊精或其衍生物相混合而成的混合物，或连翘脂素和连翘苷与α-、β-或γ -环糊精或 其衍生物经物理、化学方法处理形成的复合物。
[0034] 其中，所述连翘脂素-连翘苷-环糊精组合物中连翘苷和连翘脂素重量与环糊精或 环糊精的衍生物的重量之比为1:1-50。
[0035]特别是，所述环糊精为α-或β-、γ -环糊精;所述环糊精衍生物为羟乙基-环糊精、 2，6-二甲基-环糊精、2，3，6-三甲基-环糊精、2，6-二乙基-环糊精、2，3，6-三乙基-环糊精、 麦芽糖基-环糊精或磺丁醚环糊精、对甲基苯磺酰氯(p-TsCl)取代的β-环糊精、6-位取代 的β-⑶对甲基苯磺酸酯(β-环糊精-6-OTs )、2-氧羟丙基-β-环糊精、2-位单取代的对甲基苯 磺酸酯(β-环糊精-2-〇Ts)、i3_环糊精对甲基苯磺酸酯(T 〇Syl-i3-CD)、i3-环糊精的星形大分 子PCL-(Tos)7-0-CD。
[0036]特别是，所述药物或保健品中还包括伏苓提取物、熟地提取物、人参提取物、菟丝 子提取物，肉苁蓉提取物、肉桂提取物、枸杞子提取物、杜仲提取物、山药提取物、甘草提取 物、鹿茸提取物、维生素 C及其衍生物或维生素 E及其衍生物。
[0037]与现有技术相比，本发明具有如下的明显优点：
[0038] 1、本发明对已知化合物连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷/连翘脂素组合物发掘了新 的药用价值，将其用于抗氧化，并可制备成抗氧化的药物或保健食品，从而为连翘及连翘叶 药材的应用开拓了一个新的领域。
[0039] 2、本发明的系列试验研究证明已知化合物连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷/连翘脂 素组合物具有显著抗氧化的功效。
[0040] 3、本发明的已知化合物连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷/连翘脂素组合物药理作用 强，用于抗氧化的功效显著，见效快、毒副作用小、安全性好，能够长期服用，具有良好的药 用前景。
[0041] 4、本发明的产品原料来源丰富、价廉、临床使用安全，制备工艺简单，可制成各种 剂型，且服量小，使用方便，因此易于推广。
[0042] 5、本发明既可采用单一成分的连翘苷、连翘苷衍生物或双组份连翘苷/连翘脂素 组合物活性成分制备抗氧化的药物，又可采用连翘苷、连翘苷衍生物与或连翘苷/连翘脂素 组合物与其它活性成分(例如与伏苓提取物、熟地提取物、人参提取物、菟丝子提取物，肉苁 蓉提取物、肉桂提取物、枸杞子提取物、杜仲提取物、山药提取物、甘草提取物、鹿茸提取物、 维生素 C及其衍生物或维生素 E及其衍生物。）共同组方，制备抗氧化的复方药物。
【具体实施方式】
[0043] 下面通过【具体实施方式】来进一步描述本发明所述配方的有益效果，这些实施例包 括了本发明的连翘苷及连翘苷衍生物的胶囊、片剂、软胶囊剂的药效学试验。这些实施例仅 是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离 本发明的配方思路、用途范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但 这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
[0044] 本发明中所述连翘苷衍生物33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、9-羟基-连翘脂素 葡萄糖醛酸苷、33,34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷与专利申请（申请号： 201510319303.4,优先权号：201510164294.6)中所述连翘苷衍生物相同；连翘脂素葡萄糖 醛酸甲酯、连翘脂素葡萄糖醛酸钠、连翘脂素葡萄糖醛酸钾、连翘脂素葡萄糖醛酸与专利申 请（申请号：201510320579.4，优先权号：201410825547.5)中的相同。
[0045] 实施例1连翘苷片剂
[0046] 1、按照如下配比准备原料 连翘苷（纯度86%) 5〇0g 淀粉 丨000g
[0047] 滑石粉 】5g 硬脂酸镁 15g
[0048] 2、将连翘苷和淀粉混合均匀后制成颗粒，加入滑石粉和硬脂酸镁混合均匀后压制 成10000片。
[0049] 实施例2连翘苷胶囊剂
[0050] 1、按照如下配比准备原料
[0051 ] 连翘苷（纯度94%) 200g
[0052] 淀粉 l〇〇〇g
[0053] 2、将连翘苷和淀粉混合均匀后装胶囊，制成10000粒。
[0054]实施例3连翘苷胶囊剂
[0055] 1、按照如下配比准备原料
[0056] 连翘苷（纯度98%) 500g
[0057] 淀粉 l〇〇〇g
[0058] 2、将连翘苷和淀粉混合均匀后装胶囊，制成10000粒。
[0059] 实施例4连翘苷片剂
[0060] 1、按照如下配比准备原料 连翘苷（纯度63%) 50g. 人参提取物 20 g 维生素 C 4:00 g
[0061] 淀粉 1000 g 滑石粉 14.7g 硬脂酸镁 14. 7g
[0062] 2、将连翘苷、人参提取物、维生素 C和淀粉混合均匀后，制成颗粒，加入滑石粉和硬 脂酸镁混合均匀后压制成10000片。
[0063]实施例5连翘苷胶囊剂 [0064] 1、按照如下配比准备原料 连翘苷（纯度98%) 300g 伏苓提取物 300 g
[0065] 维生素 C 60Θ g 淀粉 1000 g
[0066] 2、将连翘苷、茯苓提取物、维生素 C和淀粉混合均匀后装胶囊，制成10000粒。
[0067]实施例6连翘苷颗粒剂 连翘苷（纯度92%) 500g 肉苁蓉提取物 100 g
[0068] 维生素 C 600 g 蔗糖粉 5000 g
[0069] 2、将连翘苷、肉苁蓉提取物、维生素 C和蔗糖粉混合均匀制成颗粒后装袋，制成 10000袋。
[0070] 实施例7连翘苷口服液
[0071] 1、按照如下配比准备原料 连翘苷 4g: 熟地提取物 3: g
[0072] 山药提取物 ：3 g 葡萄糖糖浆 5: g 全方最终加去离子水至mi)%。
[0073] 2、取连翘苷、熟地提取物、山药提取物，用乙醇溶解后加入葡萄糖糖浆，最终加去 离子水至l〇〇ml，即得。
[0074]实施例8 33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷片剂 [0075] 1、按照如下配比准备原料 33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（纯度66%) SOOg 淀粉 1000 g
[0076] 滑石粉 15? 硬脂酸镁 15容
[0077] 2、将33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均匀后，制成颗粒，加入滑石粉 和硬脂酸镁混合均匀后压制成10000片。
[0078]实施例9 33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷胶囊剂 [0079] 1、按照如下配比准备原料
[0080] 33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷(纯度60%) 200g
[0081] 淀粉 l〇〇〇g
[0082] 2、将33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均匀后装胶囊，制成10000粒。 [0083]实施例10 33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷胶囊剂
[0084] 1、按照如下配比准备原料
[0085] 33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷(纯度98%) 500g
[0086] 淀粉 l〇〇〇g
[0087] 2、将33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均匀后装胶囊，制成10000粒。 [0088]实施例11 33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷片剂
[0089] 1、按照如下配比准备原料 33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（纯度63%) 50g 甘草提取物 2〇 g 维生素 C 400 s
[0090] 淀粉 10Q0 g 滑石粉 14.'7g 硬脂酸镁 14.7g
[0091] 2、将33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、甘草提取物、维生素 C和淀粉混合均匀后制 粒，加入滑石粉和硬脂酸镁混匀后压制成10000片。
[0092]实施例12 33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷胶囊剂 [0093] 1、按照如下配比准备原料 33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（纯度98%) 300 g 枸杞子提取物 30 g
[0094] 维牛.? C 600 g 淀粉 1000 g
[0095] 2、将33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、枸杞子提取物、维生素 C和淀粉混合均匀后 装胶囊，制成10000粒。
[0096] 实施例13 33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷颗粒剂
[0097] 1、按照如下配比准备原料 33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（纯度92%) 500g 杜仲提取物 30 g
[0098] 维生素 C 600 g 薦糖粉 5_000 g
[0099] 2、将33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、杜仲提取物、维生素 C和蔗糖粉混合均匀制 成颗粒后装袋，制成10000袋。
[0100] 实施例14 33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷口服液
[0101] 1、按照如下配比准备原料 33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（纯度98%) 4g 甘草提取物 3g
[0102] 杜仲提取物 3g 葡萄糖糖浆 5g 去离子水 适量·
[0103] 2、取33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、杜仲提取物、甘草提取物，用乙醇溶解后加 入葡萄糖糖浆，最终加去离子水至l〇〇ml，即得。
[0104] 实施例15 9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷片剂
[0105] 1、按照如下配比准备原料 9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（纯度66%) 500g 淀粉 1000 g
[0106] 滑石粉 15g 硬脂酸镁 L%
[0107] 2、将9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均匀后，制成颗粒，加入滑石粉和 硬脂酸镁混合均匀后压制成10000片。
[0108] 实施例16 9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷胶囊剂
[0109] 1、按照如下配比准备原料
[0110] 9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷(纯度97 % ) 200g
[0111] 淀粉 1000g
[0112] 2、将9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均匀后装胶囊，制成10000粒。
[0113] 实施例17 9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷胶囊剂
[0114] 1、按照如下配比准备原料
[0115] 9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷(纯度98 % ) 500g
[0116] 淀粉 l〇〇〇g
[0117] 2、将9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均匀后装胶囊，制成10000粒。
[0118] 实施例18 9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷片剂
[0119] 1、按照如下配比准备原料
[0120] 9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸(纯度63%) 5:0g 甘草提取物 20 g 维生素 C 400 g
[0121] 淀粉 10_g 滑石粉 14.7g 硬脂酸镁 14.7g
[0122] 2、将9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、甘草提取物、维生素 C和淀粉混合均匀后制 粒，加入滑石粉和硬脂酸镁混匀后压制成10000片。
[0123] 实施例19 9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷胶囊剂
[0124] 1、按照如下配比准备原料 9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（纯度98%) ^)0 g 菟丝子提取物 3& g
[0125] 维生素 C 600 g 淀粉 1000 p
[0126] 2、将9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、菟丝子提取物、维生素 C和淀粉混合均匀后 装胶囊，制成10000粒。
[0127] 实施例20 9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷颗粒剂
[0128] 1、按照如下配比准备原料 9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（纯度92%) 500g 杜仲提取物 3.0 g
[0129] 维生素 C 600 g 蔗糖粉 5000 g
[0130] 2、将9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、杜仲提取物、维生素 C和蔗糖粉混合均匀制 成颗粒后装袋，制成10000袋。
[0131 ]实施例21 9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷口服液
[0132] 1、按照如下配比准备原料 9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（纯度98%) 4g： 熟地提取物 3g
[0133] 杜仲提取物 3经 葡萄糖糖浆 5g 去尚子水 适量
[0134] 2、取9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、杜仲提取物、熟地提取物，用乙醇溶解后加 入葡萄糖糖浆，最终加去离子水至l〇〇ml，即得。
[0135] 实施例22 33,34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷片剂
[0136] 1、按照如下配比准备原料 33, 34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（纯度66%) 500g 淀粉 1000 g
[0137] 滑石粉 15g 硬脂酸镁 15g
[0138] 2、将33，34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均匀后，制成颗粒，加 入滑石粉和硬脂酸镁混合均匀后压制成10000片。
[0139] 实施例23 33,34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷胶囊剂
[0140] 1、按照如下配比准备原料
[0141] 33,34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷(纯度97 % ) 200g
[0142] 淀粉 l〇〇〇g
[0143] 2、将33,34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均匀后装胶囊，制成 10000粒。
[0144] 实施例24 33，34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷胶囊剂
[0145] 1、按照如下配比准备原料
[0146] 33,34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷(纯度98 % ) 500g
[0147] 淀粉 l〇〇〇g
[0148] 2、将33,34_亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均匀后装胶囊，制成 10000粒。
[0149] 实施例25 33,34_亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷片剂
[0150] 1、按照如下配比准备原料 33, 34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（纯度63%) 50g 熟地提取物 20 g 维牛素 C 400 g
[0151] 淀粉 1000 g 滑石粉 14,7g 硬脂酸镁 14.7g
[0152] 2、将33,34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、熟地提取物、维生素 C和淀粉混 合均匀后制粒，加入滑石粉和硬脂酸镁混匀后压制成10000片。
[0153] 实施例26 33,34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷胶囊剂
[0154] 1、按照如下配比准备原料 33, 34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（纯度9:8%) 3Q0 g 寬丝子提取物 30 g
[0155] 维生素 C 600 g 淀粉 l〇〇〇g
[0156] 2、将33，34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、菟丝子提取物、维生素 C和淀粉 混合均匀后装胶囊，制成10000粒。
[0157] 实施例27 33,34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷颗粒剂
[0158] 1、按照如下配比准备原料 33, 34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（纯度92%) M)0g 杜仲提取物 30 g
[0159] 维生素 C 600 g 蔗糖粉 5000 g
[0160] 2、将33,34_亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、杜仲提取物、维生素 C和蔗糖粉 混合均匀制成颗粒后装袋，制成10000袋。
[0161] 实施例28 33,34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷颗粒剂
[0162] 1、按照如下配比准备原料 33, 34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（纯度:9:8%) 300g 杜仲提取物 30 g
[0163] 维屮索乂、 600 g 鹿糖粉 5()00 g 制成10000袋
[0164] 2、将33,34_亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、杜仲提取物、维生素 C和蔗糖粉 混合均匀制成颗粒后装袋，制成10000袋。
[0165] 实施例29 33,34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷口服液
[0166] 1、按照如下配比准备原料
[0167] 33, 34-亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷（纯度98%) 4g 熟地提取物 3g 杜仲提取物 3g
[0168] 葡萄糖糖浆 5g 去离子水 适量
[0169] 2、取33,34_亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷、杜仲提取物、熟地提取物，用乙 醇溶解后加入葡萄糖糖浆，最终加去离子水至l〇〇ml，即得。
[0170] 实施例30连翘苷和连翘脂素组合物片剂制备
[0171] 1、按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的片剂： 连翘苷/连翘脂素组合物(两者重量比为98:? 500g 淀粉 480g
[0172] 滑石粉 10g 硬脂酸镁 10g
[0173] 2、取连翘苷490g、连翘脂素10g与淀粉混合均匀后，制成颗粒，加入滑石粉和硬脂 酸镁混合均匀后压制成1 〇〇〇〇片。
[0174] 实施例31连翘苷/连翘脂素组合物颗粒剂制备
[0175] 1、按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的颗粒剂：
[0176] 连翘苷/连翘脂素组合物(两者重量比为98:2) 100g
[0177] 微晶纤维素 10000g
[0178] 2、取连翘苷98g、连翘脂素2g与微晶纤维素混合均匀后，制成颗粒装袋，制成10000 袋。
[0179] 实施例32连翘苷/连翘脂素组合物胶囊剂制备
[0180] 1、按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的胶囊剂：
[0181] 连翘苷/连翘脂素组合物(两者重量比为98:2) 250g
[0182] 淀粉 2500g
[0183] 2、取连翘苷245g、连翘脂素5g与淀粉混合均匀后装胶囊，制成10000粒。
[0184] 实施例33-36连翘苷/连翘脂素组合物胶囊剂制备
[0185] 实施例33-36中，连翘苷/连翘脂素组合物分别按下表的重量比与淀粉混合均匀后 装胶囊，各制成10000粒胶囊。
[0188] 实施例:37-40连翘苷/连翘脂素组合物颗粒剂制备
[0189] 实施例37-30中，连翘苷/连翘脂素组合物分别按下表的重量比与微晶纤维素混合 均匀后，制成颗粒装袋，制成10000袋。
[0191 ]实施例41连翘苷/连翘脂素组合物片剂制备
[0192] 1、按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的片剂： 连翘苷/连翘脂素组合物(两者重量比为98:2) 500g 淀粉 380g
[0193] 肉桂提取物 100g 滑石粉 10g: 硬脂酸镁 l〇g
[0194] 2、称取连翘苷490g、连翘脂素10g与肉桂提取物粉末混合均匀，再与淀粉混合均匀 后制成颗粒，加入滑石粉和硬脂酸镁混合均匀后压制成10000片。
[0195] 实施例42连翘苷/连翘脂素组合物颗粒剂制备
[0196] 1、按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的颗粒剂： 连翘苷/连翘脂素组合物(两者重量比为98:2> 25〇g 山药提取物 250:g
[0197] 肉桂提取物 250g 微晶纤维素 24500g
[0198] 2、取连翘苷245g、连翘脂素5与山药提取物、肉桂提取物粉末混合均匀，再与微晶 纤维素混合均匀后制成颗粒装袋，制成10000袋。
[0199] 实施例43连翘苷/连翘脂素组合物胶囊剂制备
[0200] 1、按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的胶囊剂： 连翘苷/连翘脂素组合物(两者重量比为98:2) 25% 鹿茸提取物 250g
[0201] 人参提取物 250g 肉苁蓉提取物 250g 淀粉 l〇〇〇g
[0202] 2、连翘苷245g、连翘脂素5g与鹿茸提取物、人参提取物、肉苁蓉提取物粉末混合均 匀，再与淀粉混合均匀后装胶囊，制成10000粒。
[0203] 实施例44连翘苷/连翘脂素组合物片剂制备
[0204] 1、按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的片剂： 连翘苷/连翘脂素组合物(两者重量比为80:20) 500g 淀粉 48:0g
[0205] 人参提取物 50(? 滑石粉 10g 硬脂酸镁 10g
[0206] 2、取连翘苷490g、连翘脂素10g与人参提取物粉末混合均匀，再与淀粉混合均匀后 制成颗粒，加入滑石粉和硬脂酸镁混合均匀后压，制成10000片。
[0207] 实施例45连翘苷/连翘脂素组合物颗粒剂制备
[0208] 1、按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的颗粒剂： 连翘苷/连翘脂素组合物(两者重量比为90 10) lOOOg 熟地提取物 500g
[0209] 菟丝子提取物 500g 微晶纤维素 i0000g
[0210] 2、取连翘苷900g、连翘脂素100g与上述提取物(熟地、菟丝子)粉末混合均匀，再与 微晶纤维素混合均匀后制成颗粒装袋，制成10000袋。
[0211] 实施例46连翘苷/连翘脂素组合物胶囊剂制备
[0212] 1、按照如下配比制备连翘苷/连翘脂素组合物的胶囊剂： 连翘苷/连翘脂素组合物(两者重量比为94:6) 2000g
[0213] 熟地提取物 250g 土茯苓提取物 ：5〇ag
[0214] 人参提取物 250g 淀粉 1000g
[0215] 2、连翘苷1880g、连翘脂素120g与上述提取物(熟地、土茯苓、人参)粉末混合均匀， 再与淀粉混合均匀后装胶囊，制成10000粒。
[0216] 试验例1连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素组合物清除· 0H自由基的测定
[0217] 1试验材料
[0218] 1.1药品与试剂
[0219] 连翘苷，白色粉末，大连富生天然药物开发有限公司生产，经高效液相色谱两种检 测器紫外检测器和蒸发光散射检测器面积归一化法测定，其纯度为99.5 %，并用中国药品 生物制品含量测定用连翘苷对照品标定和确认其含量为99.5%。批号:20130303。
[0220] 连翘脂素(含量>98%)，白色粉末，大连富生天然药物开发有限公司生产，批号： 20130301
[0221 ] 33-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷(连翘苷衍生物A，含量>98% )，白色粉末，大连 富生天然药物开发有限公司生产，批号：20130301。经高效液相色谱两种检测器紫外检测器 和蒸发光散射检测器面积归一化法测定，其纯度为98.5%。
[0222] 9-羟基-连翘脂素葡萄糖醛酸苷(连翘苷衍生物B，含量>98% )，白色粉末，大连富 生天然药物开发有限公司生产，批号= 20130302。经高效液相色谱两种检测器紫外检测器和 蒸发光散射检测器面积归一化法测定，其纯度为99.2%。
[0223] 33,34_亚甲基二氧-连翘脂素葡萄糖醛酸苷(连翘苷衍生物C，含量>98%)，白色 粉末，大连富生天然药物开发有限公司生产，批号= 20130301。经高效液相色谱两种检测器 紫外检测器和蒸发光散射检测器面积归一化法测定，其纯度为98.7%。
[0224] 连翘苷/连翘脂素组合物A，连翘苷(含量> 98 % )，白色粉末，大连富生天然药物开 发有限公司生产，批号= 20130303;连翘脂素(含量>98%)，白色粉末，大连富生天然药物开 发有限公司生产，批号:20130301;连翘苷与连翘脂素的重量之比为98:2。
[0225] 连翘苷/连翘脂素组合物B，连翘苷(含量>98 % )，白色粉末，大连富生天然药物开 发有限公司生产，批号= 20130303;连翘脂素(含量>98%)，白色粉末，大连富生天然药物开 发有限公司生产，批号:20130301;连翘苷与连翘脂素的重量之比为90:10。
[0226] 邻二氮菲（由天津市科密欧化学试剂开发中心生产，批号:GB1293-13);硫酸亚铁、 H2〇2双氧水、阳性对照VC等均为国产分析纯。
[0227] 2试验方法
[0228] 采用H202/Fe2+体系法[金鸣，菜亚欣.邻二氮菲-Fe2+氧化法检测H 202/Fe2+产生的羟 自由基[J].生物化学与生物物理进展，1996,23(6) :553-555]，连翘苷、连翘脂素、连翘苷衍 生物A、连翘苷衍生物B、连翘苷衍生物C、连翘苷与连翘脂素组合物A、连翘苷与连翘脂素组 合物B分别测定。
[0229] 每种药物取9只试管，分别加入0.75mmol/L邻二氮菲溶液lmL，150mmol/LPBS缓冲 液(口!17.4)1.511^，0.75111111〇1/1^65〇4 111^，0.01%!12〇2 1111以其中一只作为未损伤管，不加 H2〇2)，再分别加入不同浓度药物溶液(其中一只作为损伤管，不加药物），损伤管和未损伤管 以无水乙醇补充体积。其中一只加入同体积lmg/LVC作为阳性药对照组，混合均匀后置于37 °C水浴中温育lh，冷却后于536nm波长下测定吸光度。
[0230] · 0H清除率的计算如下：· 0H清除率=[(A2-A1)/(Ao-A1)]X100%S*--式 1,
[0231 ] Αο:未损伤管的吸光度，Αι:损伤管的吸光度，A2:加药组管的吸光度。
[0232] 对· 0H自由基清除率测定结果见表1。
[0233] 表1连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素组合物对羟基自由基的清除作用(X 土s，n = 4)
[0237] 注:与阳性药对照组相比，* :P〈0.05
[0238] 除连翘脂素及其他连翘苷及相关化合物浓度0.006/mL以下组外，各剂量组及阳性 药组均对羟基自由基的清除有一定作用，且随着药物浓度的增加，清除率呈上升趋势，经F 检验，数据差异有显著意义，连翘苷衍生物A和连翘苷衍生物C对羟基自由基清除作用最强。
[0239] 试验例2连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素组合物清除(V ·自由基的测定
[0240] 1试验材料
[0241] 1.1药品与试剂
[0242] 连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素组合物、连翘脂素同试验例1，盐酸羟 胺、过硫酸铵(AP)、对氨基苯磺酸、α-萘胺、三羟甲基氨基甲烷(tris)及Ν,Ν,Ν'，Ν'-四甲基 乙二胺(TEMED)、阳性对照VC等均为国产分析纯。
[0243] 2试验方法
[0244] 采用AP-TEMED体系测定，各药物单独测试。每一药物取8只测量管，分别加入A液 (lmol/LHCL48ml，Tris36.6g，TEMED0.23mL，定容于 100mL)lmL，B液（140mg AP定容于 100mL) 4mL，反应lmin后，从每管中吸取混合液2mL，加人不同浓度连翘苷、连翘脂素、连翘苷衍生物 A、连翘苷衍生物B、连翘苷衍生物C、连翘苷与连翘脂素组合物A、连翘苷与连翘脂素组合物B 溶液（阳性药对照组加入2%0浓度的BHT)，混匀，以相同体积无水乙醇为对照。再向各管加 入10mmol/L盐酸轻胺0.4mL，25°C混合反应20min，加入17mmol/L对氨基苯磺酸2ml和7mmol/ La-萘胺2mL，于25°C反应25min，再加入同体积正丁醇充分摇匀，静置分层，吸取正丁醇相于 530nm波长下测定吸光值。
[0245] 〇2-自由基清除率（％ ) = [ (Αο-Α!)/A。] X 100%-----式2
[0246] 式中:Αο为无水乙醇溶液的吸光度值;Αι为加药组的吸光度值
[0247] Of ·自由基清除率测定结果如表2所示。
[0248] 表2连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素组合物对02_自由基的清除作用（X 土s，n = 4)
[0252] 注:与阳性药对照组相比，*: P〈〇 · 05，#: P〈0 · 01
[0253] 由表2的试验结果可知:吸光度值的变化反映连翘苷，连翘苷衍生物及其组合物各 剂量组对〇2_ ·自由基均具有一定清除作用，除12mg/mL药物组外，随着药物浓度的增加，清 除率呈上升趋势，经F检验，数据差异有显著性意义和极显著性意义，连翘苷衍生物C对0厂自 由基清除作用最强，连翘脂素几乎没有清除作用，连翘苷与连翘脂素联合应用有协同增效 作用。
【主权项】
1. 连翘苷、连翘苷衍生物、连翘苷与连翘脂素组合物在制备用于抗氧化的药物或保健 品中的应用。2. 根据权利要求1所述的应用，其特征是所述药物由连翘苷、连翘苷衍生物或连翘苷与 连翘脂素组合物和药学上可接受的载体组成。3. 根据权利要求1或2所述的应用，其特征是所述药物以片剂、胶囊剂、丸剂、散剂、颗粒 剂、糖浆剂、溶液剂形式存在。4. 根据权利要求1或2所述的应用，其特征是所述的连翘苷、连翘苷衍生物的纯度为多 1 % ;连翘苷与连翘脂素组合物的含量多1 %。5. 根据权利要求4所述的应用，其特征是所述所述的连翘苷、连翘苷衍生物的纯度为 1 %~98% ;连翘苷与连翘脂素组合物的含量为1 %~98%。6. -种用于抗氧化的药物或保健品，其特征是含有连翘苷、连翘苷衍生物或连翘苷与 连翘脂素组合物。7. 根据权利要求6所述的药物或保健品，其特征是所述的连翘苷、连翘苷衍生物的纯度 为多1 % ;连翘苷与连翘脂素组合物的含量多1 %。8. 根据权利要求6所述的药物或保健品，其特征是所述连翘苷、连翘苷衍生物或连翘苷 与连翘脂素组合物的重量与所述药物或保健品的总重量之比为〇. 01-10:100。9. 根据权利要求6所述的药物或保健品，其特征是所述连翘苷与连翘脂素组合物选择 连翘脂素和连翘苷与α-、β_或γ -环糊精或其衍生物相混合而成的混合物，或连翘脂素和连 翘苷与α-、β-或γ -环糊精或其衍生物经物理、化学方法处理形成的复合物。10. 根据权利要求6所述的药物或保健品，其特征是还包括伏苓提取物、熟地提取物、人 参提取物、菟丝子提取物，肉苁蓉提取物、肉桂提取物、枸杞子提取物、杜仲提取物、山药提 取物、甘草提取物、鹿茸提取物、维生素 C及其衍生物或维生素 Ε及其衍生物。
【文档编号】A61K35/32GK106063797SQ201610247337
【公开日】2016年11月2日
【申请日】2016年4月20日 公开号201610247337.1, CN 106063797 A, CN 106063797A, CN 201610247337, CN-A-106063797, CN106063797 A, CN106063797A, CN201610247337, CN201610247337.1
【发明人】惠敏, 富力, 王凯乾, 鲁明明, 王硕, 柳洋, 冯雪, 刘正贤, 刘国友
【申请人】富力