专利名称：Cdk抑制性嘧啶化合物、其制备方法以及作为药物的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及嘧啶衍生物、其制备方法以及作为治疗各种疾病的药物的应用。
背景技术：
CDK(细胞周期蛋白依赖性激酶)是在调节细胞周期中扮演重要角色的一类酶，并且由此可作为用于研制小的抑制作用分子的特别有利的目标。选择性抑制CDK可用于治疗癌症或者导致细胞增殖破坏的其他疾病。
嘧啶化合物及其类似物已被描述作为活性成分，例如2-苯胺基-嘧啶化合物作为杀真菌剂(DE 4029650)或者取代的嘧啶衍生物可用于治疗神经或神经变性疾病(WO 99/19305)。作为CDK抑制剂，已描述了各种不同的嘧啶衍生物，例如二(苯胺基)嘧啶衍生物(WO 00/12486)、2-氨基-4-取代的嘧啶化合物(WO 01/14375)、嘌呤化合物(WO99/02162)、5-氰基-嘧啶化合物(WO 02/04429)、苯胺基嘧啶化合物(WO 00/12486)以及2-羟基-3-N，N-二甲基氨基丙氧基-嘧啶化合物(WO 00/39101)发明内容本发明的目的是提供一种与已知的抑制剂相比具有更佳性质的化合物。在此描述的物质具有更高的作用，这是因为它们可在纳摩尔范围内发挥抑制作用，而且与其他已知的CDK抑制剂如奥罗莫星和roscovitine显著不同。
现已发现通式I的化合物及其异构体、非对映体、对映体和盐能够克服上述缺陷 其中R1代表氢、卤素、C1-C6烷基、硝基，或者代表基团-COR5、-OCF3、-(CH2)nR5、-S-CF3或-SO2CF3，R2代表C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10环烷基，或者代表在-个或多个位置处相同或者不同地被以下基团取代的C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10环烷基羟基、卤素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、氨基、氰基、C1-C6烷基、-NH-(CH2)n-C3-C10环烷基、C3-C10环烷基、C1-C6-羟基烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基-C1-C6烷基、-NHC1-C6-烷基、-N(C1-C6-烷基)2、-SO(C1-C6烷基)、-SO2(C1-C6烷基)、C1-C6烷酰基、-CONR3R4、-COR5、C1-C6烷基OAc、羧基、芳基、杂芳基、-(CH2)n-芳基、-(CH2)n-杂芳基、苯基-(CH2)n-R5、-(CH2)nPO3(R5)2或者-R6或-NR3R4，而上述苯基、C3-C10环烷基、芳基、杂芳基、-(CH2)n-芳基和-(CH2)n-杂芳基本身可任选地在一个或多个位置处相同或者不同地被以下基团取代卤素、羟基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、杂芳基、苯甲酸基或者基团-CF3或-OCF3，C3-C10环烷基的环和C1-C10烷基可任选地插有一个或者多个氮、氧和/或硫原子和/或在所述环中插有一个或多个＝C＝O基团和/或在所述环中任选地包含一个或多个可能的双键，或者R2代表以下基团 或 X代表氧或者基团-NH-、-N(C1-C3烷基)或者代表在一个或多个位置处相同或者不同地被杂芳基取代的-OC3-C10环烷基，或者X和R2一起形成C3-C10环烷基环，该环可任选地包含一个或者多个杂原子并任选地在一个或多个位置处被羟基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或卤素取代，A和B相互独立地代表氢、羟基、C1-C3烷基、C1-C6烷氧基或者代表基团-SR7、-S(O)R7、-SO2R7、-NHSO2R7、-CH(OH)R7、-CR7(OH)-R7、C1-C6烷基P(O)OR3OR4、-COR7或以下基团
A和B一起形成C3-C10环烷基环，该环可任选地插有一个或多个氮、氧和/或硫原子和/或可插有一个或多个＝C＝O或＝SO2基团和/或在环中可任选含有一个或多个可能的双键，而且该C3-C10环烷基环可任选地在一个或多个位置处相同或不同地被以下基团取代羟基、卤素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、氨基、氰基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C3-C10环烷基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷基、-NHC1-C6烷基、-N(C1-C6-烷基)2、-SO(C1-C6烷基)、-SO2R7、C1-C6烷酰基、-CONR3R4、-COR5、C1-C6烷基OAc、苯基或者基团R6，其中所述苯基本身可任选地在一个或多个位置处相同或不同地被卤素、羟基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或者基团-CF3或-OCF3取代，R3和R4相互独立地代表氢、苯基、苄氧基、C1-C12烷基、C1-C6烷氧基、C2-C4烯氧基、C3-C6环烷基、羟基、羟基-C1-C6烷基、二羟基-C1-C6烷基、杂芳基、杂环C3-C10烷基、杂芳基-C1-C3烷基、任选被氰基取代的C3-C6环烷基-C1-C3烷基，或者代表任选在一个或多个位置处相同或不同地被苯基、吡啶基、苯氧基、C3-C6环烷基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，其中所述苯基本身可在一个或多个位置处相同或不同地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或基团-SO2NR3R4取代，或者代表基团-(CH2)nNR3R4、-CNHNH2或-NR3R4，或者R3和R4一起形成C3-C10-环烷基环，该环可任选地插有一个或多个氮、氧和/或硫原子和/或插有一个或多个＝C＝O基团和/或环中任选包含一个或多个可能的双键，R5代表羟基、苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、苯甲酸基、C1-C6烷硫基或C1-C6烷氧基，R6代表杂芳基或C3-C10环烷基环，该环具有如上所述的定义，R7代表卤素、羟基、苯基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、具有如上所述定义的C3-C10环烷基，或者代表基团-NR3R4，或者代表在一个或多个位置处相同或不同地被羟基、C1-C6烷氧基、卤素、苯基、-NR3R4或苯基取代的C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C7环烷基，其中所述苯基本身可在一个或多个位置处相同或不同地被卤素、羟基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤代C1-C6烷基、卤代C1-C6烷氧基取代，或者R7代表苯基，其本身可在一个或多个位置处相同或不同地被卤素、羟基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基、卤代C1-C6烷基或卤代C1-C6烷氧基取代，R8、R9和R10相互独立地代表氢、羟基、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、芳基、杂芳基，或者代表在一个或多个位置处相同或不同地被以下基团取代的C1-C10烷基、C2-C10烯基，C2-C10炔基或C3-C10环烷基羟基、卤素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、氨基、氰基、C1-C6烷基、-NH-(CH2)n-C3-C10环烷基、C3-C10环烷基、C1-C6羟烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基-C1-C6烷基、-NHC1-C6烷基、-N(C1-C6烷基)2、-SO(C1-C6烷基)、-SO2(C1-C6烷基)、C1-C6烷酰基、-CONR3R4、-COR5、C1-C6烷基OAc、羧基、芳基、杂芳基、-(CH2)n-芳基、-(CH2)n-杂芳基、苯基-(CH2)n-R5、-(CH2)nPO3(R5)2或者基团-R6或-NR3R4，而所述苯基、C3-C10环烷基、芳基、杂芳基、-(CH2)n-芳基和-(CH2)n-杂芳基本身可任选地在一个或多个位置处相同或不同地被卤素、羟基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或者基团-CF3或-OCF3取代，而C3-C10环烷基的环和C1-C10烷基可任选地插有一个或多个氮、氧和/或硫原子和/或在环中插有一个或多个＝C＝O基团和/或在环中任选包含一个或多个可能的双键，以及n代表0-6。
烷基定义为直链或支链烷基基团，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、己基、庚基、辛基、壬基和癸基。
烷氧基定义为直链或支链烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、异戊氧基或己氧基。
烷硫基定义为直链或支链的烷硫基，例如甲硫基、乙硫基、丙硫基、异丙硫基、丁硫基、异丁硫基、仲丁硫基、叔丁硫基、戊硫基、异戊硫基或己硫基。
环烷基通常定义为单环烷基，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基或环癸基，单也包括二环或三环的环烷基，例如降冰片基、金刚烷基等。
在环中可任选包含一个或多个可能双键的环系定义为例如环烯基，如环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基或环庚烯基，其中可连接在双键和单键上。
但是，如果A和B、R3和R4、X和R2分别相互独立地一起形成任选插有一个或多个杂原子如氮原子、氧原子和/或硫原子，和/或在环中可插有一个或多个＝C＝O基团和/或在环中任选包含一个或多可能双键的C3-C10环烷基，则上述定义还包括杂芳基或者杂环烷基和杂环烯基。
卤素都定义为氟、氯、溴或碘。
烯基取代基都是直链或支链的，例如可以是以下基团乙烯基、丙烯-1-基、丙烯-2-基、丁-1-烯-1-基、丁-1-烯-2-基、丁-2-烯-1-基、丁-2-烯-2-基、2-甲基-丙-2-烯-1-基、2-甲基-丙-1-烯-1-基、丁-1-烯-3-基、乙炔基、丙-1-炔-1-基、丁-1-炔-1-基、丁-2-炔-1-基、丁-3-烯-1-基和烯丙基。
炔基定义为包含2-6个碳原子、优选2-4个碳原子的直链或支链炔基。例如，可以是以下基团乙炔基、丙炔-1-基、丙炔-3-基、丁-1-炔-1-基、丁-1-炔-4-基、丁-2-炔-1-基、丁-1-炔-3-基等。
芳基包含3-12个碳原子，而且可以是苯并稠合的。
例如，可以是以下基团环丙烯基、环戊二烯基、苯基、托品基、环辛二烯基、茚基、萘基、甘菊环基、联苯基、芴基和蒽基等。
杂芳基都包含3-16个环原子，而且替代碳原子可在环中包含一个或多个相同或不同的杂原子，例如氧、氮或硫、而且可以是单环、二环或三环的，并且还可以是苯并稠合的。例如可以是以下基团噻吩基、呋喃基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基等，以及它们的苯并衍生物，如苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、吲唑基、吲哚基、异吲哚基等；或者吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等，以及它们的苯并衍生物，如喹啉基、异喹啉基等；或者吖辛因基、中氮茚基、嘌呤基等，以及它们的衍生物；或者quinolinyl、isoquinolinyl、噌啉基、2，3-二氮杂萘基、喹唑啉基、喹喔啉基、1，5-二氮杂萘基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、占吨基、oxepinyl等。
杂环烷基代表包含3-12个碳原子的烷基环，但替代碳原子可包含一个或多个相同或不同的杂原子，如氧、硫或氮。杂环烷基例如可以是环氧乙烷基、氧杂环丁烷基、吖丙啶基、氮杂环丁烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、二氧杂环戊烷基、咪唑啉基、吡唑啉基、二噁烷基、哌啶基、吗啉基、二噻烷基、硫代吗啉基、哌嗪基、三噻烷基、奎宁环基等。
杂环烯基代表包含3-12个碳原子并且部分饱和的烷基环，但替代碳原子包含一个或多个相同或不同的杂原子，如氧、硫或氮。杂环烯基例如可以是吡喃基、thiin、dihydroacet等。
如果包含酸基，有机酸和无机酸的生理相容盐是合适的盐，例如易溶的碱金属和碱土金属盐，以及N-甲基-葡糖胺、二甲基-葡糖胺、乙基-葡糖胺、赖氨酸、1，6-己二胺、乙醇胺、葡糖胺、肌氨酸、丝氨醇、三羟基-氨基-甲烷、氨基丙二醇、Sovak碱以及1-氨基-2，3，4-丁三醇。
如果包括碱性基团，则有机酸和无机酸的生理相容盐是合适的，例如盐酸、硫酸、磷酸、柠檬酸、酒石酸等。
以下的通式(I)化合物及其异构体、对映体、非对映体和盐是特别有效的，其中R1代表氢、卤素、C1-C6烷基、硝基、或者基团-COR5、-OCF3、-(CH2)nR5、-S-CF3或-SO2CF3，R2代表C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10环烷基，或者代表在一个或多个位置处相同或不同地被以下基团取代的C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10环烷基羟基、卤素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、氨基、氰基、C1-C6烷基、-NH-(CH2)n-C3-C10环烷基、C3-C10环烷基、C1-C6羟基烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基-C1-C6烷基、-NHC1-C6烷基、-N(C1-C6烷基)2、-SO(C1-C6烷基)、-SO2(C1-C6烷基)、C1-C6烷酰基、-CONR3R4、-COR5、C1-C6烷基OAc、羧基、芳基、杂芳基、-(CH2)n-芳基、-(CH2)n-杂芳基、苯基-(CH2)n-R5、-(CH2)nPO3(R5)2或者基团-R6或-NR3R4，而所述苯基、C3-C10环烷基、芳基、杂芳基、-(CH2)n-芳基和-(CH2)n-杂芳基本身可任选地在一个或多个位置处相同或不同地被卤素、羟基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、杂芳基、苯甲酸基或者基团-CF3或-OCF3取代，而C3-C10环烷基的环和C1-C10烷基可任选地插有一个或多个氮、氧和/或硫原子和/或在环中插有一个或多个＝C＝O基团和/或在环中任选地包含一个或多个可能的双键，或者
R2代表以下基团 或 X代表氧或者基团-NH-、-N(C1-C3烷基)或者代表可在一个或多个位置处相同或不同地被杂芳基取代的OC3-C10环烷基，或者X和R2一起形成C3-C10环烷基环，该环可任选地包含一个或多个杂原子，并任选地在一个或多个位置处被羟基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或卤素取代，A和B相互独立地代表氢、羟基、C1-C3烷基、C1-C6烷氧基或者基团-S-CH3、-SO2-C2H4-OH、-CO-CH3、-S-CHF2、-S-(CH2)nCH(OH)CH2N-R3R4、-CH2P(O)OR3OR4、-S-CF3、-SO-CH3、-SO2CF3、-SO2-(CH2)n-N-R3R4、-SO2-NR3R4、-SO2R7、-CH-(OH)-CH3，或者代表以下基团
或者A和B一起形成以下基团
或 R3和R4相互独立地代表氢、苯基、苄氧基、C1-C12烷基、C1-C6烷氧基、C2-C4烯氧基、C3-C6环烷基、羟基、羟基-C1-C6烷基、二羟基-C1-C6烷基、杂芳基、杂环-C3-C10烷基、杂芳基-C1-C3烷基、任选被氰基取代的C3-C6环烷基-C1-C3烷基，或者代表任选在一个或多个位置处相同或不同地被苯基、吡啶基、苯氧基、C3-C6环烷基、C1-C6烷基或C1-C6-烷氧基取代的C1-C6烷基，其中所述苯基本身可在一个或多个位置处相同或不同地被卤素、三氟甲基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或者基团-SO2NR3R4取代，或者代表基团-(CH2)nNR3R4、-CNHNH2或-NR3R4，或者代表以下基团
或 这些基团可任选地被C1-C6烷基取代，R5代表羟基、苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、苯甲酸基、C1-C6烷硫基或C1-C6烷氧基，R6代表以下基团 或 R7代表卤素、羟基、苯基、C1-C6烷基、-C2H4OH、-NR3R4或以下基团 R8、R9和R10分别相互独立地代表氢、羟基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基或者以下基团
n代表0-6。
以下的通式(I)化合物及其异构体、对映体、非对映体和盐尤其是特别有效的，其中R1代表氢、卤素、C1-C3烷基或者基团-(CH2)nR5，R2代表-CH(CH3)-(CH2)n-R5、-CH-(CH2OH)2、-(CH2)nR7、-CH(C3H7)-(CH2)n-R5、-CH(C2H5)-(CH2)n-R5、-CH2-CN、-CH(CH3)COCH3、-CH(CH3)-C(OH)(CH3)2、-CH(CH(OH)CH3)OCH3、-CH(C2H5)CO-R5、C2-C4炔基、-(CH2)n-COR5、-(CH2)n-CO-C1-C6烷基、-(CH2)n-C(OH)(CH3)-苯基、-CH(CH3)-C(CH3)-R5、-CH(CH3)-C(CH3)(C2H5)-R5、-CH(OCH3)-CH2-R5、-CH2-CH(OH)-R5、-CH(OCH3)-CHR5-CH3、-CH(CH3)-CH(OH)-CH2-CH＝CH2、-CH(C2H5)-CH(OH)-(CH2)n-CH3、-CH(CH3)-CH(OH)-(CH2)n-CH3、-CH(CH3)-CH(OH)-CH(CH3)2、(CH2OAC)2、-(CH2)n-R6、-(CH2)n-(CF2)n-CF3、-CH(CH2)n-R5)2、-CH(CH3)-CO-NH2、-CH(CH2OH)-苯基、-CH(CH2OH)-CH(OH)-(CH2)nR5、-CH(CH2OH)-CH(OH)-苯基、-CH(CH2OH)-C2H4-R5、-(CH2)n-C≡C(CH3)＝CH-COR5、-CH(Ph)-(CH2)n-R5、-(CH2)n-COR5、-(CH2)nPO3(R5)2、-(CH2)n-COR5、-CH((CH2)nOR5)CO-R5、-(CH2)nCONHCH((CH2)nR5)2、-(CH2)nNH-COR5、-CH(CH2)nR5-(CH2)nC3-C10环烷基、-(CH2)n-C3-C10环烷基、C3-C10环烷基，任选在一个或多个位置处相同或不同地被羟基、C1-C6烷基或基团-COONH(CH2)nCH3或-NR3R4取代的C1-C6烷基、C3-C10环烷基、-(CH2)n-O-(CH2)n-R5、-(CH2)n-NR3R4，-CH(C3H7)-(CH2)n-OC(O)-(CH2)n-CH3、-(CH2)n-R5、-C(CH3)2-(CH2)n-R5、-C(CH2)n(CH3)-(CH2)nR5、-C(CH2)n-(CH2)nR5、-CH(叔丁基)-(CH2)n-R5、-CCH3(C3H7)-(CH2)nR5、-CH(C3H7)-(CH2)n-R5、-CH(C3H7)-COR5、-CH(C3H7)-(CH2)n-OC(O)-NH-Ph、-CH((CH2)n(C3H7))-(CH2)nR5、-CH(C3H7)-(CH2)n-OC(O)-NH-Ph(OR5)3、-NR3R4、-NH-(CH2)n-NR3R4、R5-(CH2)n-C*H-CH(R5)-(CH2)n-R5、-(CH2)n-CO-NH-(CH2)n-CO-R5、-OC(O)NH-C1-C6烷基、或-(CH2)n-CO-NH-(CH2)n-CH-((CH2)nR5)2，或者代表被以下基团取代的C3-C10环烷基 或者代表以下基团
或 X代表氧或者基团-NH-、-N(C1-C3烷基)或者 R2代表以下基团 或 X和R2一起形成以下基团 或 A和B相互独立地代表氢、羟基、C1-C3烷基，C1-C6烷氧基或者基团-S-CH3、-SO2-C2H4-OH、-CO-CH3、-S-CHF2、-S(CH2)nCH(OH)CH2NR3R4、-CH2PO(OC2H5)2、-S-CF3、-SO-CH3、-SO2CF3、-SO2-(CH2)n-N-R3R4、-SO2-NR3R4、-SO2R7、-CH(OH)-CH3、-COOH、-CH((CH2)nR5)2、-(CH2)nR5、-COO-C1-C6烷基、-CONR3R4或者代表以下基团
或者A和B一起形成以下基团 或 R3和R4相互独立地代表氢、苯基、苄氧基、C1-C12烷基、C1-C6烷氧基、C2-C4烯氧基、C3-C6环烷基、羟基、羟基-C1-C6烷基、二羟基-C1-C6烷基、杂芳基、杂环-C3-C10烷基、杂芳基-C1-C3烷基、任选被氰基取代的C3-C6环烷基-C1-C3烷基，或者代表任选在一个或多个位置处相同或不同地被以下基团取代的C1-C6烷基苯基、吡啶基、苯氧基、C3-C6环烷基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基，其中所述苯基本身可在一个或多个位置处相同或不同地被以下基团取代卤素、三氟甲基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或基团-SO2NR3R4，或者代表基团-(CH2)nNR3R4、-CNHNH2或-NR3R4，或者代表以下基团 或 这些基团可任选地被C1-C6烷基取代，R5代表羟基、苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、苯甲酸基、C1-C6烷硫基或C1-C6烷氧基，R6代表以下基团 或 R7代表卤素、羟基、苯基、C1-C6烷基、-(CH2)nOH、-NR3R4或以下基团
R8、R9和R10代表氢、羟基、C1-C6烷基或者基团-(CH2)n-COOH，以及n代表0-6。
根据本发明的化合物能够有效地抑制细胞周期蛋白依赖性激酶，基于它们的作用可例如对抗癌症，如实体瘤和白血病；自身免疫疾病，如牛皮癣、脱发、以及多发性硬化、化疗引发的脱发和粘膜炎；心血管疾病，如狭窄、动脉硬化和再狭窄；感染性疾病，例如由单细胞寄生虫如锥虫、弓形虫或疟原虫导致的疾病，或者由真菌产生的疾病；肾疾病，如肾小球肾炎；慢性神经变性疾病，如Huntington病、肌萎缩性侧索硬化、Parkinson病、AIDS痴呆和Alzheimer病；急性神经变性疾病，如脑缺血和神经外伤；病毒感染，如巨细胞感染、疱疹、乙型肝炎和丙型肝炎、以及HIV疾病。
真核细胞分化确保了基因组的复制以及经由协同和经过调节的事件顺序通过传代分布在子细胞中。细胞周期分为4个连续期G1期代表了DNA复制之前的时间，在此期间细胞生长并且对外界刺激敏感。在S期中，细胞复制其DNA，而在G2期中，准备进入有丝分裂。在有丝分裂(M期)中，经复制的DNA分离，而且完成细胞分化。
细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)是一类丝氨酸/苏氨酸激酶，其成员需要作为调节亚单位的细胞周期蛋白(Cyc)的结合，以使它们活化、驱动细胞完成细胞周期。不同的CDK/Cyc对在细胞周期的不同期中是活性的。对于细胞周期的基础功能重要的CDK/Cyc对例如是CDK4(6)/CycD、CDK2/CycE、CDK2/CycA、CDK1/CycA和CDK1/CycB。CDK酶家族的一些成员通过影响上述细胞周期CKD的活性而具有调节功能，但是没有特异性功能可以与CDK酶家族的其他成员有关。作为CDK酶家族的一个成员，CDK5的特征在于其具有一个非典型的衍生于细胞周期蛋白的调节亚单位(p35)，而且其活性在脑中是最高的。
进入细胞周期以及由“限制点”中的通过标志着细胞独立于开始完成细胞分化的进一步生长信号，而且受控于CDK4(6)/CycD和CDK2/CycE复合物的活性。这些CDK复合物的必要底物是成视网膜细胞瘤蛋白(Rb)，该蛋白是成视网膜细胞瘤抑制剂基因的产物。Rb是转录辅阻遏物蛋白。对于其他性质，其机理还知之甚少。Rb结合E2F类型的转录因子并使其失活，而且与组蛋白脱乙酰酶(HDAC)形成转录阻遏物复合物(Zhang，H.S.等人(2000).Exit from G1 and S Phase of theCell Cycle is Regulated by Repressor Complexes Containing HDAC-Rb-hSWI/SNF and Rb-hSWI/SNF.Cell 101，79-89)。通过CDK对Rb的磷酸化，释放所结合的E2F转录因子，并导致基因的转录活化，其产物是DNA合成以及S期进展所需要的。另外，Rb磷酸化使Rb-HDAC复合物分解，由此活化额外的基因。CDK对Rb的磷酸化被处理为相当于超过“限制点”。对于由S期的进展及其完成，CDK2/CycE和CDK2/CycA复合物的活性是必须的，例如，一旦细胞进入S期，CDK2/CycA产生磷酸化作用，由此关闭E2F类型的转录因子的活性。完成DNA的复制后，与CycA或CycB之复合物中的CDK1控制进入细胞以及由G2和M期中通过(
图1)。根据细胞分化周期的不寻常的重要性，通过细胞周期的传代受到严格的调节和控制。细胞周期进展所必需的酶必须在正确的时间处被活化，而且一旦通过相应期后又被关闭。如果检测到DNA损坏，或者DNA复制或纺锤体的产生尚未完成，则相应的控制点(检查点)停止细胞周期中的进展。
CDK的活性直接受各种机制控制，如细胞周期蛋白的合成及分解、CDK与相应细胞周期蛋白的复合、调节性苏氨酸和酪氨酸基团的磷酸化及脱磷酸化、以及天然抑制蛋白的结合。虽然增殖细胞中的CDK蛋白的量是相对恒定的，但是每种细胞周期蛋白的量却随细胞周期的进展而摇摆不定的。因此，例如早期G1期中的CycD表达受生长因子刺激，而CycE的表达则在由于活化E2F类型的转录因子而超过“限制点”后被诱导。细胞周期蛋白本身可被遍在蛋白介导的蛋白水解分解。活化磷酸化作用或者使磷酸化作用失活都可调节CDK的活性，例如使CDK1的CDK活化激酶(CAK)Thr160/161磷酸化，但是相反，Wee1/Myt1家族的酶却通过使Thr14和Tyr15磷酸化而使激酶CDK1失活。这些失活磷酸化作用又可被cdc25磷酸酶破坏。两个天然CDK抑制剂蛋白(CKI)，即、p21基因族(p21、p27、p57)和p16基因族(p15、p16、p18、p19)对CDK/Cyc复合物活性的调节作用是非常显著的。p21族的成员结合CDKs1、2、4、6的细胞周期蛋白复合物，但是仅抑制包含CDK1和CDK2的复合物。p16族的成员是CDK4复合物和CDK6复合物的特异性抑制剂。
控制点调节的平面在CDK活性的复合物直接调节之上。控制点允许细胞跟踪细胞周期期间有序的每个期。最重要的控制点处于由G1向S过渡以及由G2向M过渡。G1控制点确保细胞不会引发任何DNA合成，除非其具有适当的营养，正确地与其他细胞或者底物相互作用，而且将DNA是完整的。G2/M控制点确保DNA复制的完成以及在细胞进入有丝分裂之前有丝分裂纺锤体的产生。G1控制点由p53肿瘤抑制剂基因的基因产物活化。在检测到细胞代谢或者基因组整体性的变化后，p53被活化，而且可触发细胞周期进展的停止或者凋亡。在此情况下，p53对CDK抑制剂蛋白p21表达的转录活化扮演着决定性的作用。G1控制点的第二个分支包括在用UV光线或者离子化辐射导致DNA破坏并由此使cdc25A磷酸酶发生蛋白水解分解后对ATM和Chk1激酶的活化(Mailand，N.等人(2000).Rapid Destruction of Human cdc25A in Response to DNADamage.Science 288，1425-1429)。由此导致细胞周期的关闭，这是因为没有除去CDK的抑制性磷酸化作用。由于DNA损坏而活化G2/M控制点后，两种机制按照类似的方式使细胞周期的进展停止。
细胞周期之调节作用的丢失以及控制点功能的丢失是肿瘤细胞的特征。在超过90％的人肿瘤细胞中，CDK-Rb信号途径受到突变的影响。这些突变作用最终导致Rb磷酸化作用的失活，并且包括由于基因扩增或者染色体移位而导致的D细胞周期蛋白和E细胞周期蛋白的过度表达，使p16型的CDK抑制剂的突变或缺失失活，以及增加(p27)或降低(CycD)的蛋白分解。受肿瘤细胞中的突变影响的第二组基因编码控制点的组成。因此，对于G1和G2/M控制点为必须的p53是人肿瘤中最经常发生突变的基因(50％以上)。在表达p53但没有突变的肿瘤细胞中，因为蛋白分解大大增加，其通常被失活。按照类似的方式，对于控制点的功能必须的其他蛋白的基因受突变的影响，例如ATM(失活突变)或者cdc25磷酸酶(过度表达)。
令人信服的实验数据表明CDK2/Cyc复合物在细胞周期进展过程中占据了关键性的位置(1)两种显性阴性形式的CDK2，例如反义核苷酸对CDK2表达的转录阻抑，使细胞周期进展停止。(2)在小鼠中CycA基因的失活是致命性的。(3)细胞渗透性肽对细胞中CDK2/CycA复合物功能的破坏导致肿瘤细胞选择性的凋亡(Chen，Y.N.P.等人(1999).Selective Killing of Transformed Cells by Cyclin/Cyclina-Dependent Kinase2 Antagonists.Proc.Natl.Acad.Sci.USA 96，4325-4329)。
细胞周期控制的变化不仅在肿瘤中扮演着重要的角色。通过病毒以及非转化病毒，许多病毒活化细胞周期，使得在宿主细胞中复制病毒成为可能。正常的有丝分裂后细胞假进入细胞周期中与各种神经变性疾病有关。细胞周期调节的机制、它们在疾病中的变化以及许多研制细胞周期进展抑制剂、特别是CDK的方法已描述在各种文献中(Sielecki，T.M.等人(2000).Cyclin-Dependent Kinase InhibitorsUseful Targets in CellCycle Regulation.J.Med.Chem.43，1-18；Fry，D.W.&Garrett，M.D.(2000).Inhibitors of Cyclin-Dependent Kinases as Therapeutic Agents forthe Treatment of Cancer.Curr.Opin.Oncol.Endo.Metab.Invest.Drugs 2.40-59；Rosiania，G.R.&Chang，Y.T.(2000).Targeting HyperproliferativeDisorders with Cyclin-Dependent Kinase Inhibitors.Exp.Opin.Ther.Patents10，215-230；Meijer L.等人(1999).Properties and Potential Applications ofChemical Inhibitors of Cyclin-Dependent Kinases.Pharmacol.Ther.82，279-284；Senderowicz，A.M.&Sausville，E.A.(2000).Preclinical andClinical Development of Cyclin-Dependent Kinase Modulators.J.Natl.Cancer Inst.92，376-387)。
为以药物的形式使用本发明的化合物，可将其制成药物制剂的形式，除用于肠道或非胃肠道给药的活性成分外，该制剂包含合适的药物学上可接受的有机或无机载体材料，例如水、明胶、阿拉伯胶、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、滑石、植物油、聚乙二醇等。药物制剂可为固体形式，例如片剂、包衣片剂、栓剂或胶囊剂，或者是液体形式，例如溶液剂、混悬剂或乳剂。另外，它们可任选包含佐剂，如防腐剂、稳定剂、润湿剂、或乳化剂，用于改变渗透压的盐或缓冲剂。这些药物制剂也是本发明的主题。
对于非胃肠道给药，注射液或混悬液、特别是活性化合物在聚羟乙氧基化蓖麻油中的含水溶液是特别合适的。
作为载体系统，还可使用表面活性剂如胆酸的盐或者动物或植物磷脂以及它们的化合物、脂质体或它们的组分。
对于口服给药，含有滑石和/或烃载体或粘合剂如乳糖、玉米淀粉或马铃薯淀粉的片剂、包衣片剂或胶囊剂是特别合适的。也可用液体剂型给药，如任选添加有甜味剂的汁液。
肠道、非胃肠道以及口服给药也是本发明的主题。
活性成分的剂量可根据给药方法、患者的年龄和体重、待治疗疾病的类型和严重程度以及类似的因素而变化。日剂量为0.5-1000mg，优选为50-200mg，其中所述剂量可以单剂量一次性给药或者分为两个或者更多个日剂量给药。
本发明的主题还包括通式I的化合物在制备用于治疗以下疾病的药物中的应用癌症、自体免疫性疾病、心血管疾病、化疗剂诱发的脱发和内膜炎、感染性疾病、肾疾病、慢性和急性神经变性疾病和病毒感染，其中癌症定义为实体瘤和白血病；自体免疫性疾病定义为牛皮癣、脱发和多发性硬化；心血管疾病定义为狭窄、动脉硬化和再狭窄；感染性疾病定义为由单细胞寄生虫导致的疾病；肾疾病定义为肾小球肾炎；慢性神经变性疾病定义为Huntington病、肌萎缩性侧索硬化、Parkinson病、AIDS痴呆和Alzheimer病；急性神经变性疾病定义为脑缺血和神经外伤；而病毒感染定义为巨细胞感染、疱疹、乙型肝炎或丙型肝炎、以及HIV疾病。
本发明的主题还包括用于治疗上述疾病的药物，其包含至少一种通式I的化合物，以及含有合适的制剂物质和载体的药物。根据本发明之通式I的化合物是细胞周期蛋白依赖性激酶(如CDK1、CDK2、CDK3、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7、CDK8和CDK9)以及糖原合成酶激酶(GSK-3β)的优异抑制剂。
如果未描述起始化合物的制备，则这些化合物是已知的或者可类似于已知化合物或在此描述的方法来制备。还可在平行的反应器中或者通过组合操作步骤进行所有在此描述的反应。
根据通常使用的方法如结晶、色谱或者成盐法，可将异构体混合物分离为对映体或E/Z异构体。
盐的制备是按照常规方式进行的式I化合物的溶液与相同量或过量的碱或酸混合，所述碱或酸任选为溶液，然后分离沉淀物或者按照常规方式处理溶液。
本发明化合物的制备以下实施例将解释本发明化合物的制备，但是本发明的范围绝不仅限于这些实施例中。
根据本发明的通式I化合物可根据以下合成路线中所示的方法进行制备合成路线1
合成路线2 Z＝O或NH
合成路线3
实施例1制备5-溴-N2-(4-二氟甲硫基苯基)-N4-2-丙炔基-2，4-嘧啶二胺(根据合成路线1中的方法实施)(化合物23)将245mg(1mmol)的2-氯-4-2-丙炔基氨基嘧啶溶解在2ml的乙腈中，然后在生物下添加4-(二氟甲硫基)-苯胺盐酸盐(其是由352mg(2mmol)的4-(二氟甲硫基)-苯胺、1ml的乙腈和0.5ml的盐酸溶液(4M，在二 烷中)制得的)的悬浮液。在N2气氛下回流反应混合物过夜。冷却后，过滤混合物，残留的固体相用水洗涤，然后干燥。得到328mg(85％)的产物。
6H 8.25(s，1H) 产率85％2C 7.86(d，2H)H7.51(d，2H)7.38(t，56.8Hz，1H)4C 4.18(m，2H) 熔点＞235℃H3.16(sb，1H)10.24(sb，1H)NH 8.17(sb，1H)实施例2制备5-溴-N-(3-(环氧乙烷基甲氧基)苯基)-2-(2-丙炔基氧基)-2-嘧啶二胺(化合物51)并按照合成路线2实施将1.55g(4.9mmol)的化合物20溶解在5.5ml的表溴醇中，然后向其中添加1.38g的K2CO3和65mg的叔丁基溴化铵。在氮气氛和100℃下搅拌反应混合物1小时。添加乙酸乙酯后，收集所得的沉淀物，然后在乙醇中重结晶。产物的产量是1.15g(62％)，为白色粉末。
6H8.45(s，1H)2CH 7.47(s，1H)7.32(d，1H)产率62％7.20(t，1H)6.40(d，1H)4.32(dd，1H)3.82(dd，1H) 熔点173℃3.3-3.4(m，1H)2.87(t，1H)2.72(dd，1H)4CH 5.13(d，2H)3.67(t，1H)NH 9.84(sb，1H)类似于实施例2制备化合物40。
6-H 8.36(s，1H) 色谱2CH 7.60(d，1H) H/EA130.5％TEA6.91(d，1H)4.28(dd，1H)3.79(dd，1H) 产率38％3.31(m，1H)2.84(dd，1H) 熔点140-141℃2.70(dd，1H)4CH 5.07(d，12H)3.65(t，1H)NH 9.65(sb，1H)OH
实施例3制备1-(4-((5-溴-4-(2-丙炔基氧基)-嘧啶-2-基)-氨基)苯氧基)-3-(4-苯基哌嗪-1-基)-2-丙醇(化合物41)将0.2ml的0.5M 4-苯基哌嗪在N，N′-二甲基丙基脲(DMPU)中的溶液添加至19mg(0.05mmol)的化合物51在DMPU中的溶液内。反应混合物在80℃下保持18小时。冷却后，添加3.5ml的叔丁基甲基醚，有机相用1.5ml的水萃取5次，然后真空蒸发。残留物在1.7g(15μM)的Lichrosphere Si60上进行色谱纯制(梯度∶二氯甲烷/己烷1∶1至DCM，然后二氯甲烷/甲醇99∶1至93∶7)。产物的产量为17mg(64％)。
按照类似的方法还制备以下化合物
按照类似于实施例中描述的方法制备以下化合物
类似于合成路线1或2的合成方法制备以下化合物所有的NMR光谱是在指定溶剂或DMSO测定的
标有*)的化合物159、160、161、163、167、168、170、174、175、191、192、203和204可按照实施例295中所述的方法来制备。
实施例258制备4-(5-溴4-吗啉-4-基-嘧啶-2-基氨基)-苯磺酰胺 使202mg(0.60mmol)实施例122的化合物与1ml的水和0.2g(1.2mmol)的溴混合，然后在室温下搅拌。24小时后，再添加0.2g(1.2mmol)的溴，并在室温下再搅拌24小时。减压蒸发溶剂，残留物通过色谱纯制(Flashmaster II，DCM/MeOH 7∶3。得到白色固体产物17mg(0.04mmol，7％)。
类似于实施例6.0中用于制备中间产物的方法(中间产物的制备，第186页)制备以下化合物
类似于制备例1制备以下化合物
根据以下的制备方法合成下述化合物 将30mg(0.0678mmol)的化合物277溶解在1ml的甲醇/四氢呋喃1∶1中。添加约10mg的硼氢化钠后，继续搅拌2小时。用约3-4滴的冰乙酸使反应停止并同时进行冷却，然后蒸发浓缩。之后，粗产物用少量的水处理，抽滤，重新用乙腈洗涤，然后在60℃下真空干燥。所希望化合物的产量为21mg(理论值的70％)。
实施例290制备通式I之肟醚-嘧啶化合物根据以下反应路线制备肟醚化合物 R8和R9与通式I中的定义相同。
实施例290的制备 使50mg(0.12mmol)的化合物282、34mg的羟基氯化铵和150mg的氢氧化钾粉末在2ml的甲醇中回流2小时。将反应混合物倾倒在冰水中，用冰乙酸进行酸化，用二氯甲烷/异丙醇4∶1萃取3次，用硫酸镁干燥，然后蒸发浓缩。将残留物悬浮在乙腈中，抽滤，然后在60℃下干燥。所希望产物的产量为28mg(理论值的54％)。
质量ESI MH+429(29％)，371(61％)，289(91％)按照类似的方法制备以下化合物
实施例294还原氨化 将50mg(0.12mmol)的化合物282和7.5mg(0.132mmol)的环丙胺溶解在2ml的1，2-二氯乙烷中。添加9.1mg(0.144mmol)的氰基硼氢化钠后，搅拌12小时。用二氯甲烷/异丙醇4∶1稀释，用水洗涤2次，用硫酸镁干燥，然后蒸发浓缩。残留物在硅胶上用二氯甲烷/甲醇(95∶5)进行色谱纯制。所希望化合物的产量为18mg(理论值的33％)。
还类似地制备化合物159、160、161、163、167、168、170、174、175、191、192、203和204。
实施例295和296按照类似于实施例1的方法制备以下两个化合物
通式I之磺酰胺的制备 将0.2mmol的磺酰氟引入合成机的反应器中。添加1.0ml的溶剂，优选2-丁醇。通过移液管顺序地添加0.2ml(0.2mmol)溶解在溶剂(例如DMSO或2-丁醇)中的DMAP以及0.2ml(0.2mmol)溶解在2-丁醇中的胺。在80℃下搅拌反应混合物20小时。反应完成后，粗产物用吸液管取出粗产物，并用1.0ml的THF重新洗涤反应器。粗产物的溶液进行蒸发浓缩，然后通过HPLC纯制。
制备以下化合物
*)根据磺酰胺中描述的方法制得的通式I之嘧啶-磺酰氟的制备类似于磺酰胺的制备方法制备嘧啶-磺酰氟
按照类似于上述实施例的方法制备以下对位化合物
本发明化合物的非对映体混合物的分离化合物274之非对映体混合物的分离 非对映体混合物通过HPLC被分离为两个相应的外消旋体(A和B)。分离条件是柱Kromasil C18(5μm)150×4.6mm洗脱剂25％乙腈/含有1ml NH3/L的水流速1.0ml/min检测PDA 300nm保留时间外消旋体A 11.6min，外消旋体B 12.4min
非对映体混合物通过HPLC被分离为两个相应的外消旋体(A和B)。分离条件是柱Chiralpak AD(10μm)250×4.6mm洗脱剂∶己烷/乙醇80∶20流速1.0ml/min检测PDA 300nm保留时间对映体A1-16.6min，对映体A2-19.6min对映体B1-16.0min，对映体B2-17.8min
优选用于制备根据本发明之式I化合物的中间制备阶段。
实施例1.0制备N-(2-氯-5-氟-4-嘧啶基)-N-2-丙炔基胺将11.1g(66mmol)的2，4-二氯-5-氟嘧啶溶解在60ml的乙腈中，然后添加10.2ml(73mmol)的三乙胺和6.0ml(86mmol)的丙炔基胺。反应混合物在室温下搅拌过夜，然后倾倒在水中。混合物用乙酸乙酯萃取，合并的有机相在硫酸镁上干燥，然后减压蒸发溶剂。残留物用异丙基醚/己烷重结晶后，得到10.6g(理论值的87％)的产物。
5-H 8.18(3.3Hz，1H) 溶剂DMSO4CH 4.14(dd，2H) 产率87％3.20(t，1H)熔点96℃NH8.65(tb，1H)以下描述的4-(二氨基环己基)衍生物是通过用三乙酰氧基硼氢化物对所述的酮基衍生物进行还原氨化而合成的(Abdel-Magid，Carson，Harris，Maryanoff，Sha，J.Org.Chem.1996，61，3849)。酮基衍生物是通过相应醇的TPAP氧化反应而得到的(Griffith，Ley，Aldrichimica Acta 1990，23，13)。
按照类似的方法制备以下中间产物
实施例2.0制备5-溴-2-氯-4-(4，4，4-三氟丁氧基)嘧啶3.19g(14mmol)的5-溴-2，4-二氯嘧啶与8.06g(63mmol)的4，4，4-三氟丁醇混合，然后向其中缓慢添加0.74ml(8.4mmol)的三氟甲烷磺酸。在室温下搅拌反应混合物过夜，然后倾倒在水中。混合物用乙酸乙酯萃取，合并的有机相在硫酸镁上干燥，然后减压蒸发溶剂。产物中还总是含有各种量的2，4-二烷氧基嘧啶。因此，残留物用硅胶作为载体介质通过梯度色谱进行纯制(洗脱剂∶己烷和己烷/乙酸乙酯9∶1)。该过程中产物的产量为1.70g(38％)，另外还得到1.93g(34％)的5-溴-2，4-二(4，4，4-三氟丁氧基)嘧啶(起始物)。
按照类似的方法制备以下化合物
按照方法实施例1和2制备以下中间产物
实施例3.0制备胺 4.5g(20mmol)的2-溴丁醛二乙缩醛(Pfaltz-Bauer Company)和5.2g(80mmol)的叠氮化钠在100℃下于15ml的DMF中搅拌5天。倾倒在冷的碳酸氢钠稀溶液中，用乙醚萃取3次，有机相用硫酸镁干燥，然后蒸发浓缩粗产物1.87g(理论值的50％)。
将936mg的粗产物溶解在50ml的甲醇中，与钯/炭(10％)混合，然后在氢气氛下搅拌12小时。过滤出催化剂并蒸发浓缩后，得到457mg(理论值的57％)所希望的胺。
实施例4.0制备游离醛 将148mg(0.5mmol)的中间产物1.18溶解在1ml的冰乙酸中。在室温下，添加0.5ml的1N盐酸，并搅拌12小时。在后处理时，将反应物倾倒在冰水中，然后仔细用碳酸氢钠粉末中和。接着，用乙酸乙酯萃取3次，用硫酸镁干燥有机相，然后蒸发浓缩，得到醛化合物4.0的粗产物104mg(理论值的83％)。粗产物无需进一步纯制也可使用。
实施例5.0制备酮 将100mg(0.356mmol)的化合物6.0和126mg的N-甲基吗啉-N-氧化物溶解在5ml的二氯甲烷中，然后与分子筛(4A)粉末一起搅拌10分钟。添加6mg的四丙基过钌酸铵，并在室温下继续搅拌4小时。蒸发浓缩后，在硅胶上进行色谱纯制(己烷/乙酸乙酯4∶1＞2∶1)。得到75mg(理论值的76％)的酮化合物5.0。
实施例6.0制备醇 将265mg(1mmol)的化合物4.2溶解在20ml的四氢呋喃中。用冰浴冷却的同时，分批添加5当量的甲基溴化镁(3M的乙醚溶液)。在室温下搅拌3小时，然后用水使反应停止并同时冷却。与氯化铵溶液混合，用乙酸乙酯萃取3次，有机相用硫酸镁干燥，然后蒸发浓缩。通过快速色谱纯制(己烷/乙酸乙酯2∶1)，得到213mg(理论值的76％)的醇化合物6.0。
ESIMH+282(100％)，276(5％)
按照类似的方法制备以下中间产物
本发明的主题还包括通式Ia的化合物 其中D代表卤素，而X、R1和R2与通式(I)中的定义相同。
特别有价值的通式Ia中间产物是，其中D代表氯，而X、R1和R2与通式(I)中的定义相同。
本发明的另一个主题是受到DE 4029650之工业产权保护的那些化合物，这些化合物的作用是作为杀真菌剂，但是没有描述它们作为CDK抑制剂的作用，而且也没有描述它们可以用于治疗癌症。
本发明还涉及一种药物，其包含通式I的化合物及其异构体、非对映体、对映体和盐，其中R1代表卤素或C1-C3烷基，X代表氧或-NH，
A代表氢，B代表羟基、-CO-烷基-R7、-S-CHF2、-S(CH2)nCH(OH)CH2N-R3R4、-S-CF3、或-CH-(OH)-CH3，或者A和B一起形成以下基团 或 R2、R3、R4、R7和R8与通式I中的定义相同。
根据本发明的药物可用于治疗癌症、自体免疫性疾病、心血管疾病、化疗剂诱发的脱发和内膜炎、感染性疾病、肾疾病、慢性和急性神经变性疾病和病毒感染，其中癌症定义为实体瘤和白血病；自体免疫性疾病定义为牛皮癣、脱发和多发性硬化；心血管疾病定义为狭窄、动脉硬化和再狭窄；感染性疾病定义为由单细胞寄生虫导致的疾病；肾疾病定义为肾小球肾炎；慢性神经变性疾病定义为Huntington病、肌萎缩性侧索硬化、Parkinson病、AIDS痴呆和Alzheimer病；急性神经变性疾病定义为脑缺血和神经外伤；而病毒感染定义为巨细胞感染、疱疹、乙型肝炎或丙型肝炎、以及HIV疾病。
以下实施例将描述本发明化合物的生物作用，但本发明的范围绝不仅限于这些实施例中。
实施例1CDK2/CycE激酶实验从Freiburg的肿瘤生物学临床医生Dieter Marmé处得到由杆状病毒感染的昆虫细胞(Sf9)纯制的重组CDK2-和CycE-GST融合蛋白。用作激酶底物的组蛋白IIIS是由Sigma公司购得的。
在各种浓度的测试物质(0μm，以及0.01-100μm的范围)存在下，CDK2/CycE(50ng/测量点)在22℃下于实验缓冲液(50mmol的tris/HCl pH8.0、10mmol的MgCl2、0.1mmol的原钒酸钠、1.0mmol的二硫苏糖醇、0.5μm的三磷酸腺苷(ATP)、10μg/测量点的组蛋白IIIS、0.2μCi/测量点的33P-gamma ATP、0.05％NP40、12.5％二甲基亚砜)中温育15分钟。添加EDTA溶液(250mmol，pH8.0，14μl/测量点)，由此使反应停止。
对于每个反应溶液，取10μl施加在P30滤纸条(Wallac Company)上，对滤纸条进行洗涤3次共10分钟，每次都在0.5％的磷酸中，由此除去未掺入的33P-ATP。滤纸条在70℃下干燥1小时后，用闪烁剂条(MeltiLexTMA，Wallac Company)将其覆盖，然后在90℃下烘烤1小时。在gamma-放射测量仪(Wallac)中通过闪烁测量测定所掺入的33P的量(底物磷酸化)。
实施例2增殖实验将所收集的人肿瘤细胞(如上所述)以500细胞/测量点的浓度铺板在96孔多滴定板上，该板在200μl相应的生长介质中。24小时后，一个板的细胞(0点板)用结晶紫染色(如以下所述)，同时其他板的介质用新的培养基(200μl)替换，在该新的培养基中添加了各种浓度的测试物质(0μm，以及0.01-30μm的范围；溶剂二甲基亚砜的最终浓度为0.5％)。细胞在有测试物质存在的情况下培养4天。通过用结晶紫染色细胞来测定细胞增殖在室温下添加20μl/测量点的11％戊二醛溶液共15分钟，由此固定细胞。用水洗涤固定的细胞3次后，所述板在室温下干燥。添加100μl/测量点的0.1％结晶紫溶液(添加乙酸将pH设定为3)，由此使细胞着色。用水洗涤着色细胞3次后，所述板在室温下干燥。将添加100μl/测量点的10％乙酸溶液，由此使染料溶。在595nm的波长下用光度计测定消光。使0点板的消光测量值(＝0％)和未处理(0μm)细胞的消光测量值(＝100％)标准化，由此计算细胞的生长百分数。
实施例1和2的结果示于以下表中。
本发明化合物与已知化合物相比具有优异性的证明为证明根据本发明的化合物与已知化合物相比具有优异性，使根据本发明的化合物与已知的参考化合物以及结构上类似的已知化合物在酶实验中进行比较。结果见以下表所示。
由以上酶实验和细胞实验中的结果可以看出，根据本发明的化合物在酶和MCF-7中比本领域已知的化合物具有显著更高的活性。因此，根据本发明的化合物远远优于已知化合物。
权利要求
1.式I的化合物及其异构体、非对映体、对映体和盐 其中R1代表氢、卤素、C1-C6烷基、硝基，或者代表基团-COR5、-OCF3、-(CH2)nR5、-S-CF3或-SO2CF3，R2代表C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10环烷基，或者代表在一个或多个位置处相同或者不同地被以下基团取代的C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10环烷基羟基、卤素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、氨基、氰基、C1-C6烷基、-NH-(CH2)n-C3-C10环烷基、C3-C10环烷基、C1-C6-羟基烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基-C1-C6烷基、-NHC1-C6-烷基、-N(C1-C6-烷基)2、-SO(C1-C6烷基)、-SO2(C1-C6烷基)、C1-C6烷酰基、-CONR3R4、-COR5、C1-C6烷基OAc、羧基、芳基、杂芳基、-(CH2)n-芳基、-(CH2)n-杂芳基、苯基-(CH2)n-R5、-(CH2)nPO3(R5)2或者-R6或-NR3R4，而上述苯基、C3-C10环烷基、芳基、杂芳基、-(CH2)n-芳基和-(CH2)n-杂芳基本身可任选地在一个或多个位置处相同或者不同地被以下基团取代卤素、羟基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、杂芳基、苯甲酸基或者基团-CF3或-OCF3，C3-C10环烷基的环和C1-C10烷基可任选地插有一个或者多个氮、氧和/或硫原子和/或在所述环中插有一个或多个＝C＝O基团和/或在所述环中任选地包含一个或多个可能的双键，或者R2代表以下基团 或 X代表氧或者基团-NH-、-N(C1-C3烷基)或者代表在一个或多个位置处相同或者不同地被杂芳基取代的-OC3-C10环烷基，或者X和R2一起形成C3-C10环烷基环，该环可任选地包含一个或者多个杂原子并任选地在一个或多个位置处被羟基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或卤素取代，A和B相互独立地代表氢、羟基、C1-C3烷基、C1-C6烷氧基或者代表基团-SR7、-S(O)R7、-SO2R7、-NHSO2R7、-CH(OH)R7、-CR7(OH)-R7、C1-C6烷基P(O)OR3OR4、-COR7或以下基团 A和B一起形成C3-C10环烷基环，该环可任选地插有一个或多个氮、氧和/或硫原子和/或可插有一个或多个＝C＝O或＝SO2基团和/或在环中可任选含有一个或多个可能的双键，而且该C3-C10环烷基环可任选地在一个或多个位置处相同或不同地被以下基团取代羟基、卤素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、氨基、氰基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C3-C10环烷基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷基、-NHC1-C6烷基、-N(C1-C6-烷基)2、-SO(C1-C6烷基)、-SO2R7、C1-C6烷酰基、-CONR3R4、-COR5、C1-C6烷基OAc、苯基或者基团R6，其中所述苯基本身可任选地在一个或多个位置处相同或不同地被卤素、羟基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或者基团-CF3或-OCF3取代，R3和R4相互独立地代表氢、苯基、苄氧基、C1-C12烷基、C1-C6烷氧基、C2-C4烯氧基、C3-C6环烷基、羟基、羟基-C1-C6烷基、二羟基-C1-C6烷基、杂芳基、杂环C3-C10烷基、杂芳基-C1-C3烷基、任选被氰基取代的C3-C6环烷基-C1-C3烷基，或者代表任选在一个或多个位置处相同或不同地被苯基、吡啶基、苯氧基、C3-C6环烷基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，其中所述苯基本身可在一个或多个位置处相同或不同地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或基团-SO2NR3R4取代，或者代表基团-(CH2)nNR3R4、-CNHNH2或-NR3R4，或者R3和R4一起形成C3-C10-环烷基环，该环可任选地插有一个或多个氮、氧和/或硫原子和/或插有一个或多个＝C＝O基团和/或环中任选包含一个或多个可能的双键，R5代表羟基、苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、苯甲酸基、C1-C6烷硫基或C1-C6烷氧基，R6代表杂芳基或C3-C10环烷基环，该环具有如上所述的定义，R7代表卤素、羟基、苯基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、具有如上所述定义的C3-C10环烷基，或者代表基团-NR3R4，或者代表在一个或多个位置处相同或不同地被羟基、C1-C6烷氧基、卤素、苯基、-NR3R4或苯基取代的C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C7环烷基，其中所述苯基本身可在一个或多个位置处相同或不同地被卤素、羟基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤代C1-C6烷基、卤代C1-C6烷氧基取代，或者R7代表苯基，其本身可在一个或多个位置处相同或不同地被卤素、羟基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基、卤代C1-C6烷基或卤代C1-C6烷氧基取代，R8、R9和R10相互独立地代表氢、羟基、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、芳基、杂芳基，或者代表在一个或多个位置处相同或不同地被以下基团取代的C1-C10烷基、C2-C10烯基，C2-C10炔基或C3-C10环烷基羟基、卤素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、氨基、氰基、C1-C6烷基、-NH-(CH2)n-C3-C10环烷基、C3-C10环烷基、C1-C6羟烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基-C1-C6烷基、-NHC1-C6烷基、-N(C1-C6烷基)2、-SO(C1-C6烷基)、-SO2(C1-C6烷基)、C1-C6烷酰基、-CONR3R4、-COR5、C1-C6烷基OAc、羧基、芳基、杂芳基、-(CH2)n-芳基、-(CH2)n-杂芳基、苯基-(CH2)n-R5、-(CH2)nPO3(R5)2或者基团-R6或-NR3R4，而所述苯基、C3-C10环烷基、芳基、杂芳基、-(CH2)n-芳基和-(CH2)n-杂芳基本身可任选地在一个或多个位置处相同或不同地被卤素、羟基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或者基团-CF3或-OCF3取代，而C3-C10环烷基的环和C1-C10烷基可任选地插有一个或多个氮、氧和/或硫原子和/或在环中插有一个或多个＝C＝O基团和/或在环中任选包含一个或多个可能的双键，以及n代表0-6。
2.如权利要求1所述的通式(I)化合物及其异构体、对映体、非对映体和盐，其中R1代表氢、卤素、C1-C6烷基、硝基、或者基团-COR5、-OCF3、-(CH2)nR5、-S-CF3或-SO2CF3，R2代表C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10环烷基，或者代表在一个或多个位置处相同或不同地被以下基团取代的C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10环烷基羟基、卤素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、氨基、氰基、C1-C6烷基、-NH-(CH2)n-C3-C10环烷基、C3-C10环烷基、C1-C6羟基烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷基、C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基-C1-C6烷基、-NHC1-C6烷基、-N(C1-C6烷基)2、-SO(C1-C6烷基)、-SO2(C1-C6烷基)、C1-C6-烷酰基、-CONR3R4、-COR5、C1-C6烷基OAc、羧基、芳基、杂芳基、-(CH2)n-芳基、-(CH2)n-杂芳基、苯基-(CH2)n-R5、-(CH2)nPO3(R5)2或者基团-R6或-NR3R4，而所述苯基、C3-C10环烷基、芳基、杂芳基、-(CH2)n-芳基和-(CH2)n-杂芳基本身可任选地在一个或多个位置处相同或不同地被卤素、羟基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、杂芳基、苯甲酸基或者基团-CF3或-OCF3取代，而C3-C10环烷基的环和C1-C10烷基可任选地插有一个或多个氮、氧和/或硫原子和/或在环中插有一个或多个＝C＝O基团和/或在环中任选地包含一个或多个可能的双键，或者R2代表以下基团 或 X代表氧或者基团-NH-、-N(C1-C3烷基)或者代表可在一个或多个位置处相同或不同地被杂芳基取代的OC3-C10环烷基，或者X和R2一起形成C3-C10环烷基环，该环可任选地包含一个或多个杂原子，并任选的在一个或多个位置处被羟基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或卤素取代，A和B相互独立地代表氢、羟基、C1-C3烷基、C1-C6烷氧基或者基团-S-CH3、-SO2-C2H4-OH、-CO-CH3、-S-CHF2、-S-(CH2)nCH(OH)CH2N-R3R4、-CH2P(O)OR3OR4、-S-CF3、-SO-CH3、-SO2CF3、-SO2-(CH2)n-N-R3R4、-SO2-NR3R4、-SO2R7、-CH-(OH)-CH3，或者代表以下基团 或者A和B一起形成以下基团 或 R3和R4相互独立地代表氢、苯基、苄氧基、C1-C12烷基、C1-C6烷氧基、C2-C4烯氧基、C3-C6环烷基、羟基、羟基-C1-C6烷基、二羟基-C1-C6烷基、杂芳基、杂环-C3-C10烷基、杂芳基-C1-C3烷基、任选被氰基取代的C3-C6环烷基-C1-C3烷基，或者代表任选在一个或多个位置处相同或不同地被苯基、吡啶基、苯氧基、C3-C6环烷基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，其中所述苯基本身可在一个或多个位置处相同或不同地被卤素、三氟甲基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或者基团-SO2NR3R4取代，或者代表基团-(CH2)nNR3R4、-CNHNH2或-NR3R4，或者代表以下基团 或 这些基团可任选地被C1-C6烷基取代，R5代表羟基、苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、苯甲酸基、C1-C6烷硫基或C1-C6烷氧基，R6代表以下基团 或 R7代表卤素、羟基、苯基、C1-C6烷基、-C2H4OH、-NR3R4或以下基团 R8、R9和R10分别相互独立地代表氢、羟基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基或者以下基团 n代表0-6。
3.如权利要求1或2所述的通式(I)化合物及其异构体、对映体、非对映体和盐，其中R1代表氢、卤素、C1-C3烷基或者基团-(CH2)nR5，R2代表-CH(CH3)-(CH2)n-R5、-CH-(CH2OH)2、-(CH2)nR7、-CH(C3H7)-(CH2)n-R5、-CH(C2H5)-(CH2)n-R5、-CH2-CN、-CH(CH3)COCH3、-CH(CH3)-C(OH)(CH3)2、-CH(CH(OH)CH3)OCH3、-CH(C2H5)CO-R5、C2-C4炔基、-(CH2)n-COR5、-(CH2)n-CO-C1-C6烷基、-(CH2)n-C(OH)(CH3)-苯基、-CH(CH3)-C(CH3)-R5、-CH(CH3)-C(CH3)(C2H5)-R5、-CH(OCH3)-CH2-R5、-CH2-CH(OH)-R5、-CH(OCH3)-CHR5-CH3、-CH(CH3)-CH(OH)-CH2-CH＝CH2、-CH(C2H5)-CH(OH)-(CH2)n-CH3、-CH(CH3)-CH(OH)-(CH2)n-CH3、-CH(CH3)-CH(OH)-CH(CH3)2、(CH2OAC)2、-(CH2)n-R6、-(CH2)n-(CF2)n-CF3、-CH(CH2)n-R5)2、-CH(CH3)-CO-NH2、-CH(CH2OH)-苯基、-CH(CH2OH)-CH(OH)-(CH2)nR5、-CH(CH2OH)-CH(OH)-苯基、-CH(CH2OH)-C2H4-R5、-(CH2)n-C≡C(CH3)＝CH-COR5、-CH(Ph)-(CH2)n-R5、-(CH2)n-COR5、-(CH2)nPO3(R5)2、-(CH2)n-COR5、-CH((CH2)nOR5)CO-R5、-(CH2)nCONHCH((CH2)nR5)2、-(CH2)nNH-COR5、-CH(CH2)nR5-(CH2)nC3-C10环烷基、-(CH2)n-C3-C10环烷基、C3-C10环烷基，任选在一个或多个位置处相同或不同地被羟基、C1-C6烷基或基团-COONH(CH2)nCH3或-NR3R4取代的C1-C6烷基、C3-C10环烷基、-(CH2)n-O-(CH2)n-R5、-(CH2)n-NR3R4，-CH(C3H7)-(CH2)n-OC(O)-(CH2)n-CH3、-(CH2)n-R5、-C(CH3)2-(CH2)n-R5、-C(CH2)n(CH3)-(CH2)nR5、-C(CH2)n-(CH2)nR5、-CH(叔丁基)-(CH2)n-R5、-CCH3(C3H7)-(CH2)nR5、-CH(C3H7)-(CH2)n-R5、-CH(C3H7)-COR5、-CH(C3H7)-(CH2)n-OC(O)-NH-Ph 、-CH((CH2)n(C3H7))-(CH2)nR5、-CH(C3H7)-(CH2)n-OC(O)-NH-Ph(OR5)3、-NR3R4、-NH-(CH2)n-NR3R4、R5-(CH2)n-C*H-CH(R5)-(CH2)n-R5、-(CH2)n-CO-NH-(CH2)n-CO-R5、-OC(O)NH-C1-C6烷基、或-(CH2)n-CO-NH-(CH2)n-CH-((CH2)nR5)2，或者代表被以下基团取代的C3-C10环烷基 或者代表以下基团 或 X代表氧或者基团-NH-、-N(C1-C3烷基)或者 R2代表以下基团 或 X和R2一起形成以下基团 或 A和B相互独立地代表氢、羟基、C1-C3烷基，C1-C6烷氧基或者基团-S-CH3、-SO2-C2H4-OH、-CO-CH3、-S-CHF2、-S(CH2)nCH(OH)CH2N-R3R4、-CH2PO(OC2H5)2、-S-CF3、-SO-CH3、-SO2CF3、-SO2-(CH2)n-NR3R4、-SO2-NR3R4、-SO2R7、-CH(OH)-CH3、-COOH、-CH((CH2)nR5)2、-(CH2)nR5、-COO-C1-C6烷基、-CONR3R4或者代表以下基团 或者A和B一起形成以下基团 或 R3和R4相互独立地代表氢、苯基、苄氧基、C1-C12烷基、C1-C6烷氧基、C2-C4烯氧基、C3-C6环烷基、羟基、羟基-C1-C6烷基、二羟基-C1-C6烷基、杂芳基、杂环-C3-C10烷基、杂芳基-C1-C3烷基、任选被氰基取代的C3-C6环烷基-C1-C3烷基，或者代表任选在一个或多个位置处相同或不同地被以下基团取代的C1-C6烷基苯基、吡啶基、苯氧基、C3-C6环烷基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基，其中所述苯基本身可在一个或多个位置处相同或不同地被以下基团取代卤素、三氟甲基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或基团-SO2NR3R4，或者代表基团-(CH2)nNR3R4、-CNHNH2或-NR3R4，或者代表以下基团 或 这些基团可任选地被C1-C6烷基取代，R5代表羟基、苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、苯甲酸基、C1-C6烷硫基或C1-C6烷氧基，R6代表以下基团 或 R7代表卤素、羟基、苯基、C1-C6烷基、-(CH2)nOH、-NR3R4或以下基团 R8、R9和R10代表氢、羟基、C1-C6烷基或者基团-(CH2)n-COOH，以及n代表0-6。
4.通式Ia的化合物作为用于制备通式I化合物的中间体的应用 其中D代表卤素，而X、R1和R2与权利要求1之通式(I)中的定义相同。
5.如权利要求4所述的应用，其中D代表氯，而X、R1和R2与权利要求1之通式(I)中的定义相同。
6.一种药物，其包含通式I的化合物及其异构体、非对映体、对映体和盐，其中R1代表卤素或C1-C3烷基，X代表氧或-NH，A代表氢，B代表羟基、-CO-烷基-R7、-S-CHF2、-S(CH2)nCH(OH)CH2N-R3R4、-S-CF3、或-CH-(OH)-CH3，或者A和B一起形成以下基团 或 R2、R3、R4、R7和R8与通式I中的定义相同。
7.如权利要求1-3之一所述的通式I化合物在制备用于治疗以下疾病的药物中的应用癌症、自体免疫性疾病、心血管疾病、化疗剂诱发的脱发和粘膜炎、感染性疾病、肾疾病、慢性和急性神经变性疾病和病毒感染。
8.如权利要求7所述的应用，其中癌症为实体瘤和白血病；自体免疫性疾病为牛皮癣、脱发和多发性硬化；心血管疾病为狭窄、动脉硬化和再狭窄；感染性疾病为由单细胞寄生虫导致的疾病；肾疾病为肾小球肾炎；慢性神经变性疾病为Huntington病、肌萎缩性侧索硬化、Parkinson病、AIDS痴呆和Alzheimer病；急性神经变性疾病为脑缺血和神经外伤；而病毒感染为巨细胞感染、疱疹、乙型肝炎或丙型肝炎、以及HIV疾病。
9.一种药物，其包含至少一种如权利要求1-3之一所述的化合物。
10.如权利要求9所述的药物，其是用于治疗癌症、自体免疫性疾病、心血管疾病、感染性疾病、肾疾病、神经变性疾病和病毒感染。
11.一种药物组合物，其包含如权利要求1-3之一所述的化合物或如权利要求6所述的药物以及合适的制剂物质和载体。
12.如权利要求1-3之一所述的化合物以及如权利要求6所述的药物作为细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制剂的应用。
13.如权利要求12所述的应用，其中所述激酶是CDK1、CDK2、CDK3、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7、CDK8或CDK9。
14.如权利要求1-3之一所述的化合物以及如权利要求6所述的药物作为糖原合成酶激酶(GSK-3β)的抑制剂的应用。
15.如权利要求1-3之一所述的化合物在制备用于肠道、非胃肠道和口服给药的制剂中的应用。
16.如权利要求6所述的药物在制备用于肠道、非胃肠道和口服给药的制剂中的应用。
全文摘要
本发明涉及通式(I)的嘧啶衍生物，其中R
文档编号C07D403/04GK1633419SQ02814886
公开日2005年6月29日 申请日期2002年5月23日 优先权日2001年5月29日
发明者托马斯·布伦比, 罗尔夫·乔特莱特, 奥拉夫·普里恩, 马丁娜·舍费尔, 格哈德·西梅斯特, 乌尔里希·吕金, 克里斯托夫·胡韦 申请人:舍林股份公司