专利名称：3－取代哌嗪三氮唑醇类抗真菌化合物及其盐类的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，是一种新型3-取代哌嗪三氮唑醇类抗真菌化合物1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-取代哌嗪基-2-丙醇类化合物及其盐类。
背景技术：
近三十年来，由于临床上广谱抗生素的大量使用，癌症放疗、化疗和器官移植患者人数的增加，皮质激素和免疫抑制剂的广泛使用，以及艾滋病的流行，深部真菌感染率已经上升了40倍。最新统计资料表明，艾滋病患者中60％的直接死亡原因为深部真菌感染。深部真菌感染正日益成为一种常见病、多发病，已成为癌症及免疫缺陷性疾病患者死亡的主要原因之一。因此，临床上迫切需要高效、低毒、选择性高的新型深部抗真菌药物。但目前临床常用抗真菌药物如两性霉素B(Amphotericin B)、酮康唑(Ketoconazole)、氟康唑(Fluconazole)和伊曲康唑(Itraconazole)等都存在毒副作用大、抗菌谱窄、耐药菌株日趋增多等问题。
发明内容
本发明提供一种高效、低毒、广谱的新型三唑醇类化合物，及其常见药用盐类如盐酸盐、氢溴酸盐、甲烷磺酸盐、乙酸盐、草酸盐、马来酸盐、富马酸盐、葡萄酸盐、酒石酸盐、乳酸盐或丁二酸盐。
本发明化合物的结构通式如下 其中X代表氢或甲基，优选甲基。
M代羟基或酯基；这里的酯基指具有1～4个碳原子的直链或支链酯基，如甲酸酯基、乙酸酯基、丙酸酯基、异丙酸酯基，优选具有1～3个碳原子的酯基，特别优选乙酸酯基；Y代表芳环上的各种取代基，取代位置可位于邻、间、对位，可以是单取代，也可以是多取代，取代基指a.卤素，如F、Cl、Br、I，优选2，4-二氟或2，4-二氯取代；b.具有1～4个碳原子的脂肪链，如甲基、乙基、三氟甲基、叔丁基等，优选三氟甲基取代；特别优选2，4-二氟基；R代表(1)杂环甲酰基或乙酰基、取代杂环甲酰基或乙酰基杂环指常见的五员或六员杂环，如呋喃、噻吩、吡唑、咪唑、三氮唑、噁唑、噻唑、异噁唑、吡喃、吡啶、嘧啶、吗啉和哌啶等，优选六员杂环，特别优选吡啶或嘧啶，取代基可位于杂环的各个位置，可以是单取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4个碳原子的脂肪链，如甲基、乙基、三氟甲基、羟甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、异丙基和叔丁基等；b.卤素，如F、Cl、Br、I；c.吸电子基团或供电子基团，如硝基、氰基、氨甲酰基、N-甲基氨甲酰基、N-乙基氨甲酰基、N，N-二甲基氨甲酰基、N，N-二乙基氨甲酰基、甲氧酰基、乙氧酰基、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羟基、甲氧基、乙氧基等；(2)杂环甲基或取代杂环甲基杂环指常见的五员或六员杂环，如呋喃、噻吩、吡唑、咪唑、三氮唑、噁唑、噻唑、异噁唑、吡喃、吡啶、嘧啶、吗啉和哌啶等，优选六员杂环，特别优选吡啶或嘧啶，取代基可位于杂环的各个位置，可以是单取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4个碳原子的脂肪链，如甲基、乙基、三氟甲基、羟甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、异丙基和叔丁基等；b.卤素，如F、Cl、Br、I；c.吸电子基团或供电子基团，如硝基、氰基、氨甲酰基、N-甲基氨甲酰基、N-乙基氨甲酰基、N，N-二甲基氨甲酰基、N，N-二乙基氨甲酰基、甲氧酰基、乙氧酰基、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羟基、甲氧基、乙氧基等；(3)杂环甲氧基苯基或取代杂环甲氧基苯基杂环指常见的五员或六员杂环，如呋喃、噻吩、吡唑、咪唑、三氮唑、噁唑、噻唑、异噁唑、吡喃、吡啶、嘧啶、吗啉和哌啶等，优选六员杂环，特别优选吡啶或嘧啶，取代基可位于杂环的各个位置，可以是单取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4个碳原子的脂肪链，如甲基、乙基、三氟甲基、羟甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、异丙基和叔丁基等；b.卤素，如F、Cl、Br、I；c.吸电子基团或供电子基团，如硝基、氰基、氨甲酰基、N-甲基氨甲酰基、N-乙基氨甲酰基、N，N-二甲基氨甲酰基、N，N-二乙基氨甲酰基、甲氧酰基、乙氧酰基、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羟基、甲氧基、乙氧基等；(4)3’，4’-杂环稠和的苯基在苯基3，4-位的杂环可以是五员环，也可以是六员环；可以是脂肪杂环，也可以是芳香杂环，如1，3-二氧戊环，内酯环，内酰胺环，吡咯，咪唑，三氮唑，噁唑，噻唑，吡啶，嘧啶，吗啉和哌啶等。优选五员环，特别优选1，3-二氧戊环和咪唑。杂环取代基可位于杂环的各个位置，可以是单取代，也可以是多取代。取代基指a.1-4个碳原子的脂肪链，如甲基、乙基、三氟甲基、羟甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、异丙基和叔丁基等；b.卤素，如F、Cl、Br、I；c.吸电子基团或供电子基团，如硝基、氰基、氨甲酰基、N-甲基氨甲酰基、N-乙基氨甲酰基、N，N-二甲基氨甲酰基、N，N-二乙基氨甲酰基、甲氧酰基、乙氧酰基、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羟基、甲氧基、乙氧基等；(5)3’，4’-杂环稠和的苄氧苯基在苄基3，4-位的杂环可以是五员环，也可以是六员环；可以是脂肪杂环，也可以是芳香杂环，如1，3-二氧戊环，内酯环，内酰胺环，吡咯，咪唑，三氮唑，噁唑，噻唑，吡啶，嘧啶，吗啉和哌啶等，优选五员环，特别优选1，3-二氧戊环和咪唑，杂环取代基可位于杂环的各个位置，可以是单取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4个碳原子的脂肪链，如甲基、乙基、三氟甲基、羟甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、异丙基和叔丁基等；b.卤素，如F、Cl、Br、I；c.吸电子基团或供电子基团，如硝基、氰基、氨甲酰基、N-甲基氨甲酰基、N-乙基氨甲酰基、N，N-二甲基氨甲酰基、N，N-二乙基氨甲酰基、甲氧酰基、乙氧酰基、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羟基、甲氧基、乙氧基等。
本发明化合物的盐类包括盐酸盐、氢溴酸盐、甲烷磺酸盐、乙酸盐、草酸盐、马来酸盐、富马酸盐、葡萄酸盐、酒石酸盐、乳酸盐和丁二酸盐等常见药用盐类。
本发明化合物的制备方法如下1.中间体的制备根据目标化合物所带基团的不同，由Y为不同基团的取代苯制得1-(2-取代苯基-2，3-环氧丙基)-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸盐或1-(2-取代苯基-2，3-环氧丁基)-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸盐环中间体。
2.目标化合物的制备中间体1-(2-取代苯基-2，3-环氧丙基)-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸盐与不同R基团的单取代哌嗪化合物在碱性条件下发生开环反应就生成X为H、M为羟基的本发明化合物；中间体1-(2-取代苯基-2，3-环氧丁基)-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸盐与不同R基团的单取代哌嗪化合物在碱性条件下发生开环反应就生成X为甲基、M为羟基的本发明化合物；M为羟基的本发明化合物再与酰氯或酸酐反应就得到相应的酯类。
以Y为2，4-二氟基、X为H为例，制备方法如下1.中间体1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-环氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸盐(III)的制备(参见孙青龚和刘超美等第二军医大学学报，2001；22(9)871) 以间二氟苯为起始原料，在三氯化铝的催化作用下，以摩尔比1∶1与氯乙酰氯在二氯甲烷中于50～55℃发生傅-克(Friedel Crafts)反应，搅拌反应8小时形成2-氯-2′，4′-二氟苯乙酮(IV)；(IV)在甲苯中与三唑反应24小时形成2′，4′-二氟-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)苯乙酮(V)；(V)与硫伊立德(ylid)试剂三甲基氧硫碘化物在60℃发生羰基的亲核加成反应，形成环氧化物，它可与甲烷磺酸成盐，得中间体1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-环氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸盐(III)。
2.目标化合物1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-取代哌嗪-2-丙醇的制备 中间体环氧化物(III)与单取代哌嗪化合物在碱性条件下发生开环反应即生成哌嗪取代的三唑醇类化合物(I)。
3.盐类的制备本发明3-取代哌嗪三唑醇类化合物盐类的制备方法是将上述制备的3-取代哌嗪三唑醇类抗真菌化合物(I)与等摩尔的酸反应1～2小时，反应结束后，浓缩反应液得沉淀，过滤就得到相应的盐类。
表1列出的是本发明中部分优选目标化合物的结构、产率、熔点和分子式。
本发明的制备方法将结合实施例进一步详细叙述。
表1部分优选化合物的化学结构、产率、熔点(a，b)和分子式 化合物 R基团 产率 熔点 分子式编号 (％) (℃)12-呋喃甲酰基84.4 123-5C20H21F2N5O322-噻吩甲酰基79.9 105-7C20H21F2N5O2S32-吡啶甲酰基76.6 144-6C21H22F2N6O243-吡啶甲酰基83.2 132-3C21H22F2N6O254-吡啶甲酰基81.8 156-8C21H22F2N6O266-喹啉甲酰基64.2 134-6C25H24F2N6O275-NO2-2-呋喃甲酰基 90.1 118-9C20H20F2N6O585-Cl-2-噻吩甲酰基 59.9 107-9C20H20ClF2N5O2S92-噻吩乙酰基49.2 107-8C21H23F2N5O2810 2-吡啶乙酰基90.5 154-6C22H24F2N6O211 4-吡啶乙酰基76.9 138-40 C22H24F2N6O212 1-(1，2，4-三唑-1-基)乙酰基 79.6 121-2C19H22F2N8O213 1-咪唑乙酰基88.2 123-4C20H23F2N7O214 4-(2-呋喃甲氧基)苯基48.5 96-8 C26H27F2N5O315 4-(5-NO2-2-呋喃甲氧基)苯基 55.6 115-7C26H26F2N6O516 4-(2-吡啶甲氧基)苯基52.2 142-4C27H28F2N6O217 4-(3-吡啶甲氧基)苯基62.5 90-2 C27H28F2N6O218 4-(4-吡啶甲氧基)苯基56.5 122-4C27H28F2N6O219 4-(2-嘧啶甲氧基)苯基63.1 114-7C26H27F2N7O220 4-(4-嘧啶甲氧基)苯基67.1 123-4C26H27F2N7O221 4-(4-CF3-2-吡啶甲氧基)苯基 80.1 117-8C28H27F5N6O222 4-(5-CF3-2-吡啶甲氧基)苯基 59.2 125-8C28H27F5N6O223 4-(6-CF3-3-吡啶甲氧基)苯基 69.7 121-3C28H27F5N6O224 4-(2-CF3-4-吡啶甲氧基)苯基 80.1 166-8C28H27F5N6O225 4-(4-F-2-吡啶甲氧基)苯基57.3 115-6C27H27F3N6O226 4-(5-Cl-2-吡啶甲氧基)苯基 60.3 109-10 C27H27ClF2N6O227 4-(3-CN-2-吡啶甲氧基)苯基 64.1 111-3C28H27F2N7O2
28 4-(5-Cl-3-吡啶甲氧基)苯基 76.2 107-9 C27H27ClF2N6O229 4-(4-OCH3-2-吡啶甲氧基)苯基 67.2 93-5 C28H30F2N6O330 4-(4-喹啉甲氧基)苯基 82.1 136-8 C31H30F2N6O231 4-(6-喹啉甲氧基)苯基 79.9 141-3 C31H30F2N6O232 4-(5-异噁唑甲氧基)苯基 84.8 132-4 C25H30F2N6O333 4-(苯并[d]1，3-二氧戊环-5-甲氧基)苯67.8 145-7 C29H29F2N5O4基34 4-(苯并[d]噻唑-5-甲氧基)苯基 74.7 152-4 C29H28F2N6O2S35 4-(苯并[d]噁唑-5-甲氧基)苯基 71.8 163-5 C29H28F2N6O336 4-(1-异丙基苯并[d]咪唑-5-甲氧基)苯基 58.3 138-9 C32H35F2N7O237 4-(1-乙基苯并[d]三氮唑-5-甲氧基)苯基 60.6 126-8 C30H32F2N8O2(a).C，H，N三种元素分析的测定值与理论计算值相差小于0.3％。
(b).温度计未校正。
药理实验表明本发明化合物具有较强的抗真菌活性，抗菌谱广，且对临床耐氟康唑菌株有效，因此可用于制备抗真菌药物。
具体实施例方式
实施例11-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[4-(2-呋喃甲酰基)哌嗪]-2-丙醇(表1中化合物1)的制备取1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-环氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸盐(III)1.65g(5mmol)，2-巯基吡啶1.08g(6mmol)，无水碳酸钾2.07g(15mmol)和相转移催化剂十六烷基三甲基溴化铵0.1g，二甲基甲酰胺30ml，在90-95℃油浴中加热搅拌反应8小时。冷却，在搅拌下加入50ml水中，乙酸乙酯提取(3×70ml)，水洗(30ml×3)，无水Na2SO4干燥，回收溶剂，用无水乙醇重结晶得白色固体1.76g，熔点123～5℃，产率84.4％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ，ppm8.24(1H，s，triazole C3-H)，7.82(1H，s，triazoleC5-H)，6.77～8.30(6H，m，Ar-H)，5.10(1H，s，OH)，4.49-4.58(2H，AB体系，triazole-CH2)，3.33-3.35(4H，m，N(CH2)4N)，3.04-3.08(1H，d，J＝13.6Hz，-N(CH2)4N-CHa)，2.66-2.72(1H，d，J＝13.6Hz，-N(CH2)4N-CHb)，2.32-2.34(4H，m，N(CH2)4N)IR(cm-1，KBr)3341，3057，2970，2806，1615，1588，1559，1272，1102，1060实施例21-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[4-(2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酰基)哌嗪]-2-丙醇(表1中化合物12)的制备取1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-环氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸盐(III)1.65g(5mmol)，2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酰哌嗪1.17g(6mmol)，无水碳酸钾2.07g(0.015mol)和相转移催化剂十六烷基三甲基溴化铵0.1g，二甲基甲酰胺25ml，在90-95℃油浴中加热搅拌反应8小时。冷却，在搅拌下加入50ml水中，用乙酸乙酯提取(60ml×3)，合并提取液，水洗(25ml×3)，无水Na2SO4干燥，过滤，回收溶剂后得粗品，将粗品进行柱层析，用CHCl3∶C2H5OH＝9∶1洗脱，得淡黄色固体1.72g，熔点121～2℃，产率79.6％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ，ppm8.12-8.15(2H，m，triazole C3-H)，7.75-7.78(2H，m，triazole C5-H)，6.75～7.58(3H，m，Ar-H)，5.20(1H，s，OH)，4.56-4.64(2H，AB体系，triazole-CH2)，3.60-3.68(4H，m，N(CH2)4N)，3.17-3.20(1H，d，J＝13.2Hz，-N(CH2)4N-CHa)，2.80-2.84(1H，d，J＝13.2Hz，-N(CH2)4N-CHb)，2.60-2.66(4H，m，N(CH2)4N)IR(cm-1，KBr)3234，3077，2975，2891，2806，1612，1564，1273，1249，1060实施例31-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[4-(4-(2-吡啶甲氧基)苯基)哌嗪]-2-丙醇(表1中化合物16)的制备取1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-环氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸盐(III)1.65g(5mmol)，4-(4-(2-吡啶甲氧基)苯基)哌嗪1.62g(6mmol)，无水碳酸钾2.07g(0.15mol)和相转移催化剂十六烷基三甲基溴化铵0.1g，二甲基甲酰胺25ml，在90-95℃油浴中加热搅拌反应8小时。冷却，在搅拌下加入50ml水中，用乙酸乙酯提取(60ml×3)，合并提取液，水洗(25ml×3)，无水Na2SO4干燥，过滤，回收溶剂后得粗品，将粗品进行柱层析，用CHCl3∶C2H5OH＝9∶1洗脱，得黄色固体1.32g，熔点142～4℃，产率52.2％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ，ppm8.29(1H，s，triazole C3-H)，7.75(1H，s，triazoleC5-H)，6.80～8.56(11H，m，Ar-H)，5.62(1H，s，OH)，5.08(2H，s，-OCH2-)，4.59(2H，s，triazole-CH2)，2.90-2.94(1H，d，J＝13.6Hz，-N(CH2)4N-CHa)，2.87-2.90(4H，m，N(CH2)4N)，2.71-2.75(1H，d，J＝13.6Hz，-N(CH2)4N-CHb)，2.50-2.56(4H，m，N(CH2)4N)IR(cm-1，KBr)3421，3137，2806，2230，2180，1621，1580，1561，1174，1024实施例41-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[4-(4-(3-吡啶甲氧基)苯基)哌嗪]-2-丙醇(表1中化合物17)的制备取1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-环氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸盐(III)1.65g(5mmol)，4-(4-(3-吡啶甲氧基)苯基)哌嗪1.62g(6mmol)，无水碳酸钾2.07g(0.15mol)和相转移催化剂十六烷基三甲基溴化铵0.1g，二甲基甲酰胺25ml，在90-95℃油浴中加热搅拌反应8小时。冷却，在搅拌下加入50ml水中，用乙酸乙酯提取(60ml×3)，合并提取液，水洗(25ml×3)，无水Na2SO4干燥，过滤，回收溶剂后得粗品，粗品进行柱层析，用CHCl3∶C2H5OH＝9∶1洗脱，得黄色固体1.58g，熔点90～2℃，产率62.5％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ，ppm8.28(1H，s，triazole C3-H)，7.74(1H，s，triazoleC5-H)，6.80～8.63(11H，m，Ar-H)，5.57(1H，s，OH)，5.08(2H，s，-OCH2-)，4.60(2H，s，triazole-CH2)，2.91-2.95(1H，d，J＝13.6Hz，-N(CH2)4N-CHa)，2.87-2.90(4H，m，N(CH2)4N)，2.72-2.76(1H，d，J＝13.6Hz，-N(CH2)4N-CHb)，2.51-2.56(4H，m，N(CH2)4N)IR(cm-1，KBr)3432，3154，3118，2941，1617，1610，1551，1301，1271，1015
实施例51-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[4-(4-(4-吡啶甲氧基)苯基)哌嗪]-2-丙醇(表1中化合物18)的制备取1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-环氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸盐(III)1.65g(5mmol)，4-(4-(4-吡啶甲氧基)苯基)哌嗪1.62g(6mmol)，无水碳酸钾2.07g(0.15mol)和相转移催化剂十六烷基三甲基溴化铵0.1g，二甲基甲酰胺25ml，在90-95℃油浴中加热搅拌反应8小时。冷却，在搅拌下加入50ml水中，用乙酸乙酯提取(60ml×3)，合并提取液，水洗(25ml×3)，无水Na2SO4干燥，过滤，回收溶剂后得粗品，粗品进行柱层析，用CHCl3∶C2H5OH＝9∶1洗脱，得黄色固体1.43g，熔点122～4℃，产率56.5％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ，ppm8.28(1H，s，triazole C3-H)，7.75(1H，s，triazoleC5-H)，6.80～8.56(11H，m，Ar-H)，5.62(1H，s，OH)，5.08(2H，s，-OCH2-)，4.59(2H，s，triazole-CH2)，2.89-2.93(1H，d，J＝13.6Hz，-N(CH2)4N-CHa)，2.87-2.89(4H，m，N(CH2)4N)，2.71-2.75(1H，d，J＝13.6Hz，-N(CH2)4N-CHb)，2.50-2.57(4H，m，N(CH2)4N)IR(cm-1，KBr)3431，3154，3020，2838，1621，1598，1574，1428，1138，1063实施例61-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[4-(4-(苯并[d]1，3-二氧戊环-5-甲氧基)苯基哌嗪)]-2-丙醇(表1中化合物33)的制备取1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-环氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸盐(III)1.65g(5mmol)，4-(4-(苯并[d]1，3-二氧戊环-5-甲氧基)苯基哌嗪1.87g(6mmol)，无水碳酸钾2.07g(0.15mol)和相转移催化剂十六烷基三甲基溴化铵0.1g，二甲基甲酰胺25ml，在90-95℃油浴中加热搅拌反应8小时。冷却，在搅拌下加入50ml水中，用乙酸乙酯提取(60ml×3)，合并提取液，水洗(25ml×3)，无水Na2SO4干燥，过滤，回收溶剂后得粗品，粗品进行柱层析，用CHCl3∶C2H5OH＝9∶1洗脱，得白色固体1.86g，熔点145～7℃，产率67.8％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ，ppm8.13(1H，s，triazole C3-H)，7.79(1H，s，triazoleC5-H)，6.77～7.61(10H，m，Ar-H)，5.94(1H，s，-OCH2O-)，5.19(1H，s，OH)，4.89(2H，s，-OCH2-)，4.50-4.59(2H，AB体系，triazole-CH2)，3.10-3.14(1H，d，J＝13.2Hz，-N(CH2)4N-CHa)，2.94-2.97(4H，m，N(CH2)4N)，2.72-2.76(1H，d，J＝13.2Hz，-N(CH2)4N-CHb)，2.51-2.53(4H，m，N(CH2)4N)IR(cm-1，KBr)3442，3346，3178，2930，1618，1592，1564，1440，1235，1088实施例71-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[4-(4-(3-吡啶甲氧基)苯基)哌嗪]-2-丙醇(表1中化合物18)富马酸盐的制备取1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[4-(4-(3-吡啶甲氧基)苯基)哌嗪]-丙醇-2(表1中化合物18)2.53g(5mmol)，富马酸0.58g(5mmol)，加入25ml甲醇，搅拌回流1小时，放冷，加入25ml二氯甲烷，放置，过滤出固体，用无水乙醇重结晶得白色固体2.73g，产率87.8％。
其余目标化合物可重复上述实施例的操作步骤，以不同的单取代哌嗪在碱性条件下与关键中间体环氧化物(III)反应，就可得到各种3-取代哌嗪三唑醇类化合物及其盐类。实施例中所用试剂均为市售分析纯。
本发明合成的1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-取代哌嗪-2-丙醇类化合物及其盐类具有抗真菌作用，其抑菌实验方法和结果如下采用美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)推荐的标准化抗真菌敏感性实验方法测试其体外抗真菌活性，以目标化合物抑制所选真菌80％生长的浓度作为判断终点(MIC80，参考Antimicrob Agents Chemother 45(9)2420，2001)。
(一)、材料与方法1、实验真菌菌株本发明选用两种ATCC标准株和六种临床株，ATCC标准株由上海长征医院菌种保存中心提供，临床株由上海长海医院真菌室提供，并经形态学和生化学鉴定。
选用的8种真菌包括4种深部真菌，1种浅表真菌，2种皮下真菌和薰烟曲霉菌。
深部真菌白色念珠菌(Candida albicans)ATCC76615(简称Ca.)新生隐球菌(Cryptococcus neoformans)ATCC32609(简称Cn.)热带念珠菌(Candida tropicalis)(简称Ct.)近平滑念珠菌(Candida parapsilosis)(简称Cp.)浅表真菌红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)(简称Tr.)皮下真菌申克氏孢子丝菌(Sporothrix schenckii)(简称Ss.)裴氏着色真菌(Fonsecaea pedrosoi)(简称Fp.)薰烟曲霉菌(Aspergillus fumigatus)(简称Af.)2、培养液RPMI1640培养液RMPI1640(Gibco BRL)10g，NaHCO32.0g，吗啡啉丙磺酸(morpholinepropanesulfonic acid，MOPS)(Sigma)34.5g(0.165M)加三蒸水900ml溶解，1N NaOH调pH至7.0(25℃)，定溶至1000ml，滤过消毒，4℃保存。
沙堡葡萄糖琼脂培养基(SDA)蛋白胨10g，葡萄糖40g，琼脂18g，加三蒸水900ml溶解，加入2mg/ml氯霉素水溶液50ml，调整pH至7.0，定溶至1000ml，高压灭菌后4℃保存。
YEPD培养液酵母浸膏10g，蛋白胨20g，葡萄糖20g，加三蒸水900ml溶解，加入2mg/ml氯霉素水溶液50ml，定溶至1000ml，高压灭菌后4℃保存。
3、实验方法菌液取酵母菌接种至1mlYEPD培养液，35℃培养16h，以RPMI1640培养液调整菌液浓度至1×103～5×103个/ml；取霉菌接种至SDA斜面，35℃培养一周，以RPMI1640培养液调整孢子浓度至1×103～5×103个/ml。
药液受试药物和对照药氟康唑及酮康唑分别用二甲基亚砜配成6.4g/L溶液，实验前用RPMI1640培养液稀释成640mg/L。
药敏板取无菌96孔板，于每排1号孔加RPMI1640培养液100μl作空白对照；3～12号孔各加新鲜配制的菌液100μl；2号孔分别加菌液190μl和受试化合物溶液10μl；2～11号孔10级倍比稀释；12号孔不含药物，作阳性对照。
二、MIC值判定念珠菌、新生隐球菌及丝状菌分别于35℃培养24h、72h和一周后，用酶标分析仪于630nm测各孔OD值。与阳性对照孔比，以OD值下降80％以上的最低浓度孔中的药物浓度为MIC80(真菌生长80％被抑制时的浓度)。
当药物的MIC80值超过测定浓度范围时，按以下方法进行统计MIC80值高于最高浓度64mg/L时，记为“＞64mg/L”；MIC80值为最低浓度或在最低浓度以下时，不作区别，均记为“≤0.125mg/L”。
上述实验均平行操作2到3次，当MIC80值能准确重复或只差一个浓度时才被接受，并以较高浓度作为MIC80值；当MIC80值相差两个浓度以上时，则需重新实验，直到符合要求为止。结果见表2。
表2目标化合物的体外抗真菌活性MIC80(μg/ml)表1中化合物 Ca.Cn. Ct. Cp.Ss. Fp. Tr. Af.
编号1 ≤0.1251 2 16 ＞64 ≤0.125 64 83 ≤0.1252 ≤0.125 ≤0.125＞64 ≤0.125 2 45 0.125 1 2 16 ＞64 ≤0.125 64 812 ≤0.125≤0.125 ≤0.125 ≤0.12516≤0.125 32 1613 ≤0.1250.250.5 16 16≤0.125 ＞643216 ≤0.125≤0.125 ≤0.125 ≤0.125＞64 ≤0.125 4 6417 ≤0.125≤0.125 ≤0.125 ≤0.125＞64 ≤0.125 16 6418 ≤0.125≤0.125 ≤0.125 0.25 640.258 833 ≤0.1251 ≤0.125 ≤0.125＞64 ≤0.125 4 8酮康唑 ≤0.1250.5 ≤0.125 ≤0.1254 ≤0.125 ≤0.125 8氟康唑 0.516 0.5 0.5＞64 2 8 ＞64上述实验结果表明本发明杂环三唑醇类化合物及其盐类有较好的抗真菌活性，大多数化合物对所选真菌的体外抑制活性均强于氟康唑，与酮康唑相当或更优，说明本发明化合物及其盐类可用于制备治疗真菌感染的药物。
权利要求
1.一种 3-取代哌嗪三氮唑醇类抗真菌化合物，其化学结构通式为 其中X 代表氢或甲基；M 代表羟基或酯基；这里的酯基指具有1～4个碳原子的直链或支链酯基，选自甲酸酯基、乙酸酯基、丙酸酯基、异丙酸酯基；Y 代表芳环上的各种取代基，取代位置可位于邻、间、对位，可以是单取代，也可以是多取代，取代基指(1) 卤素，选自F、Cl、Br、I；(2) 具有1～4个碳原子的脂肪链，选自甲基、乙基、三氟甲基、叔丁基；R代表(1)杂环甲酰基或乙酰基、取代杂环甲酰基或乙酰基杂环指五员或六员杂环选自呋喃、噻吩、吡唑、咪唑、三氮唑、噁唑、噻唑、异噁唑、吡喃、吡啶、嘧啶、吗啉和哌啶，杂环上取代基可位于杂环的各个位置，可以是单取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4个碳原子的脂肪链，选自甲基、乙基、三氟甲基、羟甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、异丙基和叔丁基；b.卤素，选自F、Cl、Br、I；c.吸电子基团或供电子基团，选自硝基、氰基、氨甲酰基、N-甲基氨甲酰基、N-乙基氨甲酰基、N，N-二甲基氨甲酰基、N，N-二乙基氨甲酰基、甲氧酰基、乙氧酰基、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羟基、甲氧基、乙氧基；(2)杂环甲基或取代杂环甲基杂环指五员或六员杂环，选自呋喃、噻吩、吡唑、咪唑、三氮唑、噁唑、噻唑、异噁唑、吡喃、吡啶、嘧啶、吗啉和哌啶，杂环上取代基可位于杂环的各个位置，可以是单取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4个碳原子的脂肪链，选自甲基、乙基、三氟甲基、羟甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、异丙基和叔丁基；b.卤素，选自F、Cl、Br、I；c.吸电子基团或供电子基团，选自硝基、氰基、氨甲酰基、N-甲基氨甲酰基、N-乙基氨甲酰基、N，N-二甲基氨甲酰基、N，N-二乙基氨甲酰基、甲氧酰基、乙氧酰基、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羟基、甲氧基、乙氧基；(3)杂环甲氧基苯基或取代杂环甲氧基苯基杂环指五员或六员杂环，选自呋喃、噻吩、吡唑、咪唑、三氮唑、噁唑、噻唑、异噁唑、吡喃、吡啶、嘧啶、吗啉和哌啶，杂环上取代基可位于杂环的各个位置，可以是单取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4个碳原子的脂肪链，选自甲基、乙基、三氟甲基、羟甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、异丙基和叔丁基；b.卤素，选自F、Cl、Br、I；c.吸电子基团或供电子基团，选自硝基、氰基、氨甲酰基、N-甲基氨甲酰基、N-乙基氨甲酰基、N，N-二甲基氨甲酰基、N，N-二乙基氨甲酰基、甲氧酰基、乙氧酰基、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羟基、甲氧基、乙氧基；(4)3’，4’-杂环稠和的苯基在苯基3，4-位的杂环可以是五员环，也可以是六员环；可以是脂肪杂环，也可以是芳香杂环，选自1，3-二氧戊环，内酯环，内酰胺环，吡咯，咪唑，三氮唑，噁唑，噻唑，吡啶，嘧啶，吗啉和哌啶，杂环取代基可位于杂环的各个位置，可以是单取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4个碳原子的脂肪链，选自甲基、乙基、三氟甲基、羟甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、异丙基和叔丁基；b.卤素，选自F、Cl、Br、I；c.吸电子基团或供电子基团，选自硝基、氰基、氨甲酰基、N-甲基氨甲酰基、N-乙基氨甲酰基、N，N-二甲基氨甲酰基、N，N-二乙基氨甲酰基、甲氧酰基、乙氧酰基、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羟基、甲氧基、乙氧基；(5)3’，4’-杂环稠和的苄氧苯基在苄基3，4-位的杂环可以是五员环，也可以是六员环；可以是脂肪杂环，也可以是芳香杂环，选自1，3-二氧戊环，内酯环，内酰胺环，吡咯，咪唑，三氮唑，噁唑，噻唑，吡啶，嘧啶，吗啉和哌啶，杂环取代基可位于杂环的各个位置，可以是单取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4个碳原子的脂肪链，选自甲基、乙基、三氟甲基、羟甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、异丙基和叔丁基；b.卤素，选自F、Cl、Br、I；c.吸电子基团或供电子基团，选自硝基、氰基、氨甲酰基、N-甲基氨甲酰基、N-乙基氨甲酰基、N，N-二甲基氨甲酰基、N，N-二乙基氨甲酰基、甲氧酰基、乙氧酰基、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羟基、甲氧基、乙氧基。
2.按权利要求1所述的3-取代哌嗪三唑醇类抗真菌化合物，其特征在于M、X、Y和R基团分别为(1)M为羟基，X为H，Y为2，4-二氟基，R为呋喃甲酰基；(2)M为羟基，X为甲基，Y为2，4-二氟基，R为4-吡啶甲酰基；(3)M为羟基，X为甲基，Y为2，4-二氟基，R为2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酰基；(4)M为羟基，X为H，Y为2，4-二氟基，R为苯并[d]噻唑-5-基；(5)M为羟基，X为H，Y为2，4-二氟基，R为4-(2-吡啶甲氧基)苯基；(6)M为羟基，X为H，Y为2，4-二氟基，R为4-(3-吡啶甲氧基)苯基；(7)M为羟基，X为H，Y为2，4-二氟基，R为4-(4-吡啶甲氧基)苯基；(8)M为羟基，X为甲基，Y为2，4-二氟基，R为4-(2-吡啶甲氧基)苯基；(9)M为羟基，X为甲基，Y为2，4-二氟基，R为4-(苯并[d]1，3-二氧戊环-5-甲氧基)苯基。
3.权利要求1或2所述的3-取代哌嗪三唑醇类化合物的盐类，选自该类化合物的盐酸盐、氢溴酸盐、甲烷磺酸盐、乙酸盐、草酸盐、马来酸盐、富马酸盐、葡萄酸盐、酒石酸盐、乳酸盐或丁二酸盐。
4.权利要求1或2或3所述的3-取代哌嗪三唑醇类抗真菌化合物或盐类在制备抗真菌药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及医药技术领域，是一种新型的3－取代哌嗪三氮唑醇类抗真菌化合物及其盐类，其化学结构通式如右式，其中X为氢或甲基；M为氢、羟基、酯基；Y为2，4－二氟基；R代表(1)杂环甲酰基或乙酰基、取代杂环甲酰基或乙酰基；(2)杂环甲基或取代杂环甲基；(3)杂环甲氧基苯基或取代杂环甲氧基苯基；(4)3’，4’－杂环稠和的苯基；(5)3’，4’－杂环稠和的苄氧苯基。取代基指a.1－4个碳原子的脂肪链，如甲基、乙基、三氟甲基、羟甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、异丙基和叔丁基；b.卤素，如F、Cl、Br、I；c.吸电子基团或供电子基团，如硝基、氰基、氨甲酰基、N－甲基氨甲酰基、N－乙基氨甲酰基、N，N－二甲基氨甲酰基、N，N－二乙基氨甲酰基、甲氧酰基、乙氧酰基、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羟基、甲氧基、乙氧基。取代基可以在杂环的各个位置，可以是单取代，也可以是多取代。该类化合物可与多种无机和有机酸成盐。本发明的3－取代哌嗪三唑醇类抗真菌化合物及其盐类显示出很强的抗真菌活性，可用于抗真菌药物的制备。
文档编号C07D407/12GK1557808SQ20041001618
公开日2004年12月29日 申请日期2004年2月10日 优先权日2004年2月10日
发明者刘超美, 何秋琴, 姜远英, 曹永兵, 梁爽, 门秀峰 申请人:中国人民解放军第二军医大学