用于抑制cdk和gsk的吡唑衍生物的制作方法

专利名称：：用于抑制cdk和gsk的吡唑衍生物的制作方法激酶(GSK)的激酶活性的吡唑化合物、此类化合物在治疗或预防由激酶介导的疾病状态或病症中的用途和具有激酶抑制或调节活性的新化合物。还提供了包含此类化合物的药物组合物和新的化学中间体。发明背景负责控制细胞内的多种信号传导过程的蛋白激酶构成了一个结构上相关的大的酶家族。(Hardie，G.和Hanks,S.(1995)TheProteinKinaseFactsBook.IandII.AcademicPress,SanDiego,CA)。激酶可以才艮据其砩酸化的底物(例如，蛋白质-酪氨酸、蛋白质-丝氨酸/苏氨酸、脂类等)而分成不同的家族。已经鉴定出了通常对应于各个激酶家族的序列模体(例如，Hanks,S.K.，Hunter,T"FASEBJ"9:576-596(1995);Knighton等人，Science,253:407-414(1991);Hiles等人，Cell,70:419-429(1992);Kunz等人，Cell,73:585-596(1993);Garcia-Bustos等人，EMBO丄，13:2352-2361(1994))。蛋白激酶可根据其调节机制来进行表征。这些机制包括，例如，自身磷酸化作用、通过其它激酶的转磷酸化作用、蛋白质-蛋白质交互作用、蛋白质-脂类交互作用和蛋白质-多核苷酸交互作用。一种蛋白激酶可能会受到一个以上机制的调节。激酶通过将磷^团添加至靶蛋白来调节许多不同的细胞过程，包括但不限于增殖、分化、细胞凋亡、运动性、转录、翻译和其它发信号过程。这些磷酸化事件起着调节或调控靶蛋白生物功能的分子ON/OFF开关的作用。靶蛋白响应各种细胞外信号(激素、神经递质、生长和分化因子等)、细胞周期事件、环境或营养胁迫等而发生磷酸化作用。合适的蛋白激酶在信号通路中的作用是激活或灭活(直接地或间接地)例如代谢酶、调节蛋白、受体、细胞骨架蛋白、离子通道或泵或转录因子。由蛋白质磷酸化作用的控制缺陷引起的不受控的信号已经涉及许多疾病，包括，例如炎症、癌、变态反应/哮喘、免疫系统的疾病和病症、中枢神经系统的疾病和病症，以及血管生成。细胞周期蛋白依赖性激酶真核细胞分裂的过程可被广义地分成称为Gl、S、G2和M的一系列连续的时相。已经证实，通过细胞周期不同时相的正确进程关键依赖于被称为细胞周期蛋白依赖性激酶(cdks)的蛋白质家族和称为细胞周期蛋白的不同组的其同源蛋白伙伴的空间和时间上的调控。Cdks是cdc2(也被称为cdkl)的同源丝氨酸-苏氨酸激酶蛋白质，其在序列依赖性背景的不同多肽的磷酸化作用中能够利用ATP作为底物。细胞周期蛋白是一个以包含大约100个氨基酸的同源区为特征的蛋白质家族，该同源区被称为"细胞周期蛋白盒"，其用于同特异性cdk伙伴蛋白质结合和定义选择性。各种cdks和细胞周期蛋白在整个细胞周期的表达水平、降解速率和活化水平的调节导致一系列cdk/细胞周期蛋白复合物的循环形成，其中cdks为酶促活化。这些复合物的形成经由不连续的细胞周期检查点控制传代，由此使细胞分裂的过程能够继续。在给定的细胞周期检查点不能满足必要的生物化学标准，即无法形成必需的cdk/细胞周期蛋白复合物，可导致细胞周期中止和/或细胞凋亡。异常的细胞增殖，如癌中所显示，常可归因于正确的细胞周期控制的缺失。因此抑制cdk酶活性提供了一种使异常分裂的细胞停止分裂和/或被杀死的方法。cdks和cdk复合物的多样性以及它们在介导细胞周期中的决定性角色，提供了基于所定义的生物化学理论来选择的广谱的潜在治疗靶标。从细胞周期的Gl期到S期的进程主要由cdk2、cdk3、cdk4和cdk6通过与D和E型细胞周期蛋白成员的结合而调节。D型细胞周期蛋白似乎有助于不通过Gl限制点进行传代，而cdk2/细胞周期蛋白E复合物是从Gl到S期转换的关键。随后通过S期和进入G2的进程被认为需要cdk2/细胞周期蛋白A复合物。有丝分裂，和触发它的G2到M期的转换，两者均受到cdkl及A和B型细胞周期蛋白复合物的调节。在Gl期，视网膜细胞瘤蛋白(Rb)和相关的袋状蛋白(pocketprotein)例如pl30，是cdk(2、4和6)/细胞周期蛋白复合物的底物。通过Gl的进程由于Rb和p130被cdk(4/6)/细胞周期蛋白-D复合物过度磷酸化从而失活而部分地促进。Rb和p130的过度磷酸化造成转录因子例如E2F的释放，并因此导致通过Gl和进入S期的进程所必需的基因，例如细胞周期蛋白E的基因的表达。细胞周期蛋白E的表达促进cdk2/细胞周期蛋白E复合物的形成，其通过Rb的进一步磷酸化作用而放大或维持E2F水平。cdk2/细胞周期蛋白E复合物也磷酸化其它DNA复制所需的蛋白质，例如NPAT，其涉及组蛋白生物合成。Gl的进程和Gl/S的转换也受到包含在cdk2/细胞周期蛋白E途径中的有丝分裂原刺激的Myc途径的调节。Cdk2还经由p21水平的p53调节与p53介导的DNA损伤应答途径有联系。p21为cdk2/细胞周期蛋白E的蛋白抑制剂，因此能够阻断或延迟Gl/S转换。cdk2/细胞周期蛋白E复合物因此可表示来自Rb、Myc和p53途径的生物化学刺激在一定程度上被整合的点。因此Cdk2和/或cdk2/细胞周期蛋白E疗靶点。cdk3在细胞周期中的确切角色并不清楚。目前为止还没有同源的细胞周期蛋白伙伴被鉴定，但是cdk3的显性负调节形式延迟Gl期细胞，因此暗示cdk3具有调节Gl/S转换的作用。虽然大多数的cdks参与细胞周期的调节，但有证据表明某些cdk家族成员参与了其它生物化学过程。以cdk5为例，它是神经元正确发育所必需的，而且也参与了几种神经元的蛋白质例如Tau、NUDE-1、synapsinl、DARPP32和Muncl8/SyntaxinlA复合物的裤酸化作用。神经元的cdk5通常通过与p35/p39蛋白质的结合而活化。然而，Cdk5活性可通过结合p25(一种p35的截短类型)来去调节。p35到p25的转化和随后cdk5活性的去调节可由局部缺血、兴奋性中毒和j3-淀粉样肽诱发。因而p25已经牵涉到神经变性性疾病例如阿尔茨海默病的发病机制，因此作为针对这些疾病的治疗靶点引起了人们的兴趣。Cdk7是一种具有cdc2CAK活性并且结合细胞周期蛋白H的核蛋白。Cdk7已被鉴定为TFIIH转录复合物的成分，其具有RNA聚合酶II的C-末端结构域(CTD)活性。这和由Tat介导的生物化学途径的HIV-1转录调节有关。Cdk8结合细胞周期蛋白C并参与RNA聚合酶II的CTD的磷酸化作用。同样地，cdk9/细胞周期蛋白-Tl复合物(P-TEFb复合物)参与RNA聚合酶II对延伸的控制。HIV-1基因组通过病毒反式作用因子Tat经由其与细胞周期蛋白Tl的交互作用的转录活化也需要PTEF-b。因此cdk7、cdk8、cdk9和P-TEFb复合物是抗病毒治疗的潜在靼点。在分子水平上，cdk/细胞周期蛋白复合物活性的介导需要一系列刺激性和抑制性的磷酸化或去磷酸化事件。Cdk磷酸化作用由一组cdk活化激酶(CAK)和/或诸如weel、Mytl和Mikl的激酶来完成。去磷酸化作用由磷酸酯酶例如cdc25(a&c)、pp2a或KAP来完成。Cdk/细胞周期蛋白复合物的活性可进一步由两个家族的内源性细胞蛋白质抑制剂调节Kip/Cip家族或INK家族。INK蛋白特异性地结合cdk4和cdk6。P16i^(也被称为MTS1)是潜在的肿瘤抑制基因，其在大量原发癌中发生突变或缺失。Kip/Cip家族包含诸如p21Ciplwafl、p27Kipl和p57叫2等蛋白质。如先前所讨论的，p21被p53诱导且能够灭活cdk2/细胞周期蛋白(E/A)和cdk4/细胞周期蛋白(Dl/D2/D3)复合物。在乳腺癌、结肠癌和前列腺癌中已经观察到非典型的低水平p27表达。相反，细胞周期蛋白E在实体瘤中的过表达显示与患者预后不良相关。细胞周期蛋白Dl的过表达与食道癌、乳腺癌、鳞状细胞癌和非小细胞肺癌相关。上面已概述了Cdks及其相关蛋白质在增殖细胞中协调和驱动细胞周期的关键性角色。还描述了一些其中cdks起关键作用的生化途径。因此，开发一种采用靶向一类cdks或特定cdks的治疗法来治疗增殖疾病如癌症的单一疗法可能是非常需要的。还可以考虑将cdk抑制剂用于治疗其它病症例如病毒感染、自身免疫疾病和神经变性疾病。当与现存的或新的治疗剂组合治疗时，靶向Cdk的治疗在前述疾病的治疗中也可提供临床益处。以Cdk为靶点的抗癌治疗可能具有优于多种现有抗肿瘤剂的优点，因为它们不与DNA直接作用，因此降低了继发肿瘤发展的危险。糖原合成酶激酶糖原合成酶激酶-3(GSK3)是一种丝氨酸-苏氨酸激酶，在人类中以两种广泛表达的同种型存在(GSK3a&pGSK3p)。GSK3参与胚胎发育、蛋白质合成、细胞增殖、细胞分化、微管动力学、细胞运动性和细胞凋亡。因而GSK3涉及疾病状态的进程，例如糖尿病、癌、阿尔茨海默病、中风、癫痫、运动神经元疾病和/或头部外伤。系统发育的GSK3与细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)密切相关。被GSK3识别的肽底物共有序列为(Ser/Thr)-X-X-X-(pSer/pThr)，其中X为任意氨基酸(在(n+l)、(n+2)、(n+3)位)，pSer和pThr分别是磷酸化丝氨酸和磷酸化苏氨酸(n+4)。GSK3在(n)位磷酸化第一个丝氨酸或苏氨酸。第(n+4)位的磷酸-丝氨酸或磷酸-苏氨酸是启动GSK3以得到最大底物转换所必需的。GSK3a在Ser21，或GSK3j3在Ser9的磷酸化引起GSK3的抑制作用。突变和肽竟争研究已经引出了GSK3磷酸化的N末端通过自动抑制机制能够与磷酸化的肽底物(S/TXXXpS/pT)竟争的模型。也有资料提出GSK3a和GSKp可以分别由酪氨酸279和216的磷酸化作用进行精细地调节。这些残基向Phe的突变引起体内激酶活性的降低。GSK3卩的X射线晶体结构有助于揭示GSK3激活和调节的所有方面。GSK3构了哺乳动物胰岛素应答途径的一部分且能够磷酸化和因此灭活糖原合成酶。由此，通过抑制GSK3而增量调节糖原合成酶活性并由此增量调节糖原合成已被视为对抗II型或非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)的可能手段，该病症是一种其中机体组织变得对胰岛素刺激有耐受性的病症。肝、脂肪或肌肉组织中的细胞对胰岛素的应答被结合于细胞外胰岛素受体的胰岛素触发。它造成胰岛素受体底物(IRS)蛋白质的磷酸化和随后向细胞膜的募集。IRS蛋白质的进一步磷酸化启动了磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)向细胞膜的聚集，其能够释放出第二信使磷脂酰肌醇3，4，5-三磷酸。它促进3-肌醇磷脂依赖性蛋白质激酶l(PDKl)和蛋白激酶B(PKB或Akt)在膜上的共定位，在那里PDK1激活PKB。PKB能分别通过Ser9或ser21的磷酸化来磷酸化并借此抑制GSK3al或GSKP。GSK3的抑制接着触发糖原合成酶活性的上调。能抑制GSK3的治疗剂因此能够诱发类似于在胰岛素刺激中观察到的那些细胞应答。GSK3的另一个体内底物是真核细胞蛋白质合成起始因子2B(elF2B)。elF2B通过磷酸化而失活，因此能够抑制蛋白质生物合成。因此，GSK3的抑制，例如通过"哺乳动物雷帕霉素靶蛋白"(mTOR)的失活，可上调蛋白质生物合成。最后，有一些通过促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)路径，使GSK3被激酶例如促分裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶l(MAPKAP-Kl或RSK)磷酸化而调节GSK3活性的证据。这些资料提示GSK3活性可受到细胞分裂、胰乌素及氨基酸刺激的调控。已知GSK3p也是脊推动物Wnt信号途径中的一种重要成分。已经证实这条生物化学途径对于正常胚胎发育#重要且可调节正常组织中的细胞增殖。GSK3对于Wnt刺激的应答是被抑制。这可导致GSK3底物例如Axin、腺瘤性结肠息肉病(APC)的基因产物和p-连环蛋白的去磷酸化。Wnt途径的异常调节与许多癌有关。APC和/或P-连环蛋白中的突变常见于结肠直肠癌和其它的肿瘤中。p-连环蛋白也已显示出在细胞附着中的重要性。因此GSK3也可在一定程度上调节细胞附着过程。除了已描述的生化途径外，也有GSK3通过细胞周期蛋白Dl的磷酸化来参与细胞分裂的调节、参与转录因子例如c-Jun、CCAAT/增强子结合蛋白a(C/EBPa)、c-Myc和/或其它底物如激活T细胞核因子(NFATc)、热休克因子-l(HSF-l)和c-AMP应答元件结合蛋白(CREB)的磷酸化的资料。GSK3还显示出在调节细胞凋亡中起作用，虽然有组织特异性。GSK3经由促细胞凋亡机理在调节细胞凋亡中的作用可能与其中可发生神经元细胞凋亡的医学病症密切相关。这些病症的例子是头部外伤、中风、癫痫、阿尔茨海默病和运动神经元疾病、进行性核上性麻痹、皮质基底核变性和皮克氏病。在体外已经证实GSK3能够过度磷酸化微管体相关蛋白Tau。Tau的过度磷酸化破坏了它与微管的正常结合，而且可导致细胞内Tau微丝的形成。据信这些微丝的不断蓄积可最终导致神经元功能障碍和变性。因此通过抑制GSK3来抑制Tau的磷酸化可提供一种限制和/或预防神经变性效应的方法。弥漫型大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞周期的进程是由细胞周期蛋白、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)和作为细胞周期负调控蛋白的CDK抑制因子(CDKi)的联合作用来调控的。p27KIPl是细胞周期调控中关键的CDKi,其降解是G1/S的转换所必需的。尽管在增殖的淋巴细胞中缺乏p27KIPl的表达，但已经报道了一些侵袭性B细胞淋巴瘤显示出反常的p27KIPl染色。在此类型的淋巴瘤中发现了p27KIPl异常的高表达。在单变量及多变量分析中，这些发现的临床相关性分析显示，在此类型肿瘤中高水平的p27KIPl的表达是不良的预后指标。这些结果显示弥漫型大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中有异常的p27KIPl表达，具有不良的临床特征，提示通过与其它细胞周期调节因子蛋白的交互作用可导致该异常的p27KIPl蛋白质失去功能。(Br.J.Cancer.1999Jul;80(9):1427-34.p27KIPl在弥漫型大B细胞淋巴瘤中异常表达并且与不良的临床结果有关。SaezA，SanchezE，Sanchez-BeatoM，CruzMA，ChaconI，MunozE，CamachoFI，Martinez-MonteroJC，MollejoM，GarciaJF，PirisMA.DepartmentofPathology,VirgendelaSaludHospital,Toledo,Spain.)慢性淋巴性白血病B细胞慢性淋巴性白血病(CLL)是西半球最常见的白血病，且每年约有10,000个新病例被诊断(ParkerSL，TongT，BoldenS，WingoPA:Cancerstatistics,1997.Ca.Cancer.J.Clin.47:5，(1997))。相对于其它形式的白血病，CLL的总的预后良好，即使是最晚期的患者也有3年的存活中位值。与先前使用的以烷化剂为基础的治疗相比，加入氟达拉滨(fludarabine)作为CLL症状患者的起始治疗可导致较高比率的完全响应(27%对3%)和无进展的存活期(33对17个月)。虽然在治疗后达到临床上的完全响应是改进CLL存活率的最初步骤，但多数患者并未达到完全緩解或对氟达拉滨没有反应。再者，所有用氟达拉滨治疗的CLL患者最后都复发，因而使其只能用作单纯的舒緩性药剂(RaiKR，PetersonB，EliasL，ShepherdL，HinesJ，NelsonD，ChesonB，KolitzJ，SchifferCA:Arandomizedcomparisonoffludarabineandchlorambucilforpatientswithpreviouslyuntreatedchroniclymphocyticleukemia.ACALGBSWOG，CTG/NCI-CandECOGInter-GroupStudy.Blood88:141a,1996(摘要552，suppl1)。因此，如果想实现该疾病治疗的进一步改进，必需鉴定具有补充氟达拉滨的细胞毒性和去除由固有的CLL耐药性因子诱发的耐药性的新作用机制的新药剂。关于CLL患者对治疗反应较差和不良存活率的研究得最为广泛的标准预测因子是异常的p53功能，其以点突变或染色体17pl3缺失为特征。的确，事实上对烷化剂或嘌呤类似物的治疗没有反应已在那些具有异常p53功能的CLL患者的多种单一机构的病例系列中被证明。一种有能力克服与CLL的p53突变有关的抗药性的治疗剂的引入，将可能为成为该病治疗的重要进步。细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制剂福拉利多(flavopiridol)和CYC202在体外可诱发来自B细胞慢性淋巴性白血病(B-CLL)的恶性细胞的凋亡。福拉利多给药造成对caspase3活性的刺激和p27(kipl)的caspase-依赖性的分解，p27是一种细胞周期的负调控因子，其在B-CLL中过表达。(Blood.1998Nov15;92(10):3804-16Flavopiridolinducesapoptosisinchroniclymphocyticleukemiacellsviaactivationofcaspase-3withoutevidenceofbcl-2modulationordependenceonfunctionalp53.ByrdJC，ShinnC，WasdenkoJK，FuchsEJ,LehmanTA，NguyenPL,FlinnIW，DiehlLF，SausvilleE，GreverMR)。现有技术来自DuPont的WO02/34721公开了一种作为细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂的茚并l，2-c吡唑-4-酮。来自BristolMyersSquibb的WO01/81348描述了5-石克-、亚磺酰基-和磺酰基吡唑并[3，4-b-吡咬作为细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂的用途。同样来自BristolMyersSquibb的WO00/62778公开了一种蛋白酪氨酸激酶抑制剂。来自Cydacel的WO01/72745A1描述了2-取代的4-杂芳基-嘧咬及其制备、包含它们的药物组合物和其作为细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)抑制剂的用途以及其在治疗增殖性疾病例如癌症、白血病、4艮屑病等中的用途。来自Agouron的WO99/21845描述了一种用于抑制细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)，例如CDK1、CDK2、CDK4和CDK6的4-氨基噢唑衍生物。该发明还涉及包含该化合物的药物组合物的治疗或预防用途，和通过给予有效量的该化合物来治疗恶性病和其它疾病的方法。来自Agouron的WO01/53274公开了一种作为CDK激酶抑制剂的化合物，其可包含连接到含N杂环基团的被酰胺取代的苯环。WO01/98290(Pharmacia&Upjohn)公开了一种作为蛋白激酶抑制剂的3-氨基羰基-2-酰氨基-噻吩衍生物。来自Agouron的WO01/53268和WO01/02369公开了通过抑制蛋白激酶例如细胞周期蛋白依赖性激酶或酪氨酸激酶来调节或抑制细胞增殖的化合物。Agouron的化合物具有直接地或经由CH-CH或CH=N基团连接至吲唑环的3-位的芳基或杂芳基环。WO00/39108和WO02/00651(两者皆属于DuPont医药)描迷了杂环化合物，它是胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶，尤其是Xa因子和凝血酶的抑制剂。据称该化合物可用作抗凝血剂或用于预防血栓栓塞症。US2002/0091116(Zhu等人)、WO01/19798和WO01/64642各自公开了作为Xa因子抑制剂的不同组的杂环化合物。公开和例举了一些l-取代的吡唑甲酰胺类化合物。US6,127,382，WO01〃0668、WO00/68191、WO97/48672，WO97/1卯52和WO97/1卯62(均属于Allergan)各自公开了用于治疗包括癌在内的各种过度增殖疾病的具有类视色素活性的化合物。WO02/070510(Bayer)描述了一种用于治疗心血管疾病的氨基-二羧酸化合物。虽然一般性地提及了吡唑类，但在此份文件中没有吡唑的特定实施例。WO97/03071(KnollAGy^开了一种用于治疗中枢神经系统病症的杂环基-甲酰胺衍生物。一般性地提及了吡唑作为杂环基的例子，但是没有公开或例举具体的吡唑化合物。WO97/40017(NovoNordisk)描述了作为蛋白酪氨酸磷酸酶的调节剂的化合物。WO03/020217(Univ,Connecticut)公开了一种用于治疗神经病症的大;^(cannabinoid)受体调节剂吡唑3-酰胺。其中描述了(第15页)该化合物可被用于癌症化疗中，但并不清楚该化合物作为抗癌剂是否有效或其是否为了其它目的而给药。WO01/58869(BristolMyersSquibb)公开了可用于治疗多种疾病的大麻碱受体调节剂。所预见的主要用途为治疗呼吸疾病，尽管提及了癌的治疗。WO01/02385(AventisCropScience)公开了作为杀真菌剂的l-(会啉-4-基)-111-吡唑衍生物。其中公开了作为合成中间体的l-未取代的吡唑。WO2004/039795(Fujisawa)公开了作为栽脂蛋白B分泌抑制剂的包含1-取代的吡唑基团的酰胺。据称该化合物可用于治疗高血脂等病症。WO2004/000318(CellularGenomics)公开了作为激酶调节剂的各种氨基-取代的单环类。无吡唑类的例举化合物。我们早先的待批申请WO2005/012256，其在本申请的优先权日之后公开，公开了作为CDK和GSK-3激酶抑制剂的3,4-二取代的吡唑化合物。发明概述本发明提供具有细胞周期蛋白依赖性激酶抑制或调节活性以及糖原合成酶激酶-3(GSK3)抑制或调节活性的化合物，且预期其可用于预防或治疗由激酶介导的疾病状态或病症。因此，例如，可预见本发明化合物将可用于减轻或降低癌症的发生率。在第一方面，本发明提供了式(I)化合物或其盐、互变异构物、溶剂合物和N-氧化物;其中R1为2，6-二氯苯基；R2a和R2b均为氢；且R"为下式的基团其中W为C^烷基。术语"烷基"包括直链和支链烷基基团。Q—4烷基基团可为d、C2、C3或Q烷基基团。在Cw烷基基团组中可包括下列亚组.Cw烷基基团；.d.2烷基基团；NH.<:2.3烷基基团；和.C2—4烷基基团。一个具体的亚组是d.3烷基。具体的d—4烷基基团是甲基、乙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基。另一个c"烷基基团的亚组包括甲基、乙基、异丙基和正丙基。一个优选的基团是甲基。其它具体的R4基团是乙基和异丙基。因此，本发明的优选化合物是4-(2，6-二氯-苯曱酰氨基)-lH-吡唑-3-甲酸(l-甲磺酰基-哌啶-4-基)-酰胺。本发明还提供了.如本文所定义的式(I)化合物或其任何亚组或实例，其用于预防或治疗由细胞周期蛋白依赖性激酶或糖原合成酶激酶-3介导的疾病状态或病症。.一种预防或治疗由细胞周期蛋白依赖性激酶或糖原合成酶激酶-3介导的疾病状态或病症的方法，该方法包括将本文所定义的式(I)化合物或其任何亚组或实例给予需要它们的患者。导的疾病状态或病症发生率的方法，该方法包括将本文所定义的式(I)化合物或其任何亚组或实例给予需要它们的患者。.一种在哺乳动物中治疗包含或起因于异常细胞生长的疾病或病症的方法，该方法包括给予哺乳动物抑制异常细胞生长有效量的本文所定义的式(I)化合物或其任何亚组或实例。病症发生率的方法，该方法包括给予哺乳动物抑制异常细胞生长有效量的本文所定义的式(I)化合物或其任何亚组或实例。.一种在哺乳动物中治疗包含或起因于异常细胞生长的疾病或病症的方法，该方法包括将抑制cdk激酶(例如cdkl或cdk2)或糖原合成酶'激酶-3活性有效量的本文所定义的式(I)化合物或其任何亚组或实例给予哺乳动物。.一种在哺乳动物中減轻或降低包含或起因于异常细胞生长的疾病或病症发生率的方法，该方法包括将抑制cdk激酶(例如cdkl或cdk2)或糖原合成酶激酶-3活性有效量的本文所定义式(I)化合物或其任何亚组或实例给予哺乳动物。.一种抑制细胞周期蛋白依赖性激酶或糖原合成酶激酶-3的方法，该方法包括使激酶与本文所定义的式(I)的激酶抑制性化合物或其任何亚组或实例接触。.一种调节细胞过程(例如细胞分裂)的方法，该方法通过使用本文所定义的式(I)化合物或其任何亚组或实例抑制细胞周期蛋白依赖性激酶或糖原合成酶激酶-3的活性来实现。.本文所定义的式(I)化合物或其任何亚组或实例，其用于预防或治疗文中所定义的疾病状态。.本文所定义的式(I)化合物或其任何亚组或实例用于生产药物的用途，其中该药物用于任意一种或多种本文所定义的用途。.一种药物组合物，其包含本文所定义的式(I)化合物或其任何亚组或实例和可药用载体。.一种适于口服给药形式的药物组合物，其包含本文所定义的式(I)化合物或其任何亚组或实例和可药用载体。.用于药物的本文所定义的式(I)化合物或其任何亚组或实例。.一种诊断和治疗由细胞周期蛋白依赖性激酶介导的疾病状态或病症的方法，该方法包括(i)筛选患者以确定该患者正在患有或可能罹患的疾病治疗敏感；(ii)当患者的疾病或病症被指示是敏感的时，给予患者本文所定义的式(I)化合物或其任何亚组或实例。.本文所定义的式(I)化合物或其任何亚组或实例在生产用于治疗或预防患者的疾病状态或病症的药物中的用途，其中所述患者已被检查并确定为患有对用具有抗细胞周期蛋白依赖性激酶活性的化合物进行的治疗敏感的疾病状态或病症或者有罹患这些疾病或病症的风险。.用于抑制哺乳动物肿瘤生长的本文所定义的式(I)化合物或其任何亚组或实例。.用于抑制肺瘤细胞生长(如在哺乳动物中)的本文所定义的式(I)化合物或其^:何亚组或实例。.用于抑制哺乳动物(如人类)中肿瘤生长的方法，该方法包括给予哺乳动物(如人类)抑制肿瘤生长有效量的本文所定义的式(I)化合物或其任何亚组或实例。.用于抑制肿瘤细胞(诸如存在于哺乳动物例如人类中的肿瘤细胞)生长的方法，该方法包括^f吏肿瘤细胞接触抑制肿瘤生长有效量的本文所定义的式(I)化合物或其任何亚组或实例。.用于任何上面所述和本文别处所述的用途和方法的本文所定义的化合物。一般优选和定义在本申请中，除非上下文中另有指示，所指式(I)化合物包括如本文所定义的式(I)的所有亚组并且术语'亚组，包括在本文中所定义的所有优选选择、具体实施方案、实施例和具体化合物。任何在本文中所指式(I)也指在式(I)范围内的化合物的任何亚组和其任何优选选择和实施例，除非上下文另有指示。盐、溶剂合物、互变异构体、异构体、N-氧化物、酯、前药和同位素对式(I)化合物和其亚组的提及也包括其离子形式、盐、溶剂合物、异构体、互变异构体、N-氧化物、酯、前药、同位素和被保护的形式，例如下文所讨论的那些。优选其盐或互变异构体或异构体或N-氧化物或溶剂合物；更优选其盐或互变异构体或N-氧化物或溶剂合物。许多式(I)化合物可以以盐、例如酸加成盐的形式存在，或者在某些情况下可以以有机或无机碱的盐如羧酸盐、磺酸盐和磷酸盐的形式存在。所有这类盐均包括在本发明的范围内，对式(I)化合物的提及包括化合物的盐形式。可以用常规的化学方法如PharmaceuticalSalts:Properties,Selection,andUse,P.HeinrichStahl(编辑)，CamilleG.Wermuth(编辑)，ISBN:3-卯639-026-8，Hardcover,388页，2002年8月中所述的方法由含有碱性或酸性部分的母体化合物合成本发明的盐。一般而言，这类盐可以通过使这些化合物的游离酸或碱形式与适当的碱或酸在水中或在有机溶剂中或在二者的混合物中进行反应来制备；一般使用非水性介质如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。可以用各种酸(无机酸和有机酸)形成酸加成盐。酸加成盐的例子包括与选自下组的酸形成的盐乙酸、2，2-二氯乙酸、己二酸、海藻酸、抗坏血酸(例如L-抗坏血酸)、L-天冬氨酸、笨璜酸、苯甲酸、4-乙酰氨基苯甲酸、丁酸、(+)樟脑酸、樟脑-磺酸、(+)-(15)-樟脑-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、肉桂酸、柠檬酸、环己烷氨基磺酸、十二烷基疏酸、乙烷-l，2-二磺酸、乙磺酸、2-羟基乙磺酸、甲酸、富马酸、半乳糖二酸、2，5-二羟基苯曱酸、葡庚糖酸、D-葡糖酸、葡糖醛酸(例如D-葡糖醛酸)、谷氨酸(例如L-谷氨酸)、a-氧代戊二酸、乙醇酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、氢碘酸、羟乙磺酸、(+)-L-乳酸、(士)-DL-乳酸、乳糖酸、马来酸、苹果酸、(-)-L-苹果酸、丙二酸、(士)-DL-扁桃酸、甲磺酸、萘-2-磺酸、萘-l，5-二磺酸、l-羟基-2-萘甲酸、烟酸、硝酸、油酸、乳清酸、草酸、棕榈酸、朴姆酸、磷酸、丙酸、L-焦谷氨酸、水杨酸、4-氨基-水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、鞣酸、(+)-L-酒石酸、硫氰酸、对-甲苯磺酸、十一碳烯酸和戊酸，以及酰化的氩基酸和阳离子交换树脂。盐的一个具体的组由与乙酸、盐酸、氢碘酸、磷酸、硝酸、疏酸、柠檬酸、乳酸、琥珀酸、马来酸、苹果酸、鞋乙磺酸、富马酸、M酸、甲苯磺酸、曱磺酸(甲烷磺酸)、乙磺酸、萘磺酸、戊酸、乙酸、丙酸、丁酸、丙二酸、葡糖醛酸和乳糖酸形成的盐组成。盐的一个亚组由与盐酸、乙酸、甲磺酸、己二酸、L-天冬氨酸和DL-乳酸形成的盐组成。盐的另一个亚组由乙酸盐、曱磺酸盐、乙磺酸盐、DL-乳酸盐、己二酸盐、D-葡糖醛酸盐、D-葡糖酸盐和盐酸盐组成。用于制备本文所述的式(I)化合物及其亚组和实例的液体(例如水性)组合物的优选的盐是在给定液体载体(例如7K)中具有大于10吗/ml液体载体(例如7K)、更通常大于0.5mg/ml、优选大于lmg/ml的溶解度的盐。在本发明的一个实施方案中，提供了一种药物组合物，其包含含有浓度大于10jig/ml液体栽体(例如水)、通常大于0.5mg/ml、优选大于lmg/ml的盐形式的本文所述的式(I)化合物及其亚组和实例的水性溶液。如果化合物是阴离子性的，或者具有可以是阴离子性的官能团(例如-COOH可以是-COO-)，则可以与合适的阳离子形成盐。合适的无机阳离子的例子包括但不限于碱金属离子如Na+和K+、碱土金属阳离子如Ca2+和Mg"以及其它阳离子如Al3+。合适的有机阳离子的例子包括但不限于铵离子(即，NH4+)和被取代的铵离子(例如，NH:jR+、NH2R2+、NHR3+、NR4+)。一些合适的净皮取代的铵离子的例子是衍生自以下物质的那些乙胺、二乙胺、二环己基胺、三乙胺、丁胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、派溱、千胺、苯基爷基胺、胆碱、葡甲胺和氨基丁三醇，以及氨基酸，如赖氨酸和精氨酸。常见季铵离子的一个例子是N(CH3)4+。在式(I)化合物含有胺官能团的情况下，这些化合物可以形成季铵盐，例如通过按照本领域技术人员公知的方法与烷基化剂反应来形成季铵盐。这类季铵化合物在式(I)的范围内。本发明的化合物的盐形式通常是可药用盐，可药用盐的例子在Berge等，1977,"PharmaceuticallyAcceptableSalts,"/./^"/tw.5W"第66巻，第l-19页中有讨论。然而，不可药用的盐也可以以中间体形式^C制备，然后可以将其转化成可药用盐。这类不可药用的盐形式可用于例如纯化或分离本发明的化合物，它们也形成了本发明的一部分。含有胺官能团的式(I)化合物也可以形成N-氧化物。本文对含有胺官能团的式(I)化合物的提及也包括N-氧化物。在化合物含有数个胺官能团的情况下，一个或一个以上的氮原子可以被氧化形成N-氧化物。N-氧化物的具体例子有叔胺或含氮杂环的氮原子的N-氧化物。可以通过用氧化剂如过氧化氢或过酸(例如过氧羧酸)处理相应的胺来形成N-氧化物，参见例如v4^/v朋"d6Vg朋/c0le附/s^v，JerryMarch,第4版，WileyInterscience，页。更具体地，可以通过L.W.Deady0Syw.CVwi附.1977，7，509-514)的操作方法制备N-氧化物，其中胺化合物与间-氯过苯甲酸(MCPBA)反应，例如在惰性溶剂如二氯甲烷中反应。式(I)化合物可以以许多不同的几何异构形式和互变异构形式存在，对式(I)化合物的提及包括所有这类形式。为了避免疑虑，在化合物可以以数种几何异构形式或互变异构形式之一存在并且仅具体描述或给出了一种的情况下，所有其它几何异构形式或互变异构形式也包括在式(I)中。例如，在式(I)化合物中，吡唑环可以以下列两种互变异构形式A和B的形式存在。为了简便，通式(I)给出了形式A，但是应认为所述通式包括两种互变异构形式。互变异构形式的其它例子包括例如酮基-、烯醇-和烯醇化物-形式，例如在下列互变异构体对中酮基/烯醇(在下面给出)、亚胺/烯胺、酰胺/亚氨基醇、脒/脒、亚硝基/將、硫酮/烯硫醇和硝基/酸式-硝基(aci-nitro)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>酮基烯醇烯醇化物除非上下文另有要求，否则在式(I)化合物含有一个或多个手性中心(例如在其中的W是2-丁基的化合物的情况中)并且可以以两种或多种旋光异构体的形式存在的情况下，对式(I)化合物的提及包括其所有旋光异构形式(例如对映体、差向异构体和非对映异构体)，所述旋光异构形式为单一的旋光异构体或者两种或多种旋光异构体的混合物(例如外消旋混合物)。可以用其旋光活性来表征和鉴别旋光异构体(即，为+和-异构体，或d和/异构体)或者可以根据其绝对立体化学用Cahn、Ingold和Prelog建立的"R和S"命名法来表征它们，参见/^v"wcWOgwi/cC%e//^y，JerryMarch,第4版，JohnWiley&Sons,NewYork,1992，第109-114页，还参见Cahn,Ingold&Prelog，爿"，.￡>ig/"1966，5，385-415。可以用包括手性色谱法(在手性栽体上进行的色谱法)在内的许多技术对旋光异构体进行分离，这类技术是本领域技术人员所公知的。作为手性色i普法的替代选择，可以通过以下方法分离旋光异构体与手性酸如(+)-酒石酸、(-)-焦谷氨酸、(-)-二-甲苯酰基-L-酒石酸、(+)-扁桃酸、(-)-苹果酸和(-)-樟脑磺酸形成非对映异构体盐，用选择结晶(preferentialcrystallisation)分离非对映异构体，然后将盐解离成游离碱的单一对映体。在式(I)化合物以两种或多种旋光异构体形式存在的情况下，一对对映体中的一种对映体可以优于另一种对映体，例如，在生物学活性方面优于另一种对映体。因此，在某些情况下，可能需要仅用一对对映体中的一种或仅用多种非对映异构体中的一种作为治疗剂。因此，本发明提供了含有具有一个或多个手性中心的式(I)化合物的组合物，其中至少55%(例如至少60%、65%、70%、75°/。、80%、85%、90%或95%)的式(1)化合物以单一旋光异构体(例如对映体或非对映异构体)的形式存在。在一个一般的实施方案中，式(I)化合物总量的99%或更多(例如基本上全部)可以以单一旋光异构体(例如对映体或非对映异构体)的形式存在。本发明的化合物包括具有一个或多个同位素取代的化合物，对具体元素的提及在其范围内包括该元素的所有同位素。例如，对氢的提及在其范围内包括111、2H(D)和SH(T)。类似地，对碳和氧的提及在其范围内分别包括12<:、13c和"c与16o和18o。同位素可以是放射性的或非放射性的。在本发明的一个实施方案中，化合物不含有放射性同位素。优选将这类化合物用于治疗用途。然而，在另一个实施方案中，化合物可以含有一种或多种放射性同位素。含有这类放射性同位素的化合物在诊断的情况下可能是有用的。酯如带有羧酸基团或羟基的式(I)化合物的羧酸酯和酰氧基酯也包括在式(I)范围内。酯的例子有含有基团-C(-O)OR的化合物，其中R是酯取代基，例如Cw烷基、C3-20杂环基或Cs-20芳基，优选d.7烷基。酯基团的具体例子包括但不限于-C(-0)0CH3、-C(=0)OCH2CH3、-C(=0)OC(CH3)3和-C(-O)OPh。酰氧基(反向酉旨)基团的例子用-OC(-O)R表示，其中R是酰氧基取代基，例如Cw烷基、C3-20杂环基或Cs-2。芳基，优选Cw烷基。酰氧基的具体例子包括但不限于-OC(=0)CH3(乙酰氧基)、-OC(=0)CH2CH3、-OC(=0)C(CH3)3、-OC(-O)Ph和-OC(-0)CH2Ph。式(I)还包括化合物的任何多晶型物、化合物的溶剂合物(例如水合物)、复合物(例如与诸如环糊精等化合物的包合配合物或包合物或与金属的复合物)和化合物的前药。"前药"意指例如在体内被转化成式(I)的生物学活性化合物的任何化合物。例如，一些前药是活性化合物的酯(例如，生理学可接受的易于代谢的酯)。在代谢过程中，酯基团(-C(-O)OR)被裂解产生活性药物。这类酯可以通过例如母体化合物中的任何羧g团(-C(=0)OH)的酯化来形成，在适宜的情况下，对母体化合物中的任何其它活性基团事先进行保护，如果需要，之后再进行去保护。这类易于代谢的酯的例子包括式-C(-O)OR的那些，其中R是(例力口，-Me、-Et、画nPr、-iPr、-nBu、-sBu、画iBu、-tBu);d-7氨基烷基(例如，氨基乙基；2-(N，N-二乙基氨基)乙基；2-(4-吗啉代)乙基)；和酰氧基-Cw烷基(例如，酰氧基甲基；酰氧基乙基；新戊酰氧基甲基；乙酰氧基甲基；l-乙酰氧基乙基；甲氧基-l-甲基)乙基-羰基氧基乙基；l-(苯甲酰氧基)乙基；异丙氧基-羰基氧基甲基；l-异丙氧基-羰基氧基乙基；环己基-羰基氧基甲基；l-环己基-羰基氧基乙基；环己基氧基-羰基氧基甲基；l-环己基氧基-羰基氧基乙基；(4-四氢吡喃基氧基)羰基氧基曱基；1(4-四氩喃基氧基)羰基氧基乙基；(4-四氢吡喃基)羰基氧基甲基；和1_(4-四氩吡喃基)羰基氧基乙基)。另外，一些前药被酶促活化产生活性化合物或是经进一步化学反应产生活性化合物的化合物(例如，在ADEPT、GDEPT、LIDEPT等中)。例如，前药可以是糖衍生物或其它糖苷结合物，或者可以是氨基酸酯衍生物。生物活性式(I)化合物和其亚组是细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制剂。例如，本发明的化合物是细胞周期蛋白依赖性激酶、特别是选自CDK1、CDK2、CDK3、CDK4、CDK5、CDK6和CDK9、更特别是选自CDK1、CDK2、CDK3、CDK4、CDK5和CDK9的细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制剂。优选的化合物是抑制一种或多种选自CDK1、CDK2、CDK4和CDK9的CDK激酶、例如CDK1和/或CDK2的化合物。本发明的化合物还具有抗糖原合成酶激酶-3(GSK3)的活性。由于它们在调节或抑制CDK和糖原合成酶激酶中的活性，预计本发期的控制的手段。因此，预计所述化合物将可用于治疗或预防增殖性疾病如癌症。还预计本发明的化合物将可用于治疗诸如病毒感染、II型或非胰岛素依赖型糖尿病、自身免疫性疾病、头部外伤、中风、癫痫、神经变性疾病如阿尔茨海默病、运动神经元疾病、进行性核上麻痹、皮质基底核变性和皮克氏病(Pick'sdisease)等病症，例如自身免疫性疾病和神经变性疾病。预计本发明的化合物在其中有用的一个疾病状态和病症亚组由病毒感染、自身免疫性疾病和神经变性疾病组成。CDK在细胞周期、细胞凋亡、转录、分化和CNS功能的调节中起作用。因此，CDK抑制剂可用于治疗其中存在增殖、细胞凋亡或分化异常的疾病例如癌症。特别是RB+ve肿瘤可能对CDK抑制剂特别敏感。RB-ve肿瘤也可能对CDK抑制剂敏感。可被抑制的癌症的例子包括但不限于癌，例如膀胱癌、乳腺癌、结肠癌(例如结肠直肠癌如结肠腺癌和结肠腺瘤)、肾癌、表皮癌、肝癌、肺癌，例如腺癌、小细胞肺癌和非小细胞肺癌、食道癌、胆嚢癌、卵巢癌、月夷腺癌例:ft口夕卜分》必腹腺癌(exocrinepancreaticcarcinoma)、胃癌、宫多贞癌、甲状腺癌、前列腺癌或皮肤癌，例如鳞状细胞癌；淋巴谱系的造血系统肿瘤(hematopoietictumorsoflymphoidlineage),例i口白血病、急小生淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、B-细胞淋巴瘤(如弥漫型大B细胞淋巴瘤)、T-细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤或伯基特淋巴瘤；骨髓镨系的造血系统肿瘤(hematopoietictumourofmyeloidlineage),例如急性和慢性髓性白血病、骨髓发育不良综合征或早幼粒细胞白血病；甲状腺滤泡状癌；间充质起源的肿瘤，例如纤维肉瘤或横紋肌肉瘤；中枢或外周神经系统的肿瘤，例如星形细胞瘤、成神经细胞瘤、神经胶质瘤或神经鞘瘤；黑素瘤；精原细胞瘤；畸胎癌；骨肉瘤；着色性干皮病；角化棘皮瘤(keratoctanthoma);甲状腺滤泡状癌；或卡波西肉瘤。癌症可以是对任何一种或多种选自CDK1、CDK2、CDK3、CDK4、CDK5和CDK6的细胞周期蛋白依赖性激酶、例如一种或多种选自CDK1、CDK2、CDK4和CDK5的CDK激酶、例如CDK1和/或CDK2的抑制敏感的癌症。可以利用下文实施例中给出的细胞生长测定法或标题为"诊断方法，，的部分中给出的方法来确定一种特定的癌症是否是对细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制敏感的癌症。还已知CDK在细胞凋亡、增殖、分化和转录中发挥作用，因此CDK抑制剂还可用于治疗癌症以外的下列疾病病毒感染，例如疱渗病毒、痘病毒、EB病毒、辛德比斯病毒、腺病毒、HIV、HPV、HCV和HCMV;在HIV-感染的个体中预防AIDS发生；慢性炎性疾病，例如系统性红斑狼疮、自身免疫介导的肾小球肾炎、类风湿性关节炎、银屑病、炎症性肠病和自身免疫性糖尿病；心血管疾病例如心脏肥大、再狭窄、动脉粥样硬/f匕；神经变性疾病，例如阿尔茨海默病、与AIDS有关的痴呆、帕金森病、肌萎缩性侧索硬化、色素性视网膜炎、脊髓性肌萎缩和小脑变性；肾小球肾炎；骨髄增生异常综合征、与缺血性损伤有关的心肌梗死、中风和再灌注损伤、心律失常、动脉粥样硬化、毒素-诱发的或与酒精有关的肝病、血液学疾病，例如慢性贫血和再生障碍性贫血；肌肉骨骼系统的变性疾病，例如骨质疏松和关节炎、阿司匹林敏感性鼻窦炎、嚢性纤维化、多发性硬化、肾脏疾病和癌症疼痛。还已经发现一些细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂可与其它抗癌剂组合使用。例如，细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂福拉利多(flavopiridol)已经与其它抗癌剂一起用于组合治疗。因此，在本发明的用于治疗包括异常细胞生长的疾病或病症的药物组合物、用途或方法中，包含异常细胞生长的疾病或病症在一个实施方案中是癌症。一组癌症包括人乳腺癌(例如原发性乳腺癌、淋巴结阴性乳腺癌、乳腺浸润性导管腺癌、非子宫内膜样乳腺癌(non-endometrioidbreastcancers));和套细胞淋巴瘤。另外，其它癌症有结肠直肠癌和子宫内膜癌。癌症的另一个亚组包括淋巴镨系的造血系统肿瘤，例如白血病、慢性淋巴细胞白血病、套细胞淋巴瘤和B-细胞淋巴瘤(如弥漫型大B细胞淋巴瘤)。一种具体的癌症是慢性淋巴细胞白血病。另一种具体的癌症是套细胞淋巴瘤。另一种具体的癌症是弥漫型大B细胞淋巴瘤。癌症的另一个亚组包括乳腺癌、卵巢癌、结肠癌、前列腺癌、食道癌、鳞状细胞癌和非小细胞肺癌。可以用下文实施例中给出的测定法来测量本发明的化合物作为细胞周期蛋白依赖性激酶和糖原合成酶激酶-3的抑制剂的活性，给定化合物所表现出的活性水平可以用ICso值来定义。优选的本发明化合物是ICso值小于1微摩尔、更优选小于0.1微摩尔的化合物。本发明化合物的优点本文所定义的式(I)的化合物和其亚组例如化合物4-(2，6-二氯-苯甲酰氨基)-111-吡唑-3-甲酸(l-甲烷磺酰基-哌咬-4-基)-酰胺具有优于现有技术的化合物的优点。本发明化合物可能具有适于口服接触的理化性质。本发明化合物在HCT-116细胞中对转录作用的ICso高于对增殖作用的ICso:因此，例如，对转录作用的ICso高于对增殖作用的IQo约100倍。这是有利的，因为化合物可以更好地耐受从而允许其在较高的水平下给药和给药较长的时间。具体而言，相对于现有技术的化合物，式(I)化合物显示出改进的口服生物利用度。口服生物利用度可定义为以百分比表示的通过口服途径给药时化合物的血浆暴露值与通过静脉内(i.V.)途径给药时化合物的血浆暴露值的比(F)。口服生物利用度(F值)大于30%、更优选大于40%的化合物特别有利，因为它们可被口服施用而非胃肠外施用，或者既可被口服施用又可被胃肠外施用。例如，化合物4-(2，6-二氯-苯甲酰氨基)-lH-吡唑-3-甲酸(l-甲烷磺酰基-哌啶-4-基)-酰胺在以口服途径对小鼠给药时具有40-50%生物利用度。本发明的化合物，例如化合物4-(2，6-二氯-苯曱酰氨基)-lH-吡唑-3-甲酸(l-甲烷磺酰基-哌啶-4-基)-酰胺，具有较高的激酶(CDK2)体外抑制活性并且对癌细胞系具有更强的抗增殖效果。此外，化合物对GSK3p具有较低活性且对CDK2的选择性超过GSK3p。因此化合物的作用主要是通过抑制CDK来影响细胞周期，而并不伴有由于GSK3p抑制例如胰岛素敏感性、生长因子作用而产成的额外结果。化合物具有更清楚的细胞周期抑制作用特征和更少的来自经由GSK3卩的额外结果的副作用。化合物4-(2，6-二氯-苯甲酰氨基)-lH-吡唑-3-甲酸(l-甲烷磺酰基-哌啶-4-基)-酰胺与其2，6-二氟苯甲酰氨基类似物的生物学特性的比较列于以下实施例11中。制备式(I)化合物的方法在该部分以及本申请的所有其它部分中，除非上下文另有提示，所指式(I)也包括所有本文所定义的其亚组和实施例。当提到Ri和RS基团或任何其它"R"基团时，所述基团的定义如上所述和如本申请以下段落所述，除非上下文另有要求。式(I)化合物可根据技术人员已知的合成方法制备，和通过下述和如我本文中)所描述的方法制备。、*''例如，式(I)化合物可通过流程1中所示的反应顺序进行制备。用于流程1中所示的合成路径的原料是4-硝基-吡唑-3-羧酸(X)，其可从商业途径获得或者可以通过相应的4-未取代的吡唑羧基化合物的硝化作用制备。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula>(XIV)流程1通过在酸催化剂或亚硫酰氯的存在下与适当的醇例如乙醇反应，将硝基-吡唑羧酸(X)转化成相应的S旨(XI)，例如甲酯或乙酯(所示为其乙酯)。反应可在室温下使用用于酯化的醇作为溶剂来进行。硝基-酯(XI)可通过用于将辨基转化成氨基的标准方法还原成相应的胺(XII)。因此，例如，硝基基团可通过用钯/炭催化剂进行氢化而被还原成胺。氢化反应可在室温下于溶剂例如乙醇中进行。所产生的胺(XII)可通过与式Wcoci的酰氯在非干扰性碱例如三乙胺的存在下反应转化成酰胺(XIII)。反应可在约室温下于极性溶剂例如二恶烷中进行。酰氯可通过用亚硫酰氯处理羧酸！^C02H，或通过在催化量的二甲基曱酰胺存在下与乙二酰氯反应，或通过酸的钾盐与乙二酰氯的反应来制备。作为上述使用酰氯的方法的替代方法，胺(Xn)可通过与羧酸RiC02H在通常用于形成肽键类型的酰胺偶合试剂存在下的反应而转化成酰胺(XIII)。这些试剂的例子包括1，3-二环己基碳二亚胺(DCC)(Sheehan等人，J.Amer.OiemSoc.1955，77，1067)、l-乙基-3-(3，-二曱氨基丙基)-碳二亚胺(在本文中称为EDC或EDAC，但在本领域中也称为EDCI和WSCDI)(Sheehan等人，J.Org.Chem.，1961，26,2525)、基于脲阳离子(uronium)的偶合剂例如0-(7-氮杂苯并三唑-l-基)-N，N，N，，N，-四曱基脲六氟磷酸盐(HATU)和基于镇的偶合剂例如l-苯并三唑氧基三-(吡咯烷-l-基)镇六氟磷酸盐(PyBOP)(Castro等人，TetrahedronLetters，19卯，31，205)。基于碳二亚胺的偶合剂有利地与l-羟基-7-氮杂苯并三唑(HOAt)(LA.Carpino，J.Amer.Chem.Soc.，1993，115，4397)或l-羟基苯并三唑(HOBt)(Konig等人，Chem.Ber.，103，708，2024-2034)组合使用。优选的偶合剂包括与HOAt或HOBt組合的EDC(EDAC)和DCC。偶合反应通常在非水性的非质子溶剂，例如乙腈、二恶烷、二甲亚砜、二氯甲烷、二甲基甲酰胺或N-甲基吡咯烷中，或任选地含有一种或多种可混溶的共溶剂的水性溶剂中进行。反应可在室温下进行，或者当反应物的反应性较低时(例如在具有吸电子基团例如磺酰胺基团的缺电子的苯胺的情况下)，在适当升高的温度下进行。反应可在非千扰性碱，例如叔胺如三乙胺或N，N-二异丙基乙胺存在下进行。酰胺(XIII)随后通过用水性碱金属氢氧化物例如氢氧化钠处理而水解成羧酸(XIV)。皂化反应可用有机共溶剂例如醇(例如甲醇)进行且反应混合物通常被加热到非极端温度，例如最高约50-60X:。羧酸(XIV)然后可通过使用上述酰胺形成条件与胺R3-NH2反应而转化成式(I)的化合物。因此，例如，酰胺偶合反应可在EDC和HOBt存在下于极性溶剂如DMF中进行。另一个合成其中R化为氢的式(I)化合物的通用途径显示于流程2中。流程2在流程2中，使用上述酰胺形成条件将硝基-吡唑-羧酸(X)或其活化的衍生物例如酰基氯与胺R、NH2反应以产生硝基-吡唑-酰胺(XV)，其接着用还原硝基基团的标准方法，例如上述使用Pd/C催化剂的氢化方法还原成相应的氨基化合物(XVI)。然后将胺(XVI)与式R、C02H的羧酸或其活化的衍生物例如酰基氯或酸酐在以上关于流程l所述的酰胺形成条件下偶合。因此，例如，作为使用酰基氯的替代方法，偶合反应可在EDAC(EDC)和HOBt存在下于溶剂例如DMF中进行以产生式(I，)化合物，其相当于其中R"是氢的式(I)化合物。式(I)化合物也可通过与适当的磺酰化试剂，例如磺酰氯例如曱烷磺酰氯反应而从式(XVII)化合物制备。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula>显示式(XVII)的化合物转化成式(I)的磺酰基衍生物的说明性反应顺序列于流程3中。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula>(XVII)流程3如流程3所示，其中议3为具有磺酰基基团-802114的哌啶环的式(1)化合物(即式(XIX)的化合物)可通过将式(XVII)的化合物与磺酰氯R4S02C1(例如曱烷磺酰氯)在干扰性碱例如二异丙基乙胺的存在下进行反应来制备。反应通常在室温下于非水性非质子溶剂例如二恶烷和二氯甲烷中进行。式I^S02C1的磺酰氯可从商业来源获得，或可通过多种方法制得。例如，烷基磺酰氯可通过如下方法制得将卣代垸与亚硫酸钠反应并在水性有机溶剂例如水/二恶烷中加热以形成相应的磺酸，接着在DMF存在下用亚>5克酰氯处理以产生磺酰氯。在一个可选的制备方法中，硫醇R4SH/R4aSH可与硝酸钾和硫酰氯反应以产生所需的磺酰氯。在许多上述反应中，可能需要保护一个或多个基团以防止在分子的不希望的位置上发生反应。保护基团的例子，以及保护和去保护官能团的方法，可见于/Vo,"rive/w^S)7i说es/s(T.GreenandP.Wuts;3rdEdition;JohnWileyandSons,1999)。例如，胺基团可被保护成例如酰胺(-NRCO-R)或氨基甲酸乙酯(-NRCO-OR),例如，被保护成甲基酰胺(NHCO-CH3);苯甲氧基酰胺(-NHCO-OCH2C6H5、-NH-Cbz);被保护成叔丁氧基酰胺(-NHCO-OC(CH3)3、-NH-Boc);2-联苯-2-丙氧基酰胺(-NHCO-OC(CH3)2C6H4C6H5、-NH-Bpoc),被保护成9-芴基甲氧基酰胺(-NH-Fmoc)，被保护成6-硝基藜芦氧基酰胺(-NH-Nvoc)，被保护成2-三甲基硅烷基乙氧基酰胺(-NH-Teoc),被保护成2，2，2-三氯乙氧基酰胺(-NH-Troc)，被保护成烯丙氧基酰胺(-NH-Alloc)，或被保护成2(-苯基磺酰基)乙氧基酰胺(-NH-Psec)。胺(例如环胺和杂环的N-H基团)的其它保护基例如对-甲氧基苯甲基(PMB)基团。羧酸基团可被保护成酯，例如，被保护成d.7烷基酯(例如，甲酯；^又丁酯)；d_7卣代烷基酯(例如，Cw三卣代烷基酯)；三Cw烷基硅烷基-d々烷基酯；或C5—2o芳基-C,.7烷基酯(例如，苯甲酯；硝基苯甲酯)；或被保护成酰胺，例如，甲基酰胺。硫醇基团可被保护成例如硫醚(-SR)，例如，保护成苯甲基硫醚；乙酰氨基甲基醚(S-CH2NHC(=0)CH3)。上述方法和实施例中所使用的新化学中间体(例如式(XIII)、(XIV)、(XV)和(XVI)的新化合物)代表了本发明的另一个方面。纯化的方法化合物可通过本领域技术人员熟知的许多方法进行分离和纯化，这些方法的例子包括色谱技术例如柱色镨法(例如快速色镨法)和HPLC。制备型LC-MS是一种用于纯化有机小分子例如本文所述化合物的标准且有效的方法。可以改变液相色语(LC)和质i瞽(MS)的方法，以使粗品更好地分离和提高MS对样品的检测。制备型梯度LC方法的优化包括改变柱子、挥发性洗脱剂和改性剂以及梯度。最优化制备型LC-MS的方法、然后将其用于纯化化合物的方法在本领域中是^^知的。这类方法描述于RosentreterU，HuberU.;OptimalfractioncollectinginpreparativeLC/MS;JCombChem.;2004;6(2)，159-64和LeisterW，StraussK，WisnoskiD，ZhaoZ,LindsleyC.，Developmentofacustomhigh-throughputpreparativeliquidchromatography/massspectrometerplatformforthepreparativepurificationandanalyticalanalysisofcompoundlibraries;JCombChem.;2003;5(3);322-9中。一个经由制备型LC-MS来纯化化合物的这类系统描述于下列实验部分，但本领域技术人员可以理解，可以使用与所述的系统和方法不同的其它系统和方法。具体而言，可利用基于正相制备型LC的方法代替此处所述的反相方法。大部分制备型LC-MS系统利用反相LC和挥发性的酸性改性剂，因为该方法对于小分子的纯化非常有效且洗脱剂与阳离子电喷雾质谱分析法相容。也可采用其它色谱方案，例如上述分析方法中概述的正相LC、交替緩沖流动相、碱性改性剂等来纯化这些化合物。药物制剂虽然活性化合物可以单独施用，但是优选其以药物组合物(例如制剂)的形式被给予，所述组合物包含至少一种本发明的活性化合物与一种或多种可药用的载体、辅剂、赋形剂、稀释剂、填充剂、緩沖剂、稳定剂、防腐剂、润滑剂或本领域技术人员熟知的其它物质，并任选地包含其它治疗或预防性物质；例如减少或减轻一些与化疗有关的副作用的物质。这类物质的具体例子包括止吐剂和预防或减少与化疗相关的中性白细胞减少的持续期和预防起因于红细胞或白细胞水平降低的并发症的物质，例如红细胞生成素(EPO)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)。因此，本发明还提供了如上所定义的药物组合物和制备药物组合物的方法，其包括将至少一种如上所定义的活性化合物与本文所述的一种或多种可药用的载体、赋形剂、緩沖剂、辅剂、稳定剂或其它物质相混合。本文所用的术语"可药用的"涉及在合理医学判断范围内适合用于与个体(例如人)的组织接触而不产生过度的毒性、刺激、变态反应或其它问题或并发症、具有合理的益处/风险比的化合物、物质、組合物和/或剂型。每种载体、赋形剂等还必须在与制剂中的其它成分相容的意义上是"可接受的"。因此，在另一方面，本发明提供了药物组合物形式的本文所定义的式(I)化合物和其亚组。药物组合物可以是任何适于口服、胃肠外、局部、鼻内、眼、耳和直肠、阴道内或透皮施用的形式。在组合物用于胃肠外施用的情况下，它们可被配制用于静脉内、肌内、腹膜内、皮下施用或通过注射、输注或其它递送手段直接递送至靶器官或组织。递送可通过快速浓注、短期输注或长期输注来实现，且可经由被动递送或通过利用合适的输注泵来实现。适合于胃肠外施用的药物制剂包括水性和非水性无菌注射液，其可含有抗氧化剂、緩沖剂、抑菌剂、共溶剂、有机溶剂混合物、环糊精*剂、乳化剂(用于形成和稳定乳剂)、用于形成脂质体的脂质体成分、用于形成聚合凝胶的可凝胶化聚合物、冷冻干燥保护剂和尤其是用于稳定可溶形式的活性成分并使制剂与预期接受者的血液等张的物质组合。用于胃肠外施用的药物制剂也可采用水性和非水性无菌混悬液的形式，其可包括助悬剂和增稠剂(R.G.Strickly，SolubilizingExcipientsinoralandinjectableformulations.PharmaceuticalResearch,21巻(2)2004，第201-230页)。如果药物的pKa与制剂的pH值差距足够大，则可通过调整pH使可电离的药物分子溶解达到所需浓度。对于静脉内和肌内施用，可接受的范围为pH2-12，但是皮下施用可接受的范围为pH2.7-9.0。溶液pH通过药物的盐形式、强酸/碱如盐酸或氢氧化钠或通过包括但不限于由甘氨酸、柠檬酸盐、乙酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、组氨酸、磷酸盐、三(羟甲基)氨基甲烷(TRIS)或碳酸盐形成的緩冲溶液来控制。在注射制剂中常使用水性溶液和水溶性有机溶剂/表面活性剂(即共溶剂)的组合。用在注射制剂中的水溶性有机溶剂和表面活性剂包括但不限于丙二醇、乙醇、聚乙二醇300、聚乙二醇400、甘油、二甲基乙酰胺(DMA)、N-曱基-2-吡咯烷酮(NMP;Pharmasolve)、二甲亚砜(DMSO)、SolutolHS15、CremophorEL、CremophorRH60和聚山梨酯80。这类制剂通常可(但不总是)在注射之前被稀释。用在可商购获得的注射制剂中的丙二醇、PEG300、乙醇、CremophorEL、CremophorRH60和聚山梨酯80是完全可与水混溶的有机溶剂和表面活性剂且可以彼此组合使用。所得有机制剂通常在静脉内浓注或静脉内输注前稀释至少2倍。或者，可通过与环糊精络合而达到增加的水溶性。脂质体是由外层的脂类双层膜和内层的水性核心组成的且具有<100微米的总直径的封闭球形小泡。根据疏水性程度，如果药物被封入或嵌入脂质体内，适度疏水性的药物可被脂质体溶解。如果药物分子变成脂类双层膜的一部分，疏水性药物也可净皮脂质体溶解，且在此情况下，疏水性药物被溶解在脂类双层的脂类部分中。通常的脂质体制剂含有水及-5-20mg/ml的磷脂、等张剂(isotonicifier)、pH5-8緩冲液，并任逸地含有胆固醇。制剂可以存在于单位剂量或多剂量容器例如密封的安瓿和小瓶中，并且可以储存于冷冻干燥(冻干)条件下，只需在^f吏用前即刻加入无菌液体栽体例如注射用水。药物制剂可通过冷冻干燥式(I)化合物或其酸加成盐来制备。冷冻干燥指的是冷冻干燥组合物的操作方法。因此，冻千和冷冻干燥在本文中用作同义词。通常的方法是将化合物溶解并将所得制剂澄清、无菌过滤并在无菌条件下转入适于冷冻干燥的容器(例如小瓶)中。在小瓶的情况下，它们被用冻干塞部分地塞住。可将制剂冷却到冰冻并在标准条件下进行冷冻干燥，然后密封加盖以形成稳定的干燥的亲液制剂。组合物通常具有〗氐的残余水含量，例如基于亲液物的重量，小于5重量％例如小于1重量％的残余水含量。冷冻干燥制剂可含有其它赋形剂，例如增稠剂、^:剂、緩冲剂、抗氧化剂、防腐剂和张力调节剂。通常的緩冲剂包括磷酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐和甘氨酸。抗氧化剂的例子包括抗坏血酸、亚石克酸氢钠、偏亚石克酸钠、硫代甘油、硫脲、丁基化羟基曱苯、丁基化羟基苯甲醚和乙二胺四乙酸盐。防腐剂可包括苯曱酸和其盐、山梨酸和其盐、对-羟基苯甲酸的烷基酯、苯酚、氯丁醇、苄醇、硫柳汞、苯扎氯铵和氯化十六烷基吡啶。如果必要，前述緩冲剂以及葡萄糖和氯化钠可用于张力调节。增量剂一般用于冷冻千燥技术中以帮助加工和/或提供冷冻干燥块的体积和/或机械完整性。增量剂意指易溶于水的固体颗粒状的稀释剂，当与化合物或其盐一起冷冻千燥时，其提供物理上稳定的冷冻干燥块、更优的冷冻干燥方法和迅速且完全的重构。增量剂也可用于使溶液等张。水溶性增量剂可以是任何一种通常用于冷冻干燥的可药用的惰性固体物质。这类增量剂包括例如糖如葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和乳糖；多元醇如山梨醇或甘露醇；氨基酸如甘氨酸；聚合物如聚乙烯吡咯烷酮；和多醣如葡聚糖。增量剂的重量与活性化合物的重量比通常为约1至约5，例如约1至约3，例如约1至2。或者，它们可以以可被浓缩且密封于合适小瓶中的溶液形式被提供。剂型的灭菌可通过过滤或通过小瓶和其内容物在配制过程的适当阶段的高压灭菌来实现。所提供的制剂可能在递送前需要进一步稀释或制备，例如稀释成合适的无菌输注包。临时配制型注射溶液和混悬液可从无菌的粉末、颗粒和片剂制备。在本发明的一个优选的实施方案中，药物组合物是适于静脉内施用例如通过注射或输注静脉内施用的形式。用于胃肠外注射的本发明的药物组合物也可包含可药用的无菌水性或非水性溶液、分散液、混悬液或乳液以及在使用前即刻重构为无菌注射液或分散液的无菌粉末。合适的水性和非水性载体、稀释剂、溶剂或介质的例子包括水、乙醇、多元醇(如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)、羧甲基纤维素和它们的适当混合物、植物油(如橄揽油)和注射用有机酯如油酸乙酯。可以例如通过使用包衣物质如卵磷脂、在分散的情况中通过维持所需的颗粒大小和通过^f吏用表面活性剂来维持适当的流动性。本发明的组合物也可含有辅剂如防腐剂、湿润剂、乳化剂和分散剂。微生物作用的预防可通过包含各种抗细菌和抗真菌剂例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸等来保证。也可能需要包括等张剂如糖、氯化钠等。可注射的药物形式的延长吸收可通过包含延迟吸收的物质如单硬脂酸铝和明胶来实现。如果化合物在水性溶媒中不稳定或在水性溶媒中具有低溶解度，可将其配制成在有机溶剂中的浓缩物。然后将浓缩物在水性系统中稀释至较低浓度，且可在给药过程中短时间内足够稳定。因此，在另一方面，提供了一种药物组合物，其包含完全由一种或多种有机溶剂組成的非水性溶液，其可以以该形式进行给药或者更通常地在施用前用合适的静脉内赋形剂(盐水、葡萄糖；緩冲的或未緩冲的)进行稀释(Solubilizingexcipientsinoralandinjectableformulations,PharmaceuticalResearch,21(2)，2004,第201-230页)。溶剂和表面活性剂的例子有丙二醇、PEG300、PEG400、乙醇、二甲基乙酰胺(DMA)、N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP、Pharmasolve)、甘油、CremophorEL、CremophorRH60和聚山梨酯。具体的非水性溶液由70-80%丙二醇和20-30%乙醇组成。一个具体的非水性溶液由70%丙二醇和30%乙醇組成。另一个是80%丙二醇和20%乙醇。通常这些'溶剂组合使用且通常在静脉内快速浓注或静脉内输注前稀释至少2倍。静脉内快速浓注制剂的通常的量为~50%甘油、丙二醇、PEG300、PEG400和20。/。乙醇。静脉内输注制剂的通常的量为~15%甘油、3%DMA和~10%丙二醇、PEG300、PEG400和乙醇。在本发明的一个优选的实施方案中，药物组合物是适于静脉内施用例如通过注射或输注静脉内施用的形式。对于静脉内施用，可以将溶液以其本身的形式给药或者可以在施用前注入输注袋内(含有可药用的赋形剂，如0.9%盐水或5%葡萄糖)。在另一个优选的实施方案中，药物组合物是适于皮下(s.c.)施用的形式。适合于口服施用的药物剂型包括片剂、胶嚢、小胶嚢、丸剂、锭剂、糖浆剂、溶液剂、散剂、颗粒剂、酏剂和混悬剂、舌下片、糯米纸嚢剂或贴剂和口腔贴剂。含有式(I)化合物的药物组合物可根据已知技术配制，例如参见Remington'sPharmaceuticalSciences,MackPublishingCompany,Easton,PA，USA。因此，片剂组合物可含有单位剂量的活性化合物以及惰性稀释剂或载体如糖或糖醇，例如乳糖、蔗糖、山梨醇或甘露醇；和/或非糖衍生的稀释剂如碳酸钠、磷酸鈣、碳酸钓或纤维素或其衍生物如曱基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素和淀粉如玉米淀粉。片剂也可含有这类标准成分如粘合剂和制粒剂如聚乙烯吡咯烷酮、崩解剂(例如可膨胀的交联聚合物如交联羧甲基纤维素)、润滑剂(例如硬脂酸盐)、防腐剂(例如对羟基苯曱酸酯)、抗氧化剂(例如BHT)、緩冲剂(例如磷酸盐或柠檬酸盐緩沖剂)和泡腾剂如柠檬酸盐/碳酸氢盐混合物。这类赋形剂是已知的，无需在此详细讨论。胶嚢剂可以是各种硬明胶或软明胶形式且可含有固体、半固体或液体形式的活性组分。明胶胶嚢可由动物明胶或其合成的或植物^f生的等价物形成。固体剂型(例如片剂、胶嚢剂等)可以被包衣或不包衣，但通常具有包衣，例如保护性薄膜包衣(例如蜡或漆膜)或控制释放的包衣。包衣(例如Endragit型聚合物)可被设计用于在胃肠道内的所需位置释放活性组分。因此，可对包衣进行选择以便在胃肠道内某pH条件下降解，从而选择性地在胃中或在回肠或十二指肠中释放化合物。代替包衣或除了包衣之外，药物可存在于固体基质中，该固体基质包含控制释放的物质，例如适合在胃肠道内于不同的酸性或碱性条件下选择性地释放化合物的延迟释放的物质。或者，基质材料或阻滞释放的包衣可以采用溶蚀性聚合物(例如马来酸酐聚合物)的形式，当剂型通过胃肠道时其基本上被连续被溶蚀。作为另一种替代选择，可以将活性化合物配制在渗透控制化合物释放的递送系统中。渗透释放和其它延迟释放或持续释放制剂可根据本领域技术人员公知的方法制备。药物组合物包含约1%到约95%、优选约20%到约90%的活性成分。本发明的药物组合物可以是例如单位剂量形式，如安瓿、小瓶、栓剂、糖衣九、片剂或胶嚢剂的形式。用于口服施用的药物组合物可通过将活性成分与固体载体混合而获得，如果需要将所得混合物制粒，并且如果需要或必需，在加入适当赋形剂后将混合物加工成片剂、糖衣丸芯或胶嚢剂。也可能将其合并于允许活性成分以计量量扩散或释放的塑料载体中。也可将本发明的化合物配制成固体分散体。固体分散体是两种或两种以上固体的均匀的极细的分散相。固体溶液(分子性分散系统)-一种固体^Ht体类型_公知可用在制药技术中(参见(Chiou和Rkgelman，J.Pharm.Sci.，60，1281-1300(1971))，并且可用于增加溶解速度和增加水溶性差的药物的生物利用度。药物的固体*体一般通过熔融法或溶剂蒸发法制备。对于熔融法，加热性质通常为半固体和蜡状的物质(赋形剂)以使药物熔化和溶解，接着通过冷却到极低温度来硬化。然后粉碎固体*体，过筛，与赋形剂混合，封入硬明胶胶嚢内或压成片剂。或者，使用具有表面活性的和自乳化的载体使得固体分散体以熔化物的形式直接封入硬明胶胶嚢内。当熔化物冷却到室温时，在胶嚢内形成固体填充物。固体溶液也可通过将药物和所需的赋形剂溶解在水性溶液或可药用的有机溶剂中、然后使用可药用方法如喷雾干燥除去溶剂而制得。如果需要，可调整所得固体的颗粒大小，任选地与赋形剂混合并制成片剂或填充入胶嚢中。制备这类固体分散体或固体溶液的一种特别适合的聚合物辅料为聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。本发明提供了一种药物组合物，其包含基本上是无定形的固体溶液，所述固体溶液包含(a)—种式(I)化合物，例如实施例l的化合物；和(b)选自下组的聚合物聚乙烯吡咯烷酮(聚维酮)、交联聚乙烯吡咯烷酮(交聚维酮)、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、聚氧化乙烯、明胶、交联聚丙烯酸(卡波姆)、羧甲基纤维素、交联羧甲基纤维素(交联羧曱纤维素)、甲基纤维素、甲基丙烯酸共聚物、甲基丙烯酸酯共聚物和水溶性盐如甲基丙烯酸和甲基丙烯酸酯共聚物的钠和铵盐、醋酞纤维素、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯和海藻酸丙二醇酯；其中所述化合物与所述聚合物的比为约1:1到约1:6，例如1:3，其由氯仿或二氯甲烷之一和曱醇或乙醇之一的混合物、优选1:1比例的二氯曱烷/乙醇的混合物喷雾干燥而得。本发明还提供了包含上述固体溶液的固体剂型。固体剂型包括片剂、胶嚢剂和咀嚼片。已知的赋形剂可与固体溶液混合以提供所需的剂型。例如，胶嚢剂可含有与(a)崩解剂和润滑剂或(b)崩解剂、润滑剂和表面活性剂混合的固体溶液。片剂可含有与至少一种崩解剂、润滑剂、表面活性剂和助流剂混合的固体溶液。咀嚼片可含有与增量剂、润滑剂和如果需要另外的甜味剂(如人工甜味剂)和合适的矫味剂混合的固体溶液。药物制剂可以以"患者包"的形式呈递给患者，其含有在单一包装(通常为泡罩包装)中的整个疗程。与其中药剂师从大批量供应中分出患者的药物供应的传统处方相比，患者包具有优点，因为患者总能使用包含在患者包中的药品说明书，而在患者处方中通常没有该说明书。已经证明药品说明书可改善患者对医师指示的依从性。用于局部使用的组合物包括软膏剂、乳骨剂、喷雾剂、贴剂、凝胶剂、液体滴剂和植入剂(insert)(例如眼内植入剂)。这类组合物可依照已知方法配制。用于胃肠外施用的组合物通常以无菌水性或油性溶液或细粒混悬液的形式提供，或者可以以研细的无菌粉末形式提供以临时用无菌注射用水进行重构。用于直肠或阴道内施用的制剂的例子包括阴道栓和栓剂，其可以例如由含有活性化合物的成形的可塑性或蜡状物质形成。剂的形式，且可以使用粉末吸入装置或气雾剂给药装置以标准形式施用。这类装置是公知的。为了通过吸入施用，粉末制剂通常包含活性化合物以及惰性固体粉末状稀释剂如乳糖。式(I)化合物一般以单位剂量形式提供，这样以来，其通常含有足够的化合物以提供所需水平的生物学活性。例如，制剂可含有lng到2g的活性成分，例如lng到2mg的活性成分。在此范围内，具体的化合物亚范围是O.lmg到2g的活性成分(更通常是10mg到lg，例如50mg到500mg),或lpg到20mg(例如lpg到10mg，例如O.lmg到2mg的活性成分)。对于口服组合物，单位剂量形式可含有lmg到2g、更通常10mg到lg、例如50mg到lg、例如100mg到lg的活性化合物。活性化合物将以足够达到所需治疗效果的有效量施用于需要其的患者(例如人或动物患者)。治疗方法预计本文所定义的式(I)化合物和其亚组可用于预防或治疗由细胞周期蛋白依赖性激酶和糖原合成酶激酶-3介导的疾病状态或病症，这类疾病状态或病症的例子如上所述。通常对需要给药的患者给予该化合物，例如人或动物病患，优选人。通常以治疗或预防有效的且一般无毒的量施用化合物。然而，在某些情况(例如在威胁生命的疾病的情况)中，施用式(I)化合物的益处可能比任何毒性效应或副作用的缺点更重要，在该情况中，可以认为需要施用与一定程度的毒性有关的量的化合物。可长期施用化合物以维持有益的治疗效果或者可仅短期施用。或者可以以脉沖方式或连续方式施用化合物。式(I)化合物的通常的日剂量可以为每千克体重100皮克到100毫克，更通常是每千克体重5纳克到25毫克，更通常是每千克体重10纳克到15毫克(例如10纳克到10毫克，更通常是每千克1孩吏克到每千克20毫克，例如每千克l微克到IO毫克)，但是如需要，也可以施用更高或更低的剂量。式(I)化合物可在每日基础或在重复基础上进行施用，例如每2或3或4或5或6或7或10或14或21或28天施用一次。本发明的化合物可在剂量范围内口服施用，例如以l-1500mg、2-800mg或5-500mg、例如2-200mg或10-1000mg的剂量口服施用，剂量的具体例子包括10、20、50和80mg。化合物可每天施用一次或一次以上。化合物可连续施用(即在治疗方案期间每天施用没有中断)。或者，化合物可间断施用(即在整个治疗方案期间，在给定的一段时间如一周中连续施用，然后中断一段时间如一周，然后再连续施用一段时间如一周等)。涉及间断施用的治疗方案的例子包括其中循环性地施用一周，中断一周；或施用两周，中断一周；或施用三周，中断一周；或施用两周，中断两周；或施用四周，中断两周；或施用一周，中断三周，例如进行一个或多个该循环、例如2、3、4、5、6、7、8、9或10或更多个该循环的方案。对于60千克的人而言，剂量的例子包括以4.5-10.8mg/60kg/天(等于75-180)ig/kg/天)的起始剂量、随后以44-97mg/60kg/天(等于0.7-1.6mg/kg/天)的有效剂量或72-274mg/60kg/天(等于1.2-4.6mg/kg/天)的有效剂量施用本文所定义的式(I)化合物，但是，如果需要，可以施用更高或更低的剂量。对于任何给定的体重，按比例换算mg/kg剂量。在一个具体的给药计划表中，患者将被每天给予一小时式(I)化合物的输液，给药长达10天，特别是长达一周5天，且以所需时间间隔如两到四周、特别是每三周一次进行重复治疗。更具体地，患者可被每天给予一小时式(I)化合物的输液达5天，且每三周一次进行重复治疗。在另一个具体的给药计划表中，患者被给予30分钟到1小时的输液，然后给予可变时期例如l-5小时例如3小时的维持输注。在另一个具体的给药计划表中，患者被给予12小时到5天的连续输注，特别是24小时到72小时的连续输注。最后，所施用化合物的量和所用组合物的类型应当与疾病的性质或待治疗的生理情况相称，且应由医师来决定。本文所定义的式(I)化合物和其亚组可作为单一治疗剂纟皮施用，或者它们可与另外的其它用于治疗特定疾病状态例如肿瘤性疾病如上文所定义的癌症的化合物之——起以组合治疗方式施用。其它可与本发明的化合物一起(无论是同时还是以不同的时间间隔)施用或使用的治疗剂或疗法的例子包括但不限制于拓朴异构酶抑制剂、烷化剂、抗代谢物、DNA结合剂、微管抑制剂(;敝管蛋白靶向剂)、单克隆抗体和信号转导抑制剂，具体的例子有顺铂、环磷酰胺、阿霉素、伊立替康、氟达拉滨、5FU、紫杉烷类、丝裂霉素C和放射疗法。对于与其它治疗组合的CDK抑制剂的情况，可以以各自不同的剂量计划并经由不同的途径给予两种或两种以上疗法。在式(I)化合物与一、二、三、四或更多种(优选一或二种，更优选一种)其它治疗剂组合施用的情况下，化合物可同时或相继施用。当相继施用时，它们可以以近距离的时间间隔(例如历经5-10分钟的时间)或以更长的时间间隔(例如间隔l、2、3、4或更多小时，或者如果需要间隔更长时间)施用，精确的剂量方案与治疗剂的性质相称。对于与其它治疗组合的CDK抑制剂的情况，可以以各自不同的剂量计划并经由不同的途径给予两种或两种以上疗法。在式(I)化合物与一、二、三、四或更多种(优选一或二种，更优选一种)其它治疗剂组合施用的情况下，化合物可同时或相继施用。当相继施用时，它们可以以形巨离的时间间隔(例如历经5-10分钟的时间)或以更长的时间间隔(例如间隔l、2、3、4或更多小时，或者如果需要间隔更长时间)施用，精确的剂量方案与治疗剂的性质相称。本发明的化合物也可与非化疗疗法如放射疗法、光动力疗法、基因疗法；手术和控制饮食一起施用。对于与另一种化疗剂的組合治疗，可将式(I)化合物和一、二、三、四或更多其它治疗剂例如一起配制成含有一、二、三、四或更多种治疗剂的剂型。在一个供选择的方案中，各治疗剂可被分开配制并且以药盒的形式一起提供，所述药盒任选地具有它们的使用说明书。本领域技术人员通过他或她的普通常识可了解所用的给药方案和组合治疗。诊断方法在施用式(I)化合物之前，筛选患者以确定该患者正在患有或可能罹患的疾病状态或病症是否对采用抗细胞周期蛋白依赖性激酶活性的化合物所进行的治疗敏感。例如，可分析取自患者的生物样本以确定该患者正在患有或可能罹患的病症或疾病如癌症是否是以导致CDK过度活化或导致正常CDK活性通路增敏的基因异常或蛋白质表达异常为特征的疾病或病症。导致CDK2信号的活化或增敏的这类异常的例子包括细胞周期蛋白E的上调(HarwellRM，MullBB，PorterDC，KeyomarsiK.;JBiolChem.2004年3月26日；279(13):12695-705)或p21或p27缺失，或存在CDC4变体(RajagopalanH，JallepalliPV，RagoC，VelculescuVE，KinzlerKW,VogelsteinB，LengauerC.;Nature.2004年3月4日；428(6978):77-81)。具有CDC4突变或细胞周期蛋白E的上调特别是过表达或者p21或p27缺失的肿瘤对CDK抑制剂特别敏感。术语"上调"包括表达升高或过表达，包括基因扩增(即多个基因拷贝)和转录效应以及高活性和活化(包括突变导致的活化)导致的表达增加。因此，可对患者进行诊断测试以检测细胞周期蛋白E上调或者p21或p27缺失或者存在CDC4变体的标记性特点。术语"诊断"包括篩选。我们用"标记"一词包括基因标记，包括例如测定DNA组成以鉴定CDC4的突变。术语"标记"还包括体现细胞周期蛋白E上调特点的标记，包括酶活性、酶水平、酶状态(例如是否磷酸化)和前述蛋白质的mRNA水平。具有细胞周期蛋白E上调或p21或p27缺失的肿瘤可能对CDK抑制剂特别敏感。可在治疗之前优先对胂瘤针对细胞周期蛋白E的上调或者p21或p27的缺失进行篩选。因此，可对患者进行诊断性测试以检测细胞周期蛋白E上调或p21或p27缺失的标记性特点。诊断测试通常用选自肿瘤活检样品、血液样品(脱落的肿瘤细胞的分离和富集)、粪便活检、痰、染色体分析、胸膜液、腹膜液或尿的生物样本上进行。Rajagopalan等人已发现(Nature.2004年3月4日；428(6978):77-81)在人结肠直肠癌和子宫内膜癌中CDC4(也称为Fbw7或Archipelago)存在突变(Spruck等人，CancerRes.2002年8月15日；62(16):4535-9)。携带CDC4突变的个体的鉴定意味着该患者特别适于用CDK抑制剂进行治疗。可在治疗之前优先针对CDC4变体的存在对肺瘤进行筛选。篩选方法通常涉及直接测序、寡核苷酸^:阵列分析或突变体特异性抗体。鉴定和分析蛋白质的突变和上调的方法是本领域技术人员公知的。筛选方法包括但不限制于标准方法如逆转录酶多聚酶链式反应(RT-PCR)或原位杂交。在使用RT-PCR进行的篩选中，肿瘤中的mRNA水平是通过产生mRNA的cDNA拷贝继而用PCR扩增cDNA来评价的。PCR扩增的方法、引物的选择和扩增条件是本领域技术人员已知的。核酸操作和PCR才艮据标准方法进行,如例如Ausubd，F.M.等人，CurrentProtocolsinMolecularBiology,2004，JohnWiley&SonsInc.,或Iimis，M.A.等人，PCRProtocols:aguidetomethodsandapplications,1990,AcademicPress,SanDiego中所述。涉及核酸技术的反应和操作在Sambrook等人，2001，第3版，MolecularCloning:ALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratoryPress中也有描述。或者，可使用RT-PCR的可商购获得的试剂盒(例如RocheMolecularBiochemicals)，或美国专利No.4,666,828;4，683，202;4，801，531;5，192，659、5,272,057、5,882,864和6,218,529中所述的方法，将它们引入本文作为参考。评价mRNA表达的原位杂交技术的一个例子是焚光原位杂交(FISH)(参见Angerer，1987Meth.EnzymoL，152:649)。通常，原位杂交包含下列主要步骤(l)固定待分析的组织；(2)对样品进行预杂交处理以增加目标核酸的可接近性和减少非特异性结合；(3)将核酸混合物与生物结构或组织中的核酸杂交；(4)进行杂交后洗涤以除去杂交中未结合的核酸片段，和(5)检测杂交的核酸片段。在这类应用中使用的探针通常是标记的，例如用放射性同位素或荧光指示剂进^f亍标记。优选的探针应足够长，例如，约50、100或200个核苷酸到约1000或更多个核苷酸，以使得能在严格条件下与目标核酸进行特异性杂交。进行FISH的标准方法在Ausubel，F.M.等人，CurrentProtocolsinMolecularBiology,2004，JohnWiley&SonsIneandFluorescenceInSituHybridization:TechnicalOverviewbyJohnM.S.BartlettinMolecularDiagnosisofCancer,MethodsandProtocols,第2版；ISBN:1-59259-760-2;2004年3月，第077-088页；Series:MethodsinMolecularMedicine中有描述。或者，可通过紳瘤样品的免疫组织化学、使用微量滴定板的固相免疫分析、蛋白质印迹法、二维SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、ELISA、流式细胞术和本领域用于检测特异性蛋白质的已知方法分析由mRNA表达的蛋白质产物。检测方法包括使用位点特异性抗体。本领域技术人员应了解所有这类已知的用于检测细胞周期蛋白E的上调或p21或p27的缺失或CDC4变体的技术均可适用于本情况。因此，所有这些技术也可用于鉴定特别适合用本发明的化合物治疗的肿瘤。具有CDC4突变或细胞周期蛋白E的上调、特别是过表达或p21或p27缺失的肿瘤可能对CDK抑制剂特别敏感。优先在治疗前针对细胞周期蛋白E的上调、特别是过表达(HarwellRM，MullBB,PorterDC，KeyomarsiK.;JBiolChem.2004年3月26日;279(13):12695-705)或p21或p27缺失或CDC4变体对肿瘤进行筛选(RajagopalanH，JallepalliPV，RagoC，VelculescuVE，KinzlerKW，VogelsteinB，LengauerC.;Nature.2004年3月4曰;428(6978):77-81)。可用本文概述的诊断测试选择患有套细胞淋巴瘤(MCL)的患者以用本发明的化合物进行治疗。MCL是非霍奇金淋巴瘤的一种特殊的临床病理学实体，其特征在于具有CD5和CD20共表达的小到中等大小的淋巴细胞增殖、侵袭性的和不可治愈的临床病程和频繁的t(ll;14)(ql3;q32)易位。在套细胞淋巴瘤(MCL)中发现的细胞周期蛋白DlmRNA的过表达是一种重要的诊断标记。Yatabe等人(Blood.2000年4月1日；95(7):2253-61)提议应包括细胞周期蛋白Dl-阳性作为MCL的标准之一，并提议应以该新标准为基础探究这种不能治愈的疾病的创新疗法。Jones等人(JMolDiagn.2004年5月；6(2):84-9)开发了一种用于细胞周期蛋白D1(CCND1)表达的实时定量逆转录PCR分析以帮助诊断套细胞淋巴瘤(MCL)。Howe等人(CIinChem.2004年1月；50(l):80-7)使用实时定量RT-PCR评估细胞周期蛋白DlmRNA的表达并且发现标准化至CD19mRNA的细胞周期蛋白DlmRNA的定量RT-PCR可用于在血液、骨髓和组织中诊断MCL。或者，可使用上文概述的诊断测试选择患有乳腺癌的患者以用CDK抑制剂进行治疗。肿瘤细胞通常过表达细胞周期蛋白E并且已显示细胞周期蛋白E在乳腺癌中过表达(Harwell等人，CancerRes，2000，60，481-489)。因此，特别是乳腺癌可以用本文所提供的CDK抑制剂进行治疗。抗真菌用途在另一方面，本发明提供了如本文所定义的式(I)化合物和其亚組作为抗真菌剂的用途。如本文中所定义的式(I)化合物和其亚组可用于动物医学(例如用于哺乳动物例如人的治疗)，或用于植物的处理(例如农业和园艺)，或作为一般性的抗真菌剂，例如作为防腐剂和消毒剂。在一个具体实施方案中，本发明提供了用于预防或治疗哺乳动物例如人的真菌感染的如本文中所定义的式(I)化合物和其亚组。还提供了如本文中所定义的式(I)化合物和其亚组在制造用于预防或治疗哺乳动物例如人的真菌感染的药品中的用途。例如，本发明的化合物可对患有或有感染危险的由念珠菌属(C"wAV/fl)、发裤菌属(7V/c/^p/^to")、小孢子菌属(iWcnwpo/7/附)或表皮癣菌属(五/7/V/emi/o/7/^(m)等生物体引起的局部真菌感染，或由白色念珠菌(Orn力'^fl/Wc"附)引起的粘膜感染(例如鹅口疮和阴道念珠菌病)的人类患者给药。也可给予本发明的化合物来治疗或预防由例如白色念珠菌、新型隐J求菌(OjptoCOCC附MW/。/7MflW5)、黄曲霉(/45/^/^///WSy7tfV附)、烟曲霉(/45/7Cgi7/"s/"iw/g"f"s)、球孢子菌属(OcciVZ/oW^)、S'J球孑包子菌属(Pflnic"oc"V//0/fifes)、纟且纟只月包浆菌属(/fto//flS附")或芽生菌属(B/"sto加j;ces)51起的全身性真菌感染。在另一方面，本发明提供了农业(包括园艺)用途的抗真菌组合物，其包含如本文所定义的式(I)化合物和其亚组及农业上可接受的稀释剂或载体。本发明进一步提供了一种治疗或处理患有真菌感染的动物(包括哺乳动物例如人)、植物或种子的方法，该方法包括用有效量的如本文所定义的式(I)化合物和其亚组处理所述动物、植物或种子或所述植物或种子所在的地点。本发明还提供了一种治疗植物或种子真菌感染的方法，该方法包括用抗真菌有效量的包含本文所定义的式(I)化合物和其亚组的杀真菌組合物处理植物或种子。可使用差异筛选分析来选择对非人类CDK酶具有特异性的本发明化合物。特异性地作用于真核病原体的CDK酶的化合物可用作抗真菌或抗寄生虫剂。念珠菌属CDK激酶抑制剂CKSI可用于治疗念珠菌病。抗真菌剂可用于对抗前面所定义的感染类型或常发生于虛弱和免疫抑制的患者例如患有白血病和淋巴瘤的患者、接受免疫抑制剂治疗的人和患有素因性病症例如糖尿病或AIDS的患者、以及非免疫抑制的患者中的机会感染。本领域所述的分析法可用于筛选可能用于抑制至少一种与真菌病例如念珠菌病、曲霉病、毛霉病、芽生菌病、地霉病、隐球菌病、着色芽生菌病、球孢子菌病、分生孢子菌病(conidiosporosis)、组织胞浆菌病、足分枝菌病、鼻孢子菌病、诺卡菌病、假放线菌病、青霉病、念珠菌病(monoliasis)或孢子丝菌病有关的真菌的药物。所述差异篩选分析可用于鉴定在曲霉病的治疗中可能具有治疗价值的抗真菌剂，所述分析利用克隆于酵母例如烟曲霉(」5/^/^///"5/"附/g"似力、黄曲霉(/45/7e"g/,/附/7flVWS)、黑曲霉(/^5/^/^///"5"/ge尸)、构巢曲霉(/ls/7cg/〃附mV/w/fl"s)或土曲霉(^5pw7/"5",e,mw)的CDK基因，或当霉菌感染为毛霉病(muconnycosis)时，CDK分析可衍生自酵母例如无根根霉(及A&o/;"s"rr/^附)、米根霉(i/^，附oo^"e)、伞枝犁头霉(J65iV//flcor戸6^m)、分枝隼头霉(^4^siV//flrfl柳5")或微小毛霉(MMcor/;Mw7/"s)。其它CDK酶的来源包括病原体卡氏肺嚢虫(iV^"w^"他举例而言，化合物的抗真菌活性的体外评价可通过测定最小抑菌浓度(M.I.C.)来进行，它是使特定微生物在合适的培养基中无法生长的待测化合物浓度。在实践中，向一系列各自掺入特定浓度测试化合物的琼脂平板接种例如白色念珠菌的标准培养物，然后将每一平板在37'C下温育适宜时间。然后检查平板上是否有真菌的生长，记录适宜的M.I.C.值。或者，可在液体培养基中进行浊度分析，概述该分析方法的例子的方案可参见下面的实施例。化合物的体内评价可在一系列的剂量水平下通过向已经接种真菌、例如白色念珠菌或黄曲霉菌林的小鼠皿内或静脉内注射或者口服给药来进行。化合物的活性可通过监测治疗和未治疗的小鼠组真菌感染的生长进行评估(通过组织学或通过取得来自感染的真菌)。活性可根据化合物提供50%防止感染致死效果的剂量水平(PDs())来测定。对于人类抗真菌用途而言，如本文所定义的式(I)化合物和其亚组可单独地或与根据预期给药途径和标准药学实践所选择的药物载体混合给药。因此，例如，可采用在上述"药物制剂"一节中所述的制剂经口服、胃肠外、静脉内、肌内或皮下给药。就对人类患者口服和胃肠外给药而言，本发明的抗真菌化合物的日剂量水平为0.01至10mg/kg(分开的剂量)，这取决于化合物经口服或胃肠外途径给药时的效力。化合物的片剂或胶嚢剂可例如含有5mg至0.5g活性化合物，每次酌情给药一片(粒)、两片(粒)或多片(粒)。无论如何，医师将确定最适合于个体患者的实际剂量(有效量)，其将因特定患者的年龄、体重和响应而异。或者，抗真菌化合物可以以栓剂或阴道栓的形式给药，或者它们可以以洗剂、溶液、霜剂、软膏剂或撒粉的形式局部施用。例如，它们可被掺入由聚乙二醇或液体石蜡的水性乳液组成的霜剂中；或者它们可被掺入由白蜡或白软石蜡基质以及根据需要加入的稳定剂和防腐剂组成的软膏剂中，浓度为1至10%。除上述治疗用途之外，用该差异筛选分析法所开发的抗真菌剂还可用作食品中的防腐剂、促进家畜重量增加的饲料添加剂，或用于处理非生命物质的消毒制剂，例如用于消毒医院设备和房间。以相似的方式，并列比等人，(1994)FEBSLett356:317-21)，将可以从本发明化合物中选择出可区别人/哺乳动物和昆虫的酶的抑制剂。因此，本发明明确地包括本发明化合物在杀虫剂中的用途和制剂，例如用于昆虫如果蝇的处理。在另一个实施方案中，可根据植物CDK相对于哺乳动物酶的抑制特异性选择某些受试的CDK抑制剂。例如，将植物CDK布置在含有一种或多种人酶的差异筛选分析中，以选择对植物酶抑制的选择性最高的那些化合物。因此，本发明具体包括用于农业应用的本发明CDK抑制剂的制剂，例如落叶剂等形式。对于农业和园艺目的而言，本发明化合物可配制成适合于特定用途和预期目的的组合物形式。因此，化合物可以以撒粉剂或颗粒剂、拌种剂、水溶液、M液或乳液、浸液、喷雾剂、气溶胶或烟雾剂的形式施用。组物也可以以^:粉剂、颗粒剂或颗粒，或用前稀释的浓缩液的形式提供。这些组合物可包含那些在农业和园艺中已知和可接受的常规载体、稀释剂或助剂，且它们可根据常规方法制造。该组合物也可掺入其它活性成分，例如，具有除草或杀虫活性的化合物或另一种杀真菌剂。化合物和组合物可以以多种方式施用，例如它们可直接地施用至植物叶片、茎、枝、种子或根，或可施用到土壤或其它成长介质，且它们不仅可以根除疾病，而且可预防性地保护植物或种子不受攻击。举例而言，该组合物可包含0.01到1重量％的活性成分。对于田间使用，活性成分的可能施用率为50到5000克/公顷。真菌和处理植物生长的土壤、育秧稻田或灌溉用水的用途。本发明还包括生真菌感染的用途。实施例现在参照下列实施例中所述的具体实施方案非限制性地阐述本发明。在实施例中，使用下列缩写。AcOH乙酸BOC叔丁氧基羰基CDIl，l-羰基二咪唑DMAW90溶剂混合物DCM:MeOH、AcOH、H2O(90:18:3:2)DMAW120溶剂混合物DCM:MeOH、AcOH、H2O(120:18:3:2)DMAW240溶剂混合物DCM:MeOH、AcOH、H2O(240:20:3:2)DCM二氯甲烷DMF二曱基曱酰胺DMSO二曱亚砜EDCl-乙基-3-(3，-二甲氨基丙基)-碳二亚胺Et3N三乙胺EtOAc乙酸乙酯Et20乙醚HOAt1-羟基氮杂苯并三唑HOBt1-羟基苯并三唑MeCN乙腈MeOH甲醇P.E.石油醚Si。2硅胶TBTUN，N，N，，N，-四曱基-O-(苯并三唑-l-基)脲四氟硼酸盐THF四氢吹喃分析型LC-MS系统和方法说明在这些实施例中，所制备的化合物是通过使用下述系统和操作条件的液相色谱和质谱法定性的。当存在具有不同同位素的原子并且引用了单一质量时，对化合物所引用的质量为单同位素质量(也就是"C1;"Br等等)。使用如下所述的多个系统，这些系统装配有并且在非常相似的操作条件下进行。所用的操作条件描述于下。WatersPlatformLC-MS系统HPLC系统Waters2795质谱检测器MicromassPlatformLCPDA检测器Waters2996PDA分析的酸性条件洗脱液A:H20(0.1%甲酸)洗脱液B:CH3CN(0.1%甲酸)梯度5-95。/。洗脱液B，历经3.5分钟流速0.8ml/分钟柱子PhenomenexSynergi4nMAX-RP80A，2.0x50mm分析的长酸性条件洗脱液A:H20(0.1%曱酸)洗脱液B:CH3CN(0.1%甲酸)梯度05-95Q/。洗脱液B，历经15分钟流速0.4ml/分钟柱子PhenomenexSynergi4jiMAX曙RP80A，2.0x150mmPlatformMS条件毛细管电压锥电压来源温度扫描范围离子化模式3.6kV(在负ES时为3.40kV)25V120QC100-800amu正电喷雾或负电喷雾或正&负电喷雾WatersFractionlynxLC-MS系统HPLC系统2767自动进样器-2525二梯度泵质^普检测器WatersZQPDA检测器Waters2996PDA分析的酸性条件洗脱液A:H20(0.1%甲酸)洗脱液B:CH3CN(0.1%甲酸)梯度5-95。/。洗脱液B，历经4分钟流速2.0ml/分钟柱子PhenomenexSynergi4jiMAX-RP80A，4.6x50mmFractioiilynxMS条件毛细管电压3.SkV(在负ES时为3JkV)锥电压25V(在负ES时为30V)来源温度120°C扫描范围100-800amu离子化模式正电喷雾或负电喷雾或正&负电喷雾质量指示纯化的LC-MS系统制备型LC-MS是一种用于纯化有机小分子例如本文所述化合物的标准且有效的方法。可以改变液相色语(LC)和质语(MS)的方法，以使粗品更好地分离和提高MS对样品的检测。制备型梯度LC方法的优化包括改变柱子、挥发性洗脱剂和改性剂以及梯度。优化制备型LC-MS方法的方法为本领域公知，采用它来纯化化合物。这类方法描述于RosentreterU，HuberU.;OptimalfractioncollectinginpreparativeLC/MS;JCombChem.;2004;6(2)，159-64和LeisterW，StraussK，WisnoskiD，ZhaoZ，LindsleyC.，Developmentofacustomhigh-throughputpreparativeliquidchromatography/massspectrometerplatformforthepreparativepurificationandanalyticalanalysisofcompoundlibraries;JCombChem.;2003;5(3);322-9中。一个经由制备型LC-MS来纯化化合物的这类系统如下所述，但本领域技术人员可以理解，可以使用与所述的系统和方法不同的其它系统和方法。具体而言，可利用基于正相制备型LC的方法代替此处所述的反相方法。大部分制备型LC-MS系统利用反相LC和挥发性的酸性改性剂，因为该方法对于小分子的纯化非常有效且洗脱剂与阳离子电喷雾质谦分析法相容。也可采用其它色谱方案，例如上迷分析方法中概述的正相LC、交替緩沖流动相、碱性改性剂等来纯化这些化合物。制备型LC-MS系统WatersFractionlynx系统.硬件2767双回路自动进样器/级分收集器2525制备泵用于柱选择的CFO(色镨柱流体组织器(fluidicorganiser))RMA(Waters试剂管理器)，作为补充泵(makeuppump)WatersZQ质谱仪Waters29%光敏二极管阵列检测器WatersZQ质i普仪.软件.-Masslynx4.0.WatersMS操作条件毛细管电压3.5kV(在负ES时为3.2kV)锥电压25V来源温度120。C放大器500V扫描范围125-800amu离子化模式正电喷雾或负电喷雾Agilent1100LC-MS制备系统.硬件自动进样器1100系列"prepALS"泵用于制备型液流梯度的1100系列"Pr印Pump"和用于向制备型液流中泵送改性剂的1100系列"QuatPump"UV检测器1100系列"MWD，，多波长检测器MS检测器1100系列"LC-MSDVL"级分收集器2x"Pr印-FC，，补充泵"WatersRMA"Agilent主动式分接器.软件Chemstation:Chem32.AgilentMS操作条件毛细管电压4000V(在负ES时为3500V)裂解电压/增益150/1干燥气体流速13.0升/分钟气体温度350°C雾化器压力50psig扫描范围125-800amu离子化模式正电喷雾或负电喷雾色谱条件.柱子1.低pH色i脊法PhenomenexSynergyMAX-RP,lOp,100x21.2mm(或者对于较大极性的化合物使用ThermoHypersil-KeystoneHyPurityAquastar,5|i,100x21.2ram)2.高pH色i脊法PhenomenexLunaCI8(2)，IOjli，100x21.2mm(或者使用PhenomenexGemini,5)a,100x21.2mm).洗脱液1.低pH色镨法溶剂A:H20+0.1%甲酸，pH1.5溶剂B:CH3CN+0.1%甲酸2.高pH色i普法溶剂A:H20+10mMNH4HOH+NH4OH,pH=9.2溶剂B:CH3CN3.补充溶剂MeOH+0.2%甲酸(用于两种色谞法类型).方法根据分析结果，选择最合适的制备型色i普法类型。通常的惯例是使用最适合于化合物结构的色谱法类型(低或高pH)来进行分析型LC-MS。一旦分析结果证实为良好的色镨法，选择一种相同类型的合适的制备方法。低和高pH色i普方法的通常运行条件为流速24ml/分钟梯度通常，所有梯度均具有使用95。/。A+5。/。B的最初0.4分钟的步骤。然后根据分析结果，选择3.6分钟梯度以便获得良好的分离(例如用于早期保留化合物的从5%到50%B;用于中间保留化合物的从35%到80%B等等)。洗涤在梯度结束时进行1.2分钟的洗涤步骤再平衡进行2.1分钟的再平衡步骤以制备用于下一次运行的系统补充流速lml/分钟.溶剂所有化合物通常溶解在100%MeOH或100%DMSO中。从所提供的信息，本领域技术人员能够通过制备型LC-MS纯化本文所述的化合物。各实施例的原料均有市售，除非另有说明。实施例11A,4-硝基-111-吡唑-3-甲酸甲酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage60</formula>在室温下将亚硫酰氯(2.90ml，39.8mmol)緩慢加至4-硝基-3-吡唑曱酸(5.68g，36.2mmol)在MeOH(100ml)中的混合物中并搅拌混合物48小时。在真空中浓缩混合物并通过与曱苯共沸干燥得到白色固体状的4-滩基-111-吡唑-3-甲酸曱酯。^匪R(400MHz,DMSO-d6)514.4(s，1H)，8.9(s，1H)，3.9(s，3H)。1B.4-氨基-lH-吡唑-3.甲酸曱酯在氢气氛下搅拌4-硝基-lH-吡唑-3-甲酸甲酯和10。/。Pd/C在EtOH中的混合物20小时。通过硅藻土塞过滤混合物，在真空中浓缩并通过与曱苯共沸干燥得到4-氨基-lH-吡唑-3-曱酸曱酯。&匪R(400MHz,MeOD)57.2(s，1H)，3.9(s，3H)。1C.4-g6-二氯-苯曱酰氨基MH-吡唑-3-曱酸将2，6-二氯苯曱酰氯(8,2g;39.05mmol)小心地加到4-氨基-lH-吡唑-3-甲酸甲酯(5g;35.5mmol)和三乙胺(5.95ml;42.6mmol)在二恶烷(50ml)中的<formula>formulaseeoriginaldocumentpage60</formula>溶液中，然后在室温下搅拌5小时。过滤反应混合物，用甲醇(50ml)和2M氢氧化钠溶液(100ml)处理滤液，于50'C下加热4小时，然后蒸发，将100ml的水加至残余物中，然后用浓盐酸酸化。通过过滤收集固体，用水(100ml)洗涤并抽干得到10.05g淡紫色固体状的4-(2，6-二氯-苯甲酰氨基)-lH-吡唑-3-曱酸。(LC/MS:Rt2.26，[M+H+300/302)。ID.44-(2,6-二氯-苯甲酰氨基)-lH-吡唑-3-羰基卜氨基V哌啶-l-甲酸叔丁II在室温下搅拌4-(2，6-二氯-苯甲酰氨基)-lH-吡唑-3-甲酸(6.5g，21.6mmo1)、4-氨基-l-BOC-哌咬(4.76g，23.8mmo1)、EDC(5.0g，25.9mmo1)和HOBt(3.5g，25.9mmol)在DMF(75ml)中的混合物20小时。在真空中浓缩反应混合物，将残余物在乙酸乙酯(100ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(100ml)之间进行分配。用盐水洗涤有机层，干燥(MgS04)并在真空中浓缩。将残余物溶解在50/。MeOH-DCM(30ml)中。通过过滤收集不溶物，用DCM洗涤并真空干燥得到白色固体状的4-U4-(2,6-二氯-苯甲酰氨基)-lH-吡唑-3-羰基卜氨基}-哌啶-1-甲酸叔丁酯(5,38g)。在真空中浓缩滤液并通过柱色谱使用梯度洗脱1:2EtOAc/己烷到EtOAc纯化残余物另外得到白色固体状的4-{[4-(2，6-二氯-苯甲酰氨基)-lH-吡唑-3-羰基l-氨基p底咬-l-甲酸叔丁酯(2.54g)。IE.4-(2,6-二氯-苯甲酰氨基)-111-吡唑-3-曱酸哌啶-4-基酰胺盐酸盐用饱和HCl-EtOAc(40ml)处理4-(4-(2，6-二氯-苯甲酰氨基)-lH-吡唑-3-羰基-氨基卜哌咬-l-甲酸叔丁酯(7.9g)在MeOH(50ml)和EtOAc(50ml)中的溶液然后在室温下搅拌过夜。由于甲醇的存在，产物没有结晶，因此蒸发反应混合物，将残余物与EtOAc—起研磨。通过过滤收集所得白色固体，用EtOAc洗涤并在过滤器(sinter)上抽千得到6.3g4-(2，6-二氯-苯甲酰氨基HH-吡唑-3-甲酸哌啶-4-基酰胺盐酸盐。(LC/MS:Rt5.89，[M+H+:382腦)。1F.4-(2,6-二氯-苯甲酰氨基)-lH-吡唑-3-甲酸f1-甲烷磺酰基-哌啶-4-基)-酰垒<formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>将二异丙基乙胺(2.211111101)加入4-(2，6曙二氯-苯甲酰氨基)画lH曙吡唑-3陽曱酸哌啶-4-基酰胺盐酸盐(lmmol)在乙腈(10ml)中的混合物中，接着加入甲烷磺酰氯(lmmol)。将混合物在室温下搅拌16小时然后在真空中浓缩。将残余物在乙酸乙酯和水之间进行分配，分离各层并用盐水洗涤有机部分，干燥(MgS04)并在真空中浓缩得到标题化合物。IM+H广460Rt2.67。LC/MS.r.t.2.67分钟；m/z460.11^NMR:(400MHz，DMSO-d6)513.51(s，1H)，10.20(s,1H)，8.50(d,J-8.0Hz，1H)，8.41(s，1H)，7.66-7.56(m，3H)，3.95-3.89(m，1H)，3.61(d，J=12.0Hz,2H)，2.92(s，3H)，2.84(t,J=12.0Hz,2H)，1.89-1.86(m，2H)，1.79-1.70(m2H)实施例24-(2,6-二氯-苯甲酰氨基〗-111-吡唑-3-曱酸(l-异丙基磺酰基-哌咬-4-基)-酰胺<formula>formulaseeoriginaldocumentpage63</formula>标题化合物按照实施例1中所描述的方法但是用异丙基磺酰氯代替甲烷磺酰氯且通过制备型LC/MS纯化而制得。r丄2.83分钟；m/z488.22。iHNMR:(400MHz，DMSO画d6)513.42(s,1H)，10.16(s,1H)，8.46(d，J=8.0Hz，1H)，8.35(s，1H)，7.60-7.51(m，3H)，3.92-3.87(m，1H)，3.65(d，J=12.0Hz，2H)，3.35-3.27(m，1H)，2.95(t，J-12.0Hz,2H)，1.80-1.76(m，2H)，1.66-1.59(m，2H)，1.22(d，J=8.0Hz，6H)实施例34-(2,6-二氯-苯曱酰氨基)-lH-吡唑-3-甲酸(l-乙基-磺酰基-哌啶-4-基V酰胺<formula>formulaseeoriginaldocumentpage63</formula>标题化合物按照实施例1中所描述的方法但是用乙基磺酰氯代替甲烷磺酰氯且通过用P.E.-EtOAc(1:1-0:1)洗脱的柱色语法纯化而制得。r.t.2.74分钟；m/z474.17。醒R(400MHz，DMSO-d6)513.45(s，1H)，10.17(s，1H)，8.51(d，J二8.0Hz，1H)，8.37(s，1H)，7.60-7.51(m，3H)，3.91-3.85(m，1H)，3.61(d，J=12.0Hz，2H),3.04(q，J=8.0Hz，2H)，2.86(t，J=12.0Hz，2H)，1.80画1.78(m，2H),1.69-1.60(m，2H)，1.21(t，J=8.0Hz,3H)实施例44-(2，6-二氯-苯曱酰氨基)-lH-吡唑-3-曱酸(l-丙基-磺酰基-哌啶-4-基)-酰胺<formula>formulaseeoriginaldocumentpage64</formula>标题化合物按照实施例1中所描述的方法但是用丙烷磺酰氯代替甲烷磺酰氯且通过制备型LC/MS纯化而制得。r.t.3.11分钟；m/z488.18。H画R:(400MHz，DMSO-d6)S13.42(s，1H)，10.15(s，1H)，8.46(d，J=8.0Hz，1H)，8.36(s，1H)，7.60-7.51(m，3H)，3.91-3.84(m，1H)，3.60(d，J=12.0Hz，2H)，3.00(t,J=8.0Hz,2H)，2.85(t，J=12.0Hz，2H)，1.82-1.78(m，2H)，1.72-1.62(m，4H)，0.99(t，J=8.0Hz，3H)。生物活性实施例5活化的CDK2/细胞周期蛋白A激酶抑制活性(ICgg)的测定采用以下方案测定本发明化合物的激酶抑制活性。将活化的CDK2/细胞周期蛋白A(Brown等人，Nat.CellBiol.，1，pp438-443，1999;Lowe,E.D.，等人Biochemistry,41，pp15625-15634，2002)在2.5倍强度测定緩沖液(50mMMOPSpH7.2，62.5mM卩-磷酸甘油，12.5mMEDTA，37.5mMMgCl2，112.5mMATP，2,5mMDTT，2.5mM原钒酸钠，0.25mg/ml牛血清白蛋白)中稀释至125pM，取与10^1的组蛋白底物混合物(60pl牛组蛋白HI(UpstateBiotechnology,5mg/ml)、940WH20、35jiCi/3p-ATP)混合，与5jil测试化合物在DMSO(最多2.5%)中的不同稀释液一起加至96孔板中。使反应进行2至4小时，然后用过量正磷酸(5jU，2%)终止反应。在MilIiporeMAPH过滤板上，从磷酸化组蛋白Hl中分离出未结合到组蛋白Hl中的/3P-ATP。将MAPH板的小孔用0.5%正磷酸湿润，然后用Millipore真空过滤系统通过这些孔过滤反应产物。过滤之后，用200nl的0.5%正磷酸洗涤残余物两次。将过滤器干燥后，加入的Microscint20闪烁剂，然后在PackardTopcount上计数30秒。计算CDK2活性的百分抑制率并绘图，以测定待测化合物抑制50%的CDK2活性所需要的浓度CIC别)。实施例6活化的CDKl/细胞周期蛋白B激酶抑制活性(IC^)的测定CDKl/细胞周期蛋白B测定法与上述CDK2/细胞周期蛋白A相同，除了使用CDKl/细胞周期蛋白B(UpstateDiscovery)和将该酶稀释到6.25nM之外。本发明的化合物具有小于20|^M的ICs。值或在lOpM的浓度时提供对CDK2活性至少50%的抑制作用。在CDK2或CDK1测定法中，本发明的优选化合物具有小于lnM的ICso值。实施例7GSK3-B激酶抑制活性分析将GSK3-卩(UpstateDiscovery)在25mMMOPS，pH7.00、25mg/mlBSA、0.0025Q/oBrij-35、1.25%甘油、0.5mlEDTA、25mMMgCl2、0.025%P-巯基乙醇、37.5mMATP中稀释至7.5nM，取lOjil与10^1底物混合物混合。GSK3-P的底物混合物为溶于lml含35pCiy33P-ATP的水中的12.5|iM礴酸化糖原合成酶肽-2(UpstateDiscovery),将酶和底物以及5pl供试化合物在DMSO(至多2.5%)中的各种稀释液一^口入到96孔板中。使反应进行3小时(GSK3-P)，然后用过量正磷酸(5[11，2%)终止。过滤操作方法同上文活化的CDK2/细胞周期蛋白A测定法。实施例8抗增殖活性本发明化合物的抗增殖活性可通过测量化合物对多种细胞系的细胞生长的抑制能力来测定。细胞生长抑制利用AlamarBlue测定法来测定(Nociari,M.M，Shalev，A.，Benias，P.，Russo，C.</7w/ww"o/<g/c"/MW/ioffc1998，213，157-167)。该方法是基于活细胞将刃天青还原为其荧光产物试卣灵的能力。对于每个增殖测定，将细胞接种在96孔板上，使其恢复16小时，然后加入抑制剂化合物达另外72小时。在温育期结束时，加入10。/o(v/v)AlamarBlue，温育另外6小时，然后在535nMex/590nMem下测定荧光产物。在非增殖细胞测定的情况下，将细胞在汇合下维持96小时，然后加入抑制剂化合物达另外72小时。如上借助AlamarBlue测定法测定活细胞数。各细胞系均从ECACC(欧洲动物细胞保藏中心，EuropeanCollectionofcellCultures)得到。具体地，用衍生自人结肠癌的HCT-116细胞系(ECACC保藏号91091005)测试本发明的化合物。在该测定法中发现许多本发明的化合物具有小于20nM的ICs。值，优选的化合物具有小于luM的ICso值。实施例9口服生物利用度的测定可如下测定式(I)化合物的口服生物利用度。将供试化合物按照以下剂量水平和剂量配方以溶液形式静脉内和口服施用于balb/c小鼠；lmg/kg，静脉内，配制在10。/oDMSO/90。/o(2-羟基丙基)-P-环糊精(25。/。w/v)中；和5mg/kg，口服，配制在10%DMSO/20°/"K/70%PEG200中。在给药后的各时间点，取血样置于肝素化试管中，收集血浆部分用于分析。在进行蛋白沉淀之后用LC-MS/MS进行分析，通过与针对供试化合物构建的标准校正曲线比较对样品进行定量。用标准方法由血浆水平-时间曲线图计算曲线下面积(AUC)。用以下方程计算百分比形式的口服生物利用度AUC口服X剂X100AUC静脉内剂量口服按照该方法，化合物4-(2,6-二氯-苯甲酰氨基)-lH-吡唑-3-甲酸(l-甲烷磺酰基-哌^-4-基)-酰胺以口服途径对小鼠给药时，具有40-50%的生物利用度。实施例10异体移植(Xenograph)研究实施例1的化合物在植入了得自人类肿瘤的细胞系的棵鼠中具有抗肿瘤作用。当以可以引起对肺瘤生物标记的抑制作用的剂量口服给药时，实施例1化合物的治疗在皮下植入的异体移植物中产生了对肿瘤生长的抑制作用。这些生物标记包括细胞周期蛋白依赖性激酶的底物例如视网膜母细胞瘤蛋白的磷酸化的抑制。实施例1的化合物在以多种不同的方案给药时(包括几个星期的长期给药)是有效的，实施例11比较实施例将实施例1的化合物(其包含2，6-二氯苯基基团)的生物活性与其2,6-二氟苯基类似物的生物活性进行比较。2，6-二氟苯基类似物在我们较早的申请PCT/GB2004/003179(公开号WO2005/012256)的实施例131中进行了描述，其具有如下结构<formula>formulaseeoriginaldocumentpage68</formula>更具体地讲，比较了化合物的抗CDK2激酶和GSK3p激酶的活性和其抑制HCT-116人结肠癌细胞增殖的能力。这些激酶抑制活性和HCT-116抑制活性是使用上述分析方法测定的，结果显示在下表中。<table>tableseeoriginaldocumentpage68</column></row><table>本申请实施例1的化合物与其二氟类似物相比具有如下优点.与其二氟类似物相比，实施例1的化合物对人结肠癌HCT-116细胞系的抗增殖效果要强6-7倍。.与其二氟类似物相比，实施例1的化合物具有更高的体外激酶(CDK2)抑制活性。.实施例1的化合物对GSK3J5的活性(0.22nM)低于其二氟-类似物(0.014nM)。.与其二氟类似物(6倍)相比，实施例1的化合物具有更高的CDK抑制/GSK3p选择性(>200倍)。药物制剂实施例12(i)片剂制剂通过以下方法制备含有式(I)化合物的片剂组合物混合50mg化合物与197mg作为稀释剂的乳糖(BP)以及3mg作为润滑剂的硬脂酸镁，用已知方法压制成片剂。(ii)胶嚢剂通过以下方法制备胶嚢剂混合lOOmg式(I)化合物与lOOmg乳糖，将所得混合物装入标准的不透明的硬明胶胶嚢内。(iii)可注射制剂I可通过以下方法制备通过注射施用的胃肠外组合物将式(I)化合物(例如盐形式的式(I)化合物)溶解在含有10%丙二醇的水中，产生1.5重量％的活性化合物浓度。然后通过过滤将溶液灭菌，装入安瓿内并密封。(iv)可注射制剂II通过以下方法制备用于注射的胃肠外组合物将式(I)化合物(例如盐形式的式(l)化合物)(2mg/ml)和甘露醇(50mg/ml)溶解在水中，将溶液无菌过滤，装入可密封的lml小瓶或安瓿内。v)可注射制剂III可通过以下方法制备用于通过注射或输注静脉内递送的制剂将式(I)化合物(例如盐形式的式(I)化合物)以20mg/ml的浓度溶解在水中。然后将小并瓦密封并高压灭菌。vi)可注射制剂IV可通过以下方法制备用于通过注射或输注静脉内递送的制剂将式(I)化合物(例如盐形式的式(I)化合物)以20mg/ml的浓度溶解在含有緩冲剂的水(例如0,2M乙酸盐pH4.6)中。然后将小瓶密封并高压灭菌。fvii)皮下注射制剂通过以下方法制备用于皮下施用的组合物混合式(I)化合物与药用级玉米油，产生5mg/ml的浓度。将组合物灭菌并装进适当容器内。viii)冷冻干燥制剂将配制的式(I)化合物的等分试样放入50ml的小瓶中并冷冻干燥。在冷冻干燥期间，在(-45。C)下使用一步冷冻方案冷冻该组合物。将温度升到-10。C以回温，然后降低至在-45。C下冷冻，接着于+25。C下初次干燥约3400分钟，继之以二次千燥，如果温度升至50。C则增加步骤。在初步和二次干燥期间，压力被设置在80毫托。(ix)固体溶液制剂将实施例1的化合物以5到50%(例如16或20%)的浓度溶解在二氯甲烷/乙醇(l:l)中，使用对应于下表中所给出的条件将溶液喷雾干燥。表中所给出的数据包括实施例1的化合物的浓度、喷雾千燥器的入口和出口温度、喷雾干燥的固体的总产率、实施例l的化合物在喷雾干燥的固体中的浓度(分析)和由喷雾干燥的固体所组成的粒度分布(P.S.D.)。<table>tableseeoriginaldocumentpage70</column></row><table>可以将实施例1的化合物和PVP的固体溶液直接装进硬明胶或HPMC(羟丙基甲基纤维素)胶嚢内，或与可药用赋形剂如增量剂、助流剂或分散剂混合。该胶嚢可含有2mg-200mg、例如10、20和80mg实施例1的化合物。实施例13抗真菌活性的测定可采用下列方法测定式(I)化合物的抗真菌活性。测试化合物对抗一组真菌的作用，包括近平滑念珠菌(Om^/a戸rjwi/仍/s)、热带念珠菌(Gmrf/rf"、白念色珠菌(OwifffV/aa仿/ams)-ATCC36082和新型隐球菌(Co^似coccwsweo/or附a附)。这些测试微生物在4'C下保存于Sabourahd葡萄糖琼脂斜面上。每一生物的单态悬浮液按照如下描述制备在27'C下、在旋转摇床上、在含有氨基酸(Difco，Detroit,Mich.)(pH7.0)和0.05M吗啉丙磺酸(MOPS)的酵母氮源液体培养基(YNB)中使酵母生长过夜。然后离心悬浮液，用0.85。/oNaCl洗涤两次，然后将经洗涤的细胞悬浮液用声波处理4秒(BransonSonifier，350型，Danbury，Conn.)。在血细胞计数器中计数单态芽生孢子，在0.85。/oNaCl中调节至所需浓度。使用液体培养基微量稀释技术的改良方法测定待测化合物的活性。将待测化合物在DMSO中稀释到1.0mg/ml的比例，然后在pH7.0的含有MOPS(使用氟康峻作为对照)的YNB液体培养基中稀释到64照/ml，以提供每种化合物的工作溶液。使用96孔板，用YNB液体培养基准备第1和3至12孔，在第2至11孔制备化合物溶液的十倍稀释液(浓度范围为64至0.125jig/ml)。第1孔用作分光光度测定的无菌对照和空白。第12孔用作生长对照。向微量板第2至11孔的各孔接种lOfil(最终接种物数目为104个生物/ml)。将经接种的板在35'C下温育48小时。用旋涡混合器(Vorte-Genie2Mixer,ScientificIndustries,Inc.，Bolemia，N.Y.)振荡板2分钟后，以分光光度法测量在420nm的吸光度(AutomaticMicroplateReader,DuPontInstruments,Wilmington,Del.)来测定IC50值。IC50终点#:定义为与对照孔相比，显示出生长减少约50%(或以上)的最低药物浓度。在浊度测定中，这被定义为小孔浊度为<50%对照的最低药物浓度(IC50)。最小溶胞浓度(MCC)通过如下方法确定在Sabourahd葡萄糖琼脂(SDA)板上移种96孔板的所有小孔，在35。C下温育1至2天，然后检查存活性。实施例14控制整抹植物体内真菌感染的生物学评价方法将式(I)化合物溶解在丙酮中，接着用丙酮连续稀释以获得所需浓度范围。依病原体而定，通过加入9体积的0.05%Tween-20TM水溶液或0.01%TritonX-10()TM获得最终处理体积。然后使用组合物采用下列方法来测定本发明化合物抗蕃茄疫病(致病疫霉(Phytophthorainfestans))的活性。使蕃茄(Rutgers品种)种子在无土的泥炭基盆栽混合物中生长直到幼苗10-20公分高。然后用100ppm比例的待试化合物喷洒该植物至流出。24小时后，测试植物用蕃茄疫病菌的孢子嚢水性悬浮液喷雾接种，并保持在露天房间过夜。然后将该植物转移到温室直到疾病在未处理的对照植物上发生。还采用类似的方法来测试本发明化合物抵抗小麦褐锈病(柄锈菌属Puccinia)、小麦(Ervsiphevraminis)和小麦(Monon品种)的白粉病、小麦叶斑病(小麦壳针孑包(Septoriatritici))和小麦颖枯病(Leptosphaerianodorum)的活性。等价方式提供上述实施例的目的在于阐述本发明，不应将其解释为对本发明范围强加任何限制。显然，可以在不背离本发明基本原理的情况下对上文所述的和实施例中所例举的本发明的具体实施方案进行各种修改和变化。所有这类修改和变化都为本申请所涵盖。权利要求1.式(I)化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>(I)或其盐、互变异构体，其中W是2，6-二氯苯基；R2a和R2b均为氢；且RS为下式的基团<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>2.根据权利要求l的化合物，其中R"是Cw烷基。3.根据权利要求2的化合物，其中R"是曱基。4.根据权利要求2的化合物，其中W是乙基。5.根据权利要求2的化合物，其中R"是正丙基。6.根据权利要求2的化合物，其中R"是异丙基。7.根据前述权利要求中任一项的化合物，其不是盐或N-氧化物的形8.根据权利要求1至6中任一项的化合物，其是盐、溶剂合物或N-氧化物的形式。9.用于预防或治疗由细胞周期蛋白依赖性激酶或糖原合成酶激酶-3介导的疾病状态或病症的根据权利要求1至8中任意一项的化合物。10.预防或治疗由细胞周期蛋白依赖性激酶或糖原合成酶激酶-3介导的疾病状态或病症的方法，该方法包括将权利要求1至8中任意一项的化合物施用给需要它的个体。11.减轻或降低由细胞周期蛋白依赖性激酶或糖原合成酶激酶-3介导的疾病状态或病症的发病率的方法，该方法包括将权利要求1至8中任意一项的化合物施用给需要它的个体。12.在哺乳动物中治疗包含或起因于异常细胞生长的疾病或病症的方法，该方法包括将抑制异常细胞生长有效量的权利要求1至8中任意一项的化合物施用给哺乳动物。13.在哺乳动物中减轻或降低包含或起因于异常细胞引起的疾病或病症的发病率的方法，该方法包括将抑制异常细胞生长有效量的权利要求l至8中任意一项的化合物施用给哺乳动物。14.在哺乳动物中治疗包含或起因于异常细胞生长的疾病或病症的方法，该方法包括将抑制cdk激酶(例如cdkl或cdk2)或糖原合成酶激酶-3活性有效量的权利要求1至8中任意一项的化合物施用给哺乳动物。15.在哺乳动物中减轻或降低包含或起因于异常细胞生长的疾病或病症的发病率的方法，该方法包括将抑制cdk激酶(例如cdkl或cdk2)或糖原合成酶激酶-3活性有效量的权利要求l至8中任意一项的化合物施用给哺乳动物。16.抑制细胞周期蛋白依赖性激酶或糖原合成酶激酶-3的方法，该方法包括使激酶与权利要求l至8中任意一项的激酶抑制性化合物接触。17.调节细胞过程(例如细胞分裂)的方法，该方法通过^f吏用权利要求l至8中任意一项的化合物抑制细胞周期蛋白依赖性激酶或糖原合成酶激酶-3的活性来实现。18.用于预防或治疗本文所述疾病状态的权利要求1至8中任意一项的化合物。19.权利要求1至8中任意一项所述的化合物在生产用于一种或多种本文所定义用途的药物中的用途。20.包含权利要求1至8中任意一项的化合物和可药用载体的药物组合物。21.适于口服给药形式的药物组合物，其包含权利要求1至8中任意一项的化合物和可药用的载体。22.用于药物中的权利要求1至8中任意一项的化合物。23.用于上述和本文其它部分所述的任何用途和方法的根据权利要求l至8中任意一项的化合物。24.—种制备权利要求1至8中任一项的化合物的方法，该方法包括将式(XVII)化合物与一种适合引入S02R"基团的磺酰化试剂(例如磺酰氯如曱烷磺酰氯)反应。25.—种诊断和治疗由细胞周期依赖性激酶介导的疾病状态或病症的方法，该方法包括(i)篩选患者以确定该患者正在患有或可能惟患的疾病状的治疗敏感；(ii)当患者的疾病或病症被指示是敏感的时，对患者施用权利要求1至8中任意一项的化合物。26.权利要求1至8中任意一项的化合物在生产用于治疗或预防患者的疾病或病症的药物中的用途，其中所迷患者已4皮检查并确定为患有对用具有抗细胞周期蛋白依赖性激酶活性的化合物进行的治疗敏感的疾病状态或病症或者有罹患这些疾病或病症的风险。27.用于抑制哺乳动物中肺瘤生长的权利要求1至8中任意一项的化合物。28.用于抑制肿瘤细胞生长(例如在哺乳动物中)的权利要求1至8中任意一项的化合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>29.抑制哺乳动物(例如人)中肿瘤生长的方法，该方法包括对哺乳动物(例如人)施用抑制肺瘤生长有效量的权利要求1至8中任意一项的化合物。30.抑制肿瘤细胞(例如存在于哺乳动物例如人中的肿瘤细胞)生长的方法，该方法包括使肿瘤细胞与抑制肿瘤生长有效量的权利要求l至8中任意一项的化合物接触。全文摘要本发明提供了一种式(I)化合物或其盐、互变异构体、溶剂合物或N-氧化物；其中R¹是2，6-二氯苯基；R^2a和R^2b都是氢；R³是基团；其中R⁴为C_1-4烷基。该化合物具有作为CDK激酶抑制剂的活性且可抑制癌细胞的增殖。文档编号C07D401/14GK101146794SQ200680009174公开日2008年3月19日申请日期2006年1月20日优先权日2005年1月21日发明者A·J·伍德黑德,A·L·吉尔,G·特里瓦撒,P·G·怀亚特,V·贝尔迪尼申请人:阿斯泰克斯治疗有限公司