专利名称：葛根素葡萄糖衍生物的一种制备方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，主要涉及葛根素葡萄糖衍生物的一种制备方法。
背景技术：
葛根素(puerarin)是由豆科植物野葛甘葛藤根中提取的一种黄酮苷，1959年日 本柴田承二证明异黄酮类化合物是葛根的主要有效成分，其中含量较多的为葛根素，1974 年，我国方起程等人成功地从葛根中提取出葛根素。1993年葛根素被卫生部批准用于临床， 多制成注射剂、滴眼剂，应用于心脏血管疾病(狄灵，于燕，杨海侠等，葛根素对心血管病作 用机制的研究进展，中西医结合心脑血管杂志，2009，7 (3) 328-341)。葛根素中的异黄烷酮的结构决定了葛根素的脂溶性和水溶性都很差，生物利用度 低。因此，提高葛根素的生物利用度，改善药效，必须对葛根素进行结构修饰与改造。蒋洁蓉等人(氧化微杆菌糖基化葛根素的研究，南京师范大学研究生学位论 文，2007)用微生物转化的方式得到了葛根素-7-0-葡萄糖苷，水溶性增加了 18倍，葛根 素-7-0-葡萄糖苷的舒张血管作用也略优于天然葛根素。Dubey，Saraswati ；Saxena, Prachi ；Pursotum, R.K(Major isoflavones identification in the rootof Pueraria lobata, Journal of Environmental Research and Development, (2008),2(3),413-420) 通过高效液相色谱_质谱联用分析技术分析葛根中存在天然7-羟基-4' -(1-3 -D-葡萄 糖基)葛根素化合物，没有文献报道该化合物合成方法，以及水溶性等的测定。本发明是依据葛根素为异黄酮碳甙，7，4' -二羟基为活性基团，其中7位的羟基 因8位糖的位阻影响，活性较4'-羟基弱(张首国，朱晓伟，王林等.葛根素衍生物的合 成及抗缺氧活性研究，中国药物化学杂志，2008，18 (2) :90-95)。利用这性质，在4'位引入 糖，寻找一种合成天然7-羟基-4' -(1-3-D-葡萄糖基)葛根素化合物的方法，实现亲脂 性和亲水性好的天然7-羟基-4' -(1-3-D-葡萄糖基)葛根素的工业化生产，从而促进葛 根素的应用推广。
发明内容
为了克服现有葛根素的不足，本发明的目的在于提供葛根素葡萄糖衍生物的一种 制备方法。本发明涉及具有通式I所示的葛根素葡萄糖衍生物的一种制备方法先将葡萄糖 经醋酐乙酰化，溴化氢醋酸溶液溴化反应制备a-溴代四乙酰葡萄糖，再与葛根素在碱和 丙酮溶液中醚化得7-羟基-4' _(2，3，4，6-四乙酰基-0-0-吡喃葡萄糖苷基)葛根素，最 后用碱和甲醇醇解得目标产物7-羟基-4' -(3-D-吡喃葡萄糖苷基)葛根素。(I) 其中R分别为四乙酰葡萄糖基、葡萄糖基。
具体实施例方式实施例1:7-羟基-4' _(l-0-D-2，3，4，6-乙酰基-葡萄糖基)葛根素在带有搅拌器、回流冷凝管和温度计的250mL四口烧瓶中，依次加入10. 12g葡 萄糖，8. 24g无水醋酸钠，55mL乙酸酐，缓慢升温至95°C，保温反应3h，将反应液倒入碎冰 中，先静置30min，后搅拌，过滤，将滤饼用水充分洗涤后得白色固体化合物全乙酰葡萄糖 14. 58g，收率 66. 5%，熔点 129-130°C (文献值 126_130°C )。向100mL单口瓶中加入全乙酰葡萄糖3.07g(7.9mmol)，二氯甲烷20mL，待全溶后 加入10mL质量分数为30%的溴化氢的醋酸溶液，室温保温2h，将反应液倒入到碎冰中，加 二氯甲烷20mLX3提取，合并有机层，用5%的碳酸氢钠洗涤至中性，再用饱和盐水洗涤，无 水硫酸钠干燥，减压除去溶剂，用乙醚和石油醚(v/v =1:5)重结晶得化合物a -溴代四 乙酰葡萄糖 2. 56g，收率 79. 4%, mp85-86°C。向500mL 单口瓶中加入葛根素 2. 91g(7mmol)，丙酮 300mL，碳酸钾 1. 93g(14mmol)， 加入a-溴代四乙酰葡萄糖5.74g(14mmol)，室温反应至原料消失(TLC跟踪)，过滤除去 无机盐，减压浓缩得粗产物，再经柱层析得3. 20g 7-羟基-4' _(l-0-D-2，3，4，6-乙酰 基葡萄糖基)葛根素，收率 61.4%。NMR(DMS0-d6, 500MHz) 8 9. 26 (d, J = 6. 0Hz, 1H, CH), 8. 17 (d, 1H, Ar-H), 7. 84 (q, J = 3. 3,9. 0Hz, 1H, Ar-H), 7. 18-7. 12(m，3H，CH2, Ar-H)， 6.57(m，2H，CH, Ar-H), 5. 48 (m, 1H, CH)，5. 17 (q, J = 9. 6，11. 7Hz，1H，CH)，4. 76-4. 61 (m， 3H, OH)，4. 49 (m, 1H, CH2-H)，4. 44 (m, 1H, CH2-H)，3. 93-3. 46 (m, 6H, CH)，1. 78 (m, 12H, CH3)； LC-MS m/z :703(M-43),415。实施例2:7-羟基-4' _(l-0-D-2，3，4，6-乙酰基-葡萄糖基)葛根素向500mL单口瓶中加入葛根素4. 55g(10. 5mmol)，丙酮300mL，碳酸钠 2. 23g(21mmol)，加入a -溴代四乙酰葡萄糖8. 61g (21mmol)，室温反应至原料消失(TLC跟 踪)，过滤除去无机盐，减压浓缩得粗产物，经柱层析得4. 68g 7-羟基-4' -(l-^-D-2,3, 4,6-乙酰基葡萄糖基)葛根素，收率59.8%。实施例3:7-羟基-4' _(l-0-D-2，3，4，6-乙酰基-葡萄糖基)葛根素向500mL单口瓶中加入葛根素3. 06g(7. 35mmol)，丙酮300mL，碳酸氢 钠1.24g(14. 7mmol)，加入a-溴代四乙酰葡萄糖6. 03g (14. 7mmol)，室温反应至原 料消失(TLC跟踪)，过滤除去无机盐，减压浓缩得粗产物，经柱层析得2. 81g 7-羟 基-4' -(l-^-D-2,3,4,6-乙酰基葡萄糖基)葛根素，收率51.2%。
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CN 101857616 A
说明书2/4页
OR
实施例4:7-羟基-4' -(l-3-D-2，3，4，6-乙酰基-葡萄糖基)葛根素向500mL单口瓶中加入葛根素3. 67g(8. 82mmol)，丙酮300mL，碳酸氢钾 1. 76g(17. 64mmol)，加入a -溴代四乙酰葡萄糖7. 23g(17. 64mmol)，室温反应至原料消失 (TLC跟踪)，过滤除去无机盐，减压浓缩得粗产物，经柱层析得2. 24g7-羟基-4' _(l-0-D-2，3，4，6-乙酰基葡萄糖基)葛根素，收率34. 1%。实施例5:7-羟基-4' _(l-0-D-2，3，4，6-乙酰基-葡萄糖基)葛根素向500mL单口瓶中力卩入葛根素4. 04g (9. 7mmol)，丙酮300mL，卩比啶
1.55g(19. 4mmol)，加入a -溴代四乙酰葡萄糖7. 95g(19. 4mmol)，室温反应至原料消失 (TLC跟踪)，减压浓缩得粗产物，经柱层析得4.36g 7-羟基-4' -(1_ 0-D_2，3，4，6-乙酰 基葡萄糖基)葛根素，收率60.3%。实施例6:7-羟基-4' -(l-3-D-2，3，4，6-乙酰基-葡萄糖基)葛根素向500mL单口瓶中加入葛根素5. 24g(12. 6mmol)，丙酮300mL，三乙胺
2.54g(25. 2mmol)，加入a -溴代四乙酰葡萄糖10. 33g(25. 2mmol)，室温反应至原料消失 (TLC跟踪)，减压浓缩得粗产物，经柱层析得4.66g 7-羟基-4' -(1_ 0-D-2，3，4，6-乙酰 基葡萄糖基)葛根素，收率49.6%。实施例7:7-羟基-4' _(l-0-D-2，3，4，6-乙酰基-葡萄糖基)葛根素向500mL单口瓶中加入葛根素2. 34g(5. 6mmol)，丙酮300mL，二乙胺 0. 82g(ll. 2mmol)，加入a -溴代四乙酰葡萄糖4. 61g(ll. 2mmol)，室温反应至原料消失 (TLC跟踪)，减压浓缩得粗产物，经柱层析得2.28g 7-羟基-4' -(1_ 0-D_2，3，4，6-乙酰 基-葡萄糖基)葛根素，收率54.6%。实施例8:7-羟基-4' -(l-3-D-2，3，4，6-乙酰基-葡萄糖基)葛根素反应过程如实施例1，在0°C反应，收率42. 2% ；实施例9:7-羟基-4' -(1-0-D-葡萄糖基)葛根素反应过程如实施例1，在50°C反应，收率34. 7%。实施例10 :7_羟基-4' -(1-0-D-葡萄糖基)葛根素取2. llg化合物7-羟基-4' _(1-0-D-2，3，4，6-乙酰基-葡萄糖基)葛根素加 入到100mL单口瓶中，加甲醇30mL和碳酸钠2. 21g，室温反应0. 5h，过滤除去无机盐，浓缩 得产物7-羟基-4' -(1-0-D-葡萄糖基)葛根素1.47g，收率90.5%。NMR(DMS0-d6, 300MHz) 8 8. 36 (d, J = 10. 0Hz, 1H, CH)，8. 05 (q, H, Ar-H)，7. 33 (m, 3H, Ar)，6. 72 (m, 2H, Ar-H)，4. 95 (m, 4H, OH, CH)，4. 28-3. 05 (m, 12H, CH) ；LC-MS m/z 579 (M+l)，417.实施例11 :7-羟基-4' -(1-0-D-葡萄糖基)葛根素取2.09g(2.8mmol)化合物 7-羟基-4' - (1_ 0-D-2，3，4，6-乙酰基-葡萄糖基) 葛根素加入到100mL单口瓶中，加甲醇30mL和碳酸钾1. lg(8mmol)，室温反应0. 5h，过滤除 去无机盐，浓缩得产物7-羟基-4' -(1-0-D-葡萄糖基)葛根素1.46g，收率89.4%。实施例12 :7-羟基-4' -(1-0-D-葡萄糖基)葛根素取1.69g(2. 27mmol)化合物 7-羟基-4' - (1- 0-D-2，3，4，6- 乙酰基-葡萄糖基) 葛根素加入到100mL单口瓶中，加甲醇30mL和碳酸氢钠0. 544g (6. 4mmol)，室温反应0. 5h， 过滤除去无机盐，浓缩得产物7-羟基-4，-(1-0-D-葡萄糖基)葛根素1. llg，收率84.3%。实施例13 :7-羟基-4' -(1-0-D-葡萄糖基)葛根素
取2.03g(2. 72mmol)化合物 7-羟基-4' - (1_ 3-D-2，3，4，6-乙酰基-葡萄糖 基)葛根素加入到100mL单口瓶中，加甲醇30mL和碳酸氢钾0. 77g (7. 7mmol)，室温反应 0.5h，过滤除去无机盐，浓缩得产物7-羟基-4' -(1-0-D-葡萄糖基)葛根素1.31g，收率 83. 6%。实施例14 :7_羟基-4' -(1-0-D-葡萄糖基)葛根素反应过程如实施例9，在0°C反应4h，收率85. 4%。实施例15 :7_羟基-4' -(1-3-D-葡萄糖基)葛根素反应过程如实施例9，在50°C反应0. 3h，收率87. 6%。
权利要求
如Ⅰ所示的葛根素葡萄糖衍生物的一种制备方法，其特征在于将葡萄糖用醋酐乙酰化，后用溴化氢醋酸溶液溴化得到α-溴代四乙酰葡萄糖，再与葛根素在丙酮溶剂和缚酸剂脱溴化氢醚化得到衍生物(I，R＝四乙酰葡萄糖基)，最后在碱性甲醇溶剂中醇解得7-羟基-4′-(β-D-吡喃葡萄糖苷基)葛根素(I，R＝葡萄糖基)；其中R分别为四乙酰葡萄糖基、葡萄糖基。FSA00000156155400011.tif
2.如权利要求1所述的合成方法，其特征在于脱溴化氢加的敷酸剂是碳酸氢钠、碳酸 钠、碳酸氢钾、碳酸钾、吡啶、三乙胺或二乙胺。
3.如权利要求1所述的合成方法，其特征在于脱溴化氢的反应温度在0 50°C。
4.如权利要求1所述的合成方法，其特征在于醇解用的碱是碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸 钾或碳酸氢钾。
5.如权利要求1所述的合成方法，其特征在于醇解的反应温度在0 50°C。
全文摘要
本发明涉及葛根素葡萄糖衍生物的一种制备方法。葡萄糖经醋酐全乙酰化，溴化氢醋酸溶液溴化制得α-溴代四乙酰葡萄糖，再与葛根素在碱性无水溶剂中反应得7-羟基-4′-(1-β-D-2，3，4，6-乙酰基葡萄糖基)葛根素，最后经甲醇醇解得7-羟基-4′-(β-D-吡喃葡萄糖苷基)葛根素。经水溶性测定，7-羟基-4′-(β-D-吡喃葡萄糖苷基)葛根素的水溶性是葛根素的15.3倍。
文档编号C07H1/00GK101857616SQ20101019528
公开日2010年10月13日 申请日期2010年6月9日 优先权日2010年6月9日
发明者刘媛媛, 朱红军, 盛超, 许庆兵 申请人:南京工业大学