一种从桔核中提取柠檬苦素类似物的方法
【专利摘要】本发明公开了一种从桔核中提取柠檬苦素类似物的方法，包括：步骤一：获取原料，其中，原料含量检测采用超声法90%乙醇提取1小时，提取液直接检测，该原料含量要求柠檬苦素（Limonin）≥0.6%、诺米林（Nomilin）≥0.3%；步骤二：对原料进行破壳粉碎处理，要求原料完全破壳；步骤三：原料进行90%乙醇提取三次，每次1.5小时，料液比1∶4∶4∶3，并最终控制渣中有效成份占原料总目标物不得高于3%；步骤四：提取液浓缩至醇度20%静置12小时，出去液表面浮油；步骤五：浓缩液继续回收溶剂，出膏比重控制在1.03±0.1静置结晶12小时；步骤六：抽取上层清膏，下层沉淀滤布过滤、离心；步骤七：离心粗结晶真空干燥，温度小于80摄氏度。
【专利说明】一种从桔核中提取柠檬苦素类似物的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于天然药物提取【技术领域】，具体涉及到以桔核为原料，采用甲醇热回流提取、提取液除杂处理、提取液浓缩特定比重析出粗结晶，经脱脂分离后，得到柠檬苦素类似物粗品，再经重结晶可得到柠檬苦素精品。
[0002]
【背景技术】
[0003]朽1檬苦素类似物(Limlclis)是存在于芸香科(Rutaceae)和楝科(Meliacace)植物中的一类三萜化合物。近年来研究表明柠檬苦素似物能够较强地激活体内主要解毒酶——谷胱甘肽转移酶(GSH - transferase)的活性，大量动物实验表明，柠檬苦素类化合物具有抑制由化学物质导致的肝癌、小肠癌、口腔癌等癌症，是一类开发价值很高的生理活性物质。
[0004]提取技术是天然药物研究工作的基础，柠檬苦素类似物的提取原料很多，以枳实、陈皮、橘核、柚核等芸香科柑橘属植物药材为原料，均能分离纯化出柠檬苦素类似物，但是较难分离出高含量的朽1檬苦素(Limonin)、诺米林(Nomilin),进一步的分离纯化研究工作开展较少。市场所需规格的产品缺乏，急需开发一种能够快速高效、精确分离纯化、提取含量高的柠檬苦素类似物工艺。
[0005]
【发明内容】
[0006]本发明所要解决的技术问题是在于为桔核的开发利用提供一条新途径，以降低对原材料的浪费，减少了环境污染，提供一种高效提取分离柠檬苦素类似物中柠檬苦素、诺米林成分的工艺。
[0007]本发明解决上述技术问题所采取的技术方案如下:
一种从桔核中提取柠檬苦素类似物的方法，包括:
步骤一:获取原料，其中，原料含量检测采用超声法90%乙醇提取I小时，提取液直接检测，该原料含量要求朽1檬苦素(Limonin)彡0.6%、诺米林(Nomilin)彡0.3% ；
步骤二:对原料进行破壳粉碎处理，要求原料完全破壳；
步骤三:原料进行90%乙醇提取三次，每次1.5小时，料液比1:4:4:3，并最终控制渣中有效成份占原料总目标物不得高于3% ；
步骤四:提取液浓缩至醇度20%静置12小时，出去液表面浮油；
步骤五:浓缩液继续回收溶剂，出膏比重控制在1.03±0.1 ；
步骤六:抽取上层清膏，下层沉淀滤布过滤、离心；
步骤七:离心粗结晶真空干燥，温度小于80摄氏度；
步骤八:粗结晶5倍量沸程60-90度石油醚脱酯两次，脱脂过程充分研磨搅拌，操作过程中避免器械剧烈碰撞； 步骤九:粗结晶在乙醇-乙酸乙酯体系下活性炭脱色重结晶；
步骤十:真空抽滤结晶，温度小于80摄氏度真空干燥，最后得到柠檬苦素产品。
[0008]本发明采取了上述方法以后，能够充分地降低对原材料的浪费，减少了环境污染，其是一种高效提取分离柠檬苦素类似物中柠檬苦素、诺米林成分的方法，具有很好的技术效果。
[0009]本发明的其它特征和优点将在随后的说明书中阐述，并且，部分地从说明书中变得显而易见，或者通过实施本发明而了解。本发明的目的和其他优点可通过在所写的说明书、权利要求书、以及附图中所特别指出的结构来实现和获得。
【专利附图】
【附图说明】
[0010]下面结合附图对本发明进行详细的描述，以使得本发明的上述优点更加明确。其中，
图1是本发明一种从桔核中提取柠檬苦素类似物的方法的示意图；
图2是本发明一种从桔核中提取柠檬苦素类似物的方法的流程示意图。
[0011]
【具体实施方式】
[0012]以下将结合附图及实施例来详细说明本发明的实施方式，借此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题，并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。需要说明的是，只要不构成冲突，本发明中的各个实施例以及各实施例中的各个特征可以相互结合，所形成的技术方案均在本发明的保护范围之内。
[0013]具体来说，如图1、2所示，一种从桔核中提取柠檬苦素类似物的方法，包括: 步骤一:获取原料，其中，原料含量检测采用超声法90%乙醇提取I小时，提取液直接检测，该原料含量要求朽1檬苦素(Limonin)彡0.6%、诺米林(Nomilin)彡0.3% ；
步骤二:对原料进行破壳粉碎处理，要求原料完全破壳；
步骤三:原料进行90%乙醇提取三次，每次1.5小时，料液比1:4:4:3，并最终控制渣中有效成份占原料总目标物不得高于3% ；
步骤四:提取液浓缩至醇度20%静置12小时，出去液表面浮油；
步骤五:浓缩液继续回收溶剂，出膏比重控制在1.03±0.1 ；
步骤六:抽取上层清膏，下层沉淀滤布过滤、离心；
步骤七:离心粗结晶真空干燥，温度小于80摄氏度；
步骤八:粗结晶5倍量沸程60-90度石油醚脱酯两次，脱脂过程充分研磨搅拌，操作过程中避免器械剧烈碰撞；
步骤九:粗结晶在乙醇-乙酸乙酯体系下活性炭脱色重结晶；
步骤十:真空抽滤结晶，温度小于80摄氏度真空干燥，最后得到柠檬苦素产品。
[0014]步骤十中，得到98%的柠檬苦素产品。
[0015]也就是说，如图2所示，在一个实施例中，解决上述技术问题所采取的技术方案由下述步骤组成:
原料质量标准，原料含量检测采用超声法90%乙醇提取I小时，原料含量要求柠檬苦素(Limonin)、> 0.6%、诺米林(Nomilin) ^ 0.3%
原料粉碎要求破壳即可，提取渣取样，90%甲醇提取I次，1.5小时，渣中有效成份占原料总目标物不得高于3%;
提取液出膏比重严格控制在1.03±0.1,比重较小沉淀物析出不完全，比重过大，沉淀物难以分离；
沉淀物脱酯过程充分研磨搅拌，在塑料溶器中进行操作，操作过程中严禁器械剧烈碰撞;
主产品自然晒至无石油醚味，再置真空干燥箱干燥，温度< 80°C ；
本发明采取了上述方法以后，能够充分地降低对原材料的浪费，减少了环境污染，其是一种高效提取分离柠檬苦素类似物中柠檬苦素、诺米林成分的方法，具有很好的技术效果。
[0016]为了确定本发明的最佳工艺步骤，发明人进行了大量的实验研究工作，具体实验情况如下:
1、提取甲醇的度摸索
桔核原料分别采用醇度为70%，80%，90%，98%甲醇热回流提取，确定提取环节为90%甲醇热回流提取1.5小时，3次。
[0017]2、提取浓缩比重摸索
提取液浓缩醇度或比重80%，40%, 20%, 0%，1.02%, 1.05%, 1.10%。依据该实验，提取液浓缩比重为1.02-1.05mg/ml，为最佳粗结晶条件。
[0018]3、粗结晶处理摸索
粗结晶直接干燥状态较差因沉淀物表面有大量油状物，故做以下脱脂处理处理。最终确定脱脂方案为沉淀离心甩干，60-90石油醚直接脱脂，石油醚用量为沉淀量5倍左右。脱脂后产品柠檬苦素含量50%-60%，诺米林20%-25%，产品收率1.2-1.5%。
[0019]4、结晶条件摸索
依据柠檬苦素与诺米林极性差异，利用不同极性溶剂对柠檬苦素与诺米林进行分离，结果如下，采用无水乙醇加5%针用活性炭回流I小时，2次，醇液结晶之后得到晶体(柠檬苦素2.16%诺米林95.82%);醇回流不溶物用乙酸乙酯回流提取2次，乙酸乙酯提取液结晶得到(柠檬苦素102.84%诺米林1.02%),母液中得到(柠檬苦素68.14%诺米林28.46%)。
[0020]本发明采取了上述方法以后，能够充分地降低对原材料的浪费，减少了环境污染，其是一种高效提取分离柠檬苦素类似物中柠檬苦素、诺米林成分的方法，具有很好的技术效果。
[0021]最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.一种从桔核中提取柠檬苦素类似物的方法，包括: 步骤一:获取原料，其中，原料含量检测采用超声法90%乙醇提取I小时，提取液直接检测，该原料含量要求朽1檬苦素(Limonin)彡0.6%、诺米林(Nomilin)彡0.3% ； 步骤二:对原料进行破壳粉碎处理，要求原料完全破壳； 步骤三:原料进行90%乙醇提取三次，每次1.5小时，料液比1:4:4:3，并最终控制渣中有效成份占原料总目标物不得高于3% ； 步骤四:提取液浓缩至醇度20%静置12小时，出去液表面浮油； 步骤五:浓缩液继续回收溶剂，出膏比重控制在1.03±0.1 ； 步骤六:抽取上层清膏，下层沉淀滤布过滤、离心； 步骤七:离心粗结晶真空干燥，温度小于80摄氏度； 步骤八:粗结晶5倍量沸程60-90度石油醚脱酯两次，脱脂过程充分研磨搅拌，操作过程中避免器械剧烈碰撞； 步骤九:粗结晶在乙醇-乙酸乙酯体系下活性炭脱色重结晶； 步骤十:真空抽滤结晶，温度小于80摄氏度真空干燥，最后得到柠檬苦素产品。
2.根据权利要求1所述的从桔核中提取柠檬苦素类似物的方法，其特征在于，步骤十中，得到98%的柠檬苦素产品。
【文档编号】C07J73/00GK104327153SQ201410555943
【公开日】2015年2月4日 申请日期:2014年10月20日 优先权日:2014年10月20日
【发明者】张必荣, 李秀妮, 张敏 申请人:陕西天谷生物科技集团有限公司