专利名称：苯并二氮杂的制作方法
技术领域：
本发明涉及下式所示新化合物及其药物上可接受的酸加成盐，氨基甲酸酯，脲和酰胺
式中X和Y各自独立地选自氢、卤素和低级烷基;R10和R11可同时为氢、或其中之一为氢、另一个为甲基、或R10和R11一起为一(CH2)n-、其中n为4或5;Z是选自下组的环
环中一个或多个碳原子可被F、Cl或低级烷基取代。
本发明的目的是提供上述化合物，其作为有效治疗剂的应用，特别是作为治疗或预防病毒感染、尤其是逆转录病毒感染，如HIV1和/或HIV2感染的应用，或作为保护细胞不受所述感染的应用;
本发明的另一目的是提供制备上述化合物以及含有一种上述化合物和任选的一种第二种抗病毒剂、特别是逆转录酶抑制剂如ddC、AZT或ddI，TIBO衍生物，三环二氮杂
酮，HIV-蛋白酶抑制剂，α-、β-和/或γ-干扰素，白细胞介素-2和/或GM-CSF的药物;
本发明的又一目的是提供使用上述化合物制备用于治疗或预防病毒感染，特别是逆转录病毒感染如HIV-1和/或HIV-2感染、或保护细胞免受所述感染的药物的方法。
式Ⅰ化合物的所有互变异构和主体异构形式都包括在本发明的范围内。
药物上可接受的酸加成盐可以是药物上可接受的无机酸如盐酸和硫酸的盐。药物上可接受的酰胺可通过用有机酸如乳酸、乙酸、苹果酸或对甲苯磺酸中和本发明的化合物来形成。药物上可接受的氨基甲酸酯可通过使式Ⅰ的化合物与碳酰氯和脂族醇或芳香醇化学计算反应的产物进行反应形成。药物上可接受的脲可通过使本发明的化合物与碳酰氯和脂族胺或芳香胺的化学计算反应的产物进行反应形成。式Ⅰ化合物的氨基甲酸酯、脲和酰胺是有用的药物前体。
在本说明书中，“低级烷基”指1-7个碳原子、最好为1-4个碳原子的直链或支链碳链基团，例如，包括甲基、乙基、丙基和异丙基。“酰基”指通过脱除羟基由有机酸衍生的有机基团。优选的有机酸包括脂族和芳香族酸如乙酸、磺基乙酸和苯甲酸。
式Ⅰ优选的化合物是式中Y是氢、X是卤素或低级烷基(特别是在7位上)的化合物。
式Ⅰ特别优选的化合物是R10为甲基、R11为氢、X选自氯和甲基(特别是在7位上)的化合物。
式Ⅰ极其优选的化合物如式Ⅰ(a)、Ⅰ(b)和Ⅰ(c)所示
采用常规方法、使式Ⅱ的3H-1，4-苯并二氮杂
-2-(1H)-酮
与P2S5和HN(R10，R11)先后反应，或采用技术上已知的步骤通过使式Ⅱ的酰胺转化，可制备式Ⅰ的化合物。例如，可在适宜的路易斯酸如U.S3，644，335号专利中所述的酸存在下，在适当的反应惰性溶剂中与式HN(R10，R11)的胺一起搅拌式Ⅱ的化合物。适当的反应惰性溶剂的实例包括但不限于四氢呋喃、甲苯和二噁烷。适当的路易斯酸的实例包括但不限于四氯化钛、四氯化锡等。
可用已知的方法制备式Ⅱ的化合物，见US3405122，3398159，3407211和3400128;J.Org.Chem.41，1976，2720;35，1970，2455和46，1981，839;ActaChem.Scan.B31，1977，701;J.HeterecyclicChem.12，1975，49和25，1988，1293;Synthesis1988，767;Syn、Commun.15，1985，1271;J.A.C.S.100，1978，4842;以及如下面实施例1-3所详述。
式Ⅱ的化合物可通过酸催化反应，环化如实施例1式6的化合物来制备。环化可在溶剂如甲苯和四氢呋喃中，或在正丁醇中，在高至回流温度的温度下，通过加热化合物6和酸如新戊酸来进行。化合物的胺，例如式6的胺，可从式4、9或15的酮开始，经相应的溴化物如式5、10、10″或17制备。
本发明的化合物具有有益的抗病毒、特别是抗逆转录病毒活性，尤其具有抗HIV活性，HIV被认为是导致爱滋病及其相关疾病如ARC(爱滋病相关综合症)的病毒。所述化合物通过抑制HIV病毒某些重要功能如TAT(转激活转录)活性，还可抑制HIV复制。感染细胞产生TAT，可激活感染患者的HIV复制。通过抑制TAT活性，本发明的化合物显著地减少HIV复制，因而能缓解HIV对人类患者的破坏作用。
根据美国专利5070010的测式方法测定了本发明式Ⅰ化合物抗HIV-TAT活性，包括下述步骤(a)将分泌的碱性磷酸酶(SeAP)基因表达和病毒转激活子TAT基因表达两者置于对HIV转激活子TAT的作用有反应性的HIV启动子LTR控制之下;
(b)用含有上述(a)的基因构建物的质粒转染培养的哺乳动物细胞，导致在细胞内产生转激活因子TAT和SeAP;
(c)加入待测试剂，即式Ⅰ的化合物，通过测定SeAP酶活性，确定SeAP的生成量，对SeAP生成的抑制是与抗TAT抑制活性相关联的。
在上述测试中，对SeAP的抑制与抗TAT活性成正比。试剂抑制SeAP的能力越大，其抗TAT活性越高。
具体地，抗HIV-TAT测试如下述进行，得到以下结果转染24小时以后，将1、10和50μM式Ⅰ的受试化合物加到用两种质粒转染的COS细胞培养介质中，两种质粒之一含有由HIV-LTR控制的为SeAP编码的报道基因，另一个含有也由HIV-LTR控制的HIV-TAT基因。介质的碱性磷酸酶活性在加入受试化合物48小时后以对硝基苯基磷酸酯为底物用比色法测定。抗TAT活性的测定是由HIV-LTR控制的SeAP基因表达的抑制百分率与由RSV-LTR控制的SeAP基因抑制百分率之比，后者对TAT不具反应性。
如下面的表所列结果所示，式Ⅰ的化合物是HIV-TAT调节基因表达的特异抑制剂，同时没有非特异胞毒作用。
式Ⅰ化合物作为TAT抑制剂的特异性由一平行试验证实，测试中将SeAP基因表达置于对TAT没有反应性的罗氏肉瘤病毒(RSV)-LTR控制下。这一测试消除了这种可能性即式Ⅰ的化合物或是一般的胞毒剂，或是SeAP活性抑制剂。
受试化合物的抗HIV-TAT活性通过测定细胞培养液上请介质中碱性磷酸酶的量确定，在细胞培养液中，SeAP基因表达受控于HIVLTR启动子。受试化合物的特异抑制活性根据下式计算100[(1-A/B)-(1-C/D)]式中A和B分别是存在受试化合物和不存在受试化合物时HIV-LTR/SeAP产生的碱性磷酸酶活性;C和D分别是存在受试化合物和不存在受试化合物时RSV-LTR/SeAP产生的碱性磷酸酶活性。试验浓度由1到50μM。试验结果是至少三次试验的平均值。在下表中，对活性的表示如下“高”为＞60%抑制;“中”为6-40%抑制;“低”为40-20%抑制。受试化合物在细胞被质粒转染24小时后加入，此时SeAP特异性mRNA和蛋白早已存在，且蛋白非常稳定。因此，用这一测试步骤不可能观察到100%抑制。
表实施例号的产物抗HIV-TAT活性1高2高／中3高／中由于本发明的化合物有效地抑制TAT蛋白，故受感染的病毒在宿主细胞中不能自我复制，所述化合物对治疗AIDS应是有效的。事实上，已发现本发明的化合物在培养液中保护CD4+淋巴细胞不受HIV细胞致病作用。此外，由于在其它逆转录病毒中发现与TAT密切相关的蛋白，如HTLV-I，本发明的化合物有可能抑制这些TAT相关蛋白的活性，因而也可用于治疗这些其它的逆转录病毒感染。
本发明还提供了缓解逆转录病毒疾病包括HIV对病人的破坏作用的方法，该方法包括使用足以抑制逆转录病毒感染进一步发展量的本发明的化合物或其生物活性代谢物治疗病人。本发明包括处置或治疗受HIV感染的病人，包括AIDS或ARC病人和受HIV感染的有症状或无症状病人。本发明的化合物可通过非肠道给药或口服，每天一次用药或以不同间隔分多次用药，最好是一天口服一次。应当清楚，对于肝或肾有问题的病人，应调节剂量和用药形式，以适应所述病症。对于人类患者，本发明的化合物抗病毒有效量(例如口服)是约0.5-约40mg/kg体量/日，较好的是约1-15mg/kg体重/日，更好的是约4-10mg/kg体重/日。以单位剂型计，例如口服单位剂型，对于一个70公斤重的病人，用药量可以是约35-约2，800mg/日，最好为约210-350mg/日。
此外，由于使用一种以上活性药剂可提供更好的治疗组合物，在不同药剂以不同机理作用时，这一点特别明显。本发明还包括含有本发明的化合物，同时还含有一种或多种其它抗病毒剂的抗病毒组合物，所述其它抗病毒剂例如包括ddC、AZT、2′，3′-二脱氧肌苷(ddI)、四氢咪唑并苯并二氮杂
酮(TIBO)衍生物、HIV-蛋白酶抑制剂和三环二氮杂
酮、HIV-整合酶和RNase H抑制剂，以及生物反应调节剂，包括例如α-，β-或γ-干扰素、白细胞介素-2和粒性白细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)等。
对于人类患者，本发明的化合物可以常规剂型用药，如本文所述。化合物本身、组合物、或其药物上可接受的酸加成盐、氨基甲酸酯、脲或酰胺都是适宜的。
本发明的化合物以本文所述的剂量用药至病状改善和/或病毒血症减轻。所述化合物也以同上述指出的其它抗病毒剂和/或生物反应调节剂一起服用。ddC和AZT用于AIDS或ARC病人的剂量已经公开。当进行组合治疗时，其它抗HIV化合物可与本发明的化合物一起使用，也可以根据需要错开使用。两种或多种药物也可组合成组合物。当组合使用时，各种药物的剂量可比其单独使用时低。
本发明还涉及在药物上可接受的载体中含有治疗有效量的本发明化合物的组合物。本发明的化合物可以单独存在于溶液中，以该方式给药。然而，优选的是以活性成分药物制剂的形式给药。在本说明书中，药物制剂即药物组合物。所述药物制剂含有至少一种本发明的活性成分，同时含有一种或多种药物上可接受的载体和赋形剂，还可选择性地含有其它治疗剂，例如HIV-RT或HIV-蛋白酶抑制剂。在本发明的范围内，“可接受的”指与配方中其它成分相容，对机体或受处理的宿主细胞无害。药物载体包括本领域技术人员已知的适于口服、直肠给药、鼻内、局部、口腔、舌下、阴道或胃肠外(如皮下注射、肌肉注射、静脉注射、和皮内注射)用药的各种载体。可用药物领域已知的方法方便地将组合物制备成单位剂型。所述方法包括将活性成分制备于载体中，载体中还可含有其它药物活性成分，例如ddC、AZT、ddI、干扰素、IL-2或HIV蛋白酶抑制剂。
本发明组合物的实例有活性成分的溶液，例如水溶液或盐水溶液;胶囊，如软胶囊;粉或片剂;各含预定量的活性成分。活性成分可以是颗粒;水溶液或悬浮液;水包油或油包水乳液形式的。片剂中可含有一种或多种乳糖、微晶纤维素、胶体二氧化硅、croscarmellosesodium，硬脂酸镁、硬脂酸和其它赋形剂，染色剂和其它药理上相容的载体。适于口服的制剂包括于香味剂(通常是蔗糖、阿拉伯胶或黄蓍胶)中含活性成分的锭剂;于惰性基质如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶中含活性成分的锭剂;于适宜的液体载体中含活性成分的漱口液。用于直肠给药的制剂可以呈栓剂形式，适宜的基质含可可油或水杨酸酯。适于阴道给药的制剂可以是阴道药栓、棉塞、乳膏、胶剂、糊、泡沫或喷雾剂。适于胃肠外给药的制剂包括含水或不含水的等渗无菌注射液，其中可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使制剂与受体的血液等渗的溶质;以及含水或不含水的无菌悬浮液，其中可含有悬浮剂和增稠剂。制剂可以呈单位剂量或多剂量密封容器的形式，例如安瓶或药瓶;也可以冻干的形式储存，仅需要在使用前加入无菌液体载体，如注射用水。即时注射液或注射悬液可由前述的无菌粉末、颗粒剂或片剂即席制备。
实施例1
a)将乙炔鼓入75mlTHF。用1小时向THF/乙炔混合物中加入EtMgBr(50ml)，加入过程中使温度不超过40℃，不断向混合物中鼓入乙炔。室温下搅拌混合物30分钟，然后停止鼓入乙炔，将混合物冷却至0℃。向混合物中滴加5-氯-2-硝基苯甲醛(13.2g)于70mlTHF的溶液。使反应过夜升至室温，然后用饱和NH4Cl溶液中止反应，用EtOAc萃取。干燥、过滤和蒸发后，残余物用快速柱色谱提纯(10%EtOAc/己烷)，得到12.26g5-氯-α-乙炔基-2-硝基苯甲醇，IR(KBr)3290，2120，1525，1338cm-1。
b)将5-氯-α-乙炔基-2-硝基苯甲醇(1.54g)在60ml冰醋酸中的溶液加热至40℃，然后用1.44gCrO3处理。搅拌后，将溶液冷却至室温，用CH2Cl2萃取。有机相用H2O和饱和NaHCO3萃取，然后干燥、过滤和蒸发。经梯度洗脱柱色谱(9%EtOAc/己烷，17%EtOAc/己烷)，得到0.94g1-(5-氯-2-硝基苯基)-2-丙炔-1-酮，MS计算208.9880;实测208.9872。
c)将1-(5-氯-2-硝基苯基)-2-丙炔-1-酮(0.03g)与叠氮-三甲基硅烷(0.02ml)和CH3CN(5ml)混合，氩气下将反应混合物加热至100℃，保持3小时，然后蒸发，采用梯度洗脱快速柱色谱(5%EtOAc/己烷，20%EtOAc/己烷，50%EtOAc/己烷)提纯后得到0.03g(5-氯-2-硝基苯基)-(1H-1，2，3-三唑-5-基)-甲酮，MS252(M+)。
d)40psi氢压下氢化(2-硝基-5-氯苯基)-(1H-1，2，3-三唑-5-基)-甲酮(2.53g)、EtOH(100ml)和10%Pd/C(50mg)的混合物16小时，然后过滤、蒸发和用CH2Cl2制浆。收集固体，得到1.64g(2-氨基-5-氯苯基)-(1H-1，2，3-三唑-5-基)-甲酮。用梯度洗脱柱色谱(9%EtOAc/己烷，20%EtOAc/己烷，33%EtOAc/己烷)提纯母液，得到另一份0.48g产物，mp148-150℃。
e)然后，向1.0g(2-氨基-5-氯苯基)-(1H-1，2，3-三唑-5-基)甲酮于150mlCH2Cl2和60mlTHF的溶液中加入50ml冰水和2.0g碳酸氢钠。向搅拌中的两相混合物中加入0.98ml溴乙酰溴。搅拌反应混合物0.5小时。分层，水层用CH2Cl2萃取。用水和盐水相继洗涤有机萃取物，然后干燥、蒸发。用乙酸乙酯/己烷作洗脱液过滤提纯残余物，得到1.2g2-溴-4′-氯-2′-[(1H-1，2，3，-三唑-5-基)羰基]N-乙酰苯胺，mp＝173-175℃。
f)向100ml于干冰浴中的浓缩液态氨中加入1.2g2-溴-4′-氯-2′-[(1H-1，2，3-三唑-5-基)羰基]N-乙酰苯胺于25mlTHF中的溶液。反应混合物搅拌过夜，使氨蒸发。蒸除残留的THF，合并的残余物在100ml10%甲醇/乙酸乙酯和20ml水中搅拌。水相用10%甲醇/乙酸乙酯萃取，有机提取物用盐水洗涤，干燥和蒸发。残余物在60ml正丁醇和100mg新戊酸中加热至回流16小时。蒸除丁醇，高真空下泵吸残余物至干。用8%甲醇/二氯甲烷分级结晶残余物，经活性炭处理和甲醇重结晶后，得到705mg7-氯-5-(1H-1，2，3-三唑-5-基)-1，3-二氢-2H-1，4-苯并二氮杂
-2-酮，mp＝246-249℃。
g)7-氯-1，3-二氢-5-(1H-1，2，3-三唑-5-基)-2H-1，4-苯并二氮杂
-2-酮(200mg)，P2S5(222mg)和THF(25ml)的混合物在20-40℃下声处理2小时。蒸除溶剂，残余物在EtOAc(200ml)和H2O(100ml)混合物中搅拌。收集未溶解的黄色固体，干燥，将其溶于THF(15ml)，然后加到事先已鼓入10分钟NH2CH3和-70℃THF溶液(20ml)中，溶液在-70℃搅拌，然后升至室温。收集沉淀的固体，与水合并后在蒸汽浴上加热。冷却后，收集固体，用甲醇重结晶，得到89mg7-氯-N-甲基-5-(1H-1，2，3-三唑-5-基)-3H-1，4-苯并二氮杂
-2-胺，mp＝232-235℃。
实施例2
a)4-溴(1H)-吡唑(50.8g)，1300mlCH2Cl2，三苯基甲基氯(99.5g)和Et3N(35.3g)的混合物在室温下搅拌24小时。然后用水萃取溶液，干燥、过滤和蒸发。残余物经CH2Cl2/己烷结晶，得到结晶产物，mp＝190-192℃。获取第二份产物后，共得到117.3g4-溴-1-(三苯基甲基)-1H-吡唑。
b)氩气流下搅拌4-溴-1-(三苯基甲基)-1H-吡唑(48g)，Et2O(100ml)和THF(500ml)的混合物，同时将其冷却至-78℃。向混合物中加入tBuLi(160ml)，得到的红色溶液在-78℃搅拌2.5小时。此时，将溶液加到已事先冷却至-78℃的2-甲基-6-氯-4H-3，1-苯并噁嗪-4-酮(21g)于THF(500ml)的溶液中。混合物过夜升至室温，然后用饱和NH4Cl中止反应。用EtOAc稀释后，分层，有机层用饱和NaCl溶液洗涤，干燥，过滤和蒸发。将得到的有机固体与THF(400ml)，MeOH(350ml)，H2O(250ml)和10N NaOH(300ml)合并，在回流温度下搅拌3小时。冷却至室温后，分离有机相和水相。水相用Et2O萃取，有机部分干燥、过滤和蒸发。得到的泡沫与CH2Cl2合并，搅拌过夜。过滤后，蒸发滤液得到49g化合物[9]，为油状物。
c)室温下向搅拌中的化合物[9]、THF(450ml)、CH2Cl2(450ml)和IN NaOH(1400ml)的混合物中滴加10.5ml溴乙酰溴。两相混合物在室温下搅拌20分钟。两相分离后，水相用CH2Cl2萃取。有机相经干燥处理并蒸发至干。残余物经THF和己烷结晶，得到23.5g2-溴-4′-氯-2′-[(1-(三苯基甲基)-1H-吡唑-4-基)羰基]N-乙酰苯胺，mp＝197-200℃。
d)向1升于干冰浴中的液态氨中加入2-溴-4′-氯-2′-[(1-(三苯基甲基)1H-吡唑-4-基)羰基]N-乙酰苯胺(23.5g)于THF(200ml)中的溶液。反应混合物搅拌过夜，使氨蒸发。蒸除残余溶剂。残余物与EtOAc和水一起搅拌。产物用水洗涤，干燥后得到18.3g固体。将该产物悬浮于含有300mg新戊酸的1-丁醇(600ml)中，加热至回流温度，保持8小时，3小时和5小时后各加入300mg新戊酸。蒸除挥发物，研制残余物，得到6.5g产物。产物溶于MeOH，用活性炭处理，过滤并滤缩。收集沉淀的产物，得到5.25g7-氯-1，3-二氢-5-(1H-吡唑-4-基)-2H-1，4-苯并二氮杂
-2-酮，mp＝289-291℃(分解)。
e)7-氯-1，3-二氢-5-(1H-吡唑-4-基)-2H-1，4-苯并二氮杂
-2-酮(295mg)、P2S5(327mg)和THF(25ml)的混合物在20-40℃声处理2小时。蒸除溶剂，残余物在EtOAc(200ml)和水(100ml)的混合物中搅拌。未溶固体经收集后干燥。将该产物溶于THF(15ml)，然后将其加到事先已鼓入10分钟NH2CH3的-70℃THF溶液(25ml)中。溶液在-70℃搅拌15分钟，然后使其升温，蒸除溶剂后，残余物与水合并，在蒸汽浴上加热。收集沉淀的固体，溶于EtOAc，干燥并蒸发。残余物经MeOH/CH3CN重结晶，得改变。在
图14和15中表示了AST和ALT的暂时改变。
没有肝炎的三名患者以1.7mg/kg一天的剂量给药。两人(患者211的212)分别在3和4剂FIAU后中断治疗，第三人(患者214)在7天后停止治疗。他们停止治疗均是由于他们有中度恶心并且两人有轻微到中度的呕吐。两名患者同时进行抗催吐治疗。患者211服用Reglan
，患者214服Compazine
。值得注意的是，在这些患者中没有记录到生物化学或血液学的不正常现象。由于这三人均因同样的症状而陆续退去，所以认为该剂量的FIAU是不耐受的并且再未将其患者参加到该剂量组中。
从1.0mg/kg一天，FIAU给药的非肝炎和肝炎组，确定FIAU和其一级脱碘代谢物FAU的峰和谷值。从每个患者的基值看，峰和谷值都很一致。起始给药后，峰和谷值分别平均为0.58和0.05μg/ml，当这些值平均为1.0和0.23μg/ml时。第三天达到稳定状态，由于其开始的10x过量，所以未将患者401的第1天的值使用到这些计算中。
以1.0mg/kg一天的剂量得到的患者的峰和谷血浆水平很相似。表1列出了开始给药后以及在稳定状态时，峰和谷FIAU值的范围，平均值和标准误差。
a)将化合物[8](24g)与THF(400ml)和Et2O(100ml)合并，冷却至-78℃。向混合物中滴加tBuLi(80ml)，得到的红色溶液在-78℃搅拌2.5小时。向溶液中滴加5-氯-2-硝基苯甲醛(11.2g)于THF(150ml)中的溶液。得到的混合物过夜升至室温。用饱和NH4Cl溶液中止反应，然后用EtOAc稀释，分层。有机层用饱和NaCl溶液洗涤，干燥，过滤并蒸发。用10%至75%EtOAc/己烷梯度洗脱快速柱色谱提纯，得到20.6gα-(5-氯-2-硝基苯基)-1H-吡唑-4-甲醇，为白色泡沫产物。MS 495(M+)。
b)上述a)的产物(27.1g)、CHCl3(250ml)和MnO2(20g)的混合物在回流温度下搅拌3小时。再加入一份MnO2(5g)，再搅拌混合物5小时。冷却后，混合物经过滤并蒸发，得到26.9g(5-氯-2-硝基苯基)[1-(三苯基甲基)-1H-吡唑-4-基]甲酮，MS 493(M+)。
c)上述b)的产物(26.9g)、EtOH(400ml)和NH4Cl(100ml)的混合物在回流温度搅拌3小时。0℃下用30%NaOH(50ml)中和，蒸出EtOH，得到的水相用EtOAc萃取。有机部分干燥、过滤和蒸发。残余物采用30%EtOAc/己烷至100%EtOAc梯度洗脱经硅胶过滤提纯，得到(5-氯-2-硝基苯基)(1H-吡唑-4-基)甲酮。将其与EtOH(250ml)和10%Pd/C(100mg)混合，在45psi下氢化。经快速柱色谱，得到10g(2-氨基-5-氯苯基)-1H-吡唑-4-基甲酮，MS 221(M+)。
d)向c)的产物(10.5g)于THF(300ml)和CH2Cl2(300ml)的溶液中，加入NaHCO3(25g)和冰水混合物(300ml)。搅拌中的两相混合物用37.2mlBrCOCH2Br处理。有机部分干燥、过滤和蒸发。将残余物溶于THF(100ml)，将其加到事先已冷却至-78℃的液态氨(NH3)(200ml)中，搅拌过夜，同时使其升至室温。蒸除挥发物，残余物分为EtOAc层和水层，分层后，水层用EtOAc萃取。有机部分经干燥、过滤和蒸发。将残余物与1-BuOH(100ml)和新戊酸(75mg)合并，将混合物加热至回流温度。蒸除溶剂，产物用快速柱色谱提纯(6.5%MeOH/CH2Cl2)，得到5.5g目的苯并二氮杂
酮。
实施例3
a)氩气下于搅拌中将溴代吡唑(24.0g)悬浮于无水THF(600ml)，并将其置于干冰/丙酮浴上冷却。滴加正丁基锂(2.5M己烷溶液)。在干冰/丙酮浴中冷却下搅拌2小时后，将该THF溶液加到己事先用10分钟预冷至约-50℃的2-甲基-6-甲基-4H-3，1-苯并噁嗪-4-酮(8.76g)于THF(500ml)的溶液中。搅拌20分钟后，通过加入15%氯化铵水溶液，(W/V，300ml)中止反应，并使之升至室温。用EtOAc稀释反应混合物，并分层。有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤，水层用EtOAc洗涤。合并有机层、干燥、过滤并浓缩。将得到的固体悬浮于THF(300ml)、甲醇(350ml)、水(250ml)和10N氢氧化钠水溶液(270ml)的混合物中，搅拌下回流加热6-24小时。使混合物冷却至室温，分为醚层和水层。有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤，然后合并、干燥、过滤和浓缩。残余物悬浮于CH2Cl2，过滤。滤饼用CH2Cl2洗涤，滤液经浓缩，采用EtOAc/CH2Cl2混合物(1∶9，V/V)作洗脱剂，使其通过硅胶。将洗脱剂合并，浓缩，得到的残余物经CH2Cl2/己烷结晶，得到15.18g(2-氨基-5-甲基苯基)[1-(三苯基甲基)-1H-吡唑-4-基]甲酮，MS计算443.1997，实测443.1990。
b)将上述a)的产物(2.85g)溶于THF(150ml)和乙醚(150ml)的混合物中，在冰水浴上冷却。然后加入饱和碳酸钠水溶液(100ml)。搅拌下加入溴乙酰溴(4×0.67ml)。4小时后，反应混合物用水稀释并用EtOAc萃取。过滤收集形成的沉淀，将其溶于CH2Cl2。将EtOAc部分与CH2Cl2溶液合并，然后干燥、过滤、蒸发和浓缩。残余物经CH2Cl2/己烷结晶，得到3.33g2-溴-N-[4-甲基-2-[1-(三苯基甲基)-1H-吡唑-4-基]羰基]苯基]乙酰胺，MS计算563.1208，实测563.1188。
c)将上述b)的产物(2.26g)溶于无水CH2Cl2(100ml)，并于干冰/丙酮浴上冷却。向反应混合物中加入液态氨(50ml)，搅拌所得溶液，过夜升至室温。然后向混合物中加水，溶解残留的沉淀。混合后，分层。有机层用饱和碳酸氢钠水溶液萃取，水层用CH2Cl2洗涤。将CH2Cl2层合并、干燥、过滤和浓缩。残余物用CH2Cl2/己烷重结晶，得到1.68g2-氨基-N-[4-甲基-2-[[1-(三苯基甲基)-1H-吡唑-4-基]羰基]苯基]乙酰胺，MS计算501.2291，实测501.2272。
d)搅拌下回流加热上述c)的产物(15.02g)于正丁醇(300ml)中的悬浮液64小时。冷却至室温后，将反应混合物浓缩至干。残余物悬浮于THF，加热至回流。过滤悬浮液，用THF洗涤滤饼。滤液经洗涤，以沸点温度加热并浓缩。
使得到的混合物冷却至室温，静置3小时。用THF洗涤产物，干燥后得到5.50g1，3-二氢-7-甲基-5-(1H-吡唑-4-基)-2H-1，4-苯并二氮杂
-2-酮，mp＝282-289℃。
e)将五硫化二磷(0.5g)加到上述d)的产物(0.24g)于THF(50ml)的悬浮液中。混合物于超声波浴中保持1小时，然后浓缩至干。残余物用THF/EtOAc(1∶2，V/V，150ml)和半饱和NaHCO3溶液分层。有机层用饱和NaCl溶液(100ml)洗涤。水层用THF/EtOAc混合物洗涤，浓缩有机层，置于真空干燥器中过夜。将残余物溶于THF并冷却至-40℃。向该THF溶液中鼓入甲胺气10分钟。混合物增重至6g。使反应混合物升至室温，搅拌2小时。浓缩后，将残余物溶于THF/EtOAc(1∶2，V/V，100ml)混合物中，用饱和NaHCO3溶液(100ml)和饱和NaCl溶液(100ml)萃取。水层用THF/EtOAc混合物洗涤，有机层干燥、过滤和浓缩。残余物经硅胶色谱提纯(洗脱剂CH3OH/CHCl3，1∶9，V/V)，用CH3OH/CHCl3/己烷重结晶后，得到N，7-二甲基-5-(1H-吡唑-4-基)-3H-1，4-苯并二氮杂
-2-胺(0.22g)，mp＝262-270℃。
下列含有上述本发明的化合物作为活性成分的药物组合物可用已知的方法制备a)口服液成分含量(mg)活性成分20.0mg羟苯甲酸甲酯20.0mg蔗糖q.s香味剂q.s柠檬酸盐缓冲剂q.s
纯化水q.s至5.0mlb)片剂成分含量(mg)活性成分20mg淀粉40mg微晶纤维素80mg乳糖274mg硬脂酸镁2mg416mgc)软胶囊成分含量(mg)活性成分20mg乙氧基化脂肪酸500mgPEG400100mg植物油q.s.至1.0ml
权利要求
1.式Ⅰ所示的化合物及其药物上可接受的酸加成盐，氨基甲酸酯，脲和酰胺
式中X和Y各自独立地选自氢、卤素和低级烷基；R10和R11可同时为氢、或其中之一为氢、另一个为甲基、或R10和R11一起为(CH2)n-，其中n为4或5；Z是选自下组的环；
环中一个或多个碳原子可被F、Cl或低级烷基取代。
2.根据权利要求1的化合物，其中Y为氢，X选自卤素和低级烷基，特别是X在7位上。
3.根据权利要求2的化合物，其中R10是甲基，R11是氢，X选自氯和甲基，特别是在7位上。
4.根据权利要求3的化合物，所述化合物具有下式Ⅰ(a)、Ⅰ(b)或Ⅰ(c)的结构;
5.权利要求1-4的任一化合物作为有效治疗剂、特别是作为抗病毒剂，在处置、治疗或预防爱滋病和爱滋病相关疾病中的应用。
6.制备如权利要求1所述化合物的方法，包括使式Ⅱ的化合物
相继与P2S5和HN(R10，R11)所示的胺反应，或在路易斯酸存在下在反应惰性的溶剂中使式Ⅱ的化合物与HN(R10，R11)所示的胺反应;当需要的产物是式Ⅰ化合物的酰胺时，用一种有机酸中和式Ⅰ的化合物;当需要的产物是氨基甲酸酯或脲时，使式Ⅰ的化合物与碳酰氯和脂族或芳族醇的化学计算反应产物进行反应，或与碳酰氯和脂族或芳族胺的化学计算反应产物进行反应。
7.一种含有如权利要求1所述的化合物作为活性成分，同时可有或可无第二种抗病毒剂，特别是逆转录酶抑制剂如ddC、AZT，HIV-蛋白酶抑制剂，α-，β和/或γ-干扰素，白细胞介素-2和/或GM-CSF的药物，所述药物用于治疗或预防病毒感染、特别是逆转录病毒感染如HIV1和/或HIV2感染，或保护细胞不受上述感染，或缓解逆转录病毒疾病对逆转录病毒感染患者的细胞破坏作用。
8.使用如权利要求1所述的化合物制备药物的方法，所述药物用于治疗或预防病毒感染，特别是逆转录病毒感染如HIV1和/或HIV2感染，或保护细胞不受上述感染，或缓解逆转录病毒疾病对逆转录病毒感染患者的细胞破坏作用。
全文摘要
本发明涉及式I所示的苯并二氮杂(式中取代基如说明书所定义)及其药物上可接受的酸加成盐、氨基甲酸酯、脲和酰胺。所述化合物可被用作有效治疗剂，特别是作为抗病毒剂，用于处置、治疗或预防爱滋病和爱滋病相关疾病。
文档编号C07D243/20GK1081442SQ93107340
公开日1994年2月2日 申请日期1993年6月15日 优先权日1992年6月16日
发明者M-C·苏, D·M·赫因, S·Y·泰姆 申请人:弗·哈夫曼-拉罗切有限公司