专利名称：抑制血管生成的5－取代的－1,2,4－噻二唑衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及用作血管生成抑制剂的5-取代的-1，2，4-噻二唑衍生物及其制备方法，本发明还涉及含有所述化合物的组合物及其作为药物的用途。
血管生成，即由内皮细胞形成的新血管，在许多生理及病理过程中起着重要作用。血管供血的发展是正常组织的生长、成熟和维持所必需的。其对伤口愈合也是必要的。血管生成对于实体肿瘤的生长和转移是至关重要的并且涉及多种其它病理性疾病如新生血管性青光眼、糖尿病性视网膜病、牛皮癣及类风湿性关节炎。这些病理症状的特点为血管生成作用增强，即在此期间正常休眠内皮细胞活化，降解细胞外基质屏障，增殖并移动形成新血管。为了控制这些依赖血管生成的疾病，具有血管生成抑制特性的化合物将是极其有用的。
本领域已公开了几种抑制血管生成的化合物，也称为血管阻滞剂、血管抑制剂或血管生成拮抗剂。例如，氢化可的松为一种熟知的血管生成抑制剂(Folkman等，Science 2301375，1985，“在肝素或肝素片断存在下的一类新的类固醇血管生成抑制剂”；Folkman等，Science221719，1983，“在可的松存在下由肝素或肝素片断引起的血管生成抑制和肿瘤消退”)。
EP-0398427(1990年11月22日公布)公开抗鼻病毒的pyridazinames，EP-0435381(1991年7月3日公布)描述了抗小核糖核酸病毒活性的哒嗪胺类(pyridazinaminies)。EP-0429344(1991年5月29日公布)公开作为胆碱能激动剂的氨基哒嗪衍生物。
本发明化合物不同于现有技术化合物之处在于其总是由噻二唑基部分取代，尤其是基于这样的事实，即这些化合物意外地具有血管生成抑制性质。
本发明涉及下式化合物
及其N-氧化物形式、药学上可接受的酸加成盐和立体化学异构形式，其中X为CH或N；R1为氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、氨基、一-或二(C1-6烷基)氨基、Ar1、Ar1NH-、C3-6环烷基、羟甲基或苄氧基甲基；R2为氢、C1-6烷基、氨基、氨基羰基、一-或二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基氨基、羟基或C1-6烷氧基；R3、R4和R5各自独立选自氢、卤代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基、硝基、氨基、氰基、叠氮基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷硫基、C1-6烷氧基羰基或Het1；
为Ar2、Ar2CH2-或Het2；Ar1为苯基；由1、2或3个各自独立选自下列的取代基取代的苯基卤代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三卤代甲基、氨基或硝基；Ar2为苯基；由1、2或3个各自独立选自下列的取代基取代的苯基卤代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三卤代甲基、氨基或硝基；Het1为选自下列的单环杂环噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基或噁唑啉基；且各单环杂环可任选在碳原子上由C1-4烷基取代；及Het2为选自下列的单环杂环呋喃基、噻吩基、噁二唑基、噻二唑基、吡啶基、嘧啶基或吡嗪基；且各单环杂环可任选在碳原子上由1或2个各自独立选自下列的取代基取代卤代、C1-4烷基、C1-4烷氧基、硝基或三氟甲基。
上述定义及下文使用的卤代一般指氟代、氯代、溴代和碘代；C1-4烷基定义为具有1-4个碳原子的直链和支链饱和烃基，如甲基、乙基、丙基、丁基、1-甲基乙基、2-甲基丙基等；C1-6烷基意欲包括C1-4烷基及其具有5-6个碳原子的较高同系物，如戊基、2-甲基丁基、己基、2-甲基戊基等。
部分的实例为
其中
为式Ar2CH2的基团，当X为CH时，所述基团的CH2部分优选连接在哌啶基部分的氮原子上，或当X为氮时，则连接在哌嗪基部分的氮原子上。
上述药学上可接受的酸加成盐意欲包括式(I)化合物可形成的具治疗活性的、非毒性酸加成盐。具有碱性性质的式(I)化合物可通过用适当的酸处理所述的碱形式，而转化为其药学上可接受的酸加成盐。适当的酸包括例如，无机酸如氢卤酸，例如盐酸或氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或有机酸例如，乙酸、丙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、琥珀酸(即丁二酸)、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对-甲苯磺酸、环己烷氨基磺酸、水杨酸、对-氨基-水杨酸、扑酸等。
术语酸加成盐也包括式(I)化合物可形成的水合物及溶剂加合物形式。此类形式的实例为例如，水合物和醇化物等。
上文使用的术语式(I)化合物的立体化学异构形式定义为式(I)化合物可能具有的，由相同顺序的键连接的相同原子组成的，但具有不可交换的不同三维结构的所有可能的化合物。除非另外提及或指明，则一个化合物的化学名称包括该化合物可能具有的所有可能的立体化学异构形式的混合物。所述混合物可含所述化合物的基本分子结构的所有非对映异构体和/或对映体。式(I)化合物的所有立体化学异构形式，包括纯净形式或其相互的混合物，均在本发明范围内。
某些式(I)化合物也可以以其互变异构形式存在。虽然此类形式在上式中并未明确指明，但仍包括在本发明范围内。
式(I)化合物的N-氧化物形式意欲包括其中一个或多个氮原子被氧化为所谓N-氧化物的那些式(I)化合物。
下文任何时候使用的术语“式(I)化合物”还包括药学上可接受的酸加成盐及所有立体异构形式。
一组重要的化合物包括其中符合一个或多个下列限制条件的式(I)化合物a)X为N；b)R1为氢、C1-6烷基、氨基或二(C1-6烷基)氨基；b)R2为氢；c)R3、R4和R5各自独立选自氢、卤代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基、硝基或C1-6烷氧基羰基。
具体的一组化合物为其中X为N；R1为氢、C1-4烷基或二(C1-4烷基)氨基；R2为氢；R3、R4和R5各自独立选自氢、卤代、C1-4烷基、C1-4烷氧基或三氟甲基；及二价基团
为Ar2、Ar2CH2-或Het2，其中Ar2为苯基或由1或2个各自独立选自下列的取代基取代的苯基卤代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三卤代甲基、氨基或硝基；Het2为噻二唑基、吡啶基、嘧啶基或吡嗪基的那些式(I)化合物。
优选的一组化合物为其中X为N，R1为甲基，R2为氢，R3和R4为氢而R5为三氟甲基的那些式(I)化合物。
更优选的一组化合物为其中R5为3位上的三氟甲基的那些优选的式(I)化合物。
最优选的式(I)化合物为1-[4-(3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)苯基]-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌嗪，及1-[5-(3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)-2-吡啶基]-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌嗪，及其药学上可接受的酸加成盐、立体异构形式或N-氧化物。
本发明化合物一般通过式(II)中间体与式(III)中间体的反应制备。
在上述和下述反应流程中，W代表合适的活性离去基团例如，卤代如氟代、氯代、溴代、碘代，或者在某些情况下，W也可为磺酰氧基如甲磺酰氧基、苯磺酰氧基、三氟甲磺酰氧基等活性离去基团。所述反应可按照本领域熟知的步骤进行，例如在反应惰性溶剂如N，N-二甲基甲酰胺、乙腈、甲基异丁酮等中，最好在碱如碳酸氢钠、碳酸钠或三乙胺存在下，一起搅拌两种反应物进行。该反应可在室温至反应混合物的回流温度之间方便地进行。
其中R1为CH3的式(I)化合物，即式(I-a)代表的所述化合物也可在反应-惰性溶剂例如，甲醇或乙醇中，在碱如吡啶存在下通过用羟氨基-O-磺酸处理式(IV)中间体制备。
式(I)化合物还可按照本领域熟知的基团转换反应，通过式(I)化合物的相互转换而制备。
按照本领域熟知的将三价氮转化为其N-氧化物形式的方法，也可将式(I)化合物转化为相应的N-氧化物形式。所述N-氧化反应一般可通过式(I)的原料与合适的有机或无机过氧化物反应而进行。合适的无机过氧化物包括如过氧化氢、碱金属或碱土金属的过氧化物，例如，过氧化钠、过氧化钾；合适的有机过氧化物可包括过氧酸，例如，苯甲过氧酸(benzenecarboperoxoic acid)或卤代苯甲过氧酸，例如3-氯代苯甲过氧酸、过氧链烷酸如过氧乙酸、烷基过氧化氢如叔丁基过氧化氢。合适的溶剂为例如，水、低级链烷醇如乙醇等，烃如甲苯，酮如2-丁酮、卤代烃如二氯甲烷，及此类溶剂的混合物。
原料和某些中间体为已知的化合物且可由商业购得，或者可根据本领域熟知的常规反应方法制得。例如，某些式(II)的中间体，例如5-(4-氟代苯基)-3-甲基-1，2，4-噻二唑已由Yang-i Lin等在J.Org.Chem.，45(19)，3750-3753页(1980)中描述，且某些式(III)中间体，如1-[3-(三氟甲基)苯基]-哌嗪可从商业购得。
式(II)中间体可通过式(V)化合物(其中W为如上定义的合适的离去基团)与式(VI)中间体反应(任选作为其酸加成盐加入)来制备。
式(IV)中间体可如流程I所示制备。
流程I
在流程I中，式(VII)中间体，其中W1为合适的离去基团例如，卤代或磺酰氧基而Z为氰基或氨基羰基，按照上述合成式(I)化合物的本领域熟知的反应方法与式(III)中间体反应。生成的式(VIII)中间体用Lawesson’s试剂在合适的溶剂，例如甲苯或吡啶中处理，或在合适的溶剂，例如N，N-二甲基甲酰胺中，任选在三乙胺存在下，用硫化氢处理。随后，在反应-惰性溶剂，例如甲苯或二氯甲烷中，用N，N-二甲基乙酰胺缩二甲醇处理式(IX)中间体，由此产生式(IV)中间体。
式(I)化合物和某些中间体在其结构中可以具有一个或多个立体化学中心，以R或S构型存在。例如，R1、R2、R3、R4或R5可以是具有立体化学中心的C1-6烷基。
按照上述方法制备的式(I)化合物可以以对映体的外消旋混合物的形式合成，其可按照以下本领域熟知的拆分方法彼此分离。式(I)的外消旋化合物可以通过与合适的手性酸反应而转化为相应的非对映异构的盐形式。所述非对映异构的盐形式随后可例如通过选择性的或分级结晶法分离而对映体可以通过碱从中释放出来。另一种分离式(I)化合物的对映体形式的方法涉及采用手性固定相进行液相层析。合适的手性固定相为，例如多糖，特别是纤维素或直链淀粉衍生物。市售可得的多糖基的手性固定相为ChiralCel CA、OA、OB、OC、OD、OF、OG、OJ和OK，及Chiralpak AD、AS、OP(+)和OT(+)。与所述多糖手性固定相结合使用的合适的洗脱剂或流动相为己烷等，可用醇如乙醇、异丙醇等改性。所述纯的立体化学异构形式也可从相应的纯立体化学异构形式的合适原料衍生，条件是该反应应是立体特异性的。如果需要特异性的立体异构体，则优选通过立体特异性的制备方法合成所述化合物。这些方法特别适于使用对映体纯的原料。
式(I)化合物具有在体内和体外抑制血管生成的有价值的药理性质。
根据它们的药理活性，式(I)化合物，它们的药学上可接受的酸加成盐、其立体化学异构形式或N-氧化物形式为血管生成的抑制剂。因此，血管生成抑制剂适用于控制或治疗依赖血管生成的疾病，例如眼部新血管性疾病、新生血管性青光眼、糖尿病性视网膜病、晶状体后纤维组织形成、血管瘤、血管纤维瘤、牛皮癣、骨关节炎和类风湿性关节炎。此外，血管生成抑制剂也适用于控制实体瘤生长，例如，乳癌、前列腺癌、黑素瘤、肾脏肿瘤、结肠癌、宫颈癌等及它们的转移。
因此，本发明公开用作药物的式(I)化合物以及这些式(I)化合物在治疗血管生成依赖性疾病的药物制备中的用途。
根据所述化合物在治疗或预防血管生成依赖性疾病中的用途，本发明提供治疗患有此类疾病的温血动物的方法，所述方法包括系统给予治疗有效量的式(I)化合物、其N-氧化物或药学上可接受的酸加成盐。
根据它们的有用的药理性质，所述化合物可以配制成各种给药目的的不同药物形式。为制备本发明的药用组合物，可以将作为活性成分的有效量的特定化合物(以碱或酸加成盐的形式)与药学上可接受的载体混合成紧密混合物，该载体可采用多种形式，其取决于给药所需的制剂形式。这些药用组合物优选以单一的剂型适合于口服、直肠或经胃肠外注射给药。例如，在制备口服剂型的药用组合物时，在口服液体制剂如悬浮液、糖浆、酏剂和溶液的情况下，可以使用任何常用的药物介质，例如，水、甘醇、油、醇等；或者在散剂、丸剂、胶囊和片剂的情况下，可使用固体载体如淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。由于片剂和胶囊方便给药，因而代表了最有利的口服单位剂型，此种情况下明显应使用固体药用载体。对于胃肠外组合物，载体通常包括无菌水(至少为大部分)，尽管可包括其它成分以帮助溶解。例如，可以制备可注射的溶液，其中所述载体包括生理盐水溶液、葡萄糖溶液或生理盐水和葡萄糖溶液的混合液。也可以制备可注射的悬浮液，其中可以使用合适的液体载体、悬浮剂等。在适合于经皮给药的组合物中，该载体任选包括渗透促进剂和/或适合的湿润剂，任选与少量的任何性质的合适添加剂混合，该添加剂应对皮肤不产生明显的有害作用。所述添加剂可促进经皮给药和/或有助于制备所需的组合物。这些组合物可以各种方式给药，如作为透皮贴剂、定点给药(spot-on)作为软膏剂。式(I)的酸加成盐由于其超过相应的碱形式的增加的水溶性，因而明显更适于制备含水组合物。
将上述药用组合物配制成给药方便且剂量均一的单位剂型是特别有利的。本说明书和权利要求书中使用的单位剂型指适合作为单位剂量的物理上独立的单位，每一单位含有经计算可与所需的药用载体一起产生所需疗效的预定量的活性成分。此类单位剂型的实例为片剂(包括划痕片或包衣片)、胶囊、丸剂、袋装散剂、糯米纸囊剂、注射溶液或悬浮液、茶匙量和汤匙量的口服液等，及其分开的多剂量组合。
对于口服给药，所述药用组合物可采用固体剂型，例如，片剂(仅用于吞服及咀嚼型两种)、胶囊或gelcaps可通过常规方法，用药学上可接受的赋形剂如粘合剂(如预胶凝化的玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或羟丙基甲基纤维素)，填充剂(如乳糖、微晶纤维素或磷酸钙)，润滑剂(如硬脂酸镁、滑石粉或二氧化硅)，崩解剂(如马铃薯淀粉或羟基乙酸淀粉钠)，或润湿剂(如月桂基硫酸钠)来制备。所述片剂可采用本领域众所周知的方法包衣。
口服给药的液体制剂可以采用例如，溶液、糖浆或悬浮液的形式，或它们可以作为临用前用水或其它合适的溶媒复制的干产物存在。这样的液体制剂可通过常规方法，任选用药学上可接受的添加剂例如，悬浮剂(如山梨醇糖浆、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素或氢化食用脂肪)，乳化剂(如卵磷脂或阿拉伯胶)，非水性溶媒(如杏仁油、油性脂或乙醇)和防腐剂(如甲基或丙基对-羟基苯甲酸酯或山梨酸)来制备。
药学上可接受的甜味剂优选至少包括至少一种强化甜味剂例如，糖精、糖精钠或糖精钙、天冬甜素、双氧噁噻嗪钾、环己基氨基磺酸钠、天门冬酰丙氨酸酯、二氢查耳酮甜味剂、莫那灵、甜菊苷或三氯半乳蔗糖(4，1’，6’-三氯-4，1’，6’-三脱氧半乳糖蔗糖)，优选糖精、糖精钠或糖精钙，并任选使用本体(bulk)甜味剂例如，山梨醇、甘露醇、果糖、蔗糖、麦芽糖、异麦芽糖醇、葡萄糖、氢化葡萄糖糖浆、木糖醇、焦糖或蜂蜜。
强化甜味剂一般以低浓度使用。例如，在使用糖精钠的情况下，该浓度范围可在0.04％-0.1％(w/w)之间(以最终制剂总体积为基准计)，优选为低剂量制剂的约0.06％和高剂量制剂的约0.08％。本体甜味剂可有效地大量使用，其范围为约10％-约35％，优选为约10％-15％(w/v)。
在低剂量制剂中可遮蔽苦味成分的药学上可接受的调味剂优选为水果型调味剂，例如樱桃、树莓、黑加仑或草莓调味剂。两种调味剂的组合可产生非常好的效果。在高剂量制剂中，需要使用更强的调味剂，例如Caramel Chocolate(焦糖巧克力)调味剂、Mint Cool(凉薄荷)调味剂、Fantasy调味剂等药学上可接受的强力调味剂。存在于最终组合物中的每种调味剂的浓度范围为0.05％-1％(w/v)。联合使用所述强力调味剂较为有利。调味剂优选以制剂在酸性条件下不产生味道和色泽的任何改变或丧失的剂量使用。
本发明化合物也可配制为贮存式制剂。此类长效制剂可通过植入(如皮下或肌内)或经肌内注射给药。因此，例如，该化合物可与合适的聚合物或疏水物质配制(例如，在可接受的油中配制为乳剂)，或者与离子交换树脂配制，或配制为难溶性衍生物，例如，难溶性盐。
本发明化合物可配制为经注射胃肠外给药(较方便经静脉内、肌内或皮下)的制剂，例如，通过大剂量注射或连续静脉内输注。注射用制剂可以为单位剂型，例如，为安瓿或多剂量容器形式，并含有防腐剂。组合物可采用在油性或水性溶媒中的悬浮液、溶液或乳液的形式，并可含有调配剂如等渗调节剂、悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。或者，活性成分可为临用前用合适的溶媒例如，无菌、无热原水再配制的粉末形式。
本发明化合物也可配制为直肠用的组合物，例如，栓剂或滞留式灌肠剂，例如，含有常规的栓剂基质如可可脂或其它甘油酯。
对于鼻内给药，本发明化合物可作为，例如液体喷雾剂、粉末剂或以滴剂的形式使用。
本领域技术人员从下文所示的试验结果可以很容易确定有效量。一般来说，推测有效量在0.001mg/kg-10mg/kg体重之间，特别是在0.01mg/kg-1mg/kg体重之间。在一天内，将所需剂量按适当的时间间隔分2、3、4或多次亚剂量给药可能是适宜的。所述亚剂量可以配制为单位剂型，例如，每单位剂型含有0.01-500mg，特别是0.1mg-200mg的活性成分。
下列实施例仅供说明试验部分下文的“DMF”指N，N-二甲基甲酰胺，“DCM”指二氯甲烷，“DIPE”指二异丙基醚及“THF”指四氢呋喃。
A.中间体的制备实施例A.1a)将2-氯代-4-甲基嘧啶(0.07mol)的亚硫酰氯(100ml)中的混合物搅拌并回流16小时。蒸发溶剂得到2-氯代-4-[二氟代(氟代硫代)甲基]嘧啶(中间体1)。
b)于0℃，将1-亚氨基-乙胺盐酸盐(1∶1)(0.08mol)加入到中间体1(0.07mol)的DCM(300ml)的搅拌混合物中。于0℃滴加氢氧化钠(50％，20ml)。于5℃搅拌该混合物1小时。加入水(300ml)和DCM(300ml)。使该混合物分层。用DCM洗涤含水层两次。将合并的有机层干燥、过滤并蒸发溶剂。残留物在玻璃滤器上经硅胶纯化(洗脱剂DCM)。收集两份纯的部分并蒸发其溶剂，得到3.5g的2-氯代-4-(3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)嘧啶(中间体2)。
实施例A.2a)将6-氮代-3-吡啶基甲酰胺(0.11mol)、1-[3-(三氟甲基)-苯基]-哌嗪(0.11mol)和碳酸钠(0.22mol)的DMF(300ml)中的混合物于120℃搅拌过夜。将该混合物倾入冰水(600ml)中并搅拌1小时。滤除沉淀物并干燥。将该部分中的一份(4g)溶于DCM和碳酸氢钠水溶液中。使该混合物分层。用DCM萃取含水层3次。将合并的有机层干燥、过滤并蒸发溶剂至小体积。滤除沉淀物并干燥，得到3.2g的6-[4-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌嗪基]-3-吡啶甲酰胺(中间体3)。
b)将中间体3(0.013mol)和Lawesson氏试剂(0.007mol)在甲苯(130ml)中的混合物搅拌并回流2小时。冷却该混合物。加入水(100ml)。搅拌该混合物1小时并使之分层。用甲苯萃取含水层3次，用DCM萃取1次。将合并的有机层干燥、过滤并蒸发溶剂，得到7.3g的6-[4-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌嗪基]-3-吡啶硫代甲酰胺(中间体4)。
实施例A.3将中间体4(0.013mol)和1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺(0.021mol)的混合物静置过夜，然后可不经进一步纯化使用，得到N-[1-(二甲基氨基)亚乙基]-6-[4-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌嗪]-3-吡啶硫代甲酰胺(中间体5)表I.1列出根据实施例A.3制备的中间体。
表I.1
B.最终化合物的制备实施例B.1将5-(4-氟代苯基)-3-甲基-1，2，4-噻二唑(0.012mol)、1-[3-(三氟甲基)苯基]-哌嗪(0.014mol)和碳酸钠(0.024mol)的DMF(10ml)中的混合物于140℃搅拌24小时，然后于150℃搅拌24小时，冷却后倾入冰水(200ml)中并搅拌。滤除沉淀物，溶于DCM中，干燥、过滤并蒸发溶剂。使残留物从DIPE中结晶。滤除沉淀物并干燥，得到2.5g(52％)的1-[4-(3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)苯基]-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌嗪(化合物2)。
实施例B.2将羟胺-O-磺酸(0.011mol)的甲醇(15ml)中的混合物一次性加入中间体5(0.01mol)和吡啶(0.02mol)在乙醇(40ml)中的混合物中。于室温下搅拌该混合物90分钟。蒸发溶剂。使残留物溶于DCM中，用水和0.1N氢氧化钠水溶液洗涤，干燥、过滤并蒸发溶剂。将残留物溶于甲醇中、过滤并干燥。使残留物溶于乙腈(100ml)。搅拌该混合物并沸腾至完全溶解，然后使之结晶出来。滤出沉淀物并干燥，得到1.4g(35％)的1-[5-(3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)-2-吡啶基]-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌嗪(化合物8)。
表F.1列出根据以上实施例之一制备的化合物和表F.2列出上述试验部分制备的化合物的碳、氢和氮元素分析实验值(栏题目“exp.”)和理论值(栏题目“theor.”)。
表F.1
表F.2
C.药理学实施例实施例C.1按照Nicosia，R.F.和Ottinetti在“Laboratory Investigation”，63卷，115页，1990中所述，采用大鼠主动脉环的血管生成模型，在体外测定血管生成抑制活性。将化合物抑制微血管形成的能力与溶媒处理的对照组环比较。培养8天后，采用成像分析系统进行定量分析(微血管面积)，该系统包括光学显微镜、CCD摄像机以及按照Nissanov，J.、Tuman，R.W.、Gruver，L.M.和Fortunato，J.M.在“LaboratoryInvestigation”，73卷(#5)，734页，1995中所述的常规设计的自动成像分析程序。在数个浓度下测试化合物，以确定抑制效力(IC50’s)。化合物1、2和6具有低于10nM的IC50值。
权利要求
1.式(I)化合物
及其N-氧化物形式、药学上可接受的酸加成盐和立体化学异构形式，其中X为CH或N；R1为氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、氨基、一-或二(C1-6烷基)氨基、Ar1、Ar1NH-、C3-6环烷基、羟甲基或苄氧基甲基；R2为氢、C1-6烷基、氨基、氨基羰基、一-或二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基氨基、羟基或C1-6烷氧基；R3、R4和R5各自独立选自氢、卤代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基、硝基、氨基、氰基、叠氮基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷硫基、C1-6烷氧基羰基或Het1；
为Ar2、Ar2CH2-或Het2；Ar1为苯基；由1、2或3个各自独立选自下列的取代基取代的苯基卤代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三卤代甲基、氨基或硝基；Ar2为苯基；由1、2或3个各自独立选自下列的取代基取代的苯基卤代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三卤代甲基、氨基或硝基；Het1为选自下列的单环杂环噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基或噁唑啉基；且各单环杂环可任选在碳原子上由C1-4烷基取代；及Het2为选自下列的单环杂环呋喃基、噻吩基、噁二唑基、噻二唑基、吡啶基、嘧啶基或吡嗪基；且各单环杂环可任选在碳原子上由1或2个各自独立选自下列的取代基取代卤代、C1-4烷基、C1-4烷氧基、硝基或三氟甲基。
2.权利要求1的化合物，其中X为N；R1为氢、C1-6烷基、氨基或二(C1-6烷基)氨基；R2为氢；R3、R4和R5各自独立选自氢、卤代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基、硝基或C1-6烷氧基羰基。
3.权利要求1或2中任一项的化合物，其中X为N；R1为氢、C1-4烷基或二(C1-4烷基)氨基；R2为氢；R3、R4和R5各自独立选自氢、卤代、C1-4烷基、C1-4烷氧基或三氟甲基；及二价基团
为Ar2、Ar2CH2-或Het2，其中Ar2为苯基和Het2为噻二唑基、吡啶基、嘧啶基或吡嗪基。
4.权利要求1-3中任一项的化合物，其中X为N，R1为甲基，R2为氢，R3和R4为氢而R5为三氟甲基。
5.权利要求1的化合物，其中所述化合物为1-[4-(3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)苯基]-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌嗪，或1-[5-(3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)-2-吡啶基]-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌嗪，及其立体异构形式或药学上可接受的酸加成盐。
6.含有药学上可接受的载体和作为活性成分的治疗有效量的权利要求1-5中任一项的化合物的组合物。
7.制备权利要求6的药用组合物的方法，其中将药学上可接受的载体与权利要求1-5的化合物充分混合。
8.权利要求1-5中任一项的化合物作为药物。
9.权利要求1-5中任一项的化合物在治疗依赖血管生成的疾病的药物制备中的用途。
10.权利要求1的化合物的制备方法，其中a)任选在合适的碱存在下，在反应惰性溶剂中，使式(II)中间体与式(III)中间体反应；
b)在合适的碱存在下，在反应惰性溶剂中，用羟氨基-O-磺酸处理式(IV)中间体，从而得到如其中R1为甲基的式(I)化合物所定义的式(I-a)化合物；
在上面的反应流程中，基团X、R1、R2、R3、R4、R5和
如权利要求1中所定义，且W为合适的离去基团；c)或者，式(I)化合物可按照本领域熟知的转换反应互相转化；或者，如果需要，式(I)化合物可转化为药学上可接受的酸加成盐，或者相反，式(I)化合物的酸加成盐可用碱转化为游离碱形式；且如果需要，制备其立体化学异构形式。
11.式(IV)化合物
及其酸加成盐、N-氧化物形式或立体化学异构形式，其中X、R2、R3、R4、R5和二价基团
如权利要求1中所定义。
12.制备如权利要求10的式(IV)化合物的方法，其中a)在反应惰性溶剂中，用N，N-二甲基乙酰胺缩二甲醇处理式(IX)中间体，由此产生式(IV)化合物；
b)或者，式(IV)化合物可按照本领域熟知的转换反应互相转化；或者，如果需要，式(IV)化合物可转化为酸加成盐，或者相反，式(IV)化合物的酸加成盐可用碱转化为游离碱形式；且如果需要，制备其立体化学异构形式。
全文摘要
本发明涉及具有血管生成抑制活性的式(Ⅰ)化合物及其N－氧化物形式、药学上可接受的酸加成盐和立体化学异构形式,其中X为CH或N;R
文档编号C07D295/14GK1261358SQ98806394
公开日2000年7月26日 申请日期1998年6月22日 优先权日1997年6月24日
发明者R·A·斯托克布勒克斯, M·A·瑟斯特斯, M·J·M·范德阿尔, M·G·M·威廉斯, R·W·图曼 申请人:詹森药业有限公司