技术领域
本发明涉及新型化合物、包含该化合物的药物组合物、制备该化合物的方法以及该化合物在治疗中的用途。更具体而言，本发明涉及某些大环化合物，该大环化合物表现为Trk家族蛋白质酪氨酸激酶抑制作用，并可用于治疗疼痛、癌症、炎症、神经退行性疾病和某些传染病。
背景技术：
对于疼痛状况的当前治疗制度使用了多种类的化合物。类鸦片活性炭 (例如吗啡)具有多个缺点，包括催吐、便秘和消极的呼吸作用，以及成瘾的可能性。非甾类抗炎止痛剂(NSAID，例如COX-1或COX-2类)还具有缺点，包括在治疗严重的疼痛方面效力不足，以及可能发生胃肠道内出血。此外，COX-1抑制剂可以造成黏膜溃疡。因此，对于疼痛(特别是慢性疼痛) 的减轻而言，不断需要新型且更有效的治疗方法。
Trk为由一组被称为神经营养蛋白(NT)的可溶性生长因子活化的高亲和性受体酪氨酸激酶。Trk受体家族具有3个成员：TrkA,TrkB和TrkC。神经营养蛋白中有(i)活化TrkA的神经生长因子(NGF)；(ii)活化TrkB的脑衍生神经营养因子(BDNF)和NT-4/5；以及(iii)活化TrkC的NT3。Trk在神经元组织中广泛表达，并涉及神经元细胞的保持、信号传递和存活(Patapoutian,A. et al.,Current Opinion in Neurobiology,2001,11,272-280)。
已经证明Trk/神经营养蛋白途径的抑制剂在疼痛的神经临床前动物模型中是有效的。例如，拮抗剂NGF和TrkA抗体(例如RN-624)在炎症和神经性疼痛的动物模型中(Woolf,C.J.et al.(1994)Neuroscience 62,327–331； Zahn,P.K.et al.(2004)J.Pain 5,157–163；McMahon,S.B.et al.,(1995)Nat. Med.1,774–780；Ma,Q.P.和Woolf,C.J.(1997)Neuroreport 8,807–810； Shelton,D.L.et al.(2005)Pain 116,8–16；Delafoy,L.et al.(2003)Pain 105, 489–497；Lamb,K.et al.(2003)Neurogastroenterol.Motil.15,355–361；Jaggar, S.I.et al.(1999)Br.J.Anaesth.83,442–448)以及在神经性疼痛的动物模型中已经显示出是有效的(Ramer,M.S.和Bisby,M.A.(1999)Eur.J.Neurosci.11, 837–846；Ro,L.S.et al.(1999)；Pain 79,265–274Herzberg,U.et al.(1997) Neuroreport 8,1613–1618；Theodosiou,M.et al.(1999)Pain 81,245–255；Li, L.et al.(2003)Mol.Cell.Neurosci.23,232–250；Gwak,Y.S.et al.(2003) Neurosci.Lett.336,117–120)。
此外，已经显示由肿瘤细胞和肿瘤侵入性巨噬细胞分泌的NGF会直接刺激位于末梢疼痛纤维上的TrkA。使用小鼠和大鼠中的多种肿瘤模型，证明使用单克隆抗体来中和NGF会抑制癌症相关性疼痛达到与最高耐受剂量的吗啡相同或优于该剂量的吗啡的程度。此外，在大量的研究中，已经涉及了作为多种类型的疼痛的调控剂的、BDNF/TrkB途径的活化，其中所述的疼痛包括炎症疼痛(Matayoshi,S.,J.Physiol.2005,569:685-95)、神经性疼痛 (Thompson,S.W.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1999,96:7714-18)以及手术疼痛 (Li,C.-Q.et al.,Molecular Pain,2008,4(28),1-11)。
此外，最近的文献显示，Trk激酶的过表达、活化、扩增和/或突变与许多癌症有关，包括成神经细胞瘤(Brodeur,G.M.,Nat.Rev.Cancer 2003,3, 203-216),卵巢癌(Davidson.B.,et al.,Clin.Cancer Res.2003,9,2248-2259), 结肠直肠癌(Bardelli,A.,Science 2003,300,949),黑素瘤(Truzzi,F.,et al., Dermato-Endocrinology 2008,3(1),pp.32-36),头和颈部的癌症(Yilmaz,T., et al.,Cancer Biology和Therapy 2010,10(6),pp.644-653),胃癌(Du,J.et al., World Journal of Gastroenterology 2003,9(7),pp.1431-1434),肺癌(Ricci A., et al.,American Journal of Respiratory Cell和Molecular Biology 25(4),pp. 439-446),乳腺癌(Jin,W.,et al.,Carcinogenesis 2010,31(11),pp.1939-1947), 成胶质细胞瘤(Wadhwa,S.,et al.,Journal of Biosciences 2003,28(2),pp. 181-188),成神经管细胞瘤(Gruber-Olipitz,M.,et al.,Journal of Proteome Research 2008,7(5),pp.1932-1944),分泌性乳腺癌(Euthus,D.M.,et al., Cancer Cell 2002,2(5),pp.347-348),唾液腺癌(Li,Y.-G.,et al.,Chinese Journal of Cancer Prevention和Treatment 2009,16(6),pp.428-430),甲状腺乳头状癌(Greco,A.,et al.,Molecular和Cellular Endocrinology 2010,321(1),pp. 44-49)以及成人髓细胞白血病(Eguchi,M.,et al.,Blood 1999,93(4),pp. 1355-1363)。在癌症的临床前模型中，TrkA、B和C的非选择性小分子抑制剂在抑制肿瘤生长和终止肿瘤转移中是有效的(Nakagawara,A.(2001) Cancer Letters 169:107-114；Meyer,J.et al.(2007)Leukemia,1–10；Pierottia, M.A.和Greco A.,(2006)Cancer Letters 232:90–98；Eric Adriaenssens,E.,et al. Cancer Res(2008)68:(2)346-351)。
此外，已经显示使用NGF抗体或TrkA、B和C的非选择性小分子抑制剂来抑制神经营养蛋白/Trk途径在治疗炎症疾病的临床前模型中是有效的。例如，抑制神经营养蛋白/Trk途径已经涉及以下疾病的临床前模型中，所述疾病包括：炎性肺病，包括哮喘(Freund-Michel,V；Frossard,N., Pharmacology&Therapeutics(2008),117(1),52-76)；间质性膀胱炎(Hu Vivian,Y.,et.al.The Journal of Urology(2005),173(3),1016-21)；炎性肠道疾病，包括溃疡性结肠炎和Crohn病(Di Mola,F.F.,et.al.,Gut(2000), 46(5),670-678)；以及炎性皮肤病，例如异位性皮炎(Dou,Y.-C.,et.al. Archives of Dermatological Research(2006),298(1),31-37),湿疹和银屑病 (Raychaudhuri,S.P.,et al.,J.Investigative Dermatology(2004),122(3), 812-819)。
此外，神经营养蛋白/Trk途径(特别是BDNF/TrkB)已经涉及神经退行性疾病的病因学，其中所述的神经退行性疾病包括多发性硬化症,Parkinson 疾病和Alzheimer疾病(Sohrabji,F.,Lewis,Danielle K.,Frontiers in Neuroendocrinology(2006),27(4),404-414)。
此外，认为在锥虫在人类宿主的寄生虫感染(Chagas病)中，TrkA对于感染的疾病过程是重要的(de Melo-Jorge,M.,et al.,Cell Host&Microbe (2007),1(4),251-261)。
据信Trk激酶的多种类小分子抑制剂可用于治疗疼痛或癌症是已知的 (Expert Opin.Ther.Patents(2009)19(3))。
然而，仍需要用于治疗疼痛(特别是慢性疼痛)以及用于治疗癌症、炎症、神经退行性疾病和某些传染病的化合物和方法。
发明概述
目前，已经发现大环化合物为Trk激酶的抑制剂，特别是TrkA和/或TrkB 和/或TrkC的抑制剂，并且可以用于治疗诸如癌症和疼痛(包括慢性和急性疼痛)之类的紊乱和疾病。作为TrkA和/或TrkB的抑制剂的化合物可以用于治疗多种疼痛，包括炎性疼痛、神经性疼痛以及与癌症、手术和骨折有关的疼痛。此外，本发明的化合物可用于治疗炎症、神经退行性疾病和某些传染病。
由此，在本发明的一个方面中提供了具有通式I所示的新型化合物：
及其立体异构体、可药用的盐和溶剂化物，其中环A,环B,W,m,D,R2, R2a,R3,R3a和Z如本文所定义。
在另一个方面中，本发明提供了具有通式I所示的新型化合物：
或其可药用的盐或溶剂化物，其中环A,W,m,R2,R2a,R3,Z,R5和R6如本文所定义。
在本发明的另一个方面中，提供了包含通式I所示的化合物以及载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。
在本发明的另一个方面中，提供了用于治疗或预防哺乳动物的疼痛、癌症、炎症、神经退行性疾病和某些传染病的方法，该方法包括向所述的哺乳动物给药有效量的通式I所示的化合物。
在本发明的另一个方面中，提供了通式I所示的化合物在制造用于治疗或预防疼痛、癌症、炎症、神经退行性疾病和某些传染病的药剂中的用途。
在本发明的另一个方面中，提供了通式I所示的化合物在治疗或预防疼痛、癌症、炎症、神经退行性疾病和某些传染病中的用途。
另一个方面提供了用于制备通式I所示的化合物的中间体。在一个实施方案中，通式I所示的某些化合物可以用作用于制备通式I所示的其他化合物的中间体。
另一个方面包括用于制备的方法、分离的方法以及纯化本文所述的化合物的方法。
发明详述
本发明的一个实施方案提供了通式I所示的化合物或其可药用的盐或溶剂化物，其中所述的化合物包含吡唑并[1,5-a]嘧啶环并具有以下结构：
其中：
环A选自具有以下结构的环A-1,A-2和A-3：
其中波浪线线标记的1表示环A与环B的链接点，而波浪线标记的2 表示环A与W的链接点；
X为N或CH；
Y为H或F；
R1为H,(1-3C)烷氧基或卤素；
环B选自具有以下结构的环B-1和B-2：
其中波浪线标记的3表示与环A的链接点，而波浪线标记的4表示与式 I所示的吡唑并[1,5-a]嘧啶环的链接点；
W为O,NH或CH2，其中当环A为A-2时，则W为CH2；
m为0,1或2；
D为碳；
R2和R2a独立地为H,F,(1-3C)烷基或OH，前提条件是R2和R2a不均为 OH；
R3和R3a独立地为H,(1-3C)烷基或羟基(1-3C)烷基；
或者D为碳或氮，R2和R3不存在并且R2a和R3a与它们所连接的原子一起形成具有1-2个环杂原子的5-6元杂芳环；
Z为*-NR4aC(＝O)-,*-ONHC(＝O)-,*-NR4bCH2-或*-OC(＝O)-，其中星号表示Z与具有R3的碳的链接点；
R4a为H,(1-6C)烷基,氟代(1-6C)烷基,二氟代(1-6C)烷基,三氟代(1-6C) 烷基,羟基(1-6C烷基)或二羟基(2-6C烷基)；
R4b为H,(1-6C)烷基,氟代(1-6C)烷基,二氟代(1-6C)烷基,三氟代(1-6C) 烷基,羟基(1-6C烷基),二羟基(2-6C烷基),(1-6C烷基)C(O)-,(3-6C环烷基)C(O)-,Ar1C(O)-,HOCH2C(O)-,(1-6C烷基)磺酰基,(3-6C环烷基)磺酰基, Ar2(SO2)-,HO2CCH2-或(1-6C烷基)NH(CO)-；
Ar1为可任选地被一个或多个取代基取代的苯基，其中所述的取代基选自卤素,(1-6C)烷基和(1-6C)烷氧基；
Ar2为可任选地被一个或多个取代基取代的苯基，其中所述的取代基选自卤素,(1-6C)烷基和(1-6C)烷氧基；以及
R5和R6独立地为H,卤素,OH,(1-6C)烷基和羟基(1-6C)烷基。
在通式I的一个实施方案中，环B为具有以下结构的环B-2：
D为碳，R2和R2a独立地为(1-3C)烷基，并且R3和R3a独立地为H,(1-3 C)烷基或羟基(1-3C)烷基，或者
D为碳或氮，R2和R3不存在并且R2a和R3a与它们所连接的原子一起形成具有1-2个环杂原子的5-6元杂芳环。
在通式I的一个实施方案中，环A为具有以下结构的环A-1：
其中X,Y和R1如通式I中所定义。在通式I的一个实施方案中，X为 CH。在一个实施方案中，X为N。在通式I的一个实施方案中，Y为F。在一个实施方案中，Y为H。在通式I的一个实施方案中，R1为H。在一个实施方案中，R1为(1-3C)烷氧基。具体的实例为甲氧基。在一个实施方案中， R1为卤素。在一个实施方案中，R1为F。
当环A由结构A-1所表示时，其具体的实例包括以下结构：
在一个实施方案中，环A为具有以下结构的环A-2。
其中Y为H或F。在一个实施方案中，Y为F。在一个实施方案中，Y 为H。在一个实施方案中，R1为H。在一个实施方案中，R1为(1-3C)烷氧基。一个具体的实例为甲氧基。在一个实施方案中，R1为卤素。在一个实施方案中，R1为F。
当环A由环A-2所表示时，其具体的实例为以下结构：
在通式I的一个实施方案中，环A为具有以下结构的环A-3。
其中Y和R1如通式I中所定义。在一个实施方案中，Y为F。在一个实施方案中，Y为H。在一个实施方案中，R1为H。在一个实施方案中，R1为(1-3C)烷氧基。具体的实例为甲氧基。在一个实施方案中，R1为卤素。在一个实施方案中，R1为F。
当环A由环A-3所表示时，其具体的实例为以下结构：
在通式I的一个实施方案中，W为O。
在一个实施方案中，W为NH。
在一个实施方案中，W为CH2。
在通式I的一个实施方案中，D为碳，R2和R2a独立地为H,F,(1-3C) 烷基或OH(前提条件是R2和R2a不均为OH)，并且R3和R3a独立地为H,(1-3 C)烷基或羟基(1-3C)烷基。
在一个实施方案中，R2和R2a独立地为H,F,甲基或OH，前提条件是 R2和R2a不均为OH。
在一个实施方案中，R2和R2a均为H。
在一个实施方案中，R2为H，而R2a为F。
在一个实施方案中，R2和R2a均为F。
在一个实施方案中，R2为H，而R2a为OH。
在一个实施方案中，R2为H，而R2a为甲基。
在一个实施方案中，R2和R2a均为甲基。
在一个实施方案中，R3和R3a独立地为H,(1-3C)烷基或羟基(1-3C)烷基。
在一个实施方案中，R3a为H.在一个实施方案中，R3为H。在一个实施方案中，R3和R3a均为H。
在一个实施方案中，R3a为(1-3C)烷基。其实例为甲基,乙基,丙基和异丙基。在一个实施方案中，R3为(1-3C)烷基。其实例为甲基,乙基,丙基和异丙基。
在一个实施方案中，R3a为(1-3C)烷基，而R3为H。在一个实施方案中， R3a为甲基，而R3为H。
在一个实施方案中，R3a和R3均为(1-3C)烷基。在一个实施方案中，R3和R3a均为甲基。
在一个实施方案中，R3为羟基(1-3C)烷基。实例包括羟基甲基,2-羟基乙基,2-羟基丙基以及3-羟基丙基。在一个实施方案中，R3为羟基甲基,2-羟基乙基,2-羟基丙基或3-羟基丙基，而R3a为H。
在通式I的一个实施方案中，D为碳或氮，R2和R3不存在，而R2a和 R3a与它们所连接的原子一起形成具有1-2个环杂原子的5-6元杂芳环。在一个实施方案中，R2a和R3a与它们所连接的原子一起形成具有1-2个环氮原子的5-6元杂芳环。杂芳基环的实例包括吡啶基和吡唑基环。杂芳基环的具体实例包括以下结构：
在一个实施方案中，Z为*-NR4aC(＝O)-。
在一个实施方案中，R4a为H。
在一个实施方案中，R4a为(1-6C)烷基。实例包括甲基,乙基,丙基,异丙基,丁基和异丁基。
在一个实施方案中，R4a为氟代(1-6C)烷基。实例包括氟代甲基和2-氟代乙基。
在一个实施方案中，R4a为二氟代(1-6C)烷基。实例包括二氟代甲基和 2,2-二氟代乙基。
在一个实施方案中，R4a为三氟代(1-6C)烷基。实例包括三氟代甲基和 2,2,2-三氟代乙基。
在一个实施方案中，R4a为羟基(1-6C烷基)。实例包括羟基甲基,2-羟基乙基,2-羟基丙基和3-羟基丙基。
在一个实施方案中，R4a为二羟基(2-6C烷基)。实例包括2,3-二羟基丙基。
在一个实施方案中，R4a为H或(1-6C)烷基。在一个实施方案中，R4a为 H或Me。
当Z由*-NR4aC(＝O)-所表示时，其实例为*-ONHC(＝O)-。
在一个实施方案中，Z为*-NR4bCH2-。
在一个实施方案中，R4b为H。
在一个实施方案中，R4b选自(1-6C)烷基,氟代(1-6C)烷基,二氟代(1-6C) 烷基和三氟代(1-6C)烷基。
在一个实施方案中，R4b为(1-6C)烷基。实例包括甲基,乙基,丙基,异丙基,丁基和叔丁基。在一个实施方案中，R4b为甲基。
在一个实施方案中，R4b为氟代(1-6C)烷基。实例包括氟代甲基和2-氟代乙基。
在一个实施方案中，R4b为二氟代(1-6C)烷基。实例包括二氟代甲基和 2,2-二氟代乙基。
在一个实施方案中，R4b为三氟代(1-6C)烷基。实例包括三氟代甲基和 2,2,2-三氟代乙基。
在一个实施方案中，R4b选自(1-6C烷基)C(O)-,(3-6C环烷基)C(O)-, Ar1C(O)-和HOCH2C(O)-。
在一个实施方案中，R4b为(1-6C烷基)C(O)-。实例包括CH3C(O)-, CH3CH2C(O)-,CH3CH2CH2C(O)-和(CH3)2CHC(O)-。在一个实施方案中，R4is CH3C(O)-。
在一个实施方案中，R4b为(3-6C环烷基)C(O)-。实例包括环丙基C(O)-, 环丁基C(O)-,环戊基C(O)-和环己基C(O)-。
在一个实施方案中，R4b为Ar1C(O)-。实例为苯基C(O)-。
在一个实施方案中，R4b为HOCH2C(O)-。
在一个实施方案中，R4b选自(1-6C烷基)磺酰基,(3-6C环烷基)磺酰基和 Ar2(SO2)-。
在一个实施方案中，R4b为(1-6C烷基)磺酰基。实例包括甲基磺酰基,乙基磺酰基和丙基磺酰基。
在一个实施方案中，R4b为(3-6C环烷基)磺酰基。实例包括环丙基磺酰基,环丁基磺酰基,环戊基磺酰基和环己基磺酰基。在一个实施方案中，R4为甲基磺酰基。
在一个实施方案中，R4b为Ar2(SO2)-。实例为苯基磺酰基。
在一个实施方案中，R4b为HO2CCH2-。
在一个实施方案中，R4b为(1-6C烷基)NH(CO)-。实例包括CH3NHC(O)-, CH3CH2NHC(O)-,CH3CH2CH2NHC(O)-和(CH3)2CHNHC(O)-。在一个实施方案中，R4为CH3NHC(O)-。
在一个实施方案中，R4b选自H,甲基,-C(O)CH3,甲基磺酰基, -C(O)CH2OH,-CH2COOH和-C(O)NHCH2CH3。
在一个实施方案中，Z为*-OC(＝O)-。
在通式I的一个实施方案中，环B为环B-1：
其中R5和R6独立地为H,卤素,OH,(1-6C)烷基或羟基(1-6C)烷基。
在一个实施方案中，R5和R6独立地为H,F,OH,(1-6C)烷基或羟基(1-6C) 烷基。在一个实施方案中，R5为H，而R6为H,F,OH,(1-6C)烷基或羟基(1-6C) 烷基。
在一个实施方案中，R5和R6独立地为H,F,OH,(1-3C)烷基或羟基(1-3C) 烷基。在一个实施方案中，R5为氢，而R6为H,F,OH,(1-3C)烷基或羟基(1-3C) 烷基。
在一个实施方案中，R5和R6独立地为H,F,OH,甲基,乙基,HOCH2-或 HOCH2CH2-。在一个实施方案中，R5为氢，而R6为H,F,OH,甲基,乙基, HOCH2-或HOCH2CH2-。
在一个实施方案中，R5和R6独立地为H,F或甲基。在一个实施方案中， R5为H，而R6为H,F或甲基。
在一个实施方案中，R5为H，而R6为F。
在一个实施方案中，R5为H，而R6为甲基。
在一个实施方案中，R5和R6均为H。
在一个实施方案中，R5和R6均为F。
在一个实施方案中，R5和R6均为甲基。
在一个实施方案中，环B为环B-1，其可任选地被一个或两个取代基取代，其中所述的取代基独立地选自OH和F，前提条件为两个OH取代基不在同一个环的碳原子上。
当环B由环B-1所表示时，其具体实例包括以下结构：
在通式I的一个实施方案中，环B为具有以下通式的环B-2：
在一个实施方案中，m为0。
在一个实施方案中，m为1。
在一个实施方案中，m为2。
本发明的一个实施方案提供了通式I所示的化合物或其可药用的盐或溶剂化物，其中：
环B为环B-1：
环A选自具有以下结构得到环A-1,A-2和A-3：
其中波浪线标记的1表示环A与通式I所示的吡咯烷环的链接点，而波浪线标记的2表示环A与W的链接点；
X为N或CH；
Y为H或F；
R1为H,(1-3C)烷氧基或卤素；
W为O,NH或CH2，其中当环A为A-2时，则W为CH2；
m为0,1或2；
D为碳；
R2和R2a独立地为H,F,(1-3C)烷基或OH，前提条件是R2和R2a不均为 OH；
R3和R3a独立地为H,(1-3C)烷基或羟基(1-3C)烷基；
或者R2和R3不存在，并且R2a和R3a与它们所连接的原子一起形成具有1-2个环氮原子的二价5-6元杂芳环；
Z为*-NR4aC(＝O)-,*-ONHC(＝O)-,*-NR4bCH2-或*-OC(＝O)-，其中星号表示Z与具有R3的碳的链接点；
R4a为H,(1-6C)烷基,氟代(1-6C)烷基,二氟代(1-6C)烷基,三氟代(1-6C) 烷基,羟基(1-6C烷基)或二羟基(2-6C烷基)；
R4b为H,(1-6C)烷基,氟代(1-6C)烷基,二氟代(1-6C)烷基,三氟代(1-6C) 烷基,羟基(1-6C烷基),二羟基(2-6C烷基),(1-6C烷基)C(O)-,(3-6C环烷基)C(O)-,Ar1C(O)-,HOCH2C(O)-,(1-6C烷基)磺酰基,(3-6C环烷基)磺酰基, Ar2(SO2)-,HO2CCH2-或(1-6C烷基)NH(CO)-；
Ar1为可任选地被一个或多个取代基取代的苯基，其中所述的取代基独立地选自卤素,(1-6C)烷基和(1-6C)烷氧基；
Ar2为可任选地被一个或多个取代基取代的苯基，其中所述的取代基独立地选自卤素,(1-6C)烷基和(1-6C)烷氧基；以及
R5和R6独立地为H,卤素,OH,(1-6C)烷基或羟基(1-6C)烷基。
本发明的一个实施方案提供了通式IA所示的化合物：
或其可药用的盐或溶剂化物，其中：
环A选自具有以下结构的环A-1,A-2和A-3：
其中波浪线标记的1表示环A与通式I所示的吡咯烷环的链接点，而波浪线标记的2表示环A与W的链接点；
X为N或CH；
Y为H或F；
R1为H,(1-3C)烷氧基或卤素；
W为O,NH或CH2，其中当环A为A-2时，则W为CH2；
m为0,1或2；
R2和R2a独立地为H,F或OH，前提条件是R2和R2a不均为OH；
R3为H,(1-3C)烷基或羟基(1-3C)烷基；
Z为*-NR4aC(＝O)-,*-ONHC(＝O)-,*-NR4bCH2-或*-OC(＝O)-，其中星号表示Z与具有R3的碳的链接点；
R4a为H,(1-6C)烷基,氟代(1-6C)烷基,二氟代(1-6C)烷基,三氟代(1-6C) 烷基,羟基(1-6C烷基)或二羟基(2-6C烷基)；
R4b为H,(1-6C)烷基,氟代(1-6C)烷基,二氟代(1-6C)烷基,三氟代(1-6C) 烷基,羟基(1-6C烷基),二羟基(2-6C烷基),(1-6C烷基)C(O)-,(3-6C环烷基)C(O)-,Ar1C(O)-,HOCH2C(O)-,(1-6C烷基)磺酰基,(3-6C环烷基)磺酰基, Ar2(SO2)-,HO2CCH2-或(1-6C烷基)NH(CO)-；
Ar1为可任选地被一个或多个取代基取代的苯基，其中所述的取代基独立地选自卤素,(1-6C)烷基和(1-6C)烷氧基；
Ar2为可任选地被一个或多个取代基取代的苯基，其中所述的取代基独立地选自卤素,(1-6C)烷基和(1-6C)烷氧基；以及
R5和R6独立地为H,卤素,OH,(1-6C)烷基或羟基(1-6C)烷基。
在一个实施方案中，通式IA包括这样的化合物，其中：
环A为由以下结构所表示的环A-1：
其中波浪线标记的1表示环A与通式I所示的吡咯烷环的链接点，而波浪线标记的2表示环A与W的链接点；
环B为由以下结构所表示的环B-1：
其中波浪线标记的3表示与环A的链接点，而波浪线标记的4表示与通式I所示的吡唑并[1,5-a]嘧啶环的链接点；
X为N或CH；
Y为为H或F；
R1为H,(1-3C)烷基,(1-3C)烷氧基或卤素；
W为O或NH；
m为0,1或2；
R2和R2a独立地为H,F或OH，前提条件是R2和R2a不均为OH；
R3为H,(1-3C)烷基或羟基(1-3C)烷基；
Z为*-NR4aC(＝O)-,*-ONHC(＝O)-或*-OC(＝O)-，其中星号表示与具有R3的碳的链接点；
R4a为H,(1-6C)烷基,氟代(1-6C)烷基,二氟代(1-6C)烷基,三氟代(1-6C) 烷基,羟基(1-6C烷基)或二羟基(1-6C烷基)；以及
R5和R6独立地为H,卤素,OH,(1-6C)烷基或羟基(1-6C)烷基。
在一个实施方案中，X为N。在一个实施方案中，X为CH。
在一个实施方案中，通式IA包括这样的化合物，其中：
环A为由以下结构所表示的环A-2：
其中波浪线标记的1表示环A与通式I所示的吡咯烷环的链接点，而波浪线标记的2表示环A与W的链接点；
环B为由以下结构所表示的环B-1：
其中波浪线标记的3表示与环A的链接点，而波浪线标记的4表示与通式I所示的吡唑并[1,5-a]嘧啶环的链接点；
Y为H或F；
R1为H,(1-3C)烷基,(1-3C)烷氧基或卤素；
m为0,1或2；
W为CH2；
m为0,1或2；
R2和R2a独立地为H,F或OH，前提条件是R2和R2a不均为OH；
R3为H,(1-3C)烷基或羟基(1-3C)烷基；
Z为*-NR4aC(＝O)-，其中星号表示与具有R3的碳的链接点；
R4a为H,(1-6C)烷基,氟代(1-6C)烷基,二氟代(1-6C)烷基,三氟代(1-6C) 烷基,羟基(1-6C烷基)或二羟基(1-6C烷基)；以及
R5和R6独立地为H,卤素,OH,(1-6C)烷基或羟基(1-6C)烷基。
在一个实施方案中，通式IA包括这样的化合物，其中：
环A为由以下结构所表示的环A-3：
其中波浪线标记的1表示环A与通式I所示的吡咯烷环的链接点，而波浪线标记的2表示环A与W的链接点；
环B为由以下结构所表示的环B-1：
其中波浪线标记的3表示与环A的链接点，而波浪线标记的4表示与通式I所示的吡唑并[1,5-a]嘧啶环的链接点；
Y为H或F；
R1为H,(1-3C)烷基,(1-3C)烷氧基或卤素；
W为O；
m为0,1或2；
R2和R2a独立地为H,F或OH，前提条件是R2和R2a不均为OH；
R3为H,(1-3C)烷基或羟基(1-3C)烷基；
Z为*-OC(＝O)-或*-NR4aC(＝O)-，其中星号表示与具有R3的碳的链接点；
R4a为H,(1-6C)烷基,氟代(1-6C)烷基,二氟代(1-6C)烷基,三氟代(1-6C) 烷基,羟基(1-6C烷基)或二羟基(1-6C烷基)；以及
R5和R6独立地为H,卤素,OH,(1-6C)烷基或羟基(1-6C)烷基。
在一个实施方案中，通式IA包括这样的化合物，其中：
环A为由以下结构所表示的环A-1：
其中波浪线标记的1表示环A与通式I所示的吡咯烷环的链接点，而波浪线标记的2表示环A与W的链接点；
环B为由以下结构所表示的环B-1：
其中波浪线标记的3表示与环A的链接点，而波浪线标记的4表示与通式I所示的吡唑并[1,5-a]嘧啶环的链接点；
X为N或CH；
Y为H或F；
R1为H,(1-3C)烷基,(1-3C)烷氧基或卤素；
W为O；
m为0,1或2；
R2和R2a独立地为H,F,或OH，前提条件是R2和R2a不均为OH；
R3为H,(1-3C)烷基或羟基(1-3C)烷基；
Z为*-NR4bCH2-，其中星号表示与具有R3的碳的链接点；
R4b为H,(1-6C)烷基,氟代(1-6C)烷基,二氟代(1-6C)烷基,三氟代(1-6C) 烷基(1-6C烷基)C(O)-,(3-6C环烷基)C(O)-,Ar1C(O)-,HOCH2C(O)-,(1-6C 烷基)磺酰基,(3-6C环烷基)磺酰基,Ar2(SO2)-,HO2CCH2-或(1-6C烷基)NH(CO)-；
Ar1为可任选地被一个或多个取代基取代的苯基，其中所述的取代基独立地选自卤素,(1-6C)烷基和(1-6C)烷氧基；
Ar2为可任选地被一个或多个取代基取代的苯基，其中所述的取代基独立地选自卤素,(1-6C)烷基和(1-6C)烷氧基；以及
R5和R6独立地为H,卤素,OH,(1-6C)烷基或羟基(1-6C)烷基。
应该理解的是，根据本发明的某些化合物可以包含一个或多个不对称中心，并且由此可以以诸如外消旋或非对映异构体的混合物之类的异构体混合物、或者以纯的对映异构体或非对映异构体的形式制备或分离。应该想到，本发明的化合物的所有立体异构体形式(包括但不限于非对映异构体、旋光对映异构体和阻转异构体，以及它们的混合物(例如外消旋混合物))构成了本发明的一部分。
在一个实施方案中，通式I所示的化合物具有图1-a所示的绝对构型，其中环B为环B-1：
在一个实施方案中，通式I所示的化合物具有图1-b所示的绝对构型，其中环B为环B-1：
在本文所示的结构中，在对任何具体手性原子的立体化学没有明确指定的情况下，则所有的立体异构体都被考虑并包含在本发明的化合物中。在立体化学通过表示具体构型的契形实线或虚线明确指定的情况下，则立体异构体由此被明确指定和定义的。
如本文所用，术语“(1-3C)烷基”和“(1-6C)烷基”分别指1至3个碳原子、以及1至6个碳原子的饱和线性或支链的单价烃基。实例包括但不限于甲基,乙基,1-丙基,异丙基,1-丁基,异丁基,仲丁基,叔丁基,2-甲基-2- 丙基,戊基和己基。
如本文所用，术语“氟代(1-6C)烷基”是指如本文所定义的1至6个碳原子的饱和线性或支链的单价烃基，其中1个氢被氟原子替代。
如本文所用，术语“二氟代(1-6C)烷基”是指如本文所定义的1至6个碳原子的饱和线性或支链的单价烃基，其中2个氢被氟原子替代。
如本文所用，术语“三氟代(1-6C)烷基”是指如本文所定义的1至6个碳原子的饱和线性或支链的单价烃基，其中3个氢被氟原子替代。
如本文所用，术语“羟基(1-6C烷基)”是指1至6个碳原子的饱和线性或支链的单价烃基，其中1个氢被羟基替代。
如本文所用，术语“二羟基(1-6C烷基)”是指如本文所定义的1至6个碳原子的饱和线性或支链的单价烃基，其中2个氢被羟基(OH)替代，只要所述的羟基不在同一碳原子上即可。
如本文所用，术语“(1-6C烷基)磺酰基”是指(1-6C烷基)SO2-基团，其中所述的自由基在硫原子上，并且(1-6C烷基)部分如上文所定义。实例包括甲基磺酰基(CH3SO2-)和乙基磺酰基(CH3CH2SO2-)。
如本文所用，术语“(3-6C环烷基)磺酰基”是指(3-6C环烷基)SO2-基团，其中所述的自由基在硫原子上。实例为环丙基磺酰基。
如本文所用，术语“(1-4C)烷氧基”和“(1-6C)烷氧基”分别指1至4 个碳原子、以及1至6个碳原子的饱和线性或支链的单价烷氧基，其中所述的自由基在氧原子上。实例包括甲氧基,乙氧基,丙氧基,异丙氧基和丁氧基。
术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘。
此外，还应该理解的是通式I所示的某些化合物可以用作用于制备通式 I所示的其他化合物的中间体。
通式I所示的化合物包括其盐。在某些实施方案中，所述的盐为可药用的盐。此外，通式I所示的化合物包括此类化合物的其他盐，该盐并非必须是可药用的盐，并且可以用作用于制备和/或纯化通式I所示的化合物和/或用于分离通式I所示的化合物的对映异构体的中间体。
术语“可药用的”表示，所述的物质或组合物在化学上和/或毒理学上与包含配制物的其他组成部分、和/或待使用其进行治疗的哺乳动物是相容性的。
此外，还应该理解的是通式I所示的化合物及其盐可以以溶剂化物的形式分离，并由此任何此类的溶剂化物都包含在本发明的范围内。
此外，本发明的化合物还可以在构成所述化合物的一个或多个原子处包含原子同位素的非天然部分。即，原子(特别是当与通式I所示的化合物相关而提及时的原子)包含天然形成或合成生成的原子(天然丰富的或同位素富集的形式)的所有同位素或同位素混合物。例如，当提及氢时，应该理解的是其是指1H,2H,3H或其混合物；当提及碳时，应该理解的是其是指11C,12C, 13C,14C或其混合物；当提及氮时，应该理解的是其是指13N,14N,15N或其混合物；当提及氧时，应该理解的是其是指14O,15O,16O,17O,18O或其混合物；以及当提及氟时，应该理解的是其是指18F,19F或其混合物。因此，根据本发明的化合物还包括具有一个或多个原子的一个或多个同为的化合物及其混合物，包括放射性的化合物，其中一个或多个非放射性的原子已经被其放射性富集的同位素之一所替代。放射性标记的化合物可用作治疗试剂(例如癌症治疗试剂)、研究试剂(例如测试试剂)以及诊断试剂(例如体内成像试剂)。本发明化合物的所有同位素变体(放射性的或非放射性的)都被包含在本发明的范围内。
本发明还提供了用于制备本文所述的通式I所示的化合物或其盐的方法，其包括：
(a)对于通式I所示的化合物(其中Z为*-NHC(＝O)-，而环A,环B,W, D,R2,R2a,R3,R3a和m如通式I所定义)而言，在偶联试剂和碱存在的条件下，在P1为H或羧基保护基的情况下，使具有通式II所示的相应化合物环化；或者
(b)对于通式I所示的化合物(其中W为O，环A为通式A-1，X为N，而环B,D,Z,Y,R1,R2,R2a,R3,R3a和m如通式I所定义)而言，
在碱存在的条件下，在n为1,2,3或4，而L1为离去基团或原子的情况下，使具有通式III所示的相应化合物环化；或者
(c)对于通式I所示的化合物(其中W为CH2，环A为通式A-2，而环 B,D,Z,Y,R1,R2,R2a,R3,R3a和m如通式I所定义)而言，
在碱存在的条件下，在L2为离去基团或原子的情况下，使具有通式IV 所示的相应化合物环化；或者
(d)对于通式I所示的化合物(其中Z为*-NHC(＝O)-，而环A,环B,W, D,R2,R2a,R3,R3a和m如通式I所定义)而言，在碱和偶联试剂存在的条件下，使具有通式V所示的相应化合物环化；或者
(e)对于通式I所示的化合物(其中Z为*-NHCH2-，而环A,环B,W,D, R2,R2a,R3,R3a和m如通式I所定义)而言，在还原剂存在的条件下，使具有通式VI所示的相应化合物环化；或者
(f)对于通式I所示的化合物(其中Z为*-NHCH2-，而环A,环B,W,D, R2,R2a,R3,R3a和m如通式I所定义)而言，在三苯基膦存在的条件下，使具有通式VII所示的相应化合物环化；或者
(g)对于通式I所示的化合物(环A,环B,W,D,m,R2,R2a,R3和R3a如通式I所定义，Z为*-NR4bCH2-，而R4b为(1-6C烷基)C(O)-,(3-6C环烷基)C(O)-, Ar1C(O)-,HOCH2C(O)-,(1-6C烷基)磺酰基,(3-6C环烷基)磺酰基,(1-6C烷基)磺酰基,(3-6C环烷基)磺酰基或Ar2(SO2)-)而言，在碱存在的条件下，使用具有以下通式的试剂使具有通式VIII所示的相应化合物偶联，其中所述通式分别为(1-6C烷基)C(O)-L3,(3-6C环烷基)C(O)-L3,Ar1C(O)-L3, HOCH2C(O)-L3,(1-6C烷基)(SO2)-L3,(3-6C环烷基)(SO2)-L3或Ar2(SO2)-L3，其中L3为离去原子；或者
(h)对于通式I所示的化合物(其中环A,环B,W,D,R2,R2a,R3,R3a和 m如通式I所定义，Z为*-NR4bCH2-，而R4b为(1-6C烷基)NH(CO)-)而言，在碱存在的条件下，使用具有通式(1-6C烷基)N＝C＝O的试剂使具有通式VIII 所示的相应化合物反应；或者
(i)对于通式I所示的化合物(其中R2为F，R2a为H，而环A,环B,Z, W,D,R3,R3a和m如通式I所定义)而言，使用氟化试剂使具有通式IX所示的相应化合物反应；或者
(j)对于通式I所示的化合物(其中W为O，环A为通式A-1，X为CH，而Y,R1,D,环B,Z,R2,R2a,R3和m如通式I所定义)而言，
在碱存在的条件下，使具有通式X所示的相应化合物(其中n为1,2,3 或4，而L1为离去基团或原子)环化；并且
可任选地，出去任何保护基团，以及可任选地制备其盐。
在上文所述的方法(a)-(j)的一个实施方案中，环B为具有以下结构的环 B-1：
D为碳，R2和R2a独立地为H,F,(1-3C)烷基或OH(前提条件是R2和 R2a不均为OH)，R3为H,(1-3C)烷基或羟基(1-3C)烷基，而环A,W,m,Z,R5和R6如通式I所定义。
对于方法(a)，可以采用传统的形成氨基化合物键的条件来形成环化，例如通过使用活化剂处理羧酸，然后通过在碱存在的条件下加入胺。合适的活化剂包括EDCI,草酰氯,亚硫酰氯,HATU和HOBt。合适的碱包括胺碱，例如三乙胺,二异丙基乙基胺,嘧啶或过量的氨水。合适的溶剂包括DCM, DCE,THF和DMF。
对于方法(b)和(c)，离去原子L1和L2可以为例如卤素原子，如Br,Cl或 I。备选地，L1和L2可以为离去基团，例如芳基磺酰氧基或烷基磺酰氧基，如甲磺酰基或甲苯磺酰基。合适的碱包括碱金属碳酸盐，例如碳酸钠、碳酸钾或碳酸铯。常规的溶剂包括质子惰性溶剂，例如醚(例如四氢呋喃或对二氧六环)DMF或丙酮。通常可以在升高的温度(例如50-150℃，例如在85 ℃下)下进行反应。
对于方法(d)，合适的偶联试剂包括HATU,HBTU,TBTU,DCC,DIEC以及本领域的技术人员公知的氨基化合物偶联试剂。合适的碱包括叔胺碱，例如DIEA和三乙胺。常规的溶剂包括DMF,THF,DCM和DCE。
对于方法(e)，合适的还原剂包括Me4N(OAc)3BH, Na(OAc)3BH和NaCNBH3。合适的溶剂包括中性溶剂，例如乙腈, THF和DCE。通常可以在环境温度下实施所述的反应。
对于方法(f)，在某些实施方案中，三苯基膦试剂以聚苯乙烯结合的PPh3树脂(由Biotage Systems以PS-PPh3形式出售)的形式使用。通常，在环境温度下实施所述的方法，合适的溶剂包括中性溶剂，例如DCM。
对于方法(g)，离去原子L3可以为卤素，例如Cl或Br。合适的碱包括叔胺碱，例如二异丙基乙基胺和三乙胺。通常在环境温度下实施所述的反应。
对于方法(h)，合适的碱包括叔胺碱，例如DIEA和三乙胺。通常在环境温度下实施所述的反应。
对于方法(i)，氟化试剂可以为例如双(2-甲氧基乙基)氨基-硫三氟化物(De 氧代-FluorTM)或二乙基氨基硫三氟化物(DAST)。合适的溶剂包括二氯甲烷, 氯仿,二氯乙烷和甲苯。通常在环境温度下实施所述的反应。
对于方法(j)，碱可以为例如碱金属碳酸盐，如碳酸钠、碳酸钾或碳酸铯。常规的溶剂包括质子惰性溶剂，例如醚(例如四氢呋喃或对二氧六环)或甲苯。通常可以在环境温度至回流温度之间的温度(例如在85℃下)下进行反应。
在上文所述的任一种方法中所述化合物中的胺基可以用任何常规的胺保护基团保护，其中所述的保护基团例如在Greene&Wuts,eds.,“Protecting Groups in Organic Synthesis”,2nd ed.New York；John Wiley&Sons,Inc.,1991 中所述。胺保护基团的实例包括酰基和烷氧基羰基，例如叔丁氧基羰基(BOC) 和[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基(SEM)。类似地，羧基可以使用任何常规的羧基保护基团保护，其中所述的保护基团例如在Greene&Wuts,eds., “Protecting Groups in Organic Synthesis”,2nd ed.New York；John Wiley&Sons, Inc.,1991中所述。羧基保护基团的实例包括(1-6C)烷基，例如甲基,乙基和叔丁基。醇基可以使用任何常规的醇保护基团保护，其中所述的保护基团例如在Greene&Wuts,eds.,“Protecting Groups in Organic Synthesis”,2nd ed. New York；John Wiley&Sons,Inc.,1991中所述。醇保护基团的实例包括苄基,三苯甲基,硅醚等。
此外，认为通式II,III,IV,V,VI,VII,VIII,IX和X所示的化合物是新型的，并且作为本发明的其他方面提供。
本发明的化合物作为TrkA抑制剂的能力可以通过在实施例A和B中所述的测试方法来证明。
作为TrkA和/或TrkB的抑制剂的某些化合物可以用于治疗多种类型的疼痛，包括炎性疼痛、神经性疼痛以及与癌症、手术和骨折有关的疼痛。
在一个实施方案中，通式I所示的化合物可以用于治疗哺乳动物的疼痛，包括慢性和急性疼痛。
急性疼痛(国际疼痛研究学会(International Association for the Study of Pain))由疾病、炎症或组织损伤所导致。这种类型的疼痛通常在例如创伤或手术后突然发生，并且可能伴随焦虑或紧张。通常，可以对其病因进行诊断和治疗，并且这种疼痛可以限制在给定的时间和严重程度内。在某些罕见的情况下，这种疼痛可以成为慢性的。
慢性疼痛(国际疼痛研究学会(International Association for the Study of Pain))被广泛认为代表了疾病本身。其可以因环境和心理因素而更加恶化。与急性疼痛相比，慢性疼痛持续了更长的时期(通常为3个月或更长)，并且对大部分的医疗治疗都具有抗性。其可以并且经常导致患者产生严重的问题。
通式I所示的化合物还可以用于治疗哺乳动物的癌症。具体实例包括成神经细胞瘤,卵巢癌,胰腺癌,结肠直肠癌和前列腺癌。
通式I所示的化合物还可以用于治疗哺乳动物的炎症。
通式I所示的化合物还可以用于治疗哺乳动物的某些传染病，例如锥虫感染。
通式I所示的化合物还可以用于治疗哺乳动物的神经退行性疾病。神经退行性疾病的实例包括脱髓鞘疾病和髓鞘形成障碍。神经退行性疾病的其他实例包括多发性硬化症,Parkinson疾病和Alzheimer疾病。
此外，通式I所示的化合物还可以用于治疗哺乳动物的间质性膀胱炎 (IC),疼痛性膀胱综合症(PBS),尿失禁,哮喘,厌食,异位性皮炎和银屑病。
由此，本发明的另一个方面提供了治疗或预防哺乳动物疼痛的方法，该方法包括向所述的哺乳动物给药可以有效治疗或预防所述疼痛的量的、通式 I所示的一种或多种化合物或其可药用的盐。在一个实施方案中，所述的疼痛为慢性疼痛。在一个实施方案中，所述的疼痛为急性疼痛。在一个实施方案中，所述的疼痛为炎性疼痛。在一个实施方案中，所述的疼痛为神经性疼痛。在一个实施方案中，所述的疼痛为与癌症有关的疼痛。在一个实施方案中，所述的疼痛为与手术有关的疼痛。在一个实施方案中，所述的疼痛为与骨折有关的疼痛。在一个实施方案中，所述的方法包括治疗哺乳动物所述疼痛的方法。在一个实施方案中，所述的方法包括预防哺乳动物所述疼痛的方法。
本发明的另一个实施方案提供了治疗或预防哺乳动物炎症的方法，该方法包括向所述的哺乳动物给药可以有效治疗或预防所述炎症的量的、通式I 所示的一种或多种化合物或其可药用的盐。在一个实施方案中，所述的疼痛为慢性疼痛。在一个实施方案中，所述的方法包括治疗哺乳动物所述炎症的方法。在一个实施方案中，所述的方法包括预防哺乳动物所述炎症的方法。
本发明的另一个实施方案提供了治疗或预防哺乳动物神经退行性疾病的方法，该方法包括向所述的哺乳动物给药可以有效治疗或预防所述神经退行性疾病的量的、通式I所示的一种或多种化合物或其可药用的盐。在一个实施方案中，所述的神经退行性疾病为脱髓鞘疾病。在一个实施方案中，所述的神经退行性疾病为髓鞘形成障碍。在一个实施方案中，所述的神经退行性疾病为多发性硬化症。在一个实施方案中，所述的神经退行性疾病为 Parkinson疾病。在一个实施方案中，所述的神经退行性疾病为Alzheimer疾病。本发明的另一个方法提供了治疗或预防哺乳动物传染病的方法，该方法包括向所述的哺乳动物给药可以有效治疗或预防所述神经退传染病的量的、通式I所示的一种或多种化合物或其可药用的盐。在一个实施方案中，所述的传染病为锥虫感染。在一个实施方案中，所述的方法包括治疗哺乳动物所述的神经退行性疾病的方法。在一个实施方案中，所述的方法包括预防哺乳动物所述的神经退行性疾病的方法。
本发明的另一个实施方案提供了治疗或预防哺乳动物癌症的方法，该方法包括向所述的哺乳动物给药可以有效治疗或预防所述癌症的量的、通式I 所示的一种或多种化合物或其可药用的盐。在一个实施方案中，所述的癌症为成神经细胞瘤。在一个实施方案中，所述的癌症为卵巢癌。在一个实施方案中，所述的癌症为胰腺癌。在一个实施方案中，所述的癌症为结肠直肠癌。在一个实施方案中，所述的癌症为前列腺癌。在一个实施方案中，所述的方法包括治疗哺乳动物所述的癌症的方法。在一个实施方案中，所述的方法包括预防哺乳动物所述的癌症的方法。
通式I所示的化合物可以作为单一疗法而单独给药，或者可以加入一种或多种以相同或不同作用机制起作用的其他物质和/或治疗方法来进行给药。实例包括抗炎化合物,甾体(例如地塞米松,可的松和氟地松),止痛剂(例如 NSAID(如阿司匹林,布洛芬,消炎痛和酮基布洛芬))和类鸦片活性肽(例如吗啡)和化疗试剂。根据本领域技术人员已知的标准的药学实践，通过相同或不同的给药途径、以及按照相同或不同的给药安排表将所述的这些试剂作为同一或分开剂型的一部分与通式I所示的一种或多种化合物一起给药。
在医学肿瘤学领域中，采用不同治疗形式的结合来治疗各个患者的癌症是常规的实践方法。在医学肿瘤学领域中，除了本发明的组合物以外，这种结合治疗的其他成分可以为例如手术、放疗、化疗、信号传导抑制剂和/或单克隆抗体。
由此，通式I所示的化合物可以与一种或多种试剂结合给药，其中所述的试剂选自有丝分裂抑制剂,烷化剂,抗代谢物,反义DNA或RNA,插入抗生素,生长因子抑制剂,信号传导抑制剂,细胞周期抑制剂,酶抑制剂,类维生素A受体调控剂,蛋白酶体抑制剂,拓扑异构酶抑制剂,生物应答调节剂, 抗激素类物质,血管再生术抑制剂,抑制细胞生长的试剂,抗雄性激素,靶向抗体,HMG-CoA还原酶抑制剂和异戊二烯基蛋白质转移酶抑制剂。根据本领域技术人员已知的标准的药学实践，通过相同或不同的给药途径、以及按照相同或不同的给药安排表将所述的这些试剂作为同一或分开剂型的一部分与通式I所示的一种或多种化合物一起给药。
如本文所用，术语“治疗”(treat)或“治疗”(treatment)是指治疗、预防、缓解或预防性的量度。无论是可检测的或不可检测的，有益的或所需的临床结果包括但不限于减轻症状、减弱疾病的程度、稳定(即，不会恶化)疾病的状态、延迟或减缓疾病的进程、改善或缓解疾病的状态、以及缓和(部分或者全部)。与未接受治疗而预计存活的时间相比，“名词性的治疗”还可以指延长存活时间。需要治疗的那些患者包括已经患有所述的状况或紊乱的那些、以及倾向于患有所述的状况或紊乱的那些、或者其中所述的状况或紊乱有待预防的那些。
在一个实施方案中，如本文所用，术语“治疗”(treatment)或“治疗”(treat) 是指完全或部分减轻与本文所述的紊乱或状况(例如多种类型的疼痛，包括炎性疼痛、神经性疼痛以及与癌症、手术和骨折有关的疼痛)有关的症状、或者减慢或停止所述症状的进一步进展或恶化。
在一个实施方案中，如本文所用，术语“预防”是指完全或部分防止本文所述的疾病或状况(例如多种类型的疼痛，包括炎性疼痛、神经性疼痛以及与癌症、手术和骨折有关的疼痛)、或者其症状的发作、复发或传播。
术语“有效量”和“治疗有效量”是指当向有需要所述治疗的哺乳动物给药时，所述化合物量足以(i)治疗或预防特定的疾病、状况或紊乱；(ii)减轻、改善或消除特定疾病、状况或紊乱的一种或多种症状；或者(iii)预防或延迟本文所述特定的疾病、状况或紊乱的一种或多种症状的发作。与所述的量相应的通式I所示的化合物的量会随着多种因素(例如具体的化合物、疾病的状况及其严重程度、需要治疗的哺乳动物的特征(例如体重))的变化而变化，但是本领域的技术人员通常仍可以确定。
如本文所用，术语“哺乳动物”是指具有或者处于发展成本文所述的疾病的恒温动物，包括但不限于天竺鼠、狗、猫、大鼠、小鼠、仓鼠和灵长动物(包括人)。
可以通过任何常规的途径将本发明的化合物给药到(例如)胃肠道(例如直肠或口服)、鼻、肺、肌肉组织、脉管系统、经皮或表皮中。所述的化合物可以以任何方便的给药形式给药，例如片剂、粉末、胶囊、溶液、分散剂、悬浮剂、浆料、喷雾剂、栓剂、凝胶、乳剂、贴剂等。此类组合物通常在药物制备物中可以包含多种成分，例如稀释剂、载体、pH调节剂、甜味剂、膨胀剂和其他活性试剂。如果需要经肠胃外给药，则所述的组合物为无菌的，并且可以为适用于注射或输注的溶液或悬浮剂形式。此类组合物构成了本发明的另一个方面。
本发明还提供了药物组合物，其包含如上文所定义的通式I所示的化合物或其可药用的盐。在一个实施方案中，所述的药物组合物包含通式I所示的化合物以及可药用的稀释剂或载体。
本发明还提供了用于治疗的通式I所示的化合物或其可药用的盐。
在一个实施方案中，本发明提供了用于治疗哺乳动物疼痛的通式I所示的化合物或其可药用的盐。在一个实施方案中，所述的疼痛为慢性疼痛。在一个实施方案中，所述的疼痛为急性疼痛。在一个实施方案中，所述的疼痛为炎性疼痛。在一个实施方案中，所述的疼痛为神经性疼痛。在一个实施方案中，所述的疼痛为与癌症有关的疼痛。在一个实施方案中，所述的疼痛为与手术有关的疼痛。在一个实施方案中，所述的疼痛为与骨折有关的疼痛。
在一个实施方案中，本发明提供了用于治疗哺乳动物炎症的通式I所示的化合物或其可药用的盐。
根据另一个方面，本发明提供了用于治疗哺乳动物神经退行性疾病的通式I所示的化合物或其可药用的盐。在一个实施方案中，所述的神经退行性疾病为脱髓鞘疾病。在一个实施方案中，所述的神经退行性疾病为髓鞘形成障碍。在一个实施方案中，所述的神经退行性疾病为多发性硬化症。在一个实施方案中，所述的神经退行性疾病为Parkinson疾病。在一个实施方案中，所述的神经退行性疾病为Alzheimer疾病。
在一个实施方案中，本发明提供了用于治疗哺乳动物传染病的通式I所示的化合物或其可药用的盐。在一个实施方案中，所述的传染病为锥虫感染。
在一个实施方案中，本发明提供了用于治疗哺乳动物癌症的通式I所示的化合物或其可药用的盐。在一个实施方案中，所述的癌症为成神经细胞瘤。在一个实施方案中，所述的癌症为卵巢癌。在一个实施方案中，所述的癌症为胰腺癌。在一个实施方案中，所述的癌症为结肠直肠癌。在一个实施方案中，所述的癌症为前列腺癌。
本发明的另一个实施方案提供了通式I所示的化合物或其可药用的盐在制造用于治疗哺乳动物疼痛的药剂中的用途。
本发明的另一个实施方案提供了通式I所示的化合物或其可药用的盐在制造用于治疗哺乳动物炎症的药剂中的用途。
本发明的另一个实施方案提供了通式I所示的化合物或其可药用的盐在制造用于治疗哺乳动物的神经退行性疾病的药剂中的用途。
本发明的另一个实施方案提供了通式I所示的化合物或其可药用的盐在制造用于治疗哺乳动物传染病的药剂中的用途。
本发明的另一个实施方案提供了通式I所示的化合物或其可药用的盐在制造用于治疗哺乳动物癌症的药剂中的用途。
实施例
以下实施例说明本发明。在下文所述的实施例中，除非另作说明，否则所有的温度均以摄氏度的形式列出。试剂购自供应商，例如Aldrich Chemical Company,Lancaster,Alfa,Aesar,TCI,Maybridge,Asta Tech或其他合适的供应商，并且除非另作说明，否则所述的试剂均未经进一步的纯化而使用。THF, DCM,甲苯,DMF和二噁烷购自Aldrich的Sure/SealTM小瓶中，并原样使用。
下文所列的反应通常是在氮气或氩气的正压力下进行的，或者在干燥试管的无水溶剂中进行的(除非另作说明)，并且反应烧瓶通常配备翻口塞，以用于通过注射器引入底物和试剂。玻璃器具是在烘箱中干燥的和/或加热干燥的或者在干燥的氮气流下干燥的。
除非另作说明，否则在具有硅胶或C-18反相色谱柱的Biotage system(Manufacturer：Dyax Corporation)上或在二氧化硅SepPak柱上(Waters) 或采用常规的快速柱色谱来进行柱色谱。
本文所用的缩写具有以下含义：
生物学测试
实施例A
TrkA的ELISA测试
使用酶联免疫吸附测(ELISA)试来估测在抑制剂存在下TrkA的激酶活性。使用0.025mg/mL的聚(Glu,Ala,Tyr；6:3:1；Sigma P3899)的溶液涂覆Immulon 4HBX 384孔微滴定板(Thermo part#8755)。将多种浓度的测试化合物、2.5nM的TrkA(Invitrogen Corp.,组氨酸标记的重组人TrkA，细胞质结构域)和500μM的ATP在环境温度下在涂覆的板中温育25分钟，同时进行摇动。所述的测试缓冲剂由25mM MOPS pH 7.5、0.005％(v/v)Triton X-100 和5mM MgCl2构成。将反应混合物通过使用包含0.1％(v/v)吐温20的PBS 洗涤来由所述的板中移出。使用0.2μg/mL与辣根过氧化物酶结合的磷酸酪氨酸特异性单克隆抗体(克隆PY20)以及TMB过氧化物酶底物系统(KPL) 来检测磷酸化的反应产物。在加入1M磷酸之后，根据在450nm下的吸附情况来对显色底物的颜色强度进行定量。使用4或5个参数逻辑曲线拟合来计算IC50值。
表1提供了在本测试中测定的本发明化合物的平均IC50值。表1中，字母“A”表示在大约1至100nM之间的IC50值，而字母“B”表示>100nM 且<3000nM的IC50值。
实施例B
TrkA的结合测试
通过Invitrogen’s LanthaScreenTM Eu激酶结合测试来测量化合物与TrkA 的结合能力。在本测试中，得自Invitrogen的His标记的重组人TrkA(细胞质结构域)与Invitrogen’s示踪剂236、生物素化的抗His、铕标记的链霉抗生物素、化合物(最终2％DMSO)在缓冲剂(25mM MOPS,pH 7.5,5 mM MgCl2,0.005％Triton X-100)中温育。在22℃下温育60分钟后，使用 EnVision通过TR-FRET双波长检测来测量反应物情况，并由发射比来计算 POC。将化合物的剂量应答数据与4个参数的逻辑模型拟合，并将IC50定义为在50POC下化合物的浓度。
表1提供了在本测试中测定的本发明化合物的平均IC50值。表1中，字母“A”表示在大约1至100nM之间的IC50值，而字母“B”表示>100nM 且<3000nM的IC50值。
表1
1化合物可以与对映异构体和/或一种或多种非对映异构体一起分离，据信，其他的异构体占分离总量的≤1.5％。
制备A
(R)-5-氟代-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)嘧啶
步骤A：2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-羧酸(R)-叔丁酯的制备：将吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(4.09mL,23.4mmol)和(-)-司巴丁(6.44mL,28.0 mmol)在MTBE(50mL)中形成的溶液冷却至-78℃，并在将内部温度保持在 -78℃的条件下通过套管滴加而引入sec-BuLi(20mL,28.0mmol,1.4M溶于环己烷中)。将所得溶液在-78℃下搅拌3小时，然后在保持内部温度低于-65 ℃的条件下，滴加ZnCl2(21.0mL,21.0mmol,1M溶于Et2O中)溶液并快速搅拌。将所得的轻质悬浮液在-78℃下搅拌10分钟，然后温暖至环境温度。将所得的混合物一次性依次加入3-溴-5-氟代-2-甲氧基嘧啶(5.05g,24.5 mmol)、Pd(OAc)2(0.262g,1.17mmol)和t-Bu3P-HBF4(0.407g,1.40mmol)。在环境温度下搅拌过夜后，加入浓缩的NH4OH(1mL)，并将反应物搅拌1 小时。将所得浆液通过过滤，并用Et2O洗涤。将有机层过滤并浓缩，通过二氧化硅柱色谱纯化产物粗品(使用5％EtOAc/己烷洗脱)，从而得到黄色油状的产物2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-羧酸(R)-叔丁酯(4.34 g,产率为63％)。
步骤B：(R)-5-氟代-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)嘧啶的制备：将TFA(11.3 mL,146mmol)的DCM(12mL)溶液加入到2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-羧酸(R)-叔丁酯(4.33g,14.6mmol)中，并在环境温度下搅拌1小时。然后浓缩反应物，溶于EtOAc中，然后用NaHCO3和盐水洗涤。将有机相干燥(MgSO4)，过滤并浓缩，并将材料粗品通过二氧化硅柱色谱纯化(使用1-2％ 7N NH3-MeOH/DCM洗脱)，从而得到液态的(R)-5-氟代-2-甲氧基-3-(吡咯烷 -2-基)嘧啶(1.40g,产率为49％)。
按照以下方法测定(R)-5-氟代-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)嘧啶的对映异构体过量百分率：向少量(R)-5-氟代-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)嘧啶的丙-2-醇溶液中加入过量的N-(2,4-二硝基-5-氟代苯基)-L-丙氨酸氨基化合物(FDAA, Marfey试剂)。将混合物加热至回流并持续大约2分钟。在冷却至环境温度之后，将反应混合物用乙腈稀释，并通过HPLC分析(YMC ODS-AQ 4.6×50 mm 3μm柱；流动相：5-95％溶剂B溶于A中；溶剂A：H2O/1％IPA/ 10mM醋酸铵，溶剂B：ACN/1％IPA/10mM醋酸铵；流速2mL/min)。由形成的2种非对映异构体衍生物的峰值面积来测定对映异构体过量百分率。测定产物的ee％为>93％。
制备B
(R)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸
步骤A：5-羟基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯的制备：向由3-氨基-1H- 吡唑-4-羧酸乙酯(25.0g,161mmol)和3-乙氧基丙烯酸(E)-乙酯(35.8ml,242 mmol)在DMF(537mL)中形成的混合物中加入碳酸铯(78.7g,242mmol)，并将反应物在110℃下加热15小时。在冷却至环境温度后，用乙酸将反应物酸化至pH4。将所得沉淀过滤，用水和EtOAc洗涤，从而得到白色固体产物。为了回收其他产物，将滤液浓缩，用EtOAc(500mL)稀释，并用H2O(5×200 mL)洗涤。过滤处于EtOAc层中的所得沉淀，并用水和EtOAc洗涤，从而得到第二批产物。将两批产物合并，并进行减压干燥，从而得到白色固体的5- 羟基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(33.3g,产率为100％)。MS(apci)m/z＝ 206.2(M-H)。
步骤B：5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯的制备：5-羟基吡唑并[1,5-a] 嘧啶-3-羧酸乙酯(22.7g,110mmol)悬浮于磷酰三氯(100mL)中，并加热至回流。在加热2小时后，将反应混合物冷却并浓缩，从而除去过量的POCl3。将残余物稀释于DCM(100mL)中，并缓慢加入到装有冰水的烧瓶中。分离混合物，并用DCM(2×200mL)萃取水层。将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤并浓缩，从而得到淡黄色固体的5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(24.2 g,产率为97.6％)。MS(apci)m/z＝225.9(M+H)。
步骤C：5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：将5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(0.75g,3.32 mmol)、(R)-5-氟代-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)嘧啶(制备A,0.984g,3.66 mmol)、DIEA(2.32mL,13.3mmol)和正丁醇(1.11mL)的混合物密封于加压管中，并在90℃下加热48小时。将反应混合物稀释于EtOAc中，并用水、盐水和饱和NaHCO3洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤并浓缩，从而得到深橘色油。通过二氧化硅柱色谱纯化产物粗品(使用50-80％EtOAc/己烷洗脱)，从而得到黄色泡沫固体产物5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(0.72g,产率为56.2％)。MS(apci)m/z＝ 386.0(M+H)。
步骤D：(R)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸的制备：向由5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(0.72g,1.868mmol)在MeOH(9.34mL)中形成的悬浮液中加入LiOH(1N,3.74mL,3.74mmol)，并将反应混合物在70℃下加热15小时。在冷却后，将反应混合物浓缩，并将所得的残余物在水中稀释。在使用柠檬酸酸化之后，将水层用DCM萃取。将合并的有机物干燥 (MgSO4)，过滤并浓缩，从而得到黄色固体(R)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3- 基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(0.67g,产率为100％)。MS(apci) m/z＝357.9(M+H)。
制备C
(R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)吡咯烷2,2,2-三氟代乙酸酯
步骤A-D根据H.Imamura,et al.in Tetrahedron,2000,56,7705所述的方法。
步骤A：(R)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)吡咯烷-2-酮的制备：在0 ℃下，向由(R)-4-羟基吡咯烷-2-酮(购自Asta Tech或Aldrich)(5.030g,48.26 mmol)在DMF(24mL)中形成的悬浮液中加入TBDMS-Cl(7.637g,50.67 mmol)，然后加入咪唑(4.978g,72.39mmol)。将所得的混合物温暖至环境温度，并搅拌1小时，然后在搅拌条件下倒入100mL水中。过滤所得的悬浮液，并将固体用水洗涤，并在减压条件下干燥，从而得到(R)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)吡咯烷-2-酮(10.14g,产率为97.56％)，该化合物未经进一步纯化的条件下直接使用。
步骤B：4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-2-氧代吡咯烷-1-羧酸(R)-叔丁酯的制备：在0℃下，向由(R)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)吡咯烷-2-酮 (10.14g,47.08mmol)在MeCN(16mL)中行成的溶液中依次加入DMAP (3.221g,26.37mmol)、TEA(3.957mL,28.25mmol)和Boc2O(11.49g,52.65 mmol)。将所得的混合物温暖至环境温度，并搅拌48小时。将反应混合物倒入水中，并用EtOAc(100mL)萃取。将有机层连续用1N HCl水溶液(2x 50 mL)、1N NaOH水溶液(50mL)和盐水洗涤。将有机层在MgSO4上干燥，过滤并在真空下浓缩，从而得到4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-2-氧代吡咯烷 -1-羧酸(R)-叔丁酯(13.62g,产率为91.69％)。1H NMR(CDCl3)4.39(m,1H), 3.87(m,1H),3.62(m,1H),2.71(m,1H),2.46(m,1H),1.53(s,9H),0.88(s,9H), 0.08(d,6H)。
步骤C：2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-4-(5-氟代-2-甲氧基苯基)-4-羟基丁基氨基甲酸(R)-叔丁酯的制备：在0℃下，向由4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-2-氧代吡咯烷-1-羧酸(R)-叔丁酯(6.00g,19.0mmol)在THF(36mL) 中形成的溶液中加入由(5-氟代-2-甲氧基苯基)镁溴化物在THF(50.0mL, 25.0mmol)中形成的0.5M溶液。将所得混合物在0℃下搅拌30分钟，然后使用MeOH(60mL)和NaBH4(0.966g,25.2mmol)进行处理。反应混合物在0 ℃下再搅拌30分钟后，将其倒入饱和的NH4Cl水溶液(40mL)中，并用EtOAc (2x 50mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，在MgSO4上干燥，过滤并在减压下浓缩，从而得到材料粗品，将该粗品通过二氧化硅柱色谱纯化(使用 0-2％MeOH/DCM洗脱)，从而得到2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-4-(5-氟代-2-甲氧基苯基)-4-羟基丁基氨基甲酸(R)-叔丁酯(假设其为顺式和反式异构体的混合物)(4.81g,产率为57.0％)。1H NMR(CDCl3)δ7.20(m,1H),6.90 (m,1H),6.77(m,1H),5.12(m,1H),4.10(m,1H),3.82(m,3H),3.29(m,2H), 1.71-1.93(m,2H),1.45(s,9H),0.93(d,9H),0.11-0.14(m,6H)。
步骤D：4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)吡咯烷-1-羧酸(R)-叔丁酯的制备：在-60℃下，向由2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-4-(5-氟代-2-甲氧基苯基)-4-羟基丁基氨基甲酸(R)-叔丁酯(4.810g,10.84 mmol)在CH2Cl2(108mL)中形成的溶液中加入TEA(4.534mL,32.53mmol)，再加入甲基磺酰氯(0.9231mL,11.93mmol)。将所得的混合物缓慢温暖至-5 ℃，并倒入冰和饱和NaHCO3水溶液(50mL)的混合物中。分离有机层，并将水层用CH2Cl2(2x 50mL)萃取。将合并的有机层在MgSO4上干燥，过滤并在减压下浓缩，从而得到材料粗品，将该粗品通过二氧化硅柱色谱纯化(使用2-10％MeOH/DCM洗脱)，从而得到4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-2-(5- 氟代-2-甲氧基苯基)吡咯烷-1-羧酸(R)-叔丁酯(假设其为顺式和反式异构体的混合物；2.648g,产率为57.38％)。LC/MS(ES+APCI)m/z＝326.1 (M+H-Boc)。
步骤E：(R)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)吡咯烷2,2,2-三氟代乙酸酯的制备：在0℃下，向由4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)吡咯烷-1-羧酸(R)-叔丁酯(2.648g,6.222mmol) 在CH2Cl2(26mL)中形成的溶液中加入TFA(9.3mL)。将所得混合物温暖至环境温度，并搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，从而得到材料粗品，将该粗品与甲苯-CH2Cl2(2x)共沸，并在减压下干燥，从而得到(R)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)吡咯烷2,2,2-三氟代乙酸酯 (假设其为顺式和反式异构体的混合物；2.92g,产率为106.8％)，该产物未经进一步的纯化而直接使用。LC/MS(ES+APCI)m/z＝326.3(M+H)。
制备D
(R)-5-(2-(5-氟代-2-羟基苯基)-4-羟基吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸
步骤A：5-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：在0℃下，向由5-羟基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(0.100g,0.483mmol)和BOP试剂(0.320g, 0.724mmol)在DMF(1mL)中形成的悬浮液中加入由(R)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)吡咯烷2,2,2-三氟代乙酸酯(制备C； 0.167g,0.483mmol)依次在CH2Cl2(1mL)和N,N-二异丙基乙基胺(0.420mL, 2.41mmol)中形成的溶液。将所得的混合物温暖至环境温度，并搅拌18小时。将反应混合物用EtOAc(10mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤。将盐水相用EtOAc(3x)反萃取。将合并的有机层在MgSO4上干燥，过滤并在减压下浓缩，从而得到材料粗品，将该粗品通过二氧化硅柱色谱纯化(使用0-50％EtOAc/己烷洗脱)，从而得到5-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯 (假设其为顺式和反式异构体的混合物；0.0487g,产率为19.6％)。LC/MS (ES+APCI)m/z＝515.2(M+H)。
步骤B：5-(2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)-4-羟基吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：在0℃下，向由5-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯 (作为顺式和反式异构体的混合物)(0.0487g,0.0946mmol)在THF(1mL)中形成的混合物加入溶于THF(0.104mL,0.104mmol)中的1M TBAF。将反应混合物温暖至环境温度，并搅拌2.5小时。将反应混合物用EtOAc(10mL) 稀释，用盐水洗涤，在MgSO4上干燥，过滤并在减压下浓缩，从而得到5-(2-(5- 氟代-2-甲氧基苯基)-4-羟基吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯 (作为顺式和反式异构体的混合物；37.9mg,产率为100％)粗品。LC/MS (ES+APCI)m/z＝401.1(M+H)。
步骤C：5-(2-(5-氟代-2-羟基苯基)-4-羟基吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：在0℃下，向由5-(2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)-4-羟基吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(作为顺式和反式异构体的混合物；0.0379g,0.0947mmol)在CH2Cl2(1mL)中形成的溶液中加入溶于 CH2Cl2(0.473ml,0.473mmol)中的1M BBr3。将所得混合物温暖至环境温度并持续5小时，然后用CH2Cl2(10mL)稀释，并倒入冰和饱和NaHCO3水溶液(15mL)的混合物中。分离有机层，并用1N HCl水溶液将水层酸化，直至 pH＝5-6。将水层用CH2Cl2(3x)萃取，并将合并的有机层在MgSO4上干燥，过滤并在减压下浓缩，从而得到(R)-5-(2-(5-氟代-2-羟基苯基)-4-羟基吡咯烷 -1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(作为顺式和反式异构体的混合物)和5-(2-(5- 氟代-2-羟基苯基)-4-羟基吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(作为顺式和反式异构体的混合物)的混合物。将混合物溶解于MeOH-THF(0.25 mL/0.75mL)中，并用1N LiOH(0.474mL,0.474mmol)水溶液处理。将所得的混合物在50℃下加热1小时，然后冷却至环境温度，并用1N HCl水溶液酸化至pH3至4。将混合物用EtOAc(3x 15mL)萃取，并将合并的有机层在 MgSO4上干燥，过滤并在减压下浓缩，从而得到(R)-5-(2-(5-氟代-2-羟基苯基)-4-羟基吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(作为顺式和反式异构体的混合物；33.9mg,产率为100％)粗品。LC/MS(ES+APCI)m/z＝357.1(M-H)。
实施例1
(6R)-9-氟代-2,11,15,19,20,23-六氮杂戊环[15.5.2.17,11.02,6.020,24]二十五烷-1(23),7,9,17(24),18,21-六烯-16,25-二酮
步骤A：5-(2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-1基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：向5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(制备B,步骤C；0.92g,2.39mmol) 和乙酸(5.73g,95.5mmol)的混合物中加入HBr(4.4mL,23.9mmol,33％，溶于乙酸中)。将反应混合物在90℃下加热2小时。在冷却后，将反应混合物用EtOAc处理，用水、饱和NaHCO3和盐水洗涤，然后干燥(MgSO4)，过滤和浓缩。通过二氧化硅柱色谱纯化材料粗品(使用3％MeOH/DCM洗脱)，从而得到所需的产物(0.605g,产率为68％)。MS(apci)m/z＝372.0(M+H)。
步骤B：5-(2-(1-(3-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)丙基)-5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：在0 ℃下，向5-(2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a] 嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(0.20g,0.54mmol)的DMF(5mL)悬浮液中加入LiH(6.8 mg,0.81mmol)，然后先进行20分钟的搅拌，在加入2-(3-溴丙基)异二氢吲哚-1,3-二酮(0.29g,1.1mmol)的DMF(1mL)溶液。将反应物温暖至环境温度，并搅拌17小时。在冷却至0℃后，将反应用冰水(30mL)猝灭，并将水溶液用EtOAc(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水和盐水反洗涤，干燥 (MgSO4)，过滤并浓缩。通过二氧化硅柱色谱纯化材料粗品(使用2％ MeOH/DCM洗脱)，从而得到所需的产物(0.2g,产率为66％)。MS(apci)m/z ＝559.0(M+H)。
步骤C：5-(2-(1-(3-氨基丙基)-5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：向由5-(2-(1-(3-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)丙基)-5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(0.20g,0.36mmol)在1:1MeOH/THF(12mL)中形成的溶液中加入肼-H2O(0.18g,3.6mmol)。将反应混合物在50℃下加热 24小时。冷却后，将反应混合物倒入水中，并用DCM(3×20mL)萃取。将合并的有机物干燥(MgSO4)，过滤并浓缩，从而得到所需的产物(0.11g,产率为72％)。MS(apci)m/z＝429.0(M+H)。
步骤D：(R)-5-(2-(1-(3-氨基丙基)-5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸的制备：向由5-(2-(1-(3-氨基丙基)-5-氟代 -2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯 (0.11g,0.26mmol)在3:1THF/MeOH(8mL)中形成的溶液中加入LiOH(1N, 1.5mL,1.5mmol)，并将反应混合物在70℃下加热20小时。冷却后，将反应混合物用MeOH处理，用1N HCl(1.5mL)酸化并浓缩，从而得到所需的产物(0.1g,产率为100％)。MS(apci)m/z＝401.1(M+H)。
步骤E：(6R)-9-氟代-2,11,15,19,20,23-六氮杂戊环[15.5.2.17,11.02,6.020,24]二十五烷-1(23),7,9,17(24),18,21-六烯-16,25-二酮的制备：在环境温度下，向由(R)-5-(2-(1-(3-氨基丙基)-5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(95mg,0.24mmol)在1:2DMF/DCM(9mL)中形成的溶液中加入EDCI(0.14g,0.71mmol)，再加入HOBT(96mg,0.71mmol)。在搅拌10分钟后，将TEA(0.099mL,0.71mmol)加入到反应混合物中，并搅拌6小时。将反应混合物用EtOAc处理，用饱和的NH4Cl、饱和的NaHCO3和盐水洗涤，然后干燥(MgSO4)，过滤，浓缩。通过二氧化硅柱色谱纯化材料粗品(使用4％MeOH/DCM洗脱)，从而得到题述的产物(35mg,产率为 39％)。MS(apci)m/z＝383.2(M+H)。
实施例2
(6R)-12-氧杂-2,16,20,21,24,26-六氮杂戊环[16.5.2.17,11.02,6.021,25]二十六烷-1(24),7(26),8,10,18(25),19,22-七烯-17-酮
步骤A：(R)-2-甲氧基-6-(吡咯烷-2-基)嘧啶的制备：根据制备A中所述的方法，在步骤A中用2-溴-6-甲氧基嘧啶替代3-溴-5-氟代-2-甲氧基嘧啶来进行制备。MS(apci)m/z＝179.1(M+H)。
步骤B：5-(2-(6-甲氧基吡啶-2-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：根据制备B的步骤C中所述的相同的方法，用(R)-2-甲氧基-6-(吡咯烷-2-基)嘧啶替代(R)-5-氟代-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)嘧啶来进行制备。MS(apci)m/z＝368.0(M+H)。
步骤C：5-(2-(6-氧代-1,6-二氢吡啶-2-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：向5-(2-(6-甲氧基吡啶-2-基)吡咯烷-1-基)吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(0.46g,1.25mmol)和乙酸(3.0g,50mmol)的混合物中加入HBr(3.1g,12.5mmol,33％溶于乙酸中)。将反应混合物在90℃下加热2小时。冷去后，将反应物用EtOAc稀释，用水、饱和NaHCO3和盐水洗涤，然后干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。通过二氧化硅柱色谱纯化材料粗品 (使用4％MeOH/DCM洗脱)，从而得到所需的产物(0.3g,产率为67％)。 MS(apci)m/z＝354.1(M+H)。
步骤D：5-(2-(6-(3-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)丙氧基)吡啶-2-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：在0℃下，向5-(2-(6-氧代 -1,6-二氢吡啶-2-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(0.091g, 0.26mmol)在DMF(2mL)中形成的悬浮液中加入LiH(3.2mg,0.39mmol)。在搅拌20分钟后，加入由2-(3-溴丙基)异二氢吲哚e-1,3-二酮(0.14g,0.52 mmol)在DMF(1mL)中形成的溶液，并将反应物温暖至环境温度，并搅拌 17小时。冷却至0℃后，将反应用冰水(30mL)猝灭，并用EtOAc(3×50mL) 萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。通过二氧化硅柱色谱纯化材料粗品(使用1.5％MeOH/DCM洗脱)，从而得到所需的产物(0.117g,产率为84％)。MS(apci)m/z＝541.1(M+H)。
步骤E：5-(2-(6-(3-氨基丙氧基)吡啶-2-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：向由5-(2-(6-(3-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)丙氧基) 吡啶-2-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(0.11g,0.20mmol) 在1:1MeOH/THF(12mL)中形成的溶液中加入肼-H2O(0.10g,2.0mmol)。将反应混合物在50℃下加热24小时。冷却后，将反应混合物倒入水中，然后用DCM(3×20mL)萃取。将合并的有机物干燥(MgSO4)，过滤和浓缩，从而得到所需的产物(70mg,产率为84％)。MS(apci)m/z＝441.1(M+H)。
步骤F：(R)-5-(2-(6-(3-氨基丙氧基)吡啶-2-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸的制备：向由5-(2-(6-(3-氨基丙氧基)吡啶-2-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(70mg,0.17mmol)在3:1THF/MeOH(8mL)中形成的溶液中加入LiOH(1N,1.5mL,1.5mmol)，并将反应混合物在70℃下加热20小时。冷却后，将反应混合物用MeOH稀释，用1N HCl(1.5mL) 酸化并浓缩，从而得到所需的产物(65mg,产率为100％)。MS(apci)m/z＝ 383.1(M+H)。
步骤G：(6R)-12-氧杂-2,16,20,21,24,26-六氮杂戊环-[16.5.2.17,11.02,6.021,25]二十六烷-1(24),7(26),8,10,18(25),19,22-七烯-17-酮的制备：在环境温度下，向由(R)-5-(2-(6-(3-氨基丙氧基)吡啶-2-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3- 羧酸(70mg,0.18mmol)在1:2DMF/DCM(9mL)中形成的溶液中先加入 EDCI(110mg,0.55mmol)，再加入HOBT(74mg,0.55mmol)。在搅拌10分钟后，将TEA(0.077mL,0.55mmol)加入到反应混合物中，并搅拌6小时。将反应混合物用EtOAc稀释，用饱和NH4Cl、饱和NaHCO3和盐水洗涤，然后干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。通过二氧化硅柱色谱纯化材料粗品(使用2％ MeOH/DCM洗脱)，从而得到题述的产物(30mg,产率为45％)。MS(apci) m/z＝365.2(M+H)。
实施例3
(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,11,17,21,22,25-六氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮
步骤A：(R)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-N-(3-羟基丙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：向冷却至0℃的(R)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(制备B,250mg,0.700 mmol)和HATU(319mg,0.840mmol)的悬浮液中滴加3-氨基丙-1-醇(0.0642 mL,0.840mmol)，得到澄清的淡黄色溶液。在滴加DIEA(0.366mL,2.10 mmol)之后，除去冰浴，并将反应物在环境温度下搅拌1小时。在反相柱色谱上直接纯化反应物(Biotage SP4系统，C-18 25+M柱，0至54％乙腈/水)，从而得到白色固体产物(200mg,产率为69％)。MS(apci)m/z＝415.1(M+H)。
步骤B：(R)-N-(3-氯丙基)-5-(2-(5-氟代-2-羟基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：将由(R)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基) 吡咯烷-1-基)-N-(3-羟基丙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(20mg,0.0483 mmol)在HCl(4N二噁烷,1.2mL,4.83mmol)中形成的混合物在85℃下加热过夜。将反应混合物浓缩，与乙醚一起磨碎并过滤，从而得到淡棕色固体产物粗品，该粗品在下一步骤中未经进一步的纯化而直接使用(22mg,产率为 106％)。MS(apci)m/z＝419.1(M+H)。
步骤C：(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,11,17,21,22,25-六氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮的制备：将(R)-N-(3-氯丙基)-5-(2-(5-氟代-2-羟基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a] 嘧啶-3-甲酰胺(5mg,0.012mmol)和Cs2CO3(4mg,0.06mmol)的DMF(1mL) 悬浮液在85℃下加热过夜。将反应混合物通过GF/F纸过滤，并在反相柱色谱(Biotage SP4系统C-18 12+M柱，5至60％乙腈/水)上直接纯化，从而得到白色固体的题述产物(2mg,产率为44％)。MS(apci)m/z＝383.3(M+H)。
实施例4
(6R)-9-氟代-15-羟基-13-氧杂-2,11,17,21,22,25-六氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮
步骤A：N-(2,3-二羟基丙基)-5-((R)-2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：将由(R)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(制备B,250mg,0.700mmol) 和HATU(319mg,0.840mmol)在1:1DMF/DMSO(2mL)中形成的混合物冷却至0℃，然后先滴加3-氨基丙-1,2-二醇(76.5mg,0.840mmol)，再加入DIEA (366μL,2.10mmol)。将反应物温暖至环境温度，搅拌20分钟，然后在反相柱色谱(Biotage SP4系统C-18 12+M柱，5至50％乙腈/水)上直接纯化，从而得到白色固体产物(295mg,产率为98％)。MS(apci)m/z＝431.1(M+H)。
步骤B：N-(3-氯-2-羟基丙基)-5-((R)-2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：将N-(2,3-二羟基丙基)-5-((R)-2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg,0.232mmol)和HCl(4N,二噁烷,5.8mL)的混合物密封于加压管中，并在85℃下加热过夜。在倒出澄清的溶液后，得到褐色油状残余物的产物粗品，将该粗品真空干燥，并在下一步骤中未经进一步的纯化而直接使用。MS(apci)m/z＝435.0(M+H)。
步骤C：(6R)-9-氟代-15-羟基-13-氧杂-2,11,17,21,22,25-六氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮的制备：将由N-(3-氯-2-羟基丙基)-5-((R)-2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷 -1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg,0.23mmol)和Cs2CO3(375mg, 1.15mmol)在DMF(3mL)中形成的悬浮液在85℃下加热2小时。将反应混合物通过GF/F纸过滤，并在反相柱色谱(Biotage SP4系统C-18 25+M柱，5 至50％乙腈/水)上直接纯化，从而得到白色固体的题述产物。MS(apci)m/z＝ 399.2(M+H)。
实施例5
(6R,13S)-9-氟代-13-羟基-2,11,15,19,20,23-六氮杂戊环-[15.5.2.17,11.02,6.020,24]二十五烷-1(23),7,9,17(24),18,21-六烯-16,25-二酮
步骤A：N-((S)-3-氯-2-羟基丙基)-5-((R)-2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺氢氯化物的制备：根据实施例 3步骤A-B中所述的方法，用(S)-3-氨基丙-1,2-二醇替代步骤A中的3-氨基丙-1-醇来进行制备。MS(apci)m/z＝435.0(M+H)。
步骤B：(6R,13S)-9-氟代-13-羟基-2,11,15,19,20,23-六氮杂戊环[15.5.2.17,11.02,6.020,24]二十五烷-1(23),7,9,17(24),18,21-六烯-16,25-二酮的制备：将由N-((S)-3-氯-2-羟基丙基)-5-((R)-2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基) 吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺氢氯化物(40mg,0.085mmol)和 Cs2CO3(138mg,0.42mmol)在DMF(0.8mL)中形成的悬浮液在85℃下加热2 小时。将反应混合物通过GF/F纸过滤，并在反相柱色谱(Biotage SP4系统 C-18 12+M柱，0至40％乙腈/水)上直接纯化，从而得到白色固体的题述产物(4mg,产率为12％)。MS(apci)m/z＝399.2(M+H)。
实施例6
(6R)-9-氟代-15-羟基-13-氧杂-2,11,17,21,22,25-六氮杂戊环-[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮
按照实施例5中所述的方法进行制备，并按照步骤B中分离副产物。在分离的终产物(6R)-9-氟代-15-羟基-13-氧杂-2,11,17,21,22,25-六氮杂戊环 -[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮中，发现其中残留有HO基团的手性中心的对映异构体均一性形成了意想不到的缺刻状(R/S比例为大约10:7)，所述的产物为通过反相柱色谱(Biotage SP4系统 C-18 12+M柱，0至50％乙腈/水)获得的白色固体。MS(apci)m/z＝399.2 (M+H)。
实施例7
(6R,15R)-9-氟代-15-羟基-13-氧杂-2,11,17,21,22,25-六氮杂戊环-[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮
步骤A：N-((R)-3-氯-2-羟基丙基)-5-((R)-2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：根据实施例3步骤 A-B中所述的方法，用(R)-3-氨基丙-1,2-二醇替代步骤A中的3-氨基丙-1-醇来进行制备。MS(apci)m/z＝435.0(M+H)。
步骤B：(6R,15R)-9-氟代-15-羟基-13-氧杂-2,11,17,21,22,25-六氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮的制备：将由N-((R)-3-氯-2-羟基丙基)-5-((R)-2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(30mg,0.069mmol)和Cs2CO3(112mg, 0.34mmol)在DMF(0.7mL)中形成的悬浮液在85℃下加热1小时。将反应混合物通过GF/F纸过滤，并在反相柱色谱(Biotage SP4系统C-18 12+M柱，0 至50％乙腈/水)上直接纯化，从而得到白色固体的题述产物(10mg,产率为 36％)。与实施例6不同，在本实施例的终产物中未观察到其中残留有HO 基团的手性中心的对映异构体均一性发生缺刻。MS(apci)m/z＝399.2 (M+H)。
实施例8
(6R,13R)-9-氟代-13-羟基-2,11,15,19,20,23-六氮杂戊环-[15.5.2.17,11.02,6.020,24]二十五烷-1(23),7,9,17(24),18,21-六烯-16,25-二酮
得到实施例7步骤B的副产物，并通过反相柱色谱(Biotage SP4系统 C-18 12+M柱,0至44％乙腈/水)分离实施例7步骤B的白色固体的材料粗品 (1.2mg,产率为4％)。MS(apci)m/z＝399.2(M+H)。
实施例9
(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,11,16,20,21,24-六氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯-17-酮
步骤A：(R)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-N-(2-羟基乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：在环境温度下，向(R)-5-(2-(5-氟代-2- 甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(制备B,100mg,0.28 mmol)和HATU(128mg,0.336mmol)的DMF(1mL)悬浮液中加入DIEA (0.146mL,0.840mmol)，然后在0℃下滴加由2-氨基乙醇(20.5mg,0.336 mmol)在少量DMF中形成的溶液。将反应物温暖至环境温度，并搅拌30分钟，然后通过反相柱色谱(0至70％乙腈/水)直接纯化，从而得到白色固体产物(95mg,产率为85％)。MS(apci pos)m/z＝401.1(M+H)。
步骤B：(R)-N-(2-氯乙基)-5-(2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：向加压反应管中的(R)-5-(2-(5-氟代 -2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-N-(2-羟基乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(77mg,0.192mmol)中加入氯化氢(4N二噁烷,4.8mL,19.2mmol)，并将所得的白色悬浮液在85℃下加热过夜。在冷却至环境温度后，倒出反应混合物，从而得到褐色油状残余物的产物粗品，将该粗品在真空下干燥，并在下一步骤中未经进一步的纯化而直接使用。MS(apci)m/z＝405.0(M+H)。
步骤C：(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,11,16,20,21,24-六氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯-17-酮的制备：将由(R)-N-(2-氯乙基)-5-(2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(78mg,0.19mmol)和Cs2CO3(314mg,0.96mmol) 在DMF(5mL)中形成的悬浮液在85℃下加热30分钟。在通过GF/F纸过滤后，将反应物用水(40mL)和NH4Cl(饱和的，5mL)稀释，然后用EtOAc(3× 40mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。通过反相柱色谱(Biotage SP4系统C-18 12+M柱，0至73％乙腈/水)纯化材料粗品，从而得到白色固体的题述产物(17mg,产率为24％)。MS(apci)m/z＝369.2 (M+H)。
实施例10
(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,11,18,22,23,26-六氮杂戊环[18.5.2.02,6.07,12.023,27]二十七烷-1(26),7,9,11,20(27),21,24-七烯-19-酮
步骤A：(R)-N-(4-氯丁基)-5-(2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：根据实施例3步骤A-B中所述的方法，用4-氨基丁-1-醇替代步骤A中的3-氨基丙-1-醇来进行制备。MS(apci) m/z＝433.0(M+H)。
步骤B：(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,11,18,22,23,26-六氮杂戊环-[18.5.2.02,6.07,12.023,27]二十七烷-1(26),7,9,11,20(27),21,24-七烯-19-酮的制备：根据实施例3中所述的方法，用(R)-N-(4-氯丁基)-5-(2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺替代步骤C中的 (R)-N-(3-氯丙基)-5-(2-(5-氟代-2-羟基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺来进行制备。在反相柱色谱(Biotage SP4系统C-18 25+M柱，0 至80％乙腈/水)上纯化产物粗品，从而得到白色固体的题述产物(32mg, 44％)。MS(apci pos)m/z＝397.2(M+H)。
实施例11
(6R)-9-氟代-2,11,16,20,21,24-六氮杂戊环[16.5.2.17,11.02,6.021,25]二十六烷-1(24),7,9,18(25),19,22-六烯-17,26-二酮
得到实施例10步骤B的副产物，并通过反相柱色谱(Biotage SP4系统 C-18 25+M柱,0至50％乙腈/水)纯化实施例10步骤B的材料粗品时分离得到白色固体(4mg,6％)。MS(apci)m/z＝397.2(M+H)。
实施例12
(6R)-9-氟代-2,11,13,16,20,21,24-七氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯-17-酮
步骤A：2-(2-氯-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-羧酸(R)-叔丁酯的制备：在氮气下，首先将由吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1mL 5.70mmol)和(-)-司巴丁(1.31 mL,5.70mmol)在无水MTBE(30mL)中形成的溶液冷却至-78℃，然后用注射器在15分钟的时间内滴加仲丁基锂(4.07mL,1.4M,5.70mmol)，并将温度保持在-75℃以下。在-78℃下将淡黄色的溶液搅拌3小时，然后在15分钟的时间内滴加氯化锌(3.80mL,1.0M,3.80mmol)进行处理，并将温度保持在-73 ℃以下。将混合物在-78℃下搅拌30分钟，然后放置于环境温度下的水浴中，并再搅拌1小时。此时，存在大量的白色沉淀。将混合物用溶于MTBE(5mL) 中的3-溴-2-氯-5-氟代嘧啶(1.00g,4.75mmol)处理，然后加入醋酸钯(53mg, 0.24mmol)和四氟代硼酸三叔丁基膦(83mg,0.28mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜以达到反应完全。将混合物用NH4OH(1mL)处理，搅拌30分钟并通过GF/F纸过滤，用MTBE洗涤。将滤液用10％柠檬酸(30mL)洗涤，并将水层用MTBE(2×30mL)反洗涤。将合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，干燥(MgSO4)并浓缩，从而得到暗黄色油状的产物粗品。将该材料粗品在二氧化硅50g Biotage SNAP柱(用溶于己烷中的10％EtOAc洗脱)上纯化，从而得到无色油状的所需产物(0.5g,产率为35％)。MS(apci)m/z＝201.1 (M+H-Boc)。
步骤B：(R)-2-氯-5-氟代-3-(吡咯烷-2-基)嘧啶二氢氯化物的制备：向2-(2- 氯-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-羧酸(R)-叔丁酯(500mg,1.66mmol)的二噁烷 (5mL)溶液中加入HCl(4N二噁烷,20mL)，然后在环境温度下搅拌过夜。将混合物浓缩并用Et2O处理，然后真空干燥，从而得到白色固体产物(0.36g, 产率为80％)。MS(apci)m/z＝201.1(M+H)。根据制备A中所述的方法测定所述产物的对映异构体过量百分率(ee％)为>92％。
步骤C：5-(2-(2-氯-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：向由5-羟基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(制备B,步骤A,275mg,1.33mmol)在无水DMF(5mL)中形成的溶液中加入六氟代磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)膦(BOP)(646mg,1.46mmol)。将多相混合物搅拌10分钟，然后加入DIEA(1.16mL,6.6mmol)，再加入(R)-2-氯-5- 氟代-3-(吡咯烷-2-基)嘧啶二氢氯化物(363mg,1.33mmol)。将反应物在环境温度下搅拌过夜，以达到反应完全。反应物分隔在10％柠檬酸(30mL)和 EtOAc(30mL)之间，并将水层用EtOAc(2×20mL)萃取。将合并的有机相连续用水(20mL)、饱和NaHCO3(20mL)、水(20mL)和盐水(3×20mL)洗涤，然后干燥(Na2SO4)并浓缩，从而得到橘色泡沫产物粗品。将该材料粗品在25 g Biotage SNAP二氧化硅柱(用1％MeOH/DCM洗脱)上纯化，从而得到奶油色泡沫的所需产物(0.35g,产率为68％)。MS(apci)m/z＝390.0(M+H)。
步骤D：5-(2-(2-(2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基氨基)-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：首先用氮气对由Pd2dba3 (7.05mg,0.00770mmol)、Cs2CO3(125mg,0.385mmol)、rac-Binap(19.2mg, 0.0308mmol)、5-(2-(2-氯-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3- 羧酸(R)-乙酯(50mg,0.128mmol)和2-氨基乙基氨基甲酸叔丁酯(24.7mg, 0.154mmol)在脱气甲苯(1mL)中形成的混合物进行吹扫，然后密封，再经历16小时的微波照射(120℃)。在冷却至环境温度后，将反应混合物用EtOAc (10mL)稀释，再用水(2×5mL)洗涤。将有机物干燥(Na2SO4)并浓缩。通过反相柱色谱(Biotage SP4系统C18 12+M柱,5至70％乙腈/水)纯化材料粗品，从而得到白色泡沫固体的所需产物(38mg,产率为58％)。MS(apci)m/z＝ 514.1(M+H)。
步骤E：(R)-5-(2-(2-(2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基氨基)-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸的制备：向由5-(2-(2-(2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基氨基)-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)- 乙酯(38mg,0.074mmol)在THF/MeOH/水(2:2:1,0.7mL)中形成的溶液中加入LiOH-H2O(9.3mg,0.22mmol)，然后在50℃下搅拌18小时。在除去溶剂后，反应残余物溶于水(0.5mL)中，并用1N HCl(0.22mL)酸化至pH 3。将反应混合物用EtOAc(3×2mL)萃取，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩，从而得到所需的产物，该产物在下一步骤中未经进一步的纯化而直接使用(假设其定量转化)。MS(apci)m/z＝486.0(M+H)。
步骤F：(R)-5-(2-(2-(2-氨基乙基氨基)-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸氢氯化物的制备：将由(R)-5-(2-(2-(2-(叔丁氧基羰基氨基) 乙基氨基)-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(31mg, 0.064mmol)在HCl(4N二噁烷,798μL)和TFA(50％DCM,2mL)中形成的溶液在环境温度下搅拌1小时，然后在高真空下进行浓缩和干燥，从而得到灰白色固体的所需产物，该产物在下一步骤中未经进一步的纯化而直接使用 (假设其定量转化)。MS(apci)m/z＝386.1(M+H)。
步骤G：(6R)-9-氟代-2,11,13,16,20,21,24-七氮杂戊环-[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯-17-酮的制备：首先向(R)-5-(2-(2-(2- 氨基乙基氨基)-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(25 mg,0.065mmol)的DMF(3mL)溶液中加入HATU(29mg,0.077mmol)，然后进行5分钟的搅拌，接着滴加DIEA(56μL,0.32mmol)。在环境温度下搅拌过夜后，通过反相柱色谱(Biotage SP4系统C18 25+M柱,乙腈/水5至45％) 对反应物直接纯化，从而得到灰白色固体的题述产物(7mg,产率为30％)。 MS(apci)m/z＝368.2(M+H)。
实施例13
(6R)-9-氟代-2,11,13,17,21,22,25-七氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮
步骤A：5-(2-(2-(3-(叔丁氧基羰基氨基)丙基氨基)-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：根据实施例12步骤D所述的方法，用3-氨基丙基氨基甲酸叔丁酯替代2-氨基乙基氨基甲酸叔丁酯来进行制备。MS(apci)m/z＝528.1(M+H)。
步骤B：(6R)-9-氟代-2,11,13,17,21,22,25-七氮杂戊环-[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮的制备：根据实施例12步骤 E-G的3个步骤中所述的方法由上述所得的5-(2-(2-(3-(叔丁氧基羰基氨基) 丙基氨基)-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯进行制备。通过反相柱色谱(Biotage SP4系统C-18 25+M柱,5至50％乙腈 /水)纯化产物粗品，从而得到白色固体的题述产物(6mg,产率为44％)。MS (apci pos)m/z＝382.2(M+H)。
实施例14
(6R)-9-氟代-13,16-二氧杂-2,11,20,21,24-五氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]-二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯-17-酮
步骤A：5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-2-氯乙酯的制备：向(R)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1- 基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(制备B,0.1g,0.28mmol)和HATU(0.128g, 0.336mmol)的DMF(1mL)悬浮液中加入DIEA(0.146ml,0.840mmol)，再加入2-氯乙醇(0.0270g,0.336mmol)。在环境温度下搅拌30分钟后，通过反相柱色谱(Biotage SP4系统C18 25+M,5至65％乙腈/水)直接纯化反应物，从而得到白色固体的中间体(R)-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(94.7mg,产率为71％)。将这种经分离的中间体溶解于过量的氯乙醇(1mL)中，然后在环境温度下滴加DIEA，并搅拌过夜以达到反应完全。通过反相柱色谱(Biotage SP4系统C18 25+M,乙腈/水5至73)直接纯化反应物，从而得到白色泡沫固体的题述产物(56mg,产率为48％)。MS(apci)m/z＝419.9(M+H)。
步骤B：5-(2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-2-氯乙酯的制备：将由5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3- 基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-2-氯乙酯(56mg,0.13mmol)在 HCl(4N二噁烷,2.5mL,10mmol)中形成的混合物密封于加压管中，并在 100℃下加热45分钟。将反应混合物冷去并浓缩，从而得到淡黄色油状产物，该产物在下一步骤中未经进一步的纯化而直接使用(假设其定量产率)。MS (apci)m/z＝406.0(M+H)。
步骤C：(6R)-9-氟代-13,16-二氧杂-2,11,20,21,24-五氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]-二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯-17-酮的制备：将由5-(2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶 -3-羧酸(R)-2-氯乙酯(54mg,0.133mmol)和Cs2CO3(217mg,0.665mmol)在 DMF(6mL)中形成的混合物在90℃下加热过夜。将反应物过滤(GF/F纸)，并通过反相柱色谱(Biotage SP4系统C18 25+M,5至60％乙腈/水)直接纯化，从而得到所需产物与杂质的混合物。使用第二柱色谱，在Biotage SNAP KP-Sil 10g(使用10％己烷/EtOAc洗脱)上对所述的混合物进行处理，从而得到白色固体的纯净题述产物(11mg,产率为22％)。MS(apci pos)m/z ＝370.2(M+H)。
实施例15
(6R)-9-氟代-14-氧杂-2,11,18,19,22-五氮杂戊环[14.5.2.17,11.02,6.019,23]二十四烷-1(22),7,9,16(23),17,20-六烯-15,24-二酮
得到实施例14步骤C的副产物，并通过反相柱色谱(Biotage SP4系统 C-18 25+M柱,5至60％乙腈/水)分离实施例14步骤C的白色固体的材料粗品(5mg,产率为9％)。MS(apci)m/z＝370.2(M+H)。
实施例16
(6R)-9-氟代-13,16-二氧杂-2,11,17,21,22,25-六氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮
步骤A：(R)-N-(2-溴乙氧基)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1- 基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：向由(R)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3- 基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(制备B,100mg,0.280mmol)和 HATU(128mg,0.336mmol)在DMF(1mL)中形成的混合物中加入DIEA (0.146mL,0.840mmol)，再一次性加入O-(2-溴乙基)羟基野芝麻花碱氢溴化物(74.2mg,0.336mmol)。在环境温度下搅拌过夜后，通过反相柱色谱 (Biotage SP4系统C-18 25+M,5至67％乙腈/水)直接纯化反应混合物，从而得到灰白色固体的所需产物(91mg,产率为68％)。MS(apci)m/z＝479.0 (M+H)。
步骤B：(R)-N-(2-氯乙氧基)-5-(2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：将(R)-N-(2-溴乙氧基)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(70mg,0.146 mmol)和HCl(4N二噁烷,3.65mL,14.6mmol)的混合物密封于加压管中，并在90℃下加热3小时。然后将反应混合物冷却，用MeOH稀释，浓缩并在高真空下干燥，从而得到所需的产物，该产物在下一步骤中未经进一步纯化而直接使用(假设其定量转化)。
步骤C：(6R)-9-氟代-13,16-二氧杂-2,11,17,21,22,25-六氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮的制备：将由(R)-N-(2-氯乙氧基)-5-(2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基) 吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(60mg,0.14mmol)和Cs2CO3(232mg,0.71mmol) 在DMF(1.4mL)中形成的混合物在90℃下加热20分钟，以达到反应完全。将反应混合物过滤(GF/F纸)，并用水稀释(10mL)，然后用EtOAc(3×10mL) 萃取。将有机层合并，用盐水洗涤并干燥(Na2SO4)。在反相柱色谱(Biotage SP4系统C18 12+M,乙腈/水5至55％)上纯化材料粗品，从而得到所需最终产物与杂质的混合物。通过制备型TLC(10％MeOH/DCM)再次纯化所述的混合物，从而得到白色固体的纯净题述产物(1mg,产率为1％)。MS(apci) m/z＝385.1(M+H)。
实施例17
(6R,13R)-9,13-二氟代-2,11,15,19,20,23-六氮杂戊环[15.5.2.17,11.02,6.020,24]二十五烷-1(23),7,9,17(24),18,21-六烯-16,25-二酮
在0℃下，将由(6R,13S)-9-氟代-13-羟基-2,11,15,19,20,23-六氮杂戊环 -[15.5.2.17,11.02,6.020,24]二十五烷-1(23),7,9,17(24),18,21-六烯-16,25-二酮(实施例5；10mg,0.0251mmol)在DCM(0.3mL)和3滴DMSO的混合溶剂中形成的溶液用双(2-甲氧基乙基)氨基硫三氟化物(7.87μL,0.0427mmol)处理，然后加入乙醇(0.231mg,0.00502mmol)的DCM(0.1mL)溶液，接着在环境温度下将所述的混合物搅拌过夜。将反应混合物倒入饱和NaHCO3中，并用DCM 萃取，然后干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。通过(Biotage SP4系统C18 12+M 柱,乙腈/水5至50％)纯化材料粗品，从而得到淡棕色固体的题述产物(1.3 mg,产率为12％)。MS(apci)m/z＝401.2(M+H)。
实施例18
(6R)-9-氟代-17-甲基-13-氧杂-2,11,17,21,22,25-六氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮
步骤A：(R)-N-(3-氯丙基)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-N-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：向由(R)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(制备B,200mg,0.56 mmol)和3-氯-N-甲基丙-1-胺氢氯化物(177mg,1.23mmol)在DMF(4mL)中形成的悬浮液中加入N-甲基吗啉(0.25mL,2.30mmol)，然后加入HATU(234 mg,0.616mmol)。将反应物在环境温度下搅拌18小时，然后用H2O(10mL) 稀释，并用EtOAc(2x 20mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。通过反相柱色谱(使用5至60％乙腈/水洗脱)纯化产物粗品，从而得到白色泡沫固体的所需产物(129mg,产率为52 ％)。MS(apci)m/z＝447.0(M+H)。
步骤B：(R)-N-(3-氯丙基)-5-(2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-N-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：将HCl(4N二噁烷,4mL, 16.0mmol)和(R)-N-(3-氯丙基)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1- 基)-N-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg,0.224mmol)的混合物密封于加压管中，并在90℃下加热90分钟。然后，将反应混合物用乙腈稀释，并浓缩，从而得到产物粗品，该粗品在下一步骤中未经进一步的纯化而使用 (145mg,产率为150％)。MS(apci)m/z＝433.0(M+H)。
步骤C：(6R)-9-氟代-17-甲基-13-氧杂-2,11,17,21,22,25-六氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮的制备：将由(R)-N-(3-氯丙基)-5-(2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1- 基)-N-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(50mg,0.12mmol)和Cs2CO3(188mg, 0.58mmol)在DMF(12mL)中形成的混合物在90℃下加热15分钟，以达到反应完全。将反应混合物过滤，用DMF漂洗并浓缩。通过反相柱色谱(使用5至60％乙腈/水洗脱)直接纯化材料粗品，从而得到淡黄色粉末的题述产物(17mg,产率为36％)。MS(apci)m/z＝397.3(M+H)。
实施例19
(6R)-9,15,15-三氟代-13-氧杂-2,11,17,21,22,25-六氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮
步骤A：(S)-1-氨基-3-氯丙-2-醇氢氯化物的制备：向由苯甲醛(4.50g, 42.4mmol)在EtOH(12mL)中形成的溶液中分若干次加入氨水(4.01g,65.9 mmol)。在搅拌10分钟后，加入(S)-2-(氯甲基)环氧乙烷(3.81g,41.2mmol)，并将反应混合物在环境温度下搅拌2小时。然后用加热套将反应混合物在 35-40℃下加热6小时，然后在环境温度下搅拌18小时。将反应物浓缩至 5mL，并加入甲苯(5mL)。将混合物加热至36℃，在5分钟内缓慢加入浓缩的HCl(6.09g,61.8mmol)和水(5.9mL)的溶液，以将内部反应温度范围保持在36-41℃。将双相混合物在42-45℃下加入3小时。分离有机相，并用水 (10mL)洗涤。将水相合并，并加入乙醇(10mL)。将混合物浓缩至10mL，并加入乙醇(6×10mL)，在每次加入之后都进行浓缩。在最后的浓缩步骤之后，将浆料温暖至回流，再冷却至环境温度，然后在-20℃下放置18小时。通过真空过滤收集产物，用冷的乙醇洗涤并真空干燥，从而得到白色结晶固体 (3.58g,产率为60％)。1H NMR(d6-DMSO)δ8.14(s,3H),5.91(s,1H),3.93(m, 1H),3.59(m,2H),2.89(m,1H),2.69(m,1H)。
步骤B：N-((S)-3-氯-2-羟基丙基)-5-((R)-2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：根据实施例18中所述的方法，用(S)-1-氨基-3-氯丙-2-醇氢氯化物(98.1mg,0.672mmol)替代步骤A中的3- 氯-N-甲基丙-1-胺氢氯化物来进行制备。MS(apci)m/z＝448.9(M+H)。
步骤C：(R)-N-(3-氯-2-氧代丙基)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：向由N-((S)-3-氯-2-羟基丙基)-5-((R)-2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(180mg,0.401mmol)在DCM(3mL)中形成的溶液中加入Dess-Martin氧化剂(204mg,0.481mmol)。将反应物在环境温度下搅拌3小时，然后通过反相柱色谱直接纯化(使用5至60％乙腈/水洗脱)，从而得到白色泡沫固体的所需产物(114mg,产率为64％)。MS(apci)m/z＝447.0(M+H)。
步骤D：(R)-N-(3-氯-2,2-二氟代丙基)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：向由(R)-N-(3-氯-2-氧代丙基)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(114mg,0.255mmol)在DCM(3mL)中形成的溶液中加入De氧代fluor (0.103mL,0.561mmol)，并将反应混合物在环境温度下搅拌23小时。将反应用饱和NaHCO3(5mL)的猝灭，用DCM(5mL)稀释并搅拌30分钟。在相分离后，将水相用DCM(10mL)萃取。将合并的有机相浓缩，并通过反相柱色谱纯化(使用5至60％乙腈/水洗脱)，从而得到白色固体的所需产物(59mg, 产率为49％)。MS(apci)m/z＝469.0(M+H)。
步骤E：(R)-N-(3-氯-2,2-二氟代丙基)-5-(2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：根据实施例18中所述的方法，用(R)-N-(3-氯-2,2-二氟代丙基)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基) 吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺替代步骤B中的(R)-N-(3-氯丙基)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-N-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶 -3-甲酰胺来进行制备。MS(apci)m/z＝455.0(M+H)。
步骤F：(6R)-9,15,15-三氟代-13-氧杂-2,11,17,21,22,25-六氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮的制备：根据实施例18中所述的方法，用(R)-N-(3-氯-2,2-二氟代丙基)-5-(2-(5-氟代-2- 氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺替代步骤C 中的(R)-N-(3-氯丙基)-5-(2-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1- 基)-N-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，并在110℃下加热5小时，从而得到淡粉色固体的题述产物(6mg,产率为11％)。MS(apci)m/z＝419.3(M+H)。
实施例20
(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,17,21,22,25-五氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮
步骤A：2-(5-氟代-2-羟基苯基)吡咯烷-1-羧酸(R)-叔丁酯的制备：根据制备A中所述的方法，在步骤A中使用2-溴-4-氟代苯基醋酸酯替代3-溴-5- 氟代-2-甲氧基嘧啶来制备上述化合物(3.2g,产率为40％)。MS(apci)m/z＝ 182.1(M+H-Boc)。
步骤B：(R)-4-氟代-2-(吡咯烷-2-基)苯酚氢氯化物的制备：向由2-(5-氟代-2-羟基苯基)吡咯烷-1-羧酸(R)-叔丁酯(3.2g,11.4mmol)在DCM(20mL)中形成的溶液中加入HCl(4N二噁烷,5.69mL,22.7mmol)，并将混合物在环境温度下搅拌15小时。将反应物浓缩，并且所得的沉淀溶于DCM(15mL) 中，过滤从而得到米色固体的(R)-4-氟代-2-(吡咯烷-2-基)苯酚氢氯化物(1.85 g,产率为90％)。MS(apci)m/z＝182.1(M+H)。
步骤C：5-(2-(5-氟代-2-羟基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：根据制备B中所述的方法，用(R)-4-氟代-2-(吡咯烷-2-基) 苯酚氢氯化物替代步骤C中的(R)-5-氟代-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)嘧啶来进行制备。通过反相柱色谱(0-65％乙腈/H2O)纯化材料粗品，从而得到纯净的产物(686mg,产率为80％)。MS(apci)m/z＝371.0(M+H)。
步骤D：5-(2-(2-(3-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)丙氧基)-5-氟代苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：将由5-(2-(5-氟代-2-羟基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(280mg,0.756 mmol)、2-(3-溴丙基)异二氢吲哚-1,3-二酮(263mg,0.983mmol)和K2CO3(104 mg,0.756mmol)在DMF(0.4mL)中形成的悬浮液在环境温度下搅拌15小时。通过反相柱色谱(5-80％乙腈/H2O)直接纯化反应物，从而得到澄清油状的 5-(2-(2-(3-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)丙氧基)-5-氟代苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(202mg,产率为48％)。MS(apci)m/z＝558.0 (M+H)。
步骤E：5-(2-(2-(3-氨基丙氧基)-5-氟代苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：将5-(2-(2-(3-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)丙氧基)-5-氟代苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(200mg, 0.359mmol)和肼一水合物(115mg,3.59mmol)与MeOH(1mL)和THF(1 mL)在密封管中合并，并在60℃下加热20分钟。在冷却至环境温度后，浓缩反应物，然后加入NaOH(1N,2mL)。将混合物用DCM萃取，并将合并的有机萃取物干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩，从而得到5-(2-(2-(3-氨基丙氧基)-5- 氟代苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(110mg,产率为72 ％)。MS(apci)m/z＝428.2(M+H)。
步骤F：(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,17,21,22,25-五氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮的制备：在密封管中将5-(2-(2-(3-氨基丙氧基)-5-氟代苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a] 嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(10mg,0.023mmol)和DIEA(8.1μL,0.047mmol)与干燥的EtOH(0.1mL)合并，并在200℃下加热过夜。将反应物浓缩，并通过反相柱色谱(0-70％乙腈/H2O)纯化，从而得到题述化合物(4.5mg,产率为50％)。 MS(apci)m/z＝382.2(M+H)。
实施例21
(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,16,20,21,24-五氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯
步骤A：(R)-4-氟代-2-(1-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)吡咯烷-2-基)苯酚的制备：将(R)-4-氟代-2-(吡咯烷-2-基)苯酚氢氯化物(实施例20,步骤B,1.50g, 6.89mmol)、DIEA(2.67g,20.7mmol)、5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶(1.11g,7.24 mmol)和异丙醇(1mL)的混合物在120℃下加热过夜。将反应物倒入乙醚(50 mL)中，并用NaOH(1N水溶液,3×25mL)萃取。用浓缩的HCl将合并的水性萃取物调节至pH4，并用DCM萃取。将合并的DCM萃取物通过分相纸过滤并浓缩，从而得到米色固体的(R)-4-氟代-2-(1-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基) 吡咯烷-2-基)苯酚(1.82g,产率为89％)。MS(apci)m/z＝299.4(M+H)。
步骤B：(R)-5-(2-(5-氟代-2-羟基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛的制备：在环境温度下将POCl3(221μL,2.41mmol)滴加到(R)-4-氟代 -2-(1-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)吡咯烷-2-基)苯酚(600mg,2.01mmol)的DMF (4mL)溶液中之后，将反应物搅拌5分钟，然后引入NaOH(804mg,10.1 mmol)。将反应物再搅拌10分钟，然后先加入HCl(4N二噁烷,3mL)，再加入DCM(50mL)。在通过矿过滤后，将反应物浓缩并通过反相柱色谱(使用0-70％乙腈/H2O洗脱)纯化，从而得到米色固体的(R)-5-(2-(5- 氟代-2-羟基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(524mg,产率为80 ％)。MS(apci)m/z＝327.2(M+H)。
步骤C：2-(4-氟代-2-(1-(3-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)吡咯烷-2-基)苯氧基)乙基氨基甲酸(R)-叔丁酯的制备：将(R)-5-(2-(5-氟代-2-羟基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(159mg,0.487mmol)、2-溴乙基氨基甲酸叔丁酯(131mg,0.585mmol)、碳酸钾(202mg,1.46mmol)和DMF(1mL)的混合物在密封管中合并，并在环境温度下搅拌过夜，然后在60℃下保持3小时。在用DCM(20mL)稀释后，将反应物通过矿过滤，浓缩并通过反相柱色谱(使用0-70％乙腈/H2O洗脱)纯化，从而得到黄色固体的2-(4-氟代 -2-(1-(3-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)吡咯烷-2-基)苯氧基)乙基氨基甲酸 (R)-叔丁酯(198mg,产率为86.6％)。MS(apci)m/z＝370.4(M+H-Boc)。
步骤D：(R)-5-(2-(2-(2-氨基乙氧基)-5-氟代苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛的制备：将HCl(4N二噁烷,80μl,0.32mmol)加入到2-(4- 氟代-2-(1-(3-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)吡咯烷-2-基)苯氧基)乙基氨基甲酸(R)-叔丁酯(198mg,0.422mmol)的DCM(2mL)溶液中，将反应物用N2吹扫，并在环境温度下搅拌过夜。在除去溶剂后，引入NaOH(5mL×1N)，并将反应混合物在分相管中用若干个批次的DCM萃取。将合并的有机萃取物浓缩，从而得到(R)-5-(2-(2-(2-氨基乙氧基)-5-氟代苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-甲醛(155mg,产率为99.5％)，该产物在下一步骤中直接使用。 MS(apci)m/z＝352.3(M+H–H2O)。
步骤E：(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,16,20,21,24-五氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯的制备：将三乙酰氧基硼氢化四甲基铵(46.7mg,0.629mmol)加入到(R)-5-(2-(2-(2-氨基乙氧基)-5-氟代苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(155mg,0.420mmol) 的DCM(50mL)溶液中，并将反应物在环境温度下搅拌过夜。然后，将反应混合物用盐水稀释，并在分相管中用若干批次的DCM萃取，再将合并的有机萃取物浓缩，接着通过反相柱色谱(使用0-90％乙腈-H2O洗脱)纯化，从而得到题述产物(32mg,产率为21.6％)。MS(apci)m/z＝354.2(M+H)。
实施例22
1-[(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,16,20,21,24-五氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯-16-基]乙-1-酮
将乙酰氯(1.7mg,0.021mmol)加入到(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,16,20,21,24- 五氮杂戊环-[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯(实施例21,5.0mg,0.014mmol)的DCM(0.5mL)溶液中，再加入DIEA(7.4μL, 0.042mmol)。在环境温度下搅拌过夜后，将反应物浓缩并通过反相柱色谱(使用0-80％乙腈/H2O洗脱)纯化，从而得到题述产物(3.9mg,产率为70％)。 MS(apci)m/z＝396.2(M+H)。
实施例23
1-[(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,16,20,21,24-五氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯-16-基]-2-羟基乙-1-酮
向(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,16,20,21,24-五氮杂戊环-[16.5.2.02,6.07,12.021,25] 二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯(实施例21,6mg,0.017mmol)的 DCM(0.5mL)溶液中加入2-氯-2-氧代乙基乙酸酯(3.5mg,0.025mmol)，然后再加入DIEA(8.9μL,0.051mmol)。将反应物在环境温度下搅拌过夜，然后浓缩，再加入MeOH(0.2mL)，接着加入氢氧化钠(6.8mg,0.085mmol)。在环境温度下搅拌5小时后，将反应物用盐水稀释，并在分相管中用若干批次的DCM萃取。将合并的有机萃取物浓缩，并通过反相柱色谱(使用0-70％乙腈/H2O洗脱)纯化，从而得到题述产物(3.6mg,产率为52％)。MS(apci) m/z＝412.5(M+H)。
实施例24
(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,17,21,22,25-五氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯
步骤A：3-(4-氟代-2-(1-(3-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)吡咯烷-2-基)苯氧基)丙基氨基甲酸(R)-叔丁酯的制备：根据实施例21中所述的方法，使用3-溴丙基氨基甲酸叔丁酯替代步骤C中的2-溴乙基氨基甲酸叔丁酯来进行制备，从而得到所需的产物(119mg,产率为84.5％)。MS(apci)m/z＝384.2 (M+H-Boc)。
步骤B：3-(4-氟代-2-(1-(3-(羟基甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)吡咯烷-2-基)苯氧基)丙基氨基甲酸(R)-叔丁酯的制备：将由3-(4-氟代-2-(1-(3-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)吡咯烷-2-基)苯氧基)丙基氨基甲酸(R)-叔丁酯(85.0 mg,0.176mmol)在MeOH(2mL)中形成的溶液首先冷却至0℃，然后引入 NaBH4(4.04mg,0.176mmol)，并将反应物在0℃下搅拌1小时。将反应物用盐水稀释，并在分相柱中用DCM萃取。将合并的有机萃取物浓缩，从而得到米色固体的3-(4-氟代-2-(1-(3-(羟基甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)吡咯烷-2- 基)苯氧基)丙基氨基甲酸(R)-叔丁酯(86mg,产率为101％)。MS(apci)m/z＝ 468.1(M+H–H2O)。
步骤C：(R)-(5-(2-(2-(3-氨基丙氧基)-5-氟代苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)甲醇氢氯化物的制备：将3-(4-氟代-2-(1-(3-(羟基甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)吡咯烷-2-基)苯氧基)丙基氨基甲酸(R)-叔丁酯(80mg, 0.16mmol)溶解于2mL的DCM中，并用HCl(4N溶于二噁烷中,6.0mg,0.16 mmol)处理。将反应物用N2吹扫，压盖并在环境温度下搅拌18小时，然后浓缩从而得到米色固体的(R)-(5-(2-(2-(3-氨基丙氧基)-5-氟代苯基)吡咯烷-1- 基)吡唑[1,5-a]嘧啶-3-基)甲醇氢氯化物(70mg,产率为101％)。MS(apci)m/z ＝368.5(M+H-H2O)。
步骤D：(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,17,21,22,25-五氮杂戊环-[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯的制备：将由 (R)-(5-(2-(2-(3-氨基丙氧基)-5-氟代苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基) 甲醇(50mg,0.130mmol)、PS-PPh3(0.259mmol)和四氯甲烷(200mg,1.30 mmol)在DCM(5mL)中形成的混合物在环境温度下摇动过夜。将反应物过滤，浓缩并通过反相柱色谱(使用0-60％乙腈/H2O洗脱)纯化，从而得到题述产物(27.4mg,产率为57.5％)。MS(apci)m/z＝368.1(M+H)。
实施例25
(6R)-9-氟代-16-甲磺酰基-13-氧杂-2,16,20,21,24-五氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯
向(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,16,20,21,24-五氮杂戊环-[16.5.2.02,6.07,12.021,25] 二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯(实施例21,5mg,0.0141mmol)的 DCM(0.5mL)溶液中加入DIEA(2.46μL,0.0141mmol)，然后加入甲基磺酰氯(1.10μL,0.0141mmol)。将反应物在环境温度下搅拌1小时，然后加入 MeOH(0.1mL)。将反应物浓缩，并通过反相柱色谱(使用0-80％乙腈/H2O 洗脱)纯化，从而得到题述产物(3.1mg,产率为50.8％)。MS(apci)m/z＝432.3 (M+H)。
实施例26
2-[(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,16,20,21,24-五氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯-16-基]乙酸
将(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,16,20,21,24-五氮杂戊环-[16.5.2.02,6.07,12.021,25] 二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯(实施例21,5mg,0.014mmol)、2-溴乙酸(2.9mg,0.021mmol)和NaOH(1N,42μL,0.042mmol)的IPA(0.1mL)溶液在密封管中在60℃下加热过夜，然后在120℃下加热24小时。冷却后，将反应混合物通过反相柱色谱(使用0-50％乙腈/H2O洗脱)直接纯化，从而得到题述产物(3.1mg,产率为53％)。MS(apci)m/z＝412.2(M+H)。
实施例27
(6R)-9-氟代-17-甲磺酰基-13-氧杂-2,17,21,22,25-五氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯
将甲基磺酰氯(1.69μL,0.0218mmol)加入到(6R)-9-氟代-13-氧杂 -2,17,21,22,25-五氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯(实施例24,4.0mg,0.0109mmol)的DCM(0.5 mL)溶液中，再加入DIEA(9.48μL,0.0544mmol)。将反应物在环境温度下搅拌过夜，浓缩并通过反相柱色谱(使用0-80％乙腈/H2O洗脱)纯化，从而得到题述化合物(2.9mg,产率为59.8％)。MS(apci)m/z＝446.3(M+H)。
实施例28
(6R)-N-乙基-9-氟代-13-氧杂-2,17,21,22,25-五氮杂戊环17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-17-甲酰胺
向(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,17,21,22,25-五氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯(实施例24,4mg,0.011mmol)的DCM (0.5mL)溶液中加入异氰酸乙酯(1.5mg,0.022mmol)，再加入DIEA(1.9μL, 0.011mmol)。将反应物在环境温度下搅拌过夜，然后浓缩，再通过反相柱色谱(使用0-80％乙腈/H2O洗脱)纯化，从而得到题述化合物(3.5mg,产率为 73％)。MS(apci)m/z＝439.1(M+H)。
实施例29
(6R)-N-乙基-9-氟代-13-氧杂-2,16,20,21,24-五氮杂戊环-[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯-16-甲酰胺
向(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,16,20,21,24-五氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯(实施例21,5.5mg,0.016mmol)的DCM (0.5mL)溶液中加入异氰酸乙酯(1.5mg,0.022mmol)，再加入DIEA(1.9μL, 0.011mmol)。在环境温度下搅拌过夜后，将反应物浓缩，并通过反相柱色谱 (使用0-80％乙腈/H2O洗脱)纯化，从而得到题述化合物(3.3mg,产率为 50％)。MS(apci)m/z＝425.4(M+H)。
实施例30
(6S)-9-氟代-4,13-二氧杂-2,11,17,21,22,25-六氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-七烯-3,18-二酮
步骤A：(S,E)-N-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)亚乙基)-2-甲基丙-2-亚磺酰胺的制备：向由(S)-2-甲基丙-2-亚磺酰胺(3.3g,27.2mmol)在DCM(50 mL)中形成的溶液中加入2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙醛(4.98g,28.6 mmol)，然后再加入无水硫酸铜(8.69g,54.5mmol)。将多相混合物在环境温度下搅拌3天，然后通过矿过滤。将滤液浓缩，并将残余物通过快速柱色谱(使用10％EtOAc/己烷洗脱)纯化，从而得到无色油状的 (S,E)-N-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)亚乙基)-2-甲基丙-2-亚磺酰胺(5.54 g,产率为73％)。1H NMR(CDCl3)δ7.96(m,1H),4.44(d,1H,J＝2.7Hz),1.11 (s,9H),0.82(s,9H),0.00(s,6H)。
步骤B：(S)-N-((S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙-2-亚磺酰胺的制备：在-78℃下，向由正丁基锂(10.8 mL,17.3mmol,1.6M溶于己烷中)在甲苯(100mL)中形成的溶液中滴加由 3-溴-5-氟代-2-甲氧基嘧啶(3.27g,15.9mmol)在甲苯(5mL)中形成的溶液，并将内部温度保持在-70℃以下。将混合物在-78℃下搅拌1小时，然后滴加由(S,E)-N-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)亚乙基)-2-甲基丙-2-亚磺酰胺(4.0 g,14.4mmol)在甲苯(10mL)中形成的溶液进行处理，并将内部温度保持在 -65℃以下。在-78℃下搅拌3小时后，将混合物用盐水(100mL)和EtOAc(100 mL)处理，并在环境温度下搅拌20分钟。加入饱和的NaHCO3溶液(50mL)，并分离各层。将水层用EtOAc(2x 50mL)萃取，并将合并的有机相用盐水(50 mL)洗涤，在Na2SO4上干燥，过滤并浓缩。通过快速柱色谱(使用10％EtOAc/ 己烷至20％EtOAc/己烷洗脱)纯化残余物，从而得到与少量极性杂质混合的无色油状(S)-N-((S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.40g,产率为24％)。MS(apci)m/z＝ 405.0(M+H)。
步骤C：(S)-2-氨基-2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)乙醇二氢氯化物的制备：向由(S)-N-((S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(5-氟代-2-甲氧基吡啶 -3-基)乙基)-2-甲基丙-2-亚磺酰胺(1.40g,3.46mmol)在甲醇(20mL)中形成的溶液中加入4N HCl/二噁烷(8.65mL,34.6mmol)。将溶液在环境温度下搅拌16小时，然后浓缩并在真空下干燥，从而得到黄色油状的(S)-2-氨基-2-(5- 氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)乙醇二氢氯化物，该产物未经纯化而使用(假设产率为100％)。MS(apci)m/z＝186.9(M+H)。
步骤D：(S)-4-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)噁唑烷-2-酮的制备：向由(S)-2- 氨基-2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)乙醇二氢氯化物(897mg,3.46mmol)在 KOH(10mL,24.2mmol,2.42M溶于水中)中形成的溶液中加入THF(10 mL)。将混合物冷却至0℃，并用三光气(1.03g,3.46mmol)处理。将混合物温暖至环境温度，并搅拌16小时，然后分隔在EtOAc(50mL)和水(50mL) 之间，并分离各层。将水层用EtOAc(2x 30mL)萃取，并将合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，在Na2SO4上干燥，过滤并浓缩。将残余物与Et2O一起磨碎，过滤并在减压下干燥，从而得到白色粉末的(S)-4-(5-氟代-2-甲氧基吡啶 -3-基)噁唑烷-2-酮(254mg,产率为35％)。1H NMR(CDCl3)δ7.98(m,1H), 7.44(m,1H),5.61(Br S,1H),5.13(m,1H),4.83(m,1H),4.16(m,1H),3.96(s, 3H)。
步骤E：制备of(S)-乙基5-(4-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)-2-氧代噁唑烷-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸：向由(S)-4-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)噁唑烷-2-酮(254mg,1.20mmol)在DMF(10mL)中形成的溶液中加入氢化钠(58 mg,1.44mmol,60％溶于矿物油中)。将混合物在环境温度下搅拌20分钟，然后用5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(270mg,1.20mmol)进行一次性的处理。将混合物搅拌48小时，然后用饱和的NH4Cl溶液(30mL)处理，用EtOAc (3x 10mL)萃取。将合并的有机相用水(5x 10mL)和盐水(10mL)洗涤，然后在Na2SO4上干燥，过滤并浓缩。通过快速柱色谱(使用20％EtOAc/己烷至66％EtOAc/己烷洗脱)纯化残余物，从而得到白色泡沫的(S)-5-(4-(5-氟代-2- 甲氧基吡啶-3-基)-2-氧代噁唑烷-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(311 mg,产率为65％)。MS(apci)m/z＝401.9(M+H)。
步骤F：(S)-5-(1-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)-2-羟基乙基氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸的制备：向由5-(4-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)-2-氧代噁唑烷-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(S)-乙酯(311mg,0.77mmol)在 MeOH:THF:H2O(15mL)的1:1:1混合物中形成的溶液中加入氢氧化锂一水合物(97.6mg,2.32mmol)。将混合物在环境温度下搅拌16小时，然后在50℃下搅拌19小时，接着浓缩至1/3体积，用水(30mL)稀释，并用1N HCl酸化至pH 4-5。通过过滤收集所得的沉淀，用水和Et2O洗涤，然后在减压下干燥，从而得到白色粉末的(S)-5-(1-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)-2-羟基乙基氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(121mg,产率为45％)。MS(apci)m/z＝347.9 (M+H)。
步骤G：(S)-N-(3-氯丙基)-5-(1-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)-2-羟基乙基氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：向由(S)-5-(1-(5-氟代-2-甲氧基吡啶 -3-基)-2-羟基乙基氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(50mg,0.14mmol)在 DCM(2mL)中形成的悬浮液中加入HOBt(44mg,0.29mmol)，再加入EDCI (83mg,0.43mmol)。将多相混合物在环境温度下搅拌10分钟，然后用三乙胺(100μL,0.72mmol)、再用3-氯-丙基胺氢氯化物(56mg,0.43mmol)处理。将混合物搅拌2小时，然后加入DMF(2mL)，并持续搅拌48小时。混合物分隔在饱和的NH4Cl溶液(20mL)和EtOAc(20mL)溶液之间，并分离各层。将水层用EtOAc(2x 10mL)萃取，并将合并的有机相用水(5x 10mL)和盐水 (10mL)洗涤，然后在Na2SO4上干燥，过滤并浓缩，从而得到淡黄色泡沫的 (S)-N-(3-氯丙基)-5-(1-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)-2-羟基乙基氨基)吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(60mg,产率为99％)，该产物未经进一步的纯化而使用。MS(apci)m/z＝423.0(M+H)。
步骤H：(S)-N-(3-氯丙基)-5-(4-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)-2-氧代噁唑烷-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：向由(S)-N-(3-氯丙基)-5-(1-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)-2-羟基乙基氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(60mg, 0.14mmol)在ACN(2mL)中形成的溶液中加入CDI(35mg,0.21mmol)。将溶液在环境温度下搅拌16小时，然后分隔在饱和的NH4Cl溶液(20mL)和 EtOAc(10mL)之间，然后分离各层。将水层用EtOAc(2x 10mL)萃取，并将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，在Na2SO4上干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速柱色谱(使用1％MeOH/DCM洗脱)纯化，从而得到白色固体的(S)-N-(3-氯丙基)-5-(4-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)-2-氧代噁唑烷-3-基) 吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(37mg,产率为58％)。MS(apci)m/z＝449.0 (M+H)。
步骤I：(S)-N-(3-氯丙基)-5-(4-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-氧代噁唑烷-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：将由(S)-N-(3-氯丙基)-5-(4-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)-2-氧代噁唑烷-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶 -3-甲酰胺(37mg,0.08mmol)在4N HCl/二噁烷(4mL)中形成的悬浮液在85 ℃下搅拌17小时，然后在环境温度下搅拌48小时。将所得的溶液浓缩至1/2 体积，然后转移至密封管中，并用4N HCl/二噁烷(2mL)处理，接着在100 ℃下搅拌2小时。将多相混合物浓缩，在减压下干燥并在下一步骤中直接使用(假设产率为100％)。MS(apci)m/z＝435.1(M+H)。
步骤J：(6S)-9-氟代-4,13-二氧杂-2,11,17,21,22,25-六氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-七烯-3,18-二酮的制备：向由(S)-N-(3-氯丙基)-5-(4-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-氧代噁唑烷-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(35mg,0.08mmol)在DMF(3mL)中形成的溶液中加入碳酸铯(79mg,0.24mmol)。将混合物在65℃下搅拌30分钟，然后在环境温度下搅拌48小时。将混合物用水(30mL)处理，在用EtOAc (3x 10mL)萃取。将合并的有机相用水(5x 10mL)和盐水(10mL)洗涤，然后在Na2SO4上干燥，过滤并浓缩。通过快速柱色谱(使用2％MeOH/DCM洗脱)纯化残余物，从而得到无定形白色固体的题述化合物(13mg,产率为 41％)。MS(apci)m/z＝399.2(M+H)。
实施例31
(6S)-9-氟代-4,13-二氧杂-2,11,16,20,21,24-六氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7(12),8,10,18(25),19,22-七烯-3,17-二酮
步骤A：5-羟基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸的制备：向由5-羟基吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(制备B,步骤A；2.0g,9.65mmol)在THF:MeOH的 2:1混合物(40mL)中形成的溶液中加入氢氧化锂一水合物(29mL,29.0mmol, 1.0M溶于水中)。将所得溶液在回流下搅拌16小时，然后冷却并浓缩。将残余物溶解于水(100mL)中，并用6M HCl酸化。将所得的白色沉淀通过过滤收集，并用水和Et2O洗涤，然后在减压下干燥，从而得到白色固体的5- 羟基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(1.18g,产率为68％)。1H NMR(d6-DMSO)δ8.50(d,2H,J＝7.7Hz),8.02(s,2H),6.07(d,2H,J＝8.2Hz)。
步骤B：5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯化物的制备：在0℃下，向由 5-羟基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(1.18g,6.59mmol)在DMF(10mL)中形成的悬浮液中在5分钟的时间内滴加亚硫酰氯(10mL)。将混合物温暖至环境温度，然后在60℃下搅拌16小时。将冷却的溶液用N2吹扫20分钟，然后用 50％EtOAc/己烷(100mL)稀释，并剧烈搅拌30分钟。倒出有机相，用Na2CO3和活化碳处理，搅拌5分钟，然后通过矿过滤并浓缩。将残余物溶解于甲苯(100mL)中，用活化碳处理，并通过矿再次过滤。将滤液浓缩，并在减压下干燥，从而得到奶油色固体的5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯化物(800mg,产率为56％)。1H NMR(CDCl3)δ8.70(m,1H),8.66(s,1H), 7.16(m,1H)。
步骤C：5-氯-N-(2-氯乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：向由5- 氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯化物(284mg,1.31mmol)在DCM(10mL)中形成的悬浮液中加入DIEA(1.14mL,6.57mmol)。将所得溶液冷却至0℃，然后用2-氯乙基胺氢氯化物(183mg,1.58mmol)处理并搅拌1小时。混合物分隔在水(30mL)和DCM(30mL)之间，并分离各层。将水层用DCM(2x 20mL) 萃取，并将合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，在Na2SO4上干燥，过滤并浓缩，从而得到米色固体的5-氯-N-(2-氯乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(290 mg,产率为85％)。MS(apci)m/z＝258.9(M+H)。
步骤D：(S)-N-(2-氯乙基)-5-(4-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)-2-氧代噁唑烷-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：向由(S)-4-(5-氟代-2-甲氧基吡啶 -3-基)噁唑烷-2-酮(根据实施例30制备；50mg,0.236mmol)在DMF(1mL) 中形成的溶液中加入氢化钠(11mg,0.28mmol,60％溶于矿物油中)。将混合物在环境温度下搅拌20分钟，然后用5-氯-N-(2-氯乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3- 甲酰胺(61mg,0.236mmol)处理。将混合物搅拌16小时，然后用饱和的NH4Cl 溶液(10mL)和水(20mL)处理。所得的沉淀通过过滤收集，用水和Et2O洗涤，然后在减压下干燥，从而得到米色固体的(S)-N-(2-氯乙基)-5-(4-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)-2-氧代噁唑烷-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(83mg,产率为81％)。MS(apci)m/z＝434.9(M+H)。
步骤E：(S)-N-(2-氯乙基)-5-(4-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-氧代噁唑烷-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：将由(S)-N-(2-氯乙基)-5-(4-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)-2-氧代噁唑烷-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶 -3-甲酰胺(80mg,0.18mmol)在5-6N HCl/IPA(2.5mL)中形成的悬浮液在密封管中温暖至90℃，并持续1.5小时。过滤冷却的混合物，并浓缩滤液。将残余物由Et2O浓缩2次，并在减压下干燥，从而得到米色固体的(S)-N-(2- 氯乙基)-5-(4-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-氧代噁唑烷-3-基)吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(63mg,产率为82％)。MS(apci)m/z＝421.0(M+H)。
步骤F：(6S)-9-氟代-4,13-二氧杂-2,11,16,20,21,24-六氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7(12),8,10,18(25),19,22-七烯-3,17-二酮的制备：根据实施例30步骤J所述的方法，用(S)-N-(2-氯乙基)-5-(4-(5-氟代 -2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-氧代噁唑烷-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺替换(S)-N-(3-氯丙基)-5-(4-(5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-氧代噁唑烷 -3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺来进行制备，从而得到白色固体的题述化合物(14mg,产率为24％)。MS(apci)m/z＝385.1(M+H)。
实施例32
(6R)-9-氟代-2,11,16,20,21,24-六氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯-17-酮
步骤A：5-(2-(2-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙-1-炔-1-基)-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：向溶于DMF(2mL) 中的5-(2-(2-氯-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)- 乙酯(实施例12,步骤C；153mg,0.392mmol)中加入丙-2-炔基氨基甲酸酯叔丁酯(122mg,0.785mmol)、碘化亚铜(11mg,0.0578mmol)、三苯基膦(82.4 mg,0.314mmol)、双三苯基磷二氯化钯(II)(116mg,0.165mmol)和二异丙基胺 (99.3mg,0.981mmol)。将反应混合物密封，并加热至95℃并持续8小时，然后冷却至环境温度并在减压下浓缩。通过二氧化硅柱色谱(使用33％ EtOAc/己烷洗脱)纯化残余物，从而得到与Ph3P混合的终产物(160mg,产率为80.2％)。MS(apci)m/z＝508.9(M+H)。
步骤B：(R)-乙基5-(2-(2-(3-氨基丙基)-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸的制备：向溶于MeOH(10mL)中的5-(2-(2-(3-(叔丁氧基羰基氨基)丙-1-炔基)-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶 -3-羧酸(R)-乙酯(160mg,0.315mmol)中加入二羟基钯(101mg,0.144mmol)。将反应混合物在氢气球下搅拌6小时，然后过滤通过矿垫，并用 MeOH(30mL)洗涤。将滤液浓缩并将所得的残余物用溶于二噁烷(3mL)中的4M HCl处理。在搅拌30分钟后，将溶液浓缩从而得到作为HCl盐的产物(140mg,产率为108％)。MS(apci)m/z＝413.0(M+H)。
步骤C：(R)-5-(2-(2-(3-氨基丙基)-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸的制备：向溶于THF/MeOH(2mL/1mL)中的(R)-乙基 5-(2-(2-(3-氨基丙基)-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸氢氯化物(160mg,0.356mmol)中加入氢氧化锂(1.1mL,2.20mmol)。将反应混合物加热至70℃并持续5小时，然后在减压下浓缩。加入水(10mL)，并将混合物用Et2O(2x 5mL)洗涤，然后用HCl(1M)中和至pH＝4。将水溶液用DCM(2x 10mL)萃取。将有机萃取物用Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，从而得到所需产物的粗品(16.0mg,产率为11.7％)。MS(apci)m/z＝385.0 (M+H)。
步骤D：(6R)-9-氟代-2,11,16,20,21,24-六氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯-17-酮的制备：向溶于DMF(5mL) 中的(R)-5-(2-(2-(3-氨基丙基)-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(16mg,0.042mmol)中加入HATU(63mg,0.17mmol)和N-乙基-N- 异丙基丙-2-胺(22mg,0.17mmol)。将反应混合物搅拌3小时，并在减压下浓缩。通过二氧化硅柱色谱，使用100％EtOAc纯化残余物粗品，从而得到题述化合物(6.0mg,产率为39％)。MS(apci)m/z＝367.3(M+H)。
实施例33
(6R)-9-氟代-15-甲基-2,11,16,20,21,24-六氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯-17-酮
根据实施例37所述的方法，用丁-3-炔-2-基氨基甲酸叔丁酯替代步骤B 中的2-甲基丁-3-炔-2-基氨基甲酸叔丁酯来进行制备，从而得到作为非对映异构体的1:1混合物的题述化合物。MS(apci)m/z＝381.2(M+H)。
实施例34
(6R,13R)-9-氟代-13-甲基-2,11,15,19,20,23-六氮杂戊环[15.5.2.17,11.02,6.020,24]二十五烷-1(23),7,9,17(24),18,21-六烯-16,25-二酮
步骤A：(R)-甲基5-(2-(5-氟代-2-羟基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸的制备：向由(R)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(制备B；5.01g,14.0mmol)在MeOH(150mL) 中形成的悬浮液中滴加TMSCHN2(8.41mL,16.8mmol)。将反应物搅拌30分钟，然后用1mL的乙酸吹灭。在减压下除去溶剂，并将残余物在高真空下干燥，从而得到甲酯粗品。向甲酯粗品中加入溶于二噁烷(100mL)中的4N HCl，并将反应物密封，然后加热至90℃并持续2小时。将反应混合物在减压下浓缩，并将残余物溶解于DCM(100mL)中，再用饱和的NaHCO3(40mL) 洗涤。将有机层在Na2SO4上干燥，过滤并在减压下浓缩，从而得到所需产物的粗品(4.67g,产率为93.2％)。MS(apci)m/z＝357.9(M+H)。
步骤B：5-((R)-2-(1-((S)-3-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)-2-甲基丙基)-5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸甲酯的制备：向由5-(2-(5-氟代-2-羟基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶 -3-羧酸(R)-甲酯(202mg,0.565mmol)在DMF(5mL)中形成的溶液中加入氢化锂(22.5mg,2.83mmol)和(R)-2-(3-溴-2-甲基丙基)异二氢吲哚e-1,3-二酮(根据在Euro.J.Med.Chem.2000,147-156中所述的方法制备)(239mg,0.848 mmol)。将反应物在70℃下搅拌2小时，然后冷却至环境温度。将反应混合物用EtOAc(20mL)稀释，并用水(2x 10mL)洗涤。通过二氧化硅柱色谱(使用66％EtOAc/己烷洗脱)纯化残余物，从而得到产物(110mg,产率为34.8 ％)。MS(apci)m/z＝559.0(M+H)。
步骤C：5-((R)-2-(1-((R)-3-氨基-2-甲基丙基)-5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸甲酯的制备：向由 5-((R)-2-(1-((S)-3-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)-2-甲基丙基)-5-氟代-2-氧代 -1,2-二氢吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸甲酯(110mg, 0.197mmol)在MeOH/THF(3mL/3mL)中形成的溶液中加入肼(31.6mg, 0.985mmol)。将反应物在50℃下搅拌14小时。冷却后，将反应混合物浓缩并将所得的残余物用EtOAc(20mL)稀释，再用饱和的NaHCO3水溶液(5 mL)、水(2x 5mL)和盐水(5mL)洗涤。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过二氧化硅柱色谱(使用EtOAc/MeOH/NH4OH 10:1:0.1洗脱)纯化残余物，从而得到所需的产物(65mg,产率为77％)。MS(apci)m/z ＝429.2(M+H)。
步骤D：(6R,13R)-9-氟代-13-甲基-2,11,15,19,20,23-六氮杂戊环[15.5.2.17,11.02,6.020,24]二十五烷-1(23),7,9,17(24),18,21-六烯-16,25-二酮的制备：向由5-((R)-2-(1-((R)-3-氨基-2-甲基丙基)-5-氟代-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3- 基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸甲酯(65mg,0.15mmol)在 THF/MeOH(6mL/2mL)中形成的溶液中加入氢氧化锂(455μL,0.91mmol)。将反应物在70℃下搅拌3小时，然后用氯化氢(910μL,0.91mmol)猝灭。在减压下除去溶剂，并在高真空下干燥残余物。向所得的残余物粗品中加入 DMF(10mL)、HATU(115mg,0.30mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(78mg, 0.61mmol)。将反应物搅拌3小时，并在减压下除去溶剂。通过二氧化硅柱色谱(使用10％MeOH/EtOAc洗脱)纯化残余物，从而得到题述化合物(6.0 mg,产率为10％)。MS(apci)m/z＝397.3(M+H)。
实施例35
(6R,13S)-9-氟代-13-甲基-2,11,15,19,20,23-六氮杂戊环[15.5.2.17,11.02,6.020,24]二十五烷-1(23),7,9,17(24),18,21-六烯-16,25-二酮
根据实施例34所述的方法，用(S)-2-(3-溴-2-甲基丙基)异二氢吲哚-1,3- 二酮(根据Euro.J.Med.Chem.2000,147-156中所述的方法制备)替代步骤B 中的(R)-2-(3-溴-2-甲基丙基)异二氢吲哚-1,3-二酮来进行制备。MS(apci)m/z ＝397.3(M+H)。
实施例36
(6R)-9-氟代-15,15-二甲基-13-氧杂-2,11,17,21,22,25-六氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7,9,11,19(26),20,23-七烯-18-酮
根据实施例3中所述的方法，用3-氨基-2,2-二甲基丙-1-醇替代步骤A 中的3-氨基丙-1-醇来进行制备。MS(apci)m/z＝411.2(M+H)。
实施例37
(6R)-9-氟代-15,15-二甲基-2,11,16,20,21,24-六氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯-17-酮
步骤A：5-(2-(5-氟代-2-(三氟代甲基-磺酰基氧基)吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-甲酯的制备：向由5-(2-(5-氟代-2-羟基吡啶 -3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-甲酯(根据实施例34步骤A 制备；2.31g,6.46mmol)在DMF(20mL)中形成的溶液中加入1,1,1-三氟代 -N-苯基-N-(三氟代甲基-磺酰基)甲磺酰胺(2.54g,7.11mmol)和三乙胺(0.785 g,7.76mmol)。将反应物搅拌18小时。在减压下除去溶剂，并通过二氧化硅柱色谱(使用33％EtOAc/己烷洗脱)纯化残余物，从而得到所需的产物(2.36 g,产率为74.6％)。MS(apci)m/z＝490.0(M+H)。
步骤B：5-(2-(2-(3-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲基丁基)-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-甲酯的制备：向溶于DMF(2mL) 中的5-(2-(5-氟代-2-(三氟代甲基磺酰基氧基)吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-甲酯(503mg,1.03mmol)中加入2-甲基丁-3-炔-2-基氨基甲酸叔丁酯(377mg,2.06mmol)、碘化亚铜(39.1mg,0.206mmol)、双三苯基磷二氯化钯(II)(144mg,0.206mmol)和二异丙基胺(260mg,2.57 mmol)。将反应混合物密封，并加热至65℃并持续8小时。在减压下除去溶剂。通过二氧化硅柱色谱(使用66％EtOAc/己烷洗脱)纯化残余物，从而得到与Ph3P混合的5-(2-(2-(3-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲基丁-1-炔基)-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-甲酯，将所得产物在H2起球下在MeOH(20mL)中使用碳上二羟基钯(200mg,0.285mmol)立即氢化 15小时。在过滤通过矿垫后，用MeOH洗涤，然后在减压下浓缩滤液，并通过二氧化硅柱色谱(使用66％EtOAc/己烷洗脱)纯化，从而得到所述的产物(166mg,产率为30.7％)。MS(apci)m/z＝527.1(M+H)。
步骤C：(6R)-9-氟代-15,15-二甲基-2,11,16,20,21,24-六氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯-17-酮的制备：向溶于THF/MeOH(3mL/1mL)中的5-(2-(2-(3-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲基丁基)-5-氟代吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-甲酯(166 mg,0.315mmol)加入氢氧化锂(946μL,1.89mmol)。将反应管密封，并加热至70℃并持续3小时。然后在减压下干燥反应混合物，并加入HCl(4mL,4M，在二噁烷中)。将反应混合物搅拌1小时，然后除去溶剂，并在真空下将残余物干燥2小时。然后向残余物中加入DMF(8mL)、HOBT-H2O(96.5mg, 0.630mmol)、EDCI(121mg,0.630mmol)和三乙胺(159mg,1.58mmol)。将反应混合物在45℃下搅拌18小时，然后在真空下浓缩。通过二氧化硅柱色谱(使用5％MeOH/DCM洗脱)纯化残余物，从而得到题述化合物(60.0mg, 产率为48.3％)。MS(apci)m/z＝395.1(M+H)。
实施例38
(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,11,16,17,21,25,26,29-十氮杂己环[21.5.2.02,6.07,12.016,20.026,30]三十烷-1(29),7,9,11,17,19,23(30),24,27-九烯-22-酮
步骤A：1-(2-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)乙基)-1H-吡唑-5-胺的制备：向由2-(5-氨基-1H-吡唑-1-基)乙醇(2.07g,16.0mmol)和1H-咪唑(5.43g,79.8 mmol)在DMF(10mL)中形成的悬浮液中滴加叔丁基氯二苯基硅烷(4.96mL, 19.1mmol)。将反应物搅拌15小时。在减压下除去溶剂并将残余物用DCM (40mL)稀释。将有机层用1N HCl(10mL)、水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，然后浓缩从而得到所需的产物粗品(5.62g,96.4％yield)，该粗品在下一步骤中未经纯化而使用。
步骤B：(R)-N-(1-(2-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)乙基)-1H-吡唑-5-基)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：向由(R)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a] 嘧啶-3-羧酸(220mg,0.616mmol)在DMF(5mL)中形成的悬浮液中滴加 2,4,6-三氯苯甲酰氯化物(106μL,0.677mmol)和三乙胺(81.0mg,0.800 mmol)。将反应物搅拌2小时，并将1-(2-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)乙基)-1H-吡唑-5-胺(338mg,0.923mmol)加入到反应混合物中。将反应物加热至60℃并持续3小时，然后冷却至环境温度。在减压下除去溶剂并通过二氧化硅柱色谱纯化残余物，从而得到所需的产物(201mg,产率为46.3％)。MS (apci)m/z＝705.1(M+H)。
步骤C：(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,11,16,17,21,25,26,29-十氮杂己环[21.5.2.02,6.07,12.016,20.026,30]三十烷-1(29),7,9,11,17,19,23(30),24,27-九烯-22-酮的制备：将由(R)-N-(1-(2-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)乙基)-1H-吡唑-5- 基)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(201mg,0.285mmol)在溶于二噁烷(6mL)中的4M HCl中形成的悬浮液密封，并加热至100℃并持续4小时。将反应混合物冷却至环境温度，并在减压下浓缩。将残余物用DCM(20mL)稀释，并用饱和的NaHCO3(5mL)、水 (5mL)和盐水(5mL)洗涤。浓缩有机层从而得到(R)-5-(2-(5-氟代-2-羟基吡啶 -3-基)吡咯烷-1-基)-N-(1-(2-羟基乙基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺粗品，向该粗品中加入THF(20mL)、DEAD(53.9μL,0.342mmol)和三苯基膦(89.8mg,0.342mmol)。将反应混合物搅拌18小时，然后在真空下浓缩。通过二氧化硅柱色谱(使用10％MeOH/DCM洗脱)纯化残余物，从而得到所述化合物(1.8mg,产率为1.5％)。MS(apci)m/z＝435.3(M+H)。
实施例39
(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,11,19,21,25,26,29-七氮杂己环[21.5.2.02,6.07,12.015,20.026,30]三十烷-1(29),7,9,11,15(20),16,18,23(30),24,27-十烯-22-酮
步骤A：3-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)甲基)吡啶-2-胺的制备：向由(2- 氨基吡啶-3-基)甲醇(2.19g,17.6mmol)和1H-咪唑(6.00g,88.2mmol)在DMF (10mL)中形成的悬浮液中滴加叔丁基氯二苯基硅烷(5.49mL,21.2mmol)。将反应物搅拌15小时。在减压下除去溶剂并使用DCM(40mL)稀释残余物。将有机层用1N HCl(10mL)、水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，然后浓缩，从而得到产物粗品(6.03g,产率为94.3％)。MS(apci)m/z＝363.1(M+H)。
步骤B：(6R)-9-氟代-13-氧杂-2,11,19,21,25,26,29-七氮杂己环[21.5.2.02,6.07,12.015,20.026,30]三十烷-1(29),7,9,11,15(20),16,18,23(30),24,27-十烯-22-酮的制备：向由(R)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-羧酸(303mg,0.848mmol)在DMF(5mL)中形成的悬浮液中加入三乙胺(103mg,1.02mmol)，然后再滴加2,4,6-三氯苯甲酰氯化物(227mg, 0.933mmol)。将反应物搅拌2小时。加入3-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基) 甲基)吡啶-2-胺(369mg,1.02mmol)，并将反应混合物加热至60℃并持续5 小时。在减压下除去溶剂，并通过二氧化硅柱色谱(使用10％MeOH/DCM 洗脱)纯化残余物，从而得到(R)-N-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)甲基) 吡啶-2-基)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶 -3-甲酰胺，向该产物中加入THF(5mL)和TBAF(848μL,0.848mmol)。将反应混合物搅拌1小时，然后用饱和的NH4Cl(1mL)猝灭，接着在减压下浓缩，从而得到(R)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-N-(3-(羟基甲基)吡啶-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺粗品，向该粗品中加入HCl(4M溶于二噁烷中，5mL)。将反应混合物密封，并加热至100℃并持续4小时。将反应混合物冷去至环境温度，并在减压下浓缩。使用DCM(20mL)稀释残余物，并将有机层用饱和的NaHCO3(5mL)、水(5mL)和盐水(5mL)洗涤。将有机层在减压下浓缩，从而得到(R)-N-(3-(氯甲基)吡啶-2-基)-5-(2-(5-氟代-2- 羟基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺粗品，向该粗品中加入DMF(10mL)和Cs2CO3(276mg,0.848mmol)。将反应混合物加热至60℃并持续4小时，然后冷却至环境温度并在减压下浓缩。通过二氧化硅柱色谱 (使用10％MeOH/DCM洗脱)纯化残余物，从而得到题述化合物(8.0mg,产率为2.2％)。MS(apci)m/z＝432.3(M+H)。
实施例40
(6R)-9-氟代-13,13-二甲基-2,11,15,19,20,23-六氮杂戊环[15.5.2.17,11.02,6.020,24]二十五烷-1(23),7,9,17(24),18,21-六烯-16,25-二酮
步骤A：3-溴-2,2-二甲基丙-1-胺氢溴化物的制备：将由2-(3-溴-2,2-二甲基丙基)异二氢吲哚-1,3-二酮(1.00g,3.38mmol)在48％HBr水溶液(10mL) 中形成的混合物回流18小时。将反应混合物冷却至环境温度，并将形成的固体滤出。将滤液在减压下浓缩，从而得到材料粗品，将该粗品先与甲苯(3x) 共沸，然后与乙腈共沸，直到形成固体。将所述的材料粗品与乙醚一起磨碎，在减压下干燥，从而得到3-溴-2,2-二甲基丙-1-胺氢溴化物(0.816g,3.07mmol, 产率为91.0％)(通过1H-NMR和posAPCI-MS证实)。该分离产物未经进一步的纯化而直接使用。
步骤B：(R)-N-(3-溴-2,2-二甲基丙基)-5-(2-(5-氟代-2-羟基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：向由(R)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(制备B；150mg,0.420mmol)、 EDCI(88.5mg,0.462mmol)和HOBT-H2O(70.7mg,0.462mmol)在DMF(10 mL)中形成的溶液中加入3-溴-2,2-二甲基丙-1-胺氢溴化物(124mg,0.504 mmol)，然后加入三乙胺(55.2mg,0.546mmol)。将反应物搅拌18小时。在减压下除去溶剂，并通过二氧化硅柱色谱(使用50％EtOAc/己烷洗脱)纯化残余物，从而得到(R)-N-(3-溴-2,2-二甲基丙基)-5-(2-(5-氟代-2-甲氧基吡啶 -3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(180mg)，向该产物中加入 HCl(5mL,4M溶于二噁烷中)。将反应物密封，并加热至90℃并持续2小时。在减压下除去溶剂，并通过二氧化硅柱色谱(使用20％己烷/EtOAc洗脱) 纯化残余物，从而得到所需的产物(130mg,产率为63％)。
步骤C：(6R)-9-氟代-13,13-二甲基-2,11,15,19,20,23-六氮杂戊环[15.5.2.17,11.02,6.020,24]二十五烷-1(23),7,9,17(24),18,21-六烯-16,25-二酮的制备：向由(R)-N-(3-溴-2,2-二甲基丙基)-5-(2-(5-氟代-2-羟基吡啶-3-基)吡咯烷 -1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(30mg,0.061mmol)在THF(5mL)中形成的溶液中滴加2-甲基丙-2-醇钾(153μL,0.15mmol)。将反应物在50℃下加热 2小时。在减压下除去溶剂，并通过二氧化硅柱色谱(使用10％MeOH/DCM 洗脱)纯化残余物，从而得到题述化合物(15mg,产率为60％)。MS(apci) m/z＝411.0(M+H)。
实施例41
(4R,6R,15S)-9-氟代-4,15-二羟基-13-氧杂-2,17,21,22,25-五氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-七烯-18-酮
步骤A：N-((S)-3-氯-2-羟基丙基)-5-((R)-2-(5-氟代-2-羟基苯基)-4-羟基吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：在0℃下，向由(R)-5-(2-(5-氟代-2-羟基苯基)-4-羟基吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(制备D；0.0339 g,0.0946mmol)和HATU(0.0540g,0.142mmol)在DMF(0.5mL)中形成的悬浮液中加入(S)-1-氨基-3-氯丙-2-醇氢氯化物(实施例19，步骤A；0.0155g, 0.142mmol；根据在Org.Process Res.Dev.2003,vol.7,p.533中所述的方法制备)和N,N-二异丙基乙基胺(0.0494mL,0.284mmol)。将所得的混合物温暖至环境温度，并搅拌18小时。将反应混合物用EtOAc(10mL)稀释，用盐水洗涤，在MgSO4上干燥，过滤并在减压下浓缩，从而得到材料粗品，通过二氧化硅柱色谱(使用0-20％MeOH/DCM洗脱)纯化该粗品，从而得到 N-((S)-3-氯-2-羟基丙基)-5-((R)-2-(5-氟代-2-羟基苯基)-4-羟基吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(其为顺式和反式异构体的混合物，0.0407g,产率为82.2％,纯度为86％)。LC/MS(ES+APCI)m/z＝448.1(M-H)。
步骤B：(4R,6R,15S)-9-氟代-4,15-二羟基-13-氧杂-2,17,21,22,25-五氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-七烯-18-酮的制备：将由N-((S)-3-氯-2-羟基丙基)-5-((R)-2-(5-氟代-2-羟基苯基)-4-羟基吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(0.0407g,0.0778mmol)和Cs2CO3 (0.127g,0.389mmol)在DMF(3.6mL)中形成的混合物在85℃下加热30分钟。将反应混合物冷却至环境温度，并过滤。将滤液在减压下浓缩从而得到材料粗品，通过二氧化硅柱色谱(使用0-20％MeOH/EtOAc洗脱)纯化该粗品，从而得到产物粗品。采用手性柱色谱(Chiral Tech OD-H柱,20％EtOH溶于己烷中)纯化材料粗品。分离所述的材料(停留时间为大约21.8分钟)，从而得到题述化合物(0.0052g,产率为16.2％)。通过1H-NMR nOe试验证实题述化合物的立体化学。LC/MS(ES+APCI)m/z＝414.1(M+H)。
实施例41-B
(4R,6S,15S)-9-氟代-4,15-二羟基-13-氧杂-2,17,21,22,25-五氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-七烯-18-酮
在实施例41中所报告的手性分离过程中，由停留时间为大约30.6分钟的级分来分离题述化合物，从而得到5.4mg的化合物(产率为16.8％)，该化合物可以与对映异构体和/或一种或多种非对映异构体一起分离。通过1H-NMR nOe试验证实题述化合物的立体化学，LC/MS(ES+APCI)m/z＝ 414.1(M+H)。
实施例42
(4R,6R)-9-氟代-4-羟基-13-氧杂-2,17,21,22,25-五氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-七烯-18-酮
根据实施例41所述的方法，用3-氯丙-1-胺氢氯化物替代步骤A中的 (S)-1-氨基-3-氯丙-2-醇氢氯化物(13.8mg，产率为16％；Chiral Tech OD-H柱, 20％EtOH溶于己烷中，停留时间为大约17.2分钟)来制备题述化合物。通过1H-NMR nOe试验证实题述化合物的立体化学。LC/MS(ES+APCI)m/z＝ 398.1(M+H)。
实施例42-B
(4R,6S)-9-氟代-4-羟基-13-氧杂-2,17,21,22,25-五氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-七烯-18-酮
在实施例42中所报告的手性分离过程中，由停留时间为大约26.2分钟的级分来分离题述化合物(21.1mg,产率为24.5％)，该化合物可以与对映异构体和/或一种或多种非对映异构体一起分离。通过1H-NMR nOe试验证实题述化合物的立体化学。LC/MS(ES+APCI)m/z＝398.1(M+H)。
实施例43
(4R,6R)-9-氟代-4-羟基-13-氧杂-2,16,20,21,24-五氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯-17-酮
根据实施例41所述的方法，用2-氯乙基胺氢氯化物替代步骤A中的(S)-1-氨基-3-氯丙-2-醇氢氯化物来制备题述化合物。使用Chiral Tech OJ-H柱 (使用溶于己烷中的20％EtOH洗脱)，通过分离停留时间为大约15.7分钟的级分来纯化题述化合物(10.7mg,产率为14.2％)。通过1H-NMR nOe试验证实题述化合物的立体化学。LC/MS(ES+APCI)m/z＝384.1(M+H)。
实施例43-B
(4R,6S)-9-氟代-4-羟基-13-氧杂-2,16,20,21,24-五氮杂戊环[16.5.2.02,6.07,12.021,25]二十五烷-1(24),7,9,11,18(25),19,22-七烯-17-酮
在实施例43中所报告的手性分离过程中，通过分离停留时间为大约21.3 分钟的级分来分离题述化合物(15.9mg,产率为21.1％)，该化合物可以与对映异构体和/或一种或多种非对映异构体一起分离。通过1H-NMR nOe试验证实题述化合物的立体化学，LC/MS(ES+APCI)m/z＝384.1(M+H)。
实施例44
(4R,6R,15R)-9-氟代-4,15-二羟基-13-氧杂-2,17,21,22,25-五氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-七烯-18-酮
根据实施例41所述的方法，用(R)-1-氨基-3-氯丙-2-醇氢氯化物(根据实施例19步骤A中所述的方法、使用(R)-2-(氯甲基)环氧乙烷制备)替代步骤 A中的(S)-1-氨基-3-氯丙-2-醇氢氯化物来制备题述化合物。在二氧化硅凝胶柱(使用CH2Cl2至NH4OH:MeOH:CH2Cl2(0.5:5:95)(4轮循环)洗脱)上纯化材料粗品。收集包含早期洗脱的化合物的级分，得到12mg(产率为10.9％) 的所需材料。通过1H-NMR nOe试验证实题述化合物的立体化学。LC/MS (ES+APCI)m/z＝414.0(M+H)。
实施例44-B
(4R,6S,15R)-9-氟代-4,15-二羟基-13-氧杂-2,17,21,22,25-五氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-七烯-18-酮
在实施例44中所报告的纯化过程中，分离题述化合物。收集包含后期洗脱的化合物的级分，得到15mg(产率为13.69％)的题述化合物，该化合物可以与对映异构体和/或一种或多种非对映异构体一起分离。通过1H-NMR nOe试验证实题述化合物的立体化学；LC/MS(ES+APCI)m/z＝414.1 (M+H)。
实施例45
(15S)-4,4,9-三氟代-15-羟基-13-氧杂-2,17,21,22,25-五氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-七烯-18-酮的非对映异构体1和非对映异构体2
步骤A：(R)-5-(5-氟代-2-甲氧基苯基)吡咯烷-3-醇氢氯化物的制备：在0 ℃下，向由4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)吡咯烷 -1-羧酸(R)-叔丁酯(1.01g,2.37mmol)在CH2Cl2(10mL)中形成的溶液中加入溶于二噁烷(5.93mL,23.7mmol)中的4M HCl。将所得的混合物温暖至环境温度，并搅拌8小时。在减压下浓缩反应混合物，从而得到材料粗品，将该粗品与乙醚一起磨碎。过滤所得的固体，并在减压下干燥，从而得到(R)-5-(5- 氟代-2-甲氧基苯基)吡咯烷-3-醇氢氯化物(0.577g,2.33mmol,产率为98.2 ％)。MS(APCI)m/z＝212.0(M+H)。
步骤B：5-(2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)-4-羟基吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯的制备：在0℃下，向由5-羟基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(0.541g,2.61mmol)和BOP试剂(1.57g,3.56mmol)在DMF/CH2Cl2(3 mL/3mL)中形成的悬浮液中加入(R)-5-(5-氟代-2-甲氧基苯基)吡咯烷-3-醇氢氯化物(0.588g,2.37mmol)，再加入DIEA(1.66mL,9.50mmol)。将所得的混合物温暖至环境温度，并搅拌18小时。在减压下浓缩反应混合物，从而得到材料粗品，将该粗品用EtOAc(30mL)再次稀释。将有机层先用饱和的 NaHCO3水溶液、再用盐水洗涤，在MgSO4上干燥，过滤并在减压下浓缩，从而得到材料粗品，通过二氧化硅凝胶快速柱色谱(使用CH2Cl2至溶于 CH2Cl2中的5％MeOH洗脱)纯化该粗品，从而得到5-(2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)-4-羟基吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(0.735g,1.84 mmol,产率为77.3％)。LC/MS(ES+APCI)m/z＝401.1(M+H)。
步骤C：5-(2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)-4-氧代吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯的制备：在0℃下，向由Dess-Martin氧化剂(0.233g,0.549mmol) 在CH2Cl2(2.2mL)中形成的悬浮液中加入由5-(2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)-4- 羟基吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(R)-乙酯(0.200g,0.499mmol)在 CH2Cl2(1.5mL)中形成的溶液。将所得的混合物温暖至环境温度，并搅拌18 小时。将反应混合物冷却至0℃，并用包含Na2S2O3(0.608g,3.85mmol)的饱和NaHCO3水溶液(5mL)猝灭。将所得的混合物温暖至环境温度，并搅拌10 分钟。分离有机层，先用饱和的NaHCO3水溶液(10mL)、再用盐水(10mL) 洗涤，在MgSO4上干燥，过滤并在减压下浓缩，从而得到5-(2-(5-氟代-2- 甲氧基苯基)-4-氧代吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(0.164g,产率为82.4％)。LC/MS(ES+APCI)m/z＝399.1(M+H)。
步骤D：5-(4,4-二氟代-2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯的制备：向由5-(2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)-4-氧代吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(0.162g,0.407mmol)在CH2Cl2(3mL) 中形成的溶液中先加入双(2-甲氧基乙基)氨基硫三氟化物(0.134mL,0.691 mmol)溶液，再加入EtOH(0.00475mL,0.0813mmol)。将所得的混合物在环境温度下搅拌18小时。将反应混合物倒入饱和的NaHCO3水溶液(6mL)中，并用CH2Cl2(2x 10mL)萃取。将合并的有机层在MgSO4上干燥，过滤并在减压下浓缩，从而得到材料粗品，通过二氧化硅柱色谱(使用0-50％EtOAc/ 己烷洗脱)纯化该粗品，从而得到5-(4,4-二氟代-2-(5-氟代-2-甲氧基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(0.126g,产率为65.6％)。MS(APCI) m/z＝420.9(M+H)。
步骤E：5-(4,4-二氟代-2-(5-氟代-2-羟基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸的制备：在0℃下，向由5-(4,4-二氟代-2-(5-氟代-2-甲氧基苯基) 吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(0.126g,0.267mmol)在CH2Cl2 (1.3mL)中形成的溶液中加入溶于CH2Cl2(1.50mL,1.50mmol)中的1M BBr3。将所得的混合物温暖至环境温度，并搅拌18小时。将反应混合物用 CH2Cl2(5mL)稀释，并倒入冰与饱和的NaHCO3水溶液(3mL)的混合物中。然后，用1N HCl水溶液将水层酸化至大约pH3。用CH2Cl2(3x 10mL)萃取水层。将合并的有机层在MgSO4上干燥，过滤并在减压下浓缩，从而得到 5-(4,4-二氟代-2-(5-氟代-2-羟基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯和5-(4,4-二氟代-2-(5-氟代-2-羟基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶 -3-羧酸的混合物。在环境温度下，将该混合物溶于MeOH-THF(0.25mL/0.75 mL)中，并加入2N LiOH水溶液(0.667mL,1.33mmol)。将所得的混合物在 50℃下加热24小时。将反应混合物冷却至环境温度，并在减压下浓缩，从而除去有机溶剂。将残余物用5mL EtOAc稀释，并在搅拌条件下用6N HCl 水溶液酸化至pH3至4。分离有机层，并用EtOAc(2x 5mL)萃取酸性的水层。将合并的有机层在MgSO4上干燥，过滤并在减压下浓缩，从而得到5-(4,4- 二氟代-2-(5-氟代-2-羟基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(0.094g, 产率为93.1％)。MS(APCI)m/z＝378.9(M+H)。
步骤F：N-((S)-3-氯-2-羟基丙基)-5-(4,4-二氟代-2-(5-氟代-2-羟基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备：在环境温度下，向由5-(4,4- 二氟代-2-(5-氟代-2-羟基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(0.047g, 0.124mmol)和HOBT(0.0252g,0.186mmol)在DMF(1mL)中形成的混合物中加入EDCI(0.0357g,0.186mmol)。将所得的混合物搅拌1小时。在环境温度下，向该混合物中先加入(S)-1-氨基-3-氯丙-2-醇氢氯化物(实施例19,步骤 A；0.0218g,0.149mmol)，再加入DIEA(0.0656mL,0.373mmol)。将所得的混合物搅拌48小时。将反应混合物用EtOAc(10mL)稀释，并将有机层用盐水和水的1:1混合物洗涤。分离水层，并用EtOAc(2x 10mL)萃取。将合并的有机层用盐水和水的1:1混合物(15mL)洗涤，再与之前得到的有机层合并。将有机层在MgSO4上干燥，过滤并在减压下浓缩，从而得到N-((S)-3- 氯-2-羟基丙基)-5-(4,4-二氟代-2-(5-氟代-2-羟基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(0.061g,产率为105％)。LC/MS(ES+APCI)m/z＝468.1 (M-H)。
步骤G：(15S)-4,4,9-三氟代-15-羟基-13-氧杂-2,17,21,22,25-五氮杂戊环[17.5.2.02,6.07,12.022,26]二十六烷-1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-七烯-18-酮的非对映异构体1和2的制备：将由N-((S)-3-氯-2-羟基丙基)-5-(4,4-二氟代-2-(5- 氟代-2-羟基苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(0.060g,0.128 mmol)和Cs2CO3(0.208g,0.639mmol)在DMF(6.4mL)中形成的混合物在85 ℃下加热30分钟。将反应混合物冷却至环境温度并过滤。将滤液在减压下浓缩，从而得到材料粗品，通过二氧化硅凝胶快速柱色谱(CH2Cl2至 NH4OH:MeOH:CH2Cl2＝0.5:5:95)纯化该粗品，从而得到非对映异构体的混合物。通过手性柱色谱(Chiral Tech OD-H柱，20％EtOH溶于己烷中)进一步纯化经分离的非对映异构体。分离停留时间为大约17.1分钟的级分，从而得到命名为非对映异构体1的题述化合物(11mg,产率为20％)；MS(APCI) m/z＝434.2(M+H)。分离停留时间为大约21.0分钟的级分，从而得到命名为非对映异构体2的题述化合物(13mg,产率为24％)；MS(APCI)m/z＝434.2 (M+H)。
本申请涉及以下方面：
1.一种通式I所示的化合物或其可药用的盐：
其中：
环A选自具有以下结构的环A-1,A-2和A-3：
其中波浪线线标记的1表示环A与环B的链接点，而波浪线标记的2 表示环A与W的链接点；
X为N或CH；
Y为H或F；
R1为H,(1-3C)烷氧基或卤素；
环B选自具有以下结构的环B-1和B-2：
其中波浪线标记的3表示与环A的链接点，而波浪线标记的4表示与通式I所示的吡唑并[1,5-a]嘧啶环的链接点；
W为O,NH或CH2，其中当环A为A-2时，则W为CH2；
m为0,1或2；
D为碳；R2和R2a独立地为H,F,(1-3C)烷基或OH(前提条件是R2和R2a不均为OH)；并且R3和R3a独立地为H,(1-3C)烷基或羟基(1-3C)烷基；或者
D为碳或氮，R2和R3不存在并且R2a和R3a与它们所连接的原子一起形成具有1-2个环杂原子的5-6元杂芳环；
Z为*-NR4aC(＝O)-,*-ONHC(＝O)-,*-NR4bCH2-或*-OC(＝O)-，其中星号表示Z与具有R3的碳的链接点；
R4a为H,(1-6C)烷基,氟代(1-6C)烷基,二氟代(1-6C)烷基,三氟代(1-6C) 烷基,羟基(1-6C烷基)或二羟基(2-6C烷基)；
R4b为H,(1-6C)烷基,氟代(1-6C)烷基,二氟代(1-6C)烷基,三氟代(1-6C) 烷基,羟基(1-6C烷基),二羟基(2-6C烷基),(1-6C烷基)C(O)-,(3-6C环烷基)C(O)-,Ar1C(O)-,HOCH2C(O)-,(1-6C烷基)磺酰基,(3-6C环烷基)磺酰基, Ar2(SO2)-,HO2CCH2-或(1-6C烷基)NH(CO)-；
Ar1为可任选地被一个或多个取代基取代的苯基，其中所述的取代基选自卤素,(1-6C)烷基和(1-6C)烷氧基；
Ar2为可任选地被一个或多个取代基取代的苯基，其中所述的取代基选自卤素,(1-6C)烷基和(1-6C)烷氧基；以及
R5和R6独立地为H,卤素,OH,(1-6C)烷基和羟基(1-6C)烷基。
2.根据1所述的具有以下通式的化合物或其可药用的盐：
其中：
环A选自具有以下结构的环A-1,A-2和A-3：
其中波浪线标记的1表示环A与通式I所示的吡咯烷环的链接点，而波浪线标记的2表示环A与W的链接点；
X为N或CH；
Y为H或F；
R1为H,(1-3C)烷氧基或卤素；
W为O,NH或CH2，其中当环A为A-2时，则W为CH2；
m为0,1或2；
R2和R2a独立地为H,F或OH，前提条件是R2和R2a不均为OH；
R3为H,(1-3C)烷基或羟基(1-3C)烷基；
Z为*-NR4aC(＝O)-,*-ONHC(＝O)-,*-NR4bCH2-或*-OC(＝O)-，其中星号表示Z与具有R3的碳的链接点；
R4a为H,(1-6C)烷基,氟代(1-6C)烷基,二氟代(1-6C)烷基,三氟代(1-6C) 烷基,羟基(1-6C烷基)或二羟基(2-6C烷基)；
R4b为H,(1-6C)烷基,氟代(1-6C)烷基,二氟代(1-6C)烷基,三氟代(1-6C) 烷基,羟基(1-6C烷基),二羟基(2-6C烷基),(1-6C烷基)C(O)-,(3-6C环烷基)C(O)-,Ar1C(O)-,HOCH2C(O)-,(1-6C烷基)磺酰基,(3-6C环烷基)磺酰基, Ar2(SO2)-,HO2CCH2-或(1-6C烷基)NH(CO)-；
Ar1为可任选地被一个或多个取代基取代的苯基，其中所述的取代基独立地选自卤素,(1-6C)烷基和(1-6C)烷氧基；
Ar2为可任选地被一个或多个取代基取代的苯基，其中所述的取代基独立地选自卤素,(1-6C)烷基和(1-6C)烷氧基；以及
R5和R6独立地为H,卤素,OH,(1-6C)烷基或羟基(1-6C)烷基。
3.根据1或2所述的化合物，其中环A为具有以下结构的环A-1：
4.根据3所述的化合物，其中X为CH。
5.根据3所述的化合物，其中X为N。
6.根据1或2所述的化合物，其中环A为具有以下结构的环A-3：
7.根据1-6的任意一项中所述的化合物，其中W为O。
8.根据1-6的任意一项中所述的化合物，其中W为NH。
9.根据1-6的任意一项中所述的化合物，其中W为CH。
10.根据1或2所述的化合物，其中环A为具有以下结构的环A-2：
11.根据1-10的任意一项中所述的化合物，其中Y为F。
12.根据1-10的任意一项中所述的化合物，其中Y为H。
13.根据1-12的任意一项中所述的化合物，其中R1为H。
14.根据1-12的任意一项中所述的化合物，其中R1为(1-3C)烷基或(1-3C) 烷氧基。
15.根据14所述的化合物，其中R1为甲基或甲氧基。
16.根据1-12的任意一项中所述的化合物，其中R1为卤素。
17.根据16所述的化合物，其中R1为氟。
18.根据1-17的任意一项中所述的化合物，其中Z为*-NR4aC(＝O)-。
19.根据18所述的化合物，其中R4a为氢。
20.根据18所述的化合物，其中R4a为(1-6C)烷基、氟代(1-6C)烷基、二氟代(1-6C)烷基、三氟代(1-6C)烷基、羟基(1-6C烷基)或二羟基(2-6C烷基)。
21.根据20所述的化合物，其中R4a为(1-6C)烷基。
22.根据1-17的任意一项中所述的化合物，其中Z为*-ONHC(＝O)-。
23.根据1-17的任意一项中所述的化合物，其中Z为*-NR4bCH2-。
24.根据23所述的化合物，其中R4b为H。
25.根据23所述的化合物，其中R4b选自(1-6C)烷基、氟代(1-6C)烷基、二氟代(1-6C)烷基和三氟代(1-6C)烷基。
26.根据25所述的化合物，其中R4b为(1-6C)烷基。
27.根据23所述的化合物，其中R4b选自(1-6C烷基)C(O)-、(3-6C环烷基)C(O)-、Ar1C(O)-和HOCH2C(O)-。
28.根据27所述的化合物，其中R4b为(1-6C烷基)C(O)-。
29.根据23所述的化合物，其中R4b选自(1-6C烷基)磺酰基、(3-6C环烷基)磺酰基和Ar2(SO2)-。
30.根据29所述的化合物，其中R4b为(1-6C烷基)磺酰基。
31.根据23所述的化合物，其中R4b为HO2CCH2-。
32.根据23所述的化合物，其中R4b为(1-6C烷基)NH(CO)-。
33.根据1或3-32的任意一项中所述的化合物，其中D为碳；R2和R2a独立地为H,F,(1-3C)烷基或OH(前提条件是R2和R2a不均为OH)；并且R3和R3a独立地为H,(1-3C)烷基或羟基(1-3C)烷基。
34.根据1-33的任意一项中所述的化合物，其中R2和R2a均为氢。
35.根据1-33的任意一项中所述的化合物，其中R2和R2a均为氟。
36.根据1-33的任意一项中所述的化合物，其中R2为氢，并且R2a为氟。
37.根据1-33的任意一项中所述的化合物，其中R2为氢，并且R2a为 OH。
38.根据1或3-33所述的化合物，其中R2为氢和R2a为甲基，或者R2和R2a均为甲基。
39.根据1或3-33所述的化合物，其中：
R3和R3a为H；或
R3a为甲基并且R3为H；或
R3和R3a均为甲基。
40.根据1或3-32所述的化合物，其中D为碳或氮，R2和R3不存在并且R2a和R3a与它们所连接的原子一起形成具有1-2个环杂原子的5-6元杂芳环。
41.根据1-40的任意一项中所述的化合物，其中环B为环B-1；并且 R5和R6独立地为H,F,OH,甲基,乙基,HOCH2-或HOCH2CH2-；其中环B-1 如下所示：
42.根据41所述的化合物，其中R5为氢；并且R6为H,F,OH,甲基,乙基,HOCH2-或HOCH2CH2-。
43.根据42所述的化合物，其中R6为H。
44.根据1或3-40所述的化合物，其中环B为环B-2：
45.根据1-44的任意一项中所述的化合物，其中m为0。
46.根据1-44的任意一项中所述的化合物，其中m为1。
47.根据1-44的任意一项中所述的化合物，其中m为2。
48.一种根据1-47的任意一项中所述的具有图1-a所示的绝对构型的化合物：
49.一种根据1-47的任意一项中所述的具有图1-b所示的绝对构型的化合物：
50.一种药物组合物，其包含1至49的任意一项中定义的通式I所示的化合物、或其可药用的盐；以及可药用的稀释剂或载体。
51.一种用于治疗疾病或紊乱的方法，该方法包括向所述的哺乳动物给药治疗有效量的、1至49的任意一项中定义的通式I所示的化合物或其可药用的盐，其中所述的疾病或紊乱选自哺乳动物的疼痛、癌症、炎症、神经退行性疾病或锥虫感染。
52.根据51所述的方法，其中所述的疾病或紊乱为疼痛。
53.一种用于治疗疼痛、癌症、炎症、神经退行性疾病或锥虫感染的、根据1至49的任意一项中定义的通式I所示的化合物或其可药用的盐。
54.一种用于制备1所示的化合物的方法，其包括：
(a)对于通式I所示的化合物而言，其中Z为*-NHC(＝O)-，而环A,环 B,W,D,R2,R2a,R3,R3a和m如通式I所定义；在偶联试剂和碱存在的条件下，在P1为H或羧基保护基的情况下，使具有通式II所示的相应化合物环化；或者
(b)对于通式I所示的化合物而言，其中W为O，环A为通式A-1，X 为N，而环B,D,Z,Y,R1,R2,R2a,R3,R3a和m如通式I所定义；
在碱存在的条件下，使具有通式III所示的相应化合物环化，其中n为 1,2,3或4，而L1为离去基团或原子；或者
(c)对于通式I所示的化合物而言，其中W为CH2，环A为通式A-2，而环B,D,Z,Y,R1,R2,R2a,R3,R3a和m如通式I所定义；
在碱存在的条件下，在L2为离去基团或原子的情况下，使具有通式IV 所示的相应化合物环化；或者
(d)对于通式I所示的化合物而言，其中Z为*-NHC(＝O)-，而环A,环 B,W,D,R2,R2a,R3,R3a和m如通式I所定义；在碱和偶联试剂存在的条件下，使具有通式V所示的相应化合物环化；或者
(e)对于通式I所示的化合物而言，其中Z为*-NHCH2-，而环A,环B,W, D,R2,R2a,R3,R3a和m如通式I所定义；在还原剂存在的条件下，使具有通式VI所示的相应化合物环化；或者
(f)对于通式I所示的化合物而言，其中Z为*-NHCH2-，而环A,环B,W, D,R2,R2a,R3,R3a和m如通式I所定义；在三苯基膦存在的条件下，使具有通式VII所示的相应化合物环化；或者
(g)对于通式I所示的化合物而言，其中环A,环B,W,D,m,R2,R2a,R3和R3a如通式I所定义，Z为*-NR4bCH2-，而R4b为(1-6C烷基)C(O)-,(3-6C 环烷基)C(O)-,Ar1C(O)-,HOCH2C(O)-,(1-6C烷基)磺酰基,(3-6C环烷基)磺酰基,(1-6C烷基)磺酰基,(3-6C环烷基)磺酰基或Ar2(SO2)-；在碱存在的条件下，使用具有以下通式的试剂使具有通式VIII所示的相应化合物偶联，其中所述通式分别为(1-6C烷基)C(O)-L3,(3-6C环烷基)C(O)-L3,Ar1C(O)-L3, HOCH2C(O)-L3,(1-6C烷基)(SO2)-L3,(3-6C环烷基)(SO2)-L3或Ar2(SO2)-L3，其中L3为离去原子；或者
(h)对于通式I所示的化合物而言，其中环A,环B,W,D,R2,R2a,R3,R3a和m如通式I所定义，Z为*-NR4bCH2-，而R4b为(1-6C烷基)NH(CO)-；在碱存在的条件下，使用具有通式(1-6C烷基)N＝C＝O的试剂使具有通式VIII 所示的相应化合物反应；或者
(i)对于通式I所示的化合物而言，其中R2为F，R2a为H，而环A,环 B,Z,W,D,R3,R3a和m如通式I所定义；使用氟化试剂使具有通式IX所示的相应化合物反应；或者
(j)对于通式I所示的化合物而言，其中W为O，环A为通式A-1，X 为CH，而Y,R1,D,环B,Z,R2,R2a,R3和m如通式I所定义；
在碱存在的条件下，使具有通式X所示的相应化合物环化，其中n为 1,2,3或4，而L1为离去基团或原子；并且
可任选地，除去任何保护基团，以及可任选地制备其盐。
55.根据54所述的方法，其中：
环B为具有以下结构的环B-1：
D为碳；
R2和R2a独立地为H,F,(1-3C)烷基或OH，前提条件是R2和R2a不均为OH；以及
R3和R3a独立地为H,(1-3C)烷基或羟基(1-3C)烷基。