一种抗皮肤癣菌的特异性卵黄抗体及其制备方法和应用与流程

文档序号:11124317阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种抗皮肤癣菌的特异性卵黄抗体的制备方法,其特征在于包括以下步骤:

(1)选取红色毛癣菌或须癣毛癣菌,先固体培养一周后采用液体培养;

(2)液体培养后进行冲洗和离心,得到的菌丝经过液氮研磨,超声破碎,离心得到细胞壁;利用冷碱抽提法提取真菌的细胞浆蛋白,离心得到上清液;将上清液透析后获得皮肤癣菌细胞壁蛋白抗原;

(3)选取20周龄产蛋母鸡;将皮肤癣菌细胞壁蛋白抗原用PBS缓冲液稀释成1mg/ml的皮肤癣菌细胞壁蛋白抗原溶液;将皮肤癣菌细胞壁蛋白抗原溶液与弗氏完全佐剂按照体积比1:1混合乳化,采用皮下多点注射的免疫方式对每只母鸡注射0.5ml;首次免疫两周后进行第一次加强免疫,用等体积的弗氏不完全佐剂与皮肤癣菌细胞壁蛋白抗原溶液混合乳化,采用皮下多点注射的免疫方式对每只母鸡注射0.5ml,以后每隔15天进行加强免疫一次,一共加强免疫4次,从第一次加强免疫开始收集免疫鸡蛋,并存放于4℃;

(4)将获得的免疫鸡蛋用酒精消毒,破壳收集蛋黄,与冻存蒸馏水按照体积比为1:9混匀,离心获得水溶性成分,采用PEG6000进行沉淀获得卵黄抗体干粉,于-20℃保存。

2.根据权利要求1所述的一种抗皮肤癣菌的特异性卵黄抗体的制备方法,其特征在于:步骤(1)所述固体培养是采用SDA固体培养基;所述液体培养基是采用SDA液体培养基。

3.根据权利要求1所述的一种抗皮肤癣菌的特异性卵黄抗体的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述液氮研磨的过程中加入10mM EDTA,10mM PMSF抑制蛋白酶。

4.一种根据权利要求1-3任一项所述的制备方法制备得到的抗皮肤癣菌的特异性卵黄抗体。

5.根据权利要求4所述的抗皮肤癣菌的特异性卵黄抗体在制备预防和治疗皮肤癣疾病的软膏、喷剂、洗手液或湿纸巾中的应用。

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