一种提高胆盐水解酶分泌效率的方法与流程

文档序号:12411718阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种提高胆盐水解酶分泌效率的方法,其特征在于,在产胆盐水解酶的毕赤酵母的发酵培养基中添加80~120mg/L的粟精胺、30~60mg/L Fe2+,并将所述毕赤酵母在20~28℃,200~220rpm发酵24~48h。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述产胆盐水解酶的毕赤酵母是以pichia pastoris GS115为宿主,以pPIC9K为载体,表达SEQ ID NO.1所示基因的重组毕赤酵母。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述重组毕赤酵母还具有α-MF信号肽。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述发酵是以按体积比1-5%的接种量将毕赤酵母接种至发酵培养基中,20~28℃,200~220rpm下进行发酵。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述发酵培养基配方包括:蛋白胨20g/L,酵母粉10g/L,7-10%甲醇,YNB 13.4g/L。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述发酵前还进行活化。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述活化是挑取毕赤酵母单菌落,接种至BMGY培养基中,30℃,200~220r/min培养16-24h。

8.权利要求1所述的方法在制备含胆盐水解酶的产品中的应用。

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