本发明属于鱼皮胶原蛋白技术领域，具体涉及一种含有绿茶提取物的鱼皮胶原蛋白抗氧化膜的制备方法。
背景技术：
胶原蛋白/明胶是可食性包装应用最广泛的动物蛋白质，具有良好的成膜性。但多数来源于猪、牛的皮和骨，近年来由于疯牛病的恐慌以及穆斯林信仰者的需求，寻找这类胶原蛋白替代物的研究迫在眉睫。鱼皮胶原蛋白不受宗教信仰的限制，是一种丰富、安全的蛋白资源。福建省是海洋与渔业大省，渔业资源丰富，水产品人均居全国第一。2008年福建省渔业经济增加值占全省GDP的5.65％，水产品总产量554.2万吨，水产品加工产量197.20万吨。但是，目前水产品加工仍以粗加工为主，精深加工产品的比例不高。水产品加工后的废弃物(比例约占60％，鱼鳞、鱼皮、鱼头等)尚未得到充分的利用，如何充分利用水产加工废弃物并研究其在医学、食品上的应用，是水产品下脚料研究的当务之急与发展趋势。鱼皮中含有丰富的蛋白质，胶原蛋白占粗蛋白的80％左右。因此，鱼皮可作为开发胶原蛋白的新资源。
氧化作用是导致食品腐败主要的原因之一，添加抗氧化剂以制备具有抗氧化性能的包装材料越来越受到重视。近年来，一些人工合成抗氧化剂开始应用于食品包装膜材料中。但是，由于合成抗氧化剂长期使用的安全性已经受到质疑，人们迫切需要天然无毒抗氧化剂的出现。绿茶是一种未发酵茶，它较多的保留了鲜叶内的天然物质及活性成分。茶多酚是茶叶中含有的一类主要活性成分，占茶叶干重的18-36％。
茶叶中主要含有茶多酚类、茶色素、茶多糖、茶蛋白和茶氨酸等有效成分。至今，已被现代科学所证实的茶的医疗、保健功效主要有：抗肿瘤、抗突变、抗衰老、抗疲劳、抗辐射、抗龋齿、消除重金属毒害、代谢调节和生理调节、美容、抑制有害微生物、增强记忆及改善大脑功能等。茶多酚是含有多个羟基的酚类物质，是一种天然、高效、安全的抗氧化剂，它还具有抗衰老、抗癌、抗辐射、降血脂、降血糖、降血压、抗菌等一系列重要作用。作为多酚类化合物的良好来源，绿茶提取物有望作为一种天然抗氧化剂而复合于食品包装膜中。但未见有报道将绿茶提取物与鱼皮胶原蛋白共混制备抗氧化膜。绿茶中的多酚性成分对人体具有卓越的保健功能，其中EGCG一度成为关注的核心。然而现有研究已经证实，EGCG的表型异构体GCG，在某些方面表现出来的生理活性要强于EGCG，例如抗过敏、对环氧酶和酪氨酸酶等许多酶的抑制作用、清除自由基活性等方面，可见，茶叶中的GCG有一定的科研开发价值。但是，茶鲜叶中基本不含有GCG，成品绿茶中GCG含量也只有0.1-0.8％左右。
技术实现要素：
本发明提出一种含有绿茶提取物的鱼皮胶原蛋白抗氧化膜的制备方法，该方法制备的抗氧化膜性能良好且具有防止食品氧化腐败的功能，从而达到食品保鲜及延长货架期的效果，并且茶多酚中GCG的含量远高于传统提取方法。
本发明的技术方案是这样实现的：
一种含有绿茶提取物的鱼皮胶原蛋白抗氧化膜的制备方法，包括以下步骤：
1)取新鲜茶叶进行去杂处理，去除老叶、老梗和非茶杂质，然后用液氮对新鲜茶叶进行冷冻处理，处理后立即进行粉碎；
2)将粉碎后的茶叶立即与温度为80℃～100℃一定量的热水混合，其足以使茶叶和水的混合物中二者的重量比例为1∶0.1至1∶30；
3)将茶叶和水混合物中的再次粉碎，并保持混合物有一定的粉碎时间，该时间足以使茶叶细胞中的细胞内物质释放入水中，得到水提取物成分和茶叶残留物成分，从水提取物中除去茶叶残留物成分，其中在整个提取过程中的温度控制在80℃～100℃；
4)趁热向水提取物中加入一定量鱼皮胶原蛋白粉末溶解，并搅拌均匀，再加入适量甘油作为增塑剂，搅拌均匀，静置脱气，得绿茶提取物的胶原蛋白铸膜液，铺展成膜制得含有绿茶提取物的鱼皮胶原蛋白抗氧化膜。
进一步，其中水提取物干燥至粉末形式。
进一步，向提取物中加入一种或多种赋形剂。
进一步，所述赋形剂为乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素或者麦芽糊精。
进一步，所得到的绿茶提取物含有0.8％至6.0％w/w的天然绿茶叶绿素和20％w/w至96％w/w的茶多酚。
进一步，其中绿茶提取物中EGCG的含量为1％w/w至75％w/w，GCG的含量为1.5％w/w至6％。
进一步，所述步骤4)成膜具体条件为：每次移取6ml绿茶提取物的胶原蛋白铸膜液铺展到120mm×80mm×2mm有机玻璃框上成膜，成膜温度为20-25℃，成膜时间为20-24h。
当确定混合物中茶叶和水的适当比例后，将混合物中的茶叶粉碎以达到使茶茶叶细胞破裂的目的，保持混合物有足够长的粉碎时间以使茶叶细胞内的物质释放入水中，得到一种水提取物和茶叶残留物的混合物。应当理解的是任何能够使茶茶叶细胞破裂的物理方法均可被采用，例如均质化、粉碎、磨碎、碾碎、剁碎、捣碎、切碎、撕裂等等。本领域普通技术人员能够知道很多种适于将茶叶和水混合物中的茶茶叶粉碎的特定装置，例如均质机、胶体磨、石磨、球体磨或气流粉碎机。根据本发明方法，茶叶和水混合物中的茶叶可进行各种程度的粉碎。然而，在一个方面，至少占绿茶茶叶细胞总数约75％的绿茶茶叶细胞破裂。在另一个方面，至少约80％至约99％的绿茶茶叶细胞破裂。在进一步的方面，至少约99％的绿茶茶叶细胞破裂。
一旦水提取物中获得了理想含量的细胞内物质，则可从水提取物中除去或分离树叶残留物，然后收集得到水提取物。本领域普通技术人员能够知晓很多种物理方法可将树叶残留物从水提取物中分离出来，例如离心法、超速离心、过滤、超滤等，其不需要升高温度或使用任何化学试剂例如有机溶剂等。
本发明的有益效果：
1、本发明提取之前先用液氮对茶叶进行迅速冷冻处理，只有这样，从提取物制备出产品才能够获得和保持绿茶植物良好的天然色泽、新鲜的气味和口感、及良好的感官特性。另外，才能够保持多酚的高浓度，并且所得到的提取物可溶于热水和冷水。
2、将冷冻处理后的茶叶迅速放入80℃～100℃的热水中，使得提取茶叶中的EGCG发生异构化为GCG，与传统加工方法相比，制得绿茶中的GCG提高了2～8倍。
3、本发明制备的胶原蛋白-绿茶提取物抗氧化膜在200-280nm波长范围内紫外线透光率为0，因此，利用胶原蛋白-绿茶提取物抗氧化膜包装可以抑制由于紫外线引起的食品脂质氧化。
具体实施方式
实施例1
一种含有绿茶提取物的鱼皮胶原蛋白抗氧化膜的制备方法，包括以下步骤：
1)取新鲜茶叶进行去杂处理，去除老叶、老梗和非茶杂质，然后用液氮对新鲜茶叶进行冷冻处理，处理后立即进行粉碎；
2)将粉碎后的茶叶立即与温度为80℃一定量的热水混合，其足以使茶叶和水的混合物中二者的重量比例为1∶20；
3)将茶叶和水混合物中的再次粉碎，并保持混合物有一定的粉碎时间，该时间足以使茶叶细胞中的细胞内物质释放入水中，得到水提取物成分和茶叶残留物成分，从水提取物中除去茶叶残留物成分，并加入配方量的麦芽糊精，其中在整个提取过程中的温度控制在80℃；
4)趁热向水提取物中加入一定量鱼皮胶原蛋白粉末溶解(50ml水提取物中加入4g鱼皮胶原蛋白粉末)，并搅拌均匀，再加入0.5g甘油作为增塑剂，搅拌均匀，静置脱气，得绿茶提取物的胶原蛋白铸膜液，每次移取6ml绿茶提取物的胶原蛋白铸膜液铺展到120mm×80mm×2mm有机玻璃框上成膜，成膜温度为20℃，成膜时间为24h，制得含有绿茶提取物的鱼皮胶原蛋白抗氧化膜。
本实施中，所得到的绿茶提取物含有5.0％w/w的天然绿茶叶绿素和90％w/w的茶多酚。其中绿茶提取物中EGCG的含量为70％w/w，GCG的含量为5％。
实施例2
一种含有绿茶提取物的鱼皮胶原蛋白抗氧化膜的制备方法，包括以下步骤：
1)取新鲜茶叶进行去杂处理，去除老叶、老梗和非茶杂质，然后用液氮对新鲜茶叶进行冷冻处理，处理后立即进行粉碎；
2)将粉碎后的茶叶立即与温度为90℃一定量的热水混合，其足以使茶叶和水的混合物中二者的重量比例为1∶15；
3)将茶叶和水混合物中的再次粉碎，并保持混合物有一定的粉碎时间，该时间足以使茶叶细胞中的细胞内物质释放入水中，得到水提取物成分和茶叶残留物成分，从水提取物中除去茶叶残留物成分，并加入配方量的羟丙基纤维素，其中在整个提取过程中的温度控制在90℃；
4)趁热向水提取物中加入一定量鱼皮胶原蛋白粉末溶解(50ml水提取物中加入3g鱼皮胶原蛋白粉末)，并搅拌均匀，再加入0.6g甘油作为增塑剂，搅拌均匀，静置脱气，得绿茶提取物的胶原蛋白铸膜液，每次移取6ml绿茶提取物的胶原蛋白铸膜液铺展到120mm×80mm×2mm有机玻璃框上成膜，成膜温度为23℃，成膜时间为22h，制得含有绿茶提取物的鱼皮胶原蛋白抗氧化膜。
本实施中，所得到的绿茶提取物含有3.0％w/w的天然绿茶叶绿素和85％w/w的茶多酚。其中绿茶提取物中EGCG的含量为60％w/w，GCG的含量为3％。
实施例3
一种含有绿茶提取物的鱼皮胶原蛋白抗氧化膜的制备方法，包括以下步骤：
1)取新鲜茶叶进行去杂处理，去除老叶、老梗和非茶杂质，然后用液氮对新鲜茶叶进行冷冻处理，处理后立即进行粉碎；
2)将粉碎后的茶叶立即与温度为100℃一定量的热水混合，其足以使茶叶和水的混合物中二者的重量比例为1∶15；
3)将茶叶和水混合物中的再次粉碎，并保持混合物有一定的粉碎时间，该时间足以使茶叶细胞中的细胞内物质释放入水中，得到水提取物成分和茶叶残留物成分，从水提取物中除去茶叶残留物成分，并加入配方量的羟丙基纤维素，其中在整个提取过程中的温度控制在100℃；
4)趁热向水提取物中加入一定量鱼皮胶原蛋白粉末溶解(50ml水提取物中加入5g鱼皮胶原蛋白粉末)，并搅拌均匀，再加入0.8g甘油作为增塑剂，搅拌均匀，静置脱气，得绿茶提取物的胶原蛋白铸膜液，每次移取6ml绿茶提取物的胶原蛋白铸膜液铺展到120mm×80mm×2mm有机玻璃框上成膜，成膜温度为25℃，成膜时间为20h，制得含有绿茶提取物的鱼皮胶原蛋白抗氧化膜。
本实施中，所得到的绿茶提取物含有3.5％w/w的天然绿茶叶绿素和82％w/w的茶多酚。其中绿茶提取物中EGCG的含量为55％w/w，GCG的含量为6％。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。