一种用于造血干细胞培养的滋养层的制备方法与流程

文档序号:12411464阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种制备用于造血干细胞的滋养层的方法,其特征在于:步骤如下:

(1)取细胞培养板,包被胶原蛋白,得包被了胶原蛋白的细胞培养板;

(2)取间充质干细胞悬液,接种到步骤(1)中包被了胶原蛋白的细胞培养板中,培养至细胞融合度为70-90%时,即可。

2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述胶原蛋白是鼠尾胶原蛋白。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,每孔包被0.8-1.2ml胶原蛋白,优选为1ml胶原蛋白。

4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,接种的间充质干细胞悬液的浓度为1×105~1.5×105个细胞/孔。

5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,培养采用的培养基为用于造血干细胞培养的无血清培养基。

6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于:所述无血清培养基培养为SFEM无血清培养基。

7.权利要求1~6任意一项方法制备得到的滋养层。

8.根据权利要求7所述的滋养层在培养造血干细胞中的用途。

9.一种造血干细胞的培养方法,其特征在于:它是权利要求7所述的滋养层为滋养层进行培养。

10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于:步骤如下:取权利要求7所述的滋养层,接种造血干细胞,加入无血清培养基,培养即可;所述无血清培养基是每1ml添加有50-100ng SCF、25-50ng TPO、10-50ng Flt-3L的SFEM无血清培养基。

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