1.检测尿液病原菌的试剂盒,其特征在于,包括尿液前处理试剂、病原菌ATP裂解液、中和液、ATP检测试剂;
所述的尿液前处理试剂包括:体细胞消化液和ATP酶,所述的体细胞消化液包括体积分数为0.3~0.7%Triton和质量分数为0.03~0.07%TCA,所述的ATP酶为95~105U/mL三磷酸腺苷双磷酸酶;
所述病原菌ATP裂解液包括:质量分数为2~5%TCA;
所述中和液包括:100~123.4mmol/L Tris-base、2~2.34mmol/L醋酸镁,pH为8.2;
所述的ATP检测试剂包括:12~20μg/mL荧光素酶、16~24μg/mL荧光素、18~22mmol/L Tris-base、1.5~2.5mmol/L醋酸镁,pH调至7.2~7.8。
2.根据权利要求1所述的检测尿液病原菌的试剂盒,其特征在于,所述的体细胞消化液包括体积分数0.5%Triton和质量分数为0.05%TCA,所述的ATP酶为100U/mL三磷酸腺苷双磷酸酶。
3.根据权利要求1所述的检测尿液病原菌的试剂盒,其特征在于,所述病原菌ATP裂解液包括:质量分数为4%TCA。
4.根据权利要求1所述的检测尿液病原菌的试剂盒,其特征在于,所述中和液包括:123.4mmol/L Tris-base、2.34mmol/L醋酸镁,pH为8.2。
5.根据权利要求1所述的检测尿液病原菌的试剂盒,其特征在于,所述的ATP检测试剂包括:16μg/mL荧光素酶、20μg/mL荧光素、20mmol/L Tris-base、2mmol/L醋酸镁,pH调至7.6。
6.根据权利要求1所述的检测尿液病原菌的试剂盒,其特征在于,所述尿液的包括血尿、乳糜尿、蛋白尿、一般尿液。
7.检测尿液中病原菌的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)取尿液900μL,加入100μL体细胞消化液和5μL的三磷酸腺苷双磷酸酶,混匀后放入30度水浴锅中消化10min,然后2000g离心1min,弃沉淀后备用;
(2)取步骤(1)得到的上清液500μL进行过柱,过柱所用滤膜为0.45μm孔径的滤膜,小柱置于2mL套管上,然后6000g离心1min,弃滤液,加入生理盐水500μL清洗1次,再6000g离心1min,弃滤液,最后12000g甩30s,将小柱换入一个新的套管中,备用;
(3)在小柱中加入100μL病原菌ATP裂解液,常温下裂解5min,释放出病原菌中的ATP,后加入400μL中和液,离心,收集滤液;
(4)取出步骤(3)中滤液50μL于96孔微孔板中并放入orinII微孔板式发光检测仪中,把ATP检测试剂注入该仪器的进样器2中,通过进样器加入100μL荧光素酶反应液,加完后测量其发光值,检测时间为5s,记录其信号值。
8.权利要求1~6任一所述检测尿液病原菌的试剂盒在检测尿液病原菌中的应用。